Bir BSL-4 laboratuvarında viral testler yapmak, gerekli ek güvenlik önlemleri nedeniyle bir BSL-2 laboratuvarındaki çalışmalara kıyasla daha karmaşıktır. Burada, uygun Sınıf II biyogüvenlik kabini kullanımını, atık yönetimini/bertarafını ve numune kaldırmayı gösteren bir BSL-4 laboratuvarında kullanılan uygulama ve prosedürlere genel bir bakış sunuyoruz.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
bir (A) Güvenlik Önlemleri ve Çalışma Usul BSL-4 Laboratuvar: 2. Genel Uygulamalar
Bu makalede
Düzeltme bildirimi
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
Özet
Özet
bir biyogüvenlik düzeyi 4 (BSL-4) çevreleme laboratuvarda çalışma zamanı ve detay için büyük dikkat gerektirir. olmayan yüksek sonucu patojenler ile bir BSL-2 laboratuvarda yapılır aynı iş BSL-4 ortamda önemli ölçüde daha uzun sürer. Bu artan zaman gereksinimi nedeniyle laboratuvar kaynaklı enfeksiyonlar, olası kontaminasyon çalışma ortamı ve yüksek sonucu patojenlerin olası sürümünden yerel halktan araştırmacı korumayı amaçlayan faktörlerin çok sayıda etmektir. laboratuvar içinde, hareket zorunlu tam vücut emniyet elbise bağlı hava hortumları nedeniyle sınırlıdır. Buna ek olarak, Sınıf II biyogüvenlik kabinleri (BSC) kaldırılır her öğenin dezenfeksiyon gereklidir. Laboratuvar uzmanları BSL-4 laboratuvar uygulamaları konusunda eğitilmelidir ve performans becerileri yüksek yeterliliğini göstermek gerekir. Bu yazının amacı, uygun prosedürleri ve laboratuvar b sağlamak için teknikleri ana hatlarıyla ortaya koymaktırörnek prosedür olarak, standart bir virütik plak deneyi kullanılarak iosafety ve deneysel doğruluk. Bir Deney görsel üzerinde durulacaktır Özellikle, uygun teknikler BSL-4 ortamında güvenli çalışma. Bu teknikler şunlardır: deneyler, uygun çalışma bitmiş Sınıf II BSC temizliği, atık yönetimi ve BSL-4 laboratuvar içinde oluşturulan atıkların güvenli bertaraf ve BSL içinden inaktive numunelerin çıkarılması için bir Sınıf II BSC kurma BSL-2 laboratuara 4 laboratuvar.
Giriş
Yüksek sonucu patojenleri ele laboratuvar personelinin güvenliği (enfeksiyon propilaksisler ne tedavi seçenekleri mevcuttur) her şeyden olduğu gibi Sağlık ve İnsan Hizmetleri Departmanı biyomedikal patojen ile çalışma güvenli yürütülmesi için tesis yapımı için kurallar ve en iyi uygulamaları kurmuştur biyogüvenlik perspektifinden 1 klinik laboratuvarlar. mevzuat ve düzenleme sayesinde, uygulamaları ve prosedürleri çok bu patojenlerin ile çalışmak için uyulması gereken zorunlu gereklilikler haline gelmiştir. ABD, kolayca insandan insana aktarılan patojenlerin, yüksek vaka-ölüm oranları neden ve / veya önemli bir halk sağlığı etkisi ve biyoterörizm potansiye....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
1. Laboratuvar Girişi
- Önce BSL-4 laboratuvara girmeden deney (örneğin, hücreler, medya ve sarf malzemeleri) için bir BSL-2 laboratuvar tüm malzemeleri toplayın.
- (Referans 7 ayrıntılı olarak belirtilen) BSL-4 girişi işlemini tamamlayın.
BSL-4 Laboratuvarı Sınıf II Biyogüvenlik Kurulu 2. Hazırlık
- Bir kez BSL-4 laboratuvar içinde tamamlanmıştır günlük iç kontrol listesini (Şekil 1) emin olun. Kontrol listesi önceden doldurulması ve virüsler kullanılacak olan işaret edilmemiş ise kontrol listesini doldurun. Kontrol listesi tamamlanmış ise, isim eklemek ve hangi virüs l....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
BSL-4 laboratuvar içinde uygun prosedürler izlenerek testlerin güvenli ve etkili tamamlanmasını sağlamak için kritik öneme sahiptir. Tamamlanan günlük iç kontrol listesi (Şekil 1) atıfta bulunarak, laboratuvar personeli bu ekipman tam olarak faaliyete olduğundan emin olun. BSC merkezinde uygun vücut pozisyonu deney optimum hava akış koşulları (Şekil 2) altında gerçekleştirilir sağlar. Virüs Örnek seri plaka başına 30-300 plaklar (Şekil 3A)
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
BSL-4 laboratuvarda çalışma önemli bir zaman ve detaylara ek dikkat gerektirir. Bu ortamda çalışmanın herhangi bir tür iyi kapsamlı, eğitimli ve vicdani bireyler gerektirir. Tahlil laboratuar çalışanları eğitilmelidir hangi birkaç önemli kavramları karıştırmak gibi standart viral plak deneyi, BSL-4 laboratuvarda yüksek sonucu patojenler ile çalışmak için ortak bir prosedürün doğru bir model sağlar.
