Summary
Transabdominal ultralyd beskrives som et effektivt, noninvasive middel til vurdering af reproduktiv status i Reeves 'muntjac hjorte. Disse metoder kan bruges til at opnå tidlig graviditetsdiagnose og til at evaluere fosterets levedygtighed. Fremtidige anvendelser af denne teknik omfatter skøn over svangerskabsalder og virkninger af modersygdomme på fostrets udvikling.
Abstract
Reeves' muntjac hjorte (Muntiacus reevesi) er en lille cervid art hjemmehørende i Sydøstasien, og er i øjeblikket ved at blive undersøgt som en potentiel model for prion sygdom transmission og patogenese. Vertikal transmission er et interesseområde blandt forskere, der studerer smitsomme sygdomme, herunder prionsygdom, og disse undersøgelser kræver effektive metoder til evaluering af virkningerne af moderens infektion på reproduktiv ydeevne. Ultralydsundersøgelse er et veletableret værktøj til diagnosticering af graviditet og vurdering af fostersundhed hos mange dyrearter1-7, herunder flere arter af opdrættede cervids8-19, men denne teknik er ikke beskrevet i Reeves 'muntjac hjorte. Her beskriver vi anvendelsen af transabdominal ultralyd til at opdage graviditet i muntjac gør, og til at evaluere fostervækst og udvikling i hele svangerskabsperioden. Ved hjælp af denne procedure blev gravide dyr identificeret så tidligt som 35 dage efter doe-buck parring, og dette var et effektivt middel til sikkert at overvåge graviditeten med jævne mellemrum. Fremtidige mål for dette arbejde vil omfatte etablering af normale føtalmålingsreferencer til vurdering af svangerskabsalder, bestemmelse af teknikkens følsomhed og specificitet til diagnosticering af graviditet på forskellige stadier af svangerskabet og identifikation af variationer i fostervækst og udvikling under forskellige eksperimentelle forhold.
Introduction
Ultralydsundersøgelse er en velbeskrevet metode til graviditetsdiagnose hos kvæg1, får2,3,geder 4,heste5, ledsagerdyr6,7og andre husdyrarter. Denne billeddannelse modalitet er også blevet identificeret som et værdifuldt redskab til graviditet afsløring og fosteralder skøn i flere arter af fangenskab livmoderhalskræft, herunder dådyr8-11, kronhjorte12-16, Hokkaido sika hjorte17, og rensdyr18,19. I mange tilfælde har ultralyd produceret højere nøjagtighedsrater end andre mekanismer til graviditetsdetektion, såsom serumprogesteron eller graviditetsrelateret glycoproteinanalyse9,18. Desuden kan ultralydsvisualisering af forplantningskanalen give yderligere oplysninger om fosterets levedygtighed, svangerskabsalder og identifikation af udviklingsmæssige abnormiteter, som ellers ville være vanskelige at vurdere. Nytten af ultralyd til evaluering af reproduktiv status tyder på, at denne metode bør tilpasses andre arter, hvor der anvendes aktive avlsprogrammer.
Reeves ' muntjac hjorte (Muntiacus reevesi) er en lille cervid arter hjemmehørende i Sydøstasien20. Mens disse dyrs reproduktionscyklus ikke er godt karakteriseret i deres oprindelige territorier, har undersøgelser af vildtlevende populationer i dele af det sydlige England forbedret forståelsen af deres avlsmønstre20. I modsætning til de fleste cervids, Reeves 'muntjac synes at avle året rundt, uden tilsyneladende sæsonbestemt fawning toppe20-22. Kvindelige muntjac typisk føder en enkelt fawn efter en 210-dages drægtighedsperiode, og pålideligt indtaste en postpartum østrus inden for 24 timer20-22. Er det ikke undfange i løbet af denne postpartum periode vil vende tilbage til østrus ca 24-25 dage senere20. I fangenskab situationer, er reproduktion typisk opnås ved boliger gør med en eller flere intakte mandlige. Dette system giver tilfredsstillende undfangelsesrater og kræver kun få tekniske færdigheder for personalet, uanset hvor nøjagtige yngledatoer er vanskelige, hvis ikke umulige, at bestemme.
