Summary
ट्रांसाडोमिनल अल्ट्रासाउंड को रीव्स के मुंतजाक हिरण में प्रजनन स्थिति का आकलन करने के लिए एक प्रभावी, गैर-निवास साधन के रूप में वर्णित किया गया है। इन तरीकों का उपयोग प्रारंभिक गर्भावस्था निदान प्राप्त करने और भ्रूण व्यवहार्यता का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है। इस तकनीक के भविष्य के अनुप्रयोगों में गर्भावधि आयु और भ्रूण के विकास पर मातृ रोग के प्रभावों का अनुमान शामिल है।
Abstract
रीव्स ' मुंटजाक हिरण(मुंटिकस रीव्सी)दक्षिण पूर्व एशिया के मूल निवासी एक छोटे सेरविद प्रजातियां हैं, और वर्तमान में प्रियोन रोग संचरण और रोगजनन के संभावित मॉडल के रूप में जांच की जा रही है । ऊर्ध्वाधर संचरण प्रिन रोग सहित संक्रामक रोगों का अध्ययन करने वाले शोधकर्ताओं के बीच रुचि का एक क्षेत्र है, और इन जांचों के प्रजनन प्रदर्शन पर मातृ संक्रमण के प्रभावों का मूल्यांकन करने के लिए कुशल तरीकों की आवश्यकता होती है । अल्ट्रासोग्राफिक परीक्षा गर्भावस्था के निदान और कई जानवरों की प्रजातियों1-7में भ्रूण के स्वास्थ्य का आकलन करने के लिए एक अच्छी तरह से स्थापित उपकरण है, जिसमें खेत वाले cervids8-19की कई प्रजातियां शामिल हैं, हालांकि रीव्स के मुंटजाक हिरण में इस तकनीक का वर्णन नहीं किया गया है। यहां हम मुंतजाक में गर्भावस्था का पता लगाने और गर्भावधि अवधि में भ्रूण के विकास और विकास का मूल्यांकन करने के लिए ट्रांसाडोमिनल अल्ट्रासाउंड के आवेदन का वर्णन करते हैं। इस प्रक्रिया का उपयोग करके, गर्भवती जानवरों को डो-बक पेयरिंग के बाद 35 दिनों के रूप में पहचाना गया था और यह नियमित अंतराल पर गर्भावस्था की सुरक्षित रूप से निगरानी करने का एक प्रभावी साधन था। इस कार्य के भविष्य के लक्ष्यों में गर्भावधि आयु के अनुमान के लिए सामान्य भ्रूण माप संदर्भ स्थापित करना, गर्भावधि के विभिन्न चरणों में गर्भावस्था के निदान के लिए तकनीक की संवेदनशीलता और विशिष्टता का निर्धारण करना और विभिन्न प्रायोगिक परिस्थितियों में भ्रूण के विकास और विकास में भिन्नता की पहचान करना शामिल होगा ।
Introduction
अल्ट्रासोनोग्राफिक परीक्षा पशु 1, भेड़2,3,बकरियों4,घोड़ों5,साथी जानवरों6,7,और अन्य घरेलू जानवरों प्रजातियों में गर्भावस्था निदान की एक अच्छी तरह से वर्णित विधि है। इस इमेजिंग तौर-तरीके को कैप्टिव सर्वविदों की कई प्रजातियों में गर्भावस्था का पता लगाने और भ्रूण आयु अनुमान के लिए एक मूल्यवान उपकरण के रूप में भी पहचाना गया है, जिसमें परती हिरण8-11,लाल हिरण12-16,होक्काइडो सिका हिरण17और हिरन18,19शामिल हैं। कई मामलों में, अल्ट्रासोनोग्राफी ने गर्भावस्था का पता लगाने के अन्य तंत्रों की तुलना में उच्च सटीकता दरों का उत्पादन किया है, जैसे सीरम प्रोजेस्टेरोन या गर्भावस्था से जुड़े ग्लाइकोप्रोटीन विश्लेषण9,18। इसके अलावा, प्रजनन पथ का अल्ट्रासोग्राफिक दृश्य भ्रूण व्यवहार्यता, गर्भावधि आयु और विकासात्मक असामान्यताओं की पहचान के बारे में अतिरिक्त जानकारी प्रदान कर सकता है जिसका आकलन करना अन्यथा मुश्किल होगा। प्रजनन स्थिति के मूल्यांकन के लिए अल्ट्रासोनोग्राफी की उपयोगिता से पता चलता है कि इस पद्धति को अन्य प्रजातियों के लिए अनुकूलित किया जाना चाहिए जिसमें सक्रिय प्रजनन कार्यक्रमों का उपयोग किया जाता है।
