Инфаркт миокарда и функциональная оценка результат в Свиней

Summary

Этот протокол описывает свиной инфаркта миокарда (ИМ) модель, используя 90 мин закрытые груди коронарной баллонной окклюзии левой передней нисходящей артерии (ПНА), а затем реперфузии. Кроме того, протокол для нескольких параметров результатов, таких как сердечной функции, гемодинамики, сопротивление микрососудов и размер инфаркта, также представлены.

Abstract

Внедрение вновь открывшимся сердечно-сосудистых терапии в первой в-человека испытаний зависит от строго регламентированной этического и правового дорожной карты. Одним из важных условием является хорошее понимание всех аспектов безопасности и эффективности, полученных в большой животной модели, что на законных основаниях отразить человеческую сценарий инфаркта миокарда (ИМ). Свиньи широко используются в этом отношении, так как их размер сердца, гемодинамика, и коронарной анатомии близки к у людей. Здесь мы представляем эффективную протокол для использования свиной модель MI использованием закрытого груди коронарной баллонной окклюзии левой передней нисходящей артерии (LAD), а затем реперфузии. Этот подход основан на 90 мин ишемии миокарда, вызывая большой левого желудочка миокарда передней, септальной и inferoseptal стен. Кроме того, мы представляем протоколы для различных мер исхода, которые предоставляют широкий спектр информации о центре, таких как сердечная систолического и диастолического функции, hemodynamiCS, коронарная скорость потока, микрососудистой сопротивление, и размер инфаркта. Этот протокол может быть легко адаптирована для удовлетворения изучать конкретные требования к валидации новых cardioregenerative биопрепаратов на различных этапах (т.е. непосредственно после острого ишемического инсульта, в условиях подострого или даже в хронической ИМ раз образование рубцовой была завершена). Следовательно, модель обеспечивает полезную поступательное инструмент для изучения ИМ, последующее негативное ремоделирование, и потенциал новых cardioregenerative агентов.

Introduction

Острый инфаркт миокарда (ОИМ) и его долгосрочных последствий, таких как хронической сердечной недостаточности (ХСН) глубоко повлиять прогноз и качество жизни пациента, не говоря уже о высоких ограничения затрат, налагаемые на наших имеющихся ресурсов здравоохранения ^1. Распространенность ХСН в западном мире оценивается в 1-2%, из которых ~ 60% случаев являются следствием ОИМ как основной причины ^2. Только в США около 5,7 млн. пациентов страдают от CHF долю компании приходится около 30 миллиардов долларов в ежегодных расходов на здравоохранение в 2008 году, с предсказанной трех экземплярах расходов поднимаясь на 97 миллиардов долларов в год в 2030 году ^1. Взятые вместе, эти цифры сделать сильный аргумент в пользу разработка новых cardioregenerative лечения, которые, для быстрого перевода, полагаются на воспроизводимым и надежным большой животных миокарда модели инфаркта, который точно имитирует человеческий сценарий.

Свиньи (Sus SCROFA) все чаще используются в сердечноЛар исследования для фармакологических и токсикологических испытаний ^3. Одна из черт, ответственных за этот успех как поступательного исследовательского инструмента является их сходство в сердечной функции и анатомии с человеческим сердцем ^4,5. Например, сердца свиньи к телу весу, сердечная размер и ишемической распределение анатомия артерия все показали, чтобы быть удивительно похожа на парня ^4. Кроме того, кардиомиоциты метаболизм, электрофизиологические свойства и реакция на ишемического инсульта, таких как AMI, как сообщается, показывают высокий уровень согласованию с человеческой ситуации ^6,7. В конечном счете, для выполнения описанных выше критериев, стандартизированный MI-протокол, который производит надежной и стабильной MI для испытания исследуемых новых препаратов (IND) нужен. Здесь мы представляем такую ​​стандартную модель, которая использует 90 мин закрытые груди коронарной баллонной окклюзии левой передней нисходящей артерии (ПНА), а затем реперфузии, тем самым создавая воспроизводимую инфарктамиокарда, охватывающий anteroapical, Септальные и inferoseptal стены левого желудочка.

Protocol

Все естественных условиях эксперименты в были проведены в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных, подготовленных Институтом лабораторных животных ресурсов. Эксперименты были одобрены местным экспериментов комитета животных на.