İlk büyük konsept yüksek sonucu patojenler için birincil çevreleme olarak işlev Sınıf II BSC, .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu yayının içeriği, ABD Sağlık ve İnsan Hizmetleri Bakanlığı'nın (DHHS) veya yazarlara bağlı kurum ve şirketlerin görüşlerini veya politikalarını yansıtmak zorunda değildir. Bu çalışma kısmen, Battelle Memorial Enstitüsü'nün ABD Ulusal Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Enstitüsü (NIAID) ile Sözleşme No. kapsamında yaptığı ana sözleşme aracılığıyla finanse edildi. HHSN272200700016I. M.R.H., D.P., L.B., K.J. ve J.W. bu işi Battelle Memorial Enstitüsü'nün çalışanları olarak gerçekleştirdiler. Bu işi yapan Battelle Memorial Enstitüsü'nün alt yüklenicileri şunlardır: MRI Global'in bir çalışanı olarak S.M.; Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.'in bir çalışanı olarak M....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Micro-Chem Plus | Ulusal Kimya Laboratuvarları | 255 | |
| Etanol | Fisher | BP2818500 | |
| 2 ml 96 Derin Kuyu Plakaları | Fisher | 278743 | |
| 10 ml Serolojik Pipet | Fisher | 13-678-11E | |
| 25 ml Serolojik Pipet | Fisher | 13-678-11 | |
| 6 oyuklu plakalar | Fisher | ||
| Kristal Menekşe | Sigma | HT90132-1L | |
| % 10 Nötr Tamponlu Formalin | Fisher | 22-050-105 | |
| Tragacanth | Fisher | 50-702-2000 | |
| 20 μ l Pipet | Uçları Fisher | 21-402-550 | |
| 200 μ l Pipet | Uçları Fisher | 21-402-561 | |
| 1.000 μ l Pipet Uçları | Fisher | 21-402-581 | |
| DMEM | Lonza | 12-604Q | |
| FBS | Sigma | F2442-500mL | |
| Penisilin / Streptomisin | Lonza | 17-602E | |
| 2x EMEM | Kalite Biyolojik | 115-073-101 | |
| Pipetleyici | Drummond | 4-000-101 | |
| 1.000 &; l Pipet ve nbsp; | Yağmur | L-1000XLS+ | |
| 200 μ l Pipet ve nbsp; | Yağmur | L-200XLS+ | |
| 12-kuyulu, çok kanallı 200 μ l Pipetleyici | Rainin | L12-200XLS + | |
| 8-Kuyulu, Çok Kanallı 1.000 & mu; l Pipetleyici | Rainin | LA8-1200XLS | |
| Ekspres Tıbbi | Malzemeleri Doğrula | ||
| Otoklav | Getinge | GEB 2404 AMB-2 | |
| Otoklav Torbası | Fisher | 01-828E | |
| 2.000 ml Beher | Fisher | 02-591-10H | |
| Otoklav Tepsisi | Fisher | 13-359-20B | |
| Pipet | Tepsisi Fisher | 13-361-5 | |
| 37 &derece; C Kuluçka | Makinesi Fisher | WU-39321-00 | |
| Biohazard Can | Rubbermaid Ticari | FG614500 KIRMIZI | |
| Otoklav Bandı | Fisher | 15-903 | |
| IRF Tesisi Tarafından Yapılan | Otoklav Çubuğu | N/A | |
| Light Box | Fisher | S11552 | |
| Isı Mühürleyen | Fisher | NC9793612 | |
| Isı Yalıtım Torbaları | Fisher | 01-812-25H | |
| Biyolojik Tehlike Çantası | Fisher | 01-828E |
Kaynaklar
- Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. 5th edn. Chosewood, L. C., Wilson, D. E. , , U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. Available from: http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/ (2009).
- Bioterrorism agents/diseases by category. , Centers for Disease Control and Prevention. Atlanta, GA, USA. Available from: http://emergency.cdc.gov/agent/agentlist-category.asp (2014).
- Executive order 13546 -- Optimizing the security of Biologi....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
Düzeltme
Formal Correction: Erratum: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices
Posted by JoVE Editors on 12/05/2016. Citeable Link.
A correction was made to the authors section in: Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 2. General Practices
One of the authors names was corrected from:
Nicole Joselyn
to:
Nicole Josleyn
