Domuzlar miyokard enfarktüsü ve Fonksiyonel Sonuç Değerlendirmesi

Summary

Bu protokol reperfüzyon ile sol ön inen arter (LAD) bir 90 dakika kapalı göğüs koroner balon oklüzyon kullanarak domuz miyokard infarktüsü (Mİ) modeli anlatılmaktadır. Ayrıca, bu tür kalp fonksiyonu, hemodinamikler, mikrovasküler direnci ve enfarkt boyutu gibi birçok parametrelerde için protokol de sunulmaktadır.

Abstract

Ilk-in-man denemeler içine yeni keşfedilen kardiyovasküler terapötik tanıtımı kesinlikle düzenlenmiş etik ve yasal yol haritası bağlıdır. Bir önemli ön koşul geçerli olarak miyokard infarktüsü (Mİ), insan senaryoyu yansıtan büyük bir hayvan modelinde elde edilen tüm güvenlik ve etkililiği konularında iyi bir anlayış. Onların kalp büyüklüğü, hemodinamik ve koroner anatomi insanlarınkine yakın olduklarından Domuzlar yaygın olarak bu konuda kullanılmaktadır. Burada, reperfüzyon ardından arter (LAD) sol ön inen bir kapalı göğüs balon koroner oklüzyon kullanılarak domuz MI modeliyle için etkili bir protokol mevcut. Bu yaklaşım, anterior, septal ve inferoseptal duvarların bir sol ventrikül enfarktüsü uyaran, miyokardiyal iskemi, 90 dakika dayanır. Ayrıca, kardiyak sistolik ve diyastolik fonksiyonu, hemodinami gibi kalp üzerinde geniş bir bilgi yelpazesi sunmak sonucu çeşitli önlemler için protokolleri mevcutcs, koroner akım hızı, mikrovasküler direnç ve enfarktüs boyutu. Bu protokol, kolayca farklı aşamalarında roman cardioregenerative biyolojiklerin doğrulama (yani doğrudan akut iskemik ataktan sonra, subakut ortamda ya da kronik MI skar oluşumu tamamlandıktan sonra) için özel gereksinimleri çalışma karşılamak için tasarlanmış olabilir. Bu model, bu nedenle, bir MI incelemek için yararlı bir araç translasyon, daha sonra ters yeniden ve yeni cardioregenerative ajanların potansiyel sağlar.

Introduction

Akut miyokard infarktüsü (AMI) ve kronik kalp yetmezliği (CHF) olarak uzun süreli sekeller derinden hasta prognozu ve yaşam kalitesini etkileyebilir, yalnız bizim mevcut sağlık kaynakları ¹ dayatılan yüksek maliyet sınırlamalar. Batı dünyasında CHF yaygınlığı vakalarının% 60 birincil nedeni ² olarak AMI sonucudur ~ olan,% 1-2 olarak tahmin edilmektedir. Sadece ABD'de yaklaşık 5,7 milyon hasta ^1. Birlikte ele alındığında, bu rakamlar için güçlü bir argüman 2030 yılda 97000000000 $ yükselen maliyetlerinin öngörülen üç kopya ile, 2008 yılında yıllık sağlık maliyeti yaklaşık 30 $ milyar muhasebe CHF muzdarip , hızlı çeviri için doğru, insan senaryoyu taklit eden bir tekrarlanabilir ve güvenilir büyük hayvan miyokard infarktüsü modeline güveniyor yeni cardioregenerative tedavilerin geliştirilmesi.

Domuzlar (Sus scrofa) artan kardiyovasküler kullanılmaktadırfarmakolojik ve toksikolojik test ³ için lar araştırma. Bir öteleme araştırma aracı olarak bu başarı sorumlu özelliklerinden biri insan ^{kalbi, 4,5} ile kalp fonksiyonu ve anatomi kendi benzerlik olduğunu. Örneğin, domuz kalp-to-vücudun ağırlık oranı, kalp boyutu ve koroner arter anatomisi dağıtım tüm ⁴ insana oldukça benzer olduğu gösterilmiştir. Ayrıca, kardiyomiyosit metabolizması, elektrofizyolojik özellikleri ve bu AMI gibi bir iskemik hasara yanıt insan ^{durum, 6,7} ile uyumlu yüksek düzeyde göstermek için bildirilmiştir. Sonuçta, araştırılan yeni ilaçlar (IND) test için sağlam ve sürdürülebilir MI needed edilir üreten bir standart MI-protokol yukarıda açıklanan kriterleri yerine getirmek. Burada, biz böylece tekrarlanabilir miyokardiyal oluşturarak, reperfüzyon ile sol ön inen arter (LAD) bir 90 dakika kapalı göğüs koroner balon oklüzyon kullanan böyle bir standart model sunuyoruzfarction anteroapikal, septal ve sol ventrikül inferoseptal duvarlarını kaplayan.

