Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

מיקום כירורגי של קטטרים לטווח ארוך בדיקת תרגיל לב וכלי דם ב חזירים

Published: February 9, 2016 doi: 10.3791/53772
* These authors contributed equally

Abstract

פרוטוקול זה מתאר את ההליך כירורגי כדי חזירי מכשיר כרוניים ההליך לממש חזירים על הליכון מונע במנוע. תפקוד לב-ריאה מוקדם קשה לאבחן, במיוחד במודלים של בעלי חיים, כמו פונקצית לב-ריאה לעתים קרובות נמדדת פולשני, בהרדמה. כסוכני הרדמה רבים הם cardiodepressive, שינויים קלים בתפקוד לב וכלי דם עשויים להיות רעול פנים. לעומת זאת, מכשור כרוני מאפשר למדידת תפקוד לב-ריאה במדינה הערה, כך מדידות ניתן להשיג בתנאי מנוחה שקטים, ללא תופעות של הרדמת טראומה כירורגית חריפה. יתר על כן, כאשר חיות מאומנות כראוי, מדידות ניתן להשיג במהלך פעילות גופנית על הליכון מדורג.

בדיקות זרימה ממוקמות סביב האאורטה או בעורק הריאה למדידת תפוקת הלב ומסביב הקדמי העורק הכלילי השמאלי היורד למדידת קורוןזרימת דם האר"י. צנתרים מלאות נוזל מושתלים אבי העורקים, עורק הריאה, אטריום שמאל, החדר השמאלי ואת החדר הימני למדידת לחץ ובדיקות דם. בנוסף, קטטר 20 G ממוקם בתוך וריד interventricular הקדמי כדי לאפשר דגימת דם ורידים כלילית.

אחרי שבוע של התאוששות, חזירים מונחים על הליכון מונע במנוע, את הצנתרים מחוברים מטרים לחץ וזרימה, וחזירים חשופים פרוטוקול תרגיל המתקדם חמישה שלבים, כאשר בכל השלב שנמשך 3 דקות. אותות המודינמי נרשמים ברציפויות דגימות דם נלקחות במהלך 30 השניות האחרונות של כל שלב מימוש.

היתרון העיקרי של לימוד חיות מאובזרות כרוני הוא שהיא מאפשר הערכת סדרה של תפקוד לב-ריאה, לא רק במנוחה, אלא גם במהלך מאמץ פיזי כמו התעמלות. יתר על כן, פונקצית לב-ריאה ניתן להעריך שוב ושוב במהלך התפתחות מחלהnd במהלך טיפול כרוני, ובכך להגדיל כוח סטטיסטי ולכן להגביל את מספר בעלי החיים הדרושים למחקר.

Introduction

פונקצית לב-ריאה נאותה חיונית כדי לספק את הגוף עם חמצן וחומרים מזינים, במיוחד במהלך תנאי ביקוש מטבולית מוגבר כגון במהלך תרגיל 1. התגובה לב-ריאה לתרגיל מאופיין במספר עיבודים בתפקוד הלב, כלומר., עלייה בקצב הלב, נפח contractility ושבץ, ותפקוד כלי הדם, כלומר, התרחבות בערוגות וסקולרית באספקת לשרירים כמו גם ב ריאתי כלי דם, ועל vasoconstriction בערוגות וסקולרית לספק את מערכת עיכול וכן 1 שרירים פעילים. יכולת הגופנית פגומה היא סימן היכר מוקדם של תפקוד לב-ריאה, ובדיקה גופנית לב-ריאה משמשת כשיטה יעילה להתוות בין תפקוד לקוי של לב, תפקוד כלי דם ו / או תפקוד לקוי ריאתי בחולים עם קיבולת 2 תרגיל פגום. תפקוד לב-ריאה מוקדם דifficult לאבחן, במיוחד במודלים של בעלי חיים, כמו פונקצית לב-ריאה לעתים קרובות נמדדת פולשני, בהרדמה, בחומרי הרדמה רבים בעלי תכונות cardiodepressive 3.

מכשור כרוני מאפשר למדידת תפקוד לב-ריאה במדינה הערה, וכאשר החיות מותאמות באופן מלא את מידות בתנאי המעבדה ניתן להשיג בתנאי מנוחה שקטים ללא תופעות של הרדמת טראומה כירורגית חריפה. יתר על כן, כאשר חיות מאומנים כראוי, מדידות ניתן להשיג במהלך פעילות גופנית על הליכון מדורגת 4,5. באופן ספציפי יותר, עזב ותפקוד החדר הימני ניתן להעריך הקשורים זלוף שריר הלב, בעוד הסדרת הטון וזומוטוריים ב בזרימת הדם הכליליים, מערכתיות ריאתי ניתן לקבוע. שימוש צנתרים מלאים נוזלות מאפשר מדידה לחץ, כמו גם דגימות דם שנטל ללא הטלת מודעהמתח ditional על החיות. יתרון נוסף של לימוד חיות מאובזרות כרוני הוא בדיקת מאמץ לב-ריאה ניתן לחזור המאפשרות שימוש של חית כשליטה משלה, או במהלך התפתחות מחלה או במהלך טיפול כרוני, ובכך להגדיל כוח סטטיסטי ולכן להגביל את מספר בעלי החיים הנדרשים מחקר .

האנטומיה לב-ריאה של חזירים דומה לזו של בני אדם ולא מן הנמנע לגרום צורות שונות של מחל לב-ריאה, כגון סוכרת 6, אוטם שריר לב 7, יתר לחץ דם ריאתי 8,9 ואי ספיקת לב הנגרמת צעדה 10,11. יתר על כן, את הגודל של חזירים מאפשר מכשור כרוני, ובדיקות דם חוזרות ונשנות של כמות מספקת כדי לנתח לא רק גזים בדם, אלא גם לבצע מדידות neurohumoral ו / או לחפש סמנים של מחלה.

פרוטוקול זה מתאר את הניתוח משמש chronicalחזירי מכשיר ly וכן הפרוטוקול למימוש החזירים על הליכון ממונע.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

הנהלים הקשורים בנושאים בעלי חיים אושרו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים בבית ארסמוס המרכז הרפואי רוטרדם (NL). חזירים עם משקולות בין 6 ל 80 קילו כבר מאובזרים בהצלחה באמצעות פרוטוקול זה.

1. הסתגלות של בעלי החיים כדי טיפול אנוש

  1. לאחר ההגעה במתקן, לשכן את החיות solitarily אבל לאפשר להם לתקשר אחד עם השני.
  2. Accustomize החזירים טיפול ותחבורה אדם ממתקן חיה למעבדה ניסיונית, על ידי טיפול בבעלי חיים לפחות פעם ביום למשך שבוע.
  3. לאמן את החיות כראוי לניסויים פעילות גופנית על הליכון מונע במנוע ידי פעילות גופנית אותם על הליכון למשך תקופה מינימלית של שלוש פעמים לפני הניתוח.
  4. בעלי חיים צריכים להיות צם O / N לפני הניתוח, כדי למנוע בחילות, הקאות השאיפה פוטנציאל ובכך נוזלים בבטן.

