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Behavior

癫痫Electrocorticograms(ECoGs)的操作,并睡在针刺大鼠和小鼠

Published: December 22, 2016 doi: 10.3791/54896
* These authors contributed equally

Introduction

癫痫是在整个病人的寿命反复发作会出现一种常见的神经系统疾病。大多数癫痫复发可以通过抗癫痫药物(AEDs)良好的控制。然而,癫痫患者约30%的开发难治性癫痫1。癫痫原因睡眠干扰,这可能进一步加剧复发。证据表明,癫痫患者既可以在夜间扰乱睡眠或导致白天过度嗜睡2,3。我们先前的研究进一步表明,癫痫在时间授时(ZT)0,即发生在光的光周期的开始:黑暗循环,减少睡眠;这是由促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),一个稳态因子介导的。癫痫在ZT13(暗期的开始)增强的另一稳态因子,白介素-1(IL-1),这增加睡眠的表达。当癫痫发生在ZT6,的中间睡眠昼夜节律发生改变光周期4,5。另一方面,睡眠问题进一步加剧癫痫6的进展和复发。根据上述证据,我们力图揭示一个最佳的治疗方法同时控制癫痫和防止干扰睡眠癫痫患者。我们以前发现,电针与10赫兹的刺激频率,其中的电流在一定量通过一个不锈钢针递送到穴位,成功地抑制了电图(脑电图)癫痫活动和癫痫引起的睡眠障碍7 。 EA用100赫兹的刺激频率进一步降低癫痫活动和大鼠8,9-睡眠中断。这个实验成功取决于三个因素:首先,一个可行的癫痫动物模型;其次,对于在啮齿类动物睡眠记录和分析的方法;第三,针灸的准确性能和穴位位置的服务的准确性附件。

癫痫病一直分为两大类型:局灶性癫痫和全身性癫痫。我们感兴趣的是焦距颞叶癫痫(TLE),全身性癫痫,癫痫持续状态(SE),和自发全身性癫痫的复发。因此,不同的操作应用到我们的实验,创造出适合癫痫模型。建立联络的TLE,毛果芸香碱的低剂量给予到杏仁核(CEA)的左中央核。为了验证此模型,六脑电图电极植入在额叶(F1&F2),顶叶(P1&P2)和枕骨(O1&O2)裂片在左和右半球两者,和另外两个参考电极(R 1 R2)被放置在两个半球,小脑。一个附加的显微注射导向插管手术植入到左杏仁(AP,来自前囟2.8毫米; ML,4.2毫米; DV,相对于前囟7.8毫米)。坐标适于从Paxinos和Watson鼠图谱10。如果焦点TLE被成功地诱导,只从(P1)上左顶叶的电极,其是邻近左侧杏仁记录,应获得主导癫痫ECoGs,与来自其他脑电图电极记录无显著痫ECoGs。毛果芸香碱的腹膜内(IP)注射入大鼠诱发全身性癫痫和SE,但是这可能是致命的。五戊四氮(PTZ)每次注射之间的为期一天的间隔注射IP诱导成功自发全身性癫痫小鼠和也保证了小鼠的生存。两线脑电图电极植入在小鼠额叶和顶叶皮质接受脑电图信号,并核实自发反复癫痫。

多导睡眠图(PSG)是记录睡眠过程中发生的生理变化的综合方法,它可以客观地划分成睡眠非快速眼动(NREM)和r的不同阶段APID眼动(REM)睡眠。 PSG记录的身体功能参数,包括脑电波(脑电图,EEG),眼球运动(眼电,EOG),骨骼肌音(肌电图,EMG),心脏节律(心电图,心电图)和血氧水平和呼吸参数。在大鼠中,我们记录ECoGs,肌电图,皮质下,和运动活动的警惕状态分为清醒,NREM睡眠和快速眼动睡眠。在小鼠睡眠分析使用ECoGs,肌电图,和自主活动的结果进行。大鼠手术有三个脑电图立体定向手术拧在额叶,顶叶电极,对侧小脑皮层植入。警戒状态(觉醒,NREM睡眠和REM睡眠)的采集后判断根据来自ECoGs,肌电图,脑温,和运动活动所获得的参数进行。进行分类在大鼠和小鼠的动物的行为的详细条件在叔描述他协议。

