Summary
Transabdominal ultralyd beskrives som et effektivt, ikke-invasivt middel for å vurdere reproduktiv status i Reeves' muntjac hjort. Disse metodene kan brukes til å oppnå tidlig graviditet diagnose og for å evaluere foster levedyktighet. Fremtidige anvendelser av denne teknikken inkluderer estimering av svangerskapsalder og effekter av mors sykdom på fosterutvikling.
Abstract
Reeves' muntjac hjort (Muntiacus reevesi) er en liten cervid art innfødt i Sørøst-Asia, og blir for tiden undersøkt som en potensiell modell for prionsykdomoverføring og patogenese. Vertikal overføring er et interesseområde blant forskere som studerer smittsomme sykdommer, inkludert prionsykdom, og disse undersøkelsene krever effektive metoder for å evaluere effekten av mors infeksjon på reproduktiv ytelse. Ultrasonografisk undersøkelse er et veletablert verktøy for å diagnostisere graviditet og vurdere fosterhelse i mange dyrearter1-7, inkludert flere arter av oppdretts cervids8-19, men denne teknikken er ikke beskrevet i Reeves ' muntjac hjort. Her beskriver vi anvendelsen av transabdominal ultralyd for å oppdage graviditet i muntjac gjør og å evaluere fostervekst og utvikling gjennom hele svangerskapet. Ved hjelp av denne prosedyren ble gravide dyr identifisert så tidlig som 35 dager etter doe-buck parring, og dette var et effektivt middel for å trygt overvåke graviditeten med jevne mellomrom. Fremtidige mål for dette arbeidet vil omfatte å etablere normale fostermålingsreferanser for estimering av svangerskapsalder, bestemme følsomhet og spesifisitet av teknikken for å diagnostisere graviditet på ulike stadier av svangerskapet, og identifisere variasjoner i fostervekst og utvikling under ulike eksperimentelle forhold.
Introduction
Ultrasonografisk undersøkelse er en godt beskrevet metode for graviditetsdiagnose hos storfe1, sau2,3, geiter4, hester5, følgesvenn dyr6,7og andre husdyrarter. Denne bildemodaliteten har også blitt identifisert som et verdifullt verktøy for graviditetsdeteksjon og fosteraldersestimering i flere arter av fangede livmorhalser, inkludert fallow hjort8-11, rød hjort12-16, Hokkaido sika hjort17og reinsdyr18,19. I mange tilfeller har ultrasonografi produsert høyere nøyaktighet enn andre mekanismer for graviditetsdeteksjon, for eksempel serumprogesteron eller graviditetsrelatert glykoproteinanalyse9,18. Videre kan ultrasonografisk visualisering av reproduksjonskanalen gi ytterligere informasjon om foster levedyktighet, svangerskapsalder og identifisering av utviklingsmessige abnormiteter som ellers ville være vanskelig å vurdere. Nytten av ultrasonografi for evaluering av reproduktiv status antyder at denne metodikken bør tilpasses andre arter der aktive avlsprogrammer brukes.
Reeves' muntjac hjort (Muntiacus reevesi) er en liten cervid art innfødt i Sørøst-Asia20. Mens reproduksjonssyklusen til disse dyrene ikke er godt karakterisert i sine opprinnelige territorier, har studier av feralpopulasjoner i deler av Sør-England forbedret forståelsen av deres avlsmønstre20. I motsetning til de fleste cervids, ser Reeves ' muntjac ut til å avle året rundt, uten tilsynelatende sesongmessige fawning topper20-22. Kvinnelig muntjac føder vanligvis en enkelt fawn etter en 210-dagers svangerskapsperiode, og går pålitelig inn i en postpartum østrus innen 24 timer20-22. Er det ikke tenkelig i løpet av denne postpartum perioden vil gå tilbake til østrus ca 24-25 dager senere20. I fangede situasjoner oppnås reproduksjon vanligvis ved boliger gjør med en eller flere intakte menn. Dette systemet produserer tilfredsstillende unnfangelsesrater og krever liten teknisk ferdighet for personell, men eksakte avlsdatoer er vanskelige, om ikke umulige, å bestemme.
