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Engineering

केशिका आधारित Monodisperse Microdroplets का आकार चलाया गठन के लिए केन्द्रापसारक Microfluidic डिवाइस

Published: February 22, 2016 doi: 10.3791/53860

Abstract

यहाँ, हम आकार चलाया, monodisperse, डब्ल्यू / हे एक केशिका आधारित केन्द्रापसारक microfluidic युक्ति का उपयोग कर microdroplets के तेजी से उत्पादन के लिए एक सरल विधि का प्रदर्शन। डब्ल्यू / हे microdroplets हाल ही में शक्तिशाली तरीकों कि रासायनिक प्रयोगों छोटी सक्षम इस्तेमाल किया गया है। इसलिए, एक बहुमुखी विधि को विकसित करने monodisperse उपज के लिए डब्ल्यू / हे microdroplets की जरूरत है। हम डब्ल्यू / हे एक केशिका आधारित केन्द्रापसारक axisymmetric सह बहने microfluidic युक्ति के आधार पर microdroplets monodisperse पैदा करने के लिए एक तरीका विकसित किया है। हम केशिका छिद्र का समायोजन करके microdroplets के आकार को नियंत्रित करने में सफल रहा। हमारे विधि उपकरण अन्य microfluidic तकनीकों के साथ तुलना में आसान करने के लिए उपयोग है कि आवश्यकता है, encapsulation के लिए नमूना समाधान का केवल एक छोटी मात्रा (0.1-1 μl) की आवश्यकता है और प्रति सेकंड डब्ल्यू / हे microdroplets के हजारों की सैकड़ों संख्या के उत्पादन में सक्षम बनाता है । हमें उम्मीद है कि इस विधि जैविक अध्ययन कीमती जैविक रों की आवश्यकता की सहायता करेंगेतेजी से मात्रात्मक विश्लेषण जैव रासायनिक और जैविक अध्ययन के लिए नमूने की मात्रा संरक्षण द्वारा amples।

Introduction

डब्ल्यू / हे microdroplets 1-5 जैव रसायन और जैव प्रौद्योगिकी के अध्ययन के लिए कई महत्वपूर्ण अनुप्रयोगों, प्रोटीन संश्लेषण 6, प्रोटीन क्रिस्टलीकरण 7, पायस पीसीआर 8,9, सेल encapsulation 10, और कृत्रिम कोशिका-तरह सिस्टम 5,6 का निर्माण भी शामिल है। इन अनुप्रयोगों के लिए डब्ल्यू / हे microdroplets का उत्पादन करने के लिए, महत्वपूर्ण मानदंड आकार और डब्ल्यू / हे microdroplets की monodispersibility का नियंत्रण कर रहे हैं। बनाने के लिए microfluidic उपकरणों monodisperse, आकार-चलाया डब्ल्यू / microdroplets 11 सह बह विधि 12,13, प्रवाह ध्यान केंद्रित विधि 14,15, और microchannels में टी जंक्शन विधि 16 के आधार पर कर रहे हैं हे। हालांकि इन तरीकों अत्यधिक monodisperse डब्ल्यू / हे microdroplets उत्पादन, microfabrication प्रक्रिया जटिल हैंडलिंग और microchannels की तैयारी के लिए विशेष तकनीक की आवश्यकता है, और यह भी नमूना समाधान की एक बड़ी राशि (कम से कम कई सौ की आवश्यकता है81, सिरिंज पंप और ट्यूबों कि microchannels के लिए नमूना समाधान आचरण में अपरिहार्य मृत मात्रा की वजह से एल)। इस प्रकार, एक करने के लिए उपयोग में आसान और कम मृत मात्रा विधि monodisperse उत्पन्न करने के लिए डब्ल्यू / हे microdroplets की जरूरत है।

