Summary
يوصف الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية بأنها وسيلة فعالة وغير الباضعة لتقييم الحالة الإنجابية في الغزلان مونتجاك ريفز. ويمكن استخدام هذه الطرق لتحقيق التشخيص المبكر للحمل وتقييم قابلية الجنين للحياة. وتشمل التطبيقات المستقبلية لهذه التقنية تقدير عمر الحمل وآثار مرض الأم على نمو الجنين.
Abstract
ريفز 'muntjac الغزلان (Muntiacus ريفسي) هي نوع صغير من عنق الرحم الأصلي إلى جنوب شرق آسيا، ويجري حاليا التحقيق كنموذج محتمل لانتقال مرض البريون ومسببات الأمراض. ويعتبر الانتقال الرأسي مجالا مهما بين الباحثين الذين يدرسون الأمراض المعدية، بما في ذلك مرض البريون، وتتطلب هذه التحقيقات أساليب فعالة لتقييم آثار العدوى النفاسية على الأداء الإنجابي. الفحص Ultrasonographic هو أداة راسخة لتشخيص الحمل وتقييم صحة الجنين في العديد من أنواعالحيوانات 1-7، بما في ذلك العديد من أنواع cervids المستزرعة8-19، ولكن لم يتم وصف هذه التقنية في الغزلان مونتجاك ريفز. هنا نحن نصف تطبيق الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية للكشف عن الحمل في muntjac لا وتقييم نمو الجنين والتنمية طوال فترة الحمل. باستخدام هذا الإجراء ، تم تحديد الحيوانات الحامل في وقت مبكر من 35 يوما بعد الاقتران دو باك وهذا كان وسيلة فعالة لمراقبة الحمل بأمان على فترات منتظمة. وستشمل الأهداف المستقبلية لهذا العمل وضع مراجع طبيعية لقياس الجنين لتقدير عمر الحمل، وتحديد حساسية وخصوصية تقنية تشخيص الحمل في مراحل مختلفة من الحمل، وتحديد الاختلافات في نمو الجنين ونموه في ظل ظروف تجريبية مختلفة.
Introduction
الفحص Ultrasonographic هو وسيلة موصوفة جيدا لتشخيص الحمل فيالماشية 1، الأغنام2،3، الماعز4، الخيول5،الحيوانات الرفيقة 6،7، وغيرها من أنواع الحيوانات المنزلية. وقد تم تحديد طريقة التصوير هذه أيضا كأداة قيمة للكشف عن الحمل وتقدير عمر الجنين في عدة أنواع من عنق الرحم الأسير، بما في ذلك الغزلان البور8-11،الغزلان الحمراء12-16،هوكايدو سيكا الغزلان17،والرنة18،19. في كثير من الحالات، أنتجت التصوير فوق السونوغرافيا معدلات دقة أعلى من الآليات الأخرى للكشف عن الحمل، مثل البروجسترون المصل أو تحليل البروتين الجليكوبروتين المرتبط بالحمل9,18. وعلاوة على ذلك، يمكن أن يوفر التصور فائقسونوغرافية من الجهاز التناسلي معلومات إضافية بشأن صلاحية الجنين، والعمر الحملي، وتحديد تشوهات النمو التي لولا ذلك سيكون من الصعب تقييمها. وتقترح فائدة التصوير فوق السونوغرافيا لتقييم الحالة الإنجابية أن هذه المنهجية ينبغي تكييفها مع الأنواع الأخرى التي تستخدم فيها برامج التربية النشطة.
