Introduction
원자 힘 현미경 (AFM)을 정량적 이미징을 가능하게하고 재료 표면의 프로빙 기술이다. 4-6 전통적, AFM은 표면 지형, 형태학 및 멀티 phasic 재료의 구조의 평가에 사용된다. AFM은 정량적으로 공기와 액체 매체 모두에서 특정 프로브와 기판 사이의 책임, 매력, 반발과 접착 힘으로 나노 크기의 상호 작용을 평가하는 기능을 가지고 있습니다. 7,8 원래 비닝, Quate에와 거버 9 용도로 개발 된 AFM 알려진 결정 / 감도와 샘플에 접근 및 / 또는 스캔 스프링 상수의 프로브. 인해 탐침과 시료 사이의 물리적 상호 작용, 캔틸레버가 접촉 또는 근접하는 동안 편향되며, 동작 모드에 따라, 이러한 편향은 탐침과 샘플 사이에 샘플 또는 계수의 힘의 지형을 취득 번역 될 수있다. AFM의 TECHNI에 대한 수정생각도, 콜로이드 프로브 nanoscopy로, (10)는 직접 그 콜로이드 시스템에있는 두 물질 사이의 나노 힘의 상호 작용을 평가하기 위해 과학자를 허용했다.
콜로이드 프로브 nanoscopy에서 선택의 구형 입자는 전통적인 원뿔과 피라미드 팁을 교체, 캔틸레버의 정점에 연결되어 있습니다. 구형 입자는 존슨, 켄달, 로버츠 (JKR) 11 Derjaguin, 랜도, Vervwey, Overbeek (DLVO) 12-14 이론과 측정에 대한 표면 거칠기의 영향을 최소화하기위한 이론적 모델과 비교를하는 것이 이상적입니다. 15이 이론은 콜로이드 시스템 내에서 예상되는 접촉 역학과 입자 간 힘을 정의하는 데 사용됩니다. DLVO 이론 동안 J, 정량적으로 수성 콜로이드 시스템의 집계 동작을 설명하는 매력적인 반 데르 발스의 힘과 (때문에 전기 더블 레이어) 반발 정전기력을 결합KR 이론은 두 개의 구성 요소 사이의 탄성 접촉을 모델링하는 접촉 압력과의 접착 효과를 통합한다. 적절한 프로브가 생성되면, 그것은 두 개의 구성 요소 사이의 힘을 평가하기 위해 다른 물질 / 입자를 접근하는데 사용된다. 표준 제조 된 팁을 사용하는 팁과 선택의 재료 사이에서 쌍방향의 힘을 측정 할 수 있지만, 주문품 콜로이드 프로브를 사용하는 이점은 조사 시스템 내에 존재하는 물질 사이에 힘의 측정을 허용한다. 측정의 상호 작용은 다음과 같습니다.. 접착제, 매력, 반발, 충전 및 입자 사이에 존재도 정전기력을 16 또한, 콜로이드 프로브 기술은 입자와 재료 탄성 사이에 접선 방향의 힘을 탐구하는 데 사용할 수 있습니다 (17, 18)
다양한 미디어에서 측정을 수행 할 수있는 능력은 콜로이드 프로브 nanoscopy의 주요 장점 중 하나입니다. 주변 조건, 액체 Media 또는 습도 제어 된 조건 모두 공부 시스템의 환경 조건을 모방하기 위해 사용될 수있다. 액체 환경에서 측정을 수행 할 수있는 능력은 자연적으로 발생하는 환경에서 콜로이드 시스템의 연구를 가능하게; 따라서, 양적으로 자연 상태에서 시스템으로 직접 변환 가능한 데이터를 취득 할 수있는. 예를 들어, 정량 흡입기 (MDI) 내에 존재하는 입자의 상호 작용은 MDI를 사용 추진제와 유사한 특성을 가진 모델 액체 추진제를 사용하여 공부하실 수 있습니다. 공기 중에서 측정 된 동일한 상호 작용은 흡입기의 시스템의 대표적인 존재하지 않을 것이다. 또한, 액상 매질이 수분 유입, 보조 계면 활성제, 또는 MDI에서 입자의 상호 작용에 대한 온도의 영향을 평가하기 위해 수정 될 수있다. 온도를 제어하는 능력은 어떻게 온도에서 제조하거나 또는 평가하는 콜로이드 시스템의 제조에서 특정 단계를 모방하는 데 사용될 수있다콜로이드 성 시스템의 저장소는 입자의 상호 작용에 영향을 미칠 수있다.
