Compensatoire Membre utilisation et l'évaluation comportementale de l'apprentissage moteur de compétence Après sensorimotrice Cortex blessures dans un modèle de souris de l'AVC ischémique

Abstract

Modèles de souris ont de plus en plus populaire dans le domaine de la neuroscience comportementale, et en particulier dans les études de course expérimentale. En tant que modèles avance, il est important de développer des mesures comportementales sensibles spécifiques à la souris. Le présent protocole décrit une tâche motrice qualifiée pour une utilisation dans des modèles murins de course. La Pasta Matrice Atteindre fonctions de tâches comme un test de comportement versatile et sensible qui permet aux expérimentateurs de recueillir des données précises sur les résultats et de manipuler l'utilisation des membres d'imiter les phénomènes cliniques humains, y compris des stratégies de compensation (c.-à-, a appris la non-utilisation) et une formation ciblée de réadaptation. Lorsqu'il est combiné avec des outils neuroanatomiques, cette tâche permet également aux chercheurs d'explorer les mécanismes qui soutiennent la reprise de comportement de la fonction (ou l'absence de celui-ci) après un AVC. La tâche est à la fois simple et abordable de mettre en place et de la conduite, offrant une variété de formation et d'évaluation des options pour de nombreuses questions de recherche concernant furésultats nctional suite à une blessure. Bien que la tâche a été appliquée à des souris modèles de course, il peut également être bénéfique dans des études de résultat fonctionnel dans d'autres modèles de lésion de l'extrémité supérieure.

Introduction

Modèles de souris ont de plus en plus populaire pour la recherche sur l'AVC expérimental en partie à cause de leur commodité et l'accessibilité, ainsi que la disponibilité des lignées transgéniques qui sont appropriés pour l'imagerie in vivo entre autres applications. Avec cette popularité accrue dans les modèles expérimentaux, l'intérêt de développer des évaluations comportementales sensibles de résultat fonctionnel après une lésion a également augmenté ^1-7. L'élaboration de protocoles de formation des animaux qui imitent à la fois la réhabilitation et des stratégies compensatoires utilisées par les survivants d'AVC humains améliore la capacité de traduire leur résultats des études expérimentales sur des animaux à utiliser dans la clinique ^8. formation des compétences de moteur sur la Pasta Matrice Atteindre Groupe (PMRT) a déjà été établie comme une évaluation comportementale sensible des résultats du habileté motrice suivant un accident ischémique du cortex sensori-moteur ^3.

L'un des intérêts primaires dans la course préoccupations de recherche réhabilitation et le développement et la compréhension des stratégies comportementales qui favorisent une meilleure récupération de la fonction suivante insulte. Actuellement, les stratégies de réadaptation chez les humains donnent lieu à ⁸ de récupération incomplète. En outre, les thérapeutes en réadaptation doivent lutter contre les stratégies compensatoires que les survivants d'AVC développent lors de la récupération qui peuvent compromettre leur capacité à reprendre entièrement fonction de leur membre (s) concerné. Par exemple, suite à un coup unilatérale qui affecte la fonction du membre supérieur, les humains ont tendance à développer une dépendance à l'égard de leur membre le moins affecté ^{9, 10.} Bien que l'amélioration de la capacité d'une personne à fonctionner à court terme, ce savant non-utilisation du membre affecté susceptibles d'entraver son potentiel de récupération ultime, comme l'a démontré dans des modèles animaux ^11-13. Ces résultats chez l'animal ont permis d'informer le développement et l'utilisation de la thérapie par contrainte induite chez l'homme ^14. Les modèles animaux sont bénéficiail pour améliorer les stratégies de réadaptation en permettant aux chercheurs d'explorer les mécanismes neurobiologiques qui subserve et promouvoir la récupération de la fonction. En plus d'être une évaluation comportementale efficace de la fonction post-AVC, le PMRT a été établi comme une stratégie de réadaptation efficace pour promouvoir l'amélioration des résultats fonctionnels suivants sensori-course ^15. Le PMRT peut également être utilisé pour la non-utilisation efficace synoptique appris du membre affecté et offrent donc un aperçu des manipulations comportementales qui peuvent améliorer la récupération fonctionnelle malgré initiale sur-dépendance sur le membre le moins affecté ^13.

