Summary
El ultrasonido de Transabdominal se describe como medios eficaces, no invasores para evaluar la situación reproductiva en Reeves' ciervos del muntjac. Estos métodos se pueden utilizar para alcanzar diagnosis temprana del embarazo y para evaluar viabilidad fetal. Los usos futuros de esta técnica incluyen la valoración de la edad gestacional y los efectos de la enfermedad maternal sobre el desarrollo fetal.
Abstract
Los ciervos muntjac de Reeves (Muntiacus reevesi) son una pequeña especie de cérvido nativa del sudeste asiático, y actualmente están siendo investigados como un modelo potencial de transmisión y patogénesis de la enfermedad priónica. La transmisión vertical es un área de interés entre los investigadores que estudian las enfermedades infecciosas, incluida la enfermedad priónica, y estas investigaciones requieren métodos eficientes para evaluar los efectos de la infección materna en el rendimiento reproductivo. El examen ultrasonográfico es una herramienta bien establecida para diagnosticar el embarazo y evaluar la salud fetal en muchas especies animales1-7,incluidas varias especies de cérvidos cultivados8-19,sin embargo, esta técnica no se ha descrito en el ciervo muntjac de Reeves. Aquí describimos el uso del ultrasonido del transabdominal para detectar embarazo en muntjac hace y para evaluar crecimiento y el desarrollo fetales a través del período gestacional. Usando este procedimiento, los animales embarazados fueron identificados tan pronto como 35 días después del emparejamiento del dor-buck y éste era un medio eficaz de supervisar con seguridad el embarazo a intervalos regulares. Los objetivos futuros de este trabajo incluirán el establecimiento de referencias de medición fetal normales para la estimación de la edad gestacional, la determinación de la sensibilidad y la especificidad de la técnica para el diagnóstico del embarazo en diversas etapas de la gestación, y la identificación de variaciones en el crecimiento y desarrollo fetal bajo diferentes condiciones experimentales.
Introduction
El examen ultrasonográfico es un método bien descrito de diagnóstico de embarazo en bovinos1,ovinos2,3,caprinos4,caballos5,animales de compañía6,7y otras especies de animales domésticos. Esta modalidad de imagen también se ha identificado como una herramienta valiosa para la detección del embarazo y la estimación de la edad fetal en varias especies de cérvidos cautivos, incluidos los ciervosbarbechos 8-11,los ciervos rojos12-16,los ciervos sika de Hokkaido17y los renos18,19. En muchos casos, la ecografía ha producido tasas de precisión más altas que otros mecanismos de detección del embarazo, como la progesterona sérica o el análisis de glicoproteínas asociadas al embarazo9,18. Además, la visualización ultrasonographic de la zona reproductiva puede proporcionar la información adicional con respecto a viabilidad fetal, a edad gestacional, y a la identificación de las anormalidades de desarrollo que serían de otra manera difíciles de determinar. La utilidad de la ecografía para evaluar el estado reproductivo sugiere que esta metodología debería adaptarse a otras especies en las que se utilizan programas de reproducción activa.
El ciervo muntjac de Reeves (Muntiacus reevesi) es una pequeña especie de cérvido nativo del sudeste asiático20. Si bien el ciclo reproductivo de estos animales no está bien caracterizado en sus territorios nativos, los estudios de poblaciones asilvestradas en partes del sur de Inglaterra han mejorado la comprensión de sus patrones de reproducción20. A diferencia de la mayoría de los cérvidos, el muntjac de Reeves parece reproducirse durante todo el año, sin picos de aduladores estacionales aparentes20-22. Muntjac femenino da a luz típicamente a un solo cervatillo que sigue un período de gestación de 210 días, y entra confiablemente en un estro postparto dentro de 24 horas20-22. ¿Que no conciben durante este período postparto volverá al celo aproximadamente 24-25 días más tarde20. En situaciones cautivas, la reproducción se logra típicamente mediante la vivienda con uno o más machos intactos. Este sistema produce tasas de concepción satisfactorias y requiere poca habilidad técnica para el personal, sin embargo, las fechas exactas de reproducción son difíciles, si no imposibles, de determinar.
