Summary
Крыса, из-за его размера, доступности и достаточно послушный поведения, был использован в качестве модели исследования на протяжении многих лет. Цель этого протокола заключается в использовании крысу ишемического кожи модели заживления раны, чтобы обеспечить ценную информацию о патофизиологии хронических ран.
Abstract
Склонность к хронических ран у человека увеличивается с возрастом патологических состояний, таких как диабет и нарушения функции сердечно-сосудистой и беспросветной давление из-за неподвижности. Животные модели были разработаны, что попытка имитировать эти условия с целью углубления нашего понимания сложности хронических ран. Модель, описанная здесь, крыса ишемическая кожа лоскут модель, которая позволяет длительное снижение кровотока в результате ранений, которые становятся ишемическая и напоминают хронический раны фенотип (снижение васкуляризации, повышение воспаление и задержки заживления раны). Она состоит из bipedicled спинной створки с 2 ишемических ран, расположенных в центре и 2 неишемических ран латеральнее лоскута в качестве контрольной группы. Новым добавлением к этому ишемической модели кожного лоскута является размещение силиконового листа под клапаном, который функционирует как барьер и шину для предотвращения реваскуляризация и снизить усадку как заживление ран. Несмотря наОбсуждение на крысах для заживления ран обучение в связи с их совершенно разных анатомических и физиологических различий по сравнению с людьми (например, наличие panniculus carnosus мышцы, короткий жизненный период, увеличение числа волосяных фолликулов, и их способность исцелять инфицированных ран) модификации, используемые в этой модели сделать это полноценной альтернативой ранее разработанных ишемических моделях кожного лоскута.
Introduction
Эффективное развитие наркотиков и другими заживлении ран терапия требует необходимости в моделях естественных условиях, несмотря на известные проблемы в переводе выводы на животных моделях для человека терапии 1. Далее следует описание подробный протокол для использования крысиной модели ишемического кожи заживление ран, чтобы исследовать механизмы, которые в дальнейшем понимание патологического заживления ран. Виды крыса, часто используемые из-за его широкой доступности, размера и покладистый характер используется для заживления ран исследований, так как достаточно большой, чтобы обеспечить подходящую поверхность кожи для разреза и эксцизионная ранения, изображений и коллекции тканей 2. Однако следует принимать во тщательного рассмотрения, что кожа крысы и человека отличаются анатомически, с крысы именуются сыпучих кожей животных. Эта отличительная характеристика позволяет контракции раны, а не эпителизации внести значительный вклад в закрытие кожи крыс шounds 2. Кроме того, наличие подкожной panniculus carnosus мышцы у крыс, способствует заживлению путем сжатия как и коллагена формирования 3,4. Эти очень важные анатомические различия были рассмотрены в развитии ишемии у крыс модели кожной раны, и были осуществлены определенные модификации, чтобы снизить сжатие раны и уменьшить влияние panniculus carnosus мышцы 5.
В диабетических язв стопы, трофических язв и пролежней, лечение затягивается, и эти раны считается хроническим. Раны характеризуются чрезмерной воспаление, которое предотвращает рану от прогрессирующих до следующих этапах заживления ран 6. Одним из главных факторов в развитии хронической раны локализован ишемии тканей (снижение кровотока) 5 вклад в неспособности очистить воспаление. В то время, в течение которого эта модель в настоящее время разработаны и утверждены (в 2003-4), Не было никаких стандартизированных моделей животных, которые могли бы обеспечить достаточно ткани, чтобы проверить индукции ангиогенеза в ране, ключевой этап в процессе нормального заживления раны и мотивации для разработки этой модели 5. Тем не менее, представленная здесь модель является модификацией модели ишемии раневой первоначально описанной Шварц и др. 7 и затем использовали в модифицированном виде Ченом и др. 8
В модифицированной ишемической модели раны, были внесены изменения, чтобы обойти вышеуказанные анатомические характеристики крысы, которые приводят к заживлению сжатием, а не эпителизации: (1) Два полных толщины эксцизионная раны создаются в bipedicled клапаном спинной кожи и panniculus carnosus мышцу удал ют из раны кровати рассечения чуть выше мышечной фасции. (2) сам клапан имеет более узкие размеры, гарантируя, что кровоснабжение является случайным и раны, расположенные в середине тон заслонки ишемическая. (3) силиконовые лист вставлен под клапаном, предотвращая readherence и реперфузии заслонки от основной ткани. Сокращение раны ограничено (и не устранены) крепления или ушивание лоскута силиконовый лист 5.
