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Biology

Myocardial प्रदर्शन और ऑक्सीजन की खपत के अध्ययन के लिए कृंतक कार्य हार्ट मॉडल

Published: August 16, 2016 doi: 10.3791/54149
* These authors contributed equally

Introduction

अलग अंगों का अध्ययन क्या विवो में संभव है परे शारीरिक शर्तों के नियंत्रण के लिए परमिट। पूर्व vivo दिल की तैयारी पहले ओटो Langendorff, 1 जो प्रतिगामी छिड़काव के साथ एक अलग मॉडल वर्णित द्वारा वर्णित किया गया। बाद में, दूसरों "काम दिल" मॉडल है, जिसमें मायोकार्डियम दोनों दबाव और मात्रा का काम करता है का वर्णन किया। 2 इस तरह की तैयारी दौरे कार्रवाई के तंत्र, 3 दौरे चयापचय, 4-6 और cardiotonic दवाओं के प्रभाव elucidating में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है। 7 9

कि दौरे सिकुड़ना बढ़ाने दवाओं के उपयोग के गंभीर रूप से बीमार रोगियों में आम है। हालांकि, कुछ डेटा सिकुड़ना और दौरे ऑक्सीजन की खपत, डेटा पर इन दवाओं जो पश्चात की स्थापना में की दिल की विफलता के नैदानिक ​​लक्षण के साथ रोगियों की देखभाल में उपयोगी हो सकता है के सापेक्ष प्रभाव की तुलना में उपलब्ध हैं। 10 हालांकि, क्योंकि ज्यादातर cardiotonic दवाएं न केवल मायोकार्डियम, लेकिन यह भी arteriolar प्रतिरोध, शिरापरक समाई 11, और एक रोगी की चयापचय दर, 12 पूर्व vivo पृथक दिल मॉडल इष्टतम साधन है जिसके द्वारा पर ऐसी दवाओं के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए रहने को प्रभावित मायोकार्डियम समुचित।

हम दौरे समारोह और ऑक्सीजन की खपत पर inotropic दवाओं के लोड स्वतंत्र अध्ययन के लिए एक पूर्व vivo मॉडल के उपयोग का वर्णन। Sprague Dawley चूहों से दिल एक बाईं दिल मॉडल काम कर वेंट्रिकुलर का उपयोग कर cannulated और एक संशोधित क्रेब्स Henseleit perfusate का उपयोग कर भरकर रखा गया था। महाधमनी और बाएं आलिंद के दबाव नियंत्रित किया गया। दबाव मात्रा प्रतिबाधा कैथेटर सिस्टोलिक और डायस्टोलिक समारोह की सतत निगरानी के लिए शिखर पंचर के माध्यम से बाएं वेंट्रिकल में रखा गया था। ऑक्सीजन की खपत लगातार छोड़ा आलिंद perfus के बीच ऑक्सीजन सामग्री में अनुक्रमित अंतर के रूप में मापा गया थाखाया और फेफड़े के धमनी प्रवाह। चिकित्सा बाएं आलिंद ब्लॉक में संचार कर रहे थे परीक्षण किया जाना है, और हृदय प्रदर्शन और ऑक्सीजन चयापचय में परिवर्तन मापा जाता है और एक तुरंत पूर्ववर्ती आधारभूत साथ तुलना की गई।

Protocol

इस प्रोटोकॉल संस्था के जानवरों की देखभाल और उपयोग समिति के तहत एक मौजूदा प्रोटोकॉल के तहत किया जाता है।

1. अध्ययन के लिए तैयारी

  1. क्रेब्स-Henseleit बफर (KHB) जलाशय (42 डिग्री सेल्सियस के लिए सेट) गर्म करने के लिए पानी के स्नान पर मुड़ें।
  2. KHB (मिमी) 128 NaCl, 5.7 KCl युक्त 16 एल, 1.3 MgSO 4, 25 NaHCO 3, 2.7 2 CaCl, 0.53 EDTA, 0.54 एनएसी 3 एच 33, और 10.8 डेक्सट्रोज। 13 सब्सट्रेट जनता इस प्रकार हैं तैयार : 27.584 जी NaCl, 1.58 छ KCl, 0.578 जी MgSO 4, 8.401 जी 3 NaHCO, 1.47 जी 2 CaCl, 0.744 ग्राम EDTA, 0.22 छ ​​एनएसी 3 एच 33, और 7.208 जी डेक्सट्रोज।
    नोट: इन घटकों प्रयोग के दिन संविधान के लिए पाउडर के रूप में शंक्वाकार ट्यूब में संग्रहित किया जा सकता है।
    1. एक 0.22 माइक्रोन फिल्टर के माध्यम से फिल्टर विआयनीकृत पानी की 4 एल।
    2. इस पानी की 3.7 एल एक 4 एल में जोड़ेबीकर। सभी घटकों को पानी के लिए 2 CaCl के अलावा जोड़ें।
    3. एक अलग बीकर का उपयोग कर पानी की शेष 300 मिलीलीटर में 2 CaCl भंग।
    4. 1 एल / 5 मिनट के लिए मिनट (LPM) में 95% 2 हे / 5% सीओ 2 के साथ समाधान आक्सीजन के साथ मिलना। यह 7.40 पीएच को सही और 2 CaCl के विघटन को बढ़ाता है।
    5. 2 CaCl KHB के शेष में जोड़े।
    6. एक जलाशय को पूरा KHB जोड़ें और 30 मिनट के लिए सभी ट्यूबिंग के माध्यम से प्रसारित। सुनिश्चित करें कि सिस्टम स्थूल बुलबुले के लिए स्वतंत्र है। 0.5 LPM पर 95% 2 हे / 5% सीओ 2 के साथ आक्सीजन के साथ मिलना।
      नोट: KHB नहीं 1 से अधिक के लिए फ्रिज में रात भर संग्रहित किया जा सकता है -, 2 दिन कमरे के तापमान और फिर से उपयोग के लिए फ़िल्टर को वापस लाया। प्रयोगों के बीच KHB पुनः प्रयोग न करें।
    7. बर्फ के ठंडे KHB के साथ 2 एक्स 50 मिलीलीटर साफ बीकर तैयार है और उन्हें विच्छेदन स्टेशन के पास बर्फ की एक बाल्टी में जगह है। सुनिश्चित करें कि KHB पूर्व से पहले बर्फ के ठंडे (बल्कि ठंडा तुलना में) है दिल रोपण।
    8. एक 10 मिलीलीटर अंशांकन करने से पहले 30 मिनट, निर्माता के निर्देशों के अनुसार के लिए KHB फ़िल्टर के साथ भरा सिरिंज में सूक्ष्म दबाव मात्रा (पीवी) कैथेटर रखें।
      नोट: KHB का तापमान सोख करने के लिए पीवी कैथेटर संभव के रूप में 37 डिग्री सेल्सियस के करीब के रूप में होना चाहिए इस्तेमाल किया।
  3. संज्ञाहरण और जानवर के लिए विदारक स्टेशन तैयार करें।
    1. जलाशय में पर्याप्त isoflurane सुनिश्चित करें। 1 मिलीलीटर सिरिंज में हेपरिन के 500 यू ड्रा; इस सिरिंज पर एक 26 गेज (1/2 ") सुई जगह है। जानवर anesthetizing के लिए एक मुखौटा तैयार करें।
  4. 80 एमएमएचजी को महाधमनी ब्लॉक छिड़काव दबाव और बाएं आलिंद (ला) 10 एमएमएचजी को ब्लॉक छिड़काव दबाव सेट करें। ओपन महाधमनी ब्लॉक और ला ब्लॉक दोनों गर्म KHB बाहर ड्रिप के लिए अनुमति देने के लिए। पशु काटना करने के लिए तैयार है, KHB की एक सतत धीमी ड्रिप बाहर अनुमति देने के लिए महाधमनी ब्लॉक खुला।
  5. निर्माताओं के निर्देशों के अनुसार पीवी कैथेटर जांचना।
"> 2। पशु तैयारी और विच्छेदन

