Summary
콘택트 렌즈 CLS () 및 기타 눈 관련 응용 프로그램을 평가하는 현재 시험관 모델은 심각하게 제한됩니다. 제시된 안 플랫폼은 생리적 눈물 흐름, 눈물 양, 공기 노출과 기계적 마모를 시뮬레이션합니다. 이 시스템은 매우 다목적이고 CL에서 분석하여 시험 관내에서 다양한 적용 할 수있다.
Introduction
콘택트 렌즈 (CL) 내의 관심 분야의 두 가지 중요한 부분이 불편 CL 및 신규 애플리케이션의 개발을 포함한다. CL의 불편 함을 기본 메커니즘을 해명하는 것은 수십 년 동안 필드를 회피 한 문제입니다. 8 소설의 개발은 이러한 약물 전달 장치 1,3,9 및 바이오 센서 등의 기능 CL에서, 10-12 성장 관심의 영역입니다, 상당한 잠재 시장과. 두 경우에, 시험 관내 모델에서 정교한는 개발 단계에서 렌즈 재료 및 디자인 특성 적절한 선택을 지원하기 위해 적절한 정보를 제공 할 것이다. 불행하게도, CL에서 다른 눈 관련 응용 프로그램을 평가하기위한 시험 관내 모델에 전류가 상대적으로 원유와 단순한입니다. 전통적으로, 눈물 성막 또는 약물 전달을 평가하는 시험 관내 연구 CL은 고정 된 부피의 유체를 포함하는 정적 대량 튜브에서 수행되는 GREATLY 생리 양을 초과합니다. 또한,이 단순한 모델은 천연 눈물 흐름 성분과 안구 환경 인자를 정의하는 둘 점멸 반사를 없다.
정교한, 생리 학적으로 중요한 눈 "모델"의 개발은 멀티 - 징계 접근 방식을 필요로하고 생체 검증에 상당한 필요합니다. 이러한 이유로, 우리의 생체 외 눈 모델에 대한 기본 골격 모델이 차후의 업그레이드 및 변조를 통해 개선 될 수있는, 범용성이 높은 것이다. 최신 모델은 눈물 양, 눈물 흐름의 기계적 마모 및 대기에의 노출을 시뮬레이션 할 수있다. 목표는 생체 내 및 생체 관측에 예측하고 무료로 의미있는 결과를 제공 할 것 체외 모델을 만드는 것입니다.
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Protocol
모든 실험은 대학의 워털루의 동물 연구 윤리위원회에 의해 설명 된 모든 관련 지침에 따라 준수에 완료되었다. 소 눈이 넉넉한 지역 도살장에서 기증된다.
1. 아이 모델
- 설계 및 금형 (13)의 제조
- 인간의 성인 눈의 평균 생리 학적 차원에 따라 눈 모델을 디자인합니다. (13)
- 안구와 눈 모델의 눈꺼풀 조각 사이에 250 ㎛의 간격을 둡니다. 컴퓨터 지원 설계 (CAD) 소프트웨어를 사용하여 각 금형을 설계한다.
- 의 AutoCAD 또는 솔리드 웍스의 새로운 .cad 파일 또는 .sldprt 파일을 만듭니다. 인간의 안구 / 눈꺼풀의 3D 모델을 생성합니다. 모델의 금형을 만들고 .STL 파일로 금형을 저장합니다.
- 3D 프린터 소프트웨어로 가져 오기 .STL 파일 (replicator2에 대한 예를 들어, makeware). 인쇄의 매개 변수 (위치, 희소성, 크기, 방향, 부드러움 등을 지정 13.
- 3D 프린터는 읽기위한 G 코드 파일로 파일을 저장합니다. 이러한 PLA (폴리 락트산), ABS (아크릴로 니트릴 부타디엔 스티렌), PC (폴리 카보네이트), 또는 이들의 조합으로서 선택 물질은 몰드 (13)를 인쇄한다.