콜로이드 프로브를 사용하여 얻을 수있다 측정은 다음과 같습니다; 지형 스캐닝 개별 힘 - 거리 곡선, 힘 - 거리 점착 맵, 힘 - 거리 측정치 드웰. 이 논문에서 제시 한 콜로이드 프로브 nanoscopy 방법을 사용하여 측정하는 중요한 매개 변수는 스냅인, 최대 부하와 분리 에너지 값이 (가) 있습니다. 스냅인 흡인력의 측정이며, 최대는 최대 접착력의 값을로드하고, 박리 에너지가 접촉으로부터 입자를 인출하는 데 필요한 에너지를 전달한다. 이 값은 순간이나 체류 힘 측정을 통해 측정 할 수있다. 드웰 측정의 두 가지 유형의 편향 및 들여 쓰기를 포함한다. 드웰 측정의 길이와 종류는 특히 관심의 시스템 내에서 존재하는 특정 상호 작용을 모방하기 위해 선택 될 수있다. 예 편향 드웰를 사용 -하는 보유분산 형성 집계에서 개발 접착제 채권을 평가하기 - 원하는 편향 값에 접촉하는 샘플. 형성된 접착제 결합은 시간의 함수로서 측정 될 수 있고, 장기 보관 후의 응집물을 재 분산하는 데 필요한 힘에 대한 통찰력을 제공 할 수있다. 이 방법을 사용하여 얻을 수있는 데이터의 과다 방법의 다양성에 대한 선언 과도 같은 것입니다.
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Protocol
1. 콜로이드 프로브 및 AFM 기판을 준비
- 콜로이드 프로브를 준비하기 위해, 저자가 이전에 개발 된 방법을 사용합니다. 19
- 간단히, 45 ° (그림 1A)의 특정 각도로 tipless 캔틸레버를 부착하는 45 ° 각도 홀더를 사용합니다.
- 현미경 슬라이드 상에 에폭시를 얇게함으로써 번짐 에폭시 슬라이드를 준비한다. 현미경 슬라이드에 추가 에폭시의 층이 최소한의 높이가 있는지 확인하기 위해 깨끗한 주걱 또는 질소의 느린 스트림을 사용합니다.
- 맞춤 설계된 홀더 (그림 1B)를 사용하여 40 배 광학 줌 현미경 렌즈에 에폭시 슬라이드를 붙입니다. 이어서 에폭시 슬라이드 접근하고 캔틸레버에 에폭시의 소량을 취득하는 캔틸레버를 사용한다.
- 또한 캔틸레버 (그림 1C)의 정점이자의 단일 입자를 연결하는이 단계를 반복합니다.
- 콜로이드 파를 부착하여 AFM 기판을 준비열가소성 부착 접착제를 이용하여 커버 슬립의 AFM 상로 다칠.
- 120 ° C에 35mm 라운드 커버 슬립을 가열하고, 커버 슬립에 접착제의 작은 금액을 적용합니다. 높은 온도는 응용 프로그램의 열가소성 접착제를 용해 할 필요가있다.
- 그런 멋진, 접착제에 콜로이드 입자를 채취하기 전에 40 ° C까지 커버 슬립. 주 : 40 ° C에서 접착제가 충분히 입자가 접착제에 포함되지 것입니다 설정하지만, 접착제 입자가 기판에 부착 할 수 있도록 충분히 스티커입니다.
- 또한 RT에 커버 슬립을 냉각하고 초과 연결되지 않은 입자를 날려 질소의 부드러운 스트림을 사용합니다.
- 모든 비 부착 된 입자가 기판으로부터 제거되도록 콜로이드 프로브 측정을 위해 사용될 것이다 액체 매질과 기판을 여러 번 씻는다. NOTE : 이것은, 측정 중에 자유 유동성 입자의 영향을 감소하는 것이 중요 할 수있는 인터캔틸레버 행동과 결과의 오류를 소개합니다.
2. 콜로이드 프로브 정렬, 레이저 및 평형화 시스템 장착
- O-링이 어떤 누출을 방지하기 위해 올바르게 장착되었는지 확인하고, 액체 셀의 하단에 콜로이드 입자의 coverslip를 탑재합니다.
