Abstract
La extracción de los otolitos (huesos del oído) de peces que tienen cráneos muy gruesas puede llevar mucho tiempo y muy difícil. La práctica común de hacer una incisión vertical transversal en la parte superior del cráneo con una sierra manual o eléctrica puede dañar los otolitos si no se realiza correctamente. Esturiones (Acipenseridae) son una familia en particular que tiene un cráneo muy grande y gruesa. Un nuevo método de laboratorio en la cavidad cerebral del lado ventral del pez para exponer los otolitos era más fácil que otros métodos de extracción de otolitos que se encuentran en la literatura. Métodos revisados en la literatura se han diseñado para el campo y son más eficientes en el procesamiento de grandes cantidades de pescado rápidamente. Sin embargo, esta nueva técnica fue diseñada para ser más adecuado para un entorno de laboratorio cuando el tiempo no es prensado y extracción exitosa de cada muestra es crítica. El éxito de la búsqueda y eliminación de los otolitos usando esta técnica es muy alta y no pone en peligro los structure de cualquier manera. Esta técnica alternativa es aplicable a otras especies de peces similares para la extracción de los otolitos.
Introduction
Poblaciones de esturión (Acipenseriformes) en todo el mundo han estado disminuyendo desde hace más de un siglo debido a los impactos, incluyendo la pérdida del hábitat, la fragmentación de la población, y la sobrepesca de tal manera que muchas poblaciones están protegidos por las leyes estatales y federales 1,2. Los organismos de gestión a lo largo de los EE.UU. y el mundo han identificado esturión como especie objetivo para la restauración y recuperación 1. Características de la población (crecimiento, reclutamiento, dieta) de la mayoría de las poblaciones de esturión se han estudiado para comprender mejor las características básicas de la biología y la historia de vida 1. Debido al estado de protección de la mayoría de las poblaciones de esturión, la evaluación de la edad es difícil en las pequeñas poblaciones amenazadas que se garantiza ningún sacrificio o daños a las personas.
La extracción de estructuras óseas para el propósito de la estimación de la edad y el análisis de crecimiento ha sido una técnica común 3 uso .La de secciones de radios de las aletas para determinar la edad de Sturgese ha convertido en un método no letal práctica, pero la verificación de la técnica ha sido limitada y la edad pueden ser muy difíciles de descifrar en los individuos de mayor edad (> 15 años) 4. Los investigadores evaluaron el uso de múltiples estructuras óseas de esturión para su uso en la validación de la edad del Golfo esturión (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, Esturión atlántico (A. o. Oxyrinchus) 6, esturión blanco (A. transmontanus) 7, y el Lago de esturión (A. fluvescens) 8 llegó a la conclusión de que la primera aleta pectoral marginal rayos proporcionó la edad más precisa, pero llegó a la conclusión de este procedimiento invasivo ser perjudiciales para las personas mayores. Actualmente, no existe el desarrollo de métricas utilizando la forma de otolitos para distinguir entre las especies de esturión de América del Norte con una muy alta tasa de éxito 9. Los detalles sobre el proceso de eliminación de los otolitos con una incisión transversal dorsal en la base del cráneo es un otolitos común adicionalMétodo cción encuentra a través de la literatura y claramente detallado por Secor et al. (1991) 10. Sin embargo, este método es difícil de aplicar en esturión que tienen cráneos muy gruesas con otolitos que son pequeños y delicados y tenderían a romper. Una nueva revisión de la literatura muestra ninguna otra metodología detallada del proceso de eliminación de los otolitos para el esturión. El objetivo de este trabajo fue al detalle un método alternativo de extracción de otolitos de esturión mediante la introducción de la cavidad cerebral del lado ventral.
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Protocol
Nota importante: Debido al estado de protección de todas las especies de esturión en los Estados Unidos, permite adquirir y manipular el pescado se obtuvieron antes de su procedimiento de laboratorio. Todos los especímenes fueron adquiridos a partir de fuentes de incubación post mortem debido a causas naturales y eliminarse siguiendo el procedimiento estándar.
1. Preparación de las muestras
- Antes de que las incisiones ponen en canal de esturión en su lado y con una cinta métrica para medir la longitud total desde el hocico hasta la punta de la cola hasta el 1 mm más cercano. (Figura 1A)
- Pesar carcasa de esturión en una escala tarado aproximadamente a 1 g. Evaluar la canal a todas las etiquetas o marcas externas y registro.
2. Extracción de otolitos
- Hacer una incisión vertical con un gran cuchillo filete entre la base del cráneo y la primera scute dorsal a través del cuerpo para separar la cabeza del cuerpo (Figura 1B). Después de quitar la cabeza, marn la cabeza para que la boca quede hacia arriba (Figura 1C).
- Quitar el tejido blando de la boca y las branquias mediante el uso de la cuchilla para cortar el filete a lo largo de la parte ventral del cráneo (Figura 1D). Hacer una incisión con una sierra para huesos eléctrica desde la punta del hocico hasta la base del cráneo hasta la bisectriz por completo la cabeza (Figura 1E). Separar las dos mitades con la mano para exponer la cavidad cerebro (Figura 2A).
- Retirar y desechar la materia cerebral (cuadro rojo de la izquierda) con una pinza para ver canales semicirculares (cuadro rojo) dentro de la cavidad del cerebro (Figura 2B).
- Retire el cartílago canal semicircular de la cavidad cerebral con unas pinzas (Figura 2C). Perfore cuidadosamente cartílago canal semicircular con la punta del fórceps y retirar los otolitos (Figura 2D). Retire los otolitos (estructura ósea con fuerza en el interior del cartílago) con unas pinzas de cartílago canal semicircular (Figura 2E)
- Repetir los pasos 2.3 hasta 2.4 para eliminar los otolitos de la otra mitad del cráneo.