Модель недавно использовалась в исследованиях, начиная от гипербарической эффектов кислорода на ишемической заживления ран 9,10 ишемической заживления ран у молодых против старых крыс 11 и оказалась надежная модель длительного ишемии тканей. Размеры bipedicled заслонки были также адаптированы к различным линий крыс, в том числе Sprague Dawley (длиной 11 см и 2 см в ширину) и F344 крыс (длинный 10,5 см и 3,0-3,5 см шириной) и другие виды, в том числе свиней 12 и мышей 13,14. Это видео использует F344 инбредных крыс напряжение в демонстрации ишемической модели кожной раны.
Утверждение для всех процедур животных, представленных ниже, был получитьред из Университета комитета Южной Флориды Уход за животными (IACUC) и соблюдать все требования Закона об охране животных и Руководство по уходу и использованию лабораторных животных.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
ПРИМЕЧАНИЕ: Утверждение для всех процедур животных, представленных ниже, была получена из Университета комитета Южной Флориды Уход за животными (IACUC) и соблюдать все требования Закона об охране животных и Руководство по уходу и использованию лабораторных животных.
1. Подготовка силиконовые листы и хирургические инструменты
- Каркасные полосы (10,5 см х 3,0 см), не усиленный 0,01 толщину, медицинского силикона простыни и стерилизовать в автоклаве.
- Очистите и стерилизовать подходящие хирургические инструменты (ножницы, щипцы и шторы или полотенца, чтобы создать стерильное поле во время операции).
2. Экспериментальные животные
- Используйте для взрослых самок и самцов крыс весом в диапазоне от 250-350 г полученного от коммерческого селекционера. Если в возрасте крыс используются, они должны быть ≥350 г в целях обеспечения лучшей выживаемости после операции. Перед началом каких-либо экспериментов акклиматизироваться всех животных, по крайней мере,7 дней в стандартных условиях 12 ч свет-темнота цикла с пищей и водой вволю.
3. Анестезия, Pre-оперативная Обезболивание и оперативной подготовки
- Общей анестезии с использованием изофлуран на уровне 3% -4% с помощью индукционной камеры и поддерживать (через использование носового конуса) на 1% -2% с O 2 при подготовке кожи и хирургии. Мониторинг глубины анестезии при наблюдении частоты и глубины дыхания, межпальцевых травмировать или глазной мерцания рефлекса.
Примечание: В это время, ветеринар мази могут быть размещены на глаз, чтобы предотвратить сухость в то время как животное находится под анестезией. - В месте, удаленном от стерильной хирургической области, поместите крысы в положении лежа и брить спинки с садовыми ножницами из основания шеи вниз примерно 11 см. Трафарет с перманентным маркером, план для 3,0 см х 10,5 см клапаном (рис 1а).
- Перемещение крысы чистой, назначенного surgicaл зона с утвержденным грелку и стерильных хирургических салфеток или полотенца. Подайте 5 мг / кг Кетопрофен подкожно до первых хирургических разрезов для лечения боли. Дополнительные жидкости (физиологический раствор) могут быть предоставлены (до 5 см), подкожно, как это необходимо.
- Подготовьте кожу дополнительно моечные сначала 70% изопропилового спирта и второй с 0,2% хлоргексидина, а затем применить стерильные шторы, чтобы создать стерильное поле. 10% повидон-йод (Бетадин) также может быть использован.
Примечание: антибиотиками (ампициллин в количестве 15 мг / кг) можно вводить подкожно, но если используются хорошие асептические методики не требуется.
4. Создание Эксцизионная раны и Bipedicled Flap
- С помощью стерильной, одноразовые 6 мм инструмент биопсии удар, создают две круговые "ишемические" раны в центре обозначенной области закрылка (Фиг.1В). Глубина раны должны быть до (не до конца) основной фасция panniculus КарноSUS мышцы (рис 1B вставка).
- Использование щипцов поднять кожу в середине контура раны, создаваемого пункционную биопсию, а затем использовать диафрагмы ножницы (с изогнутыми наконечниками) для вырезания круговой кусок ткани (в том числе panniculus carnosus мышцы). Результатом будет полный Толщина намотаны с панелью в качестве основания раны.
Примечание: Иссеченную ткани (раневые заглушки) могут быть быстро замораживали в жидком азоте или фиксировали в 10% забуференном формалине-O / N для последующей обработки в качестве контроля, нормальной кожи. - Создание bipedicled клапан, делая надрезы со стерильным скальпелем с каждой стороны ишемических ран вдоль предварительно обращено линий (рис 1c), которые 10,5 см в длину и 3,0 см друг от друга. Глубина надрезов должна быть до paraspinous мышц. Использование диафрагмы ножницами, отделить panniculus carnosus панель из paraspinous мышц, будьте осторожны, чтобы фасции нетронутыми, как "база" ММ ударов 6 (Figure 1D).