La construction de la PMRT a été décrit précédemment ^3. En bref, la chambre atteindre est composé de quatre murs en plexiglas (20 cm de haut, 15 cm de long, et 8,5 cm de large) avec une partie supérieure ouverte et en bas. Il existe une fente centrale (13 cm de haut et 5 mm de large) qui s'étend à partir de la base inférieure de la paroi avant de la chambre qui sertque l'ouverture d'atteindre (Figure 1A). La matrice de pâtes est un bloc de plastique robuste (8,5 cm de long, 5 cm de large et 1,5 cm de haut) avec 1 trous mm de diamètre percés complètement à travers la profondeur du bloc. Il ya un total de 260 trous, à partir de 2 mm de la fenêtre pour atteindre 2 mm entre chaque trou (figure 1B). La matrice de pâtes est conçu de telle sorte que secs, des morceaux de pâtes orientées verticalement s'étendent sur toute la profondeur de l'étage de matrice à environ la moitié de la pièce de pâte exposée. Une pièce amovible au-dessus de la matière plastique ou du carton doit être découpé à la taille et solidement collée sur la face inférieure de la matrice. Cela empêche les morceaux de pâtes alimentaires de tomber hors de la matrice pendant le transport et permet un retrait facile de morceaux de pâtes brisées.

Le PMRT est un test de comportement versatile et sensible qui permet aux expérimentateurs de recueillir des données précises sur les résultats et de manipuler l'utilisation des membres d'imiter les phénomènes cliniques. En o comportementaleESULTATS mesure, la PMRT permet aux expérimentateurs de recueillir des données comportementales qui reflètent plus précisément l'efficacité d'une stratégie de réadaptation que ne le fait la mesure traditionnelle de la taille de l'infarctus ^{3, 16.} Comme une manipulation comportementale, la PMRT permet aux expérimentateurs de contrôler l'utilisation des membres supérieurs chez les souris afin d'imiter les expériences cliniques de réadaptation (c'est à dire la formation de membre affecté) ou non-utilisation appris (c'est à dire de la formation des membres moins touchés). Lorsqu'il est combiné avec des méthodes neuroanatomiques, la PMRT offre aux chercheurs une occasion d'explorer les mécanismes qui soutiennent la reprise de comportement de la fonction ou la plasticité inadaptée suite à l'utilisation des membres compensatoire après un AVC. Le PMRT pourrait être appliquée à d'autres modèles murins de lésions cérébrales et de la déficience des membres supérieurs, tels que des lésions cérébrales traumatiques. Un autre avantage de la PMRT est son prix abordable. L'équipement requis pour la tâche peut être construit assez raisonnable dans la maison, la collecte de données nepas besoin d'une grande quantité d'espace ou de ressources financières, et la tâche est assez simple pour les étudiants de premier cycle à recueillir de façon fiable des données. En outre, la PMRT est sensible à même de petits déficits comportementaux ^{3, 13.} Ce protocole fournit un moyen simple et efficace pour évaluer l'apprentissage moteur de compétences, favoriser la reprise du comportement suite à une blessure, et imiter les phénomènes de non-usage apprises dans un modèle murin établie d'accident vasculaire cérébral.

Protocol

Les méthodes suivantes sont conformes aux protocoles approuvés par l'Université du Texas à Austin et de l'Illinois Wesleyan de protection des animaux et utilisation comités. Il est recommandé que les chercheurs soit de porter des gants ou de prendre des précautions appropriées (se laver les mains avant et après) lors de l'engagement dans la formation comportementale avec des animaux de laboratoire. Les gants doivent être portés lors de la manipulation des animaux en cours de préparation et pendant la chirurgie.

1. D'accoutumance et de l'Alimentation Restriction

NOTE: Comme le PMRT est une tâche appétit, il est avantageux de limiter le montant et le calendrier de l'alimentation avant le début de la formation afin de motiver la réponse atteindre et éviter la satiété pendant les sessions de formation.