Muntjac er almindeligt anvendt i cytogenetiske undersøgelser på grund af den brede vifte af diploid kromosom numre og høj grad af karyotypic diversificering blandt de forskellige arter23. Disse dyr undersøges også i øjeblikket som en model for prionsygdomspatogenese og overførsel med særlig interesse i studiet af vertikal overførsel af kronisk spildsygdom (CWD) i livmoderhalsen. Muntjac's betydning for en række forskellige forskningsapplikationer tyder på, at der bør indføres forbedrede reproduktive teknologier som supplement til de nuværende undersøgelsesprocedurer. Specifikt kan ikke-invasive mekanismer til vurdering af drægtighedsperioden potentielt belyse kritiske variationer i reproduktiv ydeevne og fostervækst og udvikling under forskellige eksperimentelle forhold. Desuden vil udviklingen af fostrets målingsreferencer i realtid være potentielt værdifuld i vurderingen af svangerskabsalderen i situationer, hvor yngledatoer ikke kan bestemmes. Tidligere undersøgelser har beskrevet mekanismer til brug af føtale målinger, såsom crown-rump længde (CRL), brystdybde (CD), og hovedlængde (HL) til at estimere den omtrentlige fase af svangerskabet i cervid arter11-14, 16,17. Derudover har nogle af disse undersøgelser også etableret retningslinjer, der beskriver, hvornår specifikke udviklingsmæssige milepæle, såsom skeletmineralisering eller fosterhjerte, kan identificeres8-19. Mens disse data kan være nyttige til at hjælpe guide reproduktiv ultralyd analyse i muntjac, de fleste af de andre cervid arter undersøgt har meget større kropsstørrelse og længere svangerskabsperioder, reducere translationel værdi af disse undersøgelser for muntjac applikationer.
Protokollen er skitseret her beskriver transabdominal ultrasonografi af den kvindelige muntjac med henblik på diagnosticering og overvågning af graviditet. Vellykket udførelse af denne protokol kan lette tidlig graviditet påvisning og evaluering af fostervækst og udvikling. Denne teknik har værdifulde anvendelser i udførelsen af undersøgelser, der undersøger reproduktion, i livmoderudvikling eller lodret overførsel af smitsomme sygdomme i en lille cervidmodel og kan også være nyttig til kliniske formål i fangenskab avlsoperationer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Proceduremæssig forberedelse
Alle beskrevne dyreforsøg er blevet gennemgået og godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee ved Colorado State University, en sammenslutning for vurdering og akkreditering af laboratoriedyrpleje (AAALAC), Intl. akkrediteret institution.
- Før undersøgelsen, immobilisere dyr ved hjælp af passende sedation eller anæstesi protokoller til at give afslapning og give mulighed for passende positionering. En handler fastholder hjorten, mens en anden person administrerer sedationen til dyret.
Bemærk: Forfatterne har fundet følgende kombination til at give effektiv sedation i denne art: butorphanol (0,45 mg/ kg), azaperon (0,035 mg/ kg) og medetomidin (0,04 mg / kg), administreret intramuskulært i glutealmusklerne. - Når doe har nået et plan for sedation, der giver mulighed for kompatibel håndtering, placere hende i enten dorsal eller lateral recumbency på en undersøgelse bordet eller inden for en V-trug. Løft hoved, nakke og brystkasse lidt (ca. 20-30°) for at reducere risikoen for gylp og aspiration af rumenalt indhold og for at lette korrekt ventilation under proceduren.
Bemærk: I de fleste cervids eller andre drøvtyggerarter udføres abdominal ultralyd hos stående dyr; Imidlertid kræver den lille størrelse og adfærdsmæssige overvejelser af denne art tung sedation til undersøgelse, og sternal positionering er derfor vanskeligere og kan udelukke effektiv billeddannelsesteknik. Placering af dyret midtvejs mellem bryst- og sideforskummet recumbency kan være ideel til at reducere risikoen for regurgitation og hypoventilation og bør overvejes, hvis det er muligt. I enhver liggende stilling er det afgørende at nøje overvåge dyrenes åndedræt og straks stoppe undersøgelsen og placere dyret i sternal recumbency, hvis regurgitation eller hypoventilation er noteret. - Klip om nødvendigt hår fra det område af maven, der skal undersøges for at opnå tilstrækkelig kontakt mellem transducerens fodaftryk og huden.