रीव्स के मुंटजाक हिरण(मुंटिकस रीव्सी)दक्षिण पूर्व एशिया20के मूल निवासी एक छोटे सेरविद प्रजाति हैं । जबकि इन जानवरों के प्रजनन चक्र को उनके मूल क्षेत्रों में अच्छी तरह से विशेषता नहीं है, दक्षिणी इंग्लैंड के कुछ हिस्सों में जंगली आबादी के अध्ययनों ने उनके प्रजनन पैटर्न20की समझ में सुधार किया है। सबसे cervids के विपरीत, रीव्स ' muntjac साल के दौर नस्ल के लिए दिखाई देते हैं, कोई स्पष्ट मौसमी चापलूस चोटियों20-22के साथ । महिला मुंतजाक आम तौर पर 210 दिन की गर्भकाल के बाद एक ही हलके को जन्म देती है, और मज़बूती से 24 घंटे20-22के भीतर एक पोस्टपार्टम एस्ट्रस दर्ज करें। क्या यह इस प्रसवोत्तर काल के दौरान गर्भ धारण नहीं करता है, लगभग 24-25 दिन बाद20बजे एस्ट्रोस में लौट आएगा । कैप्टिव स्थितियों में, प्रजनन आमतौर पर आवास द्वारा प्राप्त किया जाता है जो एक या अधिक बरकरार पुरुष के साथ होता है। इस प्रणाली संतोषजनक गर्भाधान दरों का उत्पादन और कर्मियों के लिए थोड़ा तकनीकी कौशल की आवश्यकता है, लेकिन सटीक प्रजनन तिथियां मुश्किल हैं, नहीं तो असंभव है, निर्धारित करने के लिए ।
मुंतजाक का उपयोग आमतौर पर साइटोजेनेटिक अध्ययनों में किया जाता है क्योंकि विभिन्न प्रजातियों में डिप्लॉयड गुणसूत्र संख्या और कायोयटिपिक विविधीकरण की उच्च दर के कारण23। इन जानवरों को भी वर्तमान में prion रोग रोग रोगजनन और संचरण के एक मॉडल के रूप में जांच की जा रही है, विशेष रुचि के साथ cervids में पुरानी बर्बाद कर रोग (CWD) के ऊर्ध्वाधर संचरण के अध्ययन पर रखा । कई विभिन्न अनुसंधान अनुप्रयोगों में मुंतजक के महत्व से पता चलता है कि वर्तमान जांच प्रक्रियाओं के पूरक के लिए बेहतर प्रजनन प्रौद्योगिकियों की स्थापना की जानी चाहिए । विशेष रूप से, गर्भावधि अवधि का आकलन करने के लिए गैर-विकास तंत्र संभावित रूप से विभिन्न प्रायोगिक परिस्थितियों में प्रजनन प्रदर्शन और भ्रूण विकास और विकास में महत्वपूर्ण विविधताओं को स्पष्ट कर सकते हैं। इसके अलावा, वास्तविक समय भ्रूण माप संदर्भों के विकास संभावित स्थितियों में गर्भावधि उंर का आकलन करने में मूल्यवान होगा, जहां प्रजनन तिथियां निर्धारित नहीं किया जा सकता है । पिछले अध्ययनों में भ्रूण माप का उपयोग करने के लिए तंत्र का वर्णन किया गया है, जैसे क्राउन-दुम लंबाई (सीआरएल), छाती की गहराई (सीडी), और सिर की लंबाई (एचएल) सेर्विड प्रजातियों में गर्भ के अनुमानित चरण का अनुमान लगाने के लिए11-14, 16,17। इसके अतिरिक्त, इनमें से कुछ अध्ययनों ने यह बताते हुए दिशा-निर्देश भी स्थापित किए हैं कि कंकाल खनिजीकरण या भ्रूण की धड़कन जैसे विशिष्ट विकासात्मक मील के पत्थर8-19की पहचान की जा सकती है । हालांकि ये डेटा मुंतजाक में प्रजनन अल्ट्रासाउंड विश्लेषण का मार्गदर्शन करने में मदद करने के लिए उपयोगी हो सकते हैं, अध्ययन की गई अधिकांश अन्य सर्विड प्रजातियों में शरीर का आकार बहुत बड़ा होता है और लंबे समय तक गर्भावधि होती है, जिससे मुंटजैक अनुप्रयोगों के लिए इन अध्ययनों के अनुवादात्मक मूल्य को कम किया जाता है।
यहां उल्लिखित प्रोटोकॉल गर्भावस्था के निदान और निगरानी के प्रयोजनों के लिए मादा मुंतजाक की ट्रांसाडोमिनल अल्ट्रासोनोग्राफी का वर्णन करता है। इस प्रोटोकॉल के सफल निष्पादन से भ्रूण के विकास और विकास के प्रारंभिक गर्भावस्था का पता लगाने और मूल्यांकन की सुविधा मिल सकती है । इस तकनीक में प्रजनन की जांच करने वाले अध्ययनों के संचालन में मूल्यवान अनुप्रयोग हैं, गर्भाशय विकास में, या एक छोटे सेरविद मॉडल में संक्रामक रोगों का ऊर्ध्वाधर संचरण और कैप्टिव प्रजनन अभियानों में नैदानिक उद्देश्यों के लिए भी उपयोगी हो सकता है।
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Protocol
1. प्रक्रियात्मक तैयारी