- 특히 만 측정을위한 액체 셀의 아래쪽 절반을 사용하는 경우, 실험 기간 동안 누출 될 수있는 액체를 방지하고, 현미경의 무대에 액체 셀을 배치 현미경 무대에 소수성 투명 시트를 놓습니다. 참고 : 간단하게하기 위해 하나의 시스템이 적절하게 평형을 할 수있는 점을 감안, 액체 세포 만 아래쪽 절반을 사용할 수 있습니다; 팁 - 증발 측정 및 영향의 결과 / 독서의 상태를 변경합니다.
- AFM 스캔 헤드에 콜로이드 프로브를 장착하고 AFM에 조립합니다. 의 AFM 기기 소프트웨어를 사용에 노브를 사용하여초점 캔틸레버 팁을 가지고 머리를 스캔. 참고 : 모든 절차 단계와 측정이 정신 병원 연구 소프트웨어 MFP-3D-바이오 AFM을 사용하여 완성되었다.
- , 강도를 최대화 스캐닝 헤드에 적절한 조정 노브를 이용하여 캔틸레버의 선단에 레이저를 정렬한다.
- 시스템이 5 ~ 10 분 동안이나 편향 값이 안정 될 때까지 평형을 허용합니다. 제로 또는 약간 마이너스 편향을 가지고 편향 조절 노브를 사용합니다.
- 시스템이 공중에 평형화 후에 InvOLS (감도)와 콜로이드 프로브의 스프링 정수를 산출 열적으로 AFM 소프트웨어 (마스터 패널 윈도우 열적 패널)을 사용한다. 주 : 실제 감도 측정이 완료 될 때까지 측정이 감도는 일시적으로 (4 단계 참조)이 사용됩니다.
- "열 데이터를 캡처"를 클릭 한 후 "칼 스프링 상수"또는 "칼 InvOLS"을 하나 선택합니다.
- 한 번눈에 띄는 피크가 분명하다, 데이터 캡처를 중지하고, 메인 피크 위에 확대합니다.
- 자동으로 계산 스프링 상수 또는 InvOLS 값을 얻기 위해 "열 데이터에 맞게"다음에 "초기화 맞추기"를 클릭하십시오.
- 천천히 주사기를 사용하여 액체 셀에 액체 배지 2 ㎖를 추가하고 기포가 캔틸레버의 주위에 존재하지 않는 것을 확인합니다. 매질의 굴절률이 이제 변경된 이후, 레이저를 다시하는 것은 - 정렬하고 다시 편향 값은 다시 0으로 편향을 조절하기 전에 안정화 할 수 있도록 시스템을 평형. 참고 : 큰 온도 차이가 환경과 액체 사이에 존재하는 경우, 평형 시간이 더 걸릴 것입니다.
3. 이미징 및 데이터 수집
- 1 Hz에서 90 °로 스캔 각도, 0.2 V로 설정 지점에 스캔 속도, 20 μm의 초기 스캔 크기를 설정하고 샘플의 검사를 얻을 수 있습니다. 오버랩 추적을 구하는 것이 필요 게인을 조정곡선을 되돌아.
- 또한 입자가 발견되면, 직전 포스 볼륨 측정을 얻는데 기판과 확장 된 탐침의 상호 작용을 제한하기 위하여 그 입자에 확대.
- 한 번에 확대, 단일 입자의 단일 입자 또는 부분의 충분한 이미지를 취득. 그런 다음 소프트웨어의 강제 패널로 전환합니다. , 가장 높은 위치에 빨간색 위치 표시 줄을 가지고 5 μm의, 스캔 속도 0.1 Hz에서, 아무도에 트리거 채널에 힘 거리를 설정하고 하나의 힘 측정을 실시하고 있습니다. 프로브가 기판과 접촉하지 않도록하십시오.
- 얻어진 단일 측정 그래프에서 그래프 창에서 마우스 오른쪽 버튼을 클릭하여 가상 편향 라인을 계산하고, "가상 데프 라인을 계산"옵션을 선택. 이것은 자동으로 가상 편향 계산 소프트웨어 내에 필요한 값을 갱신한다.
- 20 nm의 트리거 포인트를 편향하고 설정하는 트리거 채널을 변경합니다. 힘 DIST를 설정1 μm의 ANCE 관심의 측정 된 힘에 따라 원하는대로 스캔 속도를 조정합니다.
- 수동으로 2 ~ 3 년 연속 예비 하나의 힘의 측정을 수행 한 후 검토 포스 패널의 변형 역 광학 레버 감도 (InvOLS)의 값을 조정합니다.