Los muntjac se utilizan comúnmente en estudios citogenéticos debido a la amplia gama de números de cromosomas diploides y la alta tasa de diversificación cariotípica entre las diferentes especies23. Estos animales también están siendo investigados actualmente como modelo de patogénesis y transmisión de la enfermedad priónica, con especial interés en el estudio de la transmisión vertical de la enfermedad de pérdida crónica (CWD) en cérvidos. La importancia del muntjac en una serie de diferentes aplicaciones de investigación sugiere que se deben establecer tecnologías reproductivas mejoradas para complementar los procedimientos de investigación actuales. Específicamente, los mecanismos no invasores para evaluar el período gestacional podrían potencialmente aclarar variaciones críticas en funcionamiento reproductivo y crecimiento y desarrollo fetal bajo diversas condiciones experimentales. Además, el desarrollo de referencias de medición fetal en tiempo real sería potencialmente valioso para estimar la edad gestacional en situaciones en las que no se pueden determinar las fechas de reproducción. Estudios previos han descrito mecanismos para el uso de mediciones fetales, tales como la longitud de la corona-grupa (CRL), la profundidad torácica (EC) y la longitud de la cabeza (HL) para estimar la etapa aproximada de gestación en especies cérvidas11-14, 16,17. Además, algunos de estos estudios también han establecido pautas que describen cuándo se pueden identificar hitos específicos del desarrollo, como la mineralización esquelética o los latidos del corazón fetales,8-19. Si bien estos datos pueden ser útiles para ayudar a guiar el análisis de ultrasonido reproductivo en el muntjac, la mayoría de las otras especies de cérvidos estudiadas tienen un tamaño corporal mucho mayor y períodos gestacionales más largos, lo que reduce el valor de traslación de estos estudios para aplicaciones de muntjac.
El protocolo contorneado aquí describe la sonografía transabdominal del muntjac femenino con el fin de diagnosticar y de supervisar embarazo. La ejecución acertada de este protocolo puede facilitar la detección temprana del embarazo y la evaluación del crecimiento y del desarrollo fetales. Esta técnica tiene aplicaciones valiosas en la realización de estudios que investigan la reproducción, el desarrollo en el útero o la transmisión vertical de enfermedades infecciosas en un modelo de cérvido pequeño y también puede ser útil para fines clínicos en operaciones de cría en cautividad.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Preparación procesal
Todos los procedimientos de animales descritos han sido revisados y aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Estatal de Colorado, una Asociación para la Evaluación y Acreditación del Cuidado de Animales de Laboratorio (AAALAC), institución internacional acreditada.
- Antes del examen, inmovilice a los animales utilizando protocolos apropiados de sedación o anestesia para proporcionar relajación y permitir un posicionamiento adecuado. Un manejador sujeta al ciervo mientras que una segunda persona administra la sedación al animal.
Nota: Los autores han encontrado la combinación siguiente para proporcionar la sedación eficaz en esta especie: butorfanol (0,45 mg/kg), azaperona (0,035 mg/kg), y medetomidina (0,04 mg/kg), administrada intramuscular en los músculos glúteos. - Una vez que la mente ha alcanzado un plano de sedación que permite el manejo conforme, colóquela en reclinación dorsal o lateral en una mesa de examen o dentro de un canal en V. Eleve ligeramente la cabeza, el cuello y el tórax (aproximadamente 20-30°) para reducir el riesgo de regurgitación y aspiración de contenido ruminal y para facilitar la ventilación adecuada durante el procedimiento.
Nota: En la mayoría de los cérvidos u otras especies de rumiantes, el ultrasonido abdominal se realiza en animales de pie; sin embargo, el tamaño pequeño y las consideraciones del comportamiento de esta especie requieren la sedación pesada para la examinación y la colocación esternal es por lo tanto más difícil y puede imposibilitar técnica de proyección de imagen eficaz. La colocación del animal a medio camino entre la reclinación esternal y lateral puede ser ideal para reducir el riesgo de regurgitación e hipoventilación y debe considerarse si es posible. En cualquier posición reclinada, es crítico monitorear cuidadosamente las respiraciones de los animales y detener inmediatamente el examen y colocar al animal en reclinación esternal si se observa regurgitación o hipoventilación. - Si es necesario, recorte el cabello de la zona del abdomen a examinar para lograr un contacto adecuado entre la huella del transductor y la piel.
