Summary
Двухступенчатый метод установить хронической болезнью почек (ХБП) у крыс Льюиса путем хирургического удаления 5/6th почечной массы описывается. Сочетание хирургической процедуры, NOS-торможение и высокую содержанием соли приводит к модели напоминающие человеческие CKD, позволяющей исследовать причинных механизмов и разработке новых терапевтических вмешательств.
Abstract
Хроническая болезнь почек (ХБП) является глобальной проблемой. Замедление прогрессирования ХБП является одним из основных приоритетов в области здравоохранения. С ХБП характеризуется комплексом расстройств гомеостаза, интегративной модели на животных необходимы для изучения развития и прогрессирования ХБП. Для изучения развития ХБП и новых терапевтических вмешательств при ХБП, мы используем модель абляции 5/6th нефрэктомии, известный экспериментальной модели прогрессирующей почечной болезнью, напоминающей несколько аспектов человеческой CKD. Валового снижение почечного массы вызывает прогрессивное клубочковой и тубуло-интерстициального повреждения, потерю нефронов остатком и развитие системного и клубочковой гипертензии. Это также связано с прогрессивным внутрипочечный капиллярного потери, воспаление и гломерулосклероз. Факторы риска для CKD неизменно влияние на функцию эндотелия. Для имитации этого, мы объединяем удаление 5/6th почечной массы с окисью азота (NO) истощение и диеты с высоким содержанием соли. После прибытия и акклиматизации, животных повторноне воспринимаем NO синтазы (NG-нитро-L-аргинин) (L-NNA) с добавлением к питьевой воде (20 мг / л) в течение 4 недель, после чего правосторонний uninephrectomy. Через неделю Итого нефрэктомии (SNX) осуществляется с левой стороны. После SNX, животным дают восстановиться в течение двух дней, после чего LNNA в питьевой воде (20 мг / л) в течение еще 4 недель. Диеты с высоким содержанием соли (6%), дополнен в землю чау (см. тайм-линии рис. 1), продолжается в течение всего эксперимента. Прогрессирование почечной недостаточности следует с течением времени при измерении мочевины в плазме, систолическое давление крови и протеинурии. По шесть недель после SNX, почечная недостаточность сложилась. Почечная функция измеряется с помощью инулина «золотой стандарт» и пара-амино гиппуровую кислоты (ПАУ) оформление технологии. Эта модель ХБП характеризуется снижением скорости клубочковой фильтрации (СКФ) и эффективного почечного кровотока плазмы (ЭПП), артериальная гипертензия (систолическое артериальное давление> 150 мм ртутного столба), протеинурия (> 50 мг/24 часа) И мягкой уремия (> 10 мм). Гистологические особенности включают тубуло-интерстициальный повреждение отражается воспаление, трубчатых атрофия и фиброз и координационных гломерулосклероза приводит к массовому сокращению здоровых клубочков в популяции остаток (<10%). Последующие меры до 12 недель после SNX показывает дальнейшего прогрессирования ХБП.
Introduction
Благодаря своему прогрессивный характер, последующие терминальной стадией заболевания почек, сердечно-сосудистые и связанные с заболеваемостью и смертностью, CKD растущая проблема здравоохранения 1. Замедление прогрессирования ХБП Поэтому одним из главных приоритетов здравоохранения. С ХБП характеризуется комплексом расстройств гомеостаза, интегративной модели на животных необходимы для изучения развития и прогрессирования ХБП. Почка состоит из широкого спектра различных типов клеток, которые взаимодействуют друг с другом. Эта сложность не можно имитировать в лабораторных условиях.