2. הכנה לכירורגיה

  1. הַרגָעָה
    1. הכן תרופות הרגעה בתוך מזרק 10 מ"ל. Premedication מורכב tiletamine / zolazepam (5 מ"ג / ק"ג), xylazine, (2.25 מ"ג / ק"ג) ו אטרופין (1 מ"ג).
    2. להזריק את לשריר תרופות בשריר הטרפז עם מחט '19 G 1.5' להרדים את החזיר.
    3. המתן כ 10 דקות ולבדוק להרפיית שרירים ואובדן הכרה לאשר רמה מתאימה ויציבה של הרגעה.
    4. מניח קטטר בטיחות היקפית 20 G ב וריד אוזן העירוי לווריד הבא של הרדמה ו / או נוזלים.
  2. אינטובציה אוורור
    1. מניח את החיה על השולחן ו / או עגלה במצב שכיבה.
    2. פתח את הפה של חיה עם מפזר אוראלי.
    3. במקרה של הרפיה מספקת של הלסתות או נוכחות של בליעה רפלקסים, אשר לעכב אינטובציה, לנהל thiopental (10 מ"ג / ק"ג) לווריד דרך צנתר וריד האוזן. לחלופין, חזיר יכול להיות רעול פניםעם isoflurane להשרות הרגעה.
    4. השתמש לרינגוסקופ קונבנציונלי עם אור ולהב מילר לאפשר laryngoscopist כדי להציג את הגרון ישירות. אם יש laryngospasm, להחיל 2% לידוקאין אל המייתרים והגרון להפחית את ההתכווצות ולאפשר אינטובציה.
    5. הכנס stylet intubating לתוך הטובוס לעשות הצינור להתאים טוב יותר את האנטומיה של דרכי האוויר העליונות ולהעביר את הצינור דרך הפה בין מיתרי הקול לתוך קנה הנשימה.
    6. לנפח את שרוול בלון עם מזרק 10 מיליליטר כדי לעזור לאבטח אותו במקומו, כדי למנוע דליפה של גזי נשימה, וכדי להגן על דרך הנשימה מפני שאיפה אפשרית של נוזל בבטן.
    7. חבור את הצינור מסנן נשימה (מחליף חום ולחות) וכדי ההנשמה המכאנית.
    8. מניחים את חיה על צידו הימני על שולחן הניתוחים.
    9. כדי להשיג רמות PO2 של 100-120 מ"מ כספית, לאוורר את חיה עם תערובת של חמצן וחנקן (1: 2 V / V), using גדרות ההנשמה הבאה: המצב לשלוט בלחץ: לחץ קצה נשיפה חיובי (PEEP) 4 CMH 2 O; לחץ inspiratory שיא 16 - 18 CMH 2 O; נשימה תדירות בהתאם לגודל של החיה (עבור חיית 20 ק"ג, להקטין את התדירות עם משקל גוף גדל והולך) זה אמור לגרום נפח גאות של ~ 10 מ"ל / ק"ג, לפקח אוורור עם capnography.
    10. צג הטמפרטורה באמצעות מד חום רקטלי ולשמור הטמפרטורה בין 37 - 39 מעלות צלזיוס באמצעות מנורת חום או מחצלת חום. יתר על כן, לעקוב אחר קצב הלב עם electrocardiography.
  3. הַרדָמָה
    1. להשרות ולשמור הרדמה רצוי על ידי הוספת 2.0% של isoflurane (v / v) לגז-תערובת אוורור או לחילופין על ידי עירוי לוריד של פנטניל (10 מיקרוגרם / ק"ג / שעה) באמצעות קטטר וריד האוזן.
    2. בדוק עומק נאותה של הרדמה על ידי בדיקות רפלקסים הכאב עם קמצוץ הבוהן ברגלו האחורית לפני תחילת הניתוח. כאשר יש צורך, מוסיפיםהרדמה נוספת או להמתין כמה דקות. בדוק רפלקסים הכאב באופן קבוע לאורך כל הניתוח.
  4. נוזלים ואנטיביוטיקה
    1. לנהל את המנה הראשונה של אמוקסיצילין (25 מ"ג / ק"ג) לווריד דרך צנתר וריד האוזן.
    2. חבר מערכת עירוי כדי קטטר וריד האוזן לאפשר עירוי איטי של גלוקוז 10% (500 מ"ל) במהלך הניתוח.
  5. עיקור של אתר כירורגי
    1. לגלח ולנקות את העור של החיה על פני שטח של כ 25 ס"מ רוחב מעמוד השדרה כל הדרך עד לבית השחי השמאלי.
    2. שפשפו את העור בלחות עם לשפשף povidone-יוד (75 מ"ג / מ"ל) במשך כ 5 דקות.
    3. הסר את הסבון povidone- יוד מהעור עם gauzes סטרילי רטוב, לפני חיטוי העור עם קרם povidone-יוד (100 מ"ג / מ"ל).
    4. כסה את בעל חיים עם וילאות כירורגי סטרילי כדי להפחית העברת חיידקים וזיהום הבא של אתר כירורגית.