ريفز 'muntjac الغزلان (Muntiacus ريفسي) هي نوع صغير من عنق الرحم الأصلي إلى جنوب شرق آسيا20. في حين أن الدورة الإنجابية لهذه الحيوانات ليست مميزة بشكل جيد في أراضيها الأصلية ، فقد حسنت دراسات المجموعات الوحشية في أجزاء من جنوب إنجلترا فهم أنماطتكاثرها 20. على عكس معظم cervids ، يبدو أن muntjac ريفز تولد على مدار السنة ، مع عدم وجود قمم التملق الموسميةواضحة 20-22. أنثى muntjac عادة ما تلد fawn واحد بعد فترة الحمل 210 يوما، وأدخل موثوق بها استروس ما بعد الولادة في غضون 24 ساعة20-22. هل هذا لا تصور خلال هذه الفترة بعد الولادة سوف يعود إلى estrus ما يقرب من 24-25 يوما في وقت لاحق20. في الحالات الأسيرة ، يتم تحقيق الإنجاب عادة عن طريق السكن مع ذكر واحد أو أكثر سليم. وينتج عن هذا النظام معدلات حمل مرضية ويتطلب مهارات تقنية قليلة للموظفين، ولكن من الصعب تحديد تواريخ التكاثر الدقيقة، إن لم يكن من المستحيل.
وتستخدم عادة Muntjac في الدراسات الجينية الخلوية بسبب مجموعة واسعة من أعداد الكروموسومات ديبلويد وارتفاع معدل تنويع karyotypic بين الأنواع المختلفة23. ويجري حاليا أيضا دراسة هذه الحيوانات كنموذج لمسببات الأمراض المعدية للأمراض البريونية وانتقالها، مع إيلاء اهتمام خاص لدراسة الانتقال الرأسي لمرض الهزال المزمن في عنق الرحم. وتشير أهمية المونتجاك في عدد من التطبيقات البحثية المختلفة إلى ضرورة إنشاء تكنولوجيات إنجابية محسنة لاستكمال إجراءات التحقيق الحالية. وعلى وجه التحديد، يمكن للآليات غير الباضعة لتقييم فترة الحمل أن توضح الاختلافات الحرجة في الأداء الإنجابي ونمو الجنين ونموه في ظل ظروف تجريبية مختلفة. وعلاوة على ذلك، فإن وضع مراجع لقياس الجنين في الوقت الحقيقي يمكن أن يكون ذا قيمة في تقدير عمر الحمل في الحالات التي لا يمكن فيها تحديد تواريخ التكاثر. وقد وصفت الدراسات السابقة آليات لاستخدام قياسات الجنين، مثل طول التاج الردف (CRL)، وعمق الصدر (CD)، وطول الرأس (HL) لتقدير المرحلة التقريبية من الحمل في أنواع عنق الرحم11-14، 16،17. بالإضافة إلى ذلك، وضعت بعض هذه الدراسات أيضا مبادئ توجيهية تصف متى يمكن تحديد معالم تنموية محددة، مثل تمعدن الهيكل العظمي أو نبضات قلب الجنين،8-19. في حين أن هذه البيانات قد تكون مفيدة للمساعدة في توجيه تحليل الموجات فوق الصوتية الإنجابية في muntjac، فإن معظم أنواع عنق الرحم الأخرى التي تمت دراستها لديها حجم جسم أكبر بكثير وفترات حمل أطول، مما يقلل من القيمة الانتقالية لهذه الدراسات لتطبيقات muntjac.
يصف البروتوكول المبين هنا التصوير فوق السونوغرافيا عبر اليبدوية للأنثى مونتجاك لأغراض تشخيص الحمل ورصده. ويمكن أن ييسر التنفيذ الناجح لهذا البروتوكول الكشف المبكر عن الحمل وتقييم نمو الجنين ونموه. هذه التقنية لها تطبيقات قيمة في إجراء الدراسات التي تحقق في التكاثر، في تطوير الرحم، أو الانتقال الرأسي للأمراض المعدية في نموذج عنق الرحم الصغيرة، ويمكن أيضا أن تكون مفيدة لأغراض سريرية في عمليات التربية الأسير.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. إعداد الإجراءات
وقد تم استعراض جميع الإجراءات الحيوانية الموصوفة والموافقة عليها من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها في جامعة ولاية كولورادو، وهي جمعية لتقييم واعتماد رعاية الحيوانات المختبرية (AAALAC)، مؤسسة معتمدة Intl.