- 선택의 재료의 원하는 필라멘트를 설치합니다. 읽을 수있는 3D 프린터에 G 코드 파일을 가져옵니다. 금형을 인쇄합니다.
주 : 눈 모델에 매끄러운 표면이 요구되는 경우 또는, (CNC) 머신을 제어하는 컴퓨터의 수치를 이용하여 눈 금형을 생산한다. CNC 몰드 생산 용 금형 재료가 더 이상 열적 플라스틱에 한정되지 않지만, 금속, 세라믹, 폴리 테트라 플루오로 에틸렌과 같은 화학적 저항성 중합체로 연장된다. - 절단 드릴에 연결되어있는 CNC 소프트웨어 인터페이스를 엽니 다. 전면, 상단, 측면 및 제어 소프트웨어 인터페이스에서 이전에 건설 안구 / 눈꺼풀 모델 금형의 사시도에 따라 3D 금형을 구축합니다. 에 적합한 매개 변수를 선택가공 (비트 크기, 기판 소재, 재료 두께) 금형을 잘라 진행합니다.
- PDMS를 사용하여 접안 렌즈의 합성
- 주사기를 사용하여, PDMS (폴리 디메틸 실록산) 염기 10 ml의 부피를 측정하고, 15 내지 50 mL의 원심 분리 튜브로 채운다. PDMS의 총 중량 엘라스토머 솔루션의 V / w는 10 %를 추가합니다. 교반 막대를 사용하여 용액 잘 섞는다.
- 안구 및 눈꺼풀 금형에 PDMS 솔루션을 따르십시오. PDMS의 RT는 O / N에 정착 할 수 있도록 (또는 적어도 12 시간)하여 중합을 시작하고, 기포가 중합체로부터 분해 할 수 있도록.
참고 : 상승 또는 확장 할 수있는 PDMS에 남아있는 기포가 없는지 확인합니다. - 그 후, 1 시간, 5 분 동안 150 ° C (302 ° F)의 75 ° C (167 ° F) 오븐에 금형을 넣어. 부드러운 젤의 경우, PDMS이 완전히 중합 적어도 48 시간 동안 실온에서 앉아 보자.
- 몇 분 동안 냉동실에 샘플을 넣어; 이는 PDMS를 축소하고 단순화몰드로부터 표본을 제거. 얇은 주걱을 사용하여 금형의 접안 렌즈의 압축을 풉니 다.
- 안구 및 눈꺼풀 편 사이의 공간에 용액을 전달하기 위해, 1/16 "동일 다리 결합기 튜브 커넥터 1/16"X 1/8 "폴리 테트라 플루오로 에틸렌 튜브를 연결하고 튜브 구멍의 눈꺼풀 피스에 부착 .
- 아가로 오스를 사용하여 안구 조각의 합성
주 : 안구 조각을 아가 로스 등의 다른 중합체를 사용하여 합성 할 수있다. 다음 절차는 또한 PDA (포테이토 덱 스트로스 배지) 또는 SDA (사부로 포도당 한천)로서 한천 유형의 다양한 눈 조각을 생산하도록 변형시킬 수있다.- 2 % (2 ㎍ / 100 ㎖) 겔 측정 아가 2 g의 생성 및 초순수 100 ㎖와 혼합한다. 아가로 오스가 완전히 용해되도록 종기 (100 ° C)에 대한 해결책을 가져옵니다. 용액을 5 분 동안 식히십시오.
- 안구 금형에 솔루션을 붓고 솔루션은 3 냉각 할 수 있도록RT에서 0 분. 주걱으로 안구 조각을 제거합니다. A의 안구 한천 보관 -20 나중에 사용하기 위해 ° C 냉장고. 미생물학 연구의 경우, 고압 증기 멸균 및 / 또는 자외선 조사에 의한 안구 금형을 소독.
- PDMS 안구에 소 각막의 설립
참고 :.이 프로토콜은 Parekh 씨 등에서 적응하고있다 (14)- 층류 후드 무균 조건에서 소 각막 절개 및 혼합을 수행한다. 눈을 취득하고 당일을 해부.