    3. כירורגיה

    1. פתיחת בית החזה (פתיחת בית החזה)
      1. עושים חתך בעור, החל מיום 1 ס"מ הזנב לזווית השמאלית התחתונה של עצם השכמה למטה כדי השחי שמאלה (איור 1). השתמש דיאתרמיה כדי לצרוב כלי דם בעור כדי למנוע דימום יתר.
      2. חותך את שריר serratus ו שריר החזה הגדול, באמצעות שיטת החיתוך של דיאתרמיה. כמו כן להשתמש דיאתרמיה כדי לצרוב כלי דם בתוך שכבת השריר כדי למנוע דימום יתר.
      3. השתמש דיסקציה קהה לחלק את שריר צלעי בקפידה של מרחב צלעי שמאל הרביעי עם מלחציים יתוש. עכשיו שטח costal של הריאה השמאלית מכוסית הצדר קרבי הקודקודית צריך להיחשף.
      4. כדי להזין את חלל פלאורלי, בזהירות לנקב שתי השכבות של הצדר ולקרוע אותן פתוחות.
      5. השתמש מפשק החזה להפריד את שולי הפצע ואת הצלעות לנהוג בתקיפות רקמותזו מזו כדי להשיג חשיפה טובה של חלל פלאורלי.
      6. דוחקים הצדה את הריאה השמאלית לכיוון הזנב ולשמור אותו במקום עם גזה רטוב. עכשיו הלב וכלי גדול צריך להיות חשוף בבירור.
    2. המיקום של קטטרים בדיקות זרימה (איור 1)
      1. השתמש דיסקציה קהה כדי להסיר ~ 2 ס"מ 2 של רקמת חיבור המקיפה של אבי העורקים החזי יורד.
      2. בצע תפר ארנק מייתר, מורכב משלושה תפרים, בקיר אאורטלי עם תפר קלוע משי USP3-0 שאינו נספג (Ø0.2 מ"מ).
      3. לחדור את דופן כלי אבי העורקים עם מחט נירוסטה 16 G באמצע תפר הארנק מיתרים.
      4. הכנס את קצה הצנתר המלא נוזל (עד הטבעת) לתוך אב עורקים, ומשוך תפר הארנק מייתר בחוזקה יחד ולקשור שתי המחרוזות של התפר.
      5. כדי לשמור את הקטטר במקום, בסופו של תפר 3 פעמים סביב הקטטר מעל הטבעת ושוב tכלומר שתי המחרוזות של התפר. בהמשך לאבטח את הקטטר עם תפר חדש כ 1 סנטימטר גולגולתי ממקום הכניסה.
      6. חבר את הקטטר מלא נוזל כדי מתמר לחץ המכויל, אשר מחוברים למחשב, לפקח על לחץ הדם הממוצע במהלך ניתוח. קבל גז דם עורקים לאמת או להתאים הגדרות אוורור נכונות.
      7. פתח את קרום הלב עם חתך חצה. שים לב לשמור על עצב הסרעפת שיוצא על קרום הלב ללא פגע.
      8. זהה את עורק הריאה ולמשוך אותו מעט לכיוון הזנב עם מפשק Farabeuf. עכשיו האאורטה עולה קשת אבי העורקים צריך להיחשף. צג ממוצע לחץ דם תוך חוזר בה עורק ריאה.
      9. ביצוע חתך קטן (~ 1 ס"מ) ברקמות החיבור בין האאורטה עולה ואת עורק הריאה באמצעות מספריים מצנבאום, להיות מסוגל לנתח או האאורטה עולה או עורק הריאה עם גדול ומעוקלמהדק יתוש למקם את חללית הזרימה.
      10. מניח את הגומייה של חללית הזרימה סביב הספינה. כדי להקל, למקם תפר דרך קצה אחד של הגומייה, למקם תפר זה סביב כלי ולמשוך אותו עד הגומייה המקיפה את כלי השיט.
      11. תקן את מכשיר מדידת זרימת בדיקה על הגומייה. חבר את חללית זרימת למחשב ולבדוק את אות תפוקת לב במחשב כדי לאשר הקצאה נכונה של חללית הזרימה.
      12. מניח צנתרים מלאי נוזל בעורק ריאה, נכון חדר, חדר שמאליים אטריום שמאל באותו אופן כפי שתואר עבור קטטר מלאת נוזל אב העורקים (3.2.2 - 3.2.5). שימו לב כי אין צורך להסיר רקמות חיבור לפני ביצוע תפר ארנק מייתר במבנים אלה.
      13. לחשוף לנתח את החלק הפרוקסימלי של השמאלי הקדמי היורד לב כלילית על ידי הרמת הרקמה הראשונה עם מלקחיים ועושה קטן (2 - 3 מ"מ) לגזור במספריים מצנבאום, ואחריו מתגרה הרקמה מן העורק בזהירות עם מקלון צמר גפן. ודא לנתיחה מלאה של העורק הכלילי ידי העברת מהדק יתוש זוויתי ישר קטן מתחת.
      14. הפוך תפר מקביל הווריד כלילית interventricular הקדמי עם תפר, אשר מחובר אל צנתר ורידי כלילית.
      15. לנקב את הווריד כלילית עם מחט 20 G של צנתר ורידי כלילית והכניסו את הצינורית של הקטטר לווריד.
      16. הסר את המחט ולאבטח את הקטטר עם תפר ביצע כבר (3.2.14). בהמשך לאבטח את הקטטר עם תפר חדש כ 1cm ממקום ניקור ראשוני.
      17. מניחים את החללית זרימה כלילית ברחבי הקדמי השמאלי גזור בעבר יורד עורקים כליליים. כאשר העורק הוא מכווץ כמעט גלוי, להשתמש לידוקאין 10% תרסיס להרפות את הכלי כדי לקבל חשיפה טובה יותר של כלי שיט. בדוק את האות של זרימה כלילית במחשב כדי confIRM הקצאה נכונה של חללית הזרימה (איור 2).
    3. תיעול
      1. מנהרת בדיקות הזרימה בנפרד בחלל צלע השמאלי השלישי מתחת לשריר ומעל הצלע באמצעות מהדק יתוש מעוקל גדול.
      2. מנהרה את הצנתרים המלאים נוזל הדרך או השלישי או במרחב צלעי השמאל החמישי על ידי פירסינג שריר צלעי. הצמד את צנתרים מלאות נוזל ולהסיר את שסתום משולשת כדי לצמצם את שטח פירסינג ולמנוע דליפה של צנתרים מלאות נוזל במהלך מנהור.
      3. תקן חלליות הזרימה ואת הצנתרים מלאי נוזל עם משי הקלוע USP2-0 שאינו נספג (Ø0.3 מ"מ) באמצעות תפר ארנק מחרוזת על שריר צלעי. תפר זה משמש גם כדי למנוע דליפת אוויר אחרי מחדש בתארים לחצו intrathoracic שלילי.
      4. הפוך שלושה חתכים בעור כ 2 ס"מ מרושע ובמקביל עמוד השדרה, כ 3 ס"מאורך 3 ס"מ זה מזה של אחד את השני.
      5. פירס trochar מתחת שריר הגב הרחיב שמאל מאתר חתך מקורי החתכים על הגב. מנהרת בדיקות זרימת צנתרים נוזל לחלק האחורי בתוך trochar זה.
      6. מניחים את והברזים למיניהם על צנתרים מלאות נוזל ולהסיר את מהדק. לסגת דם להסיר קרישי ובועות אוויר ולמלא את צנתרים מלאות נוזל עם 1,000 הפרין IU / ml. צנתרים ורידיים כלילית צריכים להיות מלא 5,000 הפרין IU / ml.
    4. סגירת Thorax
      1. עושים חתך באורך של כ 1.5 ס"מ, 8 ס"מ הזנב ובמקביל את החתך הראשון.
      2. עופרת לטמיון מחלל פלאורלי דרך שרירי צלע השישי מתחת לעור כדי החתך הזה עם מלחציים יתוש מעוקל גדול. חבר לטמיון למכשיר שאיבה כדי להסיר כל נוזל הנותרים ולהחזיר לחץ שלילי בחלל פלאורלי במהלך הסגירה של בית החזה.
      3. להקל לנפחהריאה עם אחיזת קצה שאיפה. ודא מילוי נאות של הריאות על ידי ניטור ויזואלי.
      4. סגור את בית החזה על ידי משייכת הצלעות של מרחב צלע הרביעי יחד בשני אתרים נפרדים עם פוליאסטר הקלוע USP6 שאינו נספג (Ø0.8 מ"מ).
      5. סגור את שריר serratus ו שריר החזה גדול עם תפר ריצת העור עם תפר subcuticular פועל באמצעות משי קלוע USP2-0 שאינו נספג (Ø0.3 מ"מ)
      6. לתפור את החתכים בצד הגבי עם פוליאסטר קלוע USP2-0 שאינם נספגים (Ø0.3 מ"מ) בין צנתרים. ראשית לקשור קשר ישירות על העור כדי לסגור את החתך, ואז לקבע את צנתרים אל תפר עם פקעת 1 ס"מ מהעור. עבור בדיקות הזרימה, השתמש polyglactin הקלוע USP2-0 נספג (Ø0.3 מ"מ) תפר למנוע חיתוך של תפר בחוט בדיקת הזרימה (איור 1).
      7. מוציאים בזהירות לטמיון תוך הפעלת לחץ על הצד גולגולתי שלהחתך כדי לשמור על לחץ שלילי בחלל פלאורלי. סגירת החתך עם תפר מחרוזת הארנק באמצעות פוליאסטר קלוע USP2-0 שאינם נספגים (Ø0.3 מ"מ) ולאטום את הפצע עם וזלין.

    איור 1

    סקירה כללית באיור 1. לכירורגיה בחלונית הימנית העליונה:. אזור סטרילי של החיה, אשר אמור להיות מגולח מעוקר שקרים בין השורות bleu. אתר החתך מתואר כקו המקווקו האדום. בחלונית שמאלית תחתונה: תמונה של צנתרי בדיקות זרימה: קטטר מלא נוזל (א), חללית זרימת האאורטה / ריאתי כולל גומייה (B), צנתר ורידים כלילית כוללים 20 G מחט (C) ואת חללית הזרימה כלילית (D). פנל ממני למעלה: סקירה סכמטי של מיקום של צנתרי בדיקות זרימה. MAP, מתכוון בלחץ העורקי; ורידי Cor, צנתר ורידים כליליים; LAP, עזב לחץ פרוזדורים; LVPהלחץ של החדר השמאלי; RVP, לחץ החדר הימני; PAP, הלחץ בעורק הריאה; CO, תפוקת לב; CBF, זרימת הדם הכליליים. פנל ימני תחתונים:. צנתרי מנהרת יציאה האחורית מאובטח עם תפר וקשר בכ 1 המרחק סנטימטר לאורך התפר אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