Protocol

All in vivo deneyler Laboratuar Hayvan Kaynakları Enstitüsü tarafından hazırlanan Laboratuar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı için Kılavuzu'na uygun olarak yapılmıştır. Deneyler Yerel Hayvan Deneyleri Komitesi tarafından onaylandı.

1.. İlaçlar, Anestezi, Venöz Erişim ve Entübasyon

1. İlaç ve Anestezi
   1. Premedikasyon
      1. Amiodaron 150 mg / Başlat aritmileri önlemek için 10 gün önce ameliyat kg. 28 gün. 29. günde 50 mg / kg doz azaltmak ve çalışmanın sonuna kadar devam kadar prosedürün gün ila 100 mg / kg 'lık bir dozda amiodaron devam edin.
      2. Anti-trombosit tedavi, 1 mg / ameliyattan önce günde 3 kg klopidogreli ve 4.5 mg / kg, ameliyattan önce asetilsalisilik asit 1 güne başlayın. Klopidogrel gün ve asetilsalisilik asit 80 mg / günde 1 mg / kg devam edin.
      3. Başlangıç ​​ağrı ilaç 1 gün ameliyattan önce Fentanil yama ile, 25~ 70 kg domuz ug / sa. ' Yeterli ağrı ilaç sağlamak için 24 saat post-operatif için Fentanil yamalar kullanımına devam. Ayrıca, varsayılan rahatsızlık belirtileri ağrı ilaç artırmak için (yani davranış, solunum, yürüme, hareketlilik, vb) günlük monitör.
      4. 12 saat boyunca hayvan oruç, suya sınırsız erişim sağlamak.
   2. Anestezi
      1. Gereksiz stres ve rahatsızlığı önlemek için, midazolam 0.4 mg / kg ketamin 10 mg / kg, ve atropin 0.014 mg / kg 'lik bir karışımının kas içi enjeksiyon ile istikrarlı olarak domuz sakinleştirici.
      2. 18 G iv kanül ile kulak ven cannulating venöz erişim elde. 5 mg / kg sodiumthiopental intravenöz ile anestezi neden, ve enfeksiyonları önlemek için 1,000 / 100 mg amoksisilin / klavulanik asit verir. Domuz antibiyotik tedavisi gibi cerrahi sonrası gün 1000/100 mg amoksisilin / klavulanik asit alacaksınız.
      3. Bir endotrach kullanarak domuz entübeeal tüp (boy ~ 70 kg ağırlığındaki domuzlar için 8.5). Gerekirse 12/min bir frekans ile balon-havalandırma gerçekleştirmek ve faaliyet tiyatroya domuz taşımak.
      4. Ameliyathane üzerine varış, hemen _FiO2 0.50, 10 ml / kg tidal volüm ile mekanik pozitif basınçlı ventilasyon başlar ve 12/min under frekans Kapnografi devam ediyor.
      5. İşlem için 0.5 mg / kg / saat, sufentanil 2.5 mikrogram / kg / saat ve pankuronyum bromid, 0.1 mg / kg / st 'lik bir arada intravenöz infüzyonu devam dengeli bir anestezi başlayın. Tüm operasyon sırasında sürekli EKG, anestezi derinliğini ölçmek için arteriyel kan basıncı, sıcaklığı ve Kapnografi izlemek. Bir sinüs taşikardisi varsa ağrı kesici ve / veya anestezi yeterli Örneğin, kontrol edin.
      6. Intravenöz% 6 venofundin 500 ml amiodaron 4.3 mg / kg 'infüze.
      7. Bir 5 kalp ritmini izlemek EKG yol açar.
      8. Boyun ve arka lim tıraş ve temizb alanı.
      9. Foley kateter yerleştirin.

