Summary
Механизмы, ведущие к развитию гиперплазии интимы (Ih) и вены отторжения трансплантата до сих пор мало изучены. Это исследование описывает экс естественных систему заливать человека вены в контролируемых расхода и давления. Кроме того, эффективность внешней арматуры сетки, чтобы ограничить развитие IH оценивали.
Abstract
Основой современных методов лечения для широкого окклюзионной артерий является венозная шунтирование. Тем не менее, его долговечность угрожает гиперплазии интимы (IH), что в конечном итоге приводит к окклюзии сосудов и отторжения трансплантата. Механические силы, особенно с низким напряжение сдвига и высокой напряженности стены, как полагают, чтобы инициировать и поддерживать эти клеточные и молекулярные изменения, но их точное вклад еще предстоит разгадать. Чтобы выборочно оценить роль давления и напряжения сдвига на биологии IH, экс естественных перфузии система (ЦПС) была создана, чтобы заливать сегменты подкожных вен человека при артериальной режима (стресс при высокой скорости сдвига и высокого давления). Дальнейшие технические новшества позволили одновременное перфузии двух отрезков от том же ключе, один армированной внешней сетки. Вены собирали с помощью метода нет касание и сразу переданы в лабораторию для сборки в ЦПС. Один сегмент свежемолотым Isolованные вены не перфузировали (контроль, день 0). Два других сегментов перфузировали на срок до 7 дней, один из которых полностью защищенных с 4 мм (диаметр) внешнего сетки. Давление, скорость потока, и пульс были Постоянный мониторинг и корректировка, чтобы имитировать гемодинамики условия, существующие в бедренную артерию. По окончании перфузии, вены были демонтированы и использованы для гистологического и молекулярного анализа. Под бывших естественных условиях, перфузии высокого давления (артериальной, среднее = 100 мм рт.ст.) достаточно для генерации IH и реконструкцию человека вен. Эти изменения сводятся в присутствии внешнего полиэфирной сетки.
Introduction
Сердечно-сосудистые заболевания являются ведущей причиной заболеваемости и смертности в западных странах 1. Несмотря на достигнутые сдвиги в эндоваскулярного лечения, шунтирование остается основой современных методов лечения, таким образом более полумиллиона венозных шунтов ежегодно производится в США. Тем не менее, несмотря на десятилетия исследований, 30-60% нижних конечностей венозных шунтов терпит неудачу в течение первых лет в связи с гиперплазией интимы (IH) 2. Механические силы, особенно с низким напряжение сдвига (SS) и высокая стена напряженность, являются ключевыми в инициации и развитии этого гиперплазированной ответ 3,4. Для решения этого вопроса, экс естественных условиях вены перфузии система (ЦПС) был создан для изучения, в строго контролируемых условиях гемодинамики (давление и напряжение сдвига), поведения человека подкожных вен. В этом исследовании, после введения в артериальной-обращении, как, высокое давление (среднее = 100 мм рт.ст.) было достаточно, чтобы стимулировать prolifие и миграции гладкомышечных клеток интимы в слое (Ih) 5.
Млекопитающих исследования показали, использование внешнего армирования в качестве эффективного метода для поддержки "arterialized вену" и противодействовать острый гемодинамические изменения вены лица после имплантации в артериальной среде. Сетка предотвратили более-живота, увеличение напряжения сдвига, и снижается напряжение стенок и, следовательно IH 6-10. Тем не менее, основные механизмы и его применимость к человеческим венам в улучшении обходной проходимость не были полностью характеризуется. Наши ЦПС был использован для сравнения, в состоянии, имитирующих изменения вены лица один раз, вставленные в артериальной режима (стресс при высокой скорости сдвига и давления), поведение подкожных вен человека в отсутствие и в присутствии внешнего макропористом полиэстер трубчатой сетки. По предотвращения патологического ремоделирования и IH, сетка представил доказательства своей потенциальной клинической эффективности 11
Это исследование 1) вводит модель экс естественных человека подкожных вен перфузии под регулируемым давлением и напряжением сдвига 2) показывает, что внешняя макро-пористых полиэфирной сетки уменьшает IH и предоставляет важную информацию для ее потенциального клинического применения.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Этический комитет Университета Лозанны утвердил эксперименты, которые в соответствии с принципами, изложенными в Хельсинкской декларации 1975 года, в редакции 1983 для использования тканей человека.