इस पत्र, प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं के वीडियो के साथ साथ, एक केन्द्रापसारक केशिका आधारित axisymmetric सह बहने microfluidic सेल आकार पैदा करने के लिए डिवाइस 17, डब्ल्यू / हे microdroplets (चित्रा 1) monodisperse वर्णन करता है। इस सरल विधि आकार monodispersity और आकार controllability प्राप्त होता है। यह सिर्फ एक टेबलटॉप मिनी सेंट्रीफ्यूज और एक केशिका आधारित axisymmetric सह बहने microfluidic युक्ति एक नमूना microtube में तय की आवश्यकता है। हमारे विधि केवल एक बहुत छोटी मात्रा (0.1 μl) की जरूरत है, और नमूना के किसी भी महत्वपूर्ण मात्रा बर्बाद नहीं करता है।

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Protocol

1. एक केशिका आधारित microfluidic डिवाइस के निर्माण

  1. धारकों के सेट अप
    नोट: धारक डिजाइन चित्रा 2A में प्रस्तुत किया है।
    1. धारकों के चार डिस्क में से प्रत्येक के बाहर कट (2A चित्रा (i) - (iv)) 2 मिमी मोटी polyacetal प्लास्टिक की प्लेट एक मिलिंग मशीन का उपयोग करने से। धारक के चार डिस्क से प्रत्येक के लिए निम्नलिखित आयामों का उपयोग करें: (i) डिस्क 1 व्यास 8.5 मिमी, केशिका छेद (स्विस) व्यास 1.3 मिमी, पेंच छेद (एसएच) व्यास 1.8 मिमी; (Ii) डिस्क 2 व्यास 8.7 मिमी, 2.0 मिमी व्यास सीएच, एसएच व्यास 1.8 मिमी; (Iii) डिस्क 3 व्यास 8.7 मिमी, 0.5 मिमी व्यास सीएच, एसएच व्यास 1.8 मिमी; और (iv) डिस्क 4 व्यास 9.1 मिमी, सीएच व्यास 1.0 मिमी, 1.8 मिमी व्यास एसएच।
    2. M2 40 शिकंजा (चित्रा 2 बी) का उपयोग कर × धारकों इकट्ठा करो। धारक (चित्रा 2 बी) के एक नीचे के भाग 1 डिस्क और चित्रा 2A (i), (ii) और एक ऊपरी हिस्सा (चित्र में डिस्क 2 के होते हैंधारक के Ure 2 बी) डिस्क 3 और चित्रा 2A में डिस्क 4 के होते हैं (iii), (iv)।
      1. धारक के नीचे हिस्से का निर्माण करने के लिए, प्रत्येक डिस्क 1 के तीन एसएच में पेंच डालने और 2. धागा हिस्से का एक टुकड़ा बंद चुटकी लेनेवाला द्वारा शिकंजा छोटा। 0.9 सेमी (धारक के नीचे के भाग के रूप में एक ही लंबाई) पर पेंच की लंबाई रखें।
      2. धारक के ऊपरी भाग का निर्माण करने के लिए, प्रत्येक डिस्क 3 में से दो एसएच में शिकंजा डालने और 4. धागा हिस्से का एक टुकड़ा बंद चुटकी लेनेवाला द्वारा शिकंजा छोटा। 0.7 सेमी (धारक के ऊपरी हिस्से के रूप में एक ही लंबाई) पर पेंच की लंबाई रखें।
