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Behavior

मॉडरेट प्रसव पूर्व शराब जोखिम और वयस्क चूहों में सामाजिक व्यवहार की मात्रा का ठहराव

doi: 10.3791/52407 Published: December 14, 2014

Introduction

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बच्चों की अनुमानित 1-5% भ्रूण शराब सिंड्रोम (एफएएस), आंशिक एफएएस (pFAS), और शराब से संबंधित neurodevelopmental विकार (ARNDs) 3 में शामिल हैं जो भ्रूण शराब स्पेक्ट्रम विकार (FASDs) 2, के साथ का निदान कर रहे हैं। सामाजिक व्यवहार और अनुभूति में घाटा FASDs 4-7 के साथ बच्चों में मनाया सबसे आम प्रतिकूल परिणामों में हैं। नकारात्मक परिणामों FASDs 8-10 साथ मनुष्यों में अपेक्षाकृत सूक्ष्म, लेकिन फिर भी लगातार पैदा कर सकता है FAS के विशिष्ट, रूपात्मक व्यवहार और संज्ञानात्मक घाटे विशेषता के लिए नेतृत्व नहीं करता है कि उदारवादी पीएई के रूप में भारी जन्म के पूर्व शराब जोखिम (पीएई) के घाटे सीमित नहीं हैं और गैर मानव जानवरों मस्तिष्क के विकास में 11 के दौरान इथेनॉल से अवगत कराया। उदारवादी पीएई के व्यवहार और इसी neurobiological परिणामों को समझने के महत्व FASD मामलों की बड़ी संख्या को कम के भीतर गिर यह दर्शाता है कि मौजूदा अनुमानों से रेखांकित किया हैस्पेक्ट्रम 12 के Evere सीमा होती है।

कई स्वतंत्र प्रयोगशालाओं सहित मस्तिष्क के विकास के दौरान जोखिम इथेनॉल से संबंधित कृंतक सामाजिक व्यवहार में परिवर्तन की सूचना दी खेलने 14,16,17 बदल जांच और बातचीत 1,13-15, कमी आई है, सामाजिक उत्तेजनाओं को प्रतिक्रिया में आक्रामक बातचीत 17,18, परिवर्तन की वृद्धि हुई है सामाजिक रूप से अधिग्रहीत भोजन वरीयताओं को और सामाजिक मान्यता स्मृति 22 में 19-21, और घाटे। सामाजिक व्यवहार घाटे भारी (रक्त इथेनॉल सांद्रता (BECs) ~ 300mg / डीएल) 22,23 या इथेनॉल के अधिक मध्यम स्तर (BECs ~ 80mg / डीएल) 1, और अन्य महत्वपूर्ण के लिए मानकों का एक व्यापक रेंज भर में निम्न जोखिम मनाया गया है व्यवहार माप के समय में लोगों तक पहुंचाने के समय, जोखिम की अवधि, और उम्र सहित कारकों।

पिछले अनुसंधान सामाजिक पूर्णांक के विशिष्ट पहलुओं में है कि परिवर्तन का प्रदर्शन किया हैवयस्कता में eraction 1,18 साकारीन उजागर करने के लिए नियंत्रण जानवरों से शराब के मध्यम स्तर के संपर्क में चूहों भेदभाव। विशेष रूप से, उदारवादी पीएई लगातार आक्रामक व्यवहार में बढ़ जाती है, और वयस्कता में (साथी की सूँघने जैसे,) सामाजिक जांच के निचले स्तर से पता चलता है जो कुश्ती में मजबूत बढ़ जाती है, के साथ संबद्ध किया गया है। सामाजिक व्यवहार में परिवर्तन पीएई के विश्वसनीय परिणामों होते हैं, क्योंकि पीएई निम्न सामाजिक व्यवहार की मात्रा का ठहराव सामाजिक व्यवहार में पीएई संबंधी परिवर्तन के तंत्रिका अड्डों में से एक और पूरी समझ और हस्तक्षेप के दृष्टिकोण के विकास की ओर प्रगति के लिए महत्व पकड़ सकता है। इस पत्र और जुड़े वीडियो का लक्ष्य है कि वयस्क संतानों में सामाजिक व्यवहार की मात्रा का ठहराव के लिए उदारवादी पीएई प्रोटोकॉल और तरीकों पर शिक्षा प्रदान करना है मज़बूती से विख्यात जन्म के पूर्व शराब उजागर गैर उजागर चूहे संतानों से।

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Protocol

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यहाँ और साथ वीडियो में वर्णित सभी प्रक्रियाओं स्वास्थ्य विज्ञान केंद्र के संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समितियों और न्यू मैक्सिको विश्वविद्यालय के मुख्य परिसर के द्वारा अनुमोदित किया गया है।