1. Лекарства, Анестезия, венозного доступа, и интубации

1. Лекарства и Анестезия
   1. Премедикация
      1. Начните Амиодарон 150 мг / кг за 10 дней до операции, чтобы предотвратить аритмии. Продолжить амиодарон в дозе 100 мг / кг со дня процедуры, пока 28 день. Уменьшите дозу до 50 мг / кг на 29 день и продолжаются до конца исследования.
      2. Начните антитромбоцитарную терапию, 1 мг / кг клопидогреля от 3-й день до операции и 4,5 мг / кг ацетилсалициловой кислоты за 1 день до операции. Продолжить клопидогреля 1 мг / кг в день и ацетилсалициловой кислоты 80 мг / день.
      3. Начните обезболивающее 1 день до операции по фентанила, 25мкг / ч в течение ~ 70 кг свиней. Продолжить использование фентанила патчей в течение 24 часов после операции, чтобы обеспечить адекватное обезболивающее. Кроме того, ежедневно монитор на наличие признаков предполагаемого дискомфорта (т.е. поведение, дыхание, походка, мобильности и т.д.), чтобы увеличить обезболивающее.
      4. Быстрая животное в течение 12 часов, поддерживать неограниченный доступ к воде.
   2. Анестезия
      1. Для предотвращения ненужного стресса и дискомфорта, степенный свинью в ее стабильной внутримышечно смеси мидазолама 0,4 мг / кг, кетамин 10 мг / кг, и атропин 0,014 мг / кг.
      2. Получить венозного доступа путем cannulating ушной вены с 18 г в канюли. Вызвать анестезии внутривенным введением 5 мг / кг sodiumthiopental, и дать 1000/100 мг амоксициллин / клавулановой кислоты для предотвращения инфекции. Свинья получит 1000/100 мг амоксициллин / клавулановой кислоты на следующий день после операции, как лечение антибиотиками.
      3. Интубировать свинью с помощью endotrachEAL трубка (размер 8,5 для свиней весом ~ 70 кг). При необходимости выполнения баллон-вентиляцию с частотой 12/min и транспортировать свинью в операционную.
      4. По прибытии на операционную, сразу же начать механическую положительный вентиляцию давления с FiO ₂ 0,50, 10 мл / кг дыхательного объема и частоты 12/min нижним продолжает капнографии.
      5. Начните сбалансированных анестезии по-прежнему внутривенное вливание комбинации мидазолама 0,5 мг / кг / ч, суфентанил 2,5 мкг / кг / ч и панкурония бромида 0,1 мг / кг / час. Во время всей операции, постоянно следить за ЭКГ, артериальное давление, температуру и капнографии для измерения глубины анестезии. Например, если синусовая тахикардия присутствует, проверьте, если обезболивающее и / или анестезии являются адекватными.
      6. Наполните 4,3 мг / кг амиодарон в 500 мл 6% venofundin внутривенно.
      7. Монитор сердечного ритма с помощью 5 приводит ЭКГ.
      8. Бритье и очистить шеи и заднюю Нтб площадь.
      9. Вставьте катетер Фолея.

2. Трансторакальная эхокардиографии

1. Место животное в правильном положении на боку. В ландрас свиней, таких как Dalland свиней, только парастернальной просмотров (длинные и короткие ось) могут быть получены. Из-за формы грудной клетки, апикальный приобретение вид не представляется возможным.
2. Восток и получить парастернальной долгосрочную перспективу оси в 2D (B-режим). Определить размеры LV на конец диастолы и конечного систолы в М-режиме.
3. Поверните эхо датчику 90 ° по часовой стрелке, сохраняя свою парастернальной позиции по приобретению короткие взгляды оси LV на уровне митрального клапана, папиллярных мышц и верхушки. Короткая ось из папиллярной мышцы и вершиной может потребовать размещение эхо зонда один или два межреберные промежутки ниже по сравнению с положением на митрального клапана короткая ось.