      3. धारक को इकट्ठा करने के लिए, एक लंबे पेंच का उपयोग कर धारक के नीचे और ऊपरी भागों में शामिल हो।
        नोट: धारक सटीक के प्रत्येक भाग की लंबाई रखें: नीचे हिस्से में 0.9 सेमी है; ऊपरी हिस्सा 0.7 सेमी (चित्रा 2 बी) है।
  2. कांच केशिकाओं का निर्माण
    1. () भीतरी व्यास (आईडी) बाहरी व्यास (ओवर ड्राफ्ट / 1.0 / 0.6 मिमी) एक आंतरिक गिलास केशिका:, और एक बाहरी कांच केशिका (ओवर ड्राफ्ट / ID: 2.0 / 1.12 मिमी) दो गिलास केशिकाओं के प्रकार का प्रयोग करें।
    2. तीन बराबर भागों में विभाजित करने के लिए बाहरी गिलास केशिका एक ग्लास कटर का प्रयोग करें, और उसके बाद दो बराबर टुकड़ों में विभाजित करने के लिए आंतरिक कांच केशिका ग्लास कटर का उपयोग करें।
    3. एक गिलास केशिका डांड़ी (चित्रा 3) का उपयोग कर प्रत्येक विभाजित भीतरी और बाहरी कांच केशिकाओं तेज करें। अधिकतम पर खींचने का वजन निर्धारित करें। बाहरी कांच केशिका के लिए 60 डिग्री और भीतरी केशिका के लिए 70 डिग्री पर खींचने की गर्मी स्तर सेट करें। ध्यान से गिलास केशिका पैनापन।
      1. कांच केशिका के constricted भाग के भीतर टिप की लंबाई रखें: इनर केशिका 1.5-1.8 सेमी है; बाहरी केशिका 0.8-1.0 सेमी (चित्रा 3 सी) है। यदि यह लंबाई कम या वर्णित लंबाई से अधिक लंबी है, कृपया खींचने की गर्मी के स्तर को समायोजित।
    4. एफनौवीं microforge करने के लिए आंतरिक या बाहरी कांच केशिकाओं टेप (चित्रा 3 बी) का उपयोग कर खड़े हो जाओ।
    5. तीन चरणों (चित्रा 3 बी) में microforge का उपयोग कर गिलास केशिका की नोक कट: (i) एक प्लैटिनम तार पर कांच के मोती के लिए गिलास केशिका की नोक स्पर्श, (ii) प्लैटिनम तार एक पैर पर कदम रखकर गर्मी 1-2 सेकंड के लिए स्विच, और (iii) 1-2 सेकंड के बाद, प्लैटिनम तार ठंडा करके कांच केशिका की नोक काट दिया।
      1. भीतरी (घ i) और बाहरी (डी ओ) केशिका orifices का व्यास क्रमश: समायोजित करें। आंतरिक कांच केशिका के छिद्र व्यास 5, 10, और 20 माइक्रोन (घ मैं = 5,10, 20 माइक्रोन) और बाहरी कांच केशिका (डी ओ) 60 माइक्रोन (डी ओ = 60 माइक्रोन) इस प्रयोग में है।
        नोट: कांच केशिका डिस्पोजेबल है। कांच के निर्माण capillar दोहराएँएँ।