1. प्रसव पूर्व इथेनॉल एक्सपोजर

  1. सभी आवश्यक सामग्री और रसायनों प्राप्त करें: Saccharin सोडियम नमक हाइड्रेट, 190 सबूत इथेनॉल (मात्रा से 95% शराब), मनके गिलास पीने ट्यूब, एक छेद, एक "मोड़ ट्यूब गेंद बिंदु, कागज शासकों www से मुद्रित प्राकृतिक रबर सफेद # 4 डाट .vendian.org / mncharity / dir3 / paper_rulers /।
  2. एक विक्रेता या वैकल्पिक स्रोत से सिद्ध वयस्क ब्रीडर चूहों प्राप्त करते हैं। इस प्रोटोकॉल में प्रस्तुत तरीकों और प्रतिनिधि डेटा के लिए लंबी इवांस प्रजनक का प्रयोग करें। महिलाओं 125-150 ग्राम और वे प्रजनन के समय में लगभग 9-10 सप्ताह पुराने हैं कि इस तरह के आगमन पर उम्र के 6-7 सप्ताह (1.5 कदम) वजन। सभी भावी बांधों पहली बार माताओं हैं सुनिश्चित करें। पुरुषों के 12 हैं कि सुनिश्चित करेंआगमन पर उम्र के हफ्तों और प्रजनन प्रोटोकॉल के शुरू में पुराने 15 हफ्तों।
  3. हाउस एक रिवर्स 12 घंटा / प्रकाश अंधेरे समय पर 22 डिग्री सेल्सियस पर व्यक्तिगत रूप से प्लास्टिक पिंजरों में जानवर (09:00 घंटा करने के लिए 21:00 से पर रोशनी)। सभी पीने के सत्र के दौरान सहित, अध्ययन के दौरान भोजन और पानी के नल यथेच्छ के लिए पहुँच प्रदान करते हैं। 1.4 कदम के लिए आगे बढ़ने से पहले की सुविधा के लिए दशानुकूलन के लिए कम से कम एक सप्ताह की अनुमति दें।
  4. प्रत्येक महिला चूहे के लिए आधारभूत शरीर भार प्राप्त करते हैं।
  5. 2 सप्ताह के लिए मादा चूहों में पूर्व गर्भावस्था पीने के स्तर का मूल्यांकन। चरणों का पालन करें 1.5.1-1.5.6 क्रम में।
    1. दिन पर एक और दो नल के पानी में 0.066% साकारीन समाधान (कोई इथेनॉल) युक्त एक पीने ट्यूब भरना। खपत इसे भरने के लिए पहले पीने ट्यूब मिमी परिशुद्धता के साथ एक कागज शासक प्रत्यय यों। यह इथेनॉल खपत यों की नलियों वजन के साथ जुड़े माप में त्रुटि कम कर देता है के रूप में इस विधि का प्रयोग करें। शासक पर 20 मिमी चिह्नित करने के लिए ट्यूब भरें। चार घंटे की drinki शुरू करोएनजी सत्र (1.5.1-1.5.6 और 1.7 कदम) गतिविधि और पीने का स्तर उच्चतम रहे हैं जब अंधेरा चरण (10:00 एचआर) के शुरू होने के बाद एक घंटा।
    2. प्रत्येक पीने के सत्र के अंत में भस्म हो गया था कि साकारीन समाधान की मात्रा यों। माप की सुविधा के लिए अग्रिम में शासक पर मिमी प्रति समाधान की मात्रा का निर्धारण और मात्रा मिमी परिवर्तित। यहाँ की सिफारिश की ट्यूबों के लिए प्रत्येक मिमी 0.366 मिलीग्राम से मेल खाती है।
    3. दिन 3 और 4 पर 2.5% इथेनॉल (वी / वी) और नल के पानी में 0.066% साकारीन समाधान के साथ एक ट्यूब भरना। प्रत्येक सत्र के अंत में भस्म हो गया था कि (शरीर के वजन के प्रति किलोग्राम वजन) इथेनॉल समाधान की राशि यों।
    4. दिन पर 5 और उसके बाद 5% इथेनॉल (वी / वी) और नल के पानी में 0.066% साकारीन समाधान के साथ एक ट्यूब भरना। प्रत्येक सत्र के अंत में भस्म हो गया था कि (शरीर के वजन के प्रति किलोग्राम वजन) इथेनॉल समाधान की राशि यों।
    5. पूर्व गर्भावस्था पीने चरण के पूरा होने पर चूहों का वजन और मतलब इथेनॉल consum की गणनाption और पूरे समूह के लिए मानक विचलन। खपत से अधिक एक मानक विचलन गर्भावस्था के दौरान स्वैच्छिक पीने में परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए अध्ययन से इसका मतलब यह ऊपर या समूह से नीचे है जो मतलब के लिए चूहों को निकाल दें।
    6. पूर्व गर्भावस्था पीने के स्तर को दो समूहों के लिए संभव के रूप में बारीकी से मिलान कर रहे हैं कि इस तरह के साकारीन नियंत्रण या पीएई शर्तों या तो शेष चूहों निरुपित।
  6. 1-14 दिनों जोड़ी के भीतर एक सिद्ध पुरुष ब्रीडर के साथ प्रत्येक महिला चूहा। मादा चूहों प्रजनन चरण के दौरान इथेनॉल का उपभोग नहीं करते। एक योनि प्लग की मौजूदगी से गर्भावस्था की पुष्टि महिला चूहे तौलना, और व्यक्तिगत रूप से उसके घर। इस अध्ययन से महिलाओं को हटाने के बाद जो अप करने के लिए 5 दिनों के लिए एक पुरुष ब्रीडर के साथ मादा चूहों को छोड़, गर्भावधि दिन 1. वैकल्पिक के रूप में परिभाषित किया गया है।
    नोट: गर्भावस्था के दौरान इथेनॉल खपत एक योनि प्लग की उपस्थिति के लिए गर्भावधि दिन एक निरीक्षण पर 10:00 घंटा में शुरू होता है क्योंकि प्रदर्शन किया जाना चाहिएइस समय से पहले।
  7. गर्भावस्था की अवधि के लिए प्रति दिन चार घंटा (1000 करने के लिए 1400 मानव संसाधन) के लिए इथेनॉल या साकारीन समाधान प्रदान करते हैं।
    1. गर्भावधि दिन 1 पर शुरू, 0% या 5% इथेनॉल और समूह के काम पर आधारित नल के पानी में 0.066% साकारीन समाधान के साथ या तो मादा चूहे प्रदान करते हैं। साकारीन नियंत्रण चूहों को उपलब्ध कराई 0% इथेनॉल समाधान की मात्रा इथेनॉल चूहों द्वारा खपत 5% इथेनॉल समाधान का मतलब मात्रा करने के लिए मिलान किया जाता है सुनिश्चित करें। प्रत्येक सत्र के अंत में भस्म हो गया था कि या साकारीन (शरीर के वजन के प्रति किलोग्राम वजन) इथेनॉल समाधान की राशि यों।
    2. मातृ वजन बढ़ाने का आकलन करने के लिए साप्ताहिक चूहे बांधों वजन।
    3. पीने के सत्र सहित सभी समय पर भोजन और पानी के नल प्रदान करें।
    4. संतानों के जन्म लेते हैं जब इथेनॉल जोखिम प्रक्रियाओं रहेगा। जन्म के समय लाइव पिल्ले और पिल्ला वजन की संख्या रिकॉर्ड। प्रसव के बाद दिन 0 के रूप में जन्म के दिन निर्दिष्ट।
    5. प्रसव के बाद दिन में 2-3 लगभग 10 पिल्ले को कूड़े चुनना। टी प्रयासओ प्रत्येक कूड़े में महिला पशुओं के लिए पुरुष के बराबर अनुपात को बनाए रखने। यह संभव नहीं है, तो पुरुषों और महिलाओं की एक असमान संख्या के साथ 10 पिल्ले को चुनना।
    6. रिकॉर्ड पिल्ला वजन जन्म के बाद 2-3 दिनों के लिए।
    7. एक ही जन्म के पूर्व का इलाज हालत से एक पशु के साथ ही सेक्स जोड़े में लगभग प्रसव के बाद दिन 21-24 और घर में जानवरों को छुड़ाना। संभावित कूड़े प्रभाव को सीमित करने के प्रयोग के प्रति प्रत्येक कूड़े से अधिक से अधिक 1-2 चूहों का प्रयोग न करें।