Bemærk: I den tidlige svangerskab kan der påvises tegn på graviditet i kaudale underliv nær brystkirtlerne. Denne region af muntjac er typisk hårløs, og derfor barbering kan ikke angives på nuværende tidspunkt. Som fosteret vokser og livmoderen distends at besætte en mere kraniestilling i maven, klipning af håret vil være nødvendigt forud for billeddannelse. Man skal være omhyggelig med at undgå at forårsage mekaniske traumer på huden, herunder flænger fra barberblade eller termisk skade fra elektriske klippere. - Placer ultralydsenheden på et sted, hvor teknikeren nemt kan visualisere skærmen, mens han eller hun foretager undersøgelsen med sin dominerende hånd. Indtast oplysninger om identifikation af dyr (navn, identifikationsnummer osv.)i systemet for automatisk at mærke gemte billeder og videoløkker.
2. Transabdominal reproduktiv ultralydsundersøgelse
- Påfør en generøs mængde akustisk koblingsgel på kaudalen.
- Placer en 5-10 MHz buet lineær transducer på huden af kaudale maven, straks kranie til pubis, og flytte det langsomt i en kranieretning for at evaluere strukturerne i bækkenhulen. Scan venstre og højre kvadranter af kaudale maven til at vurdere begge horn af muntjac's bicornuate livmoder.
Bemærk: Omfattende abdominal ultralyd indebærer vurdering af alle abdominal indvolde, herunder leveren, nyrerne, milten, mave-tarmkanalen, urinblæren, og reproduktive tarmkanalen. I forbindelse med denne protokol vil kun graviditetsundersøgelse blive drøftet i detaljer; det normale udseende af andre kaudale abdominale organer bør dog anerkendes, da disse strukturer sandsynligvis vil opstå i løbet af undersøgelsen. Organer, der oftest ses på dette sted, omfatter segmenter af mave-tarmkanalen, urinblæren og forplantningskanalen. Tyktarmen og tyndtarmen identificeres ved tarmvæggens karakteristiske lagdelte udseende. Lumen kan eller ikke kan udtales afhængigt af typen og mængden af indhold, som kan omfatte væske, gas, slimhjerne, eller mad partikler. Urinblæren kan være svært at identificere, medmindre udspilet med urin, og lagene af blærevæggen er betydeligt mindre forskellige end tarmene. Bortset fra livmoderen kan æggestokkene også findes på ultralyd af den kvindelige muntjacs reproduktive tarmkanal. Æggestokkene vises som æggelignende strukturer nær nyrernes kaudale pol, og deres udseende kan ændre sig i løbet af den estøse cyklus. Tilstedeværelsen af flere modne, væskefyldte follikler i cortex tyder på østrus.
Bemærk: Ved at rotere og/eller "vifte" transducerens scanhoved kan strukturer evalueres i tværgående eller sagittale planer.- Hvis det er nødvendigt for at skelne en gravid livmoder fra urinblæren, tømme blæren manuelt ved at anvende blidt tryk på kaudale maven eller ved at placere en urin kateter og gentage scanningen.
Bemærk: Manuel ekspression af blæren bør kun forsøges, når dyret er i en sternal eller opretstående position, hvilket letter en mere naturlig orientering af abdominal indvolde og reducerer risikoen for traumer til andre strukturer. Livmoderen kan også skelnes fra urinblæren ved at vurdere tykkelsen af organets væg. Den typiske tykkelse af en moderat udspilet blære er ca. 1,4 mm24, mens forfatterne har fundet ud af, at den mere muskuløse væg i den gravide livmoder i muntjac generelt måler mellem 7-8 mm.
Bemærk: Tidlig graviditet er vanskelig at diagnosticere endeligt på grund af mangel på identificerbare fosterstrukturer, og faktisk kan den første indikation af graviditet simpelthen være en lille væskelomme i kaudale underliv. Hvis det ses på dette tidspunkt, vil det udviklende embryo fremstå som en hyperechoic, ovoid til amorf struktur i livmoderen (Figur 1).
- Hvis det er nødvendigt for at skelne en gravid livmoder fra urinblæren, tømme blæren manuelt ved at anvende blidt tryk på kaudale maven eller ved at placere en urin kateter og gentage scanningen.
- Foretag justeringer af dybde, hyppighed og forstærkning efter behov for at forbedre kontrast- og billeddetaljer.