वर्णित सभी पशु प्रक्रियाओं की समीक्षा की गई है और कोलोराडो राज्य विश्वविद्यालय, मूल्यांकन और प्रयोगशाला पशु देखभाल (AAALAC), Intl. मांयता प्राप्त संस्था के प्रत्यायन के लिए एक एसोसिएशन में संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है ।
- परीक्षा से पहले, छूट प्रदान करने और उचित स्थिति के लिए अनुमति देने के लिए उपयुक्त गति या संज्ञाहरण प्रोटोकॉल का उपयोग करके जानवरों को स्थिर करें। एक संचालक हिरण को नियंत्रित करता है जबकि एक दूसरा व्यक्ति जानवर को सेनिटेशन का संचालन करता है ।
नोट: लेखकों को इस प्रजाति में प्रभावी सेडेशन प्रदान करने के लिए निम्नलिखित संयोजन मिला है: बुटोफेनॉल (0.45 मिलीग्राम/किलो), एजापेरोन (0.035 मिलीग्राम/किलो), और मेडेटोमिडीन (0.04 मिलीग्राम/किलो), ग्लूटियल मांसपेशियों में इंट्रामस्कुलर रूप से प्रशासित। - एक बार डो sedation के एक विमान है कि आज्ञाकारी हैंडलिंग के लिए अनुमति देता है पहुंच गया है, उसे या तो पृष्ठीय या पार्श्व प्रतिन्यूबेंसी में एक परीक्षा तालिका पर या एक वी गर्त के भीतर स्थिति । रूमेनल सामग्री के पुनरुत्थान और आकांक्षा के जोखिम को कम करने और प्रक्रिया के दौरान उचित वेंटिलेशन की सुविधा के लिए सिर, गर्दन और छाती को थोड़ा (लगभग 20-30 डिग्री) ऊंचा करें।
नोट: अधिकांश सर्वविदों या अन्य जुगाली प्रजातियों में, पेट अल्ट्रासाउंड खड़े जानवरों में किया जाता है; हालांकि, इस प्रजाति के छोटे आकार और व्यवहार विचारों को परीक्षा के लिए भारी सेडेशन की आवश्यकता होती है और स्टर्नल पोजिशनिंग इसलिए अधिक कठिन है और प्रभावी इमेजिंग तकनीक को बाधित कर सकती है। स्टर्नल और पार्श्व प्रतिनम्बेंसी के बीच पशु मिडवे को पोजिशनिंग पुनर्जन्म और हाइपोवेंटिलेशन के जोखिम को कम करने के लिए आदर्श हो सकता है और यदि संभव हो तो इस पर विचार किया जाना चाहिए। किसी भी अनुघव स्थिति में, जानवरों के श्वसनों की सावधानीपूर्वक निगरानी करना और तुरंत परीक्षा को रोकना और पशु को यदि पुनरुत्थान या हाइपोवेंटिलेशन नोट किया जाता है तो उसे स्टर्नल रेक्यूम्बेंसी में रखना महत्वपूर्ण है। - यदि आवश्यक हो, तो ट्रांसड्यूसर और त्वचा के पदचिह्न के बीच पर्याप्त संपर्क प्राप्त करने के लिए पेट के क्षेत्र से बालों को क्लिप करें।
नोट: प्रारंभिक गर्भावस्था में, स्तन ग्रंथियों के पास कौडल पेट में गर्भावस्था के सबूतों का पता लगाया जा सकता है। मुंटजाक का यह क्षेत्र आम तौर पर बाल रहित होता है, और इसलिए शेविंग इस समय इंगित नहीं की जा सकती है। जैसे-जैसे भ्रूण बढ़ता है और गर्भाशय पेट में अधिक कपाल स्थिति पर कब्जा करने के लिए डिटेंड करता है, इमेजिंग से पहले बालों की कतरन आवश्यक होगी। त्वचा के लिए किसी भी यांत्रिक आघात के कारण से बचने के लिए देखभाल की जानी चाहिए, जिसमें रेजर ब्लेड या विद्युत कतरनी से थर्मल चोट से कमियां शामिल हैं। - अल्ट्रासाउंड इकाई को एक स्थान में रखें जो तकनीशियन को अपने प्रमुख हाथ से परीक्षा आयोजित करते समय आसानी से मॉनिटर की कल्पना करने की अनुमति देता है। सहेजे गए चित्रों और वीडियो लूप को स्वचालित रूप से लेबल करने के लिए सिस्टम में इनपुट पशु पहचान जानकारी (नाम, पहचान संख्या, आदि)।
2. ट्रांसाडोमिनल प्रजनन अल्ट्रासाउंड परीक्षा
- कौडल पेट में ध्वनिक युग्मन जेल की उदार मात्रा लागू करें।
- कौडल पेट की त्वचा पर 5-10 मेगाहर्ट्ज घुमावदार रैखिक ट्रांसड्यूसर रखें, तुरंत प्यूबिस के कपाल करें, और पेल्विक गुहा के भीतर संरचनाओं का मूल्यांकन करने के लिए इसे धीरे-धीरे कपाल दिशा में ले जाएं। मुंतजक के बाइकॉर्नुएट गर्भाशय के दोनों सींगों का आकलन करने के लिए कौडल पेट के बाएं और दाएं क्वाड्रंट्स को स्कैन करें।