1. La place la souris sur un horaire d'alimentation restreinte à compter au moins 1 semaine avant le début de la formation de tâches. Peser chaque souris avant le début de la restriction alimentaire à établir poids libre-alimentation, qui sont déterminés comme ee poids de chaque animal au premier jour de l'alimentation restreinte.
   1. Nourrir les souris une fois par jour, à chaque réception de souris ~ 2,5 g de nourriture standard pour rongeurs par jour (par exemple, si il ya 4 souris logées dans une cage, la cage recevra 10 g de nourriture par jour). Assurez-vous d'alimentation se produit à la même heure chaque jour, de préférence au moment des sessions de formation par jour sont attendus à conclure.
   2. Peser les animaux régulièrement pour s'assurer qu'aucune souris perd plus de 10% de leur poids alimentation libre. REMARQUE: Réglez quantités alimentaires quotidiennes en conséquence pour favoriser le maintien d'un poids approprié. Souris acquièrent généralement poids à mesure qu'ils vieillissent, même avec des souris de restriction alimentaire constants demeurent sur la restriction de la nourriture pour la durée de PMRT formation / évaluation.
2. Exposer les animaux à des petits morceaux de pâtes (couper à 1,6 cm) dans leur cage à plusieurs reprises avant l'entraînement afin de surmonter les réponses de néophobie. REMARQUE: En règle générale 5-10 jours d'exposition sont suffisants, avec environ 4 pièces par disposition de la sourisded à chaque tétée.
3. Couper des morceaux de pâtes à la taille (3,2 cm) à l'aide d'une lame de rasoir. NOTE: Il est recommandé que l'excès de morceaux de pâtes sont coupés avant le début de la formation de la journée et pièces inutilisées stockées dans un récipient hermétique. Capellini pâtes est utilisé pour remplir la matrice. Comme les différentes marques de pâtes varient dans la texture et de diamètre, ce qui pourrait influencer la stabilité de pâtes dans la matrice ou la quantité de force nécessaire pour la souris pour casser les pâtes, il est recommandé que DeCecco marque pâtes être utilisé tout au long de la formation et de test.
4. Placer des morceaux crus capellini de pâtes dans la matrice de pâte, tout en remplissant les trous disponibles dans la matrice (figure 1A).
5. Habituer souris à la chambre d'essai avec une matrice de pâtes plein placé à l'avant (figure 1A) et plusieurs morceaux de pâtes à manger au fond de la chambre d'essai. Habituer souris pour 3 séances de 5-10 min. REMARQUE: Les souris ne doivent pas être encouragés à atteindre pour les pâtes pendant habituationformation de tion. Souris commencent généralement à montrer de l'intérêt dans les pâtes situé à l'extérieur de la chambre atteint en reniflant à travers l'ouverture. Il est possible d'habituer deux compagnons de cage dans une seule chambre si vous le souhaitez, mais les souris doit être façonné et formé individuellement. Toutes les surfaces doivent être nettoyées à l'éthanol à 70% ou une solution désinfectante similaire, en toute sécurité, avant et après chaque animal est placé dans l'appareil de comportement.

2. Shaping Reach

1. Déterminer membre préféré de chaque animal en façonnant la portée sur 3-5 essais une fois par jour pour le formage. Permettez-souris pour atteindre 10 minutes, ou un total de 10 fois, ce qui survient en premier.
   1. Placer les souris individuellement dans la chambre d'essai avec une matrice de pâtes en pleine face de la chambre que dans la formation d'habituation (Figure 1A).
   2. Notez le nombre de tronçons de chaque membre, indiquant le nombre de tronçons avec le droit et les membres de gauche séparément. Définir une portée que l'extensiondu membre à travers l'ouverture de telle sorte que pour atteindre le poignet casse le plan de la chambre; il n'est pas nécessaire que la portée à être orientée vers la ou entrer en contact avec les pâtes.
2. Contenir plusieurs morceaux de pâte juste à l'intérieur de la chambre à travers l'ouverture pour atteindre à encourager les souris qui sont réticents à atteindre. Dessinez les morceaux de pâtes lorsque la souris montre l'intérêt (par exemple reniflement, morsures), les encourageant ainsi à atteindre après les morceaux de pâtes en retraite. Si les souris ne montrent pas d'abord intérêt à la pâte sèche, puis mouiller les extrémités des morceaux de pâtes dans une petite tasse d'eau chaude pour les rendre plus agréables au goût.
3. Déterminer la préférence du membre lorsque la souris présente un minimum de 70% de leurs portées par jour avec un seul membre. Faire de ne pas trop en forme d'animaux, car cela peut limiter le montant de l'apprentissage observée au cours de la partie de la formation de tâches atteignant ^17. Commencer la formation PMRT fois les souris sont en forme. NOTE: La formation peut être démarré dès que le NEXt jour, mais il est également acceptable d'attendre plusieurs jours entre mise en forme et les procédures de formation.

