Abstract
ومطفول الحيوانات البرية عادة من قبل مجموعة واسعة من الديدان الطفيلية. أربعة أنواع رئيسية من الديدان الطفيلية هي "الديدان" (النيماتودا)، "الديدان شوكية الرأس" (acanthocephalans)، "المثقوبة" (الديدان المثقوبة)، و "الدودة الشريطية" (الديدان الشريطية). الأسلوب الأمثل لجمع الديدان هو دراسة المضيف الذي كان القتلى أقل من 4-6 ساعة لأن معظم الديدان سوف يكون لا يزال على قيد الحياة. ينبغي إجراء التشريح شامل وجميع الأجهزة الرئيسية فحصها. يتم غسلها الأجهزة أكثر من 106 ميكرون غربال تحت الماء ومحتويات فحصها تحت المجهر ستيريو تشغيل. تحسب جميع الديدان ويتم إصلاحها عدد ممثل (إما في الايثانول 70٪، 10٪ من الفورمالين مخزنة، أو حمض الخليك، الكحول الفورمالين). لتحديد الأنواع، يتم مسح إما الديدان الطفيلية في lactophenol (الديدان الخيطية وacanthocephalans الصغيرة) أو الملون (الديدان المثقوبة، الديدان الشريطية، وacanthocephalans كبيرة) باستخدام الهيماتوكسيلين هاريس أو اللون القرمزي Semichon ل. الديدان هي KEYEد على الأنواع من خلال دراسة الهياكل المختلفة (على سبيل المثال. الشويكات الذكور في الديدان الخيطية أو منقاف في الديدان الشريطية). البروتوكولات المذكورة هنا يمكن تطبيقها على أي حيوان فقاري. أنها تتطلب بعض الخبرة في الاعتراف الأجهزة المختلفة والقدرة على التفريق الديدان الطفيلية من غيرها من الحطام الأنسجة أو الأمعاء محتوياتها. جمع وحفظ وتلطيخ هي التقنيات التي تتطلب واضحة الحد الأدنى من المعدات والكواشف. تحديد التصنيفية، خصوصا أن الأنواع، يمكن أن يكون وقتا طويلا جدا، وربما يتطلب تقديم العينات إلى خبير أو تحليل الحمض النووي.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Fixing | |||
| Alcohol-Formalin-Acetic Acid (AFA) | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) F75F-1GAL (formaldehyde) BP2401500 (glacial acetic acid) |
Ethanol 85% (85 ml) + formaldehyde 37% (10 ml) + glacial acetic acid (5 ml) |
| Ethanol for killing and long-term preservation | Fisher Scientific | A407-1 | Ethanol 100% (70 ml) + distilled water (30 ml) |
| Ethanol for fixing and DNA studies | Fisher Scientific | AC61511-0010 | Ethanol 80-90% (80-90 ml) + distilled water (20-10 ml), respectively |
| Formalin Buffered | Fisher Scientific | SF100-4 | Formalin 10% (10 ml) + distilled water (90 ml) |
| Glycerine-alcohol | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) AC15365-1000 (glycerine) |
Ethanol 70% (95 ml) + glycerine (5 ml) |
| Clearing, staining and mounting | |||
| Ethanol for dehydrating during staining | Fisher Scientific | A407-1 | Ethanol 80%, 95%, 100% (80 ml, 95 ml, 100 ml) + distilled water (20 ml, 5 ml, 0 ml) |
| Lactophenol | Fisher Scientific | R400-27 | - |
| Phenol | Fisher Scientific | A931I-1 (phenol) A407-1 (ethanol) |
Phenol 100% (80 ml) + ethanol 100% (20 ml) |
| Harris’ Hematoxylin | Fisher Scientific | S25347 (hematoxylin) A407-1 (ethanol) A567-500 (ammonium aluminum sulfate) S25553 (sodium iodate) |
Hematoxylin (5 g) + ethanol 100% (50 ml) + ammonium aluminum sulfate (100 g) + sodium iodate (0.37 g) + distilled water (1,000 ml) |
| Semichon’s acetic carmine | Fisher Scientific | BP2401500 (glacial acetic acid) S25236 (carmine) A407-1 (ethanol) |
Glacial acetic acid (100 ml) + carmine (1.5 g) + distilled water (100 ml). Heat in a boiling water bath for 15 min and cool. Filter to make stock solution. Mix 1:2 with 70% alcohol for staining. |
| Xylene | Fisher Scientific | X4-4 | Use only under a chemical fume hood. |
| Methyl salicylate | Fisher Scientific | S25437 | - |
| Ethanol basic | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) S25159A (concentrated ammonium hydroxide) |
Ethanol 70% (100 ml) + ammonium hydroxide (0.1 ml) |
| Ethanol acid | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) SA9233-100 (hydrochloric acid) |
Ethanol 70% (99.5 ml) + hydrochloric acid (0.5 ml) |
| Canada balsam | Fisher Scientific | B10-100 | - |
References
- Atkinson, C. T., Thomas, N. J. Parasitic Diseases of Wild Birds. Hunter, D. B. , John Wiley & Sons, Blackwell Press. Hoboken, New Jersey, USA. (2009).
- Parasitic Diseases of Wild Mammals. Samuel, W. M., Pybus, M. J., Kocan, A. A. , Second Edition, Iowa State University Press. Ames, Iowa, USA. (2001).
- Yamaguti, S. Parts 1 and 2. The Digenetic Trematodes of Vertebrates. Systema Helminthum. I, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1958).
- Yamaguti, S. Synopsis of Digenetic Trematodes of Vertebrates. I and II, Keigaku Publishing Company. Tokyo, Japan. (1971).
- Gibson, D. I., Jones, A., Bray, R. A. Keys to the Trematoda. 1, CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2002).
- Jones, A., Bray, R. A., Gibson, D. I. Keys to the Trematoda. 2, CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2005).
- Bray, R. A., Gibson, D. I., Jones, A. Keys to the Trematoda. 3, CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2008).
- Yamaguti, S. Acanthocephala of Vertebrates. Systema Helminthum. V, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1963).
- Yamaguti, S. The Cestodes of Vertebrates. Systema Helminthum. II, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1959).
- D, G. Keys to the Cestode Parasites of Vertebrates. CRC Handbook of Tapeworm Identification. , CRC Press Inc. Boca Raton, Florida, USA. (1986).
- Khalil, L. F., Jones, A., Bray, R. A. Keys to the Cestode Parasites of Vertebrates. , CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (1994).
- Yamaguti, S. The Nematodes of Vertebrates. Parts 1 and 2. Systema Helminthum. III, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1961).
- Anderson, R. C., Chabaud, A. G., Willmott, S. Keys to the Nematode Parasites of Vertebrates: Archival Volume (Nos). 1-10. , CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2009).