नोट: व्यापक पेट अल्ट्रासाउंड जिगर, गुर्दे, तिल्ली, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट, मूत्राशय, और प्रजनन पथ सहित सभी पेट विसेरा का आकलन शामिल है। इस प्रोटोकॉल के प्रयोजनों के लिए, केवल गर्भावस्था की परीक्षा पर विस्तार से चर्चा की जाएगी; हालांकि, अन्य कौडल उदर अंगों की सामान्य उपस्थिति को पहचाना जाना चाहिए क्योंकि अध्ययन के दौरान इन संरचनाओं का सामना करने की संभावना है। इस स्थान में आमतौर पर देखे जाने वाले अंगों में गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट, मूत्राशय और प्रजनन पथ के खंड शामिल हैं। बड़ी और छोटी आंतों को आंतों की दीवार की विशेषता स्तरित उपस्थिति से पहचाना जाता है। ल्यूमेन को सामग्री के प्रकार और मात्रा के आधार पर स्पष्ट किया जा सकता है या नहीं किया जा सकता है, जिसमें तरल पदार्थ, गैस, म्यूकस या खाद्य कण शामिल हो सकते हैं। मूत्राशय की पहचान करना मुश्किल हो सकता है जब तक कि मूत्र के साथ डिस्टर्ब न हो, और मूत्राशय की दीवार की परतें आंतों की तुलना में काफी कम अलग हैं। गर्भाशय के अलावा, अंडाशय मादा मुंतजाक के प्रजनन पथ के अल्ट्रासाउंड पर भी पाया जा सकता है। अंडाशय गुर्दे के कौडल ध्रुव के पास ओवोइड संरचनाओं के रूप में दिखाई देगा, और एस्ट्रोस चक्र के दौरान उनकी उपस्थिति बदल सकती है। कॉर्टेक्स के भीतर कई परिपक्व, तरल पदार्थ से भरे रोम की उपस्थिति एस्ट्रस का विचारोत्तेजक है।
नोट: ट्रांसड्यूसर के स्कैनहेड को घुमाने और/या "हवा" करके, संरचनाओं का मूल्यांकन ट्रांसवर्स या धनु विमानों में किया जा सकता है ।- यदि मूत्राशय से ग्रेविड गर्भाशय को अलग करने की आवश्यकता हो, तो मूत्राशय को मैन्युअल रूप से खाली कर दें, कौडल पेट में कोमल दबाव लागू करके या मूत्र कैथेटर रखकर और स्कैन को दोहराकर।
नोट: मूत्राशय की मैन्युअल अभिव्यक्ति केवल तभी प्रयास की जानी चाहिए जब जानवर एक स्टर्नल या ईमानदार स्थिति में हो, जो पेट के आंत के अधिक प्राकृतिक अभिविन्यास की सुविधा प्रदान करता है और अन्य संरचनाओं के लिए आघात के जोखिम को कम करता है। अंग की दीवार की मोटाई का आकलन करके गर्भाशय को मूत्राशय से भी अलग किया जा सकता है। एक मामूली रूप से डिटेन्ड मूत्राशय की विशिष्ट मोटाई लगभग 1.4मिमी 24है, जबकि लेखकों ने पाया है कि मुंटजाक में ग्रेविड गर्भाशय की अधिक मांसपेशियों की दीवार आम तौर पर 7-8 मिमी के बीच उपाय करता है।
नोट: प्रारंभिक गर्भावस्था निश्चित रूप से पहचाने जाने योग्य भ्रूण संरचनाओं की कमी के कारण निदान करना मुश्किल है, और वास्तव में गर्भावस्था का पहला संकेत कौडल पेट में एक छोटा सा तरल पदार्थ जेब हो सकता है। यदि इस समय देखा जाए, तो विकासशील भ्रूण गर्भाशय(चित्र 1)के भीतर असंगत संरचना के लिए हाइपरकोइक, ओवोइड के रूप में दिखाई देगा।
- यदि मूत्राशय से ग्रेविड गर्भाशय को अलग करने की आवश्यकता हो, तो मूत्राशय को मैन्युअल रूप से खाली कर दें, कौडल पेट में कोमल दबाव लागू करके या मूत्र कैथेटर रखकर और स्कैन को दोहराकर।
- गहराई, आवृत्ति के लिए समायोजन करें, और इसके विपरीत और छवि विस्तार में सुधार करने के लिए आवश्यक लाभ के रूप में लाभ ।