- قبل الفحص، شل حركة الحيوانات باستخدام بروتوكولات التخدير المناسبة أو التخدير لتوفير الاسترخاء والسماح لتحديد المواقع المناسبة. معالج واحد يقيد الغزلان في حين أن الشخص الثاني يدير التخدير للحيوان.
ملاحظة: وقد وجد المؤلفون التركيبة التالية لتوفير التخدير الفعال في هذا النوع: الباتورفانول (0.45 ملغم/كغ)، والأزابيرون (0.035 ملغم/كغ)، والميدتوميدين (0.04 ملغم/كغ)، الذي يعطى عضليا في عضلات الألوية. - بمجرد أن تصل الدو إلى مستوى من التخدير يسمح بالتعامل المتوافق ، ضعها إما في شغل الظهر أو الجانبي على طاولة الفحص أو داخل حوض V. رفع الرأس والعنق والصدر قليلا (حوالي 20-30 درجة) للحد من خطر قلس وتطلعات محتويات الرضاب وتسهيل التهوية المناسبة أثناء العملية.
ملاحظة: في معظم عنق الرحم أو غيرها من الأنواع المجترة ، يتم إجراء الموجات فوق الصوتية في البطن في الحيوانات الدائمة . ومع ذلك ، فإن صغر الحجم والاعتبارات السلوكية لهذا النوع يتطلب التخدير الثقيل للفحص وتحديد المواقع القصية وبالتالي أكثر صعوبة وقد يحول دون تقنية التصوير الفعالة. قد يكون وضع الحيوان في منتصف الطريق بين شغل المقعدين القصي وال الجانبي مثاليا للحد من خطر قلس وقصور التهوية وينبغي النظر فيه إذا أمكن. في أي موقف recumbent، من الأهمية بمكان أن تراقب بعناية التنفس الحيوانات ووقف الفحص على الفور ووضع الحيوان في شغل المؤخرة إذا لوحظ قلس أو نقص التهوية. - إذا لزم الأمر، قص الشعر من منطقة البطن ليتم فحصها من أجل تحقيق اتصال كاف بين بصمة محول الجلد.
ملاحظة: في بداية الحمل، يمكن الكشف عن دليل الحمل في البطن caudal بالقرب من الغدد الثديية. هذه المنطقة من muntjac عادة بلا شعر ، وبالتالي قد لا يشار إلى الحلاقة في هذا الوقت. كما ينمو الجنين والرحم ينتقص لتحتل موقف أكثر الجمجمة في البطن، وقص الشعر سيكون من الضروري قبل التصوير. يجب توخي الحذر لتجنب التسبب في أي صدمة ميكانيكية في الجلد، بما في ذلك التمزقات من شفرات الحلاقة أو الإصابة الحرارية من المقصات الكهربائية. - ضع وحدة الموجات فوق الصوتية في موقع يسمح للفني بتصور الشاشة بسهولة أثناء إجراء الفحص بيده المهيمنة. إدخال معلومات تعريف الحيوان (الاسم ورقم التعريف وما إلى ذلك)في النظام لتسمية الصور المحفوظة وحلقات الفيديو تلقائيا.
2. فحص الموجات فوق الصوتية التناسلية عبر البدوة
- تطبيق كمية سخية من هلام اقتران الصوتية إلى البطن caudal.
- ضع محول خطي منحني 5-10 ميغاهرتز على جلد البطن الكاودي ، على الفور إلى العانة ، وتحريكه ببطء في اتجاه الجمجمة لتقييم الهياكل داخل تجويف الحوض. مسح الأرباع اليسرى والأيمانية من البطن caudal لتقييم كلا القرنين من الرحم bicornuate muntjac.