2.. Transtorasik Ekokardiyografi

1. Sağ lateral pozisyonda hayvan yerleştirin. Böyle Dalland domuzlar gibi landrace domuzlarda sadece Parasternal görünümleri (uzun ve kısa eksen) elde edilebilir. Nedeniyle toraks şekline, apikal görünüm elde etme uygun değildir.
2. Orient ve 2D (B-mod) parasternal uzun eksen görünümü edinin. M-modda son diastole ve bitiş sistol de LV boyutlarını belirleyin.
3. Mitral kapak papiller kas ve apeks düzeyde LV kısa eksen görüşlerini elde etmek için onun Parasternal konumunu korurken yankı sonda 90 ° saat yönünde döndürmek. Papiller kas ve apeks kısa eksen görünümü yankı prob yerleştirilmesi gerekebilir mitral kapak kısa eksen görünümü için konumuna göre daha düşük bir veya iki interkostal boşluk.

3. Cerrahi Hazırlık ve Damar Girişi

1. Disiniyot% 2 ile cerrahi alanları fect ve domuz steril olmayan kısımlarını örtecek şekilde steril bir cerrahi örtü kullanın.
2. Boyunda bir medial kesi yapmak. Kas hasarı en aza indirmek ve açık açık karotis arter ve trakea yanında juguler ven yaklaşım linea alba geçmek.
3. Dikkatle karotid arter ve juguler ven izole. Vagus sinir hasarsız olduğundan emin olun. Damar kontrolünü kazanmak için her iki damarlarının etrafında vicryl 2-0 sütür koyun. Seldinger tekniği kullanılarak 8F kılıf ile internal karotis arter cannulating arteriyel erişimini sağlamak. Artere kılıf Fix arter tamamen sütür tarafından tıkalı olmadığından emin olun. Venöz erişim bir 9F kılıf da Seldinger tekniği ile şah damarını cannulating tarafından elde edilebilir. Kılıf emin olun güvence önce damar bağlanır. Seçenek olarak ise, femoral arter, arter erişim için kullanılabilir.
4. Hemen kılıf ile kaplanırlar taktıktan sonra 100 IE / kg heparin uygulayıntrombüs oluşumunu inhibe etmek için hs.
5. Istikrarlı ve sürekli tansiyon ölçümü için, arter üzerinde küçük bir kesi yaparak arka bacaklarda birinde küçük arterlerin birini cannulate. Arter derinin hemen altında bulunan, pulsasyonları deri yoluyla hissedilebilir. Onun çevresindeki dokudan arteri izole. Geminin yaklaşık 2 vicryl 2-0 sütür, 1 proksimal ve 1 distal yerleştirin. Distal tarafı bağlanır ve 18 G iv kanül takın ve baskı bağlayın sıkıca sabitleyin.

4. İnvaziv Basınç Hacim Döngüsü Analizi

1. Juguler ven önceden yerleştirilen kılıf üzeri Swann-Ganz kateter (SG) takın.
2. Proksimal lümen içinde doruğa SG kısmına bir kardiyak çıkış aygıtı bağlayın.
3. SG proksimal lümen içine% 0.9 serum fizyolojik 5 ml enjekte edilir ve kardiyak output ölçümü; Bu üç kez tekrarlayın ve endeksleri ortalama.
4. Önceden kullanarak PV sistem kalibresaptanan kardiyak çıktı.
5. Floroskopi altında sol ventrikül içine karotis arter yoluyla 7F iletkenlik kateter yerleştirin.
6. Hacim ölçümleri için LV büyük segment mevcut seçin ve bir temel apnesi altında tarama gerçekleştirin.
7. Hacim kalibrasyon tamamlandıktan sonra, rekor 10-15 apnesi altında yener.
8. Kaldır SG ve floroskopi altında diyafram seviyesinde alt kaval ven bir balon kateter yerleştirebilir.
9. Apne altında balon şişirme preload azalma gerçekleştirin ve gelen PV-Loops kaydedebilirsiniz.