1 человека большой подкожной вены Harvest
- Получить излишки сегменты без варикозных человека подкожных вен у пациентов, перенесших нижний обводной конечностей хирургии для ишемии. В операционной, дезинфицировать всю ногу с раствором йода и драп пациента, чтобы выставить ногу от паха до стопы.
- Сделайте средний надрез от паха до колена (выезд прерванный часть кожи).
- Урожай большой подкожной вены с плодоножкой окружающих (технику не-сенсорный) ткани. Безопасные боковые ветви вен с 4-0 шелковых галстуков. Сразу хранения минимум 9 см в длину избыток сегмента большой подкожной вены, с внешним диаметром 2,5-4 мм при 4 ° С в среде RPMI-1640 Glutamax среднего, с добавлением 12,5% эмбриональной телячьей сыворотки и привести его в лабораторию.
2 ЦПС Дизайн
- Соберите общее оборудование, показанное на рисунке 1. Автоклав все оборудование и держать все компоненты в стерильных условиях. Кроме того, убедитесь, что система является водонепроницаемым и не протекает химических веществ в среде. Используйте Полиметакрилат метил (PMMA-GS) для обложки. Сталь (X5 Cr Ni 18 10) и полиоксиметилен пластик (ПОМ) в качестве носителя вены.
- Конструкция перфузии камеры до желаемой геометрии, чтобы позволить размещение в вену и ее связи. Убедитесь, что глубина (или радиус при использовании цилиндрическую конструкцию), по крайней мере 2,5 см, так что позволяет минимальное сгибание и дилатацию сосуда вместе с постоянной охвата культуральной среде (рисунок 1). Уплотнение является серьезной проблемой и является причиной прямоугольная конструкция PMMA-GS используется.
- Дизайн поддержку вены в нужное геометру. Чтобы избежать вены перегибов или более растяжение, позволяют регулировать длину на толкать или тянуть (винт не могут быть использованы для этой цели, так как вены бы быть скручены вместе с винтом).
ПРИМЕЧАНИЕ: полный стальной стержень соединены 2 раздвижных Г-образные части, которые поддерживают вены цилиндров 2 (диаметр 5 мм, чтобы соответствовать судно) и в вену (рисунок 1b и Рисунок 2) здесь используется. - Дизайн столбец давления, такой, что "отдыхает давление" применяется к системе является: P = 0-10 = HX ρ XG, где р = давление (Н / м 2, Па) ч = высота столба жидкости (м) ρ = плотность жидкости (кг / м 3) и г = гравитационной постоянной (9,81 м / с 2). Дизайн четыре протоки подключения, сверху вниз: для оказания давления, для оттока (из вены), приток (в вену) и позволить среднего изменения.
- Подготовьте среду. Основываясь на предыдущих исследованиях 5,11-14, выбрать RPMI-1640, дополненной Glutamax, 12.5% Фетальной телячьей сыворотки и 1% антибиотиков противогрибковое раствор (10000 ед / мл пенициллина G, плюс 10 мг / мл стрептомицина сульфата, а также 25 мг / мл амфотерицина В, плюс 0,5 мкг / мл): гентамицин. Напряжение сдвига (SS) задается SS = 4 μQ / π * R 3 Q является расход (мл / сек), г радиус (см) сегмента вены, и μ является вязкость перфузии среды.
- Модулируйте SS посредством регулирования вязкости добавлением через 70 кДа декстрана. Измерьте вязкость с помощью вискозиметра. Здесь, добавить 8% 70 кДа декстран установить SS в 9-15 дин / см 2.
- Установка зубчатой передачи насос, чтобы вызвать пульсацию кардиоидной сигнал 60 импульсов / мин и постоянной амплитуды генерации однонаправленный поток 150 ± 15 мл / мин, независимое от давления, приложенного в контролируемой системе, и с помощью компьютера. Убедитесь, что движущей программное обеспечение включает постоянное приобретение и мониторинг давления и скорости потока, частота пульса и сигнала. При желании, использовать второй насос (не синхронизацияhronized), чтобы получить нон-ламинарный, турбулентный поток.
3 ЦПС Ассамблея (Рисунок 1)
- Перед началом, убедитесь, что все оборудование является стерильным. Выполнять все описанные ниже шаги в рамках асептики в ламинаре.