- 사용하기 전에 10 분 동안의 흐름 후드를 켜고 70 % 에탄올 알코올로 소독. 모든 자료 및 악기는 273 ° F / 45 분 동안 133 ° C에서 고압 증기 멸균에 의해 멸균하고, 흐름 후드 입구에서 더 이상 4 인치 위치에 있는지 확인합니다.
- 2 분 동안 희석 된 포비돈 요오드 용액을 넣은 비커에 소 눈 담근다. 인산염 완충 식염수를 넣은 비커에 눈 린스 (PBS) pH 7.4. 사용 포셉 부드럽게 유리 페트리 접시, 각막면이 위를 향에 눈을 넣습니다.
- 무딘 끝 해부 가위로 공막 부착 지점에서 절단하여 과도한 근육과 지방 조직을 제거합니다. 동물 폐기물 지정된 멸균 비이커에 초과 조직을 폐기하십시오.
- 마이크로 가위를 사용하여 눈의 결막을 제거합니다. 윤부로부터 최소 1 cm의 거리를 유지, 멸균 거즈로 눈을 감 쌉니다.
- 기본 맥락막 및 유리체의 침투를 방지하며 표면으로되도록 메스를 사용하여 약 2mm 윤부 영역으로부터 공막 절개. 조심스럽게 자연 곡률에서 각막을 변형없이 메스 또는 해부 가위를 사용하여 360 °로 절개를 확장합니다.
- 미세 집게로, 눈의 각막을 제거합니다. 집게를 사용하여 조심스럽게 부착 포도막 조직을 제거하고 PBS로 각막을 씻어.
- 문화 멸균 용기에 31ºC에서 각막을 저장매체 (매체 (199)와 같은) 조직의 수분과 영양 세포를 유지하기 위해 3 % 소 태아 혈청을 함유.
- 실험에 앞서, PDMS의 안구에 절제 각막 휴식, 그리고 전문 클립 - 온과 함께 두 조각을 고정.
2. 깜박임 플랫폼
- 깜박임 플랫폼의 설계 및 생산
주 : 깜박 플랫폼이 세 가지 기능 부분으로 구성되어있다 : 눈 모델 (섹션 1에서 설명), 기어 시스템, 전자 시스템.- 디자인은 눈 모델 (섹션 1.1)에 기술 된 것과 유사한 CAD 및 3D 인쇄를 사용하여 점멸 플랫폼 제조. 는 접안 렌즈의 횡 방향 및 회전 동작에 모터의 회전 간단한 변환되도록 기어 시스템을 설계한다. 15
- 피니언과 기어기구를 이용하여 눈꺼풀 편에 연결된 피니언의 횡 방향 운동에 스테핑 모터의 회전 운동을 변환.
- 사용공액 기어에있어서, 세 개의 다른 안구 피스 세 개 (또는 그 이상)의 회전 운동에 스테퍼 모터의 하나의 회전 운동을 증폭한다.
- 둘 사이의 거리가 일정하게되도록, 두 기어 시스템 눈꺼풀 용 및 안구에 대한 하나의 정렬. 마이크로 모터 차폐, 2 개의 모터를 전자 시스템을 조립한다.
참고 : 깜박이는 운동으로 기어 시스템에 의해 번역됩니다 회전 모터를 제공하는 두 개의 스테퍼 모터를 사용합니다. - 마이크로 컨트롤러에 적층 모터 방패로 구성된 시스템에 두 개의 스테퍼 모터를 연결합니다. 연결 및 오픈 소스 소프트웨어 제품과 함께 작동하는 전자 부품을 구성합니다.
- 분당 발사 속도 (RPM), 전방 발사 수, 후방 발사 수 및 회전 스타일 같은 모터 파라미터를 제어하도록 시스템을 프로그램.