大鼠和小鼠需要用低剂量zoletil的(25毫克/千克),它是立体手术过程中通常施用麻醉剂的一半剂量被麻醉,执行手动针刺或EA之前。这一剂量可以向动物注射后醒来30至35分钟。无论手动针刺或EA在黑暗时期的开始进行的,以30分钟的恒定的时间段,并且每个动物被连续为两到三天处理。刺激EA电流通过被插入到穴的不锈钢针递送到特定穴位。刺激电流是双相方脉冲序列,其中脉冲持续时间为150毫秒和刺激强度为1毫安。如果干针用于手动针刺,插入穴位针头抽动每隔5分钟10次。手动针刺或EA的困难的部分是定位取穴在啮齿类动物。组委会在大鼠或小鼠穴位通货膨胀类似于在人体内的解剖学位置。例如,双侧凤池穴位于从颈部后部中线3毫米远,两个耳朵,这类似于在人体11的解剖位置之间。此外,在皮肤上的低阻抗的穴位,可以进一步证实。假针灸或假EA操作是必要的针灸或EA实验。假针刺或假的EA应在靠近穴,如腋下12附近的非穴位进行。

要成功地观察针刺或电针的癫痫和癫痫引起的睡眠中断的影响,以下因素必须到位:一个可行的癫痫动物模型,癫痫ECoGs的精准分析和癫痫的复发,要警惕状态进行分类的方法和在啮齿类动物针刺或EA的精确性能。