2. जनरेटिंग डब्ल्यू / हे Microdroplets के लिए प्रक्रिया

  1. तेल युक्त surfactant के साथ एक बाहरी कांच केशिका भरें। तेल और surfactant के मिश्रण hexadecane 2% से युक्त (डब्ल्यू डब्ल्यू /) इस प्रयोग (चित्रा 4 ए) में Sorbitan monooleate है।
    नोट: तेल और surfactants की कई संयोजन कर रहे हैं (उदाहरण के लिए, तेल fluorinated या कार्बोनेटेड हो सकता है, surfactants, आयनिक nonionic, या fluorochemical हो सकता है)।
    1. एक बाहरी कांच केशिका में hexadecane युक्त Sorbitan monooleate के 10 μl का परिचय। चित्रा -4 ए में, बाहरी कांच केशिका (डी ओ) के छिद्र व्यास 60 माइक्रोन (डी ओ = 60 माइक्रोन) है। कांच केशिका के छिद्र को समायोजित करने के लिए, कदम 1.2.4-1.2.5 में लौटने।
  2. धारक (चित्रा 4 बी) के नीचे हिस्से में बाहरी केशिका सेट करें।
  3. नाटकीयएक आंतरिक गिलास केशिका (चित्रा 4C) केशिका क्रिया द्वारा में एक जलीय समाधान के बारे में 0.1 μl डब्ल्यू। चित्रा 4C में, आंतरिक कांच केशिका (घ i) के छिद्र व्यास 10 माइक्रोन (घ मैं = 10 माइक्रोन) है। कांच केशिका के छिद्र को समायोजित करने के लिए, कदम 1.2.4-1.2.5 में लौटने।
  4. धारक (चित्रा 4D-ए) के ऊपरी भाग में भीतरी केशिका सेट करें। बाहरी केशिका (चित्रा 4D-ए) में भीतरी केशिका डालें। चित्रा के रूप में सफेद डॉट चक्र को देखते हुए 4D-एक, बाहरी केशिका के अंदर भीतरी केशिका की स्थिति (बाहरी केशिका (डब्ल्यू) = 130 माइक्रोन के आंतरिक व्यास) का निरीक्षण करें (चित्रा 4D-बी, सी) एक डिजिटल माइक्रोस्कोप का उपयोग । बाहरी केशिका में भीतरी केशिका की स्थिति डब्ल्यू = 100-150 माइक्रोन करने के लिए सेट किया जाना चाहिए।
    नोट: इनर की स्थिति बदलने के लिएबाहरी केशिका केशिका में, कृपया धारक के ऊपरी भाग में पेंच की बारी है। इस प्रकार, दूरी डब्ल्यू ठीक से नियंत्रित किया जा सकता है।
  5. एक 1.5 मिलीलीटर नमूना microtube के तल में hexadecane युक्त Sorbitan monooleate (2% w / w) के 100 μl का परिचय। नमूना microtube (चित्रा 4E-ए) में भीतरी और बाहरी केशिकाओं के साथ धारक स्थापित करें,। बाहरी केशिका जाँच करने के लिए हवा-तेल इंटरफेस (चित्रा 4E-बी) से दूर रखने के लिए सुनिश्चित करें।
  6. नमूना अपकेंद्रित्र microtube 1-2 सेकंड के लिए 1600 XG की एक गुरुत्व में एक टेबलटॉप झूल-बाहर प्रकार मिनी सेंट्रीफ्यूज का उपयोग कर microdroplets उत्पन्न करने के लिए (चित्रा 4F)। आरटी पर सभी प्रयोगों से बाहर ले।
    नोट: एक झूलते-बाहर प्रकार सेंट्रीफ्यूज का प्रयोग करें। एक छोटी बूंद नमूना microtube के एक sidewall के साथ टकराने और जब एक निश्चित कोण प्रकार सेंट्रीफ्यूज प्रयोग किया जाता है बिखर सकता है।
  7. धीरे-धीरे डब्ल्यू / हे बूंदों पिपेट से आकर्षित है, और फिर, एक गिलास रों पर डाल दियाLIDE।
  8. microdroplets की छवियों पर कब्जा एक डिजिटल माइक्रोस्कोप (बढ़ाई, 200X) का उपयोग कर उत्पन्न।

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Representative Results

इस अध्ययन में, हम एक केशिका आधारित केन्द्रापसारक microfluidic युक्ति (चित्रा 1) का उपयोग करके सेल आकार डब्ल्यू / हे microdroplets की पीढ़ी के लिए एक सरल तरीका मौजूद है। Microfluidic युक्ति एक केशिका धारक (चित्रा 2 बी) की रचना की थी, दो गिलास केशिकाओं (चित्रा -3 सी में भीतरी और बाहरी कांच केशिकाओं), और surfactant सहित एक तेल युक्त एक microtube। हम आंतरिक कांच केशिका में नमूना समाधान के 0.1 μl इंजेक्शन और बाहरी कांच केशिका (चित्रा 4D) में आंतरिक कांच केशिका रखा। सेल आकार डब्ल्यू / हे microdroplets नमूना समाधान 17 (चित्रा 1 बी) के एक jetting प्रवाह के पठार-रेले अस्थिरता से उत्पन्न होता है और कम से कम 2 घंटा 17 के लिए स्थिर थे।