ملاحظة: يتضمن التصوير الشامل بالموجات فوق الصوتية في البطن تقييم جميع أحشاء البطن، بما في ذلك الكبد والكلى والطحال والجهاز الهضمي والمثانة البولية والجهاز التناسلي. ولأغراض هذا البروتوكول، لن تناقش سوى دراسة الحمل بالتفصيل؛ ومع ذلك ، ينبغي التعرف على المظهر الطبيعي لأجهزة البطن المسموية الأخرى حيث من المرجح أن تواجه هذه الهياكل أثناء الدراسة. وتشمل الأجهزة الأكثر شيوعا في هذا الموقع أجزاء من الجهاز الهضمي، والمثانة البولية، والمسالك التناسلية. يتم تحديد الأمعاء الكبيرة والصغيرة من خلال مظهر الطبقات المميزة لجدار الأمعاء. قد تكون أو لا تكون واضحة التجويف اعتمادا على نوع وكمية المحتويات، والتي قد تشمل السوائل والغاز والأغشية المخاطية، أو جزيئات الطعام. قد يكون من الصعب تحديد المثانة البولية ما لم يتم تهيؤها بالبول ، وتكون طبقات جدار المثانة أقل تميزا بكثير من طبقات الأمعاء. وبصرف النظر عن الرحم، يمكن أيضا العثور على المبيضين على الموجات فوق الصوتية من الجهاز التناسلي لل muntjac الإناث. سيظهر المبيضان كهياكل بويضة بالقرب من القطب الودود للكلى ، وقد يتغير مظهرهما على مدار الدورة الإسترو. وجود بصيلات ناضجة متعددة مملوءة بالسوائل داخل القشرة يوحي بالحجر.
ملاحظة: من خلال تدوير و / أو "تأجيج" رأس المسح الضوئي للمحول ، يمكن تقييم الهياكل في الطائرات العرضية أو القوسية.- إذا لزم الأمر للتمييز بين الرحم gravid من المثانة البولية، إفراغ المثانة يدويا عن طريق تطبيق ضغط لطيف على البطن caudal أو عن طريق وضع قسطرة البولية وتكرار المسح الضوئي.
ملاحظة: يجب محاولة التعبير اليدوي عن المثانة فقط عندما يكون الحيوان في وضع القص أو المستقيم ، مما يسهل التوجه الطبيعي أكثر لأحشاء البطن ويقلل من خطر الصدمة إلى الهياكل الأخرى. يمكن تمييز الرحم أيضا عن المثانة البولية من خلال تقييم سمك جدار العضو. سمك نموذجي من المثانة منتفخة باعتدال هو ما يقرب من 1.4 ملم24، في حين وجد المؤلفون أن الجدار أكثر العضلات من الرحم gravid في muntjac يقيس عموما بين 7-8 ملم.
ملاحظة: من الصعب تشخيص الحمل المبكر بشكل نهائي بسبب نقص هياكل الجنين التي يمكن التعرف عليها ، وفي الواقع قد يكون أول مؤشر على الحمل ببساطة جيب سائل صغير في البطن. إذا كان ينظر في هذا الوقت، سوف تظهر الجنين النامية كما hyperechoic، ovoid إلى بنية غير متبلور داخل الرحم(الشكل 1).
- إذا لزم الأمر للتمييز بين الرحم gravid من المثانة البولية، إفراغ المثانة يدويا عن طريق تطبيق ضغط لطيف على البطن caudal أو عن طريق وضع قسطرة البولية وتكرار المسح الضوئي.
- إجراء تعديلات على العمق والتردد والكسب حسب الضرورة لتحسين التباين وتفاصيل الصورة.
ملاحظة:ترتبط الترددات الأعلى بأطوال موجية أقصر، وهي ضرورية لتحسين دقة الصورة. معظم محولات قادرة على العمل ضمن مجموعة من الترددات (على سبيل المثال، 6-10 ميغاهيرتز)24. يمكن ضبط التردد باستخدام عناصر التحكم في الماسح الضوئي على وحدة الموجات فوق الصوتية ، وسيؤدي زيادة التردد إلى صورة أوضح. زيادة التردد يقلل في الوقت نفسه من عمق اختراق الموجات الصوتية؛ لذلك، قد يكون تقليل التردد ضروريا لتصور الهياكل الأعمق، ولكن قد يصبح الحل عرضة للخطر24. لهذا السبب من المهم تحديد أعلى تردد ممكن للوصول إلى عمق الأنسجة المطلوب. تعديلات على ضوابط الكسب سوف يغير تضخيم الموجات الصوتية العائدة إلى محول من الأنسجة وتؤثر على درجة التباين في الصورة24. يجب تعيين المكسب إلى نقطة حيث يتم تحقيق التباين الأمثل بين الأنسجة المفرطة التشوة والهيبوتشوك ، وقد تحتاج هذه الإعدادات إلى تعديل اعتمادا على الهياكل التي يتم تصويرها.