- 하나의 힘 측정을 실시하고 마스터 포스 패널을 여는 힘 패널의 "검토"버튼을 클릭합니다.
- 가장 최근에 완성 된 힘 측정을 강조 표시합니다. "축"는 제목 아래 만 "DeflV"가 선택되어 있는지 확인합니다. "9 월"드롭 다운 메뉴를 사용하려면 "X 축"입력 필드를 변경하고 클릭 "그래프를 확인합니다."
- 마스터 포스 패널의 "PARM"탭을 클릭하고 그래프의 접촉 영역이 완전히 수직이 될 때까지 "InvOLS"의 값을 조정합니다. 그런 다음 칼 아래에있는 "Defl InvOLS"필드에이 값을 채 웁니다(60) 주 마스터 패널 창에있는 강제 탭의 하위 탭을 클릭합니다.
- InvOLS 값이 크게 변경되지 않도록하기 위해이 2 ~ 3 번 반복합니다.
- 이제 모든 매개 변수가 설정되어 있는지, 액체 중간 수준은 여전히 충분하며, 편향은 여전히 안정적인지 확인하십시오. 참고 :이 때, 하나의 힘 곡선 또는 힘지도를 얻을 수있다. 드웰 힘을 측정하고 싶은 경우는, 드웰 옵션은 강제 패널에 액세스 할 수 있습니다.
분석 감도 4. 후 조정
- 측정 수집의 완료 후, 콜로이드 프로브의 실제 감도를 측정한다. 이를 위해, 예컨대 운모 "무한"경질의 표면에 대해 동일한 액체 매질에서 콜로이드 프로브 비교적 큰 편향 / 힘을 사용하여 힘 측정을 실시. 참고 : 큰 편향 / 힘이 Collo까지 손상 될 수 있기 때문에 감도는 실험 종료 후 얻은다공성 또는 깨지기 쉬운 콜로이드 준비 IDAL 프로브.
- 접촉 영역의 기울기가 자동 감도 (도 2)를 계산하는 소프트웨어에 의해 사용된다. 특정 콜로이드 프로브를 사용하여 얻은 모든 곡선의 데이터 분석에서 감도의이 진정한 가치를 사용합니다.
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Representative Results
액체 콜로이드 시스템은 여러 가지 제약 약물 전달 시스템에 사용됩니다. 흡입 약물 전달, 일반적인 콜로이드 시스템은 정지 가압 정량 흡입기 (PMDI)입니다. PMDI 내에 존재하는 입자의 상호 작용 제제 물리적 안정성, 저장 및 약물 전달의 균일 성에서 중요한 역할을한다. 이 논문에서는, 모델 추진체 (2H, 3H-퍼플 루오로 펜탄)에서 다공질 지질 계 입자 간의 입자 간 힘 (~ 2 ㎛의 광학 평균 입자 직경)의 기능 및 표시와 관련된 잠재적 인 오류를 전달하기 위해 RT에서 평가 하였다 절차.
도 3은이 대표 콜로이드 프로브 콜로이드 프로브 nanoscopy 사용될 수 지질 계 호흡 가능한 입자를 사용하여 제조를 나타낸다. 그것은 하나의 콜로이드 입자가 가장 두드러진 특징이고 첫 번째 포인트가 될 것이다되도록 캔틸레버의 꼭대기에 부착되는 것이 중요의 측정시에 문의하십시오. 이 측정의 상호 작용은 콜로이드 입자에 전적으로 기인 것을 보장한다. 여러 입자 또는 입자의 응집체를 부착 인해 동시에 기판에 동일한 단일 입자의 존재를 감지하는 두 입자에 의한 여러 캔틸레버 편향에 잘못된 결과 (그림 4)를 생성 할 수 있습니다. 제대로 준비 콜로이드 프로브를 사용하여, 예컨대도 5에 도시 된 것과 같은 입자 기판의 지형적 이미지는 액체 매질에서 달성 될 수있다.
콜로이드 프로브를 사용하여 지형 스캔은 날카롭게 원추형 팁을 사용하여 얻은 것 이상 정의 될 것이다; 그러나, CPN에서 지형 스캔의 주된 목적은 입자 간 상호 작용을 평가하는 데 사용될 수있는 기판상의 입자를 위치시키는 것이다. 6은 액체 매질에서 콜로이드 프로브 측정을 수행 할 때 하나가 발생할 수있는 여러 가지 힘 곡선을 전달 도표 . 액체 측정측정 중에 오류가 더 많은 소스를 포함하는 하나의 적절하게 측정 (그림 6A)의 정확도에 미치는 영향을 최소화하기 위해 모든 소스를 알고 있어야합니다.
