Summary
Rotter på grund af sin størrelse, tilgængelighed og snarere føjelige adfærd er blevet anvendt som et forsknings- model for mange år. Målet med denne protokol er at udnytte rotten i en iskæmisk hud sårheling model til at give værdifuld indsigt i patofysiologien af kroniske sår.
Abstract
Tilbøjeligheden til kroniske sår hos mennesker stiger med aldring, sygdomstilstande såsom diabetes og nedsat kardiovaskulær funktion og unrelieved pres på grund af immobilitet. Animal modeller er blevet udviklet, forsøg på at efterligne disse forhold med henblik på at fremme vores forståelse af kompleksiteten af kroniske sår. Den beskrevne model er en rotte iskæmisk hudlap model, der tillader en forlænget reduktion af blodstrømmen resulterer i sår, der bliver iskæmisk og ligner et kronisk sår fænotype (reduceret vaskularisering, øget inflammation og forsinket sårlukning). Den består af en bipedicled dorsal klap med 2 iskæmiske sår placeret centralt og 2 ikke-iskæmiske sår lateralt i forhold til klappen som kontroller. En ny tilføjelse til dette iskæmisk hudlap model er placeringen af en silikone ark under klappen, der fungerer som en barriere og en skinne for at forhindre revaskularisering og mindske sammentrækning som sår heles. Trodsdebat anvendelse rotter til sårheling undersøgelser på grund af deres helt forskellige anatomiske og fysiologiske forskelle i forhold til mennesker (dvs. tilstedeværelsen af en panniculus carnosus muskulatur, kort levetid, øget antal hårsække, og deres evne til at helbrede inficerede sår) ændringerne anvendes i denne model gør det et værdifuldt alternativ til tidligere udviklede iskæmisk hud flap-modeller.
Introduction
Effektiv lægemiddeludvikling og andre sårhelende lægemidler kræver passende in vivo modeller, på trods af kendte problemer med at oversætte fund i dyremodeller for humane terapier 1. Det følgende er en beskrivelse af en detaljeret protokol for anvendelse af en rottemodel for iskæmisk hud sårheling at undersøge mekanismer, der yderligere forståelse af patologiske sårheling. De rotte arter, ofte er ansat på grund af sin brede tilgængelighed, størrelse og føjelig naturen bruges til sårheling undersøgelser, da det er stort nok til at give et passende hudområde til incisional og excisional såret, billedbehandling og væv kollektion 2. Det skal dog tages i nøje overvejelse, at huden på en rotte og en menneskelig er forskellige anatomisk, med rotter benævnes løs-flået dyr. Denne særskilte egenskab giver mulighed for sår sammentrækning, snarere end epitelialisering at bidrage væsentligt til lukning af rottehud wounds 2. Derudover er tilstedeværelsen af en subkutan panniculus carnosus muskulatur i rotter, bidrager til heling af både kontraktion og kollagen formation 3,4. Disse meget vigtige anatomiske forskelle blev anset for udviklingen af rotte iskæmisk hudsår model og specifikke modifikationer blev gennemført for at mindske sår sammentrækning og reducere indflydelsen af panniculus carnosus muskulatur 5.