- Поместите вену в чашку Петри со средой. Используйте хирургического лезвия и разделить вену на 3 равные части.
- Немедленно промойте один сегмент в PBS. Разделите сегмент в 3 частях, исправить один в формалине для морфометрии. Замораживание два других для количественного стенограмма (RT-PCR) и белка (вестерн-блот) анализа. Рассмотрим эти сегменты как контроль, нераспространение-перфузии вены.
- Используйте 2 оставшихся сегментов для перфузии.
- Очень осторожно вводят среду в вену и определения нормальной направление потока; в наличии клапанов вен восстанавливается.
- Уплотнение вены имеет первостепенное значение для экспериментальной успеха. Убедитесь в отсутствии утечек через залогов. Зафиксируйте все течи 6-0 шелковыми швами. </ Ол>
- Подключите вен сегмент между двумя металлическими цилиндрами, один конец за один раз (2,3, рис 1). Закрепите цилиндры с Ethibon 3-0 вокруг углубления (Рисунок 1А и В).
- Поместите всю венозную сегмент в перфузии камеры ранее заполненной среде. Повторите ту же процедуру для второго сегмента.
ПРИМЕЧАНИЕ: Неправильное запечатать вену в цилиндр будет источником утечки, требуют повторных операций, и значительно увеличить риск инфекции и экспериментальной неудачи.
- Поместите всю венозную сегмент в перфузии камеры ранее заполненной среде. Повторите ту же процедуру для второго сегмента.
- Для усиления (сетка) второй сегмент, выпустить два цилиндра (с вены прилагается) от Г-образных фигур (2,3 и рис 1).
- Будьте нежны и не прикасайтесь к вену с любыми инструментами. Авто сетку сначала на цилиндр затем на вены. Тяни / Толкай толкотня получите сетку на вены.
- После того, как сетка покрывает всю поверхность вены обеспечить Jacketed вены в цилиндры с Ethibon 3-0.
- Соберите вены / цилиндра соединение с L-образный поддержку и передать его на камеры перфузии, ранее заполненной среде.
- Подключите каждый металлический цилиндр (в-и оттока) в Y-разветвитель с помощью перекиси обращению силиконовые трубки с внутренним диаметром 3,2 мм.
- Подключение разветвитель оттока на второй Y-разветвитель, используя тот же тип трубы. С этой Y-разветвитель, использовать одну трубку для измерения давления перфузии через обоих судов. Подключите другой его обратно в колонну, чтобы образуют замкнутую систему цикла (Рисунок 2).
- Внутри инкубатора, использовать длинный (один метр длины) трубки для подключения колонки давления к головке насоса.
- Завершения настройки при подключении насоса голову к притока Y-разветвитель на другой большой длины трубы (рисунок 1).
4 Вены перфузии
- После сборки ЦПС был совместноmpleted, заполнить колонку со средой (оставаться ниже оттока вены канала, чтобы позволить заправки). Добавить больше среду в колонну, пока система не будет заполнен. Перемещение всю систему в инкубаторе при температуре 37 ± 0,1 ° С с рН поддерживали на постоянном уровне 7,40 ± 0,01 (с использованием алгоритма СО 2 / рН, основанный на уравнении Хендерсон-Хассельбаха).
- Принесите голову передач насоса вне инкубатора и подключить его к приводу передач насоса. Винтовые стержни чтобы закрепить.
- Перейти от мощности накачки, убедитесь, что он активируется на программное обеспечение вождения и позволяют 5 мин, чтобы среда равномерно распределяется в каждом отсеке.
- Чтобы контролировать давление, использовать мониторинг артериального строки. Подключите выход давления ЦПС (это соответствует артериального катетера) к датчику давления, связанного с компьютером.
- Убедитесь, что трубка полностью заполнена средой и не содержит никаких пузырей. Де-пузырь систему культуры через "артериальной Liпе "трубка (Рисунок 2). Обратите внимание на дисплее и отыскать пульсирующим кардиоидной сигнала 60 импульсов / мин с постоянной амплитудой. В этот момент, среднее давление находится в диапазоне от 0-10 мм рт. Если давление <0 и столбец постепенно впадает искать утечки (вен залога или ненадлежащее уплотнения между веной и трубки).
- Установите минимальное давление на 6 мм рт.ст. для венозной теста или на 90 мм рт.ст. для артериальной теста. В этих условиях, воздушного инжектора применяется требуемое давление в колонне и системы.