- Принимать по 1 стерильный силиконовый лист нарезанные и поместите его между panniculus carnosus фасции и paraspinous мышц (рис 1E) обеспечение того, лист не пряжки или сбросить карты. Использование черной, не рассасывающиеся нити (размер 4,0) закрыть оба разрезы анкерными силиконовый лист на кожу, по меньшей мере 8 прерванных стежков на каждой стороне, вдоль длины крылышка (фиг 1F и 1G).
- С помощью стерильной, одноразовые биопсии инструмент удар, создают две внутреннего контроля "не-ишемические" раны (вплоть до передней фасции panniculus carnosus мышцы) 1 см латеральнее ишемических ран по обе стороны от клапана (фиг 1G).
- Поместите линейку ниже раны и делать цифровые фотографии для заживления целей измерения (рис 3а). В это время, кровотока (перфузии) можно контролировать с помощью лазерного доплеровского или других манипуляций (местное размещения препарат), выполненных.
- Применить утвержденный жидким клеем и краниально и каудально к ранам и прозрачная пленка одеваться, чтобы сохранить окружающую среду раны влажные, чистые (стерильный). Дополнительным туалетный могут быть размещены на хвостовом конце клапана, чтобы предотвратить животное от удаления наиболее хвостовые швов.
5. Послеоперационные процедуры
- Поместите животных в клетках (по отдельности размещены), оснащенных мелких питателей, чтобы предотвратить хирургическую сайт от трения против подачи. Животные не должны оставаться без присмотра или вернулся в компанию других животных, пока они не восстановить достаточный сознание, чтобы сохранить грудины лежачее положение и выставлять целенаправленное движение. Нагревательные маты должны быть помещены под половине клетки до 2 дней, в течение восстановления.
- Для управления боль после операции, управлять кетопрофен (5 мг / кг) подкожно животных следующее утро и 1 раз в день в течение до 48 ч после операции. Животные тоже должны контролироваться ежедневно в течениедлительные признаки боли, потеря веса или хирургических инфекций.
6. Последующие измерения раны и Отделочные Изменения
- Измерьте ишемических и неишемические раны часто под общим наркозом с использованием изофлуран на уровне 3% -4% с помощью индукционной камеры и поддерживается (с помощью носового конуса) на 1% -2% с O 2, как в шаге 3.1.
- Снимите повязку мягко, чтобы не тянуть клея от кожи. В это время дополнительные цифровые фотографии взяты для измерения раны, актуальные лечения вновь применен, лазерная допплеровская томография (МИГ) и другие манипуляции, выполняемые в соответствии с потребностями следователя.
- Нанесите клей и чистой повязки и позволяют животному восстановить, как в шаге 5.1.
7. рана Сбор и Эвтаназия
- Урожай ишемических и неишемические раны (в дни следователь сочтет это целесообразным), а животное находится под общей анестезией изофлуран на уровне 3% -4% через Indед ен ие камера и поддерживается (с помощью носового конуса) на 1% -2% с O 2, как в шаге 3.1.
- Использование скальпеля, сделать квадратной формы иссечение вокруг раны, чтобы включить некоторые здоровые ткани вокруг раны. Поместите иссечение в 1,5 мл оснастки колпачок трубки и оснастки замораживание в жидком азоте (хранить при -80 ° С) для последующего анализа или молекулярного инкубировать в 10% забуференном формалине O / N при комнатной температуре в течение гистологической обработки.
ПРИМЕЧАНИЕ: раны иссечения также могут быть снижены в два раза, чтобы обеспечить больше образцов для анализа. - После заживления удаления ткани, усыпить животное с использованием утвержденной метод CO 2 ингаляции.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Протокол крыса ишемическая модели заживления раны занимает приблизительно 20 мин на одно животное, если оно проводится эффективно. Перед нанесением соус модели должны появиться как показано на рисунке 1G. Важно, чтобы убедиться, что bipedicled заслонки и раны в нем ишемическая. Подкожное напряжение кислорода (ИКГП 2) на уровне ран был измерен во время проверки этой модели 5, помещая полярографическое электрод в подкожной клетчатке между двумя ишемических ран. ИКГП 2 значения были в критическом ишемической диапазоне (20-40 мм рт.ст.). Так как развитие этой модели использование LDI все чаще используется для измерения перфузии крови, и этот метод даст адекватную информацию о ишемической состояния bipedicled лоскута.