Nota: En la gestación temprana, la evidencia del embarazo se puede detectar en el abdomen caudal cerca de las glándulas mamarias. Esta región del muntjac es típicamente sin pelo, y por lo tanto el afeitado puede no estar indicado en este momento. A medida que el feto crece y el útero se distede para ocupar una posición más craneal en el abdomen, el recorte del cabello será necesario antes de la toma de imágenes. Se debe tener cuidado para evitar causar cualquier trauma mecánico a la piel, incluyendo laceraciones de cuchillas de afeitar o lesiones térmicas de cortadoras eléctricas. - Coloque la unidad de ultrasonido en una ubicación que permita al técnico visualizar fácilmente el monitor mientras realiza el examen con su mano dominante. Introduzca información de identificación de animales (nombre, número de identificación, etc.)en el sistema para etiquetar automáticamente las imágenes guardadas y los bucles de vídeo.
2. Examen de ultrasonido reproductivo transabdominal
- Aplique una generosa cantidad de gel de acoplamiento acústico en el abdomen caudal.
- Coloque un transductor lineal curvo de 5-10 MHz en la piel del abdomen caudal, inmediatamente craneal al pubis, y muévalo lentamente en dirección craneal para evaluar las estructuras dentro de la cavidad pélvica. Escanee los cuadrantes izquierdo y derecho del abdomen caudal para evaluar ambos cuernos del útero bicornuado del muntjac.
Nota: El ultrasonido abdominal completo implica la evaluación de todas las vísceras abdominales, incluyendo el hígado, los riñones, el bazo, el aparato gastrointestinal, la vejiga urinaria, y la zona reproductiva. A los efectos de este protocolo, sólo se discutirá detalladamente el examen del embarazo; sin embargo, el aspecto normal de otros órganos abdominales caudales debe ser reconocido pues estas estructuras son probables ser encontradas durante el curso del estudio. Los órganos más comúnmente vistos en esta localización incluyen segmentos del aparato gastrointestinal, de la vejiga urinaria, y de la zona reproductiva. Los intestinos grueso y delgado se identifican por la apariencia característicamente estratificada de la pared intestinal. La luz puede o no ser pronunciada dependiendo del tipo y la cantidad de contenido, que puede incluir partículas de líquidos, gases, mucosas o alimentos. La vejiga urinaria puede ser difícil de identificar a menos que se distede con la orina, y las capas de la pared de la vejiga son significativamente menos distintas que las de los intestinos. Aparte del útero, los ovarios también se pueden encontrar en la ecografía del tracto reproductivo de la hembra muntjac. Los ovarios aparecerán como estructuras ovoides cerca del polo caudal de los riñones, y su apariencia puede cambiar en el transcurso del ciclo estroso. La presencia de folículos maduros múltiples, llenos de líquido dentro de la corteza es sugestiva de celo.
Nota: Al rotar y/o "avivar" el cabezal de exploración del transductor, las estructuras se pueden evaluar en planos transversales o sagitales.- Si es necesario diferenciar un útero grávido de la vejiga urinaria, vacíe la vejiga manualmente aplicando una presión suave al abdomen caudal o colocando un catéter urinario y repitiendo la exploración.
Nota: La expresión manual de la vejiga solo debe intentarse cuando el animal está en posición esternal o vertical, lo que facilita una orientación más natural de las vísceras abdominales y reduce el riesgo de traumatismo a otras estructuras. El útero también se puede diferenciar de la vejiga urinaria mediante la evaluación del grosor de la pared del órgano. El grosor típico de una vejiga moderadamente distendido es de aproximadamente 1,4 mm24,mientras que los autores han encontrado que la pared más musculosa del útero grávido en el muntjac generalmente mide entre 7-8 mm.
Nota: El embarazo temprano es difícil de diagnosticar definitivamente debido a una carencia de estructuras fetales identificables, y de hecho la primera indicación del embarazo puede ser simplemente un pequeño bolsillo flúido en el abdomen caudal. Si se ve en este momento, el embrión en desarrollo aparecerá como una estructura hiperecoica, ovoide a amorfa dentro del útero (Figura 1).
- Si es necesario diferenciar un útero grávido de la vejiga urinaria, vacíe la vejiga manualmente aplicando una presión suave al abdomen caudal o colocando un catéter urinario y repitiendo la exploración.
- Realice ajustes en la profundidad, la frecuencia y la ganancia según sea necesario para mejorar el contraste y el detalle de la imagen.