2. सामाजिक व्यवहार

  1. प्राप्त करें और सभी आवश्यक सामग्री और उपकरण तैयार करते हैं।
    1. सामाजिक संपर्क के लिए एक उपकरण प्राप्त करते हैं। साफ और स्वच्छ बनाना आसान है कि सामग्री का निर्माण एक खुला शीर्ष के साथ एक कक्ष का प्रयोग करें। तंत्र के सामने फिल्माने के लिए कठोर पारदर्शी प्लास्टिक (~ 2 मिमी मोटाई) के साथ कवर किया जाना चाहिए। रेखा पारदर्शी प्लास्टिक (~ 2 मिमी मोटाई) के साथ भीतरी दीवारों और फर्श की सफाई और गंध नियंत्रण में सहायता करने के लिए। वापस इंटीरियर वा साथ प्लेस दर्पणडालूँगा विश्लेषण सहायता करने के लिए।
      नोट: प्रतिनिधि डेटा यहां तंत्र के आंतरिक पक्ष और फर्श को कवर करने के लिए एक कस्टम चैम्बर एक खुला शीर्ष और कठोर पारदर्शी प्लास्टिक (2 मिमी मोटाई) के साथ (× 43 सेमी लंबा चौड़ा 95 सेमी लंबी × 47 सेमी) की रिपोर्ट के लिए इस्तेमाल किया गया था। दर्पण पीछे की दीवार के साथ रखा गया था। विशिष्ट आयाम और सामग्री सामाजिक व्यवहार की माप के लिए महत्वपूर्ण नहीं हैं, हालांकि, यह आयाम पर्याप्त है कि वास्तविक सामाजिक संपर्क सुनिश्चित करने के लिए बड़े अन्य व्यवहार से प्रतिष्ठित किया जा सकता हो कि सिफारिश की है। जानवरों है कि एक दूसरे के करीब निकटता में हमेशा नहीं कर रहे हैं इतना है कि तंत्र इतना बड़ा होना चाहिए।
    2. सभी फिल्माने में दिखाई स्पेक्ट्रम के कम या कोई परिवेश प्रकाश व्यवस्था के साथ आयोजित किया जाता है के रूप में कम या कोई प्रकाश स्थितियों के तहत रिकॉर्डिंग के वीडियो कैमरों सक्षम प्राप्त करते हैं। इसके मूल में अंधेरे शर्तों के तहत, कैमरा हालांकि, अवरक्त स्पेक्ट्रम के भीतर एक उच्च संकल्प किया है कि रिकॉर्डिंग में सक्षम किसी भी कैमरे सुनिश्चित करेंअतिरिक्त अवरक्त illuminators के साथ रात मोड या पर्याप्त होना चाहिए।
    3. तंत्र के आसपास स्थिति अवरक्त illuminators वीडियो रिकॉर्डिंग में तंत्र की प्रकाश व्यवस्था में सुधार होगा।
    4. प्रयोगशाला ग्रेड लकड़ी के चिप्स (एस्पेन चिप) प्राप्त करते हैं।
    5. सत्र और गंध नियंत्रण के बीच तंत्र की सफाई के लिए एक ब्रश, dustpan, क्लोरीन डाइऑक्साइड और isopropyl शराब (70%) प्राप्त करते हैं।
  2. उपकरण दशानुकूलन और सामाजिक व्यवहार
    1. प्रयोग के इस चरण के लिए, उम्र के कम से कम 90 दिनों कर रहे हैं कि वयस्क चूहों में माप करना।
    2. पहले प्रत्येक सत्र के लिए, किसी भी जंगल चिप्स निकालने के सत्र के बीच में odors को नियंत्रित करने और नए सिरे से लकड़ी के चिप्स प्रदान करने के लिए isopropyl शराब के साथ स्वच्छ तंत्र पोंछे। लकड़ी के चिप्स पूरी तरह तंत्र के नीचे कवर सुनिश्चित करें। स्वच्छ और आवश्यक के रूप में, इस तरह क्लोरीन डाइऑक्साइड के रूप में, एक उपयुक्त एजेंट के साथ तंत्र को साफ करता।
    3. लगातार तीन दिनों के लिए में एक जानवर और अपने पिंजरे के साथी जगह30 मिनट के लिए चैम्बर तंत्र के लिए जानवरों acclimate करने के लिए। दशानुकूलन सत्र के दौरान सभी कमरे में रोशनी बंद कर दिया है।
    4. जानवरों को व्यक्तिगत रूप से 24 घंटे के लिए नए सिरे से बिस्तर, भोजन, और पानी के साथ नए पिंजरों में तीसरे दशानुकूलन सत्र घर के अंत में सामाजिक संपर्क के लिए प्रेरित करने के लिए।
    5. जानवरों के बाद अगले दिन 24 घंटा पर रिकॉर्ड सामाजिक संपर्क अलग हो गए थे।
      1. साफ है, तंत्र से लकड़ी के चिप्स निकालें और क्लोरीन डाइऑक्साइड के साथ स्वच्छ बनाना, odors को नियंत्रित करने के लिए isopropyl शराब के साथ पोंछे, और सत्र के लिए पहले लकड़ी के चिप्स की जगह।
      2. बातचीत रिकॉर्ड करने के लिए एक या एक से अधिक कैमरों स्थिति। स्थिति में कम से कम एक कैमरा तंत्र के सामने तंत्र के पीछे की दीवार पर लगे शीशे के विश्लेषण के लिए एक अतिरिक्त परिप्रेक्ष्य प्रदान कर सकते हैं।
      3. जानवरों के एक बार में एक ही निकालते हैं और फर पैटर्न की अनूठी विशेषताओं का उल्लेख किया जा सकता है इतना है कि कैमरे के सामने पशु पकड़ो। ये पहचान करने सुविधाओंफर विश्लेषण के बजाय कृत्रिम रूप से पशुओं के अंकन के दौरान चूहों को अलग करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