नोट: सर्वोत्तम परिणामों के लिए, यह सुनिश्चित पशु जी 300 और 500 के बीच है; हमने पाया है कि 425 से 450 ग्राम के बीच एक जानवर वजन हमारे सिस्टम के लिए आदर्श है।

  1. (- 2% 1) जब तक पशु बेहोश है एक कक्ष का उपयोग isoflurane में पशु anesthetize। विच्छेदन स्टेशन के लिए जानवर स्थानांतरण और isoflurane और जानवर पर ऑक्सीजन के साथ संज्ञाहरण मुखौटा जगह है। बेहोश करने की क्रिया के स्तर का आकलन करने के लिए पैर की अंगुली चुटकी प्रदर्शन करना। आँखों पर पशु चिकित्सक मरहम लागू जबकि संज्ञाहरण के तहत सूखापन को रोकने के लिए।
  2. हेपरिन, उदर गुहा में 500 यूनिट intraperitoneal इंजेक्षन। 10 मिनट की अनुमति के लिए हेपरिन अवशोषित हो। टेप के साथ पशु के अंगों को सुरक्षित छाती के दृश्य बढ़ाने के लिए।
  3. दिल के विच्छेदन।
    1. एक बार जब यह सुनिश्चित करने के एक पैर की अंगुली चुटकी करने के लिए कोई जवाब नहीं है कि वहाँ, संदंश के साथ उदर गुहा से दूर त्वचा उठा और फिर कैंची का उपयोग पेरिटोनियल गुहा काटकर अलग कर देना, टी की वक्र निम्नलिखितवह पसलियों के पीछे कोण करने के लिए वापस डायाफ्राम।
    2. एक बार जब डायाफ्राम दिखाई दे रहा है, छोटे कैंची, पूर्व में कटौती की दिशा छाती में प्रवेश के लिए अनुमति देने के लिए निम्नलिखित डायाफ्राम के पूर्वकाल सतह के साथ कटौती का उपयोग कर। कांख को द्विपक्षीय स्तर पर कक्षा रेखा के साथ प्रत्येक कटौती बढ़ाएँ।
      ध्यान दें: अगले चरणों का प्रदर्शन किया जाना चाहिए कुशलता के बाद से एक बार वेंटिलेशन डायाफ्राम छिन्न है समझौता हो जाएगा।
    3. जिफाएडा प्रक्रिया संदंश का उपयोग करने से पूर्व से ribcage वापस लेना। पेरीकार्डियम और फुस्फुस काटकर अलग कर देना।
    4. सिर्फ डायाफ्राम से ऊपर अवर रग Cava (आईवीसी) और महाधमनी को पहचानें और एन गुट पूर्व से कुंद संदंश का उपयोग कर उन्हें वापस लेना।
    5. बड़े, घुमावदार कैंची का प्रयोग, तेजी से आईवीसी और महाधमनी भर में एक चीरा बनाने, एन गुट सीने से बाहर दिल और फेफड़ों खींच रहा है। घेघा, श्वासनली, प्रगंडशीर्षी धमनियों और नसों छाती से हृदय और फेफड़ों को दूर करने के cephalad कट। तेरा आबकारीऊतक के इस ब्लॉक के साथ mic ऊतक। देखभाल आरोही महाधमनी के समीपस्थ हिस्से में कटौती नहीं ले लो।
    6. तुरंत ठंडा KHB में हृदय और फेफड़ों को विसर्जित कर दिया और चरण 1 में वर्णित के रूप में Langendorff तंत्र, पहले से स्थापित करने के लिए कदम।

3. महाधमनी नलिका

  1. एक फ्लैट पकवान में दिल फेफड़ों जटिल जगह है और थाइमस और महान वाहिकाओं प्रयोगकर्ता और टेबल का सामना करना पड़ फेफड़ों के पीछे पहलू का सामना करना पड़ के साथ दिल से उन्मुख। थाइमस के दो पालियों अलग खींच और महाधमनी से प्रगंडशीर्षी धमनियों की उड़ान भरने की पहचान।
    1. पकवान के किनारे पर महाधमनी कपड़ा और महाधमनी महाधमनी वाल्व के ऊपर लगभग 5 मिमी छोटे कैंची, सिर्फ सही अवजत्रुकी धमनी के उड़ान भरने के लिए समीपस्थ का उपयोग कर आड़ा काट।
      ध्यान दें: चीरा एक साफ गोल चक्र उपज चाहिए - पार अनुभाग में महाधमनी। यदि यह बंद कोण है (यानी, एक विस्तृत अंडाकार)या अधूरा, वांछित परिणाम हासिल करने के लिए कटौती दोहराएँ। इस कुशल महाधमनी केन्युलेशन की सुविधा होगी।
  2. महाधमनी के दोनों ओर घुमावदार संदंश के 2 जोड़ी का प्रयोग, महाधमनी प्रवेशनी (जो धीरे-धीरे KHB साथ टपकता किया जाना चाहिए) पर महाधमनी गाइड। प्रवेशनी की नोक के नीचे 2 मिमी - महाधमनी वाल्व 1 बैठना चाहिए।
    1. महाधमनी केन्युलेशन के बाद, महाधमनी भर लंबरूप संदंश का स्थान बदलने जगह में महाधमनी पकड़। वैकल्पिक रूप से, महाधमनी भर में एक छोटे से दबाना जगह जगह में दिल फेफड़ों जटिल धारण करने के लिए, इस मॉडल को पूरा करने के लिए एक एकल प्रयोगकर्ता सक्षम करने से।
  3. एक सहायक सिर्फ संदंश के नीचे एक रेशम 4-0 सीवन के पास है और जगह में टाई, प्रवेशनी के आसपास पाशन और दोनों के सामने और दिल के पीछे कई बार बांधने की है। प्रवेशनी पूरी तरह से खुला पूर्ण प्रतिगामी महाधमनी प्रवाह शुरू करने के लिए। दिल को सख्ती से हराया का निरीक्षण करें।
    ध्यान दें: दिल तेजी से हरा करने के लिए (~ 200 बीपीएम) शुरू नहीं होता है और तेजी से,टाई या प्रवेशनी एक या कोरोनरी धमनियों के दोनों occluding हो सकता है। यदि यह संदिग्ध है, टाई को हटा दें और इसे दूर का स्थान बदलने कोरोनरी धमनियों से। दिल distends और हरा नहीं करता है, प्रवेशनी महाधमनी वाल्व भर में हो सकता है। कोरोनरी धमनी लीक (महाधमनी जड़ से KHB स्प्रे), अग्रिम प्रवेशनी महाधमनी वाल्व के करीब है (इस घटना हो सकता है यदि एक प्रगंडशीर्षी धमनी आरोही महाधमनी के स्थान पर Cannulate है)।

