Summary

Modifiye Delik Kurulu - Fareler ve Sıçanlarda Davranışı, Biliş ve Sosyal Etkileşim Ölçme

Published: April 08, 2015
doi:

Summary

This protocol describes the modified hole board, which is a behavioral test set-up that comprises the characteristics of an open field and a traditional hole board. This set-up enables the differential analysis of unconditioned behavior of small laboratory mammals as well as the analysis of cognitive abilities.

Abstract

Bu protokol, geleneksel bir delik kurulu açık alandan özelliklerini bir araya getiren ve küçük laboratuar memelileri (örneğin, fare, sıçan, ağaç shrews ve küçük primatlarda) 'de koşulsuz davranış çeşitli boyutları ölçmek için tasarlanmıştır değiştirilmiş delik kartını (MHB) tarif etmektedir. Bir hayvanın davranışsal profilinin geniş bir davranış spektrumu tek test incelenebilir çünkü bu paradigma, bir davranış test bataryası kullanımı için değerli bir alternatif.

Cihaz, bir grup bölmesinden ayrılan 'korumalı' alanı, temsil, bir kutudan ibarettir. Küçük silindirler üç hatlarında sendeleyerek edildiği bir kurul, set-up 'korumasız' alanı temsil eden, kutunun merkezine yerleştirilir. Hayvanların bilişsel yetenekleri gemide bazı silindirlerin yem ve çalışma ve referans bellek ölçerek ölçülebilir. Örneğin faaliyete gibi diğer koşulsuz davranışy-related-, anksiyete-related- ve sosyal davranış, bu paradigma kullanılarak görülebilir. Davranış esneklik ve yeni bir ortama alışmakta yeteneği ayrıca, MHB birden çalışmalarda hayvanların tabi hayvanların uyum kapasitesi hakkında fikir ortaya çıkararak görülebilir.

Bir davranış testi bataryanın olarak sipariş etkilerinin test dolayı, saf hayvanlar her bir deney için kullanılmalıdır. Tek bir paradigma birden davranış boyutları test edilmesi ve böylece, bu sorunu engellemeyi olarak, kullanılan deneysel hayvan sayısı azalır. Hayvanlar mahrum test sırasında ve gıda gerek kalmadan sosyal izolasyon kaçınarak Ayrıca, MHB stres varsa, çok düşük miktarda teşvik, bir davranış test sistemi temsil etmektedir.

Introduction

modifiye edilmiş delik kartı (MHB) temel olarak fareler ve sıçanlar 1, koşulsuz davranış çeşitli boyutları değerlendirmek için kullanılır. Yaygın olarak kullanılan testlerin bir dizi tamamen davranışsal boyutta tüm fenotip kapsamaz tek bir davranış parametre ölçmek. MHB kemirgenler sadece zengin bir test ortamında 2 onların zengin davranış repertuarı göstermek ve böylece karmaşık etolojik gözlemler için veriyor olabilir kavramına dayanmaktadır geliştirilmiştir.

set-up (yani, hayvan sayısı 1,3,4 kullanılan azaltılması engellemeyi bir test bataryası dezavantajlarını ortadan kaldıran bir tek kompleks paradigma sonuçlanan, geleneksel delik kurulu ve açık alan testi özelliklerini içerir Test amacıyla 5, ve zaman-etki ve maliyetleri 6) azaltılması olası etkileri. En davranış testleri (örneğin, Hånell & Marklund, 2014) aksine 7 </ Sup>, MHB bir avantaj hayvanlar görevi çözmek için motivasyonu artırmak amacıyla yoksun gıda olması gerek kalmamasıdır. Ayrıca, sosyal izolasyon, görsel, işitsel ve koku temas 8,9 için izin şeffaf delikli bölüm test bölmesinden ayrılan (group-) bölme deneysel hayvan grup arkadaşları koyarak test sırasında atlatılabilir.