Formation 3. Atteindre

1. souris de train une fois par jour avant d'insulter afin d'établir la compétence sur la PMRT. REMARQUE: Chaque essai se compose d'un maximum de 15 min ou 100 atteint comptés par l'observateur (réussies ou non), selon la première éventualité. Les souris sont formés pour atteindre seulement avec leur membre préféré. Souris tolèrent deux essais par jour si un paradigme de formation plus intense est souhaitée ^18.
   1. Placer les souris dans la chambre d'essai avec une matrice à demi-plein placé à l'avant (figure 1B). souris de train pour atteindre seulement avec leur membre préféré en remplissant uniquement du côté de la controlatéral de matrice à la branche privilégiée puisque les souris atteignent travers la ligne médiane de leur corps. Laisser la partie de la matrice correspondant à la branche non privilégiées non pourvus dans le but de décourager les tentatives d'atteindre avec cette branche (qui ne serait pas successful parce qu'ils ne peuvent pas atteindre les pâtes) et encourager atteignant seulement avec le membre préféré.
2. Placer une petite quantité de pression sur les pâtes pendant qu'il est dans la matrice pour aider souris briser succès morceaux pendant les sessions de formation au début. Ne pas casser les morceaux de pâtes pour la souris. Atteindre cet objectif en tenant un ou deux morceaux de pâtes légèrement derrière et perpendiculaires à la cible d'atteindre prévue. Cette petite quantité de support permet de stabiliser les pâtes mince, ce qui est assez souple et difficile pour les souris à saisir comme ils apprennent d'abord la tâche.
3. Inscrivez le nombre total de portées, le nombre de tronçons de succès, et les emplacements des tronçons succès. Atteint réussies exigent la souris pour atteindre à travers l'ouverture, prenez un morceau de pâte, et briser la pièce de pâtes pour le retirer de la matrice. REMARQUE: morceaux de pâtes ne doivent pas être remplacés dans la matrice qu'après le procès a pris fin. Au début de la formation, les souris ne se cassera pas beaucoup de morceaux de pâtes.
4. souris de train sur la PMRT de compétence, qui est définie comme au moins 3 jours (et jusqu'à 5 jours) de rendement constant (rupture d'au moins 9 morceaux de pâtes avec pas plus de 2 plus ou moins morceaux sur plusieurs jours). Il faut souvent entre 15-20 jours pour former les souris jeunes adultes à la compétence.

4. Formation Limb moins touchés

1. Former le membre le moins affecté (le membre non privilégiées pré-opératoire) à compter quatre jours après un accident ischémique dans le cortex moteur controlatéral à la branche atteindre préféré (voir la figure 2 pour des précisions sur les membres touchés / préféré et less-affected/unpreferred) . Administrer séances une fois par jour de 15 min ou de formation de 100 de portée.
   1. Retirez la première colonne de pâtes (à savoir la colonne verticale la plus médiane s'étendant de l'ouverture d'atteindre) pour la première semaine de formation des membres moins touchés afin d'assurer atteint que début avec le membre affecté ne sont pas réussies.
2. Encourager les atteindre avec le membre le moins affecté par le renforcement de l'extension de cette branche à travers l'ouverture d'atteindre. Lorsque les souris s'étendent le membre le moins affecté dans les premiers jours de lieu de formation d'un petit (1/2 pièces) de pâtes sur le sol de la chambre atteindre indépendamment de si oui ou non la portée est réussie.
3. Compter que les tronçons réalisés avec le membre le moins affecté vers au total 100 portée. Ne pas compter les tentatives furtives avec le membre affecté dans le nombre total de tronçons.
4. Retour de la colonne verticale la plus interne de pâtes à la matrice après les 7 premiers jours de la formation des membres moins touchés.
5. Notez le nombre de portées, le nombre de tronçons de succès, et les lieux de succatteint essful. REMARQUE: Ces données peuvent être analysées pour observer les différences pour atteindre les modèles avec le membre le moins affecté, mais n'ont pas été précédemment rapporté.