- Sumergir los otolitos en 92% de etanol durante 5 segundos para eliminar cualquier cartílago. Coloque los otolitos en un vial de centelleo de 25 ml abierta se sequen durante 24 horas.
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Representative Results
El tamaño adulto de esturión en todo el mundo es muy variable, pero la ubicación de los otolitos es consistente. Se encontró que el uso de un cuchillo filete de afilado para eliminar el tejido blando de la boca fácilmente muestra en la Figura 1D. Una sierra para huesos eléctrica es la herramienta preferida para la incisión lateral para exponer la cavidad del cerebro en la Figura 1E. Sin embargo, la atención al que divide en dos la línea media del cráneo se necesitaría de otro modo los otolitos puede ser aplastado durante este proceso. Si este proceso se realiza correctamente, entonces la cavidad cerebral será expuesto de manera uniforme con ningún daño a los otolitos como se muestra en la Figura 2A. La materia cerebral se elimina fácilmente con el uso de fórceps como en la Figura 2B y encontrar el cartílago canal semicircular que contiene los otolitos se encuentra fácilmente en la base de la cavidad cerebral como se muestra en la Figura 2C. El cartílago que se encuentra en el canal semicircular es EASily retirado de la otolitos con un par de fórceps como se ve en la Figura 2D.
Este procedimiento se muestra con éxito la eliminación de los otolitos esturión y es un paso preliminar en un análisis más cuantitativo de la historia de la vida de los peces. Resultado éxito se puede medir por la eliminación de los otolitos sin romper la estructura. las tasas de determinación de la edad y el crecimiento son dos parámetros que pueden ser evaluados con el uso de los otolitos retirados. análisis de la forma para la diferenciación de las especies es otro indicador medible que se puede desarrollar a partir de los otolitos.
Figura 1. La colocación de esturión de la canal para extraer los otolitos. (A) del esturión de la canal lateral Vista de Medición y pesaje, (B) Incisión vertical para separar la cabeza del esturión de Bo dy, (C) Voltear la cabeza para ver la boca y ventral lateral de la cabeza, (D) de tejido blando retira para exponer ventral lateral del cráneo, (E) incisión lateral desde la punta del hocico a la base del cráneo Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta cifra.
Figura 2. Examen interna de la cavidad cerebral para extirpar los otolitos. (A) de la cavidad cerebro expuesto después de Cabeza es separado, (B) Materia Cerebro retira para exponer los canales semicirculares, (C) Canal semicircular cartílago quitado, (D) de los otolitos han visitado y se retira El cartílago de Canal semicircular, (E) de Shortnose esturión Otolito54316 / 54316fig2large.jpg "target =" _ blank "> Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
La visión general de un método alternativo de extracción de otolitos de las canales de esturión se ha detallado. Es importante tener en cuenta que debe prestarse especial atención a la colocación de la incisión lateral sobre la línea media del cráneo con el fin de dividir en dos el cráneo de manera uniforme para asegurar que ningún daño a los otolitos durante la disección. Si la incisión no es lo suficientemente profunda para bisecar completamente el cráneo será muy difícil para exponer la cavidad cerebro donde la ubicación de los otolitos es claramente visible. Con la experiencia, la técnica general es relativamente simple y conduce a un alto porcentaje de los otolitos que se encuentra intacta. Este nuevo método proporciona una forma alternativa investigaciones para extraer los otolitos de especies distintas de esturión que puede ser difícil utilizando métodos estándar de extracción de otolitos.
Las limitaciones a este método son la aplicabilidad a una configuración no para uso en el campo de laboratorio. El tiempo necesario para la preparación de la canal no es propicio para las muestras recogidasen el campo de una manera oportuna. Otra preocupación es el uso de especies de esturión que por lo general están protegidos por las leyes estatales o federales debido a la disminución de la población.
Es muy difícil obtener permisos para llevar a cabo este tipo de evaluación a costa de sacrificar los individuos que son necesarios para mantener las poblaciones de vida. Sin embargo, cuando los especímenes muertos están disponibles a través de causas naturales esta técnica proporciona una forma útil de recoger más información que estaría disponible de otra manera.
Es importante tener en cuenta la importancia de esta técnica para eliminar con éxito otolitos de esturión utilizando este método alternativo. Las técnicas existentes eliminación de otolitos de la región dorsal de la cabeza son todavía útil y beneficioso pero no es aplicable para el esturión. El uso de esta nueva técnica para exponer la cavidad cerebro también da acceso y la aplicabilidad a otras áreas función neural y la morfología del cerebro. Esta nueva técnica puede ser beneficiosoutilizar en otras especies de peces con paredes muy gruesas cráneo o donde hay una cantidad limitada de peces de utilizar para la extracción de los otolitos.
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Acknowledgments
Un agradecimiento especial a la División de St. Regis Mohawk Ambiental, Welaka Nacional de Peces, Pesca y Unidad de Investigación del Servicio de Vida Silvestre de la Universidad del Sur de Illinois, US Fish and Wildlife Service Center Pesca noreste, Sterling Caviar, de la Universidad de California-Davis, Garrison presa Nacional de Pesca criadero, osos Bluff Nacional de Peces y Pesca y la Oficina de recursos de la Ciudad de Panamá Servicio de Pesca de la fauna por su ayuda el suministro de esturión para este proyecto. este artículo es la contribución de la USGS 2013 Great Lakes Science Center.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Measuring Board | Metric meter stick is preferred | ||
| Weighing scale | |||
| Filleting Knife | |||
| Scalpel | |||
| Forceps | |||
| Sample vials | 25 ml scintillation vials work well |
References
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