इस वीडियो प्रस्तुति संचयन दो सबसे महत्वपूर्ण अत्यधिक संवहनी संरचनाओं कि अग्रमस्तिष्क समारोह का समर्थन करने की एक विधि से पता चलता है. वे मस्तिष्क (सतही) जुड़े (MAV) meninges और रंजित plexus जो मस्तिष्क में रक्त प्रवाह और मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) homeostasis के लिए आवश्यक हैं के साथ सतह vasculature हैं.
इस वीडियो प्रस्तुति के लिए दो सबसे महत्वपूर्ण अत्यधिक संवहनी संरचनाओं कटाई की एक विधि दिखाने के लिए बनाया गया था, उचित मस्तिष्क के भीतर नहीं रह है कि समर्थन अग्रमस्तिष्क समारोह. वे मस्तिष्क (सतही) जुड़े (MAV) meninges और रंजित plexus जो मस्तिष्क में रक्त प्रवाह और मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) homeostasis के लिए आवश्यक हैं के साथ सतह vasculature हैं. काटा ऊतक जैव रासायनिक और शारीरिक विश्लेषण के लिए उपयुक्त है, और MAV एम्फ़ैटेमिन और अतिताप 1,2 द्वारा उत्पादित क्षति के प्रति संवेदनशील होने के लिए दिखाया गया है. साथ ही, बड़ी और छोटी मस्तिष्क MAV में काटा vasculatures संभवतः उच्च ब्याज की हैं जब सिर दर्द के concussive प्रकार की जांच कर रहा है. इस प्रस्तुति में dissected MAV PIAL और रेशेदार (कम ड्यूरा) झिल्ली meninges की और बड़ी और छोटी मस्तिष्क सतह vasculature की कुछ होते हैं. रंजित plexus dissected संरचना कि एल में रहता हैateral ventricles Oldfield और McKinley 3,4,5,6 द्वारा वर्णित के रूप में. दो ऊतकों से कटाई के लिए इन तरीकों का इस्तेमाल किया भी क्षेत्रीय cortical meninges और बड़े मस्तिष्क सतह vasculature रहित ऊतक की कटाई की सुविधा है, और दो ऊतकों लेता विच्छेदन आदि striatum, hypothalamus, हिप्पोकैम्पस, जैसे अन्य मस्तिष्क के ऊतकों की कटाई के साथ संगत है 5 से 10 मिनट की कुल से. dissected MAV और रंजित plexus के लिए जीन की अभिव्यक्ति के स्तर, के रूप में दिखाया गया है और इस प्रस्तुति में वर्णित NCBI भू भंडार GSE23093 (MAV) और GSE29733 (रंजित जाल) में पाया जा सकता है. इस डेटा किया गया है, और है, मदद के लिए आगे MAV और रंजित plexus के कामकाज को समझने और neurotoxic कैसे गंभीर अतिताप और AMPH के रूप में इस तरह की घटनाओं पर प्रतिकूल उनके कार्य को प्रभावित करने के लिए इस्तेमाल किया जा रहा है.
MAV के तकनीकी पहलुओं और रंजित plexus विच्छेदन
MAV के विच्छेदन के दौरान महत्वपूर्ण है मस्तिष्क सामान्य नमक या सोडियम खारा फॉस्फेट-buffered में समय की सबसे "जलमग्न". MAV और प्रांतस्था विच्छेदन के दौरान निर्जलीकरण करने के लिए अनुमति दे cortical परत मैं यह cortical MAV और / या प्रांतस्था से इन MAV वर्गों पालन को दूर करने में असमर्थता में परिणाम के साथ काटा ऊतक की राशि में वृद्धि होगी कसकर पालन MAV में परिणाम देगा. इसके अलावा, धैर्य विच्छेदन के दौरान आवश्यक है. फिर, अगर एक प्रांतस्था से विच्छेदन के दौरान एक गोलार्द्ध में MAV को हटाने में कुछ प्रतिरोध का सामना करना पड़ता है, अन्य गोलार्द्ध स्विच और वापस जाने के बाद ओर जहां प्रतिरोध का सामना करना पड़ा था. इस विधि को सही करने के लिए कुछ अभ्यास ले करता है और के बारे में 5 से 15 "अभ्यास" dissections की आवश्यकता MAV ऊतक के एक लगातार वर्दी फसल से पहले हासिल की है. विच्छेदन और रेमो शुरू करने की विधिmeninges की वैल मस्तिष्क के आधार पर धमनी चक्र में MAV के समर्थन के रूप में बड़ा vasculature का उपयोग करके हटाने की सुविधा "मचान."
बलिदान के बाद MAV vasculature में रक्त की मूल विच्छेदन के दौरान निकली किया जाना चाहिए, और शाही सेना के कम से कम 5% MAV से काटा रक्त मूल के होना चाहिए. यह खारा की 50 से 70 मिलीलीटर के साथ पशु perfusing, histological तकनीक का उपयोग कर कत्ल और मस्तिष्क को हटाने के लिए पहले, लगभग सभी रक्त निकालने के लिए संभव है. हालांकि, यह तो और अधिक के लिए विच्छेदन के दौरान MAV ऊतकों कल्पना करना मुश्किल है. MAV ऊतकों के संदूषण "के तीन सबसे अधिक संभावना स्रोतों पीनियल ग्रंथि, cortical परत मैं ऊतक और अवशिष्ट घ्राण बल्ब ऊतक हैं, लेकिन यह भी संभव है तैयारी में पिट्यूटरी ग्रंथि ऊतक मिल. MAV में चीटीदार संदूषण एक दौर 1 से 2 मिमी व्यास क्षेत्र है कि गहरे लाल रंग युक्त MAV से पता चला है. प्राथमिक समारोहपीनियल ग्रंथि की सामान्य रूप से पूरी तरह से MAV से अलग हो जाता है. इसका प्राथमिक कार्य करने के लिए, melatonin है जो circadian ताल 9 के पहलुओं को नियंत्रित और लिपिड व्यापारियों के 10 lipoxygenation में उत्पादन होता है. हालांकि जीन Lox, जो lipoxygenase गतिविधि को नियंत्रित चीटीदार ग्रंथि में 10 मुख्य रूप से वयस्कों में उपस्थित होने के लिए सोचा था, हमारे परिणामों से संकेत मिलता है कि यह भी लगातार MAV में महत्वपूर्ण स्तर पर मौजूद है. वेब की तरह गुलाबी MAV कुछ 1 से 2 मिमी denser ऊतकों कि में संलग्न रंग में बहुत पीला हैं होने के ऊतकों में अवशिष्ट cortical या घ्राण बल्ब संदूषण का परिणाम है. इस बफर की सतह पर MAV "" अस्थायी है, और फिर भारी cortical या बल्ब ऊतकों को हटाने का उपयोग कर दो संदंश विदारक द्वारा देखा जा सकता है.
यदि cortical परत मैं ऊतक, hypothalamic ऊतक या पीनियल ग्रंथि से MAV के संदूषण मौजूद है, तो कई जीनों एक महत्वपूर्ण होगाकी तुलना में क्या आम तौर पर एक "साफ" विच्छेदन में मौजूद है cantly अधिक अभिव्यक्ति. पीनियल ग्रंथि के साथ MAV के संदूषण (Aanat) एन acetyltransferase arylalkylamine जो melatonin संश्लेषण के लिए आवश्यक है की उच्च अभिव्यक्ति में परिणाम देगा. दुर्भाग्य से, अगर चीटीदार संदूषण MAV विच्छेदन के दौरान होता है, MAV में Lox का स्तर सही निर्धारित करने में सक्षम नहीं होगा. Cortical ऊतक के साथ MAV के संदूषण (Hpca) hippocalcin parvalbumin (Pvalb) और / या neuronal pentraxin रिसेप्टर (Nptxr) के रूप में इस तरह के न्यूरॉन विशेष जीनों के उच्च अभिव्यक्ति में परिणाम देगा. MAV के hypothalamic ऊतक के साथ प्रदूषण के उच्च अभिव्यक्ति में वृद्धि हार्मोन 1 (GH1), proopiomelanocortin (POMC) परिणाम होगा. काटा ऊतकों में घटना है कि कुछ संदूषण मौजूद नहीं है, इन जीनों के अधिकांश और पहचाना जा सकता है और जीन अभिव्यक्ति विश्लेषण में उपयोग नहीं किया है. यह परिसंचारी blo में मौजूद जीन के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण हैआयुध डिपो है कि अभी भी MAV या रंजित plexus में मौजूद हो सकता है.
Harvested MAV और रंजित plexus से डाटा जीन की अभिव्यक्ति interpretting
मस्तिष्क (सतही) के साथ जुड़े (MAV) meninges और रंजित plexus सतह vasculature मस्तिष्क में रक्त प्रवाह और मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) 4,11 homeostasis, 12, 13, 14, 15, 16, 17 के लिए आवश्यक हैं. ऊतक फसल जैव रासायनिक और शारीरिक विश्लेषण के लिए उपयुक्त है, और MAV विश्लेषण जीन अभिव्यक्ति के माध्यम से अतिताप 1,2 एम्फ़ैटेमिन द्वारा उत्पादित क्षति के प्रति संवेदनशील होने के लिए दिखाया गया है. ये परिणाम भी गंभीर अतिताप और 18,19,20 सामान्य रूप में मस्तिष्क vasculature amphetamines के लिए जोखिम के बारे में जाना जाता है के अनुरूप हैं. मानव नैदानिक डेटा का समर्थन करता है विश्वास है कि अवदृढ़तानिकी vasculature एम्फ़ैटेमिन और methamphetamine 21,22 नुकसान के प्रति संवेदनशील है. साथ ही, बड़ी और छोटी मस्तिष्क vasculatures समेतmeninges कि MAV में काटा जाता है संभवतः उच्च ब्याज की हैं जब सिर दर्द 25 23,24 के concussive प्रकार की जांच के PIAL परत में उन आईएनजी. वर्तमान जीन अभिव्यक्ति MAV से मिले प्रोफाइल इंगित करता है कि PIAL और संभवतः रेशेदार मस्तिष्कावरणीय झिल्ली एक बड़ी भूमिका से सीएसएफ संरचना को विनियमित करने में उम्मीद निभा सकते हैं. भविष्य में, विदारक माइक्रोस्कोप तकनीक के प्रयोग के माध्यम से, यह संभव हो सकता है आगे MAV PIAL और रेशेदार झिल्ली इतना है कि बड़े धमनी vasculature वर्तमान से और संभवतः एक दूसरे से अलग किया जा सकता है जिसमें ऊतकों को अलग कर सकते हैं. यह harvested MAV के इन 3 घटकों में से प्रत्येक के समारोह के एक बेहतर व्याख्या सक्षम हो जाएगा.
The authors have nothing to disclose.
इस काम NCTR / एफडीए द्वारा वित्त पोषित किया गया था.
Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
Normal Saline (9 grams saline/ 1 Liter H2O) | In-house | Dissection buffer | |
0.1 M Sodium Phosphate pH 7.4 | In-house | Dissection buffer | |
Bone Rongeurs | Roboz | RS-8300 | Skull bone removal |
Forceps-bent tip (4″ long & 0.8 mm wide tip) | Roboz | RS-5135 or RS-5137 | Dissecting forceps |
Forceps-straight tip (5.5″ long ) | Roboz | RS-8124 or RS-8104 | Thumb Dressing forceps |