MHB (farmakolojik) hem fareler ve sıçanlar 1,6 valide edilmiştir. Davranışları geniş bir yelpazede gibi kaçınma davranışı, risk değerlendirmesi, uyarılma, keşif, lokomotor aktivite, alışkanlık, toplumsal yakınlık ve biliş 2,8-10 gibi, ölçülebilir. Buna ek olarak, MHB bir besin alma inhibisyonu testi, hem de yeni nesne tanıma testi 10,11 ile kombine edilebilir. Son olarak, MHB de baskın bir bireysel yerleştirirken sosyal mağlup hayvanların test edilmesi ile toplumsal baskı deneyleri gerçekleştirmek için kullanılabilirgrup bölmesi 12,13. Fareler ve sıçanlar için bu protokol MHB birden uygulamaların bir bakış verecektir.

Protocol

NOT: Deneyler Üniversitesi Tıp Merkezi Utrecht ve Utrecht Üniversitesi, Hollanda Hayvan Deneyleri Komitesi tarafından onaylanmıştır. Ayrıca, hayvan deneyleri laboratuvar hayvanları bakım İlkeleri takip ve Bakım ve Nörobilim ve Davranış Araştırma Memelilerin Kullanım Rehberi bakın. 25 1. Deney Seti-up NOT: Standart MHB cihaz deney hayvan grubu arkadaşları, test süresi boyunca yerleştirilebilir olan bir ek bölme (50 x 50 x 50 cm) ile ayrılan bir gri PVC deney kutusuna (100 x 50 x 50 cm) oluşur şeffaf, delikli bölme 1 ile. Grup arkadaşları varlığı istenmeyen ya da tek başına tutulmuş hayvanlar test ise, gri PVC yapılmış bir bölme ile saydam bölüm değiştirin (Şekil 1;)., Aynı zamanda bakın Ohl ve arkadaşları, (2001 1). MHB (wibilişsel testleri için kullanılan inci ayrı ölçüm) protokol bölüm 5'de tarif edilmiştir. Kurulu yerleştirin (60 x 20 x 0,5 cm, gri PVC yapılmış) kutunun ortasında. NOT: tahta 20 silindir (ᴓ 1,5 cm) içerebilir 14 iki satır ya da 23 silindir (ᴓ 3 cm) 8 üç hatlarında sendeleyerek de sendeledi. 10 dikdörtgenler (20 x 15 cm) ve 2 kareler (20 x 20 cm) içine siyah çizgilerle kurulu çevresini bölün. Yönetim kurulu arasındaki ışık şiddeti daha büyük bir kontrast (açık alan veya bir ışık-karanlık geçiş testi ışık bölme merkezi ile karşılaştırılabilir bir korumasız alan temsilen) ve kutu (koruma alanı) oluşturmak için tahta üzerinde bir sahne ışık yerleştirin yönetim kurulu 4,8 ve caydırıcı karakterini artırmak için. House 12 saat altındaki hayvanlar (örneğin, 07:00 kapalı ışıklar ve 07:00 de ışıklar) gece-gündüz döngüsü ters. NOT: Ancak, MHB da yapabilirsinizGeleneksel ışık programa altında kullanılacak 1,6 (potansiyel eksiklikleri tartışmaya bakınız). 4,15 (10:00-2:00, örneğin) hayvanların en aktif fazda davranışsal test gerçekleştirin. Tesislerinde hayvanların geldikten sonra 2 haftalık bir alışma dönemi koruyun. Bu dönemde aynı kişi davranışsal deney haftada hayvanlar dört kez ele performans ve gerçek test sırasında yapılacak tüm taşıma prosedürleri içerir. Hayvanlar daha sonra test maruz kalacağı zaman günün zamanında sadece hayvanları taşıyınız. Video veri depolama ve sonuçları optimize etmek ve diğerlerinin gözlemci değişkenliği azaltmak için deneyler kaydedin, önceki deneylerde 2 video kaydını kullanarak davranış puanlama uygulama. Gözlemci tarafından yürütülen tüm eylemleri ve prosedürleri standardize emin olun. 2. Behavioral Testi – Grup Mates Varlığında olmadan Hayvanlar düzenli olarak yerleştirilmiştir odasında davranışsal test gerçekleştirin (bir test yere ulaşım olası etkilerini önlemek için) ve tesislerin (ekipman varlığı hayvanları alışmakta) hayvanların gelişinden önce tüm test ekipmanları yükleyin. Kendi ev kafesinden kuyruk tabanı tarafından hayvan Pick up ve doğrudan MHB yerleştirin. (Şekil 1 'de gösterildiği gibi) duvara bakan aynı köşede cihazının her hayvan yerleştirin. Hayvan serbestçe bir süre (genellikle 5 dk 1,6,16-18) için