Для изучения новых терапевтических вмешательств при ХБП, мы используем модель абляции 5/6th нефрэктомии, известная экспериментальная модель прогрессирующей почечной болезнью, напоминающей несколько аспектов человеческой CKD 2,3. Валового снижение почечного массы вызывает прогрессивное клубочковой и тубуло-интерстициального повреждения, потерю нефронов остатком и развитие системного и клубочковой гипертензии. Это связано с прогрщий внутрипочечное капиллярных потерь 4, воспаления и гломерулосклерозу. Факторы риска для CKD неизменно влияние на функцию эндотелия 5. Мы использовали линии крыс (Lewis), который является относительно устойчивы к развитию ХПН и поэтому в сочетании удаление 5/6th почечной массы с оксидом азота (NO) истощение 6, 7, 8 и диеты с высоким содержанием соли 9. После прихода и акклиматизации, животных не получат NO синтазы (L-NNA) с добавлением к питьевой воде (20 мг / л) в течение 4 недель, после чего правосторонний uninephrectomy (UNX) с продолжением L-NNA после двух дней . Через неделю субтотальной нефрэктомии (SNX), то есть удаление 2/3rds почечной массы выполняется на левой стороне. После SNX, животным позволяют восстановиться в течение 2 дней, а затем снова по 20 мг / л LNNA в питьевой воде в течение 4 недель. Диеты с высоким содержанием соли (6%), дополнен в землю чау (см. тайм-линии рис. 1), продолжается в течение всего эксперимента. Tон причина для выполнения UNX на правой стороне и SNX на левой стороне в том, что почечные сосуды длиннее на левой стороне, что облегчает доступ к почке без растяжения сосудов слишком много, когда почки подвергается вне тела . В литературе модели описаны в котором полюса левой почки удаляются первым, а затем UNX из правой почки через неделю 10,11,12. В наших руках этой модели показали гораздо более быстрое развитие почечной недостаточности, но и гораздо большее изменение в потере почечной функции. Прогрессирование почечной недостаточности следует с течением времени при измерении мочевины в плазме, систолическое давление крови и протеинурии. По шесть недель после SNX, почечная недостаточность сложилось, характеризуется выраженным снижением скорости клубочковой фильтрации (69%) и эффективного почечного кровотока плазмы (62%) 13 гипертонией (систолическое АД> 150 мм рт.ст.), протеинурия (> 50 мг/24 ч) и мягкий уремия (> 10 мм). Гистологические особенности включают TUBULо-интерстициальный повреждение отражается воспаление, трубчатых атрофия и фиброз и координационных гломерулосклероза приводит к массовому сокращению здоровых клубочков в популяции остаток (<10%). Последующие меры до 12 недель после SNX не показывает дальнейшее прогрессирование ХБП, обеспечивая окно возможностей для оценки терапевтического вмешательства.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все эксперименты выполнены в соответствии с экспериментальными животными этические направляющие линии Комитета по Животным экспериментальной Утрехт. Протокол проводится под руководством и утверждения учреждения автора уходу и использованию животных комитета.
ХБП вызывают у самцов инбредных крыс Льюиса (Charles River, Sulzfeld, Германия) в возрасте 8 недель. Крыс содержали в стандартных условиях в легком, температуры и влажности контролируемой среде.
1. Подготовка хирургии
- Стерилизовать хирургических инструментов:
- 1 студент Пинцет хирургический 1-2 зубов 12 см
- 1 студент стандартных щипцов узором
- 2 Semken щипцы
- 1 Майо ножницами
- 1 студент Iris ножницами
- 1-Olsen Hegar иглодержатель с ножницами
- Одеяло
- Проверка наличия списка:
- Операционный стол с пусковой площадкой потепления и лампы
- O
- Ткани
- Бритва
- Весы
- Стерильная операционная
- Стерильные 5x5 марлю и 10x10
- 70% спиртом
- 0,9% раствором хлорида натрия
- 1 мл шприц
- Иглы (25G)
- Гель коврики: Spongostan
- Vicryl 4.0 и 5.0
- Бупренорфин 0,03 мг / кг (1:10 разводили в физиологическом соли)
- Чистую клетку для крыс после операции
2. Правая сторона Uninephrectomy
- Лечить таблицу с 70% спиртом.
- Место крысу в коробку и индукции анестезии с 4% изофлурана и 1 литр потока O 2. Примечание: в зависимости от вида крыс использовали, пред-и периоперационной анальгезии назначают, это должно быть обсуждено с местным ветеринаром.