참고 : 자세한 내용은 보충 "아두 이노 코드 파일"을 참조하십시오. - 석사에서 시스템 소프트웨어를 다운로드제조 업체들이 적시 한 '웹 사이트.
- 소프트웨어를 설치하고 엽니 다. 원하는 구성에 스텝 모터를 제어하는 코드를 작성한다. 연구자에 의해 정의 된 모터가 원하는 방식으로 이동할 수 있도록 전자 시스템에 전원을 공급하는 공급원과 시스템을 연결한다.
참고 : 추가 "아두 이노 코드 파일"을 참조하십시오.
- 미세 유체와 어셈블리 (인공 눈물 솔루션)
- 합성 안구와 눈꺼풀 조각을 타고 눈 모델에 대한 해당 클립 기능에 그들을 미끄러. 눈꺼풀 조각 (섹션 1.2.5)과 미세 유체 펌프에 주사기와 결합하고 위치 튜브를 연결합니다. 테스트 플랫폼을 실행하고 일관된 움직임을 확인합니다.
- 프라임 튜브와 인공 눈물 액 (ATS)의 꾸준한 흐름을 확인합니다. ATS에 대한 레시피는 이전에보고 된 바있다. (16)
- 수동으로 평평한 평면 함께 눈 모델 부품을 이동하도록 상기 안구와 시선뚜껑 접촉하고있다. 원하는 값으로 미세 유체 펌프의 유량을 설정한다. 1.5 μL / 분에 생리 흐름 속도를 설정합니다. (17)
- 실험을 시작하기 위해 펌프와 액추에이터를 시작합니다. 약물 전달 실험을 위해, 안구 부분에 약물 함유 콘택트 렌즈를 배치했다.
- 플로우를 통해 유체가 12 웰 플레이트에 똑 수 있습니다. 원하는 설정된 시간 간격, 예컨대 UV-비스 분광법이나 형광 검출 등의 일반적인 방법을 사용하여 분석 물 또는 약물 농도를 정량화. 1,4,18을
- 콘택트 렌즈에 눈물 성분의 침착을 평가하는 연구를 들면, "안구"조각에 콘택트 렌즈를 배치합니다. 버려 질 수있는 관류 액을 모은다.
- 원하는 시간 간격 후에 안구 부분에서 콘택트 렌즈를 제거하고 같은 초점 현미경으로 추가 분석을 위해 렌즈를 준비한다.
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Representative Results
기계 숍에서 3-D 인쇄에서 얻어진 합성 눈 금형은도 1에 나타내었다. 이들 주형은 원하는 특성으로 접안 렌즈를 생산하기 위해, 아가 로스 PDMS와 같은 중합체의 다양한 이용 될 수있다. 미세 유체 주사기 펌프로 눈 모델 플랫폼의 손짓 조립체는도 2에 도시된다.이 플랫폼과 눈꺼풀 피스의 움직임 아웃 횡 통해 안구 부재의 회전, 대기에의 노출을 통해 기계적 마모를 시뮬레이션한다. 누액 원하는 유량 미세 유체 펌프로부터 눈꺼풀에 주입되고, 관류 액은 12 웰 플레이트에서 수집 될 수있다.
소의 렌즈의 절개 및 PDMS 접안 렌즈에 장착하는 절차는도 3에 도시되어있다. 과량의 조직이 눈으로부터 분리 및 폐기는 제거하여결막의. 각막의 제거는 윤부 근처의 공막 절개에 시작된다. (4) 분석 시험 관내에서 다양한 사용될 수 아이피스의 다양성을 나타낸다. 표시된 장착 안구 조각 PDMS, 한천에서 합성 및 전 생체 소 각막은 PDMS의 안구 부분에 장착.