नोट:उच्च आवृत्तियों छोटे तरंगदैर्ध्य के साथ जुड़े रहे हैं, जो बेहतर छवि संकल्प के लिए आवश्यक हैं । अधिकांश ट्रांसड्यूसर आवृत्तियों (उदाहरण के लिए, 6-10 मेगाहर्ट्ज)24की एक श्रृंखला के भीतर काम करने में सक्षम हैं। अल्ट्रासाउंड इकाई पर स्कैनर नियंत्रण का उपयोग करके आवृत्ति को समायोजित किया जा सकता है, और बढ़ती आवृत्ति के परिणामस्वरूप एक स्पष्ट छवि होगी। बढ़ती आवृत्ति समवर्ती ध्वनि तरंग प्रवेश की गहराई को कम कर देता है; इसलिए, आवृत्ति को कम करने के लिए गहरी संरचनाओं कल्पना आवश्यक हो सकता है, लेकिन संकल्प24समझौता हो सकता है . इस कारण से वांछित ऊतक गहराई तक पहुंचने के लिए उच्चतम आवृत्ति का चयन करना महत्वपूर्ण है। लाभ नियंत्रणों में समायोजन से ऊतकों से ट्रांसड्यूसर में लौटने वाली ध्वनि तरंगों का प्रवर्धन बदल जाएगा और छवि24में इसके विपरीत की मात्रा को प्रभावित करेगा । लाभ को एक बिंदु पर सेट किया जाना चाहिए जहां हाइपरकोइक और हाइपोइकोइक ऊतकों के बीच इष्टतम विपरीत हासिल किया जाता है, और इन सेटिंग्स को छवि की जा रही संरचनाओं के आधार पर समायोजित करने की आवश्यकता हो सकती है।
3. भ्रूण माप प्राप्त करना
नोट:अल्ट्रासाउंड परीक्षा से प्राप्त भ्रूण मापन के लिए स्थापित संदर्भ श्रेणियों का उपयोग करके कई घरेलू पशु प्रजातियों में गर्भावधि आयु का अनुमान लगाया जा सकता है। सबसे अधिक उपयोग किए जाने वाले मापों में सीधे क्राउन-दुम लंबाई (एससीआरएल), छाती की गहराई (सीडी), और सिर की लंबाई (एचएल)17शामिल हैं। हालांकि रीव्स के मुंतजाक हिरण में विश्वसनीय गर्भावधि आयु दिशानिर्देश विकसित करने के लिए अभी तक पर्याप्त डेटा एकत्र नहीं किया गया है, इन संदर्भों की स्थापना शुरू करने के लिए माप एकत्र किए जा सकते हैं । भ्रूण हृदय गति (एफएचआर) को सेर्विड और जुगाली करने की अन्य प्रजातियों में दिखाया गया है क्योंकि गर्भधारण एक निश्चित बिंदु तक बढ़ता है (आमतौर पर गर्भ के दिन 60 के आसपास), जिस समय हृदय गति17कम होना शुरू होती है। एफएचआर का उपयोग अन्य अल्ट्रासाउंड टिप्पणियों के साथ गर्भावधि आयु का अनुमान लगाने के लिए किया जा सकता है, हालांकि इसका उपयोग आमतौर पर भ्रूण व्यवहार्यता17,24के उपाय के रूप में किया जाता है। FHR रीव्स ' muntjac में ३५ दिनों के बाद मनाया संभोग के रूप में जल्दी की गणना की गई है ।
- एससीआरएल को मापने के लिए, मॉनिटर पर गर्भाशय का पता लगाएं और ट्रांसड्यूसर की स्थिति में ठीक समायोजन करें जब तक कि पूरे भ्रूण का एक शिथिल दृश्य प्राप्त न हो जाए(आंकड़े 2 और 3)। छवि को फ्रीज करें और खोपड़ी के सबसे पृष्ठीय पहलू और सैक्रम(आंकड़े 2 और 3)के आधार के बीच की दूरी को मापें।
- सीडी को मापने के लिए, भ्रूण का एक sagittal दृश्य प्राप्त करें (एससीआरएल को मापने के लिए एक ही छवि का उपयोग किया जा सकता है) और छाती(आंकड़े 2 और 3)के पृष्ठीय और वेंट्रल पहलुओं के बीच की दूरी को मापने के लिए।
- एचएल को मापने के लिए, एसआरएल और सीडी मापन के लिए वर्णित भ्रूण के समान शिथिल दृश्य का उपयोग करके, ओसिपिटल क्रेस्ट से नाक के आधार(आंकड़े 2 और 3)तक की दूरी को मापें।
- भ्रूण हृदय गति की गणना करने के लिए, अपने लयबद्ध संकुचन की कल्पना करके भ्रूण के वक्ष गुहा के भीतर दिल की पहचान करें। 1 मिनट की अवधि के भीतर होने वाले संकुचन (दिल की धड़कन) की संख्या की गणना करके हृदय गति की गणना करें।
नोट: यदि अल्ट्रासाउंड इकाई का उपयोग किया जा रहा है डॉप्लर क्षमताओं है, इस सुविधा को आगे अंय गैर विशिष्ट भ्रूण आंदोलनों से दिल भेद में सहायता करने के लिए नियोजित किया जा सकता है । - सत्यापित करें कि सभी सहेजे गए चित्रों और वीडियो लूप में जानवरों का नाम या संख्या, तिथि, माप और उचित संरचना लेबल सहित सभी आवश्यक पहचान जानकारी शामिल हैं।
4. प्रक्रियात्मक निष्कर्ष और वसूली
- एक नरम कपड़े या कागज तौलिए का उपयोग कर जानवर के पेट से सभी अवशिष्ट अल्ट्रासाउंड संपर्क जेल निकालें। भंडारण से पहले ट्रांसड्यूसर से जेल को साफ करें।