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Protocol

所有实验方案由国立台湾大学的机构动物护理和使用委员会(IACUC)的批准。

1,立体定向手术植入耳蜗电图电极,电极肌电图,脑热敏电阻和注射引导套管

  1. 对于大鼠(250 - 350克,6至8周龄的Sprague-Dawley大鼠)
    1. 麻醉大鼠腹腔注射50毫克/公斤zoletil。按捏后肢后观察缺少响应确认麻醉合适的深度。应用眼膏,刮胡子的皮毛,和消毒用聚维酮碘溶液和75%乙醇的皮肤。注射抗生素(青霉素G),以防止感染。
    2. 准备手术刀,剪刀,止血钳,纱布和烧灼的机器进行手术。由高压釜中并通过75%乙醇的烧灼消毒外科齿轮和纱布。
    3. 将耳杆进入耳道和老鼠安装到立体定向。
    4. 运用手术刀,使头骨大约2厘米的正中切口沿着两个耳朵之间的直线,尾部移动。剪辑皮瓣具有止血,露出颅骨,取出组织过用手术刀头骨。
    5. 钻头八孔(F1,F2,P1,P2,O1,O2,R 1,和R 2),每个约0.7mm的直径,在具有旋转工具的头骨。拧上额叶,顶叶,枕叶8脑电图电极和在左和右半球都小脑。这些电极用于局灶性癫痫检测。
      1. 用于记录电极以下坐标:从中线2.0毫米前方前囟和2.5毫米,顶叶(P1和P2):额叶(F1和F2)-2.0毫米前方前囟和3.0毫米从中线和枕骨(O1和O2):-5.5毫米前方前囟以及从中线3.0毫米。
      2. 放置两个参比电极(R1和R2)在小脑(-11.0毫米前方前囟并从midli4.0毫米NE)。
    6. 在大鼠中,钻三个孔并放置在右额(F2)中,用相同的坐标的皮质顶叶(P2)的两个螺旋EEG电极的单独的基团,在步骤1.1.5.1中所述。将在左小脑(R1),其作用是地面动物,减少信号假象第三脑电图电极。这些电极被用于确认全身性癫痫和分析警惕阶段。
    7. 分离颈部皮肤和肌肉,并插入两个EMG电极插入颈部肌肉。
    8. 钻头骨另一个孔和一个放置注射引导套管插入左侧杏仁(AP,从囟门2.8毫米; DV,相对于前囟门7.8毫米; ML,4.2毫米)的大鼠。坐标将被改编自Paxinos和Watson鼠图谱10。
    9. 钻取头骨一个更大的孔(直径为1.6毫米)和顶叶皮层的表面上,这将在后面凝成插入校准的30千伏热敏电阻器,以MONITOR大鼠皮层温度。
    10. 用纱布和烧灼停止当它发生出血。
    11. 路线从脑电图电极和电极肌电绝缘导线为底座和热敏电阻连接到系绳。水泥基座和引导插管用牙科丙烯酸头骨。
    12. 与polysporin(杆菌肽锌/多粘菌素B),以防止感染局部治疗的切口。给一周中的水的动物都布洛芬和青霉素G手术后。
  2. 对于小鼠(20 - 30克,6至8周龄的C57BL / C小鼠)
    1. 麻醉通过IP注射小鼠用50mg / kg的zoletil和按捏后爪后观察缺乏响应的确认麻醉的适当深度。应用眼膏。剃毛发后,消毒用聚维酮碘溶液和75%的乙醇的皮肤。注射抗生素(青霉素G),以防止感染。
    2. 将耳杆插入耳道安装鼠标的立体定位。
    3. 使用手术刀,使在头骨的近似1.5厘米正中切口沿两个耳朵之间的线路,尾部移动。剪辑皮瓣具有止血,露出颅骨,取出组织过用手术刀头骨。
    4. 戳与手术剪颅骨两个孔并放置两线​​脑电图电极上的右额叶(F2:2.0毫米到前囟和+1.5到中线)和左顶叶(P1:-3.0毫米到前囟和-2.5毫米到中线)。
    5. 分离颈部皮肤和肌肉,并插入两个EMG电极插入颈部肌肉。
    6. 从金属丝脑电图电极和EMG电极绝缘导线水泥连接到阴端子和一2.54毫米连接器,然后用牙科用丙烯酸系的头骨。
    7. 与polysporin(杆菌肽锌/多粘菌素B),以防止感染局部治疗的切口。给在水中的动物都布洛芬和青霉素G一凌晨手术后ķ。
  3. 允许所有的动物,以之前的实验的开始恢复七天。
  4. 房屋分别大鼠或小鼠,在各个记录笼,在隔离室,其中的温度保持在23±1℃,和光:暗(L:D)的节奏被控制在12:12小时循环(40瓦×4管照明)。提供食物和水随意
  5. 通过系绳1周连接脑电图,肌电图,和热敏电阻到放大器手术后开始录音。

2.局灶性癫痫TLE,SE和自发性癫痫复发的建立

  1. 对于大鼠
    1. 通过使用微量注射泵注射引导套管辖毛果芸香碱(2.4毫克/μL)进入左东航0.5微升。喷射率应在0.2微升/分钟设定为诱导焦TLE。
    2. IP注射300毫克/公斤的毛果芸香碱诱导广义外延复发性SE lepsy。
  2. 对于老鼠
    1. 在一个特定的ZT点IP管理PTZ(0.035毫克/克鼠标体重),隔日1次。五个连续注射会导致自发和循环地全身性癫痫的发展。
  3. 对于大鼠和小鼠
    1. 由5000放大脑电图信号,0.1和40赫兹之间过滤模拟带通。
    2. 使用一个A / D转换板将模拟ECoGs信号转换成数字信号,与一个128赫兹的采样率。
    3. 使用视觉得分软件和分析发作和癫痫的持续时间。测量,以便表示的持续时间的时间比例。
    4. 由癫痫尖峰的外观比振幅2 mV的更大,拥有超过30秒13的持续时间定义脑电图癫痫。