4. पल्मोनरी नस रोड़ा और नलिका के लिए पल्मोनरी धमनी की तैयारी

नोट: इस कदम का उद्देश्य यह सुनिश्चित करना है कि बाएं आलिंद ब्लॉक से सभी मात्रा और दबाव बाईं दिल संरचनाओं के लिए प्रसारित किया जाता है एक बंद बाएं आलिंद प्रणाली बनाने के लिए है। पूरी तरह से फेफड़े के नसों रोक देना विफलता प्रीलोड की कमी में परिणाम सकता है और परिणाम मिथ्या सिद्ध या एक अस्थिर काम कर दिल तैयारी बना सकते हैं।

  1. वें के जोखिम में सुधार करने के थाइमस हटायेई फेफड़े के धमनी (पीए)।
  2. मैन्युअल महाधमनी प्रवेशनी बारी बारी से इतना है कि दिल के पीछे पहलू ऑपरेटर का सामना करना पड़ रहा है। वाहिकाओं सही फेफड़ों के लिए अग्रणी काटना। संदंश का उपयोग कर आगे इन जहाजों को चित्रित करने के लिए सही फेफड़े के ऊतकों को निलंबित करें। मध्यम बड़ी शल्य क्लिप्स (या सिवनी) का उपयोग करना, सही फेफड़े के धमनी और शिरा और एक क्लिप के साथ श्वसनी रोक देना। क्लिप के लिए सही फेफड़ों बाहर का बांटना।
    नोट: फेफड़े के धमनी मुक्त विदारक में कठिनाई के कारण, हमारे अभ्यास फेफड़े के धमनी फैलाना को फेफड़े के नसों को रोक देना है, यह आसान एक दिल की धड़कन मॉडल में पास संरचनाओं घायल हुए बिना काटकर अलग करने के लिए बना है।
  3. बाएं फेफड़े पर दोहराएँ कदम 4.2।
    नोट: संभावित नुकसान और समस्या को हल: एक बार दोनों फेफड़े धमनियों occluded कर रहे हैं, सही आलिंद दिख फैलाना होगा और दिल bradycardic बन सकता है। इसका कारण यह है सही वेंट्रिकल दबाव बन जाता है। यदि यह उत्पन्न नहीं होती है, यह है कि pulm की संभावना हैonary नसों पूरी तरह से occluded नहीं कर रहे हैं, और यह कि प्रीलोड दिल मोड काम करने के लिए अपर्याप्त होगा। दिल, दिल (देखें नीचे) काम करने के बाद छोड़ दिया आलिंद (ला) केन्युलेशन कार्डियक आउटपुट और संक्रमण का प्रयास बनाए रखने के लिए किसी भी अवशिष्ट रिसाव रोक देना अतिरिक्त क्लिप या फेफड़े नस स्टंप के चारों ओर एक टाई रखने पर विचार करने में सक्षम नहीं है। एक बार पीए occluded कर रहे हैं, हालांकि, चरण 5 तुरंत दौरे को कम करने के लिए किया जाना चाहिए। ध्यान दें कि कुछ जांचकर्ताओं फेफड़े के नसों के बंधाव से पहले फेफड़े के धमनी काटकर अलग कर देना सही वेंट्रिकल की दबाव से बचने के लिए।
  4. पल्मोनरी धमनी चीरा
    1. महाधमनी प्रवेशनी घुमाएँ तो यह है कि दिल के पूर्वकाल पहलू ऑपरेटर का सामना करना पड़ रहा है। फेफड़े के धमनी को पहचानें। फिर, यह धमनी distended जा सकता है। छोटे कैंची का प्रयोग एक अनुप्रस्थ चीरा फेफड़े के वाल्व के ऊपर लगभग 3 मिमी बनाते हैं।
      नोट: यह तुरंत दबाव से राहत मिल जाएगी और हृदय की दर को बढ़ा सकता है। होनाकारण यह प्रवेशनी, हटाना फेफड़े के धमनी cannulate बाएं आलिंद केन्युलेशन पूरा होने के बाद करने के लिए आसान है।

5. वाम अलिंद नलिका

  1. महाधमनी प्रवेशनी घुमाएँ तो यह है कि बाएं आलिंद ऑपरेटर का सामना करना पड़ रहा है। एट्रीवेन्ट्रीकुलर नाली के ऊपर लगभग 3 मिमी, बाएं आलिंद के शरीर के ऊपरी हिस्से में 3 मिमी चीरा - छोटे कैंची का प्रयोग, एक 2 बनाते हैं।
    1. माइट्रल वाल्व के विमान को सीधा बाएं आलिंद प्रवेशनी स्थिति और आलिंद पट की ओर इशारा किया।
    2. ला प्रवेशनी समय तक खुला KHB बहती है। सुनिश्चित करें कि KHB छूने के लिए गर्म है (इसे जल्दी ठंडा हो जाता है जब किसी भी गैर-जैकेट ट्यूबिंग में बैठे) मोड काम करने के लिए संक्रमण के बाद हाइपोथर्मिया के कारण आदेश दौरे रोग से बचने के लिए। केन्युलेशन के दौरान एक ड्रिप दर के लिए संक्रमण।
  2. , संदंश का प्रयोग, जवाबी कर्षण पकड़ बाएं आलिंद के शरीर में आलिंद प्रवेशनी डालने के लिए excessi उपयोग नहीं करने के ख्याल रख रही हैबल ve, जो आलिंद फाड़ कर सकते हैं।
    नोट: ला प्रवेशनी तैनात किया जाना चाहिए ताकि यह आलिंद दीवार पर किसी भी तनाव के बिना आलिंद के बीच में बैठता है।
  3. बाएं आलिंद के शरीर के चारों ओर एक 4-0 रेशम सीवन पास और एक गाँठ बाँध प्रवेशनी चारों ओर आलिंद की मुहर बनाने के लिए। यह सुनिश्चित करें कि बाएं आलिंद के पीछे पहलू सिवनी में शामिल है ख्याल रखना। अतिरिक्त टांके आवश्यक रूप में जोड़े। 2 मिमी इतना है कि यह बजाय आलिंद पट के खिलाफ की तुलना में आलिंद के बीच में बैठता है - एक बार सील, प्रवेशनी वापस 1 खींच।
    नोट: सबसे आम कारण है कि दिल दिल मोड काम करने के लिए संक्रमण पर malperfused हो जाता है कि ला प्रवेशनी आलिंद पट, जो बाएं आलिंद प्रवाह occludes abuts है। ला ट्रेसिंग अक्सर एक उचित एक लहर और वी लहर प्रदर्शित करने के लिए परिवर्तन जब प्रवेशनी उचित स्थिति (देखें चित्रा 2 ई) में है।
  4. ला प्रवेशनी वाल्व पूरी तरह से खुला बाएं आलिंद के लिए पूर्ण प्रीलोड प्रशासन के लिए। की निगरानीदिल से ड्रिप दर (जो कोरोनरी प्रवाह से आता है)। सुनिश्चित करें कि ड्रिप दर जब ला प्रवेशनी खुला है नहीं बदलता है। यदि ऐसा है, कदम 6.4 में वर्णित के रूप में प्रवेशनी चारों ओर आलिंद retie के रूप में इस प्रणाली में एक रिसाव का प्रतिनिधित्व करता है।