5.. İntrakoroner Basınç ve Debi Ölçümü

1. Ml 100 ug / konsantrasyonunda nitrogliserin seyreltin ve 30 ug / ml 'lik bir konsantrasyonda adenozin seyreltin.
2. Sol koroner arter ostiyumunda 8F kılavuz kateter yerleştirin.
3. Sol koroner arterin proksimalinde kombine basınç / akım teli yerleştiriny.
4. Nitrogliserin intrakoroner 200 ug yönetme ve arter basıncı ile, tel ile ölçülen distal basınç (Pd), normalize.
5. Sol ön inen arter (LAD) orta kısmında teli yerleştirin.
6. Bazal basınç ve debi ölçümü başlatın. Tuz 2 ml ile aynı hizada adenozin Intrakoroner ile 60 ug verilerek hiperemi neden ve hiperemik basıncını ve akışını ölçmek. Başlangıç ​​değerlerine geri akışı için bekleyin. Iki ölçümü tekrarlayın.
7. Başka bir 200 mikrogram nitrogliserin intrakoroner aşılamak ve tekrar sol sirkumfleks koroner arter için 1.6 ve 1.7 adımları.

MI 6. İndüksiyon

1. Venöz kılıf kullanarak sağ ventrikül intrakardiyak defibrilasyon kateter yerleştirin. Distal elektrotlar ventrikül apeks, atriyum ve / veya daha kaval damar yakın elektrotlar olmalıdır. Defibrilatöre kateter bağlayın ve 50 olarak ayarlayınJ.
2. İkinci AP (D2) diyagonal ve Lao 30 ° görünümünden LAD distalinde çapını ölçün.
3. D2'den LAD distal (Şekil 1) çapına göre bir çapı olan bir anjiyoplasti balonu seçin.
4. Distale LAD kılavuz kateter yoluyla bir kılavuz tel yerleştirin.
5. Kılavuz tel üzerinden balon kateteri. D2 gelen balon distalinden yerleştirin.
6. 30 IE / kg heparin yönetmek.
7. Basınç LAD sağ çapına kadar balonu şişirmek.
8. Anjiyografi ile LAD tam tıkalı (Şekil 1) kontrol edin.
9. Steril çalışma alanını ve steril örtüler bezler ile boyun yarayı örtün. Göğüs kompresyonu veya transtorasik defibrilasyon için kullanılabilir yapmak için herhangi bir kapsama göğüs özgür.
10. Sonraki 90 dakika boyunca balonunda basıncını kontrol edin ve gerekirse basıncını geri.
11. Ventriküler fibrilasyon durumda:
    1. Hemen 100/dk bir frekans ile göğüs masajına başlayın.
    2. Hızlı bolus (~ 1 dak) olarak intravenöz 300 mg amiodaron yönetmek.
    3. Intrakardiyak defibrilasyon başlayın, 50 J. şokları vermek
    4. 5 başarısız şoklara sonra, göğüs kompresyonu yeniden başlatın. Başarısız şok durumunda 150 J. ile transtorasik defibrilasyon ve şok intrakardiyak defibrilasyon değiştirin, 200 J. değiştirmek
    5. Gerekirse, 150 mg amiodaron gibi ilaçlar ve / veya 1 mg adrenalin bir doz tatbik. Gerekli 3-5 dakika aralıklar ile iki kere adrenalin tekrarlayın.
    6. Transtorasik defibrilatör ile serpiştirilmiş göğüs masajına devam

Cerrahi Prosedür Terbiye (Uzun Süreli Takip Up)

1. Anjiyografi ile 90 dakika onay LAD hala tam tıkalı ise sonra.
2. Başka bir 30 IE / kg heparin yönetmek ve balon deflate. Reperfüzyon için kontrol edin. GUID ile Sönük bir balon çıkarıncarotica'nın gelen kateter ing.
3. Dikkatle arteriyel kılıfı çıkarın ve bir anastomoz kelepçe (Şekil 1) ile hemen karotis arter kelepçe. Kullanım karotis arter kapatmak için dikiş (6-0 prolen) devam ediyor. Kelepçeyi çıkarın ve sızıntı açısından kontrol edin.
4. Dahili defibrilasyon kateteri çıkarın ve juguler venden kılıfı çıkarın. Kılıf giriş ligate yakın.
5. 2-0 Vicryl kullanarak iki kat boyun deri altı ve deri kapatın.