3. Хирургическое Подготовка и сосудистого доступа

1. DisinFect хирургические области йодом 2% и использовать стерильные хирургические простыни, чтобы покрыть нестерильных части свиньи.
2. Сделайте медиальной разрез в области шеи. Pass белой линии, чтобы минимизировать повреждение мышц и прямо подойти к сонной артерии и внутренней яремной вены рядом с трахеи.
3. Тщательно изолировать сонной артерии и внутренней яремной вены. Убедитесь, что блуждающий нерв не поврежден. Наведите Vicryl 2-0 швов вокруг обоих судов, чтобы получить контроль сосудов. Достижение артериальное доступ по cannulating внутренней сонной артерии с оболочкой 8F используя технику Сельдингера. Закрепите оболочку к артерии, убедитесь, что артерия не полностью поглощается шва. Венозного доступа могут быть приобретены cannulating яремной вены с 9F оболочка также используя технику Сельдингера. Перед закреплением оболочка убедитесь, что вены лигируют. В качестве альтернативы, бедренной артерии также может быть использован для артериального доступа.
4. Администрирование 100 IE / кг гепарина сразу после установки оплеткиУГ в ингибируют образование тромба.
5. Для измерения стабильной и постоянной артериального давления, иглу один из небольших артерий в одной из задних конечностей, сделав небольшой надрез над артерии. Артерии находится непосредственно под кожей, пульсации может ощущаться через кожу. Изолировать артерию от окружающей его ткани. Место 2 Vicryl 2-0 швов вокруг судна, 1 ближний и 1 дистальнее. Лигируют дистальной стороны и вставить 18 г в канюли и закрепите плотно подключать давление.

4. Инвазивная Давление Анализ Объем Loop

1. Вставьте катетер Сван-Ганц (SG) с помощью ранее размещенных оболочки во внутренней яремной вены.
2. Подключите сердечной устройство вывода в части SG, который завершается в проксимальных просвета.
3. Введите 5 мл 0,9% раствора натрия хлорида в проксимальных просвета SG и измерить сердечный выброс; повторить это три раза и в среднем индексы.
4. Калибровка системы PV с помощью ранееопределяется сердечный выброс.
5. Вставьте проводимости катетер 7F через сонную артерию в левый желудочек под флуороскопа.
6. Выберите самый большой сегмент, присутствующий в нашем для измерения объема и выполнять базовое сканирование под апноэ.
7. После калибровки объем завершен, запись 10-15 бьет под апноэ.
8. Извлеките SG и место баллонного катетера в нижней полой вены на уровне диафрагмы под флюороскопии.
9. Выполните сокращение предварительной нагрузки, раздувая воздушный шар под апноэ и записать соответствующие PV-петли.

5. Внутрикоронарное измерения давления и расхода

1. Развести нитроглицерин в концентрации 100 мкг / мл и разбавить аденозин в концентрации 30 мкг / мл.
2. Позиционировать направляющий катетер 8F в устье левой коронарной артерии.
3. Поместите комбинированный провод давления / расхода в проксимальной части левой коронарной артерийу.
4. Администрирование 200 мкг нитроглицерина внутрикоронарного и нормализовать дистального давления (PD), измеренный проволоки, с артериальным давлением.
5. Поместите провод в средней части левой передней нисходящей артерии (ПНА).
6. Начните измерения базовой давления и расхода. Вызвать гиперемия путем введения 60 мкг аденозин внутрикоронарного, флеш с 2 мл физиологического раствора и измерить гиперемии давления и расхода. Подождите, пока поток для восстановления к исходным значениям. Повторите измерение в два раза.
7. Настаивать еще 200 мкг нитроглицерина внутрикоронарную и повторите шаги 1,6 и 1,7 для левой огибающей коронарной артерии.