6. पल्मोनरी धमनी नलिका और कार्य हार्ट मोड के लिए संक्रमण

  1. अगर दौरे ऑक्सीजन की खपत (या ऐसी दवा का स्तर या साइटोकिन्स के रूप में कोरोनरी प्रवाह में अन्य पदार्थों,) को मापने, फेफड़े के धमनी में पूर्व चीरा में 1/32 "लचीला ट्यूबिंग डालें।
    नोट: ऑक्सीजन की खपत बाएं आलिंद perfusate और फेफड़े के धमनी प्रवाह के बीच ऑक्सीजन सामग्री में अंतर के रूप में मापा जाता है 2।
    1. दौरे ऑक्सीजन की खपत के निरंतर माप के लिए छोड़ दिया है, आलिंद और कोरोनरी साइनस प्रवाह तुलना करने के लिए एक लाइन में ऑक्सीजन इलेक्ट्रोड का उपयोग करें।
    2. एक स्नातक की उपाधि प्राप्त CYL में (दोनों फेफड़े के धमनी और हृदय से टपकता से) कोरोनरी साइनस प्रवाह लीजिएकोरोनरी प्रवाह की मात्रा का ठहराव के लिए समय पर इंदर।
    3. दौरे ऑक्सीजन की खपत की गणना के रूप में पहले से वर्णित। 2
  2. प्रतिगामी महाधमनी पंप बंद करके दिल मोड काम करने के लिए संक्रमण।
    नोट: जब यह किया जाता है, ला दबाव पूर्व लोड दबाव और अवरोध जो पहले Langendorff मोड में प्रतिगामी पंप करने के लिए प्रतिरोध प्रदान किया गया था अब, कार्डियक आउटपुट के लिए प्रतिरोध प्रदान करता है एक मतलब धमनी दबाव बनाने बन जाता है। मतलब धमनी दबाव ~ 80 एमएमएचजी नीचे में गिरावट आती है, कारण होने की संभावना या तो प्रीलोड या दौरे समारोह से संबंधित है। सबसे अधिक संभावना समस्या बाएं आलिंद प्रवेशनी, जो प्रतिगामी पंप के बाद शुरु समायोजित किया जाना चाहिए है।

7. बाएं निलय दबाव माप कैथेटर की प्रविष्टि

नोट: पीवी कैथेटर या तो प्रतिगामी (महाधमनी वाल्व के माध्यम से) या शिखर पंचर के माध्यम से रखा जा सकता है। प्रतिगामी का लाभ यह है कि पी हैosition अधिक सुसंगत है और यह शिखर पंचर और कोरोनरी चोट या प्रीलोड के नुकसान के सहवर्ती जोखिम के लिए जरूरत obviates। हालांकि, प्रतिगामी नियुक्ति को कभी कभी बहुत चुनौतीपूर्ण हो सकता है, इसलिए हम दोनों तकनीकों के साथ साथ का वर्णन है।

  1. दबाव मात्रा लूप सिस्टम के लिए एक 1.4 फ्रेंच दबाव मात्रा कैथेटर संलग्न। निर्माता के निर्देशों के अनुसार गर्म KHB में प्रणाली जांचना। सुनिश्चित करें तरंग वास्तविक समय में दिखाई दे रहा है। इतनी के रूप में यह नियुक्ति को निम्नलिखित को बेदखल करने के लिए नहीं कैथेटर और केबल एल.वी. की सतह के करीब लाने के लिए।
  2. प्रतिगामी नियुक्ति के लिए, समायोज्य वाल्व खोलने और महाधमनी वाल्व भर में धीरे पीवी कैथेटर को खिलाने के लिए जब तक एक स्थिर दबाव और मात्रा तरंग पहचान कर रहे हैं। बल के अत्यधिक उपयोग से जो महाधमनी वाल्व को नुकसान या वेंट्रिकुलर सर्वोच्च पंचर कर सकते से बचें।
    नोट: हमने पाया है कि यह ट्यूबिंग और चला है कि पीवी कैथेटर ए वी दृष्टिकोण करने के लिए नेविगेट चाहिए की संख्या की लंबाई कम करने के लिए महत्वपूर्ण है। यहट्यूबिंग जो सिस्टम के साथ आता है कटौती करने के लिए सहायक हो सकता है।
  3. शिखर स्थान के लिए, एल.वी. में एक शिखर पंचर बनाने के लिए एक 24 जी Angio-कैथेटर का उपयोग करें। बाईं पूर्वकाल कोरोनरी धमनी उतरते से बचने के लिए सुनिश्चित करें। वेंट्रिकुलर शीर्ष से महाधमनी वाल्व की ओर सुई निशाना लगाओ। एल.वी. के शरीर में दबाव मात्रा कैथेटर अग्रिम। जैसे ही एल.वी. दबाव और मात्रा तरंग की पहचान की है कैथेटर को आगे बढ़ाने बंद करो।
  4. एक बार जब दबाव मात्रा कैथेटर जगह में है, दिल के आसपास की स्थिति में पानी जैकेट ले जाते हैं। टेप का एक छोटा सा टुकड़ा के साथ पानी जैकेट की दीवार के लिए कैथेटर सुरक्षित।
  5. किसी भी माप या हस्तक्षेप शुरू करने से पहले स्थिरता के कम से कम एक 30 मिनट की अवधि सुनिश्चित करें।