    1. הפסקת הרדמה והתאוששות מניתוח
      1. עצור הרדמה כאשר כל אתרי החתך סגורים.
      2. לספק שיכוך כאבים באמצעות מתן עצירות (0.015 מ"ג / ק"ג) im ב השריר העדין.
      3. עצור את אוורור כאשר החיה נושמת באופן עצמאי ונתקו את צינור לקנה הנשימה ממכונת ההנשמה. בדקו מעת לעת אם חיה נושמת מספיק.
      4. מניחים פדי גזה בין אתרים החצנה של צנתרים לספוג נוזל הפצע.
      5. כדי להגן על חיצוניים segments של צנתרים, לתת את החיה אפוד אלסטי ואורזים את צנתרים בין שתי פיסות עור כבש מלאכותית.
      6. להוציא אוויר הבלון של צינור לקנה הנשימה ואת extubate כאשר החיה חוזר רפלקס הבליעה שלה.
      7. לספק שיכוך כאבים לטווח ארוך באמצעות תיקון שחרור איטי פנטניל (12 מיקרוגרם / hr עבור חזיר 20 ק"ג; להתאים את הכוח שלך על פי משקל גוף). מניחים את המדבקה על חלק דק של העור (כגון בבטן התחתונה), כדי להבטיח אספקה ​​של שיכוך כאבים הולם.
      8. בית החיה בנפרד לתקופה שלאחר הניתוח כולו. ספק מנורת חימום במשך השבוע הראשון לאחר הניתוח כדי לשמור על חומו של בעלי חיים.
      9. לספק iv מספיק נוזלים אם החיה אינה שותה באופן עצמאי.
      10. שטוף את צנתרים מלאות נוזל יומי, על ידי משיכת הדם הראשונה להסיר קרישי, אז מילוי עם מי מלח ולבסוף עם מלח heparinized (1,000 - 5,000 IU / ml) כדי למנוע היווצרות קריש דם. יש להיזהר שלא להחדיר כל האוויר bubbles תוך שטיפת הצנתרים.
      11. נהל אמוקסיצילין (25 מ"ג / ק"ג) iv יומי במשך 6 ימים לאחר הניתוח, כדי למנוע זיהומים לאחר ניתוח.
      12. אפשר החיה להתאושש במשך שבוע לפני תחילת הניסויים הליכון.

    4. ניסוי הליכון (איור 2)

    1. שטוף את הצנתרים מלאי נוזל כמתואר (3.5.10) ולצרף את הצנתרים הסמוקים אל מתמר ללחץ. מדוד את טמפרטורת רקטלי כדי להיות מסוגלת להשיג ערכי גז דם תיקן טמפרטורה.
    2. שטוף את מתמר ללחץ עם תמיסת מלח כדי למנוע הדעיכה של האותות עקב בועות אוויר. צרף מתמר לחץ לחזה אלסטי בצד הגבי.
    3. חבר את מתמרי לחץ בדיקות זרימה למגבר. להתחיל למדוד בתוכנת מחשב ולכייל התמר לחץ בדיקות זרימה עם 0 mmHg להיות פתוח לאוויר (וסגורות חיה) ו -100 מ"מ כספי באמצעות מנומטר.
    4. (איור 2).
    5. במידת הצורך, לחבר קו רחב או של צנתרי נוזל הדגימה של דם ורידי עורקים מעורבים.
    6. מדוד ופרמטרים המודינמיים כאשר החיה שוכבת כמו גם עומד בשקט על ההליכון. לחצי דם ממוצע נמדדים לאורך פרק זמן של 10 שניות.
    7. השג עורקי דגימות דם ורידי מעורב ידי הראשון למשיכת 5 מ"ל של דם באמצעות מזרק 10 מ"ל, כך 1 מ"ל של דם טהור ניתן להשיג באמצעות מזרק 1 מ"ל heparinized. לקבלת דגימות דם ורידי כלילית, מזרק 2 מ"ל משמש במקום של מזרק 10 מ"ל ונסיגה של 1 מ"ל מספיקה כדי להשיג דם טהור.
    8. תחזיקי את המזרקים 1 מ"ל חתום על הקרח לפני עיבוד דגימות דם עם מנתח גז דם כדי לקבועתנאי מטבוליות נשימתית של חיה.
    9. נושא החזירים כדי פרוטוקול תרגיל לחמש שלב על ההליכון, 3 דק 'לכל מהירות, 1 - 5 ק"מ / שעה (~ 85% מהדופק המקסימאלי). השג ופרמטרים המודינמיים וגזים בדם לאחר 1.5 - 2 דקות לכל מהירות בכל מהירות כמו תנוחת מנוחה.
    10. לאחר פרוטוקול תרגיל לסגור את והברזים למיניהם ולבדוק אם להיסחף שחל כיול 0 mmHg, ורשום כיול זה. הסר את מתמר ללחץ של צנתרים מלאי נוזל וניתקת את בדיקות הזרימה.
    11. שטוף את צנתרים מלאות נוזל עם מליחים הפרין (1,000 - 5,000 IU / ml). הגן על צנתרי בדיקות זרימה ידי לשים אותם מתחת הגופייה אלסטית בין שתי פיסות עור כבש מלאכותי. החיה כעת ניתן חזרה לכלוב שלה.

    איור 2
    איור 2. ניסוי הליכון. בחלונית הימניתls: מאובזרת חזירים על ההליכון. צנתרים מלאים נוזל מחובר מתמר ללחץ, דגש על החלק האחורי של החזירים. פנל ממני למעלה: סקירה של ניסוי הגדרת הכל, כולל הליכון, מגבר ומחשב הקלטה. פנל ימני תחתון: דוגמא אופיינית נתונים המודינמי מוקלט. מלמעלה למטה; הלחץ אבי העורקים (AOP, כחול) ובלחץ של החדר השמאלי (LVP, אדום); לחץ פרוזדורי שמאל (LAP, כחול) ובלחץ של חדר שמאלי (אדום); לחץ בעורק ריאה (PAP, כחול) ולחץ חדר ממני (RVP, אדום); זרימת אבי העורקים / תפוקת הלב (aof, כחול); זרימת הדם הכליליים (CBF, אדום). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

תרגיל עד 5 ק"מ / שעה הביא להכפלת תפוקת הלב מ -4.3 ± 0.3 ל 8.5 ± 0.7 ליטר / דקה אשר הושג בעיקר על ידי גידול בקצב הלב מן 137 ± 7 ל 256 ± 8 פעימות לדקה בשילוב עם עלייה קטנה בנפח הפעימה מ -32 ± 2 כדי 36 ± 3 מ"ל (איור 3). הגידול בהיקף שבץ התאפשרה על ידי גידול התכווצות החדר השמאלי, כפי שמעידים עלייה מקסימלית של הנגזרת הראשונה של הלחץ של החדר השמאלי DP / dtmax יחד עם עלייה בשיעור של הרפיה של החדר השמאלי ועלייה עזב לחץ פרוזדורים, להיות בלחץ המילוי של החדר השמאלי (איור 3). הגידול בתפוקת הלב יחד עם עלייה בריכוז ההמוגלובין (לעומת 8.5 ± 0.4 כדי 9.2 ± 0.4 g / dl) וגידול מיצוי החמצן בגוף מ -45 ± 1 כדי 71 ± 1% מותר tripling של צריכת החמצן בגוף (איור 3). התרחבות מערכתית התרחשה כפי שמעיד עליה במוליכות וסקולרית מערכתיות ירידה בתנגודת כלי דם מערכתית, אשר לאכלס הגידול בתפוקת הלב כמעט לחלוטין, כך אומרים לחץ אב עורקים גדל רק במעט (איור 3). פעילות גופנית גם הביא התרחבות מתונה מחזור הדם הריאתי, כפי שמעידים עלייה של 33 ± 8% במוליכות בכלי הדם הריאתיים. עם זאת, העלייה 101 ± 8% בתפוקת הלב, יחד עם עליית הלחץ פרוזדורים שמאל (מ 3 ± 1 עד 10 ± 1 מ"מ כספית), הביא לעלייה בלחץ בעורק הריאה ובכך לעלייה afterload החדר הימני ( איור 3).