Nota:las frecuencias más altas están asociadas con longitudes de onda más cortas, que son necesarias para mejorar la resolución de la imagen. La mayoría de los transductores son capaces de funcionar dentro de una gama de frecuencias (por ejemplo, 6-10 MHz)24. La frecuencia se puede ajustar utilizando los controles del escáner en la unidad de ultrasonido, y el aumento de la frecuencia dará como resultado una imagen más clara. El aumento de la frecuencia simultáneamente disminuye la profundidad de la penetración de las ondas sonoras; por lo tanto, la reducción de la frecuencia puede ser necesaria para visualizar estructuras más profundas, pero la resolución puede verse comprometida24. Por esta razón es importante seleccionar la frecuencia más alta posible para alcanzar la profundidad de tejido deseada. Los ajustes en los controles de ganancia alterarán la amplificación de las ondas sonoras que regresan al transductor desde los tejidos y afectarán el grado de contraste en la imagen24. La ganancia debe establecerse en un punto en el que se logre un contraste óptimo entre los tejidos hiperecoicos e hipoecoicos, y estos ajustes pueden necesitar ser ajustados dependiendo de las estructuras que se están fotodeando.
3. Obtención de mediciones fetales
Nota:La edad gestacional en muchas especies de animales domésticos puede estimarse utilizando rangos de referencia establecidos para las mediciones fetales obtenidas del examen de ultrasonido. Las mediciones más comúnmente utilizadas incluyen la longitud recta de la corona-grupa (SCRL), la profundidad del pecho (CD) y la longitud de la cabeza (HL)17. Si bien aún no se han recopilado datos suficientes para desarrollar pautas confiables de edad gestacional en los ciervos muntjac de Reeves, se pueden recopilar mediciones para comenzar a establecer estas referencias. Se ha demostrado que la frecuencia cardíaca fetal (FHR) en otras especies de cérvidos y rumiantes aumenta linealmente a medida que la gestación progresa hasta cierto punto (típicamente alrededor del día 60 de gestación), momento en el que la frecuencia cardíaca comienza a disminuir17. La FHR puede ser utilizada para estimar la edad gestacional en conjunción con otras observaciones ecográficas, sin embargo es más comúnmente utilizada como medida de viabilidad fetal17,24. La FHR se ha calculado en el muntjac de Reeves tan pronto como 35 días después del apareamiento observado.
- Para medir el SCRL, localice el útero en el monitor y realice ajustes finos en la posición del transductor hasta obtener una visión sagital de todo el feto (Figuras 2 y 3). Congelar la imagen y medir la distancia entre el aspecto más dorsal del cráneo y la base del sacro (Figuras 2 y 3).
- Para medir la EC, obtener una vista sagital del feto (la misma imagen puede ser utilizada para medir scrl) y medir la distancia entre los aspectos dorsales y ventrales del tórax (Figuras 2 y 3).
- Para medir el LH, utilizando la misma vista sagital del feto que se describe para las mediciones de SCRL y CD, mida la distancia desde la cresta occipital hasta la base de lanariz (Figuras 2 y 3).
- Para calcular la frecuencia cardíaca fetal, identifique el corazón dentro de la cavidad torácica del feto visualizando sus contracciones rítmicas. Calcule la frecuencia cardíaca contando el número de contracciones (latidos del corazón) que ocurren dentro de un período de tiempo de 1 minuto.
Nota: Si la unidad del ultrasonido que es utilizada tiene capacidades de Doppler, esta característica se puede emplear para ayudar más lejos en la distinción del corazón de otros movimientos fetales no específicos. - Verifique que todas las imágenes guardadas y los bucles de video incluyan toda la información de identificación necesaria, incluido el nombre o número del animal, la fecha, las mediciones y las etiquetas de estructura apropiadas.
4. Conclusiones procesales y recuperación
- Retire todo el gel de contacto de ultrasonido residual del abdomen del animal con un paño suave o toallas de papel. Limpie el gel del transductor antes de almacenar.
- Si utiliza el protocolo de sedación descrito en el paso 1.1, administre atipamezol por vía subcutánea a una dosis de 0,25 mg/kg para revertir los efectos de la medetomidina. Si se utiliza un protocolo de sedación diferente en el que se dispone de un antagonista, administre este agente al animal de acuerdo con las dosis publicadas al concluir el procedimiento para acelerar la recuperación.
- Coloque el muntjac sobre una superficie de cama suave en reclinación esternal, con la cabeza ligeramente elevada para reducir el riesgo de regurgitación y aspiración de contenido ruminal. Vigilar de cerca al animal hasta que esté completamente recuperado y pueda ambular alrededor del recinto sin ayuda.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Usando el protocolo descrito aquí, el embarazo se puede diagnosticar y supervisar en los ciervos muntjac de Reeve con técnicas como mínimo invasores. El punto de tiempo más temprano que el embarazo pudo ser detectado por los autores fue aproximadamente 35 días después del comportamiento de apareamiento observado.