MHB keşfetmek için izin verin. Deneyimli bir gözlemci canlı davranışsal puanlama yazılımı kullanarak davranış parametrelerini puan var. Tablo 1 'de listelenen parametreleri kullanın. NOT: Bazı davranışsal parametreler (örneğin, otoyollarda ve keşif davranış), örneğin otomatik olarak atılır olabilir, </em> Henry ve arkadaşları tarafından tartıştı. (2010) 19 MHB gerekli ayardan sonra. Koku ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için her denemede sonra musluk suyu ve bir kağıt havlu ile temizleyin aparatı. NOT: Olası test-mertebe etkileri sosyal ev sahipliği hayvanlar test akılda 17,20 tutulmalıdır. 3. Davranış Testi – Grup Mates Varlığında Grup yuvanın durumunda, deney hayvan ve test sırasında kafesi arkadaşları ile etkileşimi ölçmek. Alışkanlık (özellikle 10-30 dk 1,12) için izin vermek için deneysel hayvan test öncesi grup bölmesindeki grup arkadaşları yerleştirin. NOT: Sosyal-stres koşulları altında test bir sosyal mağlup bireysel 13 test ederken grup bölmesinde bir baskın kafes arkadaşı koyarak mümkündür. Test bölmesinde deneysel hayvan koyun ve ücretsiz izin2. Bölümde açıklandığı gibi ly MHB keşfetmek. NOT: Olası test-mertebe etkileri sosyal ev sahipliği hayvanlar test akılda 17,20 tutulmalıdır. Deneyimli bir gözlemci canlı davranışsal puanlama yazılımı kullanarak davranış parametrelerini puan var. Tablo 1 'de listelenen parametreleri kullanın. Koku ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için her denemede sonra musluk suyu ve bir kağıt havlu ile temizleyin aparatı. 4. Roman Nesne Tanıma ve Gıda Emme engellenmesi 2 gün deneyden önce evlerine kafes içinde bir nesne (örneğin bir zar veya gıda pelet) ile hayvanların alıştırın. Başlangıç ​​noktasından arasında köşede yeni bir nesne (örneğin bir cıvata veya yabancı Gıda) 2 cm aralıklı cihazında aşina nesne yerleştirin. Hayvan roman ve tanıdık bir nesne / gıda yaklaşım süresini ölçün. Parametreleri kullanın <strong> Tablo 1. Koku ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için her denemede sonra musluk suyu ve bir kağıt havlu ile temizleyin aparatı. 5. Bilişsel Test Sıçanlar 3,22 test için kutunun ortasında 10 silindir (Şekil 1) ile küçük bir tahta (35 x 22 x 1 cm) yerleştirin. Gri PVC yapılmış bir bölüm ekleyerek fareler 21 test için 50 x 50 cm boyutunda kutusunu azaltın. Bir lezzet hayvanlar (örneğin, vanilya) çekiliyor tüm silindirler kokusunu ve hayvanlar kaldıramazsınız böylece bir ödül (badem, örneğin, bir parça, fareler ve sıçanlar için son derece lezzetli ödül) bir ızgara altındaki tüm yem. (Gri PVC ile zıt) renkli halka ile Cue silindirler (genellikle üç) çıkarılabilir ödül (badem, örneğin, 0.05 gr parça) ile yem. Deneyde 2 gün önce günlük ödül ile hayvanlar alıştırıncımbız ile sunan ve hayvanların yemek emin yaparak evlerine kafes. Deneyimli bir gözlemci canlı davranışsal puanlama yazılımı kullanarak davranış parametrelerini puan var. Tanıma veya gıda alımı inhibisyonu nesne ile ilgili parametreler hariç olmak üzere bölüm 2 (Tablo 1) 'de belirtilen davranış parametrelere ek olarak, Tablo 2'de listelenen parametreleri ölçülür. Aşama 1: Her hayvan ile bir deneme bitirmek için sürekli zamana kadar sabit arası deneme aralığı (örneğin, 30-60 dk) ile günde dört denemeler yapmak ulaşıldığında (yani, üç badem parçaları toplanmıştır zaman). Aşama 2: Cue ve yem üç farklı silindir ve ters öğrenme yeteneğini test etmek için dört çalışmalarda kurulum hayvanları yerleştirin. Koku ipuçları dayalı bir önyargı önlemek için her denemede sonra musluk suyu ve bir kağıt havlu ile temizleyin aparatı.