Hos diabetiske fodsår, venøse bensår og tryksår, er healing forsinket, og disse sår betragtes kronisk. Sårene er kendetegnet ved overdreven inflammation, som forhindrer såret udvikler sig og de næste faser i sårheling 6. En af de vigtigste faktorer i udviklingen af en kronisk sår er lokaliseret væv iskæmi (reduceret blodstrømning) 5 bidrager til den manglende evne til at fjerne betændelse. På det tidspunkt, hvor denne model blev udviklet og valideret (i 2003-4), Var der ingen standardiserede dyremodeller, der kunne give nok væv til at teste induktion af angiogenese i såret, et afgørende tidspunkt under normal sårheling og motivationen for at udvikle denne model 5. Det er sagt, model præsenteres her er en modifikation af den iskæmiske sår model oprindeligt beskrevet af Schwartz et al. 7 og efterfølgende anvendes i modificeret form af Chen et al. 8
I den modificerede iskæmisk sår model er der foretaget ændringer for at omgå de ovenfor nævnte anatomiske karakteristika af rotte, der fører til helbredelse ved sammentrækning stedet epitelialisering: (1) To fuld tykkelse Excisionssår er skabt inden for en bipedicled flap dorsale hud og panniculus carnosus muskulatur fjernes fra såret ved dissekering lige over muskelfascie. (2) flap selv har mere smalle dimensioner, der sikrer, at blodforsyningen er tilfældig og sår placeret ved midtpunktet af than klap er iskæmisk. (3) En silicone ark indsættes under klappen, forebygge readherence og reperfusion af klappen fra det underliggende væv. Sår sammentrækning er begrænset (ikke elimineres) ved at forankre eller suturering klappen til silikone ark 5.
Modellen er for nylig blevet anvendt i undersøgelser spænder fra oxygenovertrykskramper virkninger på iskæmisk sårheling 9,10 til iskæmisk sårheling hos unge versus ældre rotter 11 og har vist sig at være en pålidelig model for langvarig vævsiskæmi. Dimensionerne af bipedicled flap er også blevet tilpasset til forskellige rottestammer, herunder Sprague Dawley (11 cm lang og 2 cm bred) og F344-rotter (10,5 cm lang med 3,0-3,5 cm bred) og andre arter, herunder svin 12 og mus 13,14. Denne video udnytter F344 indavlede rotte stamme i demonstrationen af den iskæmiske hudsår model.
Godkendelse af alle dyreforsøg præsenteres nedenfor var fåed fra University of South Florida Animal Care Udvalg (IACUC) og overholde alle krav i dyreværnsloven og vejledningen for pleje og anvendelse af forsøgsdyr.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
BEMÆRK: Godkendelse af alle dyreforsøg præsenteres nedenfor blev opnået fra University of South Florida Animal Care Udvalg (IACUC) og overholde alle krav i dyreværnsloven og vejledningen for pasning og anvendelse af forsøgsdyr.
1. Fremstilling af silikone Plader og kirurgiske instrumenter
- Forskåret strimler (10,5 cm x 3,0 cm) af ikke-forstærket 0,01 tykkelse, medicinsk silikone presenningen og sterilisere ved hjælp af en autoklave.
- Rens og sterilisere egnede kirurgiske instrumenter (sakse, pincetter og gardiner eller håndklæder til at skabe et sterilt område under operationen).
2. Eksperimentelle Dyr
- Brug voksen mand eller hunrotter med en vægt i intervallet 250-350 g opnået fra en kommerciel opdrætter. Hvis ældre rotter udnyttes, bør de være ≥350 g for at sikre bedre overlevelse efter kirurgi. Forud for starten af eventuelle forsøg akklimatisere alle dyr i mindst7 dage under standardbetingelser i en 12 timers lys-mørke cyklus med foder og vand ad libitum.
3. Anæstesi, Præoperativ analgesi og operative Forberedelse
- Fremkald generel anæstesi ved hjælp af isofluran på 3% -4% via en induktion kammer og vedligeholde (via brug af en næse kegle) ved 1% -2% med O 2 under forberedelse og kirurgi hud. Overvåg anæstesidybden ved observation af hastigheden og dybden af respiration, interdigital knivspids eller palpebral blink refleks.
BEMÆRK: På dette tidspunkt kan en dyrlæge salve placeres på øjnene for at forhindre tørhed, mens dyret er under anæstesi. - I et sted fjernt fra det sterile kirurgiske område, skal du placere rotte i bugleje og barbere dorsum med neglesaks fra bunden af halsen og ned ca. 11 cm. Stencil med permanent markør, omridset for 3,0 cm x 10.5 cm klap (se figur 1A).
- Flyt rotte til en ren, betegnet surgical område udstyret med en godkendt varmepude og sterile kirurgiske gardiner eller håndklæder. Injicer 5 mg / kg Ketoprofen subkutant forud for den første kirurgiske incisioner til smertebehandling. Supplerende væske (saltvand) kan gives (op til 5 cc) subkutant efter behov.
- Forbered huden yderligere ved pensling først med 70% isopropylalkohol og det andet med 0,2% chlorhexidin, derefter anvende sterile forhæng til at skabe et sterilt område. 10% povidon-iod (Betadine) kan også anvendes.
BEMÆRK: Et antibiotikum (ampicillin ved 15 mg / kg) indgives subkutant, men hvis der anvendes gode aseptiske teknikker det ikke er nødvendigt.
4. Oprettelse Excisionssår og Bipedicled Flap
- Ved hjælp af en steril, engangs 6 mm biopsitang værktøj, oprette to cirkulære "iskæmiske" sår i centrum af den udpegede flap område (figur 1B). Dybden af såret bør være ned til (ikke gennem) det underliggende fascia af panniculus Carnosus muskel (figur 1B indsat).
- Ved hjælp af pincet løfte huden i midten af såret omrids skabt af punch biopsi og derefter bruge iris saks (med buede tips) for at udskære cirkulære stykke væv (herunder panniculus carnosus muskel). Resultatet vil være en fuld tykkelse sår med fascia som base af såret.
BEMÆRK: Det udskårne væv (sår stik) kan hurtigt nedfrosset i flydende nitrogen eller fast i 10% bufferet-formalin O / N til senere behandling som kontrol, normal hud. - Lav en bipedicled klap ved at indsnit med en steril skalpel på hver side af den iskæmiske sår langs præ-tegnede linier (figur 1c), der er 10,5 cm i længden og 3,0 cm fra hinanden. Dybden af indsnit bør være ned til paraspinous muskler. Ved hjælp af iris saks, adskille panniculus carnosus fascia fra paraspinous muskler, være omhyggelig med at holde fascia intakt som "base" af de 6 mm slag (Figur 1D).
- Tag 1 steril forskårne silikone ark og placere den i mellem panniculus carnosus fascia og paraspinous muskler (figur 1E) sikrer, at pladen ikke bøjer eller fold. Med sort, ikke-absorberbare suturer (størrelse 4,0) lukke begge indsnit ved at forankre silikone ark til huden med mindst 8 afbrudt masker på hver side langs længden af klappen (figur 1F og 1G).
- Ved hjælp af en steril, engangs biopsi stanseværktøjet, oprette to intern kontrol "non-iskæmisk" sår (ned til den forreste fascia af panniculus carnosus muskulatur) 1 cm lateralt for iskæmiske sår på hver side af klappen (figur 1G).
- Placer en lineal under sårene og tage digitale billeder for sår måling formål (se figur 3A). På dette tidspunkt kan blodgennemstrømning (perfusion) overvåges ved anvendelse af laser-doppler eller andre manipulationer (topisk lægemiddel placering) udføres.
- Anvender et godkendt flydende klæbemiddel både kraniale og kaudale til sår og en transparent film dressing at holde såret miljø fugtig og rene (sterile). En yderligere forbinding kan placeres i den kaudale ende af flappen for at forhindre dyret i at fjerne de mest kaudale suturer.
5. Post-operative procedurer
- Placer dyr i bure (enkeltvis opstaldet) udstyret med overfladiske foderautomater således at forhindre det kirurgiske sted kan gnide mod feeder. Dyrene bør ikke efterlades uden opsyn eller returneres til selskab med andre dyr, indtil de genvinde tilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystleje og udviser målrettet bevægelse. Varme måtter bør placeres under halvdelen af buret i op til 2 dage under opsving.
- At håndtere smerte postoperativt, subkutant administrere Ketoprofen (5 mg / kg) til dyr den følgende morgen og 1x per dag i op til 48 timer efter kirurgi. Dyrene bør også overvåges dagligt forlangvarige symptomer på smerte, vægttab eller kirurgiske infektioner.
6. Efterfølgende Wound Målinger og bandageskift
- Mål iskæmiske og ikke-iskæmiske sår ofte under fuld narkose ved hjælp isofluran på 3% -4% via en induktion kammer og vedligeholdes (via en næse kegle) ved 1% -2% med O 2 som i trin 3.1.
- Fjern forbindingen forsigtigt for ikke at trække klæbemidlet fra huden. På dette tidspunkt yderligere digitale fotos er taget for sår målinger aktuelle behandlinger igen anvendt, laser Doppler imaging (LDI) eller andre manipulationer udføres for at passe til investigator behov.
- Påfør lim og en ren forbinding og så dyret kan komme sig som i trin 5.1.
7. sår Indsamling og Eutanasi
- Harvest iskæmisk og ikke-iskæmiske sår (investigator på dage finder passende), mens dyret er under fuld narkose ved hjælp isofluran på 3% -4% via en INDuction kammer og vedligeholdes (via en næse kegle) på 1% -2% med O 2 som i trin 3.1.
- Ved hjælp af en skalpel, lave en firkant formet excision omkring såret til at omfatte nogle sunde væv omkring såret. Placer excision i et 1,5 ml snap cap rør og snap fryse i flydende nitrogen (opbevares ved -80 ° C) til fremtidig molekylær analyse eller inkuber i 10% pufret formalin O / N ved stuetemperatur til histologisk bearbejdning.
BEMÆRK: Såret excisions kan også skæres i halve for at give flere prøver til analyse. - Efter sårvæv fjernelse, aflive dyret ved hjælp af den godkendte metode CO 2 indånding.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Rotten iskæmisk sårheling model protokol bør tage ca. 20 min per dyr, hvis det sker effektivt. Før påføring af en bandage modellen skal vises som vist i figur 1G. Det vil være vigtigt at kontrollere, at bipedicled klap og sår deri er iskæmisk. Subkutan oxygenspændingen (PSCo 2) på niveau med sårene er blevet målt under validering af denne model 5 ved at placere en polarografisk elektrode i det subkutane væv mellem de to iskæmiske sår. PSCo 2 værdier var i kritisk iskæmisk interval (20-40 mmHg). Da udviklingen af denne model i stigende grad er blevet anvendt brugen af LDI at måle blodperfusion og denne teknik vil give tilstrækkelige oplysninger om den iskæmiske tilstand bipedicled klap.
Kort fortalt er LDI teknik baseret på udledningen af en stråle af laserlys, der bæres af et fiberoptisk probe. Den measuring dybde afhænger af væv egenskaber og bølgelængde af laserlyset. I normal hud, et instrument med en sonde med standard fiber separation (0,25 mm) og en 780 nm bølgelængde laser, måler dybde vil være i størrelsesordenen 0,5-1 mm. Et repræsentativt Doppler billede (venstre) til en dorsal bipedicled klap viser både et perfunderet område (venstre af suturen linje) og det ikke-perfunderede område (højre af suturen linje) er vist i figur 2.
Ud over at måle subkutan ilt spændinger, kan man også bruge prober eller fælles biokemiske markører for at fastslå, at sårene i flappen er iskæmisk. PECAM-1 eller CD31 normalt findes på vaskulære endotelceller er en markør for nydannelse fartøj i sår. Forskellige markører for reaktive ilt arter, fundet at være forhøjet i iskæmiske sår, er kommercielt tilgængelige ofte som fluorescerende-mærkede antistoffer eller superoxid indikatorer som dihydroethidium (DHE).
Wound arealmålinger at spore sårlukning kan være repræsenteret i en række forskellige måder. Almindeligvis er viklet område kvantificeret fra digitale billeder af sårene over tidsforløbet for helbredelse 11 hjælp af en formel, såsom (6 mm dorn biopsi område = (π) R2 = 3,14 x 9 = 28,26 mm 2 på dag 0) med data præsenteres som procent af oprindelige sårområde eller viklet overfladeareal på en bestemt dag kan kvantificeres som i Gould et al. 5 Med henblik på denne demonstration sårlukning progression er repræsenteret som procent af oprindelige sår området over et tidsforløb på 28 dage . Brug af gratis software ImageJ er et digitalt billede åbnes og skalaen indstilles med 10 mm på linealen i billedet (figur 3A). En linje trukket 10 mm i længde svarer til en pixel (indsat i figur 3A), som kan omdannes til en enhed af valg, i dette tilfælde (mm). Dernæst omkredsen af såret spores på billedet (Figur 3B), og når foranstaltningen kommandoen gives, er området præsenteres i mm (indsat i figur 3B). Data kan derefter præsenteres som procent af oprindelige sårområde på y-aksen og dage på x-aksen (figur 3C).
Figur 1. Fotografier skildrer trin under operationen til at skabe iskæmiske sår, den bipedicled flap og ikke-iskæmiske sår. (A) Pre-kirurgisk hårfjerning og forberedelse huden af en bedøvet rotte modtog et præ-kirurgisk dosis af analgetisk (Ketoprofen) subkutant til smertebehandling. (B og indsat) iskæmisk sår er skabt inde i 2 indsnit markører ved anvendelse af en steril dorn biopsi værktøj. (C) Snit er lavet langs de markerede linjer ned til paraspinous muskler og (D) den bipedicled klap hævesat vise adskillelsen af klappen (med panniculus carnosus fascia intakt) fra muskel lag nedenfor. (E) Et ark af steril silicone (sort pil) er anbragt mellem fascia af panniculus carnosus og paraspinous muskel. (F) Sort, ikke-absorberbare suturer (størrelse 4,0) lukke begge indsnit ved at forankre silikone ark til huden med flere afbrudt sting langs længden af klappen (G). To ikke-iskæmiske sår (sorte pile) er skabt ved hjælp af en steril dorn biopsi værktøj lateralt for bipedicled klap på begge sider. Klik her for at se en større udgave af dette tal.
Figur 2. Repræsentant laser Doppler billede af blodperfusion post-kirurgi. Den rigtige panel viser et sort og hvidt billede af 2 iskæmiske sår (sorte pile) i midten af bipedicled flap og 1 non-iskæmisk sår (enkelt sort pil) laterale til klappen. Suturen linje er blevet fremhævet i hvidt. Det venstre panel viser Doppler billede af det samme område er vist i højre panel. Områder med lysere farver er mere perfunderet end områder med mørkeblå. Denne forskel i perfusion mellem den ikke-iskæmiske område (venstre) og det iskæmiske område (højre) er klar og kan følges langs hele længden af suturen linje. Bemærk, at sårene på begge sider lysere, da blodlegemer er stadig til stede i nogen grad. Klik her for at se en større udgave af dette tal.
Figur 3. Sår måling og data repræsentation. (A) digital fotografier skildrer sårareal måling ved hjælp af software (ImageJ), omdannelse af pixels til (mm) (sorte pile) og metoden til at fange en nøjagtig omkreds (enkelt sort pil) af såret (B). Statistiske data (middelværdi ± SEM af viklet områder på en given dag) kan derefter præsenteres som procent af oprindelige sårområde (dag 0) på y-aksen og dage på x-aksen (C). De linjegraf præsenterer data analyseres ved hjælp af en 2-vejs ANOVA med Sidak multiple sammenligninger test, *** repræsenterer signifikant højere (P = 0,0004) end ikke-iskæmisk på samme tidspunkt (dag 10), n = 8 sår per gruppe. Klik her for at se en større udgave af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Sårheling hos rotter har ofte været genstand for debat på grund af deres evne til at helbrede inficerede sår og høje interanimal variabilitet 5. En af de oprindelige mål af modellen under udviklingen var at mindske denne variation. Ændringer i bredden af klappen, hvilket reducerer antallet af sår med specifik placering (centreret på flappen med konsekvent kranio-caudale placering) og indførelse af et silicone ark har opnået dette mål. Sårheling ved sammentrækning er også blevet reduceret, og helbredelse ved epitelialisering, som hos mennesker, er den målte resultat. Tilpasning af modellen til en anden stamme af rotter, dvs. F344, har også vist sig succesfuld og gengiver graden af iskæmi observeret ved anvendelse af Sprague Dawley rotter. Samlet de kirurgiske teknikker (biopsi, sutureringsteknikker og sår excision), der kræves for denne model er let erhvervet af de fleste studerende og teknikere med begrænset kirurgisk erfaring.
_content "> For at opnå overensstemmelse med denne model, mens de udfører flere operationer, blev det konstateret, at det er vigtigt at skabe de iskæmiske sår før elevation af klappen for silikone ark placering 5. Derudover ikke stansning gennem panniculus carnosus fascia er afgørende for tilvejebringe en levedygtig sårbunden at forblive over silikone. Silikone virker ikke kun for at forhindre vaskulær genvækst, men også som en "skinne", der tilskynder til sår reepitelialisering. Anvendelsen af klæbemidlet og forbindinger for at forhindre infektion og opretholde et fugtigt miljø for sårheling er også vigtig. Produkt valg kan, hvad der foretrækkes, eller anvendes i forskerens dyreanlægget. Imidlertid er det ikke ualmindeligt for nogle af de dyr, der kunne fjerne deres forbindinger, uanset hvilken type af klæbemiddel / dressing kombination er anvendes.Den bipedicled flap skal forblive levedygtig gennem et tidsforløb for healing, som er omtrentlige ly 28 dage afhængigt af rotte stamme og andre co-morbiditet tilstedeværende. I sjældne tilfælde kan bylder dannes i klappen (især nær suturer) og seromas kan danne under flappen. Fluid kan tømmes og antibiotika, hvis nødvendigt indgives. Hvis klappen mister levedygtighed og bliver nekrotisk Det anbefales dog, at dette dyr ikke længere bruges. Sår excision for biokemisk analyse vil skabe variation på grund af (1) nogle normale væv skal opbevares i holderen (2) valg af væv homogenisering og forberedelse til isolering af RNA, DNA eller protein og (3) iboende interanimal variabilitet 5,10, 11. Man kunne overveje dette sidste punkt en begrænsning til modellen, og det blev konstateret, at reducere størrelsen af klappen (<2,0 cm) eller klap traumer kan forårsage nekrose, hvilket indikerer, at mindre variationer i faktorer som temperatur eller stress niveauer, kan også føre til biokemisk påviselig variation mellem sår prøver fra en rotte til en anden 5.
ve_content "> Sammenfattende denne model, med en langsgående, bipedicled flap spænder fra 2,0 til 3,0 cm i bredden og en strategisk placeret silikone ark, er en pålidelig model for langvarig vævsiskæmi. Når brugeren er dygtig til at bruge de teknikker til at skabe en konsekvent iskæmisk sår, bør de være i stand til at tilpasse det til yderligere aldre og arter af gnavere (mus medfølger). De Excisionssår kan behandles topisk eller systemisk behandlinger anvendes til yderligere at udforske mekanismen (er) er involveret i kronisk sår dannelse, forværret inflammatoriske reaktioner, afvigende angiogenese og forsinket sårlukning.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sil-Tec medical grade sheeting | Technical Products Inc. | 500-3 | nonreinforced, 0.01 inches in thickness |
| Mini Iris scissors, 8 cm, curved, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Ethilon Nylon Sutures | Ethicon | 1964G | black, size 4.0, PC-3 16 mm needles (3/8 circle) |
| Laser Doppler Imager | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | free download | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
References
- Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).
- Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound healing: a review. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).
- Davidson, J. M. Animal models for wound repair. Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).
- Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue). Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).
- Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. Optimization and validation of an ischemic wound model. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).
- Loots, M. A., et al. Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds. The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).
- Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds. Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).
- Chen, C., et al. Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds. Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).
- Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model. The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).
- Zhang, Q., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism. The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).
- Moor, A. N., et al. Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure. Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).
- Roy, S., et al. Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound). Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).
- Biswas, S., et al. Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).
- Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model. Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).