הגידול בקצב הלב, יחד עם עלייה קלה בלחץ העורקי הביאה לגידול ב והחסרונות החמצן של שריר הלב של חדר שמאלumption, אשר נענה בעיקר על ידי גידול בזרימת הדם הכליליים אשר, בשילוב עם העלייה בריכוז ההמוגלובין הביאה לגידול במשלוח החמצן של שריר הלב (מ 310 ± 37 כדי 738 ± 68 μmol / min). הגידול בביקוש חמצן של שריר לב היה בקנה אחד עם הגידול בהיצע חמצן של שריר לב, כמו מיצוי חמצן של שריר לב (79.8 ± 1.9% במנוחה 81.6 ± 1.9% במהלך תרגיל מקסימאלי) בעצם נשמר קבוע, וכתוצאה מכך רוויון חמצן ורידים ללא שינוי כלילית כלילי מתח חמצן ורידים (איור 3).

איור 3
איור 3. התגובה hemodynamic אופיינית לתרגיל. גוף חמצן הצריכה (BVO2) שימש כמדד עצימות האימון (x-צירי לוח AL). מוצגים הם התגובות של קצב לב (HR, פנל), נפח פעימה (SV, לוח ב '), מקסימוםimum מינימום של הנגזרת הראשונה של הלחץ של החדר השמאלי (DP / dtmax, C פאנל DP / dtmin, לוח שו"ת D) כמדדים של התכווצות ושיעור הרפיה, תפוקת הלב (CO, פאנל E), מתכוון בלחץ העורקי (MAP לוח, F), מוליכות וסקולרית מערכתיות (SVC, פנל G), התנגדות כלי דם מערכתי (SVR, פנל H), לחץ בעורק ריאה (PAP, לוח J), לחץ פרוזדורי שמאל (LAP, אני פנל), מוליכות בכלי דם הריאתיים (PVC לוח, K). סה"כ התנגדות ריאתי (מדד TPR על הזכות afterload חדרית גדל במהלך פעילות גופנית, לוח L). הגידול בקצב הלב, יחד עם עלייה קלה בלחץ העורקי הביאה לגידול בצריכה החמצן של שריר הלב של חדר שמאל (x-צירי לוחות MP), אשר נענה בעיקר על ידי גידול בזרימת הדם הכליליים (CBF, M פאנל) , כמו חילוץ חמצן של שריר לב (MEO2, לוח N), רוויון חמצן ורידים כלילי (CVSO2, פנל O) ומתח חמצן ורידים כלילי (cvPO2, P הפנל) הושפע באופן מינימאלי.כל הנתונים מוצגים כממוצע עם סטיית התקן של הממוצע (SEM). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

המחקר הנוכחי מתאר את הניתוח עבור מכשור chronical של חזירים וכן הפרוטוקול למימוש חזירים המאובזרת על הליכון מונע במנוע תוך מדידה ופרמטרים המודינמיים ולקיחת דגימות דם למדידת תכולת חמצן העורקי, ורידים מעורבים ודם ורידים כלילית.

צעדים קריטיים בתוך הפרוטוקול
ישנם מספר שלבים קריטיים בתוך הפרוטוקול שמתחילים כבר במהלך הליך אינטובציה. Thiopental (2.1.5) הוא סוכן דיכאון הנשימה, ולכן דורש אינטובציה מהירה על הממשל. כמו כן, חשוב לעקוב אחר הגדרות הנשמה בזהירות במהלך ההליך. לכן, כאשר את חלל בית החזה נפתח (שלב 3.1.4), זו תוצאת פסד של לחץ intrathoracic השלילי. כדי לפצות על אובדן זה ולמנוע קריסה המכתשית, אוורור דורש לחץ נשיפה סוף חיובי (PEEP). יתר על כן, הגדרות הנשמה (עיתונות inspiratory שיאיור) צריך להיות מותאם כדי לשמור על נפח גאות של ~ 10 מ"ל / ק"ג. כמו כן שים לב כי כאשר הריאה שמאלית נדחפה משם (3.1.6.) נפח גאות עשוי להיות ירידה משום שרק חלק הריאה השמאלית מאוורר. הגדרות הנשמה צריכות להיות מותאמת על בסיס גזי דם.

עוד הערה חשובה לגבי מדידות המודינאמית עם צנתרים מלאי נוזל הוא כי יש הבדל בין לחץ ההידרוסטטי מתמר לחץ ואת ההחדרה של הקטטר מלא נוזל לתוך מערכת לב וכלי דם. ההבדל בגובה בין רמת הלחץ מתמר הלחץ על אפוד אלסטי (4.2), ואת נקודת הכניסה של הקטטר צריך להיות מוערך במהלך הניתוח ועל הקרבה של החיה ותיקן על ידי אינטרפולציה או עיבוד מראש או שלאחר של הנתונים.

נקודה חשובה נוספת שיש להביא בחשבון בעת ​​השימוש בטכניקה זו היא איבוד דם, או במהלך הניתוח או במהלך חוזר ונשנהדגימת דם צריכה להיות ממוזערת, למרות עובדת חזירים הם גדולים יחסית ולכן יש נפח דם גדול (65 מיליליטר / קילו). במהלך הניתוח, אובדן דם במהלך החדרת צנתרים ניתן למזער פשוט באמצעות הפעלת לחיצה על פצעי דקירה. על פי הנחיות לניסויים בבעלי חיים, עד 10% מנפח הדם במחזור ניתן לקחת בהזדמנות אחת מן הרגיל, חיים בריאים עם תופעות לוואי מינימליות, אבל זה ייקח חיה כ -14 ימים כדי לחדש את הסכום הזה של הדם 15. משמעות הדבר הוא כי התאוששות מהניתוח הוא ממושך כאשר כמות של דם משמעותי הולכת לאיבוד.

במהלך דגימת הדם החוזרת במהלך ניסויי התרגיל, לכל היותר 1.0% של נפח הדם במחזור של חיה, או 0.6 מיליליטר / קילו ניתן להסיר כל 24 שעות 15. זה גם אומר כי כמות הדם שנדגם במהלך פעילות גופנית על הליכון, צריך להיות מתוכנן היטב וכי, לאחר הסרת iniקרישי tial כי הם תמיד נוכח לומן של הקטטר ליד הקצה על ממשק עם הדם, דם שנותר מסוגר לשטוף את הקווים צריכים להימסר בחזרה את החיות.

שינויים ופתרון בעיות
צנתרים מלאי נוזל מושתל צריכים להיות סמוק מדי יום כדי למנוע תקלה בגלל היווצרות קריש דם. בהתאם לכמות של קרישי דם הצנתרים מלאי נוזל, כמות הפרין בכל שורה יכול להיות מגוון מ 1,000 IU / ml ל -5,000 IU / ml. כמות הפרין צריך להישמר עד למינימום בשבוע הראשון לאחר הניתוח כדי למנוע דימום מפצעים כירורגית חתך בשל נוכחותם של הפרין נוגדות קרישה.