Bemærk:Højere frekvenser er forbundet med kortere bølgelængder, som er nødvendige for forbedret billedopløsning. De fleste transducere er i stand til at operere inden for en række frekvenser (for eksempel 6-10 MHz)24. Frekvensen kan justeres ved hjælp af scannerkontrollerne på ultralydsenheden, og stigende frekvens vil resultere i et klarere billede. Stigende frekvens samtidig reducerer dybden af lydbølge penetration; derfor kan det være nødvendigt at reducere frekvensen for at visualisere dybere strukturer, men opløsningen kan blive kompromitteret24. Af denne grund er det vigtigt at vælge den højest mulige frekvens for at nå den ønskede vævsdybde. Justeringer af forstærkningskontrollerne vil ændre forstærkningen af lydbølger, der vender tilbage til transduceren fra vævene og påvirke kontrastgraden i billedet24. Forstærkningen skal indstilles til et punkt, hvor der opnås optimal kontrast mellem hyperechoic og hypoechoic væv, og disse indstillinger skal muligvis justeres afhængigt af de strukturer, der afbildes.
3. Opnåelse af føtale målinger
Bemærk:Svangerskabsalder hos mange husdyrarter kan estimeres ved hjælp af etablerede referenceområder for føtale målinger opnået ved ultralydsundersøgelse. De mest anvendte målinger omfatter lige krone-gump længde (SCRL), brystdybde (CD), og hovedlængde (HL)17. Selv om der endnu ikke er indsamlet tilstrækkelige data til at udvikle pålidelige retningslinjer for svangerskabsalderen i Reeves' muntjac-hjorte, kan der indsamles målinger for at begynde at fastlægge disse referencer. Føtal puls (FHR) har vist sig i andre arter af livmoderhalskræft og drøvtyggere at stige lineært som svangerskabet skrider frem til et vist punkt (typisk omkring dag 60 af svangerskabet), på hvilket tidspunkt pulsen begynder at falde17. FHR kan bruges til at estimere svangerskabsalder i forbindelse med andre ultralyd observationer, men det er mere almindeligt anvendt som et mål for fosterets levedygtighed17,24. FHR er allerede 35 dage efter observeret parring blevet beregnet i Reeves' muntjac.
- For at måle SCRL skal livmoderen på skærmen lokaliseres, og transducerens position skal justeres, indtil der opnås et sagittalt syn på hele fosteret (Figur 2 og 3). Frys billedet, og mål afstanden mellem det mest dorsale aspekt af kraniet og bunden af korsbenet (Figur 2 og 3).
- For at måle CD skal du få et sagittalt billede af fosteret (det samme billede kan bruges til at måle SCRL) og måle afstanden mellem brystkassens dorsale og ventrale aspekter (Figur 2 og 3).
- For at måle HL måler ved hjælp af samme sagittalvisning af fosteret som beskrevet for SCRL- og CD-målingerne afstanden fra nakkebenet til næsebasen (Figur 2 og 3).
- For at beregne fosterpulsen skal du identificere hjertet i fosterets brysthule ved at visualisere dets rytmiske sammentrækninger. Beregn pulsen ved at tælle antallet af sammentrækninger (hjerteslag), der forekommer inden for en 1 min periode.
Bemærk: Hvis ultralydsenheden, der anvendes, har Doppler-egenskaber, kan denne funktion anvendes til yderligere at hjælpe med at skelne hjertet fra andre uspecifikke fosterbevægelser. - Kontroller, at alle gemte billeder og videoløkker indeholder alle nødvendige identifikationsoplysninger, herunder dyrenavn eller -nummer, dato, målinger og passende strukturetiketter.
4. Proceduremæssige konklusioner og inddrivelse
- Fjern alle resterende ultralyd kontakt gel fra dyrets mave ved hjælp af en blød klud eller papirhåndklæder. Gelen rengøres fra transduceren inden opbevaring.
- Hvis du anvender den i trin 1.1 beskrevne sedationsprotokol, skal atipamezol underkutant gives ved en dosis på 0,25 mg/kg for at vende virkningerne af medetomidin. Hvis du bruger en anden sedationsprotokol, hvor en antagonist er tilgængelig, skal dette middel administreres til dyret i henhold til offentliggjorte doser ved afslutningen af proceduren for at fremskynde genopretningen.
- Placer muntjac på en blød bedded overflade i sternal recumbency, med hovedet lidt forhøjet for at reducere risikoen for regurgitation og aspiration af rumenal indhold. Overvåg dyret nøje, indtil det er fuldt genoprettet og i stand til at ambulate omkring kabinettet uden hjælp.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Ved hjælp af den protokol, der er beskrevet her, kan graviditet diagnosticeres og overvåges i Reeves muntjac hjorte med minimalt invasive teknikker. Det tidligste tidspunkt, hvor graviditeten kunne påvises af forfatterne, var ca. 35 dage efter observeret parringsadfærd.