Analyse 5. Atteindre

Déterminer l'impact de moins touchés par l'utilisation du membre sur le rétablissement de la fonction du membre affecté en évaluant le membre affecté à la tâche PMRT après la formation du membre le moins affecté. Cette évaluation a lieu après le nombre souhaité de jours de formation des membres les moins touchés sont complets (généralement 14 jours).

1. Placer la matrice en face de la chambre, orientés de manière identique pour les procédures de formation (par exemple, avec la moitié de la controlatéral de la matrice sur le membre préféré rempli). NOTE: Cette force souris pour atteindre leur touchée (et précédemment préféré) membre.
2. Inscrivez le nombre total de portées, le nombre de tronçons de succès, et les emplacements des tronçons réussis à comparer avec les niveaux de performance pré-course. Ne pas sonder la performance dele membre affecté lors de la formation des membres moins touchés que ces sondes des membres touchés peut fonctionner que des sessions de formation qui pourraient influer sur la récupération du membre atteint.

Representative Results

Les résultats de l'analyse PMRT devraient inclure le nombre de morceaux de pâtes brisées et le modèle de succès atteint. Résultats de souris présentant des lésions corticales sensori indiquent que l'insulte ischémique affecte à la fois le nombre de tronçons de succès ainsi que les modes de portée physique ^{3, 19,} comme le montre la figure 3A. Changements de modèle représentatives peuvent être observés dans la figure 3B. La capacité de la PMRT pour imiter les effets de non-usage apprises chez la souris est démontrée par altération de la récupération du membre affecté après la formation des membres moins touché ^{13, 20.} Par conséquent, seuls les tronçons de succès avec le membre affecté sont analysés. Résultats de souris présentant des lésions ischémiques au cortex sensori-moteur indiquent que deux semaines de formation des membres moins touchés après un AVC ischémique altère l'utilisation du membre touché pendant au moins sept jours ^13. Comme le montre la figure 4, les souris qui reçoivent moins touchés par branche tpleuvoir pendant 15 jours après un accident ischémique unilatérale présentent moins de tentatives réussies de portée plus sept jours de l'évaluation de la branche concernée. Les souris qui reçoivent aucune formation (contrôle) pendant 15 jours après un AVC récupèrent la possibilité de récupérer avec succès des morceaux de pâtes avec sept jours de l'évaluation de la branche concernée. Cet effet a été constaté à persister jusqu'à 28 jours de suite l'évaluation de membre affecté suivantes formation moins touchés ^20.

Le PMRT pourrait également être utilisé pour évaluer les changements qualitatifs dans atteignant ainsi qu'il a été étudiée chez le rat avec la pastille unique tâche atteindre ^21. Cette évaluation, qui doit encore être réalisée chez la souris, exigerait une analyse systématique des tronçons filmées dans le PRMT.

Matrice de pâtes Figure 1. Atteindre matériaux de tâches. (A). Au cours de mise en forme, toute la matrice est rempli de pâtes. Cependant, au cours de la formation qualifiée de portée du membre affecté ou moins touchés que la moitié de la matrice est remplie. Cela nécessite la souris pour atteindre à travers le corps avec un seul membre (par exemple, le membre le plus pratique pendant la formation pré-opératoire) (B). Les images présentes sont reproduites avec l'autorisation ^3.

