Ici, nous présentons un faible coût, durable dispositif cryotolerant pour la récupération d'échantillon à partir de réservoirs de Dewar remplis avec de l'azote liquide. La facilité de la construction et la conception modulaire de l'appareil rend le processus de récupération de l'échantillon à partir de réservoirs cryogéniques sûr et facile.
L'azote liquide est incolore, inodore, très froid (-196 ° C) liquide maintenu sous pression. Il est couramment utilisé comme fluide cryogénique pour le stockage à long terme de matériaux biologiques tels que le sang, des cellules et tissus 1,2. La nature de l'azote liquide cryogénique, tandis idéal pour la conservation des échantillons, peut provoquer une congélation rapide des tissus vivants au contact – connu sous le nom «cryogénique brûler» 2, ce qui peut conduire à des gelures sévères chez les personnes étroitement impliquées dans le stockage et la récupération des échantillons provenant de Dewars. En outre, comme l'azote liquide s'évapore il réduit la concentration d'oxygène dans l'air et peuvent provoquer l'asphyxie, en particulier dans des espaces confinés 2.
Dans les laboratoires, les échantillons biologiques sont souvent stockées dans des cryotubes ou cryoboîtes empilés dans des racks en acier inoxydable dans les réservoirs de Dewar 1. Ces supports de stockage sont pourvus d'un arbre long pour empêcher de glisser hors des boîtes à partir des supports et dans le fond deDewars lors de la manipulation de routine. Trop souvent, cependant, des boîtes ou flacons de précieux échantillons de s'échapper et de couler au fond de la cuve d'azote liquide remplie. Dans de tels cas, les échantillons pourraient être récupérés péniblement après le transfert de l'azote liquide dans un récipient de secours ou de le jeter. Les boîtes et flacons peut alors être récupéré à partir de façon relativement sûre vidé Dewar. Cependant, la nature de l'azote liquide cryogénique et son taux d'expansion fait coulé dangereux de récupération de l'échantillon. Il est souvent recommandé par les bureaux de sécurité que l'extraction d'échantillon sera jamais réalisée par une seule personne. Une autre alternative est d'utiliser commercialement disponibles accapareurs fraîches ou des pinces pour arracher les 3 flacons. Cependant, la visibilité limitée dans les sombres liquides Dewars remplis pose un obstacle majeur à leur utilisation.
Dans cet article, nous décrivons la construction d'un dispositif de récupération de bricolage Cryotolerant, ce qui rend la récupération de l'échantillon de Dewar contenant des fluides frigorigènes, à la fois la sécurité d'une faciles.
Une des méthodes les plus courantes de récupération cryoboîtes et cryotubes du fond de la cuve Dewar, est de clarifier l'azote liquide dans un récipient de secours et de sortir les échantillons restants dans le ballon ou flottant dans l'azote liquide décanté. C'est, cependant, une pratique dangereuse qui peut causer des brûlures cryogéniques ou asphyxie due à une exposition prolongée à des vapeurs d'azote liquide 2. Autre manière commune de la récupération des cryotubes déchus…
The authors have nothing to disclose.
DIY cryogénique de récupération dispositif a été testé en cours des projets de "prénylation des protéines Modélisation bactérienne dans les cellules eucaryotes à l'aide de la bioinformatique et des approches moléculaires», parrainé par Mary Louise Andrews Prix pour le programme de recherche sur le cancer, en Virginie Académie des sciences, "signification physiologique de l'ARN dans le plasma d'édition Les cellules dendritiques »parrainé par le Jeffress Thomas F. Miller et Kate Jeffress Memorial Trust et du contrat Etat 16.740.11.0364 (Ministère de la Science et de l'éducation, de la Russie). Nous tenons à remercier Beth Eom de l'aide pour l'expérience intégrité de l'ARN.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge | Local Hardware shop | N/A | 1 unit required |
Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw | Local Hardware shop | Model # 42281 | 4 units required |
Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers | Local Hardware shop | Model # 20122 | 4 units required |
Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut | Local Hardware shop | Model # 18512 | 4 units required |
Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base | Local Hardware shop | Model # BC40Z | 2 units required |
Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap | Local Hardware shop | Model # 66T | 1 unit required |
Oneida 6″ Mesh Strainer | Local Grocery shop | Model # 7859W | 1 unit required |
The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16 | Local Hardware shop | Model #:810509 | 6 units required |
The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16 | Local Hardware shop | 4 units required | |
Foam for insulation | Local Hardware shop | 1 unit required | |
Screw Driver | Local Hardware shop | 1 unit required | |
Pliers | Local Hardware shop | 1 unit required |