Representative Results

MHB ölçülebilir parametre büyük miktarda çok sayıda davranış boyutları ölçmek için, bu kurulum, özellikle uygun hale getirmektedir. Bir örnek, test tekrarlanan maruz yeni bir çevreye davranış adaptasyon tanımlanmasıdır. . Salomons ve arkadaşları (2010) (iki farklı ışık koşullarında MHB farelerde (BALB / CJ ve 129P3 / J) iki kendilenmiş suşlarının alışkanlık okudu kırmızı ışık: 45 lux vs beyaz ışık: kutusu ve yönetim kurulu arasındaki kontrast: kutu ve yönetim kurulu arasındaki kontrast: 115 lux) 4 (ayrıca protokol bölüm 1.3). Şekil 2A gösterildiği gibi Balc / CJ fareler ilk yönetim kurulu girişi kadar azalan (alıştırmak) gecikme göstermek kırmızı ışık koşullarında (Tablo 1). Contrastingly, 129P3 / J fareleri Şekil 2B beyaz ışık koşullarında deney gösterir. Denemeleri üzerinde alışkanlık hiçbir işaret gösterir. BALB / CJ fareler a bu olsa yine çalışmalarda üzerinde ilk yönetim kurulu girişine azalan gecikme göstermeknimals kırmızı ışık durumuna göre daha yavaş bir alışkanlık desen göstermektedir. 129P3 / J fareleri sadece tekrar alışkanlık engelli, ama aynı zamanda beyaz ışık koşullarında sensitizasyon doğru bir eğilim göstermektedir. Benzer şekilde, Salomons tarafından yapılan bir çalışmada (2012), 129P2 / OlaHsd farenin yenilik, BALB / cOlaHsd fareler 23 göre yanıt olarak bozulmuş davranış esneklik sergiledi. MHB 4 test edildiğinde alışkanlık yeteneği fark böylece farelerin iki kendilenmiş suşları arasındaki belirgin hale gelir. MHB bilişsel versiyonu örneğin farelerde bilişsel bozuklukları ölçmek için kullanılabilir. Van der Kooij ve diğ. (; HI-45 hipoksi 45 dakika), şiddetli HI (hipoksi 75 dakika; HI-75) ve SHAM- (2010) bilişsel hafif serebral hipoksi-iskemi ile C57BL / 6J farelerin işleyişini ölçmek için bu set-up kullanılan Kontrol fareleri 9. denemeler tamamlanması yeteneğini (örneğin, 5 dakika içinde baited deliği bulunmaktadır), Şekil 3A'da gösterilmiştir. </strong> Kısa süreli bellek hataları sayısı, uzun süreli bellek hatalar (non-baited delik ziyaretleri) ve ihmal hataları (bir baited delik yok ziyareti) (bir baited delik revisits) Şekil 3B-D gösterilmiştir sırasıyla. HI-45 grup bilişsel bozukluk olduğunu teyit etmek amacıyla, bu grup ters görev sahte kontrollere karşı test edilmiştir. Üç baited delikler üç farklı silindirlere atandı ve hayvanlar 4 denemeleri için test edilmiştir. ters aşamasında ilk deneme ilk aşamada son deneme karşılaştırırken ters etkisi belirgin hale gelir. Dört ters denemeleri tamamlamak için süre genel performansı üzerinde bir gösterge verir. Şekil 4 iki grupta ve net bir genel tedavi etkisi belirgindir için deneme tamamlamak için gecikme gösterir. Bu ters görev gerçekten olabilir HI-45 grubunda bilişsel esneklik (yeniden-öğrenme) bir değer düşüklüğü var demektir MHB 9 kullanılarak saptanabilir geldi. Modifiye delik kurulu 1. şematik bir bakış Şekil. (A) kurulum (korumasız) yönetim kurulu zikzak çizgiler ve grup bölmesi ile gösterilen ortasında bir test bölmesinin (kutu) oluşur. = Roman nesne, = Tanıdık bir nesne, = Başlangıç ​​noktası. (B) fareler için modifiye delik kurulu bilişsel sürümü şematik bakış. Bir silindirin (C) Yan görünümü değiştirilmiş delik kurulu bilişsel sürümünde kullanılan. Badem bir parça tüm silindirlerin ızgara altına yerleştirilir.target = "_ blank"> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız. Şekil 2. Kırmızı ışık ya da beyaz ışık