- Передача крысе нос таблицу и поместить в конусе. Крысы и носовой обтекатель размещены на грелку для поддержания температуры тела крысы. Я крысас вентилируемой смесью 2% изофлуран и 1 л O 2.
- Бритье фланг крысы и дезинфицируют спиртом. Вымыть и продезинфицировать руки и носить стерильные хирургические перчатки. Несите крышку головы и маски. Сделать 1 - 1,5 см разрез параллельно ребрам с использованием анатомических щипцов и тупыми ножницами. Expose почки тупым рассечением мышц спины.
- Нижний полюс почки видно, тщательно используйте небольшие тупые щипцы для захвата паранефральная жировой ткани. Externalize почки, осторожно потянув на паранефральная жира щипцами. Будьте осторожны, чтобы не беспокоить надпочечниках во время этой процедуры. Надпочечников могут быть легко удалены путем размещения щипцов на медиальной сайт в жировой ткани и осторожно перемещается вверх между надпочечников и почек, как показано на рисунке 2.
- Наведите почек мягко на марлю и подальше от окружающих жира и соединительной ткани. Определить почечную артерию и вену и поместить лигатуры (5.0викрил) с одним узлом вокруг сосудов, но не галстук узлом.
- Переместить свободный узел тщательно по сосудам к аорте примерно на 0,5 см, чтобы создать пространство между почками и узел. Это сделано, чтобы предотвратить лигатуры от соскальзывания после резки.
- Галстук узлом с двумя узлами. Если перфузии прекращается, цвет почки немедленно перейти в коричневый цвет. Не обрезайте концы лигатуры.
- Разрежьте почечные сосуды близко к почке и удалить почку. Осторожно потяните за длинные концы лигатуры для проверки кровотечения почечные сосуды. Лигатуры должны оставаться на месте на судне. Обрежьте длинные концы лигатуры. Обратите внимание, что остаток почечных сосудов втянется в брюшную полость немедленно.
- Тех вырезали почки высушить и взвесить его.
- Закройте скелетных мышц разрез с проточной швов с Vicryl 5.0. Введите 0,10 мл (0,03 мг / кг) бупренорфин внутримышечно в заднюю конечность. Закрытькожи с Vicryl 4,0 с внутрикожных швов. Это предотвращает крыс от открытия раны. Обратите внимание: из-за угнетения дыхания у крыс Льюиса, мы только даем послеоперационного обезболивания перед выключением изофлурана.
- Дом крысы в чистой одиночной клетке с легким доступом к пище и воде. Поместите клетку половина на потепление площадку O / N и проверьте тщательно крысы на следующий день. Когда рану закрывают и крыса активна, который обычно между 6 и 12 ч после операции у крыс может быть помещен обратно в группе корпуса.
3. Левая сторона Итого Нефрэктомия
- Через семь дней те же препараты изготовлены на левой стороне, на правой стороне, как описано от 2,1 до 2,5. Перед операцией, количество почечной ткани, которая должна быть удалена соответствующая приблизительно 2/3rds веса правой почки рассчитывается. Подготовьте небольшие кусочки пены гель (Spongostan, Johnson & Johnson, Нью-Джерси) до операции. Наведите острыми ножницами вокруг верхнего полюса левой почки и резекцию верхнего полюса в одном инсульта (для Scissor месте, см. рисунок 3). Крышка непосредственно с куском гель пены и оказывают умеренное давление стерильной марлей.
- Повторите с нижнего полюса почки, как в 3.3.
- Поднимите почку, чтобы предотвратить свертывание на коже. Поддерживайте давление на мягкие гелевые подушечки и пены стерильной марлей, пока кровотечение не остановится. Если кровотечение продолжается, добавьте еще поролоновую губку.
- Поместите остатки почек с приверженцем гель коврики внутри брюшной полости. Закройте мышц и кожи и следуйте 2.9-2.12.