Muntjac brukes ofte i cytogenetiske studier på grunn av det brede spekteret av diploid kromosomtall og høy grad av karyotypisk diversifisering blant de forskjellige artene23. Disse dyrene blir også for tiden undersøkt som en modell av prionsykdom patogenese og overføring, med særlig interesse plassert på studiet av vertikal overføring av kronisk s kaste bort sykdom (CWD) i cervids. Muntjacs betydning i en rekke ulike forskningsapplikasjoner tilsier at det bør etableres forbedrede reproduktive teknologier for å utfylle dagens etterforskningsprosedyrer. Spesielt kan ikke-invasive mekanismer for å vurdere svangerskapsperioden potensielt belyse kritiske variasjoner i reproduktiv ytelse og fostervekst og utvikling under ulike eksperimentelle forhold. Videre vil utviklingen av sanntids fostermålingsreferanser være potensielt verdifull i å estimere svangerskapsalder i situasjoner der avlsdatoer ikke kan bestemmes. Tidligere studier har beskrevet mekanismer for bruk av fostermålinger, for eksempel krone-rump lengde (CRL), brystdybde (CD) og hodelengde (HL) for å estimere omtrentlig stadium av svangerskapet i cervid arter11-14, 16,17. I tillegg har noen av disse studiene også etablert retningslinjer som beskriver når spesifikke utviklingsmilepæler, for eksempel skjelettmineralisering eller fosterets hjerteslag, kan identifiseres8-19. Selv om disse dataene kan være nyttige for å veilede reproduktiv ultralydanalyse i muntjac, har de fleste av de andre cervid artene som studeres mye større kroppsstørrelse og lengre svangerskapsperioder, noe som reduserer oversettelsesverdien av disse studiene for muntjac-applikasjoner.
Protokollen som er skissert her beskriver transabdominal ultrasonografi av den kvinnelige muntjac med det formål å diagnostisere og overvåke graviditet. Vellykket gjennomføring av denne protokollen kan lette tidlig graviditet deteksjon og evaluering av fostervekst og utvikling. Denne teknikken har verdifulle anvendelser i gjennomføringen av studier som undersøker reproduksjon, i utero-utvikling eller vertikal overføring av smittsomme sykdommer i en liten cervidmodell og kan også være nyttig for kliniske formål i fangede avlsoperasjoner.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Prosedyreforberedelse
Alle dyreprosedyrer som er beskrevet er gjennomgått og godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee ved Colorado State University, en forening for vurdering og akkreditering av laboratorie dyrepleie (AAALAC), Intl. akkreditert institusjon.
- Før undersøkelse immobiliserer du dyr ved hjelp av passende sedasjons- eller anestesiprotokoller for å gi avslapning og tillate passende posisjonering. En handler begrenser hjorten mens en annen person administrerer sedasjonen til dyret.
Merk: Forfatterne har funnet følgende kombinasjon for å gi effektiv sedasjon i denne arten: butorphanol (0,45 mg/kg), azaperon (0,035 mg/kg) og medetomidin (0,04 mg/kg), administrert intramuskulært i glutealmuskulaturen. - Når doe har nådd et plan av sedasjon som tillater samsvarende håndtering, plassere henne i enten dorsal eller lateral recumbency på et undersøkelsesbord eller innenfor en V-trough. Løft hodet, nakken og thoraxen litt (ca. 20-30°) for å redusere risikoen for oppblåsthet og aspirasjon av romlig innhold og for å lette riktig ventilasjon under prosedyren.
Merk: I de fleste cervider eller andre drøvtyggerarter utføres abdominal ultralyd hos stående dyr; Imidlertid krever de små størrelses- og atferdshensynene til denne arten tung sedasjon for undersøkelse, og sternal posisjonering er derfor vanskeligere og kan utelukke effektiv bildeteknikk. Plassering av dyret midt mellom sternal og lateral recumbency kan være ideelt for å redusere risikoen for oppblåsthet og hypoventilering og bør vurderes om mulig. I enhver liggende stilling er det viktig å nøye overvåke dyrenes åndedrett og umiddelbart stoppe undersøkelsen og plassere dyret i sternal liggende hvis oppblåsthet eller hypoventilering er notert. - Klipp eventuelt hår fra underlivets område som skal undersøkes for å oppnå tilstrekkelig kontakt mellom transduserens og hudens fotavtrykk.