koşulları. (A) Gecikme ilk yönetim kurulu girişi kadar BALB / CJ ve kırmızı ışık koşullarında (kutu 0-5 lux ve yönetim kurulu 45 lüks) altında ölçülen 123P3 / J fareleri (+ SEM). Huyn-Feldt ayarlı bir tekrarlanan ölçümler ANOVA bir yük (P = 0.025), deneme (p <0.001) ve deneme x suşu etkileşimi (p <0.001) etkisini ortaya hoc Mesaj analizleri:. Suşları arasında: * = p <0.0026 arasında İki ardışık çalışmalar: $ = p <0.0026 (BALB / CJ) (B) ilk yönetim kurulu giriş gecikme beyaz ışık koşullarında (kutu 0-5 lux ve yönetim kurulu 120 lux) altında (+ SEM).. Huyn-Feldt ayarlı bir tekrarlanan ölçümler ANOVA bir yük (P = 0.031), deneme (p <0.001) ve deneme x suşu etkileşimi ortaya (p <0.001) effe. ct Post hoc analizler: İki ardışık denemeler arasında * = p <0.0026,: $ = p <0.0026 (BALB / CJ) ve T = P <0.0026 (123P3 / J) suşları arasında. Bu rakam Salomons ark. 2010 4 modifiye edilmiştir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız. MHB Şekil 3. Bilişsel testler (evre 1). Tüm rakamlar ortalama ± SEM göstermektedir. (A) Sahte kontrol farelerin deneme (sn) tamamlamak için gecikme, 45-HI ve HI-75. (B) ihmal hataların sayısı, (C) Sigara baited delik ziyaretleri ve (D) baited delikler tekrar başvurular. * = P <0.05, ** = p <0.01, *** = P <HI-75 vs 0.001 sahte, # = p <0.05, ## = P <0.01, ### = p <0.001HI-45 vs HI-75. Bu rakam, Van der Kooij ark modifiye edilmiştir. 2010 9. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız. Şekil 4. Ters öğrenme görevi (evre 2). Gecikme ters öğrenme görevi bir deneme (sn) (+ SEM) tamamlamak için. Deneme etkileri: # = p <0.05, ## = P <0.01 (önceki deneme vs ilk deneme ters görevi). Tedavi etkisi: * = p <0.05, ** = p <0.01 (HI-45 sahte vs). Bu rakam, Van der Kooij ve ark. 2010 9'dan modifiye edilmiştir. Sistem Etkinlik Ölçülen parametre Avodans ederim Yönetim Kurulu girişi Gemide Frekans, gecikme (ler), süresi (%) ve ortalama süresi (s) Risk değerlendirmesi Gerilmiş katılır (Arka bacaklarda dahil) Frekans ve gecikme (ler) gerilmiş vücut duruşları Uyarılma Tımar Frekans, gecikme (ler), süresi (%) ve ortalama süresi (s) öz-bakım Dışkılama Frekans ve Boli gecikme (ler) üretilen Işeme Frekans ve idrara çıkma gecikme (ler) Yönetmen arama Delik ziyaretleri Frekans ve silindir ziyaret gecikme (ler) Roman nesne arama Frekans, gecikme (ler), süresi (%) ve ortalama süresi (s) yeni nesne keşfetmek Undirected arama Kutusunu Yetiştirme </ Td> Kutuda sıklığı ve rearings gecikme (ler) (ön pençeleri duvara dokunmadan değil) Yetiştirme kurulu Gemide sıklığı ve rearings gecikme (ler) Delik arama Frekans ve silindir keşifler gecikme (ler) Bellek Tanıdık nesne arama Frekans, gecikme (ler), süresi (%) ve ortalama süresi (s) tanıdık nesne keşfetmek Sosyal afinite Grup etkileşimi Grup bölmesi ile etkileşim Frekans, gecikme (ler), süresi (%) ve ortalama süresi (s) Lokomotor aktivite Hat geçiş Frekans ve hat geçişlerinin gecikme (ler) Tablo 1: davranış parametre listesi <table border="0" cellpadding="0" cellspacing = "0"> Bellek sistemi Parametre Tanım Uzun süreli bellek Yanlış seçim Olmayan baited silindir ziyaret; ağız kenarı altında burun Atlanmış hata Bir baited silindir atlanmış Bir baited silindire yok ziyareti Kısa süreli bellek Tekrarlanan seçim Baited silindire tekrar; ağız kenarı altında burun Genel performans Toplam deneme süresi Zaman her baited silindirler ziyaret edilene kadar Tablo 2: bilişsel parametrelerin listesi

Discussion

MHB paradigma koşulsuz davranış çeşitli boyutları ölçmek için kullanılabilir. protokol biraz deney amacına bağlı olarak değiştirilebilir. Bu protokolde ayarları, süreleri ve ölçümler genellikle bizim laboratuvarda kullanılan tartışmak. Bununla birlikte, düzeneğin ölçümleri için ufak sapmalar geçmişte kullanılmıştır ve ek olarak silindir miktarı 3 değişebilir. Bilişsel deneme başarılı ya da test süresini uzatma tamamlanmış gibi hayvanların son derece endişeli veya fiziksel engelli iseniz kısa sürede testi biten, yani sık sık çalışmalar deneme başına 5 dakika bir test süresi istihdam, ancak diğer test süreleri de uygun olabilir. test günün saati kemirgenler gece hayvanlar ve erken karanlık fazda en aktif olduğundan kırmızı ışık koşulu altında olduğu seçildi. Roedel ve ark. (2006) davranışsal ve bilişsel performans açık veya koyu faz test etkilerini gösterirMHB 16 DBA farelerde. Diğer çalışmalar, beyaz ışık koşulları altında 1,6 MHB deneyler icra edilmiştir, ancak, bu, beyaz ışık koşulları altında test davranış inhibisyonu ve (dba farelerde gösterildiği gibi) kognitif bozulma 16 uyarabilir not edilmelidir.

Tablo 1 ve 2 davranışsal parametreler büyük miktarda ölçülecek içerir. Veri analizi sırasında bu değil, aynı motivasyon sisteminin diğer parametreleri (bu durumda 'Kaçınma' de), örneğin 'ilk giriş kartına gecikme' önemli bir artış gösteren bazı parametrelere yol açabilir. Bazı durumlarda, bu kesin sonuçlara yol açabilir. Guilloux ve ark. (2011), farelerde 24 davranışsal fenotiplen entegre davranışsal z-puanları tanıttı. Entegre davranışsal z-skorları kullanımı ile birden fazla parametre, belirli bir motivatio açıklayan bir tek z-skoru kombine edilebilirnal sistem. sonraki z-skorları kendi sırayla davranış test ve deneyler arasında karşılaştırıldığında daha kolay olabilir.

Bu paradigmanın anlatılan özelliklerin yanında, daha derin bir kullanım Salomons ve arkadaşlarının çalışmasında ortaya çıktı. (2012). MHB iki fare suşları (Balc / CJ ve 129P3 / J) olarak yenilik alışma, 129P3 / J fareler 4 bir adaptif olmayan davranış profilini gösteren davranışsal esneklik fark sergileyen, karşılaştırıldı muhtemelen uyum kapasitelerini engelli ve yansıtma Hatta patolojik anksiyete.

Sonuç, MHB, tek bir deneyde birden davranışsal boyutları ölçümünü sağlar. Yani geleneksel delik kurulu ve açık alan testi, koşulsuz davranış, sosyal etkileşim, biliş ve adaptif kapasiteleri, gelen özellikleri birleştirerek, refah incelenebilir. Örneğin Bu test pharmacological- nedeniyle davranış değişiklikleri değerlendirmek için kullanılan ve / veyagenetik manipülasyonlar, seçici üreme ve adaptif kapasiteleri. Klasik bir test pillere kıyasla, ihtiyaç duyulan hayvan sayısı, açık bir şekilde azaltılır ve test sırasında hayvanların yaşadığı stresi son derece düşüktür.

