चूहा इस्केमिक त्वचा घाव मॉडल का प्रदर्शन
Summary
चूहे की वजह से इसका आकार, उपलब्धता, और नहीं बल्कि विनम्र व्यवहार करने के लिए कई वर्षों के लिए एक शोध मॉडल के रूप में उपयोग किया गया है। इस प्रोटोकॉल के लक्ष्य के पुराने घावों के pathophysiology में बहुमूल्य जानकारी प्रदान करने के लिए एक इस्कीमिक त्वचा घाव भरने मॉडल के रूप में चूहे का उपयोग करने के लिए है।
Abstract
मानव में पुराने घावों के लिए प्रवृत्ति ऐसे कारण गतिहीनता को मधुमेह और बिगड़ा हृदय समारोह, और लगातार दबाव के रूप में बुढ़ापे, बीमारी की स्थिति के साथ बढ़ जाती है। पशु मॉडलों पुराने घावों की जटिलता के बारे में हमारी समझ को आगे बढ़ाने के उद्देश्य के लिए इन शर्तों को नकल करने के लिए लगता है कि प्रयास विकसित किया गया है। इस के साथ साथ वर्णित मॉडल इस्कीमिक बनने के लिए और एक पुराने घाव फेनोटाइप (कम vascularization वृद्धि हुई है, सूजन और देरी घाव बंद) जैसे लगते हैं कि घाव में जिसके परिणामस्वरूप रक्त के प्रवाह की एक लम्बी कमी है कि परमिट एक चूहे इस्कीमिक त्वचा फ्लैप मॉडल है। यह नियंत्रण के रूप में फ्लैप के लिए पार्श्व केन्द्र रखा दो इस्कीमिक घाव और दो गैर इस्कीमिक घाव के साथ एक bipedicled पृष्ठीय फ्लैप के होते हैं। इस इस्कीमिक त्वचा फ्लैप मॉडल के लिए एक उपन्यास के अलावा एक बाधा और revascularization रोकने और घावों को भरने के रूप में संकुचन कम करने के लिए एक पट्टी के रूप में कार्य करता है कि फ्लैप के नीचे एक सिलिकॉन चादर का स्थान है। के बावजूदकारण मनुष्यों की तुलना में उनकी काफी अलग शारीरिक और शारीरिक मतभेद के अध्ययनों से घाव भरने के लिए चूहों का उपयोग करने की बहस (यानी, एक panniculus carnosus मांसपेशी, लघु जीवन अवधि की उपस्थिति, बालों के रोम की संख्या में वृद्धि, और संक्रमित घावों को चंगा करने की क्षमता) इस मॉडल में कार्यरत संशोधनों यह पहले से विकसित इस्कीमिक त्वचा फ्लैप मॉडल के लिए एक मूल्यवान विकल्प बनाते हैं।
Introduction
प्रभावी दवा के विकास और अन्य घाव भरने चिकित्सा विज्ञान मानव उपचारों एक करने के लिए पशु मॉडल में निष्कर्षों का अनुवाद करने में ज्ञात समस्याओं के बावजूद, विवो मॉडल में उपयुक्त आवश्यकता होती है। क्या इस प्रकार के तंत्र रोग घाव भरने की है कि आगे समझने की जांच के लिए इस्कीमिक त्वचा घाव भरने की एक चूहे मॉडल के उपयोग के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल का वर्णन है। चूहे प्रजातियों, अक्सर इसकी व्यापक उपलब्धता, आकार की वजह से कार्यरत हैं और यह incisional और excisional लोग घायल हो गए, इमेजिंग और ऊतक संग्रह 2 के लिए एक उपयुक्त त्वचा क्षेत्र प्रदान करने के लिए काफी बड़ी है के रूप में विनम्र स्वभाव घाव भरने के अध्ययन के लिए प्रयोग किया जाता है। हालांकि यह चूहों के रूप में ढीली चमड़ी जानवरों के लिए भेजा जा रहा है, के साथ एक चूहा और एक मानव की त्वचा anatomically अलग हैं कि सावधान ध्यान में रखा जाना चाहिए। यह अलग विशेषता चूहे की त्वचा के समापन डब्ल्यू में महत्वपूर्ण योगदान करने के लिए नहीं बल्कि epithelialization से, घाव संकुचन के लिए अनुमति देता हैounds दो। इसके अतिरिक्त, चूहों में एक चमड़े के नीचे panniculus carnosus मांसपेशियों की उपस्थिति, दोनों संकुचन और कोलेजन गठन 3,4 द्वारा उपचार के लिए योगदान देता है। ये बहुत ही महत्वपूर्ण संरचनात्मक भेद चूहे इस्कीमिक त्वचा घाव मॉडल के विकास में विचार किया गया और विशिष्ट संशोधन घाव संकुचन कम होती है और panniculus carnosus पेशी 5 के प्रभाव को कम करने के लिए लागू किया गया।