        नोट: कृंतक सामाजिक संपर्क के कई पहलुओं घ्राण संकेतों और संभव शुरू करने के लिए विदेशी odors को बचा जाना चाहिए जहाँ भी साथी, महक शामिल हैं। लंबी इवांस चूहों आम तौर पर जानवरों के किसी भी जोड़ी भेद करने के लिए उपयोग किया जा सकता है कि फर पैटर्न के कुछ सुविधा है। अन्य उपभेदों के लिए (जैसे, Sprague-Dawley चूहों) के लिए इस तरह के एक unscented डाई के साथ पूंछ अंकन के रूप में वैकल्पिक तरीकों का इस्तेमाल किया जा सकता है। यह ब्याज की कई व्यवहार विशिष्ट लक्ष्यों की ओर निर्देशित कर रहे हैं कि पहचान करने के लिए महत्वपूर्ण है (उदाहरण के लिए।, Anogenital पूंछ के आधार के पास निर्देशित सूँघने, गर्दन, या flanks या पेट की ओर निर्देशित आक्रामक हमलों के डब के निर्देश पर चंचल हमलों)। अब तक ब्याज के इन ठिकानों से पूंछ की नोक के करीब जानवरों चिह्नित की सिफारिश की है।
      4. कम से कम 12 मिनट के लिए सामाजिक बातचीत के रिकॉर्ड वीडियो।
      5. सत्र के दौरान लड़ने के लिए जानवरों की निगरानी करें। यदि संभव हो तो प्रयोगकर्ता के सत्र के दौरान कमरे में नहीं है, इसलिए है कि एक निगरानी या खिड़की के माध्यम से जानवरों को देखने।
        नोट: लड़ केवल शायद ही कभी वयस्क चूहों के साथ अध्ययन में देखा गया है, हालांकि, जानवरों के सत्र के दौरान निगरानी की जानी चाहिए। सत्र अत्यधिक लड़ अगर वहाँ नहीं रह जाना चाहिए या एक जानवर को नुकसान या चोट के संकेत मिल रहे हैं।
  3. व्यवहार कोडिंग और विश्लेषण।
    1. पीएई 1,18 के साथ पिछले काम के अनुसार ब्याज की निम्न व्यवहार को पहचानें। निम्न व्यवहार की पहली घटना की अवधि, आवृत्ति और विलंबता यों; लकड़ी के चिप्स में खुदाई /, anogenital सूँघने, साथी के तहत / पर (क्रासिंग) साथी के शरीर (शरीर सूँघने) के अन्य सूँघने रेंगने (पार्टनर के सौंदर्य) allogrooming, पालन, और सूँघने, मुक्केबाजी, (लगाए सहित) कुश्ती । प्रत्येक व्यवहार के उदाहरण देकर स्पष्ट कर रहे हैंइस लेख के वीडियो घटक में डी।
    2. वीडियो से ब्याज की सामाजिक व्यवहार यों। ब्याज की प्रत्येक व्यवहार के लिए पहला उदाहरण के लिए आवृत्ति, कुल अवधि और विलंबता प्राप्त करते हैं।
      नोट: इन उपायों प्राप्त करने के लिए मैन्युअल रूप से प्राप्त किया जा सकता है, तथापि, डिजीटल वीडियो के कम्प्यूटरीकृत विश्लेषण का उपयोग कर इन उपायों की मात्रा का ठहराव की सिफारिश की है। वीडियो और व्यवहार की मात्रा का ठहराव के प्लेबैक के लिए एक matlab (www.mathworks.com) स्क्रिप्ट इस लेख के लिए एक पूरक के रूप में प्रदान की जाती है।
    3. सभी चूहों के लिए पूरा हो गया है कोडिंग के बाद जिसके परिणामस्वरूप अवधि, आवृत्ति और विलंबता डेटा एक सांख्यिकीय पैकेज के साथ विश्लेषण कर रहे हैं।

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Representative Results

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कई प्रजनन दौर के पाठ्यक्रम पर इथेनॉल हालत में मादा चूहों को लगातार चार घंटा पीने के प्रति सत्र इथेनॉल के बारे में 2.1 ग्राम / किलो के एक औसत पीते हैं। चूहा बांधों 45 मिनट समय बिंदु पर मापा जाता है के बारे में 60 मिलीग्राम / डीएल की एक चोटी मातृ सीरम इथेनॉल एकाग्रता, जिसके परिणामस्वरूप में पीने ट्यूबों की शुरूआत के बाद पहली बार 15 से 30 मिनट के दौरान चार घंटा कुल का लगभग एक से डेढ़ खपत करते हैं। पीने अवधि के शेष 3.5 घंटा से अधिक है, वे 0.4 ग्राम / किलो शरीर के वजन / घंटा की कम है, लेकिन अपेक्षाकृत स्थिर दर पर 5% इथेनॉल का उपभोग करने के लिए जारी है। स्वैच्छिक इथेनॉल खपत का यह स्तर और पैटर्न मातृ वजन, वंश जन्म के समय वजन, कूड़े आकार, मातृ देखभाल, अपरा गीला वजन, व्यवहार परीक्षण पर संतानों के वजन, या पूरी मस्तिष्क, हिप्पोकैम्पस या अनुमस्तिष्क गीला वजन पर कोई महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है।