그림 6의 (b)에 힘 곡선에 분명 신속하고 날카로운 피크가 측정하는 동안 시스템에 갑자기 방해를 표시한다. 이는 AFM 구 이동이나 순간과 신속한 불안정화 단기간에 발생 배경 (예 도어 부딪혀서 재채기)에서 갑작스런 잡음에 기인 할 수있다. 도 6c에 캔틸레버의 접근과 후퇴에서 기준선의 변동은 액체 매질에 대한 문제를 제시. 액체 셀이 적절히 매체의 증발 시스템 및 측정의 안정성에 큰 영향을 미칠 수 있도록 작성되지 않은 경우에 발생할 수있다. 이 불안정성의 다른 소스는 액체 비누에 캔틸레버의 부적절한 평형에서 할 수있다이전의 분석에 ID 매체. 캔틸레버는 온도 변화와 같은 액체 셀을 '토핑'등의 작업에 민감 적절한 재 평형의 시간이 필요합니다. 그림 6D는 초기 접근하는 동안 변화와주기를 철회을 보여줍니다. 이 깨끗한 변화는 순간적인 힘을 측정하는 동안 존재하지만, 드웰 힘의 측정에 더 명백하다. 이 드리프트는 등 여러 가지 이유로 발생할 수있는 캔틸레버 온도 드리프트의 효과이다 :, 매질의 온도 변화로 이어지는 액체 매질의 느린 증발 여전히 주위 온도로 평형화되는 매체를 이용하여, 또는 전도 이상적으로 제어되지 않는 환경에서 측정. 측정하는 동안 액체 매질의 온도에서 최소 꾸준한 변화는 감도를 생산하고 있습니다. 측정 드리프트 이러한 유형의 폐쇄 액체 셀 측정 동안 사용되지 않으면, 높은 증발 액체를 제어하는 것은 어렵다; howeveR, 대부분의 AFM 분석 소프트웨어는 감도를 해결할 수 있습니다.
오류의 모든 제어 가능한 소스가 완화되었으며 시스템이 적절하게 평형화 후, 점착 매핑 샘플의 결정된 크기에 걸쳐 큰 통계적 본체 데이터를 얻기 위해 사용될 수있다. 포스 매핑 입자 접착제 세력에 지형의 영향 (도 12)을 평가하기 위해 독립적으로 또는 지형적 주사와 함께 사용될 수있다. 높이에 따라 샘플의 지형도하는 캔틸레버 연락처 기판 (그림 7A)와 각 개별 힘 곡선의 최대 인장력 (그림 7B)를 전달 접착지도 : 강제 매핑은 그 두 가지 그래프를 제공 할 것입니다. 도 7b의 그래프는 접착 수치 평균 및 표준 편차를 구하여 스냅인 샘플 전체에 걸쳐 힘뿐만 아니라, 에너지 분리하는데 사용될 수있다. 이러한 원시 데이터 GRAPHS는 샘플 (도 7C / D)에 걸쳐 밀착성 측정 지형 또는 확산의 삼차원 표현으로 간주 될 수 있고, 이들을 중첩하면 (지형의 함수로서 부착력의 분포의 입체 션을 생성 할 것이다 그림 7E). 이 유형의 데이터는 콜로이드 방법 표면 콜로이드 더 효과의 상호 작용 사이에 존재하는 힘의 중요한 이해를 제공합니다.
또한 드웰 힘 측정은 접촉 역학 및 점착력의 접촉 길이의 효과를 평가할 수있다. 그들은 편향 드웰를 사용하여 고원 동안 고체 지질 입자가 측정 된 점착력 (그림 8)에 드웰의 효과를 전달하는 데 사용되었다. 그림 8, 들여 쓰기 드웰를 사용하여 시간의 함수로 그 접착력 증가를 나타냅니다. 이러한 경향은 긴 체류 시간 (180 초)에서 더 분명됩니다.
.. 콜로이드 프로브 nanoscopy에 대한 콜로이드 프로브를 생산하는 데 사용되는 방법의 그림 1 묘사 (A) AFM 캔틸레버는 45 ° 캔틸레버 홀더를 설계 사용자 정의에 부착, (B) 에폭시 / 입자 슬라이드 보조 홀더에 부착되어 있습니다에 미끄러 져 그 현미경 렌즈, (C) 캔틸레버는 천천히 에폭시와 입자를 얻기 위하여 발생된다.