6. Индукция ИМ

1. Поместите внутрисердечное дефибрилляции катетер в правом желудочке с помощью венозного оболочку. Дистальные электроды должны быть в вершине желудочка, проксимальных электродов в предсердии и / или повышенной полую вену. Подключите катетер для дефибриллятора и установить его на 50Дж.
2. Измерьте диаметр ЛАД дистальнее от второй диагонали (D2) в точке доступа и LAO 30 ° зрения.
3. Выберите баллонным с диаметром, зависящего от диаметра ЛАД дистальных от D2 (рис. 1).
4. Расположите проводник через направляющего катетера дистально в ЛАД.
5. Продвигайте баллонный катетер по проводнику. Поместите шар дистальнее от D2.
6. Администрирование 30 IE / кг гепарина.
7. Раздуть баллон, пока давление не соответствует правильный диаметр ЛАД.
8. Проверьте полной окклюзии ПНА по ангиографии (рис. 1).
9. Накройте стерильной рабочей поле и рану в области шеи с стерильных портьерам тканей. Освободите грудную клетку от любого покрытия, чтобы сделать его доступным для компрессии грудной клетки или трансторакальной дефибрилляции.
10. Проверьте давление в баллоне в течение следующего 90 мин и при необходимости восстановить давление.
11. В случае фибрилляции желудочков:
    1. Сразу начать непрямой массаж сердца с частотой 100/мин.
    2. Администрирование 300 мг амиодарон внутривенно в виде болюса быстром (~ 1 мин).
    3. Начните внутрисердечной дефибрилляции, дать потрясений 50 J.
    4. Через 5 неудачных потрясений, перезагрузите непрямой массаж сердца. Изменение внутрисердечной дефибрилляции в трансторакального дефибрилляции и шока с 150 J. В случае неудачной шока, изменить до 200 Дж.
    5. При необходимости, управлять еще одну дозу 150 мг амиодароном и / или 1 мг адреналина. Повторите адреналина дважды с интервалами 3-5 мин, когда это необходимо.
    6. Продолжить непрямой массаж сердца, чередующиеся с трансторакальной дефибрилляции

Отделочные хирургического вмешательства (на длительный срок исполнению)

1. После 90 мин проверка с помощью ангиографии, если ЛАД-прежнему полностью окклюзии.
2. Администрирование еще 30 IE / кг гепарина и выкачать воздушный шар. Проверьте реперфузии. Снимите спущенный воздушный шар с GUIDING катетер из сонной оболочкой.
3. Осторожно снимите артериальное оболочку и сразу зажать сонную артерию с анастомоза зажима (рис. 1). Использование продолжает стежки (6-0 PROLENE), чтобы закрыть сонную артерию. Снимите зажим и проверить на герметичность.
4. Снимите внутреннюю дефибрилляции катетер и снимите оболочку с внутренней яремной вены. Перевязывать проксимального вступления оболочки.
5. Закройте подкожного и кожу шеи в два слоя с использованием 2-0 викрил.

7. Сердечная Магнитно-резонансная томография

1. Место животное на стол главы МРТ сначала в положении лежа при непрерывном анестезии.
2. Поставьте посвященный фазированной антенной решеткой сердечной катушкой над груди животного.
3. Для планирования изображения получить разведчиков фотографий в короткой оси и двухкамерных видом длинной оси.
4. Приобретать ЭКГ-закрытого стационарного свободной прецессии (SSFP) киношный из короткой оси (от вершины до основания LV) и два Chambeг просмотров длинномерной.
5. Поздно повышение гадолиния (LGE) могут быть приобретены с помощью инверсии восстановление 3D-турбо-градиент-эхо-технику 15 мин после дважды дозы IV болюсного введения гадолиния основе контрастного вещества.
6. Выполните автономный анализ с подтверждены программного обеспечения функциональных параметров. Оценка левого желудочка фракция выброса (ФВ ЛЖ), массы ЛЖ, конечно-диастолический объем, конец объем систолического, ударного объема, сердечного выброса и рубцовой массы.

8. Конец исследования и инфаркта Размер

1. В конце исследования, следуйте Протоколы 1-5 и 7 по приобретению последующих мер измерения.
2. Сделать средний 30-40 см разрез от чуть ниже супрастернальные ступень до уровня чуть ниже мечевидного отростка. Заранее через белой линии вниз к грудине. Сплит мечевидного и использовать Клинкенберг ножницы, чтобы отделить заднюю грудины от перикарда с осторожностью. После использования ножниц тупо продолжать дальнейшее разделение. Выполните Стернотомия бу например с помощью молотка и Lebsch нож. Кровотечение костного мозга сводится к минимуму, потерев кости воска на мозге. Откройте грудную клетку с грудины втягивающим.
3. Введите третью плевральную полость и найдите нижней полой вены в средостения.
4. Гуманно усыпить животное, сокращая нижней полой вены под глубоким наркозом. Удалить кровь с всасывающим устройством. Поместите батареи 9 В на вершине, чтобы вызвать фибрилляции желудочков.
5. После удаления сердца, вырезать правого и левого желудочка на пять ломтиков от основания к вершине, и инкубировали в 1% хлорида трифенил-тетразолия, растворенного в 0,9% солевом растворе при 37 ° С в течение 15 мин. Затем промыть ломтики в 0,9% солевом растворе и сфотографировать ломтики с обеих сторон.