प्रतिनिधि मतलब है और प्रत्येक व्यवहार उपाय एक के लिए पुरुष saccharin- और इथेनॉल उजागर चूहों से एसईएमतालिका 1 में दिखाया गया हो। इन आंकड़ों से पहले प्रयोगों से जमा है और प्रत्येक जन्म के पूर्व का इलाज हालत के लिए 16 पुरुषों को शामिल किया गया। सभी जानवरों को एक ही जन्म के पूर्व का इलाज हालत से भागीदारों के साथ रखा गया था। महिला पशुओं के सामाजिक व्यवहार में मजबूत शराब संबंधी परिवर्तन एक, तथापि, महिला सामाजिक व्यवहार में शराब से संबंधित मतभेदों अन्य प्रक्रियाओं 15,23 का उपयोग कर प्रलेखित किया गया है कि इन प्रक्रियाओं का उपयोग हमारे अध्ययन में मनाया नहीं किया गया है। विचरण (ANOVAs) के अलग univariate विश्लेषण SPSS देखें में प्रदर्शन किया। Macintosh के लिए 21 (पुरुष इथेनॉल उजागर चूहों कुश्ती की काफी अधिक अवधि [एफ (1, 30) = 19.12] और आवृत्ति [एफ (1, 30) = 6.80] था कि पता चला है और कुश्ती का पहला उदाहरण [एफ के लिए विलंबता में कमी आई 1, 30) = 9.41]। इथेनॉल उजागर चूहों भी कम anogenital में लगे समय सूँघने [एफ (1, 30) = 5.17] खर्च किए।

1 ए। आवृत्ति सैक पीएई
कुश्ती * 2.00 (0.58) 8.00 (2.23)
मुक्केबाज़ी 1.81 (0.80) 3.56 (1.47)
के तहत / पार 1.06 (0.48) 1.00 (0.29)
सूँघने Anogenital 6.25 (1.20) 3.75 (0.73)
शारीरिक सूँघने 19.75 (1.64) 18.56 (2.06)
Allogrooming 2.31 (0.93) 0.75 (0.27)
पालन 56.50 (5.39) 56.06 (5.40)
खोदो / सूंघ बिस्तर 32.06 (6.03) 30.06 (5.27)
1 बी। अवधि (एसईसी) सैक पीएई
कुश्ती ** 9.14 (2.31) 39.81 (6.62)
मुक्केबाज़ी 2.55 (1.43) 3.81 (1.62)
के तहत / पार 0.83 (0.39) 1.03 (0.27)
Anogenital सूँघने * 11.21 (2.10) 5.69 (1.22)
शारीरिक सूँघने 27.21 (2.33) 27.09 (3.73)
Allogrooming 13.50 (5.68) 3.82 (1.79)
पालन 120.31 (13.32) 121.48 (12.13)
खोदो / सूंघ बिस्तर 119.59 (24.45) 109.15 (21.41)
-1 सी। विलंबता (एसईसी) सैक पीएई
कुश्ती ** 430.75 (50.51) 209.98 (51.25)
मुक्केबाज़ी 569.52 (48.14) 525.63(74.75)
के तहत / पार 544.4 (65.21) 429.01 (75.78)
सूँघने Anogenital 107.68 (39.35) 164.31 (44.09)
शारीरिक सूँघने 22.77 (6.14) 16.80 (3.21)
Allogrooming 471.44 (70.82) 588.52 (48.47)
पालन 20.92 (7.65) 11.94 (1.20)
खोदो / सूंघ बिस्तर 76.78 (25.78) 117.66 (44.64)

तालिका 1: पहली घटना को मीन (SEM) के आवृत्ति (1 ए), अवधि (1 बी) और विलंबता (-1 सी) प्रत्येक saccharin- (एसएसी) के लिए सामाजिक बातचीत सत्र के दौरान मात्रा निर्धारित व्यवहार और जन्म के पूर्व शराब उजागर (पीएई) चूहों (के लिए एन = जन्म के पूर्व का इलाज समूह प्रति एक 6)। [* पी <0.05, ** पी <0.005]

18 की सिफारिश की है भेदभाव जो मूल्यांकन करने के लिए एक रेखीय विभेदक विश्लेषण प्रदर्शन, ANOVAs प्रदर्शन के अलावा "jove_content">। स्वतंत्र चर की संख्या के मामलों की संख्या से अधिक था क्योंकि वर्तमान नमूने के लिए, बराबर प्रसरण के लिए परीक्षण करने के लिए बॉक्स एम के परीक्षण की गणना नहीं हो सकता है (एक 5: 1 के अनुपात में आम तौर पर की सिफारिश की है)। विभेदक समारोह समूह परिवर्तनशीलता के बीच के 74% के लिए लेखांकन, समूहों और भविष्यवक्ताओं के बीच एक महत्वपूर्ण एसोसिएशन का पता चला। संरचना मैट्रिक्स के विश्लेषण से कुश्ती की पहली घटना (-0.330) थे महत्वपूर्ण भविष्यवक्ताओं को कुश्ती (0.470), और विलंबता के उस अवधि का पता चला। कुश्ती (0.280) और anogenital की अवधि सूँघने (-0.244) के मायने रखता है (आवृत्ति) से थोड़ा कमजोर भविष्यवक्ताओं थे। पार मान्य वर्गीकरण कुल मिलाकर, मामलों की 71.9% सही ढंग से वर्गीकृत किया गया है कि पता चला है।