- Изменение среды каждые 2 дня, используя трубку, подключенный к колонке давления. Для предотвращения ущерба от изменения давления, откройте пробку столбца первой.
5 Завершение перфузии
- После 3 или 7 дней перфузии: принять ЦПС из инкубатора и демонтировать вены. Откажитесь от 5 мм ближней и дальней вены концы прикреплены к оборудованию. Вырезать центральную, толщина 5 мм РинGS от оставшегося сегмента и исправить в формалина (морфометрии). Заморозьте оставшиеся фрагменты и уменьшить в порошок для дальнейших молекулярных анализов.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ЦПС предоставляет ценный инструмент самостоятельно оценить гемодинамические силы на подкожная вена человек прививает ремоделирования и IH.
На рисунке 1 показана перфузии камеры и поддержку вену. На рисунках 1А и В, поддержка вены до (1А) и после (Рисунок 1В) в сборе, соответственно, на фото. Он состоит (от вершины до основания) 1 простой трубке из нержавеющей стали размером 9 см, который служит в качестве опоры для 2 Г-образных частей, которые легко скользят (слева направо) и обеспечивает надежную технику настроить размер поддержки в вену. Каждая из этих частей имеет POM диск, чтобы соответствовать стальной цилиндр (разъем вены), установленный в месте по комплексной винта (стрелки). Рисунок 1C-D показывает перфузии камеры в одиночку (C) и после введения поддержке вен (D). На перфузии камеры, депрессии предназначены дляудерживайте поддержку вены в месте (сверху) и, чтобы избежать перегибов из соединительной трубки, входящие и из вены (внизу).
Рисунок 2 показывает в реальном масштабе времени изображений (Фиг.2А) и схематическое изображение (2В) из ЦПС. Перфузии камеры, вены и ее опоры, а также колонна давление, поддерживаются в контролируемой среде (температура, CO 2 и O 2), тогда как насосом, инжектором давления, и управления все остаются вне инкубатора. На рисунке показано, зубчатой передачи насос (1), который генерирует пульсирующий сигнал, управляемый компьютером (2), который контролирует скорость потока (3), давление (4), и контролирует минимальное диастолическое давление (5); два сегмента из одного и того же подкожной вены соединены параллельно к перфузионной насоса внутри отдельных перфузии камер (6а и 6b) помещают в инкубаторе для клеточных культур.
На рисунке 3, Гистоморфометрическое анализ показывает, что внешнее армирование предотвращает гиперплазию интимы и патологических медиа ремоделирование в противном случае наблюдалось после 7 дней под высоким давлением (артериальной режима, среднее = 100 мм рт.ст.) перфузии. В рисунке 3А, представительные гистологические срезы, окрашенные для гематоксилинэозином (ОН) раскрывает прокладку просвет ядрами эндотелиальных клеток и ядер ГМК в медиа-слоя в любых условиях. Рисунки 3B-C показывает представитель Ван Гизону эластичной оболочкой ( VGEL) окрашивали разделы. На фиг.3В, интима утолщена (IH) в венах перфузии при высоком давлении (в среднем = 100 мм рт.ст.) в течение 7 дней по сравнению с контрольными не-перфузированных вены, это явление в значительной степени снижается в присутствии внешнего сетки. Фиг.3С показан патологическое наружу реконструкции и СМИ истончение в венах, подвергшихся 7 дней артериального давления. Это в значительной степени предотвращается с помощью внешнего армирования. Furthermorе, в фиг.3Г, трихромом окрашивания Массона (синий = соединительной ткани, красный = мышцы) связывает это патологическое ремоделирование с сохранением только один из трех слоев мышц и накопления гладкомышечных клеток во внутреннем слое (интима). Внешний арматура сохраняет распределение SMCS и СМИ структуры.
Фиг.4 иллюстрирует текущую клиническое применение внешнего сетки. Наглядный пример обеспечивается внешним армирования с аневризмы артериовенозного свища (доступ гемодиализ). 4А показывает временное представление блюд из арматуры вен (от верхней части к нижней). Во-первых, сетка была помещена вокруг жесткой трубки, а оконечность вену в прикреплен к оправке (верхняя панель). Затем вены был остановлен через трубы, благодаря оправки. После того, как был вены в месте, трубка медленно втягивается, в результате чего сетка вокруг вены (UДОРП и средняя панель). В данном конкретном случае, процедура повторялась с обеих сторон венах, и сегменты вены и сетки подкрепления были собраны анастомоза конец в конец (нижняя панель). 4В обеспечивает большую вид на артериовенозного конце -в стороне анастомоза, показывая, что сетка оборачивается вокруг анастомоза, связывая его вдоль задней стенки артерии.