7. Kardiyak Manyetik Rezonans Görüntüleme

1. Sürekli anestezi altında sırtüstü yatar pozisyonda ilk MRG tablo kafasına hayvan yerleştirin.
2. Hayvanın göğüs üzerinde bir adanmış fazlı dizi kardiyak bobin yerleştirin.
3. Görüntü planlaması için kısa eksen ve iki odacıklı uzun eksen görünümlerinde izci görüntüler elde.
4. EKG-kapılı kararlı durum serbest devinim kısa ekseni (SSFP) cine (apeks LV tabanına) ve iki Chambe Edinmeuzun eksen bakıldı r.
5. Geç gadolinyum (LGE) bir inversiyon kurtarma 3D-turbo-gradyan-eko-teknik gadolinyum bazlı kontrast madde çift doz iv bolus enjeksiyondan sonra 15 dakika kullanılarak elde edilebilir.
6. Fonksiyonel parametrelerin geçerliliği yazılımı ile çevrimdışı analiz gerçekleştirin. Sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu (LVEF), LV kitle, diyastol sonu hacmi, sistol sonu hacmi, strok hacmi, kardiyak output ve skar kitle değerlendirin.

Çalışma ve Enfarktüs Boyutu 8. Sonu

1. Çalışmanın sonunda, takip ölçümleri elde etmek Protokolleri 1-5 ve 7 izleyin.
2. Sadece kılıç şeklinde bir süreç altında bir noktaya sadece suprasternal aşağıdan medyan 30-40 cm kesi olun. Sternum aşağı linea alba ilerlemek. Kılıç şeklinde bölünmüş ve dikkatli perikarttan posterior sternumu ayırmak için Klinkenberg makas kullanın. Açık açık makas kullandıktan sonra tekrar ayrılmasını devam ediyor. Bir sternotomi b gerçekleştiriny, örneğin, bir çekiç ve Lebsch bıçak kullanarak. Kemik iliği kanama iliği kemik balmumu sürtünme minimize edilir. Bir sternum ekartör ile göğüs kafesi açın.
3. 3. plevral boşluk girin ve mediastende alt kaval ven bulun.
4. Insanca derin anestezi altında alt kaval ven keserek hayvan euthanize. Bir emme cihazı ile kan çıkarın. Ventriküler fibrilasyona yol için apeks üzerinde 9 V pil yerleştirin.
5. Kalbin eksizyonu, sağ kesilmiş ve tepe tabanından beş dilimler halinde sol ventrikül ve 15 dakika boyunca 37 ° C 'de% 0.9 tuzlu su içinde çözülmüş% 1 trifenil tetrazolyum klorid-inkübe edildi. Daha sonra,% 0.9 tuzlu su içinde dilimleri yıkayın ve her iki taraftan dilimleri fotoğraf.

Representative Results

Ölüm ve Enfarktüs Boyutu

Merkezimizde, bu MI protokol, beş (% 15.6) tabi tutuldu 32 Domuzlar (6 aylık Kadın Dalland Landrace, ~ 70 kg) üzerinden iskemi sırasında nedeniyle refrakter ventriküler fibrilasyona öldü. Bu protokol anteroseptal, septal ve inferoseptal duvarları (Şekil 2A) bulunan sol ventrikül yaklaşık% 10-15 kapsayan infarktusunden oluşturur. Enfarkt boyutu seri invaziv olmayan değerlendirme garanti edilir ise, CMR geç gadolinyum (LGE) zamanla cansız enfarktüs alanı (Şekil 2B) takip etmek için kullanılabilir.

Kardiyak Fonksiyon ve Tadilat

Dört hafta sonra MI, kardiyak fonksiyonunu yansıtan, küresel ve bölgesel parametreleri sağlıklı başlangıç ​​değerlerine göre azaltılmalıdır. Özellikle, LV ejeksiyon fraksiyonu (EF), yaklaşık ~% 35-45, dört hafta post-MI düşmelidir. Küresel sistolik fonksiyonu yanında,MI sonrası ters yeniden yansıtan çeşitli parametreler, aynı zamanda, LV morfolojisi ve CMR ve ekokardiyografi (Şekiller 3A ve 3B) kullanılarak çapları olarak ölçülebilir. MI, olumsuz yeniden bir işareti olarak diyastol sonu hacmi (DSH) bir artış beklenebilir dört hafta sonra (Şekil 3A ve 3B).