8. दवा का आसव

  1. (वैकल्पिक) एक मानक दवा पंप का उपयोग दवाओं (जैसे, डोपामाइन) बाएं आलिंद ब्लॉक में दिखे।
    नोट: हम Whol के अनुसार dosed दवाओं हैई पशु शरीर के वजन एक पूरे हृदय उत्पादन करने के लिए प्रवाह बराबर के बाद से आलिंद ब्लॉक के माध्यम से गुजरता है, केवल इस बात का एक छोटा सा हिस्सा कोरोनरी परिसंचरण के माध्यम से गुजरता है, के रूप में यह विवो में करता है। वैकल्पिक रूप से, perfusate की एक दूसरे सेट दवा की एक पूर्व निर्धारित एकाग्रता के साथ बनाया है और दिल छिड़कना के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
    नोट: हमारी प्रोटोकॉल में, हम दवाओं के एक 12 मिनट की अवधि में दिखे, प्रत्येक निषेचन के अंतिम 10 मिनट के दौरान शारीरिक डेटा इकट्ठा करने और एक तुरंत पूर्ववर्ती 10 मिनट आधारभूत के लिए यह तुलना।

9. शारीरिक जोड़तोड़

  1. हृदय गति
    1. (वैकल्पिक) सिवनी दो पेसिंग तारों सही आलिंद दीवार पर और एक अस्थायी पेसिंग डिवाइस को देते हैं।
      नोट: यह दिल की दर (देशी साइनस की दर से ऊपर) के सटीक नियंत्रण और हृदय गति और सिकुड़ना एक cardiotonic दवा की स्वतंत्र के बीच के रिश्ते की एक समझ परमिट।
  2. प्रीलोड
    1. वैरीप्रीलोड (बाएं निलय अंत डायस्टोलिक मात्रा के रूप में परिभाषित) स्तंभ बाएं आलिंद ब्लॉक खिला की ऊंचाई से अलग।
  3. रक्त चाप
    1. IH-51 पर दबाव वाल्व का उपयोग कर रक्तचाप (इस मॉडल में afterload के प्राथमिक निर्धारक) में हेरफेर।
  4. कोरोनरी ऑक्सीजन सामग्री
    1. विभिन्न गैस के मिश्रण में संतृप्त KHB के साथ दिल perfusing द्वारा दौरे हाइपोक्सिया की डिग्री बदलती पूरा। अलग जैकेट जलाशयों (अपनी ही गैस मिश्रण के साथ प्रत्येक) का उपयोग गैस और KHB के बीच संतुलन सुनिश्चित करने के द्वारा इस करो।
    2. एक बाहर का कोरोनरी धमनी ligating सिवनी से कोरोनरी ischemia पूरा।
      नोट: काम कर दिल मोड में समीपस्थ कोरोनरी धमनियों के बंधाव घातक रोग दौरे में परिणाम कर सकते हैं।
    3. दखल या समय का एक निर्धारित अवधि के लिए प्रतिगामी छिड़काव में देरी से वैश्विक कोरोनरी ischemia प्रेरित।

Representative Results

प्रतिगामी छिड़काव (चित्रा 1 ए) और बाएं निलय काम कर दिल (चित्रा 1 बी) में एक पूरी तरह से instrumented दिल का एक योजनाबद्ध। ठेठ महाधमनी छोड़ दिया है, आलिंद और बाएं निलय दबाव और मात्रा ट्रेसिंग चित्रा 2A में दिखाया जाता है -। डी विशिष्ट अंत डायस्टोलिक प्रेशर लगभग 3 - इस मॉडल में 5 एमएमएचजी, और चोटी सिस्टोलिक दबाव लगभग 100 एमएमएचजी है चित्रा 2 ई परिवर्तन को दर्शाता है। में आलिंद ट्रेसिंग जब ला प्रवेशनी स्थान और प्रवेशनी की स्थिति के दौरान आलिंद पट से दूर ले जाया जाता है छोड़ दिया है। इन प्रयोगों में, महाधमनी दबाव 90 एमएमएचजी में स्थापित किया गया था, और ला दबाव 10 एमएमएचजी करने के लिए स्थापित किया गया था।

catecholamines के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए, प्रत्येक शारीरिक पैरामीटर (दबाव मात्रा कैथेटर और संबंधित सॉफ्टवेयर से मुख्य रूप से व्युत्पन्न) तुरंत पूर्ववर्ती की तुलना में था आधारभूत अवधि। दिखाए गए उदाहरण में, डोपामाइन बाएं आलिंद ब्लॉक में 15 माइक्रोग्राम / किग्रा / मिनट में संचार किया गया था। हालांकि अंत डायस्टोलिक दबाव दो स्थितियों में समान है (इस मॉडल में तय आलिंद दबाव को देखते हुए), बाएं निलय अंत डायस्टोलिक मात्रा 2.5% से कम हो जाती है, और बाएं निलय अंत सिस्टोलिक मात्रा 4.9% से कम हो जाती है एक वृद्धि की मात्रा स्ट्रोक से बेदखल (चित्रा 3 ए)। प्लेसबो सुई लेनी के साथ तुलना में, बाएं निलय स्ट्रोक का काम है, दबाव मात्रा वक्र के भीतर क्षेत्र के रूप में पहचान, डोपामाइन साथ इलाज के दौरान 32% की वृद्धि हुई (चित्रा 3 बी, पी <0.001, टी परीक्षण, एन = 10 समूह प्रति)। इस प्लेसबो लेनी (चित्रा 3 सी) के लिए दौरे ऑक्सीजन की खपत के सापेक्ष में एक बड़ी वृद्धि के साथ जुड़े थे। इस रास्ते में, अलग-अलग cardiotonic दवाओं और खुराक के सापेक्ष शक्ति और ऊर्जा की लागत से एक के लिए की स्थिति लोड हो रहा है पर उनके प्रभाव का एक और स्वतंत्र तुलना में किया जा सकता है।

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चित्रा 1: प्रतिगामी छिड़काव और कार्य हार्ट मोड (एक पैनल में एक पूरी तरह Instrumented दिल में प्रवाह की आरेख: Langendorff मोड; पैनल बी:।। काम कर दिल मोड प्रतिगामी मोड में, KHB महाधमनी जड़ में एक सेट छिड़काव दबाव में संचार होता है। इस विधा इस्कीमिक समय निम्न और इंस्ट्रूमेंटेशन के दौरान मायोकार्डियम ठीक करने के लिए उपयोग किया जाता है। दिल मोड काम करने में, perfusate कोरोनरी परिसंचरण perfusing से पहले छोड़ दिया दिल के माध्यम से बहती है। इस मोड में, मायोकार्डियम अपने स्वयं के छिड़काव दबाव उत्पन्न होगा। देखने के लिए यहाँ क्लिक करें यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण।