Рис.1 поддержка вены и перфузии камера. А. Поддержка вены состоит из 1 простой трубки, 2 L-образный штук, диски и цилиндры (формы сверху на дно). B. Поддержка вены собранном. С. Вид перфузии камеры. D. перфузии Камера предназначена для проведения на месте поддержку вены и позволяет его подключенияион в вену и соединительных трубок.
Рисунок 2 Экс естественных перфузии система. А. полностью собрать ЦПС в культивирования клеток инкубатора. Б. Схематическое изображение. 1) насос генерации пульсирующего кардиоидную волну; 2) компьютер регулирования давления, расхода (тип, скорость и амплитуду); 3) расходомер; 4) датчик давления - артериальная линия; 5) форсунки под давлением; 6) два сегмента на той же самой подкожной вены перфузируют без (6а) или с внешним армирующую сетку (6b).
Рисунок 3 внешнего армирования предотвращает гиперплазию интимы.. Характерные гистологические срезы окрашивали гематоксилином-эозином (HE). Бар представляет 50 мкм. До нашей эры. Представительства гистологических срезах, окрашенных для эластина (VGEL). л = люмен м = СМИ, IH = гиперплазия интимы. Бар представляет 50 мкм. Д. Представительства гистологических срезах, окрашенных трихромом Массона. Бар представляет 50 мкм.
Рис.4 Внешний армирование аневризмы свища. А. Время-курс фотографии арматуры вен (сверху вниз). Б. большего размера в артериовенозного конца в сторону анастомоза.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Это исследование раскрывает экс естественных условиях вены перфузии системы (ЦПС) на выполнение работ по гемодинамики исследования в человека вен. Эта система позволяет подкожных вен перфузии при определенных параметров гемодинамики при отсутствии отягчающих воспалительных и факторов роста, опубликованным циркулирующих клеток в естественных условиях. Таким образом, он обеспечивает лучшее понимание основных путей, участвующих в контроле IH в человека вен трансплантатов 5,11,12,15.
Воспроизводимые и исчисляемая гемодинамики возмущения ограничены в естественных условиях. Несколько сложных мышиные микрохирургические процедуры были описаны. Использование изотрансплантат модель байпаса через интерпозицией полой вены от мыши-донора в правой общей сонной артерии и дополнительное создание отток филиала перевязки, в середине трансплантата или общий стеноз сонной, расхода и СС остро снижение и повышенную IH 3. Внешний против внутрь ремоделирования может быть, кроме того междуrogated помощью середине очаговую против дистального общей сонной стеноза 16. В крупных животных (овцы, свиньи, и бабуина), шунтов технически проще и представляют собой привлекательный подход, чтобы проверить доклинические размера устройства человека, таких как сетки, используемой в настоящем исследовании, 8-10. Тем не менее, его стоимость и нехватка проверенных молекулярных инструментов ограничить использование этих стратегий. Наконец, эти манипуляции потоков постоянно изменять напряжение стенок и не опрашивает одного из компонентов в отдельности. Кроме того, сложные отношения между гемодинамики и иммунной и эндокринной систем дальнейших ограничить анализ одного актера.
Несколько проблемы возникают при использовании в ЦПС. 1) низкой степени бактериальное загрязнение часто сопровождается урожай человеческого вен и экс-естественных условиях отсутствия оборотных клетки выступают в качестве важной причиной инфекции. В основном это предотвратить, мытья рук кусочки отдельно, то автоклавирование все материалы доиспользовать. Кроме того, сборка выполнена менее чем за 90 минут и при строгой асептики. 2) Уплотнение, что переносит многократную стерилизацию. По этой причине, прямоугольной конструкции ПММА-GS был использован, избегая использования суставов и ограничение деформации. 3) SS и стены напряжение рассчитаны на определенные моменты времени, на основе радиуса просвета сосуда (гистологии), потока и вязкости при постоянном. Интеграция продольной томографии (камеру высокого разрешения, лазерной или Доплера), который непрерывно контролирует диаметр вен и / или потока обеспечит более подробную информацию о локальных вариаций потока и позволит циклические расчеты деформации. 4) Две параллельные сегменты вены может иметь неконтролируемые различия в их соответствии стенки и радиуса. Таким образом, сравнивать только сегменты с той целью и предположить, что под тем же давлением, шаблон скорость потока подобны в обоих сегментах.