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यहाँ वर्णित जन्म के पूर्व शराब जोखिम प्रतिमान गर्भावस्था के दौरान चूहे बांधों से इथेनॉल की स्वैच्छिक खपत (5% वी / वी) शामिल है। समय, खुराक, अवधि और मार्ग इथेनॉल प्रशासन के रूप में अच्छी तरह से जांच के तहत प्रजातियों के संबंध में भिन्न होते हैं जो साहित्य में प्रतिनिधित्व मस्तिष्क के विकास के दौरान इथेनॉल के लिए गैर मानव जानवरों को उजागर करने के लिए प्रोटोकॉल के एक नंबर रहे हैं। विभिन्न लोगों तक पहुंचाने के प्रोटोकॉल के फायदों में से एक पूरी तरह से उपचार यहाँ प्रदान नहीं की जाती है, पीएई के लिए स्वैच्छिक पीने विधि के कई फायदे डाला जाता है इस प्रोटोकॉल में वर्णित है। पहले हम चूहे बांधों प्राथमिक खाद्य स्रोत 24 के भाग के रूप में 5% इथेनॉल का उपभोग जिसमें एक तरल आहार प्रोटोकॉल, आमतौर पर अनुसंधान के इस क्षेत्र में कार्यरत एक दृष्टिकोण, का उपयोग किया। इस दृष्टिकोण के लिए नियंत्रण की स्थिति गरमी सेवन इथेनॉल लेने वाली बांधों की है कि yoked किया गया था जिसमें एक जोड़ी खिलाया समूह और यथेच्छ पहुँच गया है कि एक समूह में शामिलचाउ करने के लिए। दोनों समूहों में चूहे बांधों (इथेनॉल और साकारीन) पोषण और गरमी सेवन में समूह परिवर्तनशीलता के बीच कम कर देता है, और एक अपरिचित खाद्य स्रोत के लिए मजबूर खपत के साथ जुड़े तनाव के संभावित उलझाना जो कम से कम एक ही चूहे चाउ आहार का उपभोग यहाँ वर्णित स्वैच्छिक पीने प्रतिमान में 25। स्वैच्छिक पीने के प्रतिमान की यह सुविधा भी (3-2) प्रयोगात्मक समूहों की संख्या में कटौती सहित कुछ व्यावहारिक और नैतिक लाभ प्रदान करता है जो तरल आहार दृष्टिकोण, साथ ही एक जोड़ी खिलाया नियंत्रण के लिए की जरूरत है, की संख्या समाप्त अनुसंधान में प्रयुक्त जानवर, और संबद्ध लागत अनुसंधान करने के लिए। स्वैच्छिक इथेनॉल खपत पैदावार इसी तरह पीएई संतानों में मनाया परिणाम उपायों में परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए यथोचित उम्मीद की जा सकती है, जो 5% इथेनॉल तरल आहार प्रोटोकॉल के साथ मनाया की तुलना में कम चर पीने के स्तर के चार घंटा रुक-रुक कर लोगों तक पहुंचाने के पैटर्न। रक्त इथेनॉल conce क्योंकिकिसी भी प्रोटोकॉल के साथ हासिल की ntrations मातृ सीरम इथेनॉल सांद्रता के मापन के लिए समय समय पर आयोजित किया जाना चाहिए, यों और संवाद करने के लिए महत्वपूर्ण हैं (जैसे, सालाना) है कि तुलनीय BACS प्रजनन राउंड में हासिल किया जा रहा है सुनिश्चित करने के लिए। कारण जन्म के पूर्व तनाव और इथेनॉल जोखिम के बीच बातचीत के लिए क्षमता के लिए इन उपायों (रेफरी देखते हैं। 26) संतानों के बाद अध्ययन में इस्तेमाल नहीं कर रहे हैं, जिसके लिए महिलाओं की एक अलग पलटन में किया जाना चाहिए। इसे पीने ट्यूब शुरू की है के बाद लगभग 45-60 मिनट घटित होगा कि शिखर सीरम इथेनॉल सांद्रता पहचान करने के लिए महत्वपूर्ण है। प्रयोगात्मक संतानों के उत्पादन बांधों से BACS के एवज में, परिणाम के उपायों के साथ संबंध स्थापित करने के लिए सबसे उपयोगी उपाय गर्भावस्था के दौरान एक चूहे बांध के दैनिक इथेनॉल की खपत है। हालांकि, समूह के लिए मतलब की एक मानक विचलन के भीतर करने के लिए चूहे बांधों में पीने की सीमा को सीमित करने की संभावना है betw कोई सार्थक सहसंबंध विवश होगाeen इथेनॉल का सेवन किया और एक दिया परिणाम उपाय। अंत में, पूर्व गर्भावस्था पीने के मूल्यांकन पीने के प्रोटोकॉल के बाद के चरणों के लिए वांछित स्तर पर पीने कि चूहों की पहचान करने के लिए उपयोग किया जाता है। इथेनॉल लोगों तक पहुंचाने के प्रतिमान के इस पहलू भी सभी मादा चूहों कि पीने में मानव व्यवहार गर्भावस्था के दौरान शुरू करने की संभावना नहीं है जो अधिक सही मॉडल गर्भावस्था, के लिए पूर्व के अनुभव पीने सुनिश्चित करता है कि।