עם זאת, גם כאשר סמוק יומי, כמה צנתרים מלאי נוזל יהיו סתומים. כאשר זה קורה, לנסות למשיכת דם עם מזרק 2 מ"ל קטן על ידי יישום יניקה מינימלי ו / או pulsatile. זה יכול לקחת כמה דקות לפני קטטר יהיה בלתיסָמִיך. כאשר זה לא עובד, בזהירות לשטוף כמות קטנה של תמיסת מלח לקטטר ומיד מנסה למשוך דם. עליך להיות מודע לכך עירוי יכול לגרום לשחרור של פקיק למחזור הדם תסחיף של איברים דיסטלי, תלוי באתר של הקטטר. כאשר השטיפה זהירה לא עובדת, החבר את הקו הסתום מתמר בלחץ כדי לבדוק אם יש עדיין אות המודינמי. אם אין אות, הקו מלא נוזל צריך להיות אטום על ידי כמה קשרים ומנותקים.

פרשנות ומגבלות
כאשר כל הנקודות הנ"ל נלקחים בחשבון, שילוב של מדידות המודינמי ודגימות דם מאפשר פרשנות של התגובה תרגיל מבחינת הגוף וצריכת החמצן של שריר הלב, אשר הם מדדים טובים יותר עבור עצימות האימון מאשר מהירות ההליכון לבד 7,12 -14.

על מנת לעמוד בדרישות המטבולית המוגבר של הגוף, exerבתרגיל דורש שינויים בתפקוד הלב, כמו גם שינויים זלוף המקומי. זלוף רקמות מוסדר שינויים בקוטר של העורקים arterioles הקטנים של מיטת כלי הדם ואספקת הרקמה. גורמי vasoactive מיריאד, נגזרו מערכות neurohumoral, האנדותל מטבוליטים המקומי אינטראקציה כדי לקבוע טון וסקולרית ולהבטיח 1,5,12,16 רקמות זלוף נאותות. שינויי התנגדות כלי דם מערכתית ריאתי או ההופכי, מוליכות וסקולרית, ניתן לחשב את לחץ דם ואת אותות זרימה לפרש במונחים של שינויי טון וזומוטוריים בכלי דם המערכתיים ריאתי. באופן אינטואיטיבי, התנגדות כלי דם משמש לעתים קרובות כדי להעריך שינויי טון וסקולרית. עם זאת, בקבוצת מחקר שלנו, אנו ממליצים על שימוש ב מוליכות למרות מוליכות והתנגדות קשורות מתמטי, עם היות מוליכות זרימה מנורמלת ללחץ, ולחץ שווה התנגדות מחולקת זרימה. למרות מוליכות מילistance ניתן להחלפה אם אחד חוקר את השפעת גירוי יחיד בלבד (כלומר, פעילות גופנית) 7,17, פרשנות של שני הפרמטרים יכולה להיות שונה, כאשר שילוב של פעילות גופנית עם התערבויות תרופתיות, לחקור את תרומתם של מערכות vasoactive שונות לרגולציה של טון וסקולרית 4 , 5,7,14,18.

במהלך התרגיל, המחזור המערכתי הופך ממערכת במנוחה המתאפיינת זרימה נמוכה עמידות גבוהה (כלומר, מוליכות נמוכות) למערכת עם זרימה גבוהה ועמידות נמוכה, (מוליכות גבוהות). ככזה, התרחבות תרופתית יש השלכות שונות עבור מוליכות והתנגדות במנוחה לעומת תרגיל. הקיטון התנגדות כי הוא מיוצר על ידי vasodilator תרופתי במנוחה הוא גדול בעוד הגידול במוליכות קטן בלבד. לעומת זאת, במהלך התרגיל את אותה מידה של התרחבות מיתרגם עלייה גדולה המוליכות, אבל only ירידה קטנה התנגדות. לפיכך, כאשר מוליכות משמשות, התרחבות גדולה יותר נראה להתרחש במהלך פעילות גופנית, ואילו כאשר מסתכלים התרחבות התנגדות שנראית גדול במנוחה. פרשנות של הנתונים ולכן הוא שונה כאשר משתמשים בהתנגדות או מוליכות. למרות הבחירה בין ההתנגדות לבין המוליכות אולי נראה שרירותי למדי, בפיסיקה המשתנה שעובר השינוי העיקרי הוא יועד במונה של המדד לתגובה 7,17,18. מאז במהלך פעילות גופנית לחץ הדם באבי העורקים נשאר קבוע למדי ואילו עליות תפוקת הלב באופן ניכר, את הפרמטר המתאים ביותר לתאר את התגובה של כלי הדם מערכתית לממש יופיע להיות המוליכות וסקולרית מערכתית (תפוקת הלב / לחץ דם אבי העורקים), ולא התנגדות. יתר על כן, מחזור מערכתי מורכב ממספר רב של ערוצי כלי הדם ממגוון איברים כי הם perfused בעיקר באופן מקביל. מאז נגדים במקביל מסתכמים reciproקאלי, ואילו מנצח במקביל מסתכמים באופן ליניארי, כל שינוי מוליכות של מיטת כלי דם אזורית בפרט מיתרגם שינוי זהה (מוחלט) של המוליכות וסקולרית המערכתיות הכוללות. שיקול זה מעניק תמיכה נוספת לשימוש מוליכות וסקולרית לתאר את התגובות של כלי דם המערכתיים לממש והתערבויות תרופתיות.

הבחירה של התנגדות או או מוליכות לתאר את התגובות של כלי הדם לממש במיטה ריאתי נראה פחות ברור, כי פעילות גופנית המיוצר לעליה בתפוקת הלב, כמו גם הלחץ בעורק הריאה 7,17. בחירה עבור או התנגדות או המוליכות היא גם פחות קריטי, לאור שינויים קלים יחסית שנגרם כתוצאה מפעילות גופנית ב PVR ו- PVC לעומת מידת התרחבות המיוצר על ידי, למשל, המצור ET-קולטן 7. כתוצאה מכך, שימוש או של התנגדות או מוליכות לאפיין את ההשפעות של כלי דם ofa vasodilator התרופתי במחזור ריאתי יניב למסקנות דומות.

במחזור כלילית, הפרשנות של נתונים מורכבים עוד יותר כמו לנטילה דרך פה של יריבים תרופתיים של תוצאות חומרי vasoactive אנדוגני לא רק שינויי טון כלי התנגדות כלילית, אך לעתים קרובות גם מייצרים שינויים בולטים במשתנים המודינמי מערכתיים 7,14,17, 19. ופרמטרים המודינמיים שינו אלה להשפיע עבודת לב, ובכך לגרום לשינויים בזרימת דם הכליליים הנובע משינויי דרישות מטבוליות של לב או מן autoregulation, ולא השפעה ישירה של ההתערבות על טון וסקולרית כלילי. לדוגמה, המצור של מערכת מכווץ כלי דם אנדוגני מקטין לחץ אאורטלי ממוצע, כפועל יוצא של התרחבות מערכתית, מעוררת התאמות autoregulatory בטון כלי הדם הכליליים. יתר על כן, הפעלת רפלקס baroreceptor פועלת להגברת קצב לבהתכווצות שריר הלב nd. שינויים כאלה בקצב הלב ו / או לחץ דם ובהמשך יביא שינויים במטבוליזם שריר הלב, המחייב התאמה באספקת החמצן של שריר הלב ומכאן בזרימת הדם הכליליים.

כדי לקחת בחשבון את ההשפעות של שינויי סמים כגון בצריכת חמצן של שריר לב, החוקרים לבחון את הקשר בין רמות חמצן ורידי עורקי לב וצריכת חמצן של שריר לב (MVO 2) 4,5, כמו גישה זו מאפשרת הערכה של הסדרת טון כלי התנגדות כלילית עצמאי של שינויים בביקוש החמצן של שריר הלב. מינהל של vasodilator יגדל משלוח החמצן של שריר הלב ברמה מסוימת של MVO 2. כמו עלייה זו במשלוח החמצן מתרחש ללא שינוי צריכת חמצן, מיצוי חמצן של שריר לב יקטן, ויגרום לעליית תכולת חמצן ורידים כלילית וכפועל יוצא משמרת כלפי מעלה של היחס בין MVO 2 4,5.