Merk: Ved tidlig svangerskap kan det påvises tegn på graviditet i kaudal mage nær brystkjertlene. Denne regionen av muntjac er vanligvis hårløs, og derfor barbering kan ikke angis på dette tidspunktet. Etter hvert som fosteret vokser og livmoren distends å okkupere en mer kranial posisjon i magen, klipping av håret vil være nødvendig før avbildning. Det må utvises forsiktighet for å unngå å forårsake mekaniske traumer i huden, inkludert kutt fra barberblader eller termisk skade fra elektriske clippers. - Plasser ultralydenheten på et sted som gjør at teknikeren enkelt kan visualisere skjermen mens han eller hun gjennomfører undersøkelsen med sin dominerende hånd. Skriv inn informasjon om dyreidentifikasjon (navn, identifikasjonsnummer osv.)i systemet for automatisk å merke lagrede bilder og videoløkker.
2. Transabdominal reproduktiv ultralydundersøkelse
- Påfør en sjenerøs mengde akustisk koblingsgel på kaudallivet.
- Plasser en 5-10 MHz buet lineær svinger på huden på kaudal mage, umiddelbart kranial til pubis, og flytt den sakte i kranial retning for å evaluere strukturene i bekkenhulen. Skann venstre og høyre kvadranter av kaudallivet for å vurdere begge hornene i muntjacs bicornuate livmor.
Merk: Omfattende abdominal ultralyd innebærer vurdering av alle abdominal viscera, inkludert leveren, nyrene, milten, mage-tarmkanalen, urinblæren og reproduktive kanaler. For denne protokollen vil bare undersøkelse av graviditet bli diskutert i detalj; Imidlertid bør det normale utseendet til andre kaudale bukorganer gjenkjennes, da disse strukturene sannsynligvis vil oppstå i løpet av studien. Organer som oftest ses på dette stedet inkluderer segmenter i mage-tarmkanalen, urinblæren og reproduksjonskanalen. Tykktarmen og tynntarmen er identifisert av det karakteristisk lagdelte utseendet på tarmveggen. Lumen kan eller ikke kan uttales avhengig av type og mengde innhold, som kan omfatte væske, gass, slimete eller matpartikler. Urinblæren kan være vanskelig å identifisere med mindre den er distended med urin, og lagene i blæreveggen er betydelig mindre distinkte enn tarmens. Bortsett fra livmoren, kan eggstokkene også bli funnet på ultralyd av reproduksjonskanalen til den kvinnelige muntjac. Eggstokkene vil vises som ovoidstrukturer nær nyrenes kaudale pol, og deres utseende kan endres i løpet av østrogensyklusen. Tilstedeværelsen av flere modne, væskefylte follikler i cortex er antydende for østrus.
Merk: Ved å rotere og/eller "vifte" transduserens skannehode, kan strukturer evalueres i tverrgående eller sagittale plan.- Hvis det er nødvendig for å skille en gravid livmor fra urinblæren, tøm blæren manuelt ved å bruke forsiktig trykk på kaudal mage eller ved å plassere et urinkateter og gjenta skanningen.
Merk: Manuelt uttrykk for blæren bør bare forsøkes når dyret er i en sternal eller oppreist stilling, noe som letter en mer naturlig orientering av bukviscera og reduserer risikoen for traumer til andre strukturer. Livmoren kan også skilles fra urinblæren ved å vurdere tykkelsen på orgelets vegg. Den typiske tykkelsen på en moderat distended blære er ca 1,4 mm24, mens forfatterne har funnet ut at den mer muskuløse veggen av gravid livmor i muntjac vanligvis måler mellom 7-8 mm.
Merk: Tidlig graviditet er vanskelig å diagnostisere definitivt på grunn av mangel på identifiserbare fosterstrukturer, og faktisk kan den første indikasjonen på graviditet ganske enkelt være en liten væskelomme i kaudallivet. Hvis det ses på dette tidspunktet, vil det utviklende embryoet vises som en hyperechoic, ovoid til amorf struktur i livmoren (Figur 1).
- Hvis det er nødvendig for å skille en gravid livmor fra urinblæren, tøm blæren manuelt ved å bruke forsiktig trykk på kaudal mage eller ved å plassere et urinkateter og gjenta skanningen.
- Gjør justeringer i dybden, frekvensen og forsterkningen etter behov for å forbedre kontrasten og bildedetaljene.