- यदि चरण 1.1 में वर्णित सेडेशन प्रोटोकॉल का उपयोग करते हुए, मेडिटोमीडीन के प्रभाव को रिवर्स करने के लिए 0.25 मिलीग्राम/किलोग्राम की खुराक पर atipamezole को कम से कम प्रशासित करें। यदि एक अलग सेडेशन प्रोटोकॉल का उपयोग करते हैं जिसमें एक विरोधी उपलब्ध है, तो वसूली की गति के लिए प्रक्रिया के समापन पर प्रकाशित खुराकों के अनुसार इस एजेंट को जानवर को प्रशासित करें।
- मुंटजाक को एक नरम बिस्तरों वाली सतह पर स्टर्नल रेक्यूम्बेंसी में रखें, जिसमें सिर थोड़ा ऊंचा होता है ताकि रीग्रेगेशन और रुमेनल सामग्री की आकांक्षा के जोखिम को कम किया जा सके। पूरी तरह से बरामद होने तक जानवर की बारीकी से निगरानी करें और सहायता के बिना बाड़े के चारों ओर एम्बुलेट करने में सक्षम न हो जाएं।
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Representative Results
यहां वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग करके, गर्भावस्था का निदान और न्यूनतम आक्रामक तकनीकों के साथ रीव के मुंतजाक हिरण में निगरानी की जा सकती है। सबसे शुरुआती समय बिंदु है कि गर्भावस्था लेखकों द्वारा पता लगाया जा सकता है लगभग ३५ दिनों के बाद मनाया संभोग व्यवहार था ।
गर्भ के शुरुआती दौर में, गर्भावस्था का निदान एक तरल पदार्थ से भरे गर्भाशय की कल्पना करके किया गया था जो कौडल पेट में एक एनेकोइक स्पेस के रूप में पहचाना जाता है। गर्भाशय के भीतर, विकासशील भ्रूण कुछ पहचान योग्य विशेषताओं(चित्रा 1)के साथ हाइपरकोइक, ओवोइड संरचना के रूप में दिखाई दिया। जैसे-जैसे गर्भावस्था आगे बढ़ी, भ्रूण संरचनाएं स्पष्ट हो गईं और कंकाल खनिजीकरण और भ्रूण की धड़कन(आंकड़े 2 और 3)के अवलोकन के बाद एक निर्णायक निदान किया जा सकता है।
भ्रूण माप प्राप्त किया जा सकता है और मामलों में गर्भावधि आयु का आकलन करने के लिए संदर्भ दिशानिर्देश स्थापित करने के लिए इस्तेमाल किया जहां एक सटीक प्रजनन तिथि ज्ञात नहीं है, हालांकि हम अभी तक पूरी तरह से muntjac में इस प्रणाली को विकसित नहीं किया है । सीधे क्राउन-दुम लंबाई (एससीआरएल), एचएल और सीडी मानक भ्रूण माप हैं जिनका उपयोग आमतौर पर कई प्रजातियों17में भ्रूण की उम्र का अनुमान लगाने के लिए किया जाता है, और ये माप यहां वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग करके मुंतजक गर्भधारण की अल्ट्रासाउंड छवियों से प्राप्त किए गए थे। इन तीनों मापों को एक ही ठीक से तैनात सगितीय छवि(आंकड़े 2 और 3)से प्राप्त किया जा सकता है, लेकिन यदि पूरे भ्रूण को एक भी धनु दृश्य में कब्जा नहीं किया जा सकता है तो अलग-अलग चित्रों का उपयोग किया जा सकता है। भविष्य में, इन तकनीकों का उपयोग विभिन्न प्रायोगिक परिस्थितियों में देखे गए विकास और विकास में भिन्नता की पहचान करने और भ्रूण व्यवहार्यता निर्धारित करने के लिए भी किया जा सकता है।
चित्रा 1. अल्ट्रासाउंड छवि एक रीव्स ' muntjac हिरण में जल्दी गर्भावस्था का प्रदर्शन । इस अध्ययन में डो ४६ दिनों के लिए एक बरकरार पुरुष muntjac के साथ रखा गया था, लेकिन एक सटीक प्रजनन की तारीख ज्ञात नहीं है । गर्भ के इस चरण में भ्रूण की विशेषताएं अलग नहीं हैं।
चित्रा 2। एक ही गर्भावस्था के अल्ट्रासाउंड छवि आंकड़ा 1, ९१ दिनों में चित्रित हिरन को डो की शुरूआत के बाद । (सीडी - छाती की गहराई, एचएल - सिर की लंबाई, पी - प्लेसटोम, एससीआरएल - सीधे क्राउन-दुम लंबाई)।
चित्र 3। भ्रूण माप प्राप्त करने के लिए उपयुक्त स्थिति का प्रदर्शन करने वाली दूसरी गर्भावस्था की अल्ट्रासाउंड छवि। छवि हिरन को डो की शुरूआत के बाद ९१ दिन ले लिया । (सीडी - छाती की गहराई, एचएल - सिर की लंबाई, पी - प्लेसटोम, एससीआरएल - सीधे क्राउन-दुम लंबाई)।