Representative Results

Смертность и инфаркта Размер

В нашем центре, из 32 свиней (женщина Dalland ландрас, 6 месяцев, ~ 70 кг), подвергшихся этим протоколом М.И., пять (15,6%) умерли от огнеупорной фибрилляции желудочков при ишемии. Этот протокол создает инфаркт, охватывающий примерно 10-15% левого желудочка, расположенный в передне, перегородки и inferoseptal стены (рис. 2а). Если серийный неинвазивной оценки размера инфаркта является оправданным, в конце гадолинием (LGE) на CMR могут быть использованы следовать нежизнеспособных область инфаркта в течение долгого времени (фиг.2В).

Сердечной функции и реконструкция

Через четыре недели после ИМ, глобальные и региональные параметры, отражающие функции сердца должна быть снижена по сравнению со здоровыми исходных значений. В частности, фракция выброса ЛЖ (ФВ ЛЖ) должна уменьшаться примерно ~ 35-45% четыре недели после MI. Кроме глобального систолической функцией,несколько параметров, отражающих после ИМ негативное ремоделирование также может быть измерена, например, морфологии и диаметров с использованием CMR и эхокардиографию (фиг.3А и 3В) ЛЖ. Через четыре недели после MI, увеличение конечного диастолического объема (КДО) в знак неблагоприятного ремоделирования можно ожидать (фиг. 3A и 3B).

Коронарного кровотока и давления параметры

Ангиогенез и образование новых капилляров часто рассматриваются в качестве важных целей лечения при ишемической болезни сердца ^8. Оценка сопротивления микрососудов может быть косвенно на основе комбинированного измерения интракоронарного давления и скорости потока. Представитель давления и измерение скорости потока при нормальных условиях и максимальная гиперемия показано на рисунке 4. Через четыре недели после ИМ, гиперемирована сопротивление микрососудов должна быть увеличена в инфаркт коронарной артерии (ПНА) по сравнениюк исходной ситуации ^8.

. Рисунок 1 модель MI (А) на основе ЛАД баллонной окклюзии Standard хирургическое оборудование с:. 1) зажимов для полотенец; 2) комары; 3) диссекционные; 4) круглые контейнеры; 5) иглодержатели (штраф и грубая); 6) Клинкенберг ножницами; 7) рассекает ножницы (прямые и изогнутые); 9) Щипцы (Де-Бейки, штраф и грубая); 10) хомут; 11) анастомоза зажим; 12) сеток; 13) электрохирургическое карандаш; 14) держатель скальпель; 15) Dreesman (всасывание); 16) втягивающее; 17) патроны. (В) левой передней косой рентгеноскопии вид на LAD и LCX. (C) После визуализации второй диагональной ветви, разместить две рентгеноконтрастные маркеры (см. вставку, черные стрелки) от воздушного шара просто дистально от D2. Надувныее и убедитесь, что коронарный кровоток успешно заблокирован инъекции контрастного (см. звездочку). Внутрисердечный дефибриллятор свинец можно увидеть в правом желудочке (см. стрелку белый). ЛАД обозначает левой передней нисходящей артерии; LCX обозначает левой огибающей артерии; ЛАО обозначает левой передней косой взгляд; AP обозначает переднюю вид задней; D1 обозначает первую диагональную ветвь; D2 обозначает вторую диагональную ветвь. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.

Рисунок 2. Размер инфаркта после ИМ. (А) 90 мин шар окклюзия ЛАД приводит к обширным поражением миокарда и образования рубца (белый цвет), визуализировали окрашиванием TTC через 1 месяц наблюдения.(B) Схематическое распределение показывает, что инфаркт миокарда расположен в передней, передне-и inferoseptal сегменты сердца. (С, D) Короткая и длинная ось поздно гадолиния усовершенствованные изображения CMR показать обширную шрам инфаркта (белый сигнала, см. черные стрелки), локализованных в передней, передне-и inferoseptal сегментах сердца. LGE-CMR обозначает поздний гадолиния повышенную сердечную магнитный резонанс. Масштаб черта означает 3 см. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.