Merk:Høyere frekvenser er forbundet med kortere bølgelengder, som er nødvendige for forbedret bildeoppløsning. De fleste svingere er i stand til å operere innenfor en rekke frekvenser (for eksempel 6-10 MHz)24. Frekvensen kan justeres ved hjelp av skannerkontrollene på ultralydenheten, og økende frekvens vil resultere i et klarere bilde. Økende frekvens reduserer samtidig dybden av lydbølgeinntrengning; Derfor kan det være nødvendig å redusere frekvensen for å visualisere dypere strukturer, men oppløsningen kan bli kompromittert24. Av denne grunn er det viktig å velge høyest mulig frekvens for å nå ønsket vevsdybde. Justeringer av forsterkningskontrollene vil endre forsterkningen av lydbølger som kommer tilbake til svingeren fra vevet og påvirke kontrastgraden i bildet24. Gevinsten bør settes til et punkt der optimal kontrast mellom hyperechoic og hypoechoic vev oppnås, og disse innstillingene må kanskje justeres avhengig av strukturene som blir avbildet.
3. Oppnå fostermålinger
Merk:Svangerskapsalder hos mange husdyrarter kan estimeres ved hjelp av etablerte referanseområder for fostermålinger oppnådd ved ultralydundersøkelse. De mest brukte målingene inkluderer rett krone-rump lengde (SCRL), brystdybde (CD) og hodelengde (HL)17. Selv om det ennå ikke er samlet inn tilstrekkelige data for å utvikle pålitelige retningslinjer for svangerskapsalder i Reeves' muntjac hjort, kan det samles inn målinger for å begynne å etablere disse referansene. Fosterpuls (FHR) har blitt vist i andre arter av cervid og drøvtygger for å øke lineært etter hvert som svangerskapet utvikler seg til et visst punkt (vanligvis rundt dag 60 av svangerskapet), da begynner hjertefrekvensen å redusere17. FHR kan brukes til å estimere svangerskapsalder i forbindelse med andre ultralydobservasjoner, men det er mer vanlig å bruke som et mål på foster levedyktighet17,24. FHR er beregnet i Reeves' muntjac så tidlig som 35 dager etter observert parring.
- For å måle SCRL, finn livmoren på skjermen og gjør fine justeringer i svingerens posisjon til en sagittal visning av hele fosteret er oppnådd (Figur 2 og 3). Frys bildet og mål avstanden mellom det mest dorsale aspektet av skallen og bunnen av sakrummet (figur 2 og 3).
- For å måle CD, få en sagittal visning av fosteret (det samme bildet kan brukes til å måle SCRL) og måle avstanden mellom dorsale og ventrale aspekter av thoraxen (Figur 2 og 3).
- For å måle HL, ved hjelp av samme skytten visning av fosteret som beskrevet for SCRL- og CD-målingene, måler du avstanden fra oksipital kam til nesebunnen (figur 2 og 3).
- For å beregne fosterets hjertefrekvens, identifiser hjertet i fosterets thoraxhule ved å visualisere dets rytmiske sammentrekninger. Beregn pulsen ved å telle antall sammentrekninger (hjerteslag) som forekommer innen 1 minutt.
Merk: Hvis ultralydenheten som brukes har Doppler-evner, kan denne funksjonen brukes til ytterligere å skille hjertet fra andre ikke-spesifikke fosterbevegelser. - Kontroller at alle lagrede bilder og videoløkker inneholder all nødvendig identifiserende informasjon, inkludert dyrenavn eller -nummer, dato, målinger og passende strukturetiketter.
4. Prosedyremessige konklusjoner og gjenoppretting
- Fjern all gjenværende ultralydkontaktgel fra dyrets underliv ved hjelp av en myk klut eller papirhåndklær. Rengjør gelen fra svingeren før lagring.
- Hvis du bruker sedasjonsprotokollen som er beskrevet i trinn 1.1, administrer atipamezol subkutant i en dose på 0,25 mg/kg for å reversere effekten av medetomidin. Hvis du bruker en annen sedasjonsprotokoll der en antagonist er tilgjengelig, administrer dette middelet til dyret i henhold til publiserte doser ved avslutningen av prosedyren for å øke utvinningen.
- Plasser muntjac på en myk senget overflate i sternal recumbency, med hodet litt forhøyet for å redusere risikoen for oppblåsthet og aspirasjon av romlig innhold. Overvåk dyret nøye til det er fullstendig gjenopprettet og i stand til å ambulate rundt kabinettet uten hjelp.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Ved hjelp av protokollen som er beskrevet her, kan graviditet diagnostiseres og overvåkes i Reeves muntjac hjort med minimalt invasive teknikker. Det tidligste tidspunktet graviditeten kunne oppdages av forfatterne var omtrent 35 dager etter observert parringsadferd.