4. Шам хирургии
- Ложнооперированных управления проходят такую же процедуру для того, чтобы подвергать почки. Вместо искоренения почки или резки полюса через неделю, как почки декапсулируется на одну неделю интервала, стараясь не нарушить надпочечников. Закрытие раны и послеоперационного ухода IDentical до 2,11 и 2,12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
После субтотальной нефрэктомии, примерно 1/6th от общего числа почечных массу оставляют. Рисунок 4 показывает вес удаленной части правой почки со средней и стандартного отклонения в двух предыдущих экспериментов. При этом следует иметь в виду, что в течение недели после UNX, гипертрофии левого почек происходит, указывающий, что вес, который должен быть удален рассчитаны на основе веса правой почки всегда приводит к менее 5/6th удаления. Однако, так как это не возможно, чтобы определить вес левой почки во время операции, это наиболее точный способ удаления примерно 5/6th оригинального почечной массы.
Со временем у крыс с ХПН развиваются гипертония, уремии, анемии, протеинурии и значительное снижение СКФ и ЭПП. После 6 недель, созданная CKD сложилось, подходящий момент времени для проверки спасательных мероприятий. Со временем, сильный прогрессирования артериальной гипертензии и протеинурии наблюдается при гематокритаи функции почек (СКФ и ЭПП) показывают умеренный износ (рис. 5). Другие симптомы, которые мы не сосредоточены на в наших экспериментах, включают расстройства в кальций-фосфатных и липидный обмен, и многие другие. В зависимости от штамма крыс, разработка CKD может сильно варьировать 14, 15, 2. Мы добавили диеты с высоким содержанием соли и блокатора NO, чтобы вызвать гипертонии и эндотелиальной дисфункцией.
Прогрессирование почечной недостаточности отслеживается сбор мочи (для измерения количества белка и креатинина), крови (плазме мочевины и креатинина) и систолическое артериальное давление. Мы понимаем, что развитие гипертонии можно проследить более точно при использовании телеметрии вместо плетизмографию хвост манжеты. Клиренс креатинина можно рассчитать, но имеет тенденцию недооценивать снижение СКФ из-за обширных канальцевую секрецию креатинина у крыс 16, подчеркивая важность золотым стандартом метод для определения функции почек инулин и ПАУ зазор 17, 18, 19. Koeners соавт. описанные полной процедуре 20. Инулин и ПАУ зазор рассчитывают из их концентрации в моче (U), скорость потока мочи (V), а также их концентрации в плазме (P). Мы ранее показали заметное снижение СКФ и ERPF в этой модели с использованием классической технологии очистки, в то время как это было менее очевидными изменениями в плазме креатинина, мочевины в плазме, или клиренс креатинина 13.
Рисунок 1. Время линии L-ННА, диета с высоким содержанием соли, и UNX SNX. Продольные измерения для определения функции почек и прекращения временной точке указаны. При более длительном наблюдении необходимо после SNX, 6% NaCl диета может быть продолжено в течение долгого времени.
98fig2.jpg "/>
Рисунок 2. Надпочечников рассечение железы. Для удаления надпочечника, не нарушая ее, установите ее щипцами в жире между почками и надпочечниками и перейти от полюса судно вверх к вершине, как показывают по красной линии. Рисунок адаптирован из 20-го издания США Анатомия Грея из организма человека, 1918 год.
Рисунок 3. Итого нефрэктомии. Красные линии обозначают режущими кромками. Рисунок адаптирован из 20-го издания США Анатомия Грея из организма человека, 1918 год.
Рисунок 4. Процент удалены почечной ткани после субтотальной нефрэктомии в двух различных экспериментах. Опыт 1, N = 16, Опыт 2, N = 23.
Рисунок 5. Развития почечной недостаточности у крыс CKD прекращается через 6 недель после SNX (sdashed линий N = 5) против здоровых (pdashed линий N = 5) и CKD крыс прекращается через 12 недель после SNX (£ N = 8) против здоровых управления (• N = 8). CKD крысы не получали L-ННА неделю до 4 и диеты с высоким содержанием солей от 1 недели до окончания (не показаны на графиках). SNX вызывает гипертонии (измеряется tailcuff плетизмографии) (A), уремия (B), анемии (С) и протеинурии (D) и заметное снижение СКФ (Е) и ЭПП (F) 13. Указанные * р <0,05 по сравнению с здоровых для каждой временной точки проходят проверку двусторонний ANOVA с Бонферони после теста на графиках A, B и D. Графики С, Е и F, испытывают с двустороннимиT-тест для 6 и 12 недель момент времени. Нажмите здесь, чтобы увеличить рисунок .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Хирургическое удаление 5/6th почечной массы у крыс Льюиса, в сочетании с высоким содержанием соли и временного ингибирования NOS приводит к модели ЦП, который напоминает человека CKD и позволяет исследовании причинных механизмов и эффективность терапевтического вмешательства в ЦП.
Модель 5/6th нефрэктомии является хорошо известной и широко описано модель для ЦП. Однако простое удаление 5/6th почечной массы не приводит к немедленному почечной недостаточности у всех крыс штаммами. Мы используем крыс Льюиса для изучения эффектов клеточной терапии у больных ХПН, как наличие GFP + 21 крыс Льюиса позволяет клетке-отслеживание вводили клетки донора у реципиента (nonGFP +) крысы. Крыс Льюиса относительно устойчив к развитию повреждение почек и развитием ХПН является медленным по сравнению с другими штаммами 22, 15. Поэтому мы объединили удаление 5/6th почечной массы с NO истощения и диеты с высоким содержанием соли, так как это напоминает несколько аспектов человеческой CKDкак высокое потребление соли и эндотелиальной дисфункцией. Читатели должны иметь в виду, что необходимость объединения 5/6th нефрэктомия с высоким содержанием соли и / или истощение NO зависит от штамма крыс использовали для экспериментов.
Мы провели 5/6th нефрэктомии в двухэтапной процедуры вместо одноэтапная процедура, поскольку это рассматривается как менее обременительным для животных, связана с меньшим, связанного с операцией смертность и предпочитают наши экспериментальных животных комитета. Мы предпочли фланга разреза, а не лапаротомия достичь почками в виде лапаротомии связано с более высоким риском развития раневой инфекции, ослабление стежки, подкожные грыжи и спайки в кишечнике по сравнению с фланга разреза. Кроме того, если экспериментальный дизайн включает вмешательства с лапаротомии - как это имеет место в наших экспериментальных исследований для введения клеток костного мозга в почечную артерию остатка почки выполнении лапаротомии для SNX предварительно неferable как повторные лапаротомии следует избегать.
После хирургического удаления 5/6th почечной массы, несколько критических могут возникнуть проблемы. Во UNX могут возникнуть трудности стабилизации почек, так как жир вокруг него будет легко отделяются. Два метода могут быть использованы, чтобы получить почек подвергаются. 1) Используйте пинцет меньше, чтобы получить контроль над почечных сосудов, осторожно двигая вниз от нижнего полюса почки к сосудистой и осторожно потяните, пока не может стабилизировать почки. 2) Используйте тупым пинцетом осторожно вытяните почки из брюшной полости. Когда почки подвергается, марли может быть использован для остановки кровотечения, которые могут возникнуть во время этой процедуры. Для предотвращения кровотечения, начать тянуть жира в области нижнего полюса почки, где жир сильно прикреплены к почке.
Важно, чтобы создать пространство между узлом вокруг почечных сосудов и почек, чтобы предотвратить кровотечение после удаления почки как узел может соскользнутьпочечных сосудов за счет набегающего потока крови, быстро заполняя живота кровью. Марли может быть использован для удаления крови и давление должны быть применены, чтобы остановить кровотечение. Используйте пинцет для захвата и почечной разместить новый лигатуры. При почечных сосудов не может быть прослежена, поддержания давления, пока кровотечение не будет остановлено. Добавить 1 мл физиологической соли, чтобы предотвратить обезвоживание из-за кровотечения в брюшной полости и подождите около 5 мин до закрытия мышц и кожи слоя. Монитор крысы Особенно тщательно в течение следующих дней. Когда лигатуры находится на своем месте после удаления почки, но почечных сосудов являются кровотечения, длинные концы лигатуры могут быть использованы, чтобы связать сосудов.
Когда после рассечения поляки, несмотря на проведение давление на гелевые подушечки пены, если кровотечение продолжается, это, вероятно, из-за травмы в значительной почечной артерии или почечной лоханки. Это кровотечение может быть остановлено путем размещения новых тормозных пены геля на рану, стараясь не двигатьсяпусковая площадка пены во время подъема остатка, поскольку более крупные сосуды близко к воротам, и ожидание в течение более длительного периода.
Кровь не может быть прослежено в моче до 2 дней после операции. При почечной лоханки поврежден или большим почечной сосуд сохраняется кровоточить, будут стойкими следов гематурия. Крыс со стойкой гематурии после операции должны быть умерщвлены, поскольку это не возможно, чтобы остановить кровотечение. Если гематурия наблюдается в более поздний момент времени после операции, которые могут произойти до 2 недель после операции, крыса также должны быть умерщвлены с сгустками крови имеет внутри почечной лоханки и, в конечном счете закупоривают мочеточник и мочевой пузырь, что приводит к обструкции.
При более быстрое развитие почечной недостаточности требуется, протокол может быть отменено, то есть сначала удалить полюсов последующим uninephrectomy через неделю. Это обратная модель была использована в других линиях крыс, см., например, Лю и др..
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Acknowledgments
Мы благодарим Криста ден Ouden за отличную техническую помощь. Этот метод при финансовой поддержке голландского почечный фонд, грант C06.2174. MCV при поддержке Нидерландской организации научных исследований (NWO) Види-грант 016.096.359.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagent | |||
| L-NNA | Sigma-aldrich | N5501 | |
| Spongostan dental: gel foam pads 1x1x1 cm | Johnson&Johnson | Ms0005 | |
| Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36 | Ethicon | V303H | |
| Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36 | Ethicon | V392H | |
| Buprenorphine (0.3 mg/ml) | Via local pharmacist ordered by Reckitt Benckiser pharmaceuticals | unknown | |
| Equipment | |||
| Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm | Fine Science Tools (FST) | 91121-12 | |
| Student Standard Pattern Forceps | FST | 91100-12 | |
| Mayo Scissors | FST | 14010-15 | |
| 2X Semken Forceps | FST | 11008-13 | |
| Student Iris Scissors | FST | 91460-11 | |
| Olsen-Hegar Needle Holder | FST | 12002-14 | |
|
|||
References
- AS, G. o, Chertow, G. M., Fan, D., McCulloch, C. E., Hsu, C. Y. Chronic kidney disease and the risks of death, cardiovascular events, and hospitalization. N. Engl. J. Med. 351 (13), 1296-1305 (2004).
- Fleck, C., Appenroth, D., et al. Suitability of 5/6 nephrectomy (5/6NX) for the induction of interstitial renal fibrosis in rats--influence of sex, strain, and surgical procedure. Exp. Toxicol. Pathol. 57 (3), 195-205 (2006).
- Griffin, K. A., Picken, M. M., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A. K. Functional and structural correlates of glomerulosclerosis after renal mass reduction in the rat. J. Am. Soc. Nephrol. 11 (3), 497-506 (2000).
- Kang, D. H., Kanellis, J., et al. Role of the microvascular endothelium in progressive renal disease. J. Am. Soc. Nephrol. 13 (3), 806-816 (2002).
- Baylis, C. Nitric oxide synthase derangements and hypertension in kidney disease. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 21 (1), 1-6 (2012).
- Bongartz, L. G., Braam, B., et al. Transient nitric oxide reduction induces permanent cardiac systolic dysfunction and worsens kidney damage in rats with chronic kidney disease. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 298 (3), 815-823 (2010).
- Fujihara, C. K., De N, G., Zatz, R. Chronic nitric oxide synthase inhibition aggravates glomerular injury in rats with subtotal nephrectomy. J. Am. Soc. Nephrol. 5 (7), 1498-1507 (1995).
- Fujihara, C. K., Sena, C. R., Malheiros, D. M., Mattar, A. L., Zatz, R. Short-term nitric oxide inhibition induces progressive nephropathy after regression of initial renal injury. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290 (3), F632-F640 (2006).
- Dikow, R., Kihm, L. P., et al. Increased infarct size in uremic rats: reduced ischemia tolerance? J. Am. Soc. Nephrol. 15 (6), 1530-1536 (2004).
- Elrashidy, R. A., Asker, M. E., Mohamed, H. E. Pioglitazone attenuates cardiac fibrosis and hypertrophy in a rat model of diabetic nephropathy. J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. 17 (3), 324-333 (2012).
- Haylor, J., Schroeder, J., et al. Skin gadolinium following use of MR contrast agents in a rat model of nephrogenic systemic fibrosis. Radiology. 263 (1), 107-116 (2012).
- Moriguchi, Y., Yogo, K., et al. Left ventricular hypertrophy is associated with inflammation in sodium loaded subtotal nephrectomized rats. Biomed. Res. 32 (2), 83-90 (2011).
- van Koppen, A., Joles, J. A., et al. Healthy bone marrow cells reduce progression of kidney failure better than CKD bone marrow cells in rats with established chronic kidney disease. Cell Transplant. , (2012).
- Baylis, C., Corman, B. The aging kidney: insights from experimental studies. J. Am. Soc. Nephrol. 9 (4), 699-709 (1998).
- Szabo, A. J., Muller, V., Chen, G. F., Samsell, L. J., Erdely, A., Baylis, C. Nephron number determines susceptibility to renal mass reduction-induced CKD in Lewis and Fisher 344 rats: implications for development of experimentally induced chronic allograft nephropathy. Nephrol. Dial Transplant. 23 (8), 2492-2495 (2008).
- Darling, I. M., Morris, M. E. Evaluation of "true" creatinine clearance in rats reveals extensive renal secretion. Pharm. Res. 8 (10), 1318-1322 (1991).
- Levey, A. S. Measurement of renal function in chronic renal disease. Kidney Int. 38 (1), 167-184 (1990).
- Myers, G. L., Miller, W. G., et al. Recommendations for improving serum creatinine measurement: a report from the Laboratory Working Group of the National Kidney Disease Education Program. Clin. Chem. 52 (1), 5-18 (2006).
- Hostetter, T. H., Meyer, T. W. The development of clearance methods for measurement of glomerular filtration and tubular reabsorption. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 287 (5), F868-F870 (2004).
- Koeners, M. P., Racasan, S., Koomans, H. A., Joles, J. A., Braam, B. Nitric oxide, superoxide and renal blood flow autoregulation in SHR after perinatal L-arginine and antioxidants. Acta. Physiol. (Oxf). 190 (4), 329-338 (2007).
- van den Brandt, J., Wang, D., Kwon, S. H., Heinkelein, M., Reichardt, H. M. Lentivirally generated eGFP-transgenic rats allow efficient cell tracking in vivo. Genesis. 39 (2), 94-99 (2004).
- Kreutz, R., Kovacevic, L., Schulz, A., Rothermund, L., Ketteler, M., Paul, M. Effect of high NaCl diet on spontaneous hypertension in a genetic rat model with reduced nephron number. J. Hypertens. 18 (6), 777-782 (2000).
- Liu, Z. C., Chow, K. M., Chang, T. M. Evaluation of two protocols of uremic rat model: partial nephrectomy and. 25 (6), 935-943 (2003).
- Griffin, K. A., Picken, M., Bidani, A. K. Method of renal mass reduction is a critical modulator of subsequent hypertension and glomerular injury. J. Am. Soc. Nephrol. 4 (12), 2023-2031 (1994).
- Meyer, F., Ioshii, S. O., et al.