그림 5는 CL에서의 항생제, 목시 플록 사신의 방출을 평가하는 연구를 보여줍니다. 18 기존의 유리 병 모델에서 측정 할 때, 약물 방출은 고원 단계 다음에 첫번째 2 시간 이내에 발생합니다. 대조적으로, 새로운 눈 모델은 최대 24 시간. 18 CL에서의 콜레스테롤의 침착을 평가 한 연구는 그림 6에 표시됩니다에 대한 약물 방출 속도가 느린와 지속 가능을 보여줍니다.이 연구에서 콜레스테롤 형광 NBD의 형태로 태그되었습니다 - 콜레스테롤 (7-nitrobenz-2 옥사 -1,3- diazol -4- 일 - 콜레스테롤) 및 deposition은 레이저 스캐닝 공 초점 현미경을 사용하여 영상화 하였다. 결과는 증착 과정은 바이알에서 수행 될 때 눈 모델과 비교하여 상당한 차이가있는 것을 나타낸다.
그림 1. 접안 렌즈 금형. (A) 기계 공장에서 안구 조각 금형. 3-D 인쇄에서 (B) 아이 뚜껑 금형. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2. 체외 안구 플랫폼입니다. (A) 원형 운동은 기계적 마모를 시뮬레이션합니다. (B)의 횡 방향 운동 간헐적 공기 생산노출. (C) 눈꺼풀에 눈물 유체 주입. (D) 웰 플레이트를 수집. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3. 해부 및 소 각막의 설립. 초과 조직의 (A) 제거. 결막의 (B)를 제거. 윤부 영역으로 (C) 절개. (D) 그 절제 각막 저장 또는 PDMS 눈에 볼 조각에 장착 할 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 4. 샘플 접안 렌즈. 콘택트 렌즈, 한천 눈 조각과 함께 PDMS 눈 조각의 샘플 생체 소 각막 장착 된 눈 조각. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
체외 안구 플랫폼을 사용하여 그림 5. 약물 전달.에서 매일 일회용 콘택트 렌즈에서 목시 플록 사신의 릴리스 (A) 많은 양의 정적 유리 병 (B) 눈 모델 비전 연구 협회의 허가와 (재 인쇄 및 안과). 모든 데이터는 평균 ± 표준 편차로보고됩니다 (18). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
체외 안구 플랫폼을 사용하여도 6 콜레스테롤 침착. etafilcon의 A, nelfilcon의 A, nesofilcon의 A, ocufilcon의 B, A delefilcon, somofilcon의 A, narafilcon (A)의 단면을 나타낸 공 촛점 이미지에서 NBD 콜레스테롤 4 시간 배양 한 후 유리 병 및 눈 모델입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
거기에 특별한주의를 필요로하는 프로토콜 내에서 세 가지 중요한 단계는 다음과 같습니다 설계 및 금형 생산 (섹션 1.1), 플랫폼 어셈블리 (제 2.2.1-2.2.3)을하고, 실험 실행을 감시 (제 2.2.4-2.2.7 ). 설계 및 금형 (1.1 절)의 제조의 측면에서, 안구 부분은 인간 각막의 크기에 따라 설계되어야한다. 그러나, 완벽한 시판 콘택트 렌즈 (CL)에 맞는 생성 될 수있는 안구 편 전에 몰드의 복수의 원형을 요구할 수있다. 안구 및 눈꺼풀 부분이 CL이 존재하는 경우 누액 전체 눈 모델에 걸쳐 원활하게 유입되도록 접촉하는 경우 또한, 250 ㎛의 요구가 유지되어야한다. 이 거리는 미래의 반복에서 변경 될 수 있지만 미만 150 μm의는 CL에 맞게 충분한 공간을 허용해서는 안됩니다. 플랫폼 어셈블리 (제 2.2.1-2.2.3)는 안구와 눈꺼풀 조각 접점에 와서 않도록 세심한주의가 필요합니다점멸 동작시 중부 표준시. 접안 렌즈는 완벽한 접촉하지 않는 경우, 닫힌 눈꺼풀의 시뮬레이션 및 기계적 마찰이 실패합니다. 오퍼레이터는 안구와 눈꺼풀 모두에 접촉하고, 해당 프로그램과 같이 마찰이 발생하도록 몇 사이클 동안의 플랫폼 움직임을 관찰한다. 현재 플랫폼은 1 개월간 계속 실행하도록 설계되어 있지만 실험 (제 2.2.4-2.2.7)을 실행할 때 작업자는 항상 시스템의 안정성에 매 24 시간을 확인해야합니다. 현재 플랫폼은 온도 나 습도 제어를 소유하지 않으며, 이러한 매개 변수의 변동이 CL에서를 건조 수 있기 때문에 중요하다. 이 경우, 조절 된 습도 및 온도 챔버 내의 눈 모델을 배치했다. 또한, 약물 전달 실험에서 수집 된 관류 액을 분석하거나 샘플의 현저한 증발을 방지하기 위해 적어도 매 2 시간을 저장한다.
제시된 두 가지 제한 사항이 현재있다눈 모델입니다. 첫 번째 제한은 주위 환경에 대한 노출에 관해서이다. 눈 조각이 제어 된 실내에 묶여 있기 때문에 현재, 이러한 작업 영역의 온도 및 습도 등의 변화는 실험의 다양한 양태에 영향을 미칠 것이다. 환경이 너무 건조 경우 예를 들어, CL에서 빨리 건조 및 안구 조각에서 분리 할 수 또는 흐름을 통해 유체가 증발 할 수있다. 이 문제를 해결하기 위해 미래의 반복을 제어 된 온도 및 습도 챔버 내의 눈 모델을 수용한다. 두 번째 제한은 복잡성 안구 부분에 관한 것이다. 현재 접안 렌즈는, 간단 아가로 오스 중 하나 PDMS 또는 구성된, 어느 것도 진정으로 각막 표면 특성을 나타냅니다. 향후 연구는 가까운 모방 각막 표면 구조를 눈의 모델을 생산하는 것을 목표로합니다.
시험 관내에서 눈 연구는 일반적으로 생체 내 연구 이전 테스트 단계로 볼 수 있습니다. 하나,그렇지 않으면 혼자 생체 내 연구에서 얻을 수없는 중요한 통찰력을 제공, 시험 관내 연구는 또한 생체 데이터를 보완 할 수 있다는 점에 유의하는 것이 중요합니다. 유감스럽게도, 테스트 CL에서를위한 체외 모델 현재는 기초하고 적절하게 생체 내 환경을 모방하는 몇 가지 주요 구성 요소가 부족하다. 예를 들어, 시험 관내 CL 연구 인산염 완충 식염수 2-5 ㎖, 크게 7.0 ± 2 μL에 생리 눈물 양을 초과 1-6을 함유하는 바이알에 수행된다. (7) 또한, 상기 안구 환경의 두 가지 중요한 요인 천연 눈물 흐름 및 깜박이는 반사는, 단순한 정적 유리 병 모델에서 존재하지 않는다. 미세 유로 인열 보충 성분 (2)를 포함하여, 종래의 유리 병 모델의 제한은 연구원에 의해 인식되고, 그리고 시도 안구 환경을 시뮬레이션하는 생체의 눈 모델에 고유하게 생성 된0-24 및 / 또는 간헐적으로 공기 노출. 25,26 놀랍게도 이들 실험에서 생성 된 결과들은 종래의 유리 병 모델에 의한 것보다 매우 다르고 더 가깝게 생체 데이터가 유사 할 수있다. 20-25을 따라서, 현상 없음 검사하는 체외 눈 모델에서 복잡한 CL에서의 안구 표면과 렌즈 물질의 상호 작용에 대한 새로운 통찰력을 제공하고, 새로운 재료와 앞으로 수십 년 동안 CL에서의 새로운 응용 프로그램의 개발을 촉진하는 데 도움이됩니다.