कई अतिरिक्त methodological मुद्दों और शराब लोगों तक पहुंचाने के प्रतिमान से संबंधित निरंतर विचार किया जाना चाहिए। यहाँ वर्णित स्वैच्छिक पीने पीएई प्रतिमान चूहे में मानव में गर्भावधि विकास के पहले दो trimesters के लिए मोटे तौर पर मेल खाती है जो गर्भावधि विकास, भर में होता है। जल्दी प्रसव के बाद विकास के दौरान एक्सपोजर (जैसे रेफरी देखते हैं। 27) तीसरी तिमाही मानव तुल्यता मॉडल करने के लिए कई प्रयोगशालाओं द्वारा उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, हम यहाँ प्रस्तुत प्रक्रियाओं एक पुरानी प्रतिनिधित्व करते हैं कि ध्यान देंजोखिम प्रोटोकॉल (चूहे बांधों हर दिन जाम)। महत्वपूर्ण बात है, ठीक शराब के उच्च स्तर के लिए जोखिम का समय समाप्त (~ 287 मिलीग्राम / डीएल) गर्भावधि दिन 15 तक ही सीमित भी सामाजिक व्यवहार में 15 परिवर्तन करने के लिए दिखाया गया है। यहाँ प्रस्तुत प्रतिमान इसलिए, इस दृष्टिकोण के साथ प्राप्त किया जा सकता है कि रक्त इथेनॉल सांद्रता की एक सीमित रेंज है, चूहे बांधों द्वारा स्वैच्छिक शराब की खपत शामिल है। उच्च रक्त इथेनॉल सांद्रता हासिल करने के लिए जोखिम के अन्य तरीकों (जैसे, gavage, इंजेक्शन, वाष्प जोखिम) की आवश्यकता है। महत्व के एक अतिरिक्त अंक के जन्म के पूर्व इथेनॉल जोखिम के साथ जुड़े व्यवहार प्रभाव की व्याख्या उलझा सकता है कि मातृ देखभाल के क्षेत्र में परिवर्तन के लिए संभावित का सवाल है। यह पता करने के लिए, गर्भावस्था के दौरान मातृ देखभाल का आकलन समय-समय पर मूल्यांकन किया जाना चाहिए। मातृ देखभाल पर गर्भावस्था के दौरान कम मात्रा में मद्यपान का कोई प्रभाव लंबे समय इवांस चूहा 28 में यहाँ वर्णित प्रक्रियाओं का उपयोग पाया गया है। चाहे का मूल्यांकनविधियों से विचलन का उपयोग कर रहे प्रजातियों और जानवर के तनाव, या इथेनॉल के उच्च सांद्रता सहित, यहाँ वर्णित है, खासकर अगर मातृ देखभाल (रेफरी देखते हैं। 29) के व्यवहार संकेतकों में परिवर्तन, हालांकि, शुरू में और समय-समय पर उसके बाद मूल्यांकन किया जाना चाहिए।

यहाँ वर्णित व्यवहार प्रक्रिया जन्म के पूर्व का मस्तिष्क विकास 1,18,30 के दौरान शराब के मध्यम स्तर के संपर्क में वयस्क नर चूहों में सामाजिक व्यवहार (कुश्ती और जांच) के विशिष्ट पहलुओं के बारे में विश्वसनीय परिवर्तन मिले हैं। यहां मात्रा निर्धारित व्यवहार चयनित आसानी के माध्यम से मापा जा सकता है (उदाहरण के लिए, पालन, खुदाई) पर्यावरण की ओर निर्देशित साथी निर्देशित व्यवहार (जैसे, कुश्ती, जांच) और अन्य व्यवहार लक्षित करने के लिए वर्तमान साहित्य 31 का एक बड़ा शरीर पर आधारित थे वीडियो विश्लेषण। विभेदक कुश्ती में बढ़ जाती है अल के बीच सबसे अच्छा भेदभाव को उपलब्ध कराने से पता चला कि विश्लेषणअल्कोहल-संपर्क में है और सामाजिक और गैर-सामाजिक व्यवहार चर 18 की एक विस्तृत श्रृंखला के बीच में साकारीन उजागर चूहों। सेक्स के मुख्य प्रभाव anogenital सूँघने (महिला> पुरुष) सहित कई निर्भर उपायों के लिए सूचित किया गया है, हालांकि यह मादा चूहों में सामाजिक व्यवहार पर पीएई का प्रभाव यहां एक वर्णित विधियों का उपयोग कर मनाया नहीं किया गया है कि बाहर बात करने के लिए महत्वपूर्ण है, शरीर सूँघने (पुरुष> महिला), कुश्ती (पुरुष> महिला), और मुक्केबाजी (पुरुष> महिला)।

कुश्ती उदारवादी पीएई द्वारा बदल सामाजिक व्यवहार के प्राथमिक पहलू होना दिखाया गया है, अन्य कार्यों के शामिल किए जाने के व्यवहार प्रभाव के चयनात्मकता की स्थापना और सामान्यीकृत व्यवहार घाटे बाहर सत्तारूढ़ के लिए महत्वपूर्ण है। यहां मात्रा निर्धारित व्यवहार के सेट कोई संपूर्ण माध्यम से है। ब्याज के व्यवहार डेटा का सेट दिया में मनाया प्रभाव के समग्र पैटर्न पर कब्जा करने के लिए प्रारंभिक कार्य के दौरान चयनित किया जाना चाहिए। यह बराबर हैविभिन्न शराब जोखिम मानदंड, या मापदंडों, प्रक्रियाओं में बदलाव यथोचित अलग व्यवहार परिणामों उपज के लिए उम्मीद की जा सकती रूप में उपयोग कर रहे हैं तो महत्वपूर्ण ticularly। शुरू में (स्वयं), पूर्ण संवारने दृश्यों, (चिंता का संकेत) छोटा संवारने दृश्यों scratching, काट सहित व्यवहार का एक व्यापक सेट के मूल्यांकन, यहाँ वर्णित व्यवहार, के अलावा "पार्श्व" प्रदर्शन 32,33, शरीर का पीछा करते हुए, हिलाता है, और खेलने के व्यवहार 34-37 की सिफारिश की है। जानवरों के 6-12 जोड़े में अवलोकन शराब उजागर गैर उजागर जानवरों से अलग व्यवहार है कि पहचान करने के लिए पर्याप्त होना चाहिए।