Рисунок 3. Оценка функции сердца при ишемической моделей ИМ. (A) представитель CMR кино-петли изображения в конце диастолы и конечного систолы показывающие функциональные нарушения в инфARCT шрам сегменты. (В) М-режим образ 2D парастернальной длинной оси по эхокардиографии, показывая дилатации ЛЖ (увеличение LVIDd) через 1 месяц после ИМ, а также функциональные нарушения (отсутствие перегородки утолщение). КДО обозначает конечную объем диастолического; ESV обозначает конечную объем систолического; LVIDd обозначает левого желудочка внутренний диаметр в диастолу и LVIDs обозначает левого желудочка внутренний диаметр в систолу. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.

Рисунок 4. Внутрикоронарное давление и скорость потока происходит параметры. Внутрикоронарное давления и записи скорости потока с помощью Combowire показывая (А) справочные значения до ИМ с высокими которая несетэ к гиперемии (черный стрелки). (B) через 1 месяц после ИМ, инфаркт ответственной артерии (ЛАД) имеет пониженную гиперемии ответ в скорости коронарного кровотока (черные стрелки). В результате, давление и скорость потока, полученные параметры (HMR) или резервные скорость потока (CFR) уменьшаются по сравнению с базовым. bAPV обозначает базальной средний пиковой скорости; pAPV обозначает пиковую среднюю пиковую скорость; CFR обозначает коронарного резерва; HMR обозначает гиперемии сопротивление микрососудов. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.

Рисунок 5. Обзор различных конструкций исследования. (А) Схематическое нескольких возможных конструкций исследования для подтверждения исследуемых новых препаратов(INDS) на различных стадиях ИМ использующих данную модель, ЛАД MI свиньи. В зависимости от выбранного этапа ИМ, который находится под следствием, функциональный анализ может выполняться только до распределения лечения в качестве исходного значения и оценки зоны риска. Кликните здесь, чтобы посмотреть увеличенное изображение.

Discussion

Внутрикоронарное баллон окклюзия LAD обеспечивает воспроизводимое и последовательное доклинической модели MI у свиней, которые могут быть использованы для исследования безопасности и эффективности новых сердечно-сосудистых терапии, которые точно имитирует человеческую ситуацию. Как показано на фиг.5, представлена ​​модель миокарда ишемией / реперфузией обеспечивает платформу, которая может быть дополнительно с учетом исследовать различные фазы инфаркта миокарда и пост-MI ремоделирования в то время как начальная травма ишемией / реперфузией одинакова для обоих.

Успех описанного протокола, изложенной здесь зависит от ишемии миокарда, как наиболее острой фазы протокола. Правильное расположение баллона дистальнее второй диагональной ветви ПМЖВ имеет решающее значение для достижения адекватного размера инфаркта в то время как обеспечение высокого выживаемость. На основе этой модели М. И., скорость ~ смертности 15% наблюдался, в то время как обширные середине и верхушечные сегменты передней, септальной и инфериили стены инфаркта, как видно на CMR и окрашивания ТТС (фиг.2А и 2В). Продолжительность ишемии может быть адаптирована в соответствии с желаемым размером инфаркта. Хотя мы использовали ландрас свиней в данном протоколе, карликовых свиней (т.е. Геттинген карликовых свиней), как правило, требуют более длительного продолжительности ишемии миокарда (например, 150 мин окклюзии).

Анализ результат в доклинических и клинических исследований ИМ часто основывается на ФВ ЛЖ. Хотя ниже ФВ ЛЖ была прочно ассоциируется с повышенным риском для сердечно-сосудистой смертности, она остается зависимой от гемодинамических параметров, таких как преднагрузки ^9. Можно утверждать, что, учитывая, что в среднем только 10-15% от РН инфаркта, несколько концептуальные и практические ограничения, связанные с ФВ ЛЖ будучи глобальной мерой систолической функции ЛЖ, а не отражает местную улучшение ^10. Таким образом, предлагаемые меры исхода, используемого в этой модели пролить свет на различные аспекты М.И. и пост-MI ремоделирования тем самым обеспечивая следователи средства для точной оценки эффективности новых методов лечения на нескольких уровнях.