Figure 2. Atteinte and membres moins touchés. L'PMRT peut être manipulé pour s'engager soit le touché ou le membre le moins affecté. Solide couleur noire indique membres Preferred / touchés dans les deux premières images et le membre le moins affecté dans la troisième image. Ce graphique permet de démontrer les membres touchés et les moins touchés, en référence à la branche préférée.

Figure 3. Représentant atteindre motifs avec le membre affecté. Atteindre les modèles de souris avant et après ischémie unilatérale du cortex sensori-moteur en face de la branche préféré sont présentés (A). Antérieur dénote morceaux de pâtes situées de plus en plus en outre en avant de la souris, tandis latérale dénote tronçons de pâtes alimentaires situées de plus en plus vers le côté de la souris. Changements de modèle représentatives peuvent être observées dans 3.

Figure 4. Des résultats représentatifs de moins touchés par la formation des membres sur le résultat affecté des membres. D'entraînement de la branche moins touchées pendant 15 jours suivant un accident ischémique unilatérale du cortex sensori-moteur altère le pronostic fonctionnel du membre atteint, empêchant ainsi la récupération fonctionnelle. Ce chiffre est reproduit avec la permission ^13.

Discussion

Le PMRT représente un moyen simple, quantitative pour évaluer la performance d'atteindre l'homme de la souris. Bien que beaucoup de temps, il est possible pour les étudiants déjà inexpérimentés être formés pour recueillir des données fiables et reproductibles avec seulement quelques séances de formation. La tâche est assez sensible pour mesurer même de légers changements dans la souris la performance des habiletés motrices suivantes accident ischémique ^{3, 13, 15,} et un certain nombre d'études font état ​​d'déficits à long terme avec une variété de protocoles de formation ^{15, 20, 22.} Parce que c'est un unilatérale tâche, il peut également être utilisé pour dicter la branche avec laquelle la souris accomplir la tâche. Cette caractéristique de la PMRT lui permet d'être efficace dans des études à la fois la plasticité comportementale et neuronal adaptatif suivant insulte ainsi que les changements inadaptés et compensatoires qui se produisent avec le recours appris sur le membre le moins affecté. La tâche se prête également à des études d'utilisation des membres bimanuel, qui ont été étudiés chez le rat, mais pas presmanière régulière dans le la souris ^23.

Les aspects les plus critiques du protocole actuel comprennent: la détermination précise de la branche préférée avant la formation, la formation des souris à la maîtrise de la tâche motrice qualifiés avant l'accident, et le passage de la souris de membre préféré / touchée atteignant non privilégiées membre / moins touchés atteindre dans la première semaine de formation post-opératoire. Pour déterminer avec précision le membre préféré avant la formation, il est important de permettre à des souris à atteindre pour les pâtes dans la matrice complète pendant le façonnage. Souris devraient être encouragés à atteindre, mais ils ne devraient pas être récompensés pour tronçons, qui peuvent involontairement biais de la branche à laquelle ils atteignent. Séances Galbe ne sont pas des sessions de formation, et donc la souris ne devraient pas être spécifiquement encouragés à briser des morceaux de pâtes, être récompensés pour atteindre le comportement, ou d'atteindre un nombre excessif de fois par session ^3. Il est également important que les souris acquérir les habiletés motrices avant ischémie si tdes données précises d'autocollants peuvent être recueillies concernant les effets de la formation à la fois touchés et moins touchées par branche après une blessure, ainsi que pour permettre la quantification appropriée de déficit initial suite à une blessure. Un minimum de 15 jours de formation pré-opératoire (hors mise en forme) est proposé pour assurer l'acquisition de la tâche. Une bonne règle de base est de s'assurer que les animaux sont conformes à leur performance, présentant ainsi une performance stable sur au moins 3-5 jours de formation. Cela peut être mieux assuré par la représentation graphique des données atteignant pré-opératoires pour chaque animal à observer visuellement des modèles de réussite. Si la performance apparaît asymptotique plus de 3-5 jours (c'est à dire, varie de moins de 2 récupérations réussies à travers jours), il est raisonnable de supposer que l'animal a suffisamment acquis la tâche. Souris atteignent généralement un niveau de succès asymptotique de ~ 11 pièces, mais avec prolongée (mois) de formation peuvent atteindre progressivement les niveaux de ~ 14 pièces ²⁴ de réussite. Enfin, surtout avec relativement petites lésions ^{13, 20,} les souris peuvent continuer à essayer d'atteindre avec le membre atteint au début de la formation des membres moins touchés. Il est utile de sortir la première colonne de pâtes de la matrice pendant les 7 premiers jours de la formation des membres moins touchés pour décourager ce comportement. Les souris peuvent être en mesure de briser les premiers morceaux de pâtes avec leur membre atteint si la moitié matrice complète utilisée, et ce succès continueront d'encourager membre affecté atteindre malgré une incapacité à récupérer avec succès des pièces au-delà de ces quelques premiers. Au cours de la première semaine de formation des membres moins touchés, le nombre total de tronçons concernés peut être quantifiée, mais le nombre de ruptures de succès ne sera pas informative. Comme mentionné ci-dessus, succès seulement Limb atteint touchés sont analysés pour l'interprétation des données. Afin d'encourager davantage branche moins touchés atteindre, il est utile de fournir aux petites entreprises (½) des morceaux de pâtes que des récompenses pour les tentatives atteint avec le membre le moins affecté. Ce practice est généralement nécessaire pour les 2-3 premiers jours de moins touchés par la formation des membres, à quel point les souris deviennent compétents à atteindre avec le membre le moins affecté et commenceront avec succès la rupture et de récupérer des morceaux de pâtes.