चित्र 2
एफigure 2: प्रतिनिधि दबाव और मात्रा Tracings आधारभूत मापन के दौरान प्राप्त की। (ए) महाधमनी जड़ दबाव, (बी) आलिंद दबाव, (सी) बाएं निलय दबाव और (डी) एक आधारभूत माप के दौरान बाएं निलय मात्रा ट्रेसिंग प्रदर्शित कर रहे हैं छोड़ दिया है। स्ट्रोक की मात्रा, स्ट्रोक का काम है, कार्डियक आउटपुट, ताऊ, और अन्य मानकों स्वचालित रूप से गणना की और सॉफ्टवेयर द्वारा वास्तविक समय में प्रदर्शित किया जा सकता है। एक पा छोड़ दिया आलिंद ट्रेसिंग (ई) काम कर दिल मोड में एक गरीब कार्डियक आउटपुट के साथ जुड़े एक संकेत है कि प्रवेशनी बाएं आलिंद में malpositioned है हो सकता है। ध्यान दें कि अच्छी तरह से रखा बाएं आलिंद दबाव का पता लगाने में प्रमुख वी लहर पूरी तरह से instrumented जानवर में एक कम बाएं आलिंद के अनुपालन के कारण आम की संभावना है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।


चित्रा 3:। दबाव मात्रा वक्र पीवी वक्र (ए), एक वृद्धि स्ट्रोक की मात्रा शामिल है, में एक बाई ओर शिफ्ट में डोपामाइन अर्क परिणामों पर डोपामाइन का प्रभाव, सिस्टोलिक मात्रा में अंत में कमी आई आधारभूत माप के साथ तुलना में। ध्यान दें कि इन पीवी घटता के कुछ घटकों के आकार में आम तौर पर इन विवो में मापा जाता है उन लोगों से अलग धमनी और शिरापरक elastance के अभाव के कारण (चित्रा 4 देखें)। (बी) के एक तुरंत पूर्ववर्ती आधारभूत के सापेक्ष, स्ट्रोक काम सुई लेनी के दौरान काफी अधिक वृद्धि हुई है placebo से डोपामाइन की (**, पी = 0.0017, टी परीक्षण), के रूप में दौरे ऑक्सीजन की खपत था (*, पी = 0.013, टी परीक्षण, सी)। इस मॉडल का उपयोग करना, बेस लाइन पर औसत दौरे ऑक्सीजन की खपत 0.22 ± 0.02 mmol 2 हे / ग्राम ऊतक / मिनट था, एक अनुमान के अनुसार dissolv का उपयोग कर40 डिग्री सेल्सियस पर 165 μmol खारा में / एल की एड ऑक्सीजन सामग्री इस तरह के मापन विभिन्न दवाओं के दौरे ऑक्सीजन की खपत की तुलना करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा 4: दबाव माप लूप्स का विश्लेषण। सैद्धांतिक दबाव मात्रा लूप दिखाया सामान्य हृदय चक्र का वर्णन महाधमनी वाल्व (ए वी) बंद (1), isovolemic संकुचन होता है (1 - 2) के बाद। वेंट्रिकुलर दबाव के रूप में आलिंद दबाव से नीचे घट जाती है। इस चरण की अवधि के ताऊ का प्रतिनिधित्व करती है। माइट्रल वाल्व (एमवी) तो आलिंद सिस्टोल साथ समकालीन खोलता है, वेंट्रिकल (2 - 3) भरने। सिस्टोल तो isovolemic Contracti के साथ शुरू(3 - 4) पर जब तक वेंट्रिकुलर दबाव डायस्टोलिक धमनी दबाव है, जो समय में ए वी खोलता से अधिक है। 2 और 3 - - स्ट्रोक की मात्रा लाइनों 1 के बीच का अंतर है। 2 - - 3 - 4 स्ट्रोक काम 1 के भीतर क्षेत्र है। 4 वक्र यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Discussion

यह काम दिल मॉडल वेंट्रिकुलर प्रीलोड और afterload, perfusate की ऑक्सीजन तनाव, साथ ही दिल की दर के पूर्ण नियंत्रण के साथ वेंट्रिकुलर प्रदर्शन के आकलन के लिए सक्षम बनाता है। अन्य कारकों के अलावा, यह जो तरीके हैं कि संभव नहीं हैं afterload और प्रीलोड के स्वतंत्र inotropic दवाओं, एक विवो मॉडल का उपयोग कर के आंतरिक दौरे प्रभाव के आकलन के लिए परमिट। क्योंकि इस मॉडल एक crystalloid perfusate इस्तेमाल करता है, यह आकलन हीमोग्लोबिन से हस्तक्षेप के बिना मायोकार्डियम परमिट, दौरे ऊर्जा राज्यों के स्पेक्ट्रोस्कोपी विश्लेषण को सरल बनाने, उदाहरण के लिए। 14 इस मॉडल में, सही आलिंद हालांकि यह संभव है, हमारे इंस्ट्रूमेंटेशन के हिस्से के रूप में cannulated नहीं है ऐसा करने के लिए। हम जानबूझकर आदेश दौरे ऑक्सीजन की खपत के आकलन के लिए कोरोनरी साइनस प्रवाह का नमूना लेने की सुविधा के लिए ऐसा करने के लिए नहीं चुना है। महत्वपूर्ण बात है, हालांकि, सही दिल अब भी दबाव और कार्य की मात्रा इस मॉडल में प्रदर्शन करती है यह पंप सह के रूप मेंronary साइनस फेफड़े के धमनी प्रवेशनी में प्रवाह। कुछ सही निलय प्रीलोड उपलब्ध कराना वेंट्रिकुलर पट की स्थिति में सुधार है और बाएं निलय प्रदर्शन को बढ़ाता है, और इस मॉडल का एक महत्वपूर्ण घटक है। 15

वहाँ कई प्रयोगात्मक नुकसान का उल्लेख कर रहे हैं। पहले प्रारंभिक प्रतिगामी केन्युलेशन, जो निर्लज्जता प्रदर्शन किया जाना चाहिए (यानी, कम से कम 2 मिनट में) ischemia की अवधि को कम करने के लिए है। मास्टर करने के लिए सबसे महत्वपूर्ण कौशल कुशल अलगाव, तैयारी और आरोही महाधमनी की हैंडलिंग है। यह महत्वपूर्ण है कि महाधमनी स्टंप महाधमनी वाल्व ऊपर केन्युलेशन के लिए अपर्याप्त कमरे में जा जरूरत से ज्यादा कम नहीं काटा जा। हालांकि, यह भी महत्वपूर्ण है कि महाधमनी स्टंप बहुत लंबा है, जो चारों ओर प्रवेशनी महाधमनी के torqueing पैदा कर सकता है नहीं हो। यह भी महत्वपूर्ण है कि महाधमनी प्रवेशनी और महाधमनी जड़ को उचित आकार से मिलान किया जा रहा है। एक छोटे से प्रवेशनी पर एक जरूरत से ज्यादा बड़े महाधमनी भी कर सकते हैंप्रवेशनी पर महाधमनी जड़ की torqueing पैदा होती हैं। सही अवजत्रुकी धमनी आम तौर पर महाधमनी वाल्व ऊपर लगभग 7 मिमी आरोही महाधमनी से दूर ले जाता है। विच्छेदन के दौरान प्रगंडशीर्षी वाहिकाओं (व्यास में लगभग 1 मिमी) की पहचान करने और महाधमनी के trimming अनुप्रस्थ महाधमनी चीरा के लिए के रूप में महत्वपूर्ण स्थलों की सेवा। सिर्फ पहली प्रगंडशीर्षी धमनी के उड़ान भरने के नीचे महाधमनी ट्रिमिंग सलाह दी जाती है। छंटनी की महाधमनी जड़ में इस पोत के शामिल किए जाने के लिए आम तौर पर काम कर दिल मोड में संक्रमण पर KHB का रिसाव, और महाधमनी जड़ दबाव का नुकसान होता है।