डब्ल्यू के विभिन्न आकारों की विशिष्ट उदाहरण / हे microdroplets केशिका-बा से उत्पन्नएसईडी केन्द्रापसारक microfluidic युक्ति चित्रा में दिखाए जाते हैं 5। चित्रा 5 ए-एफ डिजिटल माइक्रोस्कोपी छवियों और आकार के वितरण histograms (एन = 200) डब्ल्यू / हे microdroplets का पता चलता है। डब्ल्यू / हे microdroplets एक डी के साथ एक आंतरिक केशिका का उपयोग कर उत्पन्न थे मैं = 5 (ए, बी), 10 (सी, डी), या 20 माइक्रोन (ई, एफ) छिद्र व्यास, जबकि 60 माइक्रोन से कम डी और w स्थिर रखने और 115 माइक्रोन, क्रमशः। उत्पन्न डब्ल्यू / हे microdroplets के आकार के माप प्राप्त माइक्रोस्कोप छवि के विश्लेषण के द्वारा हासिल किया गया। विकास के लिए मैं = 5, 10, और 20 माइक्रोन orifices, microdroplets की औसत व्यास 8.3 माइक्रोन (मानक विचलन (एसडी) 0.9 माइक्रोन, विभिन्नता का गुणांक (सीवी) 10.8%), 12.7 माइक्रोन (एसडी 1.1 माइक्रोन, सीवी थे 8.6%), और 17.9 माइक्रोन (एसडी 1.4 माइक्रोन, सीवी 7.8%), क्रमशः। इन परिणामों से संकेत मिलता है कि हम सफलतापूर्वक monodisperse डब्ल्यू / हे microdrople प्राप्तप्रस्तावित विधि द्वारा TS। इसके अलावा, डब्ल्यू / हे microdroplet व्यास लगभग भीतरी केशिका छिद्र (चित्रा 5 जी) के रूप में एक ही थे। इस प्रकार, डब्ल्यू / हे microdroplets का मतलब आकार में आसानी से एक विस्तृत श्रृंखला पर, आम तौर पर 5 से 20 माइक्रोन के लिए देखते जा सकता है, माइक्रो डिवाइस का उपयोग।

आकृति 1
चित्रा 1. केन्द्रापसारक केशिका आधारित axisymmetric सह बहने microfluidic युक्ति और इस प्रक्रिया पैदा डब्ल्यू / हे microdroplets (केन्द्रापसारक केशिका आधारित axisymmetric सह बहने microfluidic युक्ति और डब्ल्यू / हे डिवाइस का उपयोग microdroplets के गठन। (ए) चित्रण का अवलोकन वृत्त), (ख) डब्ल्यू / हे जलीय घोल 17 साल की एक jetting प्रवाह के पठार-रेले अस्थिरता द्वारा उत्पन्न microdroplets भीतर, डी मैं आंतरिक कांच केशिका के छिद्र व्यास है, डी आंतरिक कांच केशिका के छिद्र व्यास, w है बाहरी केशिका के आंतरिक व्यास, (सी) गढ़े डिवाइस की तस्वीर है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2. केशिका धारक के सेटअप (ए) केशिका polyacetal प्लास्टिक का बना धारक के डिजाइन:। धारक में व्यास की इकाई मिमी है। (बी) धारक के फोटोग्राफ एक ऊपरी हिस्से और एक नीचे हिस्से से मिलकर बनता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
(ए) टिप के बाहर एक गिलास केशिका डांड़ी, (बी) केशिका की नोक microforge से बाहर कटौती (काले बिंदु के चक्र) और कटौती की योजना का उपयोग कर गिलास केशिका पैना, (सी) गढ़े भीतरी और बाहरी केशिका की तस्वीरें। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा 4. microfluidic युक्ति सेट अप और डब्ल्यू / हे microdroplets की पीढ़ी के फ्लो चार्ट। (ए) बाहरी केशिका की तैयारी। बाहरी केशिका, (बी) बाहरी केशिका धारक के नीचे हिस्से में सेट, (सी) के भीतरी केशिका की तैयारी में पेश surfactants के साथ तेल: जलीय समाधान डॉअन्न की बाल केशिकत्व द्वारा एक आंतरिक केशिका में, (डी) इनर केशिका धारक (क) के ऊपरी भाग में निर्धारित किया है। जांच की जा रही है कि आंतरिक केशिका नमूना ट्यूब (क) में स्थापित भीतरी और बाहरी केशिकाओं के साथ एक डिजिटल माइक्रोस्कोप (बी, सी), (ई) धारक का उपयोग बाहरी केशिका में था। जांच की जा रही है कि बाहरी केशिका एयर तेल इंटरफ़ेस से दूर रखा गया था, (एफ) अंत में, नमूना microtube एक टेबलटॉप झूल-बाहर प्रकार मिनी सेंट्रीफ्यूज द्वारा centrifuged किया गया था। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
। Monodisperse सेल आकार डब्ल्यू / हे microdroplets की चित्रा 5. गठन डिजिटल माइक्रोस्कोप छवियों और आकार के वितरण histograms (एन = 200) विभिन्न व्यास की केशिकाओं का उपयोग कर उत्पन्न microdroplets कीमीटर, डी मैं = 5 (ए, बी), 10 (सी, डी), और 20 माइक्रोन (ई, एफ), (जी) कांच केशिका के छिद्र व्यास और उत्पन्न डब्ल्यू / हे microdroplets के व्यास के बीच सहसंबंध । त्रुटि सलाखों उत्पन्न डब्ल्यू / हे microdroplets के व्यास का मानक विचलन दिखा। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