3.警惕的状态分类

  1. 对于大鼠
    1. 通过使用记录的12-S集内ECoGs,肌电图,脑温度和运动获取的参数确定警惕状态。通过系绳1周连接脑电图,肌电图,和热敏电阻到放大器手术后开始录制。 3.1.7 - 根据步骤3.1.5使用自定义国产软件评分的状态。
    2. 测量使用红外运动检测器的运动活动,整合的信号每隔1秒,并存储信号。
    3. 测量皮质温度并存储信号。
    4. 根据我们先前定义的标准分类,14警惕的状态。
    5. 通过使用下面的特征评分觉醒:( - 4.0赫兹0.5)和下部THETA功率高频频谱小振幅ECoGs,更高的增量功率(6.0 - 9.0赫兹);占主导地位的自主活动;高肌电活动;逐步增加对皮质的温度。
    6. 通过跟随着分数NREM睡眠摹特点:三角波主导ECoGs大的振幅,谢绝肌电活动,减少皮质温度,并没有自主活动。
    7. 通过使用下面的特征得分REM睡眠:ECoGs的振幅与主导THETA频率,突然增加皮质温度,最小EMG活动,和低自发活动与身体抽搐降低。
  2. 对于老鼠
    1. 重复警惕状态的分类中如在大鼠中进行,除有来自热敏电阻没有记录皮质温度小鼠。

4.性能大鼠手册针灸和EA的

  1. 大鼠被麻醉了EA协议。
  2. 通过定位解剖穴位和穴位确认低皮肤阻抗。当检测到低皮肤阻抗的指示灯闪烁。注:风池穴取穴位于3毫米远离后正中线上是吐温两个耳朵,脖子上的。
  3. 以2mm的深度插入不锈钢针入穴。
  4. 抽搐插入针每隔5分钟10次。
  5. 使用功能性电刺激,用1毫安通过针穴位强度双相传送脉冲(150微秒的时间每个)的一列火车。
  6. 执行假针灸或假EA作为对照。

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Representative Results

有不同的大鼠和小鼠模型,以满足不同的癫痫类型的需求。为了诱导焦点TLE,毛果芸香碱0.5μL(2.4毫克/μL)给予到左侧杏仁核。和稀有癫痫活动由脑电图电极的其余部分拾取( 1A:A,C,D,E:主要的癫痫样ECoGs从脑电图电极上的左半球的顶叶( 二图1A)获得,和f)当毛果芸香碱施用。癫痫ECoGs主要是毛果芸香碱给药后立即记录。这些结果是从8通过。这些结果表明焦TLE的成功诱导大鼠直接注射低剂量毛果芸香碱入杏仁后。

5分钟内,该IP的300毫克/公斤的毛果芸香碱诱导jection对行为严重的胆碱能作用,如毛发竖立,流涎,眼睛发红,发抖,面部automatisms。这些行为迹象的严重程度逐渐增加,直到脑电图癫痫大发作时( 图1B,蓝色框)。 SE还出现全身性癫痫( 图1B,红色框)以下。这些结果是从13通过。我们的研究结果表明,300毫克/公斤毛果芸香碱的IP注射是诱导脑电图文件证明全身性癫痫和SE的可靠方法。然而,SE显影后的存活率为15%和20%之间。癫痫小鼠云台-点燃模型被用来开发自发和循环地全身性癫痫。云台的剂量0.035毫克/克小鼠体重为IP注射在特定ZT点( 例如,暗期的开始,ZT13)每隔一天,并且每次注射由一天的间隔隔开。有没有癫痫样在第1 注射PTZ后黑暗时期发现ECoGs( 图1C:a)或在以下黑暗时期,当它是用于注射的一个休息日( 图1C:b)中 。无显著癫痫活性的2 ,3 后发现,和 4 注射(数据未在这里示出)。然而,癫痫ECoGs是第5 的PTZ注射( 图1C:cd)后诱导,以及自发和循环地全身性癫痫( 图1C:e一个')。