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Discussion
यह प्रोटोकॉल रीव्स के मुंतजाक हिरण में गर्भावस्था निदान के लिए ट्रांसाडोमिनल अल्ट्रासोनोग्राफी के आवेदन का वर्णन करता है। अन्य अल्ट्रासाउंड अध्ययनों के अनुरूप, उपयुक्त उपकरण और तकनीकी प्रवीणता मुंतजाक डो की सफल प्रजनन परीक्षा के लिए जरूरी हैं। बुनियादी स्तनधारी शरीर रचना विज्ञान की सावधानीपूर्वक समीक्षा, नैदानिक अल्ट्रासाउंड के भौतिक सिद्धांतों, और पेट विसेरा की विशिष्ट अल्ट्रासोग्राफिक उपस्थिति गलत निदान की कमी में सहायता करेगी। इसके अलावा, उच्च गुणवत्ता वाली छवियों और सटीक व्याख्या प्राप्त करने के लिए उपयुक्त ट्रांसड्यूसर और इंस्ट्रूमेंटेशन और स्कैनर नियंत्रण के साथ परिचित का चयन महत्वपूर्ण है।
कई अनुभवहीन अल्ट्रासोग्राफरों के लिए, इमेजिंग कलाकृतियां खराब छवि संकल्प और संरचनाओं के गलत आकलन का एक आम कारण हैं। त्वचा-ट्रांसड्यूसर इंटरफ़ेस में गूंज पशु चिकित्सा पेट अल्ट्रासाउंड में सबसे अधिक बार सामना करने वाली कलाकृतियों में से एक है, और दोनों सतहों के बीच गैस की उपस्थिति को नष्ट करके काफी कम किया जा सकता है। पर्याप्त बालों को हटाने और त्वचा के लिए ध्वनिक जेल के उदार आवेदन इस विरूपण साक्ष्य के प्रभाव को कम करने के लिए पर्याप्त होना चाहिए। अन्य इमेजिंग कलाकृतियों की चर्चाएं मानव और पशु चिकित्सा अल्ट्रासोनोग्राफी के विभिन्न ग्रंथों में पाई जा सकती हैं, और इसलिए यहां और विस्तार से चर्चा नहीं की जाएगी; हालांकि, इन घटनाओं का एक सामान्य ज्ञान अल्ट्रासोग्राफर उन्हें और अधिक प्रभावी ढंग से नियंत्रित करने की अनुमति होगी24.
यदि प्रजनन परीक्षा आयोजित करते हैं, तो यह समझा जाना चाहिए कि गर्भाशय को सामान्य, गैर-गर्भवती जानवर में कल्पना करना मुश्किल हो सकता है। प्रारंभिक गर्भावस्था में, गर्भाशय का ल्यूमेन गर्भावधि थैली रूपों के रूप में एनेकोइक अंतरिक्ष के लिए एक हाइपोइकोइक के रूप में पहचाना जा सकता है। मुंतजाक में इस स्तर पर, गर्भाशय आमतौर पर स्तन ग्रंथियों के स्तर पर स्कैनिंग, या थोड़ा कौडल द्वारा पाया जा सकता है। कंकाल खनिजीकरण या भ्रूण की धड़कन की उपस्थिति से पहले, गर्भावस्था को अन्य प्रजनन स्थितियों की उपस्थिति में गलत निदान किया जा सकता है जिससे गर्भाशय में तरल पदार्थ जमा हो जाता है, जिसमें पायोमेट्रा, हाइड्रोमेट्रा या म्यूकोमेट्रा जैसी विकृति शामिल हो सकती है। अल्ट्रासाउंड निदान प्रक्रिया के लिए sedation से पहले जानवर के एक पूर्ण नैदानिक मूल्यांकन के साथ संयोजन के रूप में किया जाना चाहिए। प्रारंभिक गर्भावस्था में, अवधारणा एमनियोटिक थैली के भीतर ओवोइड, हाइपरकोइक संरचना के गोलाकार के रूप में दिखाई देगी। इस प्रजाति में विशिष्ट विकासात्मक समय अंक अच्छी तरह से विशेषता नहीं हैं; हालांकि कंकाल खनिजीकरण और भ्रूण हृदय गति लगभग 8 सप्ताह के बाद संभोग पर लगातार पता लगाने योग्य प्रतीत होते हैं ।