I de tidlige stadiene av svangerskapet ble graviditet diagnostisert ved å visualisere en væskefylt livmor identifisert som et anechoic rom i kaudal mage. Innenfor livmoren oppstod det utviklende embryoet som en hyperechoic, ovoid struktur med få identifiserbare egenskaper (Figur 1). Etter hvert som graviditeten utviklet seg, ble fosterstrukturer tydelige, og en avgjørende diagnose kunne gjøres etter observasjon av skjelettmineralisering og fosterets hjerteslag (figur 2 og 3).
Fostermålinger kan oppnås og brukes til å etablere referanseretningslinjer for estimering av svangerskapsalder i tilfeller der en nøyaktig avlsdato ikke er kjent, selv om vi ennå ikke har fullt utviklet dette systemet i muntjac. Straight crown-rump lengde (SCRL), HL og CD er standard fostermålinger som ofte brukes til å estimere fosteralder i mange arter17, og disse målingene ble hentet fra ultralydbilder av muntjac graviditeter ved hjelp av protokollen beskrevet her. Alle disse tre målingene kan fås fra det samme riktig plasserte sagittalbildet (figur 2 og 3), men separate bilder kan brukes hvis hele fosteret ikke kan fanges opp i en enkelt sagittal visning. I fremtiden kan disse teknikkene også brukes til å identifisere variasjoner i vekst og utvikling observert under ulike eksperimentelle forhold og for å bestemme fosterets levedyktighet.
Figur 1. Ultralydbilde som viser tidlig graviditet i en Reeves's muntjac hjort. Doe i denne studien hadde vært plassert med en intakt mannlig muntjac i 46 dager, men en nøyaktig avlsdato er ikke kjent. Fosteregenskaper kan ikke skilles på dette stadiet av svangerskapet.
Figur 2. Ultralyd bilde av samme graviditet avbildet i figur 1, 91 dager etter innføring av doe til pengene. (CD - brystdybde, HL - hodelengde, P - placentome, SCRL - rett krone-rump lengde).
Figur 3. Ultralyd bilde av en annen graviditet som viser passende posisjonering for å oppnå fostermålinger. Bildet tatt 91 dager etter introduksjonen av doe til pengene. (CD - brystdybde, HL - hodelengde, P - placentome, SCRL - rett krone-rump lengde).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Denne protokollen beskriver anvendelsen av transabdominal ultrasonografi for graviditetsdiagnose i Reeves' muntjac hjort. I samsvar med andre ultralydstudier er passende utstyr og teknisk ferdighet avgjørende for en vellykket reproduktiv undersøkelse av muntjac-doe. Nøye gjennomgang av grunnleggende pattedyranatomi, de fysiske prinsippene for diagnostisk ultralyd og det typiske ultrasonografiske utseendet til bukviscera vil bidra til reduksjon av feilaktige diagnoser. Videre er valg av passende transdusere og kjennskap til instrumenterings- og skannerkontrollene avgjørende for å oppnå bilder av høy kvalitet og nøyaktig tolkning.
For mange uerfarne ultrasonografer er avbildningsartefakter en vanlig årsak til dårlig bildeoppløsning og unøyaktig vurdering av strukturer. Gjenklang ved hudtransdusergrensesnittet er en av de hyppigst oppståtte artefaktene i veterinær abdominal ultralyd, og kan reduseres betydelig ved å eliminere tilstedeværelsen av gass mellom de to overflatene. Tilstrekkelig hårfjerning og sjenerøs påføring av akustisk gel til huden bør være tilstrekkelig til å minimere virkningen av denne artefakten. Diskusjoner om andre bildeartefakter finnes i ulike tekster av menneskelig og veterinær ultrasonografi, og vil derfor ikke bli diskutert nærmere her; En generell kunnskap om disse fenomenene vil imidlertid tillate ultrasonografen å kontrollere dem mer effektivt24.