En los primeros tiempos de la gestación, el embarazo fue diagnosticado visualizando un útero lleno de líquido identificado como espacio anecoico en el abdomen caudal. Dentro del útero, el embrión en desarrollo apareció como una estructura hiperecoica, ovoide con pocas características identificables (Figura 1). A medida que avanzaba el embarazo, las estructuras fetales se hicieron evidentes y se pudo hacer un diagnóstico concluyente tras la observación de la mineralización esquelética y el latido del corazón fetal(Figuras 2 y 3).
Las mediciones fetales se pueden obtener y utilizar para establecer pautas de referencia para estimar la edad gestacional en los casos en que no se conoce una fecha exacta de reproducción, aunque todavía no hemos desarrollado completamente este sistema en el muntjac. La longitud recta de la corona-grupa (SCRL), el HL, y el CD son las medidas fetales estándar que se utilizan comúnmente para estimar edad fetal en muchas especies17,y estas medidas fueron obtenidas de imágenes del ultrasonido de los embarazos del muntjac usando el protocolo descrito aquí. Las tres mediciones se pueden obtener a partir de la misma imagen sagital correctamente colocada(Figuras 2 y 3),pero se pueden utilizar imágenes separadas si todo el feto no puede ser capturado en una sola vista sagital. En el futuro, estas técnicas también se pueden utilizar para identificar las variaciones en el crecimiento y el desarrollo observadas en diferentes condiciones experimentales y para determinar la viabilidad fetal.
Figura 1. Imagen del ultrasonido que demuestra embarazo temprano en un Reeves' ciervos del muntjac. La mente en este estudio había sido alojada con un muntjac macho intacto durante 46 días, sin embargo, no se conoce una fecha exacta de reproducción. Las características fetales no son distinguibles en esta etapa de la gestación.
Figura 2. Imagen de ultrasonido del mismo embarazo representado en la Figura 1, 91 días después de la introducción de la mente a la pelota. (CD - profundidad del pecho, HL - longitud de la cabeza, P - placentome, SCRL - longitud recta de la corona-grupa).
Figura 3. Imagen del ultrasonido de un segundo embarazo que demuestra la colocación apropiada para obtener medidas fetales. Imagen tomada 91 días después de la introducción del do a la pelota. (CD - profundidad del pecho, HL - longitud de la cabeza, P - placentome, SCRL - longitud recta de la corona-grupa).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Este protocolo describe el uso de la sonografía del transabdominal para la diagnosis del embarazo en Reeves' ciervos del muntjac. De acuerdo con otros estudios de ultrasonido, el equipo apropiado y la competencia técnica son imprescindibles para un examen reproductivo exitoso del do muntjac. La revisión cuidadosa de la anatomía mamífera básica, de los principios físicos del ultrasonido de diagnóstico, y del aspecto ultrasonographic típico de las vísceras abdominales ayudará en la reducción de diagnosis equivocadas. Además, la selección de transductores apropiados y la familiaridad con la instrumentación y los controles del escáner son fundamentales para obtener imágenes de alta calidad e interpretación precisa.
Para muchos ultrasonographers inexpertos, los artefactos de la proyección de imagen son una causa común de la resolución pobre de la imagen y del gravamen inexacto de estructuras. La reverberación en la interfaz piel-transductor es uno de los artefactos lo más frecuentemente encontrados en ultrasonido abdominal veterinario, y se puede reducir perceptiblemente eliminando la presencia de gas entre las dos superficies. La depilación adecuada y la generosa aplicación de gel acústico a la piel deben ser suficientes para minimizar el impacto de este artefacto. Las discusiones de otros artefactos de la proyección de imagen se pueden encontrar en varios textos de la sonografía humana y veterinaria, y por lo tanto no serán discutidos más detalladamente aquí; sin embargo, un conocimiento general de estos fenómenos permitirá al ultrasonógrafo controlarlos más eficazmente24.