Для оптимизации перевод от доклинических моделях в клинической практике, мы выбираем с использованием больших свиней вместо карликовых свиней. Гемодинамические измерения, лекарства дозы и хирургические устройства могут быть легко обмениваться с клинической практике. По сравнению с карликовых свиней, большие свиньи получить относительно большой вес. Это может привести к проблема в долгосрочной перспективе следить, в отношении сопоставимости серийных результатов. Женский Dalland ландрас свиней весят приблизительно 70 кг в возрасте 6 месяцев. Для предотвращения обильные увеличение веса во время последующего периода, животные содержатся на ограниченной диеты. Свиньи получать 750 г на заказ еды низкокалорийного (содержащее: белки 15,6%, жиры 2,0%, волокна 14,8%, пепел 8.8%, кальций 0,9%, фосфор 0,57%, магний 0,29% и калий 0,18%), два раза в день и получить около 10 кг веса в течение 4 недель.

e_content "> Макколл и его коллеги ранее опубликовал аналогичный протокол для инфаркта миокарда у свиней ^11. значительное совпадение существует между этим протоколом и их, подчеркивая предпочтение ЛАД, а не левой огибающей артерии (LCX) или правой коронарной артерии (RCA ). По нашему опыту, существует меньшая степень размера инфаркта от общего левого желудочка с помощью LCX в то время как RCA миокарда сопровождается повышенной вероятностью нежелательных нарушения проводимости (т.е. дисфункции синусового узла, AV-узла дисфункции). Одно из различий между два протокола относится к применению повышенного торможения фармакологической тромбоцитов в этом протоколе, как мы видели более высокие темпы не-оплавления на основе тромбообразования в результате 90 мин гемостаза в закупоренной коронарной артерии. Это наблюдение согласуется с Известно, гиперкоагуляция наблюдается у свиней ^12. Несмотря на то, Макколл предложил использовать единый, высокие дозы, болюс гепарина, Тхис Протокол основан на использовании гепарина в нескольких более низких дозах распространяются по всему операции, чтобы минимизировать тромботических осложнений.

Таким образом, мы представляем свиной MI модель, которая позволяет исследователям использовать эффективной, воспроизводимым и, прежде всего практической большой животной модели заболевания человека для изучения новых терапевтических качестве важного шага на пути к первой-в-человека клинических испытаний.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.9% Saline	Braun
6-0 Prolene	Ethicon
Acetylsalicylic acid	Ratiopharm		80 mg
Adenosine	Apotheek UMCU		3 mg/ml
AdVantage PV loop system	Transonic Science
Amiodarone	Cordarone I.V. (Sanofi)
Amiodaron HCl (PCH)
Amoxicilline/clavulaanzuur	Sandoz		500/50 mg
Atropinesulfate	PCH		0.5 mg/ml
Bone Marrow Wax	Syneture
Cardiac Defibrillator	Philips
Clopidogrel	Apothecon B.V.		Clopidrogel 75A
Contrast agent	Telebrix
Endotracheal tube	Covidien
Fentanyl patch	Durogesic (Janssen-Cilag)		25 μg/hr
Fogarty catheter	Edwards Life Sciences
Gadolinium	Gadovist
Guidewire	Abbott
Heparin	Leo
I.V. cannula	Abbocath (Hospira Venisystems)
Iodine	Jodiumtictuur 2% (Eurovet)
Ketamine	Narketan 10 Vétoquinol
Midazolam	Actavis		5 mg/ml
Nitroglycerin	Pohl Boskamp		1 mg/ml
Pancuronium bromide			2 mg/ml
Seldinger vascular sheath 8F	Arrow
Sufentanil	Sufentanil-Hameln		50 μg/ml
Swann-Ganz catheter	Criticath ref 680078 (Argon)
Synolux	Pfizer		250 mg
Tetra-polar catheter	Transonic Science
Thiopental	Inresa		0.5 g
Triphenyl-tetrazolium chloride	Merck
Venofundin	Braun
Vicryl 2-0	Ethicon
Volcano ComboMap system	Volcano