אף אלגנטיות השימושיות שלה, כמה חוקרים הצביעו על המגבלות של גישה זו 20. לפיכך, התוויית MVO 2 מול PO ורידים כלילית 2 או ורידים כלילית SO 2 יכולים להיחשב בלתי הולם כי משתנית אלה הם למעשה חלק ממשוואה לחשב 2 MVO. כתוצאה מכך, MVO 2 הוא לא משתנה שאינו תלויה PO ורידים כלילית 2 בערך 2. לחלופין, חוקרים כדאי לשקול את השימוש במדד אחר של עבודה שריר הלב, המוצר בלחץ שיעור (RPP), שהינה תוצר של קצב הלב ולחץ הדם הסיסטולי של חדר שמאל. עם זאת, כפי RPP ו MVO 2 כמעט קשור באופן ליניארי, יםubstituting RPP עבור MVO 2 מניב תוצאות זהות כמעט 14, ואת היחס בין MVO 2 ורמות חמצן ורידי עורקי הלב נחשב בדרך רגישה של לימוד שינויים הטון וזומוטוריים כלילית.

משמעות ביחס שיטות קיימות
שיטה נוספת בשימוש הנפוץ להעריך שינויים ברגולציה של טון וסקולרית היא השימוש עורק קטן כלילית ריאתי מבודדת או arterioles בתוך myograph לחץ או תיל 6,14,21. היתרון של מחקרי myograph הוא הכלי ניתן ללמוד עצמאי של רקמה הסובבת וללא פוטנציאל בלבול השפעת מגורמים במחזור. טכניקות במבחנה אלה הם אפוא משלימים מדידות vivo. עם זאת, in vivo ו בטכניקות חוץ גופית לפעמים לתת תוצאות מנוגדות. לדוגמה, התגובה אנדותלין מכווץ כלי דם פוטנטי הופחת circulatio כלילית ללא פגע n לאחר אוטם שריר לב, אבל הועצם בעורקים קטנים כלילית מבודד חזירים עם אוטם שריר לב בהשוואת חזירי ביקורת בריא. 21 הפרש זה בין vivo פנימה בנתונים במבחנה נבע דיכוי מוגבר השפעת מכווץ כלי הדם של אנדותלין ידי prostanoids in vivo 21.

יישומים עתידיים
לנוכח התפקיד המוצע של שינויים בתפקוד כלי הדם הכליליים בתפקוד חדר שמאל וימין כאחד, הערכה של שינויים אלה מודלים רלוונטיים למחלות לב וכלי דם נדרש. השימוש בבעלי החיים כרוניים מאובזרים מאפשר מתאמים של חומרת המחלה עם כלי דם (פרע) פונקציה. יתר על כן, הוא פונקצית כלי דם הכליליים ריאתי עשויה להופיע נורמלית בתנאי מנוחה בסיסית, תוך תפקוד כלי דם עשוי להתגלות תחת לחץ לב וכלי דם, כגון במהלך פעילות גופני.

t "> מודלי חזירים מספר למחל לב-ריאה, כגון סוכרת 6, אוטם שריר לב 22, יתר לחץ דם ריאתי 8,9 וללכת איתו אי ספיקת לב הנגרמת 10 הזמין וניתן לשלבו עם מכשור כרוני. חסרון הוא כי פוטנציאל, כאשר חזירים זמינים מסחרי גזעים כמו יורקשייר, landrace, גדול לבן וכו ', משמשים, חזירים מבוגרים הם גדולים מאוד ולפיכך עשויים קשה להתמודד. לכן, חזירים לנוער משמשים לעתים קרובות. עם זאת, כמו חזירים לנוער לצמוח במהירות, מיצוב פונקציה של בדיקות זרימה צנתרי לחץ patency של צנתרים מלאי נוזל עלולים להיות בסכנה, הגבלת משך מדידות סדרו בתוך בעלים חיים בודדים לכ -10 שבועות. אלטרנטיבה היא שימוש חזירים מיניאטורי בוגרים, כגון יוקטן או חזירי גוטינגן, מתוכם המשקל הבוגר 40 - 60 ק"ג 23.

לסיכום, שימוש אנימה מאובזרת כרוניls מאפשר הערכת סדרה של תפקוד לב-ריאה או במהלך התפתחות מחלה או הערכה של טיפול, ובכך להגדיל כוח סטטיסטי והגביל את מספר בעלי החיים הדרושים למחקר.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

החוקרים אין לי מה לחשוף.

Acknowledgments

מחקר זה נתמך על ידי קרן הלב הולנד מענק 2000T038 (אל DJ Duncker) מענק 2000T042 (ד Merkus), FP7-בריאות-2010 הנציבות האירופית מענק MEDIA-261,409 (אל DJ Duncker וד Merkus), יוזמת מחקר לב וכלי דם הולנד: קרן הלב ההולנדית, הפדרציה הולנדית עבור מרכזים רפואיים האוניברסיטה, ארגון הולנד למחקר בריאות ופיתוח והאקדמיה המלכותית ההולנדית למדעים   CVON- ARENA CVON 2011-11 (אל DJ Duncker), CVON-פדרה CVON2012-08 (ד Merkus) ו CVON-חבר מחדש CVON 2014-11 (אל DJ Duncker וד Merkus), סופיה קרן (ד דה Wijs-Meijler, ד Merkus ו IKM רייס).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3-way stopcocks B. Braun 16496
Perfusor lines PVC (DEHP-free) 150 cm/2.6 ml  B. Braun 8722960 Used for fluid filled catheters
“python “ silicontubing Rubber BV 1757 ID 1 mm, OD 2 mm Used for fluid filled catheters
Sodium Chloride 0.9% Baxter TKF7124
Glucose 10% Baxter WE0163
Suction device
Slim-Line electrosurgical pencil with 2 buttons ERBE ELEKTROMEDIZIN GMBH 20190-066
Servo Ventilator SV900C  Siemens-Elema AB 
Laryngoscoop Vererinary Technics Int. 11.02.47
Sterile surgical gloves
tie-on surgical mask 3M 1818FS
surgical hat Klinidrape 621301
Procedure pack Molnlycke Health Care 97027809 Surgical drape, gauze pads, syringes, beaker etc
Droptears Alcon 288-28282-01
Betadine scrub 75 mg/ml Povidone-iodine Meda Pharma BV RVG08939
Betadine solution 100 mg/ml Povidone-iodine Meda Pharma BV RVG01331
Cuffed Endotracheal tube Emdamed size depends on animal size
Breathing filter Hyrdo therm 3HME Intersurgical 1560000
Laryngoscope Handle+ Miller blade size 4 Kawe Germany
Manual resuscitator- Combibag Weinmann 6515-12-313-5596
Perivascular flow probe 3PS Transonic For coronary artery; Size 2.5 - 4 mm depending on animal size
Confidence flow probe Transonic For aorta/pulmonary artery, 16 - 20 mm; size depends on animal size
Venflon-Venisystem 20 G x 32 mm BD 393224 For coronary venous catheter
Blunt Needle 18 G For coronary venous catheter
Tygon Tubing Rubber BV 2802 ID 0.8 mm (1/32’’), OD 2.4 mm (3/32’’) For coronary venous catheter
Suction Handle 17 cm 6 6/8 " Coupland 18/8 martinit with tube connector KLS Martin Group 18-575-24
Scalple blade 
Scalpel Handle 13.5 cm 5 3/8 " Stainless Steel solid KLS Martin Group 10-100-04
Vascular Forceps 20.2 cm 8 " De Bakey Stainless Stee KLS Martin Group 24-388-20 ± 14 cm
Dressing Forceps 17 cm 6 6/8 " Cushing Stainless Steel KLS Martin Group 12-189-17 ± 18 cm
halsted-musquito straight 12.5 cm - 5" Rudolf Medical RU-3100-13 ± 12 cm
halsted-musquito curved 12.5 cm - 5" Rudolf Medical RU-3101-12 ± 12 cm
Dissecting and Ligature Forceps 13 cm 5 1/8 " Gemini Stainless Steel KLS Martin Group 13-451-13 ± 12 cm
Dissecting and Ligature Forceps 18.5 cm 7 2/8 " Schnidt Stainless Steel KLS Martin Group 13-363-18
Rib Retractor Finochietto, Baby Aluminium - KLS Martin Group 24-162-01
suture forceps Mayo-Hegar 3 mm 18 cm - 7" Rudolf Medical RU-6050-18
Metchenbaum blunt curved 14.5 cm - 5(3/4)" Rudolf Medical RU-1311-14M
Retrector farabeuf 12 cm - 4 (3/4)" Rudolf Medical RU-4497-12
Towel forceps schrädel curved 9cm - 3,5" Rudolf Medical RU-3550-09
surgical scissors blunt 13 cm - 5" Rudolf Medical RU-1001-13
Gauzes Cutisoft 10 x 10 cm 4-ply BSN Medical 45846-00
Gauzes Cutisoft 5 x 5 cm 4-ply BSN Medical 45844-00
Flowmeter -CM2 / SF2 - 2gas (O2 and Air) UNO BV 180000008
Tec 7 Vaporizer Datex-Ohmeda
Acederm wound spay Ecuphar NV
Vaseline Album Bufa 165313
silkam 3-0 Natural silk, non-absorbable B. Braun F 1134043 sutures for placement of catheters
silkam 2-0 Natural silk, non-absorbable B. Braun F 1134051 sutures for muscular approximation
dagrofil 3-0 Polyester, non-absorbable B. Braun C 0842478 sutures for fluid fille catheters after tunneling
Vicryl rapide 3-0, 1 x 45 cm FS2, V2930G Daxtrio medische producten 15560 sutures for electrical catheters after tunneling
Vitafil 6 USP SMI 6080 Ties
Syringes 10 ml and 2.5 ml
Heparin LEO (heparin sodium)  LEO Pharma A/S
Zoletil Virbac tiletamine / zolazepam
Sedazine AST farma 108855 xylazine
Temgesic RB Pharmaceuticals 5429 buprenorphine
Tensogrip BSN Medical 71522-00 elastic vest