3. الحصول على قياسات الجنين
ملاحظة:يمكن تقدير العمر الحملي في العديد من أنواع الحيوانات المنزلية باستخدام نطاقات مرجعية ثابتة لقياسات الجنين التي تم الحصول عليها من الفحص بالموجات فوق الصوتية. وتشمل القياسات الأكثر استخداما طول التاج الردف على التوالي (SCRL)، وعمق الصدر (CD)، وطول الرأس (HL)17. وفي حين أنه لم يتم بعد جمع بيانات كافية لوضع مبادئ توجيهية موثوقة لعمر الحمل في غزال مونتجاك ريفز، يمكن جمع القياسات من أجل البدء في وضع هذه المراجع. وقد تبين أن معدل ضربات قلب الجنين (FHR) في أنواع أخرى من عنق الرحم والمجترة يزداد خطيا مع تقدم الحمل إلى نقطة معينة (عادة حوالي اليوم 60 من الحمل) ، وفي ذلك الوقت يبدأ معدل ضربات القلب في الانخفاض17. يمكن استخدام FHR لتقدير عمر الحمل بالتزامن مع ملاحظات الموجات فوق الصوتية الأخرى ، ومع ذلك فهو أكثر شيوعا كمقياس لحياة الجنين17،24. وقد تم حساب FHR في muntjac ريفز في وقت مبكر من 35 يوما بعد التزاوج لوحظ.
- لقياس SCRL، حدد موقع الرحم على الشاشة وإجراء تعديلات دقيقة على موقف محول حتى يتم الحصول على عرض القوس من الجنين بأكمله(الشكلين 2 و 3). تجميد الصورة وقياس المسافة بين الجانب الأكثر الظهرية من الجمجمة وقاعدة العجز(الشكلين 2 و 3).
- لقياس CD، والحصول على وجهة نظر القوس من الجنين (يمكن استخدام نفس الصورة لقياس SCRL) وقياس المسافة بين الجوانب الظهرية والبطينية من الصدر(الشكلين 2 و 3).
- لقياس HL، وذلك باستخدام نفس عرض القوس من الجنين كما هو موضح لقياسات SCRL وCD، وقياس المسافة من قمة القذالي إلى قاعدة الأنف(الشكلين 2 و 3).
- لحساب معدل ضربات قلب الجنين، حدد القلب داخل تجويف الصدر للجنين من خلال تصور تقلصاته الإيقاعية. حساب معدل ضربات القلب عن طريق حساب عدد الانقباضات (دقات القلب) التي تحدث في غضون فترة دقيقة واحدة من الزمن.
ملاحظة: إذا كانت وحدة الموجات فوق الصوتية المستخدمة لديها قدرات دوبلر، يمكن استخدام هذه الميزة للمساعدة في التمييز بين القلب وحركات الجنين الأخرى غير المحددة. - تحقق من أن جميع الصور المحفوظة وحلقات الفيديو تتضمن جميع المعلومات التعريفية الضرورية، بما في ذلك اسم الحيوان أو رقمه وتاريخه وقياساته وتسميات البنية المناسبة.
4. الاستنتاجات الإجرائية والاسترداد
- إزالة جميع هلام الاتصال بالموجات فوق الصوتية المتبقية من بطن الحيوان باستخدام قطعة قماش ناعمة أو مناشف ورقية. تنظيف الجل من محول قبل التخزين.
- إذا كان استخدام بروتوكول التخدير الموصوف في الخطوة 1.1، إدارة الأتيباميزول تحت الجلد بجرعة 0.25 ملغم/كغ لعكس آثار ميدتوميدين. إذا كان استخدام بروتوكول التخدير المختلفة التي يتوفر فيها خصم، وإدارة هذا العامل إلى الحيوان وفقا لجرعات نشرت في ختام الإجراء لتسريع الانتعاش.
- ضع muntjac على سطح الفراش الناعم في شغل المؤخرة ، مع ارتفاع الرأس قليلا لتقليل خطر قلس وتطلع محتويات الرهم. مراقبة الحيوان عن كثب حتى يتعافى تماما وقادرة على التجول حول الضميمة دون مساعدة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
باستخدام البروتوكول الموصوف هنا ، يمكن تشخيص الحمل ورصده في غزال مونتجاك في ريف باستخدام تقنيات طفيفة التوغل. وكانت أقرب نقطة زمنية يمكن أن يكتشفها المؤلفون عن الحمل هي حوالي 35 يوما بعد سلوك التزاوج الملاحظ.
في المراحل المبكرة من الحمل، تم تشخيص الحمل من خلال تصور رحم مملوء بالسوائل تم تحديده كمساحة أنشوائية في البطن المسد. داخل الرحم ، ظهر الجنين النامي كبنية مفرطة التشوة ، بويضة مع ميزات قليلة يمكن التعرف عليها (الشكل 1). ومع تقدم الحمل، أصبحت هياكل الجنين واضحة ويمكن إجراء تشخيص قاطع بعد ملاحظة تمعدن الهيكل العظمي ونبض قلب الجنين(الشكلان 2 و3).
يمكن الحصول على قياسات الجنين واستخدامها لوضع مبادئ توجيهية مرجعية لتقدير عمر الحمل في الحالات التي لا يعرف فيها تاريخ تكاثر دقيق، على الرغم من أننا لم نطور هذا النظام بالكامل بعد في المونتجاك. طول التاج المستقيم (SCRL) وHL وCD هي قياسات الجنين القياسية التي تستخدم عادة لتقدير عمر الجنين في العديد من الأنواع17، وتم الحصول على هذه القياسات من الصور بالموجات فوق الصوتية لحمل muntjac باستخدام البروتوكول الموصوف هنا. ويمكن الحصول على كل ثلاثة من هذه القياسات من نفس الصورة القوس وضعه بشكل صحيح(الشكلين 2 و 3)،ولكن يمكن استخدام صور منفصلة إذا كان الجنين بأكمله غير قادر على التقاطها في عرض القوس واحد. وفي المستقبل، يمكن استخدام هذه التقنيات أيضا لتحديد الاختلافات في النمو والتطور التي لوحظت في ظل ظروف تجريبية مختلفة ولتحديد قابلية الجنين للحياة.
الشكل 1 - الأرقام 1- الأرقام 1 صورة بالموجات فوق الصوتية تظهر الحمل المبكر في الغزلان muntjac ريفز. وقد تم إيواء دو في هذه الدراسة مع muntjac الذكور سليمة لمدة 46 يوما، ولكن لا يعرف تاريخ تربية بالضبط. لا يمكن تمييز ملامح الجنين في هذه المرحلة من الحمل.
الشكل 2 - الأرقام 2- الأرقام التي تم صورة بالموجات فوق الصوتية لنفس الحمل الموضحة في الشكل 1، بعد 91 يوما من إدخال الزى الزخرفة إلى الباك. (CD - عمق الصدر، HL - طول الرأس، P - المشيمة، SCRL - طول التاج الردف على التوالي).
الشكل 3 - الأرقام 3- الأرقام التي يمكن أن صورة بالموجات فوق الصوتية للحمل الثاني تظهر تحديد المواقع المناسبة للحصول على قياسات الجنين. الصورة التي اتخذت 91 يوما بعد إدخال دو إلى باك. (CD - عمق الصدر، HL - طول الرأس، P - المشيمة، SCRL - طول التاج الردف على التوالي).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
يصف هذا البروتوكول تطبيق التصوير فوق السونوغرافيا عبر البدوية لتشخيص الحمل في غزال مونتجاك ريفز. بما يتفق مع دراسات الموجات فوق الصوتية الأخرى ، والمعدات المناسبة والكفاءة التقنية أمر حتمي لإجراء فحص إنجابي ناجح للجوه muntjac. ستساعد المراجعة الدقيقة لتشريح الثدييات الأساسي ، والمبادئ الفيزيائية للموجات فوق الصوتية التشخيصية ، والمظهر التجاوزي النموذجي لأحشاء البطن في الحد من التشخيصات الخاطئة. وعلاوة على ذلك، فإن اختيار محولات مناسبة والإلمام بالأجهزة وضوابط الماسح الضوئي أمر بالغ الأهمية للحصول على صور عالية الجودة وتفسير دقيق.
بالنسبة للعديد من الأقمار الدقيقة عديمي الخبرة ، فإن القطع الأثرية التصويرية هي سبب شائع لضعف دقة الصورة والتقييم غير الدقيق للهياكل. يتردد صداها في واجهة الجلد محول هي واحدة من القطع الأثرية الأكثر شيوعا واجه في الموجات فوق الصوتية البطن البيطرية، ويمكن أن تخفض بشكل كبير عن طريق القضاء على وجود الغاز بين السطحين. إزالة الشعر الكافية والتطبيق السخي من هلام الصوتية على الجلد ينبغي أن تكون كافية للحد من تأثير هذه القطعة الأثرية. ويمكن الاطلاع على مناقشات القطع الأثرية التصوير الأخرى في نصوص مختلفة من التصوير فوق السونوغرافيا البشرية والبيطرية، وبالتالي لن تناقش بمزيد من التفصيل هنا؛ ومع ذلك ، فإن المعرفة العامة لهذه الظواهر تسمح للسونوغرافي الفائق للسيطرة عليها بشكل أكثر فعالية24.
إذا كان إجراء فحص الإنجاب، ينبغي أن يكون مفهوما أن الرحم قد يكون من الصعب تصور في طبيعي، غير الأم. في الحمل المبكر ، قد يصبح تجويف الرحم قابلا للتحديد كمساح نقص التشوه إلى الأنشوجة كما يتشكل الكيس الحملي. في هذه المرحلة في المونتجاك، يمكن العثور على الرحم عادة عن طريق المسح الضوئي على مستوى الغدد الثديية أو caudal قليلا لها. قبل تمعدن الهيكل العظمي أو ظهور نبضات قلب الجنين ، قد يكون الحمل مشخصا بشكل خاطئ في وجود حالات إنجابية أخرى تسبب تراكم السوائل في الرحم ، والتي قد تشمل أمراضا مثل pyometra أو hydrometra أو mucometra. يجب إجراء التشخيص بالموجات فوق الصوتية بالتزامن مع تقييم سريري كامل للحيوان قبل التخدير لهذا الإجراء. في وقت مبكر من الحمل ، سيظهر المفهوم كبنية كروية إلى بيضاوية ، مفرطة التشوة داخل الكيس السلوي. ولا تتميز نقاط زمنية تنموية محددة بشكل جيد في هذا النوع؛ ومع ذلك، يبدو أن تمعدن الهيكل العظمي وحركة قلب الجنين يمكن اكتشافها باستمرار في حوالي 8 أسابيع بعد التزاوج.