मधुमेह पैर अल्सर, शिरापरक पैर अल्सर, और दबाव अल्सर में, चिकित्सा देरी हो रही है और इन घावों पुरानी माना जाता है। घाव घाव की मरम्मत 6 के अगले चरणों के लिए प्रगति से घाव को रोकता है जो अत्यधिक सूजन, की विशेषता है। एक पुराने घाव के विकास में मुख्य कारकों में से एक सूजन को स्पष्ट करने में असमर्थता के लिए योगदान दे स्थानीय ऊतक ischemia (कम रक्त प्रवाह) 5। इस मॉडल 2003-4 में (विकसित और मान्य किया जा रहा था, जिसके दौरान समय), घाव बिस्तर, सामान्य घाव भरने के दौरान एक महत्वपूर्ण चरण है और इस मॉडल 5 के विकास के लिए प्रेरणा में angiogenesis के शामिल होने का परीक्षण करने के लिए पर्याप्त ऊतक प्रदान कर सकता है कि कोई मानकीकृत पशु मॉडल थे। यही कारण है कि यहाँ प्रस्तुत मॉडल चेन एट अल द्वारा संशोधित रूप में इस्तेमाल किया मूल है Schwartz एट अल। 7 और बाद के द्वारा वर्णित इस्कीमिक घाव मॉडल के एक संशोधन है, ने कहा। 8
संशोधित इस्कीमिक घाव मॉडल में, परिवर्तन बल्कि epithelialization से संकुचन द्वारा उपचार के लिए नेतृत्व कि चूहे के उपर्युक्त शारीरिक विशेषताओं को नाकाम करने के लिए बनाया गया है: (1) दो पूर्ण मोटाई excisional घाव एक bipedicled पृष्ठीय त्वचा फ्लैप और भीतर पैदा कर रहे हैं panniculus carnosus पेशी सिर्फ मांसपेशियों प्रावरणी से ऊपर विदारक से बिस्तर घाव से निकाल दिया जाता है। (2) फ्लैप ही टी के मध्य में स्थित अधिक संकीर्ण रक्त की आपूर्ति अनियमित है कि यह सुनिश्चित करने आयाम, और घाव हैवह फ्लैप इस्कीमिक हैं। (3) एक सिलिकॉन चादर अंतर्निहित ऊतक से फ्लैप के readherence और reperfusion रोकने, फ्लैप के नीचे डाला जाता है। घाव संकुचन प्रस्तोता या सिलिकॉन चादर से 5 फ्लैप suturing द्वारा (सफाया नहीं) सीमित है।
मॉडल ने हाल ही में वृद्ध चूहों 11 बनाम युवा में इस्कीमिक घाव भरने के लिए 9,10 चिकित्सा इस्कीमिक घाव पर हाइपरबेरिक ऑक्सीजन प्रभाव से लेकर पढ़ाई में इस्तेमाल किया गया है और लंबे समय तक ऊतक ischemia के एक विश्वसनीय मॉडल साबित हो गया है। bipedicled फ्लैप के आयाम भी स्वाइन 12 और चूहों सहित और अन्य प्रजातियों, (3.0-3.5 सेमी चौड़ा द्वारा 10.5 सेमी लंबे) और F344 चूहों (2 सेमी चौड़ा द्वारा 11 सेमी लंबे) Sprague Dawley सहित विभिन्न चूहा उपभेदों के लिए अनुकूलित किया गया है 13,14। यह वीडियो इस्कीमिक त्वचा घाव मॉडल के प्रदर्शन में F344 जन्मजात चूहा तनाव का इस्तेमाल करता।
नीचे प्रस्तुत सभी पशु प्रक्रियाओं के लिए अनुमोदन प्राप्त थादक्षिण फ्लोरिडा के पशु की देखभाल समिति (IACUC) के विश्वविद्यालय से एड और पशु कल्याण अधिनियम और देखभाल के लिए गाइड और प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग की सभी आवश्यकताओं का पालन करना।
Protocol
Representative Results
Discussion
चूहों में घाव भरने कारण अक्सर संक्रमित घावों और interanimal परिवर्तनशीलता 5 की उच्च दर को चंगा करने की क्षमता के लिए बहस का विषय रहा है। अपने विकास के दौरान मॉडल के मूल लक्ष्यों में से एक इस बदलाव को कम कर?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors would like to acknowledge funding support from the University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).
Materials
| Name of Reagent/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Sil-Tec medical grade sheeting | Technical Products Inc. | 500-3 | nonreinforced, 0.01 inches in thickness |
| Mini Iris scissors, 8cm, curved, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Ethilon Nylon Sutures | Ethicon | 1964G | black, size 4.0, PC-3 16mm needles (3/8 circle) |
| Laser Doppler Imager | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | free download | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
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