इस उपकरण का उपयोग, डब्ल्यू / हे microdroplets monodisperse एक जेट-प्रवाह 17 के पठार-रेले अस्थिरता से उत्पन्न किया गया। सूक्ष्म परीक्षण उपग्रह बूंदों की उपस्थिति का खुलासा नहीं किया। इस उपकरण के निर्माण में, तीन महत्वपूर्ण कदम सफलतापूर्वक monodisperse डब्ल्यू / हे microdroplets उत्पन्न करने के लिए आवश्यक हैं। सबसे पहले, तेल युक्त surfactant और जलीय समाधान के एक सीधे प्रवाह की आपूर्ति करने के लिए, चार डिस्क की केशिका छेद एक गाढ़ा पैटर्न में व्यवस्थित किया जाना चाहिए। दूसरा, भीतरी केशिका ध्यान से बाहरी केशिका में डाला गया था क्योंकि केशिका की नोक आसानी से अगर यह संपर्क ऊपरी धारक टूट जाता है। इस आपरेशन के लिए मुश्किल हो सकता है, इसलिए हम एक आवर्धक कांच का उपयोग करना चाहिये। अंत में, आदेश जलीय घोल 17 साल की एक jetting प्रवाह बनाने के लिए, बाहरी केशिका में भीतरी केशिका की स्थिति डब्ल्यू = 100-150 माइक्रोन करने के लिए सेट किया जाना चाहिए। अगर डब्ल्यू / हे microdroplets के आकार के वितरण केन्द्रापसारक mic द्वारा उत्पन्नrofluidic डिवाइस monodisperse नहीं है, बाहरी केशिका में भीतरी केशिका की स्थिति की जाँच करें। बाहरी केशिका में भीतरी केशिका की स्थिति को बदलने के लिए, कृपया धारक के ऊपरी भाग में पेंच की बारी है। इस प्रकार, दूरी डब्ल्यू ठीक से नियंत्रित किया जा सकता है।

monodisperse डब्ल्यू / हे microdroplets बनाने के लिए, वहाँ वर्तमान सीमाएं हैं। वहाँ केन्द्रापसारक दर (यदि आवश्यक) क्योंकि अध्ययन में सभी प्रयोगों डेस्कटॉप सेंट्रीफ्यूज की अधिकतम केन्द्रापसारक दर पर प्रदर्शन किया गया बढ़ाने में कठिनाई है। इसके अतिरिक्त, छोटी बूंद पीढ़ी अलग नमूना समाधान की एक किस्म से मुश्किल है, सीमा सेंट्रीफ्यूज डिजाइन पर निर्भर जा रहा है। भीतरी केशिका सामग्री और समाधान 18 के विभिन्न संयोजनों से समझाया microdroplets प्रदान कर सकता है के रूप में मल्टी बैरल केशिकाओं।