В этом исследовании, вены были представлены ударные ламинарного потока; Тем не менее, 50% оF интимальных гиперпластические поражения возникают в конец в бок perianastomotic областях венозных шунтов, где ламинарный поток нарушается. Турбулентных условиях могут быть смоделированы с добавлением второго насоса, не синхронизирован с первым насосом. Будущие исследования будут проводиться в специально оценить влияние нарушения ламинарного потока на IH и потенциально положительный эффект армирования сеткой. Интересно, что гибкая структура сетки позволяет окружной обертывание на анастомоза сайтов, как уже выполняется для ремонта Аневризматическое свищей 17 (рисунок 4). Таким образом, сетка может оказаться полезным для ограничения perianastomotic дилатацию, нарушение ламинарного потока и, следовательно, уменьшить IH на анастомоза сайтов. Это может быть особенно полезно в дистальном шунта, часто зависит от диаметра несоответствия вены и большеберцового или малоберцового артерии.
Таким образом, установка показано здесь позволяет параллельно перфузию человека противEins, при одинаковых условиях гемодинамики. Эти данные показывают, что использование внешнего трубчатого макропористой полиэфирной сеткой является эффективным способом, чтобы ограничить развитие IH в венозных шунтов, вставленные в артериальной среды 11. Эта система может получить прибыль несколько областей исследования. Особенно, это проявляется как мощный инструмент для выполнения доклинических исследований проверки возможности и эффективность различных подходов к сокращению IH в человеческом материале, и является ценным дополнением к в естественных условиях на животных моделях. Другие носители протезов или сетки, покрытые фармацевтических агентов будут оценены с помощью этого метода 6-10. Кроме того, можно было бы предположить, чтобы проверить локально, применяемых фармакологических молекул IH, чтобы предотвратить в ткани человека, в ближайшем физиологического состояния. Вмешательства генной терапии также достижимы, трансдуцирующих сегмент вены, чтобы сверхэкспрессировать или молчание генов-мишеней, представляющих интерес.
В заключение, наша система увеличит нашу ипвития представлений гемодинамической вклад в заболеваниях вен привитых человека. Она обеспечивает инновационная платформа для тестирования новых терапевтических стратегий и могут возникнуть как «скамейке в рядом инструмент перевода."
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана грантами от ОЯТ [31003A-138528], в Octav и Марселла Ботнарь фонда, Фонда Новартис и Эмма Мушамп фонда. Мы благодарим Martine Lambelet и Жан-Кристоф STEHLE за отличную техническую помощь.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| RPMI 1640 - Glutamax | Life Technologies | 61870-010 | |
| Penicilline/Streptomycine/Fungizone | Bioconcept | 4-02F00-H | |
| Dextran from Leuconostoc spp. 500 g | Sigma-Aldrich | 31390 | |
| Tampon PBS CHUV pH 7.1-7.3 1 L | Laboratorium und Grosse Apotheke Dr. G. Bichsel AG | 100 0 324 00 | |
| Cryosectionning embedding medium - Tissue-Tek OCT Compound | Fisher Scientific | 14-373-65 | |
| Silicon Tubing (Peroxide) L/S 16 (96400-16 ) - 7.5 m | Idex Health & Science GMBH | MF0037ST | |
| Y-splitter | Idex Health & Science GMBH | Y-connector | |
| 35 mm Culture dish | Sigma-Aldrich | CLS430165-100EA | |
| 15 ml Falcon tube | BD Bioscence | 352096 | |
| 50 ml Falcon tube | BD Bioscence | 352098 | |
| Gearing pump - Reglo-Z | Idex Health & Science GMBH | SM 895 | App-Nr 03736-00194 |
| Pump Head | Idex Health & Science GMBH | MI0008 | |
| Monitoring Kit TRANSPAC IV | icumedical | 011-0J736-01 | |
| 20 ml Syringes | B. Braun Medical SA | 4612041-02 | |
| Etibon 3-0 FS-2 | Ethicon- Johnson&Johnson | EH7346H | |
| Mesh ProVena 6-8mm | B. Braun Medical SA | 1105012-14 | |
| NaCl: Sodium chloride solution perfusion 0.9% (100 ml) | B. Braun Medical SA | 534534 | |
| Masterflex L/S Standard Drive | Cole-Parmer Instrument Co | 7521-10 | |
| Acquisition card | National Instruments | PCI-6024 E | |
| Flowmeter module | Transonic Systems Inc. | TS410 and T402 | |
| Stopcock with 3-ways | BD Connexta Luerlock | 394600 | |
| Millex Filter | Milian | SE2M229I04 |
References
- Sal Go, A., et al. Executive summary: heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the american heart association. Circulation. 129, 399-410 (2014).