في ظل الظروف المثالية، يمكن أن تكون الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية أداة مفيدة بشكل لا يصدق لتقييم الهياكل الإنجابية في العديد من الأنواع، بما في ذلك مونتجاك ريفز. ومع ذلك، تعتمد قيمة هذه التقنية بشكل كبير على القدرات المحددة للمرافق السكنية للحيوانات. على عكس الآليات الأكثر سلبية للكشف عن الحمل ، مثل الملاحظة البصرية لسلوك التزاوج وانتفاخ البطن اللاحق للصامي ، تتطلب الموجات فوق الصوتية ضبط النفس البدني و / أو الكيميائي للحيوان لفترة من الوقت تستمر من 5-10 دقائق أو أكثر. في العديد من المرافق، وهذا غير ممكن أو عملي، وضرورة الفحص ينبغي النظر فيها على أساس الأهداف المحددة للدراسة. بالإضافة إلى ذلك ، قد تشير بعض الحالات الفسيولوجية أو المرضية إلى أن التصوير فوق السونوغرافيا بطلان في بعض الحيوانات بسبب الآثار الضارة المحتملة للضائقة المتعلقة بالالتقاط والتخدير. من المهم تقييم مدى ملاءمة كل لفحص الموجات فوق الصوتية قبل بدء الدراسة ، ويجب استشارة الطبيب البيطري في مراحل التخطيط لهذه المشاريع.
الممارسات الحالية للكشف عن الحمل في مونتجاك ريفز وغيرها من أنواع الحياة البرية عادة ما تكون سلبية في الطبيعة (مراقبة سلوك التزاوج وانتفاخ البطن في لا). يمكن قياس البروجسترون المصل أو مستويات البروتين السكري المرتبطة بالحمل لتأكيد التشخيص18,25، ولكن نتائج هذه المقايسات لا توفر أي معلومات بشأن مرحلة الحمل أو صلاحية الجنين. الموجات فوق الصوتية يقدم الاستفادة من السماح في الوقت الحقيقي تقييم الحالة الإنجابية بدقة مماثلة أو أكبر من أن من هرمون المصل المقايسات18، مع الحفاظ على الحد الأدنى من الغازية والضيق للحيوانات. في العمليات التي يكون فيها تاريخ التكاثر صعبا أو مستحيلا تحديده ، قد توفر الموجات فوق الصوتية آلية أكثر دقة لتقدير مرحلة الحمل من المقايسات الهرمونية ، حتى في غياب جداول الحمل المنشورة. وعلاوة على ذلك، يبدو أن التقييد البدني والكيميائي لفحص الموجات فوق الصوتية يسبب الحد الأدنى من الضيق ل muntjac صحية ويوفر فرصة مثالية لإجراء فحص بدني شامل وجمع عينات إضافية (الدم والبول، وما إلى ذلك)لتقييم الصحة العامة.
وقد تم تحديد تقدير العمر الحملي من خلال القياسات فائقة السونوغرافيا في العديد من الأنواع، بما في ذلكالماشية 1،الأغنام2،3،الماعز4،والخيول5،وقد وصفت في عدد محدود من أنواع عنق الرحم وكذلك8-19. في غياب تواريخ التكاثر الدقيقة أو جداول الحمل المعمول بها ، لا يمكن تقدير عمر الجنين من muntjac ريفز فقط تقريبا على أساس معايير نمو الجنين المبينة لأنواع أخرى. هدف محدد من العمل الموصوف هنا هو وضع مبادئ توجيهية أكثر رسمية لشيخوخة الجنين في هذا النوع. مع وجود بيانات معيارية كافية، ستشمل التطبيقات المستقبلية للتصوير فوق السونوغرافيا في هذه المستعمرة تحديد التشوهات في نمو الجنين في وجود متغيرات تجريبية مختلفة وتقييم قابلية الجنين للحياة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن تحديد حساسية وخصوصية الموجات فوق الصوتية عبر الموجات فوق الصوتية ومقارنتها بالآليات الأخرى المستخدمة بشكل شائع للكشف عن الحمل في أنواع عنق الرحم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.
Acknowledgments
ويود المؤلفان أن يشكرا جانيت هايز - كلوج وكيلي أندرسون على إدارة مستعمرة مونتجاك، والدكتور آلان يونغ على تعريفنا على مونتجاك والسيد كليف تيدفورد من شركة سيرفيد سوليوشنز على توفير بذور مونتجاك لهذا المشروع. تم دعم هذا العمل من قبل منحة المعاهد القومية للصحة R01AI093634.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 2nd edition, Saunders. Philadelphia. 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