La collecte de données comportementales avec des souris peut être efficace et enrichissante, mais il est important de se rappeler que les souris ne sont pas des petits rats. Ils ont un tempérament unique et répertoire comportemental qui doit être considéré pour des tâches comportementales. En utilisant des souris bien traités, apprivoisés augmente la collecte de données comportementales succès. Plusieurs semaines de traitement régulier est recommandé. En outre, les souris ont parfois besoin de "mise au point" lors de la formation comportementale. Il est utile de brosser doucement morceaux de pâtes dans la matrice pour faire un bruit distinct que les souris répondent. Il peut également être utile de brosser doucement l'intérieur de l'ouverture d'atteindre.

Le protocole actuel décrit une tâche comportementale sensible pour la collection of qualifiée atteindre données chez les souris suivantes petits accidents vasculaires cérébraux ischémiques. déficiences motrices sont parmi les conséquences les plus fréquentes et chroniques de la course ^{25, 26,} et sont donc l'objet d'un certain nombre de laboratoires de recherche fondamentale de la science (par exemple, ^27-32). Tâches atteignant qualifiés sont les tests les plus couramment utilisés d'utilisation des membres antérieurs adroit chez les rongeurs, et ont toujours été le plus souvent utilisé dans les modèles de rats de blessures (par exemple, ^{11, 19, 28, 33),} bien que leur utilisation dans des modèles de souris devient assez fréquent ^{34, 35.} L'application des tâches qualifiés atteignant chez la souris, comme le PMRT, permet pour les modèles de souris améliorées de course ³ et donc une meilleure traduction possible de ces expériences de sciences de base. En raison de leur prix abordable, les outils génétiques disponibles, et leur prévalence dans les laboratoires neurobiologiques, les souris sont des outils importants dans l'étude des mécanismes de l'AVC et la récupération. La disponibilité des manipulations comportementales eà sensibilité évaluer les performances du moteur, peut être utilisé pour des stratégies de réadaptation, et peut imiter les réponses compensatoires humains étend l'application du modèle de la souris. Les méthodes décrites dans ce protocole peuvent certainement être affiné et étendu à d'autres modèles de lésion de la souris, y compris les lésions cérébrales traumatiques, études sur l'utilisation de membre à deux mains suivantes insulte et études des mécanismes neuronaux qui servent sous et soutiennent la récupération fonctionnelle.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reaching chamber			Reaching chambers are made in house with Plexiglas
Pasta matrix block			The Pasta matrix box is made in house using a heavy plastic block
Capellini pasta	DeCecco		DeCecco brand capellini pasta can be purchased in a grocery store or through an online retailer such as Amazon