该视频演示了一种方法收获的两个最重要的的高度血管结构,支持前脑功能。它们是血管以及与相关的脑膜(MAV)和脉络膜丛这是必要的大脑血液流量和脑脊髓液(CSF)的稳态的脑表面(表面)。
该视频演示显示的方法收获的两个最重要的血管结构,而不是居住在大脑中正确的,即支持前脑功能。它们是血管以及与相关的脑膜(MAV)和脉络膜丛这是必要的大脑血液流量和脑脊髓液(CSF)的稳态的脑表面(表面)。收获的组织是适合生理和生化分析,和MAV已被证明是敏感的损坏所产生安非他明和热疗1,2。同时,在MAV的主要和轻微脑vasculatures的,收获的是调查震荡,头部外伤时,潜在的高利率。在此演示文稿中的MAV解剖的软脑膜和蛛网膜少硬脑膜的脑膜及脑表面血管的主要和次要一些。脉络丛的解剖结构驻留在升抵押品脑室所描述的Oldfield和麦金利3,4,5,6。收获这两个组织所采用的方法,也有利于区域皮质组织缺乏脑膜及脑表面血管的收获,是兼容的收获大脑的其他组织,如纹状体,下丘脑,海马,等这两个组织需要的解剖从总5到10分钟。可以发现,如图所示,在此演示文稿中的基因表达水平的解剖MAV和脉络丛,在GSE23093(MAV)和GSE29733(脉络膜丛)在NCBI的GEO资料库。此数据已经,正在,用于帮助进一步了解MAV和脉络丛的功能和神经中毒的事件,如严重的高热和AMPH如何影响他们的功能。
技术方面的MAV和脉络丛解剖
至关重要的是在剥离的MAV有大脑“淹没”的大部分时间在生理盐水或钠的磷酸盐缓冲盐水。 MAV和皮质脱水剥离时,将导致在MAV坚持紧紧皮质层一,这与MAV和/或造成无法删除这些坚持MAV部分,从皮质的皮质组织,收获量会增加。剥离时,耐心是必要的。同样,如果删除的MAV从一个半球皮质剥离时,遇到了一些阻力,切换到另一半球,回去以后遇到反抗的一侧。这种方法确实需要一些练习来完善,并需要约5〜15“实践”解剖之前,实现均匀一致的收获的MAV组织的。开始的解剖和圣雷莫的方法,在脑底动脉环的MAV val且便于去除脑膜通过使用较大的血管为支持“脚手架”。
大部分血液最初在MAV血管后牺牲应在剥离喷出,和小于5%的RNA收获MAV应该是血源性。这是可能的,以除去几乎所有的血液灌流动物用50至70毫升的生理盐水中,用组织学技术之前,去除斩首和脑。但是,它是可视化的MAV解剖组织中要困难得多。三个最可能的“污染”的MAV组织来源是松果体,皮质层I组织和残余嗅球组织,但它是在该制剂中,也有可能得到垂体组织。在MAV松果体污染被检测到由MAV含有一个圆形的1至2毫米直径的球体是有色的暗红色。的主要功能松果体通常被认为是从MAV是完全不同的。它的主要功能是产生褪黑激素,调节各方面的昼夜节律9,和10脂质前体lipoxygenation。虽然该基因的低 ,调节脂肪氧化酶活性,被认为是目前在成人主要是在松果体10,我们的结果表明,它是在显着水平MAV也始终存在。残余在幅状的粉红色MAV组织具有约1至2毫米的致密组织,是很大括在在颜色苍白的的皮质或嗅球污染结果。这可以通过“浮动”的MAV的缓冲液的表面上,然后使用两个解剖钳除去较重的皮质或灯泡组织发现。
如果污染的MAV由我组织的皮质层,下丘脑组织或松果体存在,那么将有一个显着的几个基因着地表达比通常存在于一个“干净”解剖。污染的MAV松果体会导致高表达芳烷脘N-乙酰转移酶(AANAT),这是必要的褪黑激素合成。不幸的是,如果松果体污染过程中发生MAV夹层,MAV 液氧在水平将不能够被精确地确定。皮质组织的MAV的污染会导致神经元特异性基因,如hippocalcin(HPCA),小白蛋白(Pvalb)和/或神经元五聚的受体(Nptxr)中高表达。下丘脑组织的MAV污染会导致在高表达的生长激素1(GH1),阿黑皮素原(POMC)。事件,确实存在一定的污染,在收获组织,大部分这些基因可以被识别,而不是用在基因表达分析。这是特别重要的基因,存在于循环BLO外径,MAV或脉络膜丛的可能仍然存在。
影视之收获MAV和脉络丛的基因表达数据
血管以及与相关的脑膜(MAV)和脉络丛的脑表面(表面)是必要的大脑血液流量和脑脊髓液(CSF)的动态平衡4,11,12,13,14,15,16,17。该组织的收获是适合生理和生化分析,MAV已被证明是敏感的损坏生产的安非他明和热疗1,2通过基因表达分析。这些结果是相称的,也被称为严重的高热和安非他明的脑血管一般18,19,20曝光。人体临床数据支持的信念,硬膜下血管容易损坏的安非他明和甲基安非他明21,22。同时,主要和次要的的脑vasculatures含ING在软脑膜层的脑膜,MAV的收获是潜在的高利率调查震荡的头部外伤23,24 25时。目前的基因的表达谱产生的MAV表示,可能是软脑膜和蛛网膜脑脊膜膜可能会发挥更大的作用比预期的调节CSF组成。在未来,通过解剖显微镜技术的使用,它可以是可能的,以进一步分离的组织,包括使得软脑膜和蛛网膜膜可以从较大的动脉血管本分离,并可能从每个其他的MAV。这将使更好的诠释了这3个组成部分的收获MAV的功能。
The authors have nothing to disclose.
这项工作是由NCTR / FDA。
Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Normal Saline (9 grams saline/ 1 Liter H2O) | In-house | Dissection buffer | |
0.1 M Sodium Phosphate pH 7.4 | In-house | Dissection buffer | |
Bone Rongeurs | Roboz | RS-8300 | Skull bone removal |
Forceps-bent tip (4″ long & 0.8 mm wide tip) | Roboz | RS-5135 or RS-5137 | Dissecting forceps |
Forceps-straight tip (5.5″ long ) | Roboz | RS-8124 or RS-8104 | Thumb Dressing forceps |