Hvis du utfører en reproduktiv undersøkelse, bør det forstås at livmoren kan være vanskelig å visualisere i et normalt, ikke-ugjennomtrengelig dyr. I tidlig graviditet kan livmorens lumen bli identifiserbar som en hypoekolsk til anechoic plass som svangerskapet sac dannes. På dette stadiet i muntjac kan livmoren vanligvis bli funnet ved skanning på nivået av, eller litt kaudal til, brystkjertlene. Før skjelettmineraliseringen eller utseendet av et foster hjerteslag, kan graviditet bli feildiagnostisert i nærvær av andre reproduktive forhold som forårsaker væske å akkumulere i livmoren, som kan omfatte patologi som pyometra, hydrometra eller mucometra. Ultralyddiagnoser bør gjøres i forbindelse med en fullstendig klinisk vurdering av dyret før sedasjon for prosedyren. I tidlig svangerskap vil conceptus vises som en sfærisk til ovoid, hyperekolsk struktur i fostersekken. Spesifikke utviklingstidspunkter er ikke godt karakterisert i denne arten; skjelettmineralisering og fosterets hjertebevegelse ser ut til å være konsekvent påviselig ved ca. 8 uker etter parring.
Under ideelle forhold kan transabdominal ultralyd være et utrolig nyttig verktøy for evaluering av reproduktive strukturer i mange arter, inkludert Reeves' muntjac. Verdien av denne teknikken er imidlertid svært avhengig av de spesifikke egenskapene til dyrenes boligfasiliteter. I motsetning til mer passive mekanismer for graviditetsdeteksjon, for eksempel visuell observasjon av parringsadferd og påfølgende abdominal distensjon av doe, krever ultralyd fysisk og / eller kjemisk selvbeherskelse av dyret i en periode som varer 5-10 min eller lenger. I mange anlegg er dette ikke mulig eller praktisk, og nødvendigheten av eksamen bør vurderes ut fra studiens spesifikke mål. I tillegg kan visse fysiologiske eller patologiske tilstander antyde at ultrasonografi er kontraindisert hos visse dyr på grunn av de potensielt skadelige effektene av nød relatert til fangst og sedasjon. Det er viktig å vurdere egnetheten til hvert dyr for ultralydundersøkelse før studien startes, og en veterinær bør konsulteres i planleggingsstadiene av disse prosjektene.
Dagens praksis for graviditetsdeteksjon i Reeves' muntjac og andre dyrearter er typisk passive i naturen (observasjon av parringsadferd og abdominal distention i gjør). Serum progesteron eller graviditet-assosiert glykoprotein nivåer kan måles for å bekrefte diagnosen18,25, men resultatene av disse analysene gir ingen informasjon om stadium av svangerskapet eller foster levedyktighet. Ultralyd gir fordelen av å tillate sanntidsvurdering av reproduktiv status med nøyaktighet som ligner eller større enn for serumhormonanalyser18, samtidig som den opprettholder minimal invasivitet og nød for dyrene. I operasjoner der avlsdatoen er vanskelig eller umulig å bestemme, kan ultralyd gi en mer nøyaktig mekanisme for å estimere svangerskapsstadiet enn hormonelle analyser, selv i fravær av publiserte svangerskapstabeller. Videre synes fysisk og kjemisk selvbeherskelse for ultralydundersøkelse å forårsake minimal nød for sunn muntjac og gir en ideell mulighet til å utføre en grundig fysisk undersøkelse og samle flere prøver (blod, urin, etc.) for generelle helsevurderinger.
Svangerskapsaldersestimering gjennom ultrasonografiske målinger er etablert i mange arter, inkludert storfe1, sau2,3, geiter4og hester5, og har blitt beskrevet i et begrenset antall cervid arter samt8-19. I mangel av eksakte avlsdatoer eller etablerte svangerskapstabeller, kan fosteralderen til Reeves' muntjac bare anslås grovt basert på fosterutviklingsparametere skissert for andre arter. Et konkret mål med arbeidet som beskrives her er å etablere mer formelle retningslinjer for foster aldring i denne arten. Med tilstrekkelige normative data på plass, vil fremtidige anvendelser av ultrasonografi i denne kolonien omfatte å identifisere abnormiteter i fosterutvikling i nærvær av ulike eksperimentelle variabler og vurdere fosterets levedyktighet. I tillegg kan følsomhet og spesifisitet av transabdominal ultralyd bestemmes og sammenlignes med andre vanlige mekanismer for å oppdage graviditet i cervid arter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Forfatterne ønsker å takke Jeanette Hayes-Klug og Kelly Anderson for ledelsen av muntjac-kolonien, Dr. Alan Young for å introdusere oss for muntjac og Mr. Cleve Tedford fra Cervid Solutions Inc. for å gi frø muntjac for dette prosjektet. Dette arbeidet ble støttet av NIH grant R01AI093634.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 2nd edition, Saunders. Philadelphia. 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