microfluidic युक्ति पारंपरिक microchannel तरीकों पर दो प्राथमिक फायदे हैं: i) ईASY और मजबूत निर्माण, और नमूना समाधान का केवल एक छोटी मात्रा (0.1 μl के द्वितीय) की आवश्यकता)। सबसे पहले, केशिका आधारित केन्द्रापसारक axisymmetric सह बहने microfluidic युक्ति का निर्माण सरल और मजबूत है। केवल पतली केशिकाओं, एक केशिका धारक, और एक नमूना microtube आवश्यक हैं। निर्माण समय डिवाइस के लिए 5-10 मिनट है। डिवाइस का निर्माण अन्य microfluidic डिवाइस के निर्माण की तुलना में कम समय लगता है। इसके अलावा, केशिका धारक मजबूत है और पुन: उपयोग किया जा सकता है। इसलिए, केवल उपभोग्य कांच केशिकाओं और डिवाइस है, जो इसे कम अन्य microfluidic प्रणालियों की तुलना में महंगा बनाता में नमूना microtube हैं। अंत में, के बाद से तेल और जलीय प्रवाह केन्द्रापसारक बल द्वारा तैयार किए गए, वहाँ कोई बेकार मात्रा था। 1-2 सेकंड के लिए, डिवाइस microdroplets की एक बड़ी संख्या उत्पन्न करता है।

Microdroplets उच्च throughput नमूना समाधान की छोटी मात्रा में शामिल प्रयोगों से बाहर ले जाने के लिए आदर्श उम्मीदवार हैंएन। इस उपकरण के साथ, यह सैद्धांतिक रूप से नमूना समाधान के 0.1 μl से सैकड़ों प्रति सेकंड 10 माइक्रोन आकार microdroplets के हजारों की उत्पन्न करने के लिए संभव है। इस प्रकार, इस उपकरण तेजी से मात्रात्मक विश्लेषण के लिए आवश्यक नमूने की मात्रा कम करके कीमती जैविक नमूने के साथ काम रह सकते हैं। इस उपकरण के जैव रासायनिक प्रतिक्रियाओं 6-9 और एकल कोशिका एंजाइमी प्रतिक्रियाओं 10 का विश्लेषण किया जा सकता है।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
2-mm-thick polyacetal plastic plate Tool Nikkyo Technos, Co., Ltd. (Japan) 244-6432-08
Milling machine Tool Roland DG Co., Ltd. (Japan) MDX-40A
End Mill RSE230-0.5*2.5 Tool NS Tool Co., Ltd. (Japan) 01-00644-00501
M2*40 screws Tool Jujo Synthetic Chemistry Labo. (Japan) 0001-024
Glass Capillry Puller Tool Narishige (Japan) PC-10
Microforge Tool Narishige (Japan) MF-900
Inner Glass Capillary Tool Narishige (Japan) G-1
Outer Glass Capillary Tool World Precision Instruments Inc. (USA) 1B200-6
1.5 ml Sample tube Tool INA OPTIKA CO.,LTD (Japan) ST-0150F
Hexadecane Reagent Wako Pure Chemical Industries Ltd. (Japan) 080-03685 
Sorbitan monooleate (Span 80) Reagent Tokyo Chemical Industry Co., Ltd. (Japan) S0060
Milli Q system Reagent Merck Millipore Corporation (Germany) ZRQSVP030
Swinging-out-type Mini-centrifuge Tool Hitech Co., Ltd. (Japan) ATT101
Digital Microscope Tool KEYENCE Corporation (Japan) VHX-2001

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References

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इंजीनियरिंग अंक 108 जल में तेल microdroplets छोटी बूंद microfluidics केन्द्रापसारक microfluidic युक्ति केशिका आधारित axisymmetric सह बहने
केशिका आधारित Monodisperse Microdroplets का आकार चलाया गठन के लिए केन्द्रापसारक Microfluidic डिवाइस
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Morita, M., Yamashita, H., Hayakawa, More

Morita, M., Yamashita, H., Hayakawa, M., Onoe, H., Takinoue, M. Capillary-based Centrifugal Microfluidic Device for Size-controllable Formation of Monodisperse Microdroplets. J. Vis. Exp. (108), e53860, doi:10.3791/53860 (2016).

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