आदर्श परिस्थितियों में, ट्रांसाडोमिनल अल्ट्रासाउंड रीव्स के मुंतजाक सहित कई प्रजातियों में प्रजनन संरचनाओं के मूल्यांकन के लिए एक अविश्वसनीय रूप से उपयोगी उपकरण हो सकता है। हालांकि, इस तकनीक का मूल्य जानवरों की आवास सुविधाओं की विशिष्ट क्षमताओं पर अत्यधिक निर्भर है। गर्भावस्था का पता लगाने के अधिक निष्क्रिय तंत्र के विपरीत, जैसे संभोग व्यवहार के दृश्य अवलोकन और डो के बाद पेट के असंतोष, अल्ट्रासाउंड के लिए 5-10 मिनट या उससे अधिक समय तक चलने वाले समय के लिए जानवर के शारीरिक और/या रासायनिक संयम की आवश्यकता होती है । कई सुविधाओं में, यह संभव या व्यावहारिक नहीं है, और परीक्षा की आवश्यकता पर अध्ययन के विशिष्ट उद्देश्यों के आधार पर विचार किया जाना चाहिए । इसके अलावा, कुछ शारीरिक या रोग राज्यों का सुझाव है कि अल्ट्रासोनोग्राफी पर कब्जा और बेहोश करने से संबंधित संकट के संभावित हानिकारक प्रभावों के कारण कुछ जानवरों में विवश है । अध्ययन शुरू करने से पहले अल्ट्रासाउंड परीक्षा के लिए प्रत्येक जानवर की उपयुक्तता का आकलन करना महत्वपूर्ण है, और इन परियोजनाओं के नियोजन चरणों में एक पशुचिकित्सक से परामर्श किया जाना चाहिए।
रीव्स के मुंटजाक और अन्य वन्यजीव प्रजातियों में गर्भावस्था का पता लगाने के लिए वर्तमान प्रथाएं आम तौर पर प्रकृति में निष्क्रिय होती हैं (संभोग व्यवहार और पेट में परहेज का अवलोकन)। सीरम प्रोजेस्टेरोन या गर्भावस्था से जुड़े ग्लाइकोप्रोटीन स्तर को निदान18,25की पुष्टि करने के लिए मापा जा सकता है, हालांकि इन परख के परिणाम गर्भ या भ्रूण व्यवहार्यता के चरण के बारे में कोई जानकारी प्रदान नहीं करते हैं। अल्ट्रासाउंड पशुओं के लिए न्यूनतम आक्रामकता और संकट को बनाए रखते हुए सीरम हार्मोन की तुलना में सटीकता के साथ या उससे अधिक सटीकता के साथ प्रजनन स्थिति के वास्तविक समय के आकलन की अनुमति देने का लाभ प्रदानकरताहै। उन कार्यों में जहां प्रजनन तिथि निर्धारित करना मुश्किल या असंभव है, अल्ट्रासाउंड एक अधिक सटीक तंत्र प्रदान कर सकता है जिसके द्वारा हार्मोनल परख की तुलना में गर्भधारण के चरण का अनुमान लगाना, यहां तक कि प्रकाशित गर्भावधि तालिकाओं के अभाव में भी। इसके अलावा, अल्ट्रासाउंड परीक्षा के लिए शारीरिक और रासायनिक संयम स्वस्थ मुंतजक के लिए न्यूनतम संकट पैदा करता है और सामान्य स्वास्थ्य आकलन के लिए अतिरिक्त नमूने (रक्त, मूत्र, आदि)एकत्र करने का एक आदर्श अवसर प्रदान करता है।
अल्ट्रासोनोग्राफिक मापन के माध्यम से गर्भावधि आयु अनुमान कई प्रजातियों में स्थापित किया गया है, जिनमें मवेशी1,भेड़2,3,बकरियां4और घोड़े5शामिल हैं, और सीमित संख्या में सेर्विड प्रजातियों केसाथ-साथ 8-19में वर्णित किया गया है। सटीक प्रजनन तिथियों या स्थापित गर्भ तालिकाओं के अभाव में, रीव्स के मुंतजाक की भ्रूण आयु केवल अन्य प्रजातियों के लिए उल्लिखित भ्रूण विकास मापदंडों के आधार पर मोटे तौर पर अनुमान लगाया जा सकता है। यहां वर्णित काम का एक विशिष्ट लक्ष्य इस प्रजाति में भ्रूण उम्र बढ़ने के लिए और अधिक औपचारिक दिशानिर्देश स्थापित करना है। पर्याप्त मानक डेटा के साथ, इस कॉलोनी में अल्ट्रासोनोग्राफी के भविष्य के अनुप्रयोगों में विभिन्न प्रयोगात्मक चरों की उपस्थिति में भ्रूण विकास में असामान्यताओं की पहचान करना और भ्रूण व्यवहार्यता का आकलन करना शामिल होगा। इसके अलावा, ट्रांसाडोमिनल अल्ट्रासाउंड की संवेदनशीलता और विशिष्टता निर्धारित की जा सकती है और सर्विड प्रजातियों में गर्भावस्था का पता लगाने के लिए अन्य आमतौर पर नियोजित तंत्रों की तुलना में।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
लेखकों को इस परियोजना के लिए बीज muntjac प्रदान करने के लिए मुंटजाक और श्री क्लेव टेडफोर्ड ऑफ Cervid समाधान इंक के लिए हमें शुरू करने के लिए Jeanette हेस-क्लूग और केली एंडरसन का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं । इस काम को एनआईएच ग्रांट R01AI093634 ने सपोर्ट किया।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
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