我们根据我们在协议中提到的标准划分警戒状态到清醒,NREM睡眠和快速眼动睡眠。失眠是通过视觉与低幅度和频率高不同步ECoGs得分。在增量频带功率密度的值(0.5 - 4赫兹)通常比在更大的θ频带 - 清醒时(6 9赫兹),更高频频谱(> 10赫兹)中找到。失眠表现出肌电图高振幅和大量的运动行为。此外,皮质温度逐渐升高时,无论从NREM睡眠或REM睡眠警觉状态转换到清醒( 图2)。 NREM睡眠的特征在于具有高振幅和低频率的同步ECoGs。的功率密度值是在增量频带占优势。肌电图振幅逐渐下降,而NREM睡眠时无自主活动展出。皮质温度降低时,警惕状态转换,从觉醒到NREM睡眠( 图2)。在REM睡眠中,脑电图波同步错开,幅度降低,主要的脑电图功率密度的θ频率内发生(6.0 - 9.0赫兹),EMG活动是最低的,阶段性体抽搐观察,和皮质温度急剧上升( 图2)。

我们展示了EA对癫痫活动的不同影响当EA刺激腧穴风池用无论是高频刺激(100 Hz)或低频刺激(10赫兹)。在图3A中 ,毛果芸香碱的0.5微升微注射(2.4毫克/μl)到左杏仁诱导焦TLE,如先前(B)中提及。但是,双边凤池穴100赫兹EA加剧了毛果芸香碱诱发癫痫ECoGs(C)。这些结果适于从8。与此相反,双边凤池的10赫兹的EA抑制毛果芸香碱诱导的癫痫样ECoGs( 图3B:℃)。这些结果是改编自7。暗周期( 图4A4B):毛果芸香碱成左东航执政期间12小时的光周期也抑制NREM睡眠。 NREM睡眠AF工作中,减少在黑暗时期的EW小时主要是由于麻醉的效果,并且不EA 15的直接影响。 100 Hz的EA的应用进一步恶化NREM睡眠( 图4A)的毛果芸香碱诱导的抑制。与此相反,双边风池穴取穴的10赫兹EA增加在黑暗时期和块在光周期( 图4B)NREM睡眠的毛果芸香碱诱导减少NREM睡眠本身 。这些结果是从9通过。

图1
图1:在大鼠和小鼠的不同型号癫痫。 一个展示的焦点TLE的影响。 阐明与SE大鼠全身性癫痫。 C表示自发性和复发性癫痫ECoGs。 (A)(A),(B),(C),(D),(e)中,和(f)表示对E从放置在左侧额叶电极记录COG信号,左顶叶,左枕叶,右额,右顶叶和右枕皮质,分别为。 (B)中的箭头指示毛果芸香碱的IP注射。灰色框(一)展示了毛果芸香碱注射前获得基线ECoGs。蓝色框显示全身性癫痫的癫痫ECoGs。红色框(b)是SE。选自(a)和(b)中的(a')和(b')示出提取的脑电图信号。 (C)的 (a)表示第1 的PTZ注射和(b)表示ECoGs第1 的PTZ注射小鼠后记录在一天后获得的ECoGs。 5 PTZ注射液(c)和事后癫痫后发生的活动。发生的当天后5 PTZ注射了性致痫ECoGs如(D)。 5 PTZ注射后第5天记录的性致痫ECoGs如(E) 。在底部(a')的该图表示从红色框萃取ECoGs。 请点击此处查看该图的放大版本。

图2
图2:觉醒,NREM睡眠和快速眼动睡眠:警惕美国的分类。大鼠的警觉状态由从ECoGs,脑电图谱,肌电图,运动活性,和皮质温度的参数进行分类。小鼠的警觉状态的特征在于用相同的参数,除了皮质温度是不适用的。
请点击此处查看该图的放大版本。