यह वास्तविक आक्रामक व्यवहार को प्रतिबिंबित या व्यवहार निभा सकता है, माप के समय उम्र पर निर्भर करता है, कि कुश्ती पर विचार करने के लिए भी महत्वपूर्ण है। Increa में परिणाम, सामाजिक व्यवहार 1,18,30 पर पीएई प्रभाव से मध्यम से जोड़ा गया है, जो चूहों में ventrolateral ललाट प्रांतस्था, के प्रारंभिक घावोंSED खेलने व्यवहार 38। चूहे में, प्रसव के बाद के दिनों में 30-40 33,34 चारों ओर विकास के बाद प्रातः दौरान व्यवहार चोटियों खेलते हैं और जानवरों को वयस्कता दृष्टिकोण के रूप में गिरावट आती है। 6,16,23 वयस्कता के लिए पूर्व मापा और व्यवहार उम्र के साथ कम हो जाती है खेलते हैं, जिस पर दर को प्रभावित कर सकता है, जब मस्तिष्क के विकास के दौरान शराब जोखिम खेलने के व्यवहार को बदल देता है। खेलते हैं और आक्रामक व्यवहार के topographies समान होते हैं, क्योंकि एक स्पष्ट अंतर को प्राप्त करने के लिए मुश्किल हो सकता है। पिछले अध्ययनों में, इस तरह से लड़ने या काट के रूप में आक्रामकता के विशिष्ट व्यवहार संकेतक, में, मध्यम पीएई चूहों में मनाया नहीं किया गया है। हालांकि, अतिरिक्त व्यवहार संकेतक इन कार्यों 18 के वर्गीकरण के बारे में सुराग दे सकता है। उदाहरण के लिए, हमलों गर्दन के डब पर निर्देशित, चंचल हमलों का प्राथमिक लक्ष्य है, शायद ही कभी वयस्क पीएई चूहों 18 में होते हैं। इसके विपरीत, हमलों गैर चंचल हमलों में 39 का लक्ष्य है mor मनाया गया, दुम की ओर निर्देशितई अक्सर, कुश्ती में पीएई से संबंधित बढ़ जाती है आक्रामकता के बजाय खेलने को प्रतिबिंबित सुझाव है कि। सामाजिक व्यवहार वयस्कता या व्यवहार वयस्क जानवरों के व्यवहार में विशिष्ट है खेलने के लिए पूर्व मापा जाता है अगर प्ले व्यवहार विश्लेषण में शामिल किया जाना चाहिए। खेलने के व्यवहार के विश्लेषण के लिए विस्तृत तरीके हिमलर एट अल द्वारा वर्णित हैं। 35

अंत में, यह साथी जानवर के चयन से प्रभावित किया जा सकता है यहाँ वर्णित तरीकों का उपयोग कर कि सामाजिक व्यवहार नोट करना महत्वपूर्ण है। यहाँ प्रस्तुत प्रतिनिधि परिणामों में जानवरों को एक ही जन्म के पूर्व का इलाज हालत 1,18 से परिचित जानवर (पिंजरे-साथी) के साथ रखा गया था। इस चयन के लिए तर्क काफी हद तक इथेनॉल उजागर चूहों के साथ कि आवास नियंत्रण जानवरों का प्रदर्शन डेटा के आधार पर किया गया था नियंत्रण चूहों 14 में सामाजिक व्यवहार, साथ ही हमारी प्रयोगशाला से इसी तरह के और विश्वसनीय अप्रकाशित टिप्पणियों बदल। इन प्रभावों कर सकते हैं संभवतः complicसामाजिक व्यवहार में पीएई संबंधी परिवर्तन की पहचान और व्याख्या खा लिया। सामाजिक व्यवहार की मात्रा का ठहराव के लिए यहाँ वर्णित विधियों, हालांकि, एक साथी का उपयोग करते हुए, न तो उपचार हालत एक से आता है कि एक गैर इलाज साथी का उपयोग सहित कई संभावनाएं हैं, जिनमें से सामाजिक साथी के स्रोत के किसी भी बदलाव के लिए लागू किया जा सकता है (यहाँ वर्णित के रूप में) एक ही इलाज की स्थिति, या एक अलग उपचार हालत से एक साथी जानवर से जानवर। इसके अलावा, साथी जानवर के अपनेपन सामाजिक बातचीत एक को प्रभावित करने के लिए चालाकी से किया जा सकता है। साथी की हालत और सामाजिक आवास, लिंग, और लोगों तक पहुंचाने के प्रतिमान से संबंधित अन्य चर का चयन अभी भी यहाँ वर्णित सामाजिक व्यवहार की मात्रा का ठहराव के लिए बुनियादी प्रक्रियाओं का उपयोग करते समय सबसे अच्छा विशेष प्रयोगशाला के वैज्ञानिक लक्ष्यों को पूरा करने के लिए सिलवाया जा सकता है।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Saccharin sodium salt hydrate Sigma S1002
190 proof ethanol Sigma 493538
Beaded glass drinking tubes Fisher 14-955K
Natural rubber white #4 stopper one hole Plasticoid LSG4M181
1" bend tubes-ball point Ancare TD-199-3"
Paper rulers N/A N/A www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers
Apparatus for social interaction Custom built N/A 95 cm X 47 cm X 43 cm
Video cameras N/A N/A Capable of recording low/no light conditions
Infrared illuminators Vitek VT-IR1-12
Teklad laboratory grade sani-chips Harlan 7090A
Brush and dustpan N/A N/A
Isopropyl alcohol Sigma W292907
Chlorine Dioxide (1.5 mg Tablets) Quiplabs N/A Prepare per manufacturer's recommendation

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References

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मॉडरेट प्रसव पूर्व शराब जोखिम और वयस्क चूहों में सामाजिक व्यवहार की मात्रा का ठहराव
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Hamilton, D. A., Magcalas, C. M., Barto, D., Bird, C. W., Rodriguez, C. I., Fink, B. C., Pellis, S. M., Davies, S., Savage, D. D. Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats. J. Vis. Exp. (94), e52407, doi:10.3791/52407 (2014).More

Hamilton, D. A., Magcalas, C. M., Barto, D., Bird, C. W., Rodriguez, C. I., Fink, B. C., Pellis, S. M., Davies, S., Savage, D. D. Moderate Prenatal Alcohol Exposure and Quantification of Social Behavior in Adult Rats. J. Vis. Exp. (94), e52407, doi:10.3791/52407 (2014).

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