Вкратце, методика ЛДИ основан на излучении пучка лазерного излучения осуществляется с помощью волоконно-оптического зонда. MeasuriГлубина нг зависит от свойств тканей и длины волны лазерного излучения. В нормальной коже, прибор с зондом со стандартным разделением волокон (0,25 мм) и длиной волны лазера 780 нм, измерение глубины будет составлять порядка 0,5-1 мм. Представитель Доплера изображение (слева) на спинной bipedicled клапаном, показывая как в перфузированной область (слева от линии шва) и не-перфузии область (справа от линии шва) показана на рисунке 2.
В дополнение к измерению подкожной напряжение кислорода, можно также использовать зонды или общих биохимических маркеров, чтобы установить, что раны в лоскуте ишемическая. PECAM-1 или CD31 обычно находится на сосудистых эндотелиальных клеток маркер для нового образования сосудов в ранах. Различные маркеры для активных форм кислорода, найденных быть повышен при ишемических ран, являются коммерчески доступными часто, как люминесцентные меченных антител или показатели супероксид, таких как dihydroethidium (DHE).
WounD измерения площади для отслеживания закрытия раны могут быть представлены в различных формах. Как правило, раневой зоны количественно с цифровыми изображениями ран За время курса исцеления 11, используя формулу, например, (6 мм Площадь пункционная биопсия = (π) R 2 = 3,14 х 9 = 28,26 мм 2 в день 0), с данными представлены в процентах от первоначальной площади ран или раневой поверхности на определенный день может быть количественно, как в Gould и соавт. 5 Для целей этой демонстрации, наматывают прогрессирование окончания представлена как процент от исходной области раны в течение времени течение 28 дней , Использование свободного программного обеспечения ImageJ, цифровое изображение открывается и масштаб задается с помощью 10 мм на линейке в изображение (Рисунок 3А). Линия, проведенная 10 мм в длину приравнивается к количества пикселей (вставка на фиг.3А), которые могут быть преобразованы в блок выбора, и в этом случае (мм). Далее, окружность раны прослеживается на изображении (3В) и один раз команда мера задается, площадь представлен в мм (вставка на рис 3B). Данные могут быть представлены в виде процента от начальной области раны на оси ординат и дней на оси абсцисс (рис 3C).
Рисунок 1. Фотографии, изображающие действия во время операции, чтобы создать ишемические раны, в bipedicled крыльями, и неишемические раны. () Pre-хирургическое удаление волос и подготовка кожи под наркозом крысы приемном предварительно хирургического дозу обезболивающего (кетопрофен) подкожно для лечения боли. (B и вставка) Ишемический раны создаются внутри 2 разреза маркеров, используя стерильный удар биопсии инструмент. (C) Разрезы сделаны вдоль отмеченных линий до paraspinous мышцы и (г) bipedicled лоскут поднимаетсяпоказать разделение лоскута (с panniculus carnosus фасции нетронутыми) от мышечного слоя ниже. (E) лист стерильный силикон (черная стрелка) находится между фасцией panniculus carnosus и paraspinous мышцы. (F) черной, не рассасывающиеся швы (размер 4,0) закрыть оба разрезы, привязывая силиконовый лист на кожу с несколькими прервал стежки вдоль створки (G). Два неишемические раны (черные стрелки) создаются с помощью стерильного пункционная биопсия инструмента сбоку от bipedicled клапаном с обеих сторон. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой цифры.
Рисунок 2. Представитель лазерный доплеровский изображения перфузии крови после операции. Право панэль показывает черно-белое изображение 2 ишемических ран (черные стрелки) в середине bipedicled клапаном и 1 неишемической раны (одной черной стрелкой) боковых клапанами, к. Шов линия была выделена белым. Левая панель показывает Доплера образ том же районе, изображенной на правой панели. Районы с более яркими цветами более перфузии, чем районах с темно-синим цветом. Это различие в перфузии между не-ишемической области (слева) и в зоне ишемии (справа) ясно и может следовать вдоль всей длины шва. Обратите внимание, что раны на обоих боках появляются яркие, как клетки крови по-прежнему присутствуют в какой-то степени. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой цифры.