केन्युलेशन की एक और तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण पहलू बाएं आलिंद केन्युलेशन है। हालांकि यह बाएं आलिंद उपांग cannulate के लिए संभव है, हमने पाया कि प्रवेशनी अक्सर उपांग भीतर अटक जाता है, और बाएं आलिंद के शरीर में आसानी से पारित नहीं होता है। इस प्रकार, हम बाएं आलिंद के शरीर में चीरा बनाने के लिए पसंद करते हैं, लगभगएट्रीवेन्ट्रीकुलर नाली से बेहतर 2 मिमी। यह आदेश पतली दीवारों आलिंद फाड़ जब प्रवेशनी हासिल करने से बचने के लिए सम्मिलन से पहले उचित विमान में बाएं आलिंद प्रवेशनी स्थिति के लिए महत्वपूर्ण है।

हमने पाया है कि बाएं आलिंद चीरा के आदर्श आकार लगभग 3 मिमी था। एक चीरा का बहुत छोटा बनाना भी बाएं आलिंद प्रवेशनी की नियुक्ति को और अधिक कठिन बना सकता है, और बाएं आलिंद के फाड़ हो सकता है। हम एक सीधे, 8 मिमी, beveled बाएं आलिंद ब्लॉक पर ऑक्सीजन अभेद्य ट्यूबिंग (भीतरी व्यास 2.9 मिमी) का टुकड़ा का उपयोग करें। हमने पाया है कि एक beveled बढ़त के साथ यह है, बजाय एक प्रवेशनी का उपयोग करते हुए, सबसे लगातार आलिंद केन्युलेशन की ओर जाता है और बाएं आलिंद ब्लॉक हासिल करने की प्रक्रिया की सुविधा है। इस्तेमाल किया ट्यूबिंग के बावजूद, यह सुनिश्चित करना है कि ट्यूबिंग के अंत आलिंद पट या माइट्रल वाल्व द्वारा occluded नहीं है (जैसा कि ऊपर दर्शाया महत्वपूर्ण है, हमने पाया कि छोड़ दिया आलिंद दबाव ट्रेसिंग इस रीगा में मददगार थेआरडी), आलिंद प्रवेशनी के रूप में भी सूक्ष्म आंदोलन काफी बाएं निलय प्रीलोड और रक्तसंचारप्रकरण माप जिसके परिणामस्वरूप बदल सकते हैं। उसी कारण से, यह सुनिश्चित करना है कि बाएं आलिंद बाएं आलिंद ब्लॉक खोलने के बाद निम्नलिखित लीक नहीं करता महत्वपूर्ण है। यह सुनिश्चित करना है कि इस प्रणाली के भीतर ट्यूबिंग ऑक्सीजन दिल को पर्याप्त ऑक्सीजन वितरण सुनिश्चित करने के लिए अभेद्य है इस्तेमाल किया ट्यूबिंग के प्रकार के बावजूद महत्वपूर्ण है।

प्रक्रिया का एक अन्य तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण पहलू दबाव मात्रा (पीवी) कैथेटर की नियुक्ति की थी। हम शुरू में महाधमनी ब्लॉक के माध्यम से कैथेटर की एक प्रतिगामी प्लेसमेंट के पक्ष में है। हालांकि तकनीकी रूप से संभव है, हम इसे transapical पंचर के माध्यम से पीवी कैथेटर जगह करने के लिए बहुत सरल और समीचीन हो पाया। केयर, प्रयोग की अवधि के दौरान कैथेटर की स्थिति पर नजर रखने के लिए लिया जाना चाहिए के रूप में कई बार कैथेटर में या बाएं वेंट्रिकल से बाहर स्थानांतरित कर सकते हैं। इस pressu की निगरानी के द्वारा किया जा सकता हैफिर से और समय के साथ मात्रा ट्रेसिंग।

अंत में, देखभाल सुनिश्चित करने के लिए कि KHB समाधान एक प्रयोग के लिए नए सिरे से बनाई गई है लिया जाना चाहिए। यह KHB के घटक वजन और उन्हें समय से आगे पाउडर के रूप में शंक्वाकार ट्यूब में स्टोर करने के लिए संभव है। प्रयोग के दिन, इन बाँझ, फ़िल्टर्ड पानी, कार्बन डाइऑक्साइड / ऑक्सीजन, और फिर कैल्शियम मिश्रण में जोड़ा के साथ मिलाया जा सकता है। यह भी ऐसी Tergazyme (या समान) के रूप में एंजाइम सक्रिय पाउडर साबुन के साथ प्रणाली धोने और perfusate फिल्टर नियमित रूप से बदलने के लिए महत्वपूर्ण है।

इस प्रयोगात्मक तैयारी की कई सीमाओं पर ध्यान दिया जाना चाहिए। सबसे पहले, सभी crystalloid-भरकर रखा Langendorff तैयारी करने के लिए भी इसी तरह, KHB और अन्य asanguinous perfusates एक काफी कम ले जाने के रक्त की क्षमता के सापेक्ष ऑक्सीजन की है। हालांकि यह आंशिक रूप से कोरोनरी वैसोडायलेटेशन और supraphysiologic कोरोनरी प्रवाह के माध्यम से के लिए मुआवजा दिया है, तैयारी पूरी तरह physiologi नहीं हैइस कारण के लिए सी। दूसरा, क्योंकि इस उपकरण में इस्तेमाल Windkessel चैम्बर के लगभग अनंत अनुपालन की, सिस्टोलिक और डायस्टोलिक दबाव के केवल न्यूनतम अलग हो रहे हैं (2A चित्रा देखें) और इस तरह कोरोनरी छिड़काव दबाव गैर शारीरिक है। इस afterload ब्लॉक करने के लिए एक elastance घटक को शामिल करके भविष्य के मॉडलों में दूर किया जा सकता है। गर्म ischemia के - (3 मिनट 2) जो मायोकार्डियल चोट या रोग पैदा होने की संभावना है तीसरा, सभी पृथक दिल तैयारी के साथ के रूप में, दिल एक निर्धारित अवधि से होकर गुजरती है। तकनीक के अभ्यास के माध्यम से इस चोट को न्यूनतम प्रतिनिधि परिणामों के लिए अत्यंत महत्वपूर्ण है। इसके अलावा, हालांकि पशु कल्याण के लिए आवश्यक है, साँस anesthetics एक दौरे suppressant के रूप में reperfusion की प्रक्रिया में जल्दी, सेवा कर सकते हैं, हालांकि यह उम्मीद है कि इस आशय जल्दी से समाप्त कर दिया है के रूप में दिल KHB साथ reperfused है।