틀림없이, 체외 눈 모델의 가장 논쟁 측면 중 하나는 눈이 CL에서의 약물 전달에 있어서는 특히 중요하다 무한 싱크 유사한 여부이다. 무한 싱크 조건 하에서 주위 용액의 부피는 약물 방출은 약물의 용해도에 의해 영향을받지 않도록, 약물 포화 량보다 훨씬 더 높다. 전열로 바이알 27 옹호자ptable 눈 모델 각막, 결막 및 무한 싱크로서 기능 안구 조직을 함께 둘러싸는 것을 주장한다. 이론이 사실이 될 수 있지만, 약물 먼저 눈물 유체에 용해해야합니다. 이 속도 제한 단계는 가능성이 싱크 조건이 아니며, 모두 눈물 볼륨에 의존하고 모델 시뮬레이션으로 흐를 것이다.
제시된 모델의 고유 ID는 눈물 필름을 에뮬레이트 할 수있는 능력에있다. 투피스 디자인은 "각막 / 공막"안구 부와 "일말"채용함으로써, 두 조각이 접촉 할 때 안구 부분에 걸쳐 눈물 막의 균일하게 확산 박막을 만들 수있다. 상기 안구 표면을 시뮬레이션하기 위해 기계적 마모 및 대기에의 노출은 두 개의 기계적 액츄에이터를 통해 모델에 통합된다. 눈꺼풀 조각이 횡 방향 이동함에 따라, 그것은 눈 간헐적 공기 노출 폐쇄를 시뮬레이션한다. 안구의 회전은 두린 생산 된 기계적 마모를 시뮬레이션g가 점멸. 시스템은 생리적 유속 누액 또는 기타 원하는 유량과 눈 모델을 불어 미세 유체 펌프에 연결되어있다. 눈물 막 두 조각에 접촉 할 때마다 형성되고, 상기 두 부분이 분리 될 때 눈물 막 파괴가 발생한다.
목표는 분석 시험관 내에서 다양한에 대한 CL에서 평가하는 보편적 인 테스트 플랫폼을 만드는 것입니다. 다재다능하기 위하여, 안구 조각 등 다양한 폴리 디메틸 실록산 등의 중합체 (PDMS) 또는 아가로 합성 할 수있다. 간단한 안구 연구의 경우, 각각 소수성과 친수성 표면을 나타내는 이들 중합체는 충분합니다. 더 복잡한 분석이 필요하지만, 예를 들어 안구 약물 침투 또는 독성 연구에 눈 조각은 또한 수정 될 필요가있을 것이다. 예컨대 도시 된 바와 같이, 생체 각막의 포함과 같은 모델이 추가 변형은 비교적 가능하다. 하지만, 더 검증 연구필요하며, 향후 연구는 생체 내 모델과 비교하여이 모델의 타당성을 개선하는 것을 목표로한다.
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Disclosures
저자는 공개 아무것도 없어.
Acknowledgments
저자는 고급 안과 재료의 개발에 대한 우리의 결제 수단 NSERC 20/20 네트워크를 인정하고 싶습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Arduino Uno R3 (Atmega328 - assembled) | Adafruit | 50 | Board |
| Stepper motor | Adafruit | 324 | Motor and Motor shield |
| Equal Leg Coupler 1.6mm 1/16" | VWR | CA11009-280 | 50 pcs of tube connector |
| Tubing PT/SIL 1/16"x1/8" | VWR | 16211-316 | Case of 50feet |
| PDMS | Dow Corning | Sylgard 184 Solar Cell Encapsulation | |
| Agarose, Type 1-A, low EEO | Sigma-Aldrich | A0169-25G | |
| PHD UltraTM | Harvard Apparatus | 703006 | MicroFluidic Pump |
| Bovine cornea | Cargill, Guelph/ON | ||
| Soldidworks | Dassault Systemes | Software | |
| 3-D printing | University of Waterloo - 3D Print Centre | ||
| Dissection tools | Fine Science Tools | General dissection tools | |
| Medium 199 | Sigma-Aldrich | Culture medium storage for cornea | |
| Fetal bovine serum | Thermo Fisher | Add to culture medium, 3% total volume |
References
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