Рисунок 3. Измерение раны и представление данных. () Цифровые фотографии, изображающие раны измерения площади с помощью программного обеспечения (ImageJ), преобразование пикселей (мм) (черные стрелки) и метод для захвата точной окружности (один черная стрелка) раны (B). Статистические данные (среднее ± SEM из раневых участков на данный день) может быть представлена как процент от исходной области раны (день 0) на оси ординат и дней на оси х (С). Данные линии графике приведены анализировали с использованием 2-полосная ANOVA тест с несколькими сравнений Сидаке, в *** представляет значительно выше (р = 0,0004) по сравнению с не-ишемической в тот же момент времени (10 дней), N = 8 ран на группу. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой цифры.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Заживление ран у крыс часто предметом обсуждения в связи с их способностью исцелять инфицированных ран и высокий уровень interanimal изменчивости 5. Один из первоначальных целей моделью во время его разработки было уменьшить этот вариант. Изменения в ширину створки, уменьшая количество ран с конкретного расположения (в центре на клапане с последовательным черепно-хвостовой месте) и введения силиконовый лист добился этой цели. Заживление ран путем сжатия также уменьшается, и заживление путем эпителизации, как и у людей, является результатом измеренное. Адаптация модели к другим штаммом крысы, т.е. F344, также оказались успешными и воспроизводит степень ишемии, наблюдаемые с помощью Спрэг Dawley крыс. В целом хирургические методы (биопсию, ушивание и попал иссечение), необходимые для этой модели легко усваиваются большинством учащихся и техников с ограниченной хирургического опыта.
_content "> Для достижения соответствия с этой модели при выполнении нескольких операций, было обнаружено, что очень важно для создания ишемические раны до высоты клапана для размещения силиконового листа 5. Кроме того, не пробивать через panniculus carnosus фасции имеет решающее значение для обеспечить жизнеспособные ране, чтобы оставаться на силикона. силикон действует не только для предотвращения сосудистых отрастания, но и как "шины", которая поощряет раны реэпителизацию. Применение клея и перевязочные материалы, чтобы предотвратить инфекцию и поддерживать влажную среду для заживление ран, также важно. Выбор изделия что это может быть предпочтительным или использоваться в животных объекта исследователя. Тем не менее, это не редкость для некоторых животных, чтобы иметь возможность для удаления их перевязки, независимо от того, какой тип клея / туалетный комбинация используемый.Bipedicled клапан должен оставаться жизнеспособными в течение всего времени ходе лечения, которое является приближенным Ly 28 дней, в зависимости от штамма крыс и других сопутствующих заболеваний присутствует. Редко, абсцессы могут образовывать в карман (в частности, в районе швов) и сером могут образовывать под крышкой. Жидкость может быть удалена и антибиотики вводят в случае необходимости. Однако, если клапан теряет жизнеспособность и становится некротической рекомендуется, что животное больше не используется. Рана иссечение для биохимического анализа делает ввести изменчивость в силу (1) некоторые нормальная ткань должна быть сохранена для поддержки (2) выбор тканей гомогенизации и подготовки к изоляции РНК, ДНК или белка и (3), присущего interanimal изменчивости 5,10, 11. Можно рассмотреть этот последний пункт ограничение на модели, и было обнаружено, что уменьшение размера лоскута (<2,0 см) или травмы закрылка может вызвать некроз, указывая, что незначительные вариации таких факторов, как уровень температуры или стресса, также может привести биохимически обнаружены различия между образцами рану от одной крысы в другую 5.
ve_content "> Таким образом, эта модель, с продольной, bipedicled заслонки в диапазоне от 2,0-3,0 см в ширину и удобно размещается силиконовый лист, является надежная модель длительного ишемии тканей. После того, как пользователь умеют использовать методы, чтобы создать в соответствии ишемическая рана, они должны быть в состоянии адаптировать его к дополнительным возрастов и видов грызунов (мышей в комплекте). В эксцизионная раны можно лечить местно, или системного лечения, используемых для дальнейшего изучения механизма (ов), участвующих в формировании хронической раны, усугубляется воспалительные реакции, отклоняющееся ангиогенез и задержки заживления раны.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sil-Tec medical grade sheeting | Technical Products Inc. | 500-3 | nonreinforced, 0.01 inches in thickness |
| Mini Iris scissors, 8 cm, curved, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Ethilon Nylon Sutures | Ethicon | 1964G | black, size 4.0, PC-3 16 mm needles (3/8 circle) |
| Laser Doppler Imager | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | free download | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
References
- Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).
- Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound healing: a review. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).
- Davidson, J. M. Animal models for wound repair. Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).
- Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue). Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).
- Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. Optimization and validation of an ischemic wound model. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).
- Loots, M. A., et al. Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds. The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).
- Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds. Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).
- Chen, C., et al. Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds. Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).
- Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model. The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).
- Zhang, Q., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism. The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).
- Moor, A. N., et al. Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure. Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).
- Roy, S., et al. Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound). Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).
- Biswas, S., et al. Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).
- Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model. Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).