Si se realiza un examen reproductivo, se debe entender que el útero puede ser difícil de visualizar en un animal normal, no embarazada. En embarazo temprano, el lumen del útero puede llegar a ser identificable como hypoechoic al espacio anecoico mientras que las formas del saco gestacional. En esta etapa en el muntjac, el útero se puede encontrar típicamente explorando en el nivel de, o levemente caudal a, las glándulas mamarias. Antes de la mineralización esquelética o de la aparición de un latido del corazón fetal, el embarazo puede diagnosticarse erróneamente en presencia de otras condiciones reproductivas que hacen que se acumule líquido en el útero, lo que puede incluir patologías como piometra, hidrometra o mucometra. Los diagnósticos de ultrasonido deben realizarse junto con una evaluación clínica completa del animal antes de la sedación para el procedimiento. En la gestación temprana, el conceptus aparecerá como una estructura esférica a ovoide, hiperecoica dentro del saco amniótico. Los puntos específicos de tiempo de desarrollo no están bien caracterizados en esta especie; sin embargo la mineralización esquelética y el movimiento cardiaco fetal aparecen ser constantemente perceptibles en aproximadamente 8 semanas de poste-apareamiento.
En condiciones ideales, el ultrasonido transabdominal puede ser una herramienta increíblemente útil para la evaluación de las estructuras reproductivas en muchas especies, incluido el muntjac de Reeves. El valor de esta técnica, sin embargo, depende en gran medida de las capacidades específicas de las instalaciones de alojamiento de los animales. A diferencia de los mecanismos más pasivos de detección del embarazo, como la observación visual del comportamiento de apareamiento y la posterior distensión abdominal de la dora, el ultrasonido requiere la restricción física y / o química del animal durante un período de tiempo que dura de 5 a 10 minutos o más. En muchas instalaciones, esto no es posible o práctico, y la necesidad del examen debe considerarse sobre la base de los objetivos específicos del estudio. Además, ciertos estados fisiológicos o patológicos pueden sugerir que la ecografía está contraindicada en ciertos animales debido a los efectos potencialmente perjudiciales de la angustia relacionada con la captura y la sedación. Es importante evaluar la idoneidad de cada animal para el examen ecográfico antes de iniciar el estudio, y se debe consultar a un veterinario en las etapas de planificación de estos proyectos.
Las prácticas actuales para la detección del embarazo en el muntjac de Reeves y otras especies de vida silvestre son típicamente pasivas en la naturaleza (observación del comportamiento de apareamiento y distensión abdominal en hace). La progesterona sérica o los niveles de glicoproteína asociados al embarazo pueden ser medidos para confirmar el diagnóstico18,25,sin embargo, los resultados de estos ensayos no proporcionan ninguna información sobre la etapa de gestación o la viabilidad fetal. El ultrasonido ofrece el beneficio de permitir la evaluación en tiempo real del estado reproductivo con una precisión similar o mayor que la de los ensayos de hormonas séricas18,manteniendo al mismo tiempo una mínima invasividad y angustia para los animales. En las operaciones donde la fecha de reproducción es difícil o imposible de determinar, el ultrasonido puede proporcionar un mecanismo más preciso para estimar la etapa de gestación que los ensayos hormonales, incluso en ausencia de tablas gestacionales publicadas. Además, la restricción física y química para el examen de ultrasonido parece causar una angustia mínima a muntjac saludable y proporciona una oportunidad ideal para realizar un examen físico completo y recoger muestras adicionales (sangre, orina, etc.)para evaluaciones generales de la salud.
La estimación de la edad gestacional mediante mediciones ultrasonográficas se ha establecido en muchas especies, incluyendo bovinos1,ovinos2,3,caprinos4,y caballos5,y se ha descrito en un número limitado de especies de cérvidos también8-19. En ausencia de fechas exactas de reproducción o tablas de gestación establecidas, la edad fetal del muntjac de Reeves solo se puede estimar aproximadamente en función de los parámetros de desarrollo fetal descritos para otras especies. Un objetivo específico del trabajo descrito aquí es establecer pautas más formales para el envejecimiento fetal en esta especie. Con suficientes datos normativos en su lugar, las aplicaciones futuras de la ecografía en esta colonia incluirán la identificación de anomalías en el desarrollo fetal en presencia de diferentes variables experimentales y la evaluación de la viabilidad fetal. Además, la sensibilidad y la especificidad del ultrasonido transabdominal se pueden determinar y comparar a otros mecanismos comúnmente empleados para detectar embarazo en especies del cérvido.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
Los autores desean agradecer a Jeanette Hayes-Klug y Kelly Anderson por la gestión de la colonia muntjac, al Dr. Alan Young por presentarnos al muntjac y al Sr. Cleve Tedford de Cervid Solutions Inc. por proporcionar el muntjac de semillas para este proyecto. Este trabajo fue apoyado por la subvención R01AI093634 de los NIH.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 2nd edition, Saunders. Philadelphia. 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