Koroner akım ve basınç parametreleri

Anjiyojenez ve yeni kılcal damarların oluşumu, genellikle iskemik kalp hastalığı ⁸ önemli tedavi hedefleri olarak kabul edilmektedir. Mikrovasküler direncinin değerlendirilmesi dolaylı içi basınç ve akış hızının kombine ölçümüne dayalı olabilir. Koşulları ve maksimal hiperemi, normal basınç altında Örnek ve akış hızı ölçüm Şekil 4 'de gösterilmiştir. Dört hafta MI sonrası, hiperemik mikrovasküler direnç karşılaştırıldığında enfarktüs ile ilgili koroner arter (LAD) olarak artırılmalıdırmevcut durum ^8.

. Şekil 1 MI modeli LAD balon tıkanıklığı dayanarak (A) Standart cerrahi aletler: 1). Havlu kelepçeler; 2) sivrisinek; 3) diseksiyon forseps; 4) yuvarlak kap; 5) iğne tutucular (ince ve kaba); 6) Klinkenberg makas; 7) makas diseksiyon (düz ve kavisli); 9) forseps (De-Bakey, ince ve kaba); 10) hortum kelepçesi; 11) anastomoz kelepçe; 12) tüller; 13) elektro kalem; 14) neşter tutucu; 15) Dreesman (emme); 16) geri çekme; 17) lamba tutucular. (B) LAD ve LCX anterior oblik floroskopi Görünüm Sol. (C) ikinci diyagonal dalı görselleştirme sonra, sadece distale D2 balonun iki radyoopak işaretleyiciler (inset bakın, siyah ok başları) yerleştirin. Inflate ve koroner kan akım başarıyla (yıldız bakınız) kontrast enjeksiyonu ile bloke olduğundan emin olun. Intrakardiyak defibrilatör kurşun (beyaz ok ucu bakınız) sağ ventrikül görülebilir. LAD Sol ön inen arter gösterir; LCX sol sirkumfleks arter gösterir; LAO sol ön oblik görünümü gösterir; AP anterior posterior görünümünü gösterir; D1 birinci diyagonal dal gösterir; D2 ikinci diyagonal dal gösterir. resmi büyütmek için buraya tıklayın.

MI sonrası Şekil 2. Enfarktüs büyüklüğü. (A) LAD 90 dakika balon oklüzyon takip 1 ay TTC boyama tarafından görüntülenmiştir geniş miyokard hasar ve skar oluşumu (beyaz renk), yol açar.(B) şematik enfarktüs dağıtım enfarktüsü, ön kalbin anteroseptal ve inferoseptal segmentleri yer aldığını göstermektedir. (C, D) Kısa ve uzun aks geç gadolinyumdan gelişmiş CMR görüntüleri anterior, kalp anteroseptal ve inferoseptal segmentlerinde lokalize geniş infarkt skar (beyaz sinyal, siyah ok uçları bakınız) göstermektedir. LGE-CMR geç gadolinyum gelişmiş kardiyak manyetik rezonans gösterir. Ölçek çubuğu 3 cm gösterir. resmi büyütmek için buraya tıklayın.

Inf fonksiyonel bozukluk gösteren uç diyastol ve sistol sonu iskemik MI modellerinde kardiyak fonksiyonu Şekil 3.. Değerlendirme. (A) Temsilcisi CMR cine-loop görüntüleriARCT yara bölümleri. LV dilatasyon (LVIDd artış) MI 1 ay sonra, hem de fonksiyonel bozukluğa (septal kalınlaşma yokluğu) göstererek ekokardiyografi ile 2D parasternal uzun eksen (B) M-Mod görüntü. EDV diyastol sonu hacmini gösterir; ESV sistol sonu hacmi gösterir; LVIDd diastole sol ventrikül iç çapı gösterir ve LVIDs sistol sol ventrikül iç çapı ifade eder. resmi büyütmek için buraya tıklayın.