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Laughlin, M. H., et al. Peripheral circulation. Compr Physiol. 2, 321-447 (2012).
  2. Datta, D., Normandin, E., ZuWallack, R. Cardiopulmonary exercise testing in the assessment of exertional dyspnea. Ann Thorac Med. 10, 77-86 (2015).
  3. Vatner, S. F., Braunwald, E. Cardiovascular control mechanisms in the conscious state. N Engl J Med. 293, 970-976 (1975).
  4. Duncker, D. J., Bache, R. J. Regulation of coronary blood flow during exercise. Physiol Rev. 88, 1009-1086 (2008).
  5. Tune, J. D., Gorman, M. W., Feigl, E. O. Matching coronary blood flow to myocardial oxygen consumption. J Appl Physiol. 97 (1985), 404-415 (2004).
  6. van den Heuvel, M., et al. Coronary microvascular dysfunction in a porcine model of early atherosclerosis and diabetes. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 302, H85-H94 (2012).
  7. Zhou, Z., et al. Pulmonary vasoconstrictor influence of endothelin in exercising swine depends critically on phosphodiesterase 5 activity. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 306, L442-L452 (2014).
  8. Pereda, D., et al. Swine model of chronic postcapillary pulmonary hypertension with right ventricular remodeling: long-term characterization by cardiac catheterization, magnetic resonance, and pathology. J Cardiovasc Transl Res. 7, 494-506 (2014).
  9. Mercier, O., et al. Endothelin A receptor blockade improves regression of flow-induced pulmonary vasculopathy in piglets. J Thorac Cardiovasc Surg. 140, 677-683 (2010).
  10. Spinale, F. G., et al. Chronic supraventricular tachycardia causes ventricular dysfunction and subendocardial injury in swine. Am J Physiol. 259, H218-H229 (1990).
  11. Yarbrough, W. M., Spinale, F. G. Large animal models of congestive heart failure: a critical step in translating basic observations into clinical applications. J Nucl Cardiol. 10, 77-86 (2003).
  12. Duncker, D. J., Stubenitsky, R., Verdouw, P. D. Autonomic control of vasomotion in the porcine coronary circulation during treadmill exercise: evidence for feed-forward beta-adrenergic control. Circ Res. 82, 1312-1322 (1998).
  13. Stubenitsky, R., Verdouw, P. D., Duncker, D. J. Autonomic control of cardiovascular performance and whole body O2 delivery and utilization in swine during treadmill exercise. Cardiovasc Res. 39, 459-474 (1998).
  14. Zhou, Z., et al. Phosphodiesterase-5 activity exerts a coronary vasoconstrictor influence in awake swine that is mediated in part via an increase in endothelin production. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 306, H918-H927 (2014).
  15. Gross, D. R. Animal Models in Cardiovascular Research. , 3, Springer. (2009).
  16. Merkus, D., Duncker, D. J. Perspectives: Coronary microvascular dysfunction in post-infarct remodelled myocardium. Eur Heart J Suppl. 16, A74-A79 (2014).
  17. de Beer, V. J., de Graaff, H. J., Hoekstra, M., Duncker, D. J., Merkus, D. Integrated control of pulmonary vascular tone by endothelin and angiotensin II in exercising swine depends on gender. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298, H1976-H1985 (2010).
  18. Lautt, W. W. Resistance or conductance for expression of arterial vascular tone. Microvasc Res. 37, 230-236 (1989).
  19. Merkus, D., et al. Phosphodiesterase 5 inhibition-induced coronary vasodilation is reduced after myocardial infarction. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304, H1370-H1381 (2013).
  20. Heusch, G. The paradox of alpha-adrenergic coronary vasoconstriction revisited. J Mol Cell Card. 51, 16-23 (2011).
  21. Merkus, D., Houweling, B., van den Meiracker, A. H., Boomsma, F., Duncker, D. J. Contribution of endothelin to coronary vasomotor tone is abolished after myocardial infarction. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 288, H871-H880 (2005).
  22. Haitsma, D. B., et al. Minimal impairment of myocardial blood flow responses to exercise in the remodeled left ventricle early after myocardial infarction, despite significant hemodynamic and neurohumoral alterations. Cardiovasc Res. 52, 417-428 (2001).
  23. Bender, S. B., van Houwelingen, M. J., Merkus, D., Duncker, D. J., Laughlin, M. H. Quantitative analysis of exercise-induced enhancement of early- and late-systolic retrograde coronary blood flow. J Appl Physiol. 108 (3), 507-514 (2010).

Tags

רפואה גיליון 108 המכשור כרונית תפקוד הלב מיקרו כלילית מיקרו ריאתי איזון החמצן של שריר הלב תפקוד האנדותל
מיקום כירורגי של קטטרים לטווח ארוך בדיקת תרגיל לב וכלי דם ב חזירים
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

De Wijs-Meijler, D. P. M., Stam, K., More

De Wijs-Meijler, D. P. M., Stam, K., van Duin, R. W. B., Verzijl, A., Reiss, I. K., Duncker, D. J., Merkus, D. Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine. J. Vis. Exp. (108), e53772, doi:10.3791/53772 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter