Labor-in-a-Drop Reaktionssysteme erlauben die vielseitige Implementierung von komplexen Reaktionen in mikrofluidischen Maßstab. Eine automatisierte Betätigung-Plattform, bestehend aus einem 3 x 3-Matrix von elektromagnetischen Spulen wurde entwickelt und erfolgreich eingesetzt, um verschmelzen zwei 10 µL Mikroreaktoren und dadurch eine enzymatische Reaktion in die resultierenden flüssige Murmeln zu initiieren.
Für die erfolgreiche Umsetzung von mikrofluidischen Reaktionssysteme, wie PCR und Elektrophorese ist die Bewegung der Flüssigkeit Kleinmengen unerlässlich. In konventionellen Labor-auf-ein-Chip-Plattformen Lösungsmittel und Proben definierten mikrofluidische Kanäle mit komplexen Steuerung Installationen durchlaufen. Die Tröpfchen Betätigung Plattform präsentiert hier ist eine viel versprechende Alternative. Damit ist es möglich, einen flüssigen Tropfen (haarfeinen) auf eine planare Fläche einer Reaktion-Plattform (Labor-in-Drop) bewegen. Die Betätigung von Mikroreaktoren für die hydrophobe Oberfläche der Plattform basiert auf der Verwendung von magnetischen Kräfte, die auf die äußere Hülle des flüssigen Tropfen aus einer dünnen Schicht von superhydrophob Magnetit-Teilchen. Die hydrophobe Oberfläche der Plattform ist erforderlich, um jeglichen Kontakt zwischen dem flüssigen Kern und der Oberfläche ermöglichen eine reibungslose Bewegung der Mikroreaktortechnik zu vermeiden. Auf der Plattform können ein oder mehrere Mikroreaktoren mit einem Volumen von 10 µL positioniert und gleichzeitig bewegt. Die Plattform selbst besteht aus einer 3 x 3 Matrix der elektrische doppelte Spulen, die entweder Neodym oder Eisen Kerne unterzubringen. Die Magnetfeld-Gradienten werden automatisch gesteuert. Durch Veränderung des magnetischen Feldes Steigungen kann die Mikroreaktoren magnetische hydrophobe Shell automatisch manipuliert werden, um die haarfeinen verschieben oder öffnen Sie die Shell reversibel. Reaktionen der Substrate und entsprechende Enzyme können durch Zusammenlegung der Mikroreaktoren oder bringen sie in Kontakt mit Oberflächen immobilisiert Katalysatoren initiiert werden.
Technische Anwendungen mit Mikro Reaktionen erfolgen überwiegend in vordefinierten Microchannel-Chips. Diese Systeme sind weit verbreitet und in der Literatur umfassend beschrieben (inter Alia 1,2,3). Im Jahr 2011 betrug der Umsatz von mikrofluidischen Technologien weltweit 6,2 Milliarden Euro 4. Im Gegensatz dazu war die Verwendung von frei beweglichen Mikro Reaktorsektionen zuvor nur untersucht und veröffentlicht in begrenztem Umfang. Die am häufigsten verwendete Methode zum Verschieben von wässriger micro Tröpfchen ist Electrowetting 5. Andere Methoden für die Bewegung der Tropfen auf Oberflächen basieren auf elektrische Felder 6, Magnetkraft 7 oder akustische Betätigung 8. Aufgrund ihrer ungünstigen Oberfläche zu Volumen-Verhältnis sind diese haarfeinen Droplet-basierte Systeme starke Verdunstung Einflüssen ausgesetzt. Damit ist die Drop-Bewegung in der Regel als einen flüssigen Zweiphasensystem eingerichtet wo die obere Phase hat einen hohen Siedepunkt die wässrige Phase vor Verdunstung zu schützen. Dieser Ansatz beinhaltet jedoch ein hohes Risiko der Kontaminierung der Reaktion Tröpfchen durch unkontrollierte Diffusion. Dies ist ein erhebliches Hindernis für die technische Einrichtung der genannten Systeme.
Neuere Arbeiten befasst sich mit nicht-anhaftende flüssig-fest Phasenübergänge. Ein hochwirksamer Ansatz ist die Verwendung von superhydrophob Oberflächen, so dass die Bildung von sphärischen wässrige Tröpfchen. Eine Erweiterung dieses Konzepts der Reaktion ist die Verwendung von micro Reaktion Fächer mit einem superhydrophob Oberfläche oder Schale, die zum Beispiel aus Polytetrafluorethylen (PTFE) Partikel 9bestehen kann. Der Kontaktwinkel auf Oberflächen sind in der Regel im Bereich von 160° (abhängig von der Rauheit der Oberfläche). Die sphärische Fächer somit minimale Widerstand gegen die Bewegung auf einer Fläche und bieten gleichzeitig Schutz vor Verdunstung.
Wässrige Tropfen mit Mikropartikeln Größe PTFE beschichtet können ihre Kugelform bis zu einem Durchmesser von etwa 2 mm beibehalten. Bei höheren Lautstärken ist die hydrophobe Shell in der Regel nicht komplett nicht mehr 10geschlossen. Der Einfluss der anderen Shell-Materialien und der Ausbau der Anwendungsbereich des flüssigen Marmors gegenüber unpolaren Lösungsmitteln wurde Gao und McCarthy mithilfe ionische Flüssigkeiten 12implementiert. Für die Bildung von hydrophoben partikelbasierte Muscheln wurden Partikeldurchmesser in Größen von 10 nm bis 30 µm bisher beschriebenen 11,14,16. Neue Studien zeigten, dass hydrophobe Nanopartikel als Hüllenmaterial noch besser zu nutzen als die Mikropartikel 13sind. Ersten Stabilitätsstudien bestätigt eine Erhöhung in Stabilität, wenn die Partikelgröße von reduziert wird ca. 600 nm bis ca. 100 nm. Dieser zu erwartenden Ergebnisse aus Dichter Partikelverteilung rund um den wässrigen Bereich 15.
Der Schutz der wässrigen Reaktion Fächer durch eine hydrophobe Shell und die Bezeichnung als flüssige Murmeln wurde erstmals im Jahr 2001 von Aussillous Et Al. und Mahadevan Et Al. beschrieben. 17 , 18. seitdem einige Anwendungen dieser definierte Reaktion Abteilungen beschrieben worden. Zum Beispiel ein Gassensor auf Basis flüssiger Marmor 19 und ein Nachweisverfahren für Wasserverschmutzung basierend auf einer optisch qualitative Basis entwickelten 20gewesen sind. Die Autoren unterscheiden die Vorteile der hohe Reaktionsgeschwindigkeiten und der niedrige Verbrauch von Chemikalien ihre Mikro Reaktionssysteme. Jüngste Publikationen beschäftigen sich mit der Herstellung von pH-Sensitive liquid Murmeln 16 oder die Darstellung der “Janus Partikel” mit zwei verschiedenen Beschichtungen aus verschiedenen Funktionen. Beispielsweise könnte Bormashenko Et Al. einen haarfeinen mit Muscheln aus Teflon und halbleitenden Ruß 21synthetisieren. Außerdem wurde nachgewiesen, dass Mikroreaktoren effizient können und bequem durch die Absorption von externen Sauerstoff als Comonomer durch die durchlässigen Gas-Flüssigkeits-Schnittstelle 24Polyperoxides zu synthetisieren. Bei einem anderen Ansatz bieten die Schale der Silica-Partikel-basierten flüssigen Murmeln die reaktiven Substratoberflächen, klassische Silberspiegel-Reaktion- 26zu regulieren. Aktuelle Probleme für Forschung und Entwicklung auf dem Gebiet der hydrophilen-Kern-hydrophobe-Schale Tropfen sind die Partikel Größenanpassung, die reproduzierbare Produktion von monodispersen Tropfen, die Benetzbarkeit von Oberflächen und die Wirkung einer Sekunde hydrophile Hülle auf das Mikro Reaktion Fächer 22sowie eine bessere Kontrolle über die Tröpfchen Flugbahnen, z.B. für die Entwicklung des MicroPCR-Durchlaufanlagen 4.
Eine magnetischen Betätigung des diese Mikroreaktoren bietet den Vorteil, relativ hohe Bewegung reicht und eine gute Selektivität der Kraft bei der Arbeit in biochemischen Systemen. Bei der Verwendung von hydrophoben Magnetit-Teilchen erfüllen sie sowohl die Funktion der magnetischen Kraftübertragung für den Verkehr von der Mikroreaktoren, als auch die Funktion einer hydrophoben Schale. Die magnetische Bewegung der Tröpfchen mit magnetischen Partikeln in einem Tröpfchen wurde erstmals im Jahr 2006 von Lehmann Et Al. postuliert. 23 und Shikida Et al. 25, die manuell benutzt wechselte Permanentmagneten als Aktoren für die Mobilisierung eines einzelnen Tropfens. Ein weiterer Ansatz, eine kleine Menge Flüssigkeit zu bewegen wurde von Zhao Et Al., realisiert, die die hydrophoben Fe3O4 Partikel als magnetische Hülle verwendet. Die Hülle des magnetischen Flüssigkeit Marmor wurde auf der oberen Seite des Tropfens durch eine vertikale umgekehrter Magnetfeld 27eröffnet. Basierend auf diesem Konzept, konnten Xue Et Al. Partikel zu entwickeln, die einen haarfeinen mit einer Oberflächenspannung von 20,1 dyn cm−1 28bilden. Lin Et Al. fabriziert Roman Zellulose basierende Mikro/Nano hierarchische Kugeln mit Superparamagnetism und Superhydrophobicity die magnetischen Tropfen Transport und Manipulation 31Gott Stabilität vorsehen. Dies war bisher nur veröffentlicht, wie ein Proof of Principle studieren und nicht für jede Anwendung verwendet. Die magnetische und elektrische Steuerung der flüssigen Marmor wird derzeit in ersten Ansätzen verfolgt. Zhao Et Al. 2010 15 und Zhang Et Al. 2012 29 waren in der Lage, eine Tröpfchen Manipulation durch die manuelle (handbetrieben) Bewegung eines Permanentmagneten unter Kern-Schale-Tröpfchen zu entwickeln. Bormashenko Et al. 11 erreicht die Beschleunigung einer ferromagnetischen flüssige Murmel auf eine Geschwindigkeit von 25 cm s-1 durch die Annäherung an einen Neodym-Magneten. Dem oben genannten Grundsatz Studien wurden ausschließlich durch die manuelle Bewegung des kleinen Dauermagneten durchgeführt. Als nächstes Entwicklung wurden Zhao Et Al. vor kurzem in der Lage, die erforderliche magnetische Flussdichte für die Bewegung der magnetischen Flüssigkeit Marmor durch Variation der Entfernung eines Permanent-Magnet- 30zu schätzen. Für eine Reaktionskontrolle vergleichbar mit der gemeinsamen Lab-on-a-Chip-Systeme scheint es unumgänglich, die automatische Steuerung des diskreten liquid v zur Verfügung zu stellenOlumes. Um dieses Bedürfnis zu befriedigen, haben wir eine neue Steuerung basierend auf Variablenfeld Steigungen zu fixieren, bewegen und öffnen Sie die magnetischen Mikroreaktoren entwickelt.
Für den erfolgreichen Einsatz von mikrofluidischen Technologien ist es wichtig, das Reaktionsvolumen entsprechend den Anforderungen der biotechnologische Synthese und Analysen zu bewegen. Die hier vorgestellten Betätigung-Plattform ermöglicht es mikrofluidischen Tröpfchen durch Magnetkraft verschieben. Die Bewegung kann frei in zwei Dimensionen auf einer planaren Fläche einer Reaktion-Plattform durchgeführt werden, unter Beifügung den flüssigen Tropfen mit einem magnetischen superhydrophob Schale. Damit wird ein …
The authors have nothing to disclose.
Die Autoren möchten die DFG für die Unterstützung zu erkennen.
3D-printer | FelixPrinters | Pro1 | |
10-acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine (Amplex Red) | Life Technologies | A12222 | |
Ammonium hydroxide | TU-KL | 1072 | |
CAD software | Siemens | Soled edge | |
Contact angle measuring device | Dataphysics | OCA 20 | |
Cylinder magnet | Webcraft GmbH | S-04-13-N | https://www.supermagnete.de/stabmagnete-neodym-rund/stabmagnet-durchmesser-4mm-hoehe-12.5mm-neodym-n42-vernickelt_S-04-13-N |
Dipotassium phosphate | Bernd Kraft | 7758-11 | |
Drying oven | Binder | FD 115 | |
Ethanol | Sigma-Aldrich | 68-17-5 | |
FeCl2 tetrahydrate | TU-KL | 1625 | |
FeCl3 hexahydrate | TU-KL | 1622 | |
Fluorescence probe | PerkinElmer | LS 55 | |
Horseradish peroxidase | Carl Roth | 9003-99-0 | |
Hydrogen peroxide | Th.Geyer GmbH & Co | 7722-84-1 | |
Monopotassium phosphate | Bernd Kraft | 7778-77-0 | |
Peltier element | Conrad | 193569 | |
Perfluoroctyltriethoxysilane | Sigma-Aldrich | 51851-37-7 | |
Scanning Electron Microscope | FEI | Helios NanoLab 650 DualBeam | |
Separation bar magnet | Webcraft GmbH | Q-40-20-10-N, | |
Winding machine | IWT GmbH | FW122 |