Şekil 4. İntrakoroner basınç ve akış hızı parametreleri türetilmiştir. Yüksek yanıt vermeyen öncesinde MI (A) referans değerlerini gösteren Combowire kullanarak İntrakoroner basınç ve akış hızı kayıtlarıhiperemi (siyah ok) e. (B) 1 ay MI sonrası, infarkt ilişkili arter (LAD) koroner akım hızı (siyah ok başları) bir azalma hiperemik cevabı vardır. Sonuç olarak, basınç ve akış hızı gibi türetilen parametreleri (HMR) veya akım hızı rezervi (CFR) başlangıca göre azalmıştır. bAPV bazal ortalama pik hızı gösterir; pAPV zirve ortalama pik hızı gösterir; CFR koroner akım rezervi gösterir; HMR hiperemik mikrovasküler direncini gösterir. resmi büyütmek için buraya tıklayın.

Araştırılan yeni ilaçlar doğrulamak için birden fazla olası çalışma tasarımları farklı çalışma tasarımlarının Şekil 5. Bakış. (A) şematikBu LAD MI domuz modeli kullanılarak MI çeşitli aşamalarında (IND). Soruşturma altında MI seçilen aşamasında bağımlı, fonksiyonel analiz hemen önce risk alan bazal değerin ve değerlendirme gibi tedavi tahsisi yapılabilir. resmi büyütmek için buraya tıklayın.

Discussion

LAD intrakoroner balon oklüzyon güvenliği ve yakından insani durumu taklit eden yeni bir kardiyovasküler tedavilerin etkinliğini araştırmak için kullanılabilecek domuzlarda bir tekrarlanabilir ve tutarlı klinik öncesi MI modeli sağlar. Şekil 5'te gösterildiği gibi, sunulan iskemi / reperfüzyon enfarktüs modeli bundan başka, ilk iskemi / reperfüzyon hasarı her ikisi için de aynıdır iken MI ve MI sonrası yeniden farklı aşamalarını araştırmak için uygun olabilir platform sağlar.

Burada özetlenen açıklanan protokole başarısı protokol en kritik faz olarak miyokart iskemisi bağlıdır. LAD ikinci çapraz dala balon distalinde Doğru yerleştirme yüksek hayatta kalma oranı sağlarken yeterli enfarktüs boyutunu ulaşmak için çok önemlidir. Bu MI modeline dayanarak, bir ~% 15 ölüm oranı, gözlenirken geniş orta ve anterior, septal ve Inferi apikal segmentlerindenCMR ve TTC lekeleme (Şekil 2A ve 2B) üzerinde görüldüğü gibi ya da duvarları enfarkte edilmiştir. Iskemi süresi arzu edilen enfarkt boyutunda göre uyarlanabilir. Bu protokolde Landrace domuzları kullanmış olsa da, mini-domuzlarda (yani Göttingen domuzcuklar), genellikle miyokard iskemi (örneğin, 150 dakika tıkanması) daha uzun süreler gerektirir.

Klinik öncesi ve klinik MI çalışmalarda sonuç analizi genellikle LVEF dayanmaktadır. Düşük EF sıkıca kardiyovasküler mortalite riski ile ilişkili olmasına rağmen, bu tür ön yük ⁹ gibi hemodinamik parametrelere bağlıdır kalır. Muhtemelen, birçok kavramsal ve pratik sınırlamalar LVEF LV sistolik fonksiyon küresel bir önlem olmaktan ziyade yerel gelişme ¹⁰ yansıtan ilgili, ortalama LV sadece% 10-15 enfarkte olduğunu verilmiştir. Bu nedenle, bu modelde kullanılan sonucun önerilen tedbirlerin farklı yönlerine ışık tutacak MI ve MI sonrası yeniden böylece araştırmacılar, doğru çoklu seviyelerde yeni tedavilerin etkinliğini değerlendirmek için araçlar sağlar.