- Sal Conte, M., et al. Results of PREVENT III: a multicenter, randomized trial of edifoligide for the prevention of vein graft failure in lower extremity bypass surgery. Journal of Vascular Surgery. 43, 742-751 (2006).
- Yu, P., Nguyen, B. T., Tao, M., Bai, Y., Ozaki, C. K. Mouse vein graft hemodynamic manipulations to enhance experimental utility. The American Journal of Pathology. 178, 2910-2919 (2011).
- Davies, M. G., Hagen, P. O. Reprinted article "Pathophysiology of vein graft failure: a review". European journal of vascular and endovascular surgery : the official journal of the European Society for Vascular Surgery. 42, Suppl 1. S19-S29 (2011).
- Berard, X., et al. Role of hemodynamic forces in the ex vivo arterialization of human saphenous veins. Journal of Vascular Surgery. 57, 1371-1382 (2013).
- Vijayan, V., et al. Long-term reduction of medial and intimal thickening in porcine saphenous vein grafts with a polyglactin biodegradable external sheath. Journal of Vascular Surgery. 40, 1011-1019 (2004).
- Jeremy, J. Y., et al. On the biology of saphenous vein grafts fitted with external synthetic sheaths and stents. Biomaterials. 28, 895-908 (2007).
- Zilla, P., et al. Constrictive external nitinol meshes inhibit vein graft intimal hyperplasia in nonhuman primates. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136, 717-725 (2008).
- Zilla, P., et al. Utilization of shape memory in external vein-graft meshes allows extreme diameter constriction for suppressing intimal hyperplasia: a non-human primate study. Journal of Vascular Surgery. 49, 1532-1542 (2009).
- Yeoman, M. S., et al. A constitutive model for the warp-weft coupled non-linear behavior of knitted biomedical textiles. Biomaterials. 31, 8484-8493 (2010).
- Longchamp, A., et al. The use of external mesh reinforcement to reduce intimal hyperplasia and preserve the structure of human saphenous veins. Biomaterials. 35, 2588-2599 (2014).
- Saucy, F., et al. Ex vivo pulsatile perfusion of human saphenous veins induces intimal hyperplasia and increased levels of the plasminogen activator inhibitor 1. European Surgical Research. Europaische Chirurgische Forschung. Recherches Chirurgicales Europeennes. 45, 50-59 (2010).
- Dubuis, C., et al. Atorvastatin-loaded hydrogel affects the smooth muscle cells of human veins. The Journal of pharmacology and experimental. 347, 574-581 (2013).
- Deglise, S., et al. Increased connexin43 expression in human saphenous veins in culture is associated with intimal hyperplasia. Journal of Vascular Surgery. 41, 1043-1052 (2005).
- Muto, A., Model, L., Ziegler, K., Eghbalieh, S. D., Dardik, A. Mechanisms of vein graft adaptation to the arterial circulation: insights into the neointimal algorithm and management strategies. Circulation Journal : Official Journal of the Japanese Circulation Society. 74, 1501-1512 (2010).
- Tao, M., et al. A simplified murine intimal hyperplasia model founded on a focal carotid stenosis. The American Journal of Pathology. 182, 277-287 (2013).
- Berard, X., et al. Salvage treatment for venous aneurysm complicating vascular access arteriovenous fistula: use of an exoprosthesis to reinforce the vein after aneurysmorrhaphy. European Journal of Vascular and Endovascular Surgery : the Official Journal of the European Society for Vascular Surgery. 40, 100-106 (2010).