도 2. 캔틸레버의 감도가 Z - 거리 곡선 대 편향의 접촉 영역의 기울기이다.
도 4. 부착 체류 입자가 여기 콜로이드 프로브의 사용은 기판의 지형적 스캔하는 동안 기판 상에 단일 입자 존재의 중복 에러가 발생할 수있다.
제대로 준비 콜로이드 프로브를 사용하여 얻은 그림 5. 지형 스캔. (A) 큰관심의 여러 입자를 공개 스캔, (B) 그 하나의 큰 입자를 드러내는 더 집중 스캔, (C) 단일 입자의 표면에 초점을 스캔.
.. 좋은 힘 곡선의 그림 6 하나는 알고 있어야 여러 가지 제한 사항을 얻은 힘 곡선 (A) 예, AFM의 움직임에 의해 또는 측정하는 동안 현재의 노이즈도 장애를 나타내는 (B) 힘 곡선, (C )으로 인해 취소 평형 캔틸레버에 변동이 철회 / 불안정한 접근으로 이어질 수 있기 때문에 천천히 증발의 측정, 존재하지 않는 동안 (D) 온도 드리프트의 존재는 중간 또는 불안정한 환경 제어의 냉각을 선도.
.. 시료 표면의 콜로이드 프로브 nanoscopy을 사용하여 얻을 수있다도 7 접착력 맵핑 (A) 지형 분포;. (B) 샘플에 걸쳐 최대 접착력의 분포 (C / D)의 그래프의 3 차원 표현은 도시 각각 A 및 B] (E) 지형의 함수로서 부착력의 단일 입체 션 제조 지형 및 밀착성의 힘의 오버레이.
그림 8. 두 개의 다른 드웰 측정 (N = 30), (◊) IND를 사용하여 드웰 시간의 함수로 측정 접착 힘[슬라이드 쇼 (□) 편향; * 95 % 신뢰 (P <0.05)이 꼬리 T-테스트를 이용하여 특정 시점에서의 값간에 상당한 차이를 나타낸다.
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Discussion
액 콜로이드 프로브 nanoscopy 동안 본 시스템 불안정의 여러 소스를 쉽게 적절한 평형 절차를 통해 완화 될 수 있습니다. 논의 된 바와 같이 불안정 이전 객관적으로 분석하기 더 어렵다 잘못된 결과 강제 곡선 초래한다. 불안정성의 모든 소스가 한 경향 및도 4에 도시 된 것과 유사한 그래프가 여전히 존재하는 경우, 다른 측정 파라미터는 이유가 될 수있다. 콜로이드 프로브 nanoscopy시 고려해야 할 중요한 다른 측정 파라미터가 캔틸레버가 결합하고 샘플로부터 후퇴되는 속도 및 힘 측정의 트리거 포인트를 포함한다. 또한,은 콜로이드 프로브의 중심의 위치가 기존의 AFM 팁과 다를 수 있다는 것을 주목해야한다. 따라서, 그것은 측정의 정확성을 극대화하기 위해 직접 프로빙 입자의 중심 위의 레이저 스폿의 위치를 권장합니다.
나는T는 하나의 측정 및 액체 매질에 사용하기 적합 하나에 관심을 강제로 충분한 속도를 선택하는 것이 중요합니다. 단 입자 사이에 존재 부착력에 관심있는 경우, 접근 속도는 중요하지 않다. 그러나, 입자 사이의 매력과 반발력 측정을 위해 방법을 선택하고 충분히 느린 속도를 철회하는 것이 중요합니다. 접근 속도는 상호 작용하고 있지 속도가 캔틸레버의 편향을 지배 할 수 있도록 선택되어야한다. 액체 배지에서 매우 느린 접근 방식은 6C를 그림과 같은 불안정한베이스 라인을 생성합니다 동안 빠른 방법은, 형성하는 매력적인 상호 작용을위한 시간을 허용 압도하지 않습니다. 캔틸레버에 액체 부력은 캔틸레버 방식에서 사용되는 힘과 유사하기 때문에 느린 접근 방식으로 인한 불안정성이다.