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3:100-Hz 和10 Hz电针癫痫的影响。(A),第一次脑电图跟踪演示了基线ECoGs(一)。毛果芸香碱成左杏仁显微注射诱导焦TLE(b)中。双侧风池穴100-Hz电针的应用加剧了癫痫ECoGs(C)。在(B)中 ,第一脑电图跟踪演示了基线ECoGs(a)中。毛果芸香碱的显微注射入左杏仁诱导焦TLE(b)中。 10-Hz电针在双侧风池穴的应用抑制癫痫ECoGs(C)。 请点击此处查看该图的放大版本。

图4
图4: 的影响100 Hz和10 Hz电针的外延lepsy诱导睡眠中断。 (A)焦点TLE匹罗卡品到左侧杏仁的注射过程中光照时间减少NREM睡眠。 100 Hz的EA进一步恶化癫痫引起的睡眠障碍。 (B)的10-Hz电针块的应用在光照期NREM睡眠的癫痫引起的减少。此外,10赫兹EA在黑暗时期增强NREM睡眠。值表示为平均值±SEM表示。黑色圆圈表示获得的值匹罗卡品的显微注射,空心圆圈示出的毛果芸香碱注射后获得的数据之前,开放三角形演示EA刺激后得到的值。黑条代表12小时的光的暗期:暗循环,并且白条描绘的光周期。 *代表100Hz的EA +毛果芸香碱组和对照(ANOVA,P <0.05)和#之间的统计差异指示统计differenc10赫兹EA +毛果芸香碱组和毛果芸香碱组(ANOVA,P <0.05)即请点击此处查看该图的放大版本。

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Discussion

选择一个可行癫痫的动物模型为每个实验目的是至关重要的。我们的目标之一是阐明电针对癫痫抑制的作用。 EA是一种替代药物,可能在癫痫表现出的治疗效果,并在中国古代文献中已有记载。然而,有一个缺乏科学证据来证明这一点。为了确定EA对癫痫的影响,我们主要侧重于EA的影响轻度局灶性癫痫,而不是严重的癫痫大发作或SE。我们以前的研究中使用大鼠的焦点TLE模型来证明对毛果芸香碱诱发的焦点TLE和焦TLE引起睡眠中断7双边风池穴位EA的低频率(10赫兹)和高频(100赫兹)的影响9。我们的研究结果表明,双侧风池穴10-Hz电针抑制焦点TLE和睡眠紊乱,而100 Hz的EA加剧焦点都和TLE TLE引起的睡眠障碍。另一个例子为tØ在展示难治性癫痫的脑深部刺激,尤其是全身发作和SE的影响。我们认为其中的丘脑(ANT)高频和低强度的电流的前核的单方面脑深部刺激成功抑制全身性癫痫的复发和SE 13的持续时间。我们还自发研制并使用小鼠PTZ-点燃方式反复地全身性癫痫。该PTZ-点燃模型可广泛应用于癫痫研究。建立这些模型癫痫的关键步骤是使用适当的剂量。较大量的毛果芸香碱进入东航显微注射可发展为继发性全身性癫痫。超过300毫克IP / kg施用毛果芸香碱诱发全身性癫痫和SE;然而,大多数老鼠没有生存SE开发之后。此外,剂量低于280毫克/千克无法成功建立全身性癫痫和SE。同样的SItuation将发生在PTZ-点燃模型。较大剂量的PTZ可能导致SE,但许多老鼠都无法生存。与此相反,低剂量的云台的需要多次注射以建立自发复发性癫痫。