Klinik pratikte klinik öncesi modellerden çeviri optimize etmek için, biz büyük domuz yerine domuzcuklar kullanarak seçin. Hemodinamik ölçümler, ilaç dozları ve cerrahi cihazlar kolaylıkla klinik uygulama ile değiş tokuş edilebilir. Mini-domuzlarda karşılaştırıldığında, büyük domuzlar nispeten çok kilo. Bu uzun vadede bir sorun seri sonuçlarının karşılaştırılabilirliği açısından, takip neden olabilir. Kadın Dalland Landrace domuzları 6 aylık bir yaşta yaklaşık 70 kg ağırlığında. Takipler sırasında bol miktarda kilo alımını önlemek için, hayvanlar kısıtlı diyet tutulur. (: Proteinler% 15,6, yağ% 2.0, lifler% 14.8, külleri% 8.8, kalsiyum% 0,9, fosfor% 0.57,% 0.29 magnezyum, potasyum ve% 0.18 içeren) bir gün ve iki kez domuz özel yapılmış düşük kalorili gıda 750 gr alırsınız 4 hafta içinde ağırlıkça yaklaşık 10 kg kazanır.

e_content "> McCall ve arkadaşları daha önce domuzlarda ^11, miyokard enfarktüsü için benzer bir protokol yayınlamıştır. Önemli örtüşme LAD için tercih ziyade sol sirkumfleks arter (LCX) veya sağ koroner arter (RCA vurgulayarak, bu protokol ve onların arasında var RCA enfarktüs yüksek istenmeyen ileti bozukluklarının şans (yani sinüs düğümü disfonksiyonu, AV düğüm disfonksiyonu) ile birlikte iken). Bizim tecrübelerimize göre, lcx kullanarak toplam sol ventrikül enfarktüs büyüklüğü daha az bir ölçüde var. arasındaki bir fark Biz tıkanmış koroner arterde hemostaz, 90 dakika bir sonucu olarak trombüs oluşumu göre-akış-olmamasına daha yüksek oranda görülen gibi iki protokol Bu protokolde artan trombosit farmakolojik inhibisyonu kullanımı ile ilgilidir. bu gözlem ile uyumludur Bilinen hiperkoagülabilite domuzlarda ¹² gözlenmiştir. McCall heparin, thi bir tek, yüksek doz, bolus kullanımında önerilen rağmens protokol trombotik komplikasyonlar en aza indirmek için, cerrahi boyunca yayılan birden çok düşük dozlarda Heparin kullanımına dayanır.

Özetle, biz bir ilk-in-man klinik deneme yolunda önemli bir adım olarak yeni ilaçlar çalışma insan hastalığının etkili, tekrarlanabilir ve her şeyden pratik büyük hayvan modelinde yararlanmak için araştırmacılar sağlar bir domuz MI modeli sunuyoruz.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.9% Saline	Braun
6-0 Prolene	Ethicon
Acetylsalicylic acid	Ratiopharm		80 mg
Adenosine	Apotheek UMCU		3 mg/ml
AdVantage PV loop system	Transonic Science
Amiodarone	Cordarone I.V. (Sanofi)
Amiodaron HCl (PCH)
Amoxicilline/clavulaanzuur	Sandoz		500/50 mg
Atropinesulfate	PCH		0.5 mg/ml
Bone Marrow Wax	Syneture
Cardiac Defibrillator	Philips
Clopidogrel	Apothecon B.V.		Clopidrogel 75A
Contrast agent	Telebrix
Endotracheal tube	Covidien
Fentanyl patch	Durogesic (Janssen-Cilag)		25 μg/hr
Fogarty catheter	Edwards Life Sciences
Gadolinium	Gadovist
Guidewire	Abbott
Heparin	Leo
I.V. cannula	Abbocath (Hospira Venisystems)
Iodine	Jodiumtictuur 2% (Eurovet)
Ketamine	Narketan 10 Vétoquinol
Midazolam	Actavis		5 mg/ml
Nitroglycerin	Pohl Boskamp		1 mg/ml
Pancuronium bromide			2 mg/ml
Seldinger vascular sheath 8F	Arrow
Sufentanil	Sufentanil-Hameln		50 μg/ml
Swann-Ganz catheter	Criticath ref 680078 (Argon)
Synolux	Pfizer		250 mg
Tetra-polar catheter	Transonic Science
Thiopental	Inresa		0.5 g
Triphenyl-tetrazolium chloride	Merck
Venofundin	Braun
Vicryl 2-0	Ethicon
Volcano ComboMap system	Volcano