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors would like to acknowledge the work of Annemarie Baars and José Lozeman-van ‘t Klooster in performing, assisting and teaching experiments using the mHB set-up.

Materials

Name of Reagent/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Standard mHB apparatus N/A N/A The standard mHB apparatus consists of a grey PVC experimental box (100x50x50 cm) separated from a group compartment (50x50x50 cm) by a transparent, perforated partition. If the presence of group mates is unwanted or if individually housed animals are tested, the transparent partition is replaced by a partition made of grey PVC. The board (60x20x0.5 cm; made of grey PVC) is placed in the middle of the box and can contain 20 cylinders (ᴓ 1.5 cm) staggered in two lines or 23 cylinders (ᴓ 3 cm) staggered in three lines positioned on the board. The area around the board is divided by black lines into 10 rectangles (20×15 cm) and 2 squares (20×20 cm).
Cognitive mHB apparatus N/A N/A The box for cognitive testing is 50×50 cm by inserting a partition made of grey PVC in the standard mHB. A smaller board (35x22x1 cm) with 10 cylinders is placed in the middle of the box. All cylinders are scented with a flavor animals are attracted to (e.g. vanilla) and all are baited with a reward (e.g. a piece of almond) beneath a grid so the animals cannot remove it. Cylinders (often three) are cued with a colored ring (contrasting with the grey PVC) and are baited with a removable reward (e.g. 0.05 g piece of almond). 
Vanilla flavor N/A N/A Vanilla flavor dissolved in water (0.02%)
Camera N/A N/A Camera that generates sufficient quality output to rescore the behavior from video. 
Stage light N/A N/A A theather light that allows to adjust the light intensity and the dimensions of the surface that is lit. 
Behavioral scoring software N/A N/A Behavioral scoring software.