I de tidlige stadier af svangerskabet blev graviditeten diagnosticeret ved at visualisere en væskefyldt livmoder identificeret som et lyddødt rum i kaudale underliv. I livmoderen optrådte det udviklende embryo som en hyperechoic, ovoid struktur med få identificerbare træk (Figur 1). Efterhånden som graviditeten skred frem, blev fosterstrukturerne tydelige, og der kunne foretages en endelig diagnose efter observation af skeletmineralisering og fosterhjerte(figur 2 og 3).
Føtale målinger kan opnås og bruges til at fastlægge referenceretningslinjer for vurdering af svangerskabsalder i tilfælde, hvor en nøjagtig yngledato ikke er kendt, selv om vi endnu ikke har fuldt udviklet dette system i muntjac. Lige krone-rump længde (SCRL), HL, og CD er standard føtale målinger, der er almindeligt anvendt til at estimere fosteralder i mange arter17, og disse målinger blev opnået fra ultralyd billeder af muntjac graviditeter ved hjælp af protokollen beskrevet her. Alle tre af disse målinger kan fås fra det samme korrekt placerede sagittalbillede (Figur 2 og 3), men separate billeder kan bruges, hvis hele fosteret ikke er i stand til at blive fanget i en enkelt sagittal visning. I fremtiden kan disse teknikker også bruges til at identificere variationer i vækst og udvikling observeret under forskellige forsøgsbetingelser og til at bestemme fosterets levedygtighed.
Figur 1. Ultralydsbillede, der demonstrerer tidlig graviditet i en Reeves' muntjac-hjort. Doe i denne undersøgelse havde været opstaldet med en intakt mandlig muntjac i 46 dage, men en nøjagtig yngledato er ikke kendt. Føtale træk kan ikke skelnes på dette stadium af svangerskabet.
Figur 2. Ultralyd billede af den samme graviditet afbildet i figur 1, 91 dage efter indførelsen af doe til sorteper. (CD - brystdybde, HL - hovedlængde, P - placentome, SCRL - lige krone-gump længde).
Figur 3. Ultralydsbillede af en anden graviditet, der demonstrerer passende positionering for at opnå føtale målinger. Billede taget 91 dage efter indførelsen af doe til sorteper. (CD - brystdybde, HL - hovedlængde, P - placentome, SCRL - lige krone-gump længde).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Denne protokol beskriver anvendelsen af transabdominal ultrasonografi til graviditetsdiagnose i Reeves 'muntjac hjorte. I overensstemmelse med andre ultralyd undersøgelser, passende udstyr og tekniske færdigheder er afgørende for en vellykket reproduktiv undersøgelse af muntjac doe. Omhyggelig gennemgang af grundlæggende pattedyr anatomi, de fysiske principper for diagnostisk ultralyd, og den typiske ultralyd udseende abdominal indvolde vil støtte i reduktionen af fejl diagnoser. Desuden er valg af egnede transducere og kendskab til instrumenterings- og scannerkontrollerne afgørende for at opnå billeder i høj kvalitet og nøjagtig fortolkning.
For mange uerfarne ultralydsfotografer er billedartefakter en almindelig årsag til dårlig billedopløsning og unøjagtig vurdering af strukturer. Efterklang på hudtransducer interface er en af de hyppigst forekommende artefakter i veterinær abdominal ultralyd, og kan reduceres betydeligt ved at fjerne tilstedeværelsen af gas mellem de to overflader. Tilstrækkelig hårfjerning og generøs anvendelse af akustisk gel på huden bør være tilstrækkelig til at minimere virkningen af denne artefakt. Diskussioner om andre billeddannelse artefakter kan findes i forskellige tekster af menneskelige og veterinære ultrasonografi, og vil derfor ikke blive drøftet nærmere her; men en generel viden om disse fænomener vil gøre det muligt for ultralydsfotografen at kontrollere dem mere effektivt24.