काम कर हृदय प्रणाली का वर्णन Physiol की एक विस्तृत विविधता के लिए अनुमति देता हैरोगी देखभाल, अनुसंधान और शिक्षण के लिए प्रासंगिक ogic जांच। कुछ अतिरिक्त संशोधनों के साथ, इस प्रणाली को भी जन्मजात हृदय रोग के लिए प्रासंगिक महत्वपूर्ण शरीर विज्ञान, फेफड़े के उच्च रक्तचाप और एकल वेंट्रिकल शरीर क्रिया विज्ञान सहित अनुकरण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। सीमाएं भी शामिल है कि यह एक पूर्व vivo तैयारी है, कि दिल में एक उच्च ऑक्सीजन सामग्री रक्त के बजाय एक बफर से भरकर रखा जा रहा है।

Acknowledgments

उपकरण और यहाँ वर्णित प्रयोगों कार्डियोलोजी, बोस्टन बच्चों के अस्पताल के विभाग द्वारा और Haseotes परिवार से परोपकारी दान के द्वारा वित्त पोषित किया गया। हम डॉक्टरों के आभारी हैं। फ्रैंक McGowan और इस मॉडल के साथ जल्दी अनुभवों के साथ हमें प्रदान करने के लिए Huamei उन्होंने कहा, और कलाकृति के साथ सहायता के लिए लिंडसे थॉमसन के लिए।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sodium bicarbonate Sigma-Aldrich S5761 8.401 g/4 L
Ethylenediaminetetraacetic acid Sigma-Aldrich E6758 0.744 g/4 L
Potassium chloride Sigma-Aldrich P9333 1.580 g/4 L
Magnesium sulfate Sigma-Aldrich M7506 0.578 g/4 L
Sodium pyruvate Sigma-Aldrich P2256 0.220 g/ 4 L
Sodium chloride Sigma-Aldrich S3014 27.584 g/4 L
Dextrose Sigma-Aldrich D9434 7.208 g/4 L
Calcium chloride dihydrate Sigma-Aldrich C7902 1.470 g/4 L
Biventricular working heart model Harvard Apparatus IH-51
Pressure volume catheter Millar, Inc SPR-944-1 6 mm spacing catheter used
LabChart Pro 8 AD Instruments Version 8.1

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References

  1. Langendorff, O. Untersuchungen am uberlebenden saugethierherzen [investigations on the surviving mammalian heart. Arch Ges Physiol. 61, 291-332 (1895).
  2. Neely, J. R., Liebermeister, H., Battersby, E. J., Morgan, H. E. Effect of pressure development on oxygen consumption by isolated rat heart. Am J Physiol. 212, (4), 804-814 (1967).
  3. Friehs, I., Cao-Danh, H., et al. Adenosine prevents protein kinase C activation during hypothermic ischemia. Circ. 96, (9 Suppl), 221-226 (1997).
  4. Aoyagi, T., Higa, J. K., Aoyagi, H., Yorichika, N., Shimada, B. K., Matsui, T. Cardiac mTOR rescues the detrimental effects of diet-induced obesity in the heart after ischemia-reperfusion. Am J Physio. Heart Circ Physiol. 308, (12), H1530-H1539 (2015).
  5. Kitahori, K., He, H., et al. Development of left ventricular diastolic dysfunction with preservation of ejection fraction during progression of infant right ventricular hypertrophy. Circ Heart Fail. 2, (6), 599-607 (2009).
  6. Cowan, D. B., Noria, S., et al. Lipopolysaccharide internalization activates endotoxin-dependent signal transduction in cardiomyocytes. Circ Res. 88, (5), 491-498 (2001).
  7. Broadley, K. J. An analysis of the coronary vascular responses to catecholamines, using a modified Langendorff heart preparation. Br J Pharmacol. 40, (4), 617-629 (1970).
  8. Schmidt, H. D., Hoppe, H., Heidenreich, L. Direct effects of dopamine, orciprenaline and norepinephrine on the right and left ventricle of isolated canine hearts. Cardiol. 64, (3), 133-148 (1979).
  9. Fawaz, G., Tutunjini, B. The effect of adrenaline and noradrenaline on the metabolism and performance of the isolated dog heart. Br J Pharm Chemother. 15, 389-395 (1960).
  10. Allen, L. A., Fonarow, G. C., et al. Hospital variation in intravenous inotrope use for patients hospitalized with heart failure: insights from Get With The Guidelines. Circ Heart Fail. 7, (2), 251-260 (2014).
  11. Furnival, C. M., Linden, R. J., Snow, H. M. The inotropic and chronotropic effects of catecholamines on the dog heart. J Physiol. 214, (1), 15-28 (1971).
  12. Li, J., Li, J., et al. Adverse effects of dopamine on systemic hemodynamic status and oxygen transport in neonates after the Norwood procedure. J Am Coll Cardiol. 48, (9), 1859-1864 (2006).
  13. Gillis, A. M., Kulisz, E., Mathison, H. J. Cardiac electrophysiological variables in blood-perfused and buffer-perfused, isolated, working rabbit heart. Am J Physiol. 271, (2 Pt 2), H784-H789 (1996).
  14. Asfour, H., Wengrowski, A. M., Jaimes, R., Swift, L. M., Kay, M. W. NADH fluorescence imaging of isolated biventricular working rabbit hearts. J Vis Exp. (65), (2012).
  15. Demmy, T. L., Magovern, G. J., Kao, R. L. Isolated biventricular working rat heart preparation. Ann Thor Surg. 54, (5), 915-920 (1992).
Myocardial प्रदर्शन और ऑक्सीजन की खपत के अध्ययन के लिए कृंतक कार्य हार्ट मॉडल
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DeWitt, E. S., Black, K. J., Kheir, J. N. Rodent Working Heart Model for the Study of Myocardial Performance and Oxygen Consumption. J. Vis. Exp. (114), e54149, doi:10.3791/54149 (2016).More

DeWitt, E. S., Black, K. J., Kheir, J. N. Rodent Working Heart Model for the Study of Myocardial Performance and Oxygen Consumption. J. Vis. Exp. (114), e54149, doi:10.3791/54149 (2016).

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