在大鼠和小鼠不同警惕状态的分类主要是基于人类从多导睡眠记录功能。我们修改了协议,以通过脑电图,光谱分布,肌电图,运动活动,和皮质下记录的值来分析睡眠 - 觉醒活动。脑电图,光谱分布,肌电图,运动活性,和皮质温度从觉醒和NREM睡眠记录特性类似于从人获得的。然而,REM睡眠是有时会产生歧义,难以在啮齿类动物进行分类。大多数文献根据其ECoGs和肌电图描述了在啮齿类动物REM睡眠。 ECoGs的THETA频段为主导和肌电图肌肉张力最低时,大鼠和小鼠重新在REM睡眠。为了提高得分REM睡眠的信心,我们还记录运动活性和皮质温度。阶段性的身体抽搐观察到当老鼠进入REM睡眠皮质温度迅速增加。运动活性和皮质温度,除了ECoGs,光谱分布,以及肌电,增强REM睡眠分析的准确性。所包含的多个参数,更精确的分类可制成。

两个要点,当研究人员进行手动针刺或电针实验一直为人所诟病。第一个问题是如何研究人员识别并确认大鼠穴位。经络系统腧穴在人体中已经非常成熟,但是没有经络系统穴位图在啮齿类动物中证实。因此,相应的穴位的在啮齿类动物中的本地化根据相对解剖位置被确定。例如,风池穴(GB 20)位于家鼠胸锁乳突肌的上部和在人体中斜方肌之间凹陷。我们发现在啮齿类动物相关的解剖位置和测量低皮肤阻抗进一步证实它。穴位的阻抗是比周围皮肤的低。第二个问题是在针刺剂量如何在实验过程中的控制。如果手动针刺用于实验中,抽搐针的操纵应用相同的研究者在每一个操作相同的方式进行。这将是更容易控制的针刺剂量如果EA是适用的,因为EA保证一个一致的刺激频率和电流强度。此外,在镇痛,EA表现出比手动针刺16多有效性。然而,手动针刺和EA在同一穴位的低频和高频刺激可能激活不同的脑区17,这可能意味着不同的underlyING机制。

综上所述,本文展示了在大鼠和小鼠几种化学诱导癫痫模型,包括焦TLE,全身性癫痫,SE和自发反复地全身性癫痫。我们还建立了大鼠传统和快速电 - 点燃癫痫模型。如果有兴趣的读者的电-点燃模型中,请参阅参考文献4和5,我们还提供了标准来分析在大鼠和小鼠睡眠 - 觉醒活性。为了评估电针对癫痫活动和睡眠的影响,我们将介绍如何本地化相关的穴位在大鼠和如何进行针灸,我们也提出了一些代表性的结果证明EA的癫痫和癫痫引起的睡眠中断的影响。

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Drugs
Zoletil Virbac 50 mg/kg i.p.
pilocarpine Sigma-Aldrich P6503 300 mg/kg i.p.; 1.2 mg microinjection
PTZ Sigma-Aldrich P6500 0.035 mg/mouse
polysporin Pfizer
Surgery
ECoG electrode Plastics One E363/20 screw electrode for rats
Pedestal Plastics One MS363
Cannula Plastics One C315G/spc
Thermistor Omega Engineering 44008
Dental acrylic Tempron
Stereotaxic Instrument Stoelting Dural arms
Recording equipments
ECoG amplifier Colbourn Instruments V75-01
A/D Board National Instruments NI PCI-6033E
Infrared-based motion detectors Biobserve GmbH custom-made
ICELUS G-System
AxoScope 10 Software Molecular Devices
Acupuncture needs
Stainless needles Shanghai Yanglong Medical Articles Co. 32 gauge x 1”
Functions Electrical Stimulator I.T.O., Japan Trio 300
AcuPen Lhasa OMS Pointer Excel II

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References

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行为,第118,针灸,脑电图(脑电图),癫痫模型,睡眠,立体定向手术,大鼠,小鼠
癫痫Electrocorticograms(ECoGs)的操作,并睡在针刺大鼠和小鼠
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Yi, P. L., Jou, S. B., Wu, Y. J.,More

Yi, P. L., Jou, S. B., Wu, Y. J., Chang, F. C. Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture. J. Vis. Exp. (118), e54896, doi:10.3791/54896 (2016).

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