이전의 데이터로 간주되어야하는 또 다른 측정 파라미터인수는 마지막 트리거 힘이다. 너무 큰 트리거 힘 측정 중에 큰 변형을 초래할 수 있으며, 심지어는 재료 특성에 따라 프로브 또는 시료를 분쇄있다. 프로브와 샘플 사이의 액체 층이 충분히 입자들 사이에서 밀려되지 않을 수 있으므로 다른 방법으로는, 힘의 너무 작은이, 부정확 한 결과를 얻을 수, 이렇게 측정 된 상호 작용은 입자 입자 수 없습니다. 방법의 최적화가 제대로 화면 얻어진 데이터 표현과 정확성을 기하기 위해 다양한 측정 매개 변수를 테스트하는 것이 중요합니다.
포스는 그림 7과 같이 매핑 큰 쉽게 얻은 데이터 세트를 제공 할 수 있습니다. 지형도이어서 겹쳐 입체적인 표현 해상도 직접 수행 측정의 수와 관련된다. 그러나, 데이터 요소가 더 많은 수의 더 높은 해상도의 이미지를 생성 할 것이지만, 스캔 시간이 크게 증가 될 수있다.힘 매핑을 통해 안정적인 액체 측정 시스템을 유지하는 액체 배지 및 환경 제어에 따라 도전 할 수있다. 가장 큰 관심사 중 하나입니다 액체 증발, 정기적으로 추가 액체로 시스템의 '토핑'에 의해 제한 될 수 있습니다. 그러나, 스캔이 일시 정지 충분한 시간 전에 측정을 다시 시작하여 시스템의 재 평형을 위해 주어진 것이 필수적입니다. 적합한 스캔 시간은 시스템이 측정의 정확도를 보장하기 위해 안정하게 유지 될 수 있도록 선택되어야한다.
순간적인 힘 곡선을 수행 할 힘 곡선을 거주하고, 힘지도 큰 데이터 세트를 할 수있는 능력은 자연적으로 발생하는 모방 환경에서의 콜로이드 시스템에 존재하는 상호 작용을 평가하는 콜로이드 프로브 nanoscopy의 다양성을 전달한다. 여기에 설명 된 방법을 사용하여 얻은 실험 데이터는 콜로이드 안정성에 중요한 통찰력, 정전 기적 상호 작용을 제공 할 수있는ND 응고 속도론. 이 정보는 화면 및 또는 다양한 산업에 걸쳐 본 콜로이드 시스템을 개선하는데 사용될 수있다. 또한이 방법은 세포 상호 작용 및 기능에 대한 특정 약물 또는 물질의 효과 (콜로이드 프로브 제조) 평가하는 생물학적 세포 라인으로 사용될 수있다. 이 작은 분자, 약물 발견 및 배합 설계에 큰 통찰력을 제공 할 수 있습니다. 또한, 서브 마이크론, 심지어 나노 콜로이드 프로브를 생산하는 능력에서 최근의 진보와 함께, 하나는 심지어 나노 콜로이드 시스템을 연구하기 위해 여기에 제시된 방법을 사용할 수 있습니다.
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Acknowledgments
저자는 인정 (1) Nanobiomedical 과학 & 단국대 학교의 재생 의료에 대한 BK21 PLUS NBM 글로벌 연구 센터 및학과에서 자금 지원 우선 순위에서 NRF, 대한민국, (재정 지원 연구 센터 프로그램 (제 2009-0093829) 2) 시설, 시드니 대학의 현미경과 미세 분석에 대한 호주 센터의 과학 및 기술 지원. HKC는 디스커버리 프로젝트 보조금 (DP0985367 & DP120102778)을 통해 금융 지원을위한 호주 연구위원회에 감사합니다. WCH 링키지 프로젝트 부여 (LP120200489, LP110200316)을 통해 금융 지원을위한 호주 연구위원회에 감사합니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Double-Bubble Epoxy | Hardman | 4004 | |
| Veeco Tipless Probes | Veeco | NP-O10 | |
| Porous Particles | Pearl Therapeutics | ||
| Atomic Force Microscope (MFP) | Asylum | MFP-3D | |
| SPIP Scanning Probe Image Processor Software | NanoScience Instruments | ||
| 35 mm Coverslips | Asylum | 504.003 | |
| Tempfix | Ted Pella. Inc. | 16030 |
References
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- Ducker, W. A., Senden, T. J., Pashley, R. M. Direct measurement of colloidal forces using an atomic force microscope. Nature. 353, 239-241 (1991).
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