References

  1. Ohl, F., Holsboer, F., Landgraf, R. The modified hole board as a differential screen for behavior in rodents. Behav. Res. Methods Instrum. Comput. 33 (3), 392-397 (2001).
  2. Ohl, F., Holsboer, F., Ströhle, A. . Anxiety and Anxiolytic Drugs. 169, 35-69 (2005).
  3. Staay, F. J., Gieling, E. T., Pinzon, N. E., Nordquist, R. E., Ohl, F. The appetitively motivated ‘cognitive’ holeboard: A family of complex spatial discrimination tasks for assessing learning and memory. Neurosci. Biobehav. Rev. 36 (1), 379-403 (2012).
  4. Salomons, A. R., van Luijk, J. A., Reinders, N. R., Kirchhoff, S., Arndt, S. S., Ohl, F. Identifying emotional adaptation: Behavioural habituation to novelty and immediate early gene expression in two inbred mouse strains. Genes Brain Behav. 9 (1), 1-10 (2010).
  5. McIlwain, K. L., Merriweather, M. Y., Yuva-Paylor, L. A., Paylor, R. The use of behavioral test batteries: Effects of training history. Physiol. Behav. 73 (5), 705-717 (2001).
  6. Ohl, F., Sillaber, I., Binder, E., Keck, M. E., Holsboer, F. Differential analysis of behavior and diazepam-induced alterations in C57BL/6N and BALB/c mice using the modified hole board test. J. Psychiatr. Res. 35 (3), 147-154 (2001).
  7. Hanell, A., Marklund, N. Structured evaluation of rodent behavioral tests used in drug discovery research. Front Behav Neurosci. 8 (252), (2014).
  8. Laarakker, M. C., van Lith, H. A., Ohl, F. Behavioral characterization of A/J and C57BL/6J mice using a multidimensional test: Association between blood plasma and brain magnesium-ion concentration with anxiety. Physiol. Behav. 102 (2), 205-219 (2011).
  9. Kooij, M. A., Ohl, F., Arndt, S. S., Kavelaars, A., van Bel, F., Heijnen, C. J. Mild neonatal hypoxia-ischemia induces long-term motor- and cognitive impairments in mice. Brain. Behav. Immun. 24 (5), 850-856 (2010).
  10. Boleij, H., Salomons, A. R., van Sprundel, M., Arndt, S. S., Ohl, F. Not all mice are equal: Welfare implications of behavioural habituation profiles in four 129 mouse substrains. PLoS One. 7 (8), e42544 (2012).
  11. Enard, W., et al. A humanized version of Foxp2 affects cortico-basal ganglia circuits in mice. Cell. 137 (5), 961-971 (2009).
  12. Bartolomucci, A., Fuchs, E., Koolhaas, J. M., Ohl, F., Gould, T. D. Acute and chronic social defeat: Stress protocols and behavioral testing. Mood and anxiety related phenotypes in mice. 42, 261-275 (2010).
  13. Erhardt, A., et al. Consequences of chronic social stress on behaviour and vasopressin gene expression in the PVN of DBA/2OlaHsd mice-influence of treatment with the CRHR1-antagonist R121919/NBI 30775. J. Psychopharmacol. 23 (1), 31-39 (2009).
  14. Salomons, A. R., Kortleve, T., Reinders, N. R., Kirchhoff, S., Arndt, S. S., Ohl, F. Susceptibility of a potential animal model for pathological anxiety to chronic mild stress. Behav. Brain Res. 209 (2), 241-248 (2010).
  15. Kooij, M. A., et al. NF-κB inhibition after neonatal cerebral hypoxia–ischemia improves long-term motor and cognitive outcome in rats. Neurobiol. Dis. 38 (2), 266-272 (2010).
  16. Roedel, A., Storch, C., Holsboer, F., Ohl, F. Effects of light or dark phase testing on behavioural and cognitive performance in DBA mice. Lab. Anim. 40 (4), 371-381 (2006).
  17. Arndt, S. S., et al. Individual housing of mice–impact on behaviour and stress responses. Physiol. Behav. 97 (3-4), 385-393 (2009).
  18. Salomons, A. R., Arndt, S. S., Lavrijsen, M., Kirchhoff, S., Ohl, F. Expression of CRFR1 and Glu5R mRNA in different brain areas following repeated testing in mice that differ in habituation behaviour. Behav. Brain Res. 246, 1-9 (2013).
  19. Henry, B. L., Minassian, A., Young, J. W., Paulus, M. P., Geyer, M. A., Perry, W. Cross-species assessments of motor and exploratory behavior related to bipolar disorder. Neurosci. Biobehav. Rev. 34 (8), 1296-1306 (2010).
  20. Chesler, E. J., Wilson, S. G., Lariviere, W. R., Rodriguez-Zas, S. L., Mogil, J. S. Identification and ranking of genetic and laboratory environment factors influencing a behavioral trait, thermal nociception, via computational analysis of a large data archive. Neurosci. Biobehav. Rev. 26 (8), 907-923 (2002).
  21. Ohl, F., Roedel, A., Binder, E., Holsboer, F. Impact of high and low anxiety on cognitive performance in a modified hole board test in C57BL/6 and DBA/2 mice. Eur. J. Neurosci. 17 (1), 128-136 (2003).
  22. Gordan, M. L., Jungwirth, B., Ohl, F., Kellermann, K., Kochs, E. F., Blobner, M. Evaluation of neurobehavioral deficits following different severities of cerebral ischemia in rats: A comparison between the modified hole board test and the morris water maze test. Behav. Brain Res. 235 (1), 7-20 (2012).
  23. Salomons, A. R., Arndt, S. S., Ohl, F. Impact of anxiety profiles on cognitive performance in BALB/c and 129P2 mice. Cogn. Affect. Behav. Neurosci. 12 (4), 794-803 (2012).
  24. Guilloux, J., Seney, M., Edgar, N., Sibille, E. Integrated behavioral z-scoring increases the sensitivity and reliability of behavioral phenotyping in mice: Relevance to emotionality and sex. J. Neurosci. Methods. 197 (1), 21-31 (2011).
  25. . . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2010).

Play Video

Cite This Article
Labots, M., Van Lith, H. A., Ohl, F., Arndt, S. S. The Modified Hole Board – Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (98), e52529, doi:10.3791/52529 (2015).

View Video