Hvis der udføres en reproduktiv undersøgelse, skal det forstås, at livmoderen kan være vanskelig at visualisere hos et normalt, ikke-gravid dyr. I den tidlige graviditet kan livmoderens lumen blive identificerbare som et hypoekoisk til lyddødt rum, da svangerskabssækken dannes. På dette tidspunkt i muntjac, livmoderen kan typisk findes ved at scanne på niveau med, eller lidt kaudale til, brystkirtlerne. Før skeletmineraliseringen eller udseendet af et fosterhjerte kan graviditeten fejldiagnosticeres i nærværelse af andre reproduktive tilstande, der forårsager væske til at akkumulere i livmoderen, hvilket kan omfatte patologi som pyometra, hydrometra eller mucometra. Ultralyddiagnoser bør foretages i forbindelse med en fuldstændig klinisk vurdering af dyret inden sedation til proceduren. I begyndelsen af svangerskabet vises conceptus som en sfærisk til ovoid, hyperechoic struktur inden for fosterhinden. Specifikke udviklingsmæssige tidspunkter er ikke godt karakteriseret i denne art; skeletmineralisering og føtal hjertebevægelse synes imidlertid konsekvent at kunne påvises ca. 8 uger efter parringen.
Under ideelle forhold kan transabdominal ultralyd være et utroligt nyttigt værktøj til evaluering af reproduktive strukturer i mange arter, herunder Reeves 'muntjac. Værdien af denne teknik afhænger imidlertid i høj grad af de særlige forhold, der gør sig heraf i dyrenes staldfaciliteter. I modsætning til mere passive mekanismer til graviditetsdetektion, såsom visuel observation af parringsadfærd og efterfølgende abdominal distention af doe, kræver ultralyd fysisk og / eller kemisk tilbageholdenhed af dyret i en periode, der varer 5-10 minutter eller længere. I mange faciliteter er dette ikke muligt eller praktisk muligt, og nødvendigheden af undersøgelsen bør overvejes på grundlag af undersøgelsens specifikke mål. Derudover kan visse fysiologiske eller patologiske tilstande antyde, at ultralyd er kontraindiceret hos visse dyr på grund af de potentielt skadelige virkninger af nød i forbindelse med indfangning og sedation. Det er vigtigt at vurdere hvert dyrs egnethed til ultralydsundersøgelse, før undersøgelsen påbegyndes, og en dyrlæge bør høres i planlægningsfasen af disse projekter.
Nuværende praksis for graviditet afsløring i Reeves 'muntjac og andre vilde dyr arter er typisk passive karakter (observation af parring adfærd og abdominal distention i gør). Serum progesteron eller graviditet-associerede glycoprotein niveauer kan måles for at bekræfte diagnosen18,25, men resultaterne af disse assays giver ingen oplysninger om stadium af svangerskab eller foster levedygtighed. Ultralyd giver fordelen ved at tillade realtidsvurdering af reproduktiv status med nøjagtighed svarende til eller større end serumhormonanalyser18, samtidig med at minimal invasivitet og angst for dyrene opretholdes. I operationer, hvor yngledatoen er vanskelig eller umulig at bestemme, kan ultralyd give en mere præcis mekanisme til at estimere drægtighedsstadiet end hormonelle assays, selv i mangel af offentliggjorte svangerskabsborde. Desuden synes fysisk og kemisk tilbageholdenhed til ultralydsundersøgelse at forårsage minimal nød for sund muntjac og giver en ideel mulighed for at udføre en grundig fysisk undersøgelse og indsamle yderligere prøver (blod, urin osv.)til generelle sundhedsvurderinger.
Der er konstateret svangerskabsaldersestimater gennem ultralydsmålinger hos mange arter , herunder kvæg1, får2,3,geder 4og heste5, og er blevet beskrevet i et begrænset antal livmoderhalskræftarter samt8-19. I mangel af nøjagtige yngledatoer eller etablerede drægtighedstabeller kan føtalalderen for Reeves' muntjac kun anslås groft på grundlag af føtale udviklingsparametre, der er skitseret for andre arter. Et specifikt mål for det arbejde, der er beskrevet her, er at etablere mere formelle retningslinjer for føtal aldring i denne art. Med tilstrækkelige normative data på plads vil fremtidige anvendelser af ultralyd i denne koloni omfatte identifikation af abnormiteter i fosterudvikling i nærværelse af forskellige eksperimentelle variabler og vurdering af fosterets levedygtighed. Derudover kan følsomhed og specificitet af transabdominal ultralyd bestemmes og sammenlignes med andre almindeligt anvendte mekanismer til påvisning af graviditet hos cervidarter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Forfatterne ønsker at takke Jeanette Hayes-Klug og Kelly Anderson for forvaltningen af muntjac koloni, Dr. Alan Young for at indføre os til muntjac og Mr. Cleve Tedford af Cervid Solutions Inc. for at give frø muntjac for dette projekt. Dette arbejde blev støttet af NIH-tilskud R01AI093634.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 2nd edition, Saunders. Philadelphia. 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
