Summary
Vi beskriver en fremgangsmåde under anvendelse målrettet perifer bestråling for at inducere træthed-lignende opførsel hos mus. Den valgte ikke-dødelige strålingsdosis fører til en ugelang reduktion i frivilligt hjul-kører aktivitet.
Abstract
Cancer-relateret træthed (CRF) er et rystende og bekostelig tilstand, der ofte påvirker patienter, der modtager cancer behandlinger, herunder strålebehandling. Her beskriver vi en fremgangsmåde under anvendelse målrettet perifer bestråling for at inducere træthed-lignende opførsel hos mus. Med passende afskærmning, bestrålingen målretter lavere abdominal / bækkenpartiet af musen, skåner hjernen, i et forsøg på at modellere strålebehandling modtages af personer med bækken cancere. Vi leverer en strålingsdosis, der er tilstrækkelig til at inducere træthed-lignende opførsel hos mus, målt ved frivillig hjul-running aktivitet (VWRA), uden at forårsage åbenbar morbiditet. Da hjulet kører er en normal, frivillig adfærd hos mus, bør dens anvendelse har ringe confounding effekt på andre adfærdsmæssige test eller biologiske foranstaltninger. Derfor kan hjulet kører anvendes som en gennemførlig endepunkt i at forstå de adfærdsmæssige og biologiske korrelater for træthed. CRF er en kompleks tilstand med hyppige cofølgesygdomme, og sandsynligvis har årsager i forbindelse med såvel kræft og dens forskellige behandlinger. Beskrevet i dette papir metoder er nyttige til undersøgelse stråling-induceret ændringer, der bidrager til udviklingen af CRF og mere generelt, at udforske de biologiske netværk, der kan forklare udviklingen og persistens af et perifert-udløst, men centralt drevet adfærd som træthed .
Introduction
Kræft-relaterede træthed (CRF) er en foruroligende og bekostelig tilstand, der ofte påvirker patienter, der fik kræftbehandling 1. Den træthed hverken proportional med seneste aktivitet eller lindres ved hvile, og det er forbundet med en lang række forstyrrelser relateret til humør, motivation, opmærksomhed og kognition 2. De biologiske årsager til CRF er ukendte, selvom det er blevet vist i mange tilfælde at korrelere med inflammation og cytokinniveauer, også i nogle tilfælde med hæmoglobinniveau og funktionen af forskellige hormonsystemer (se Saligan et al. 3 for en gennemgang af den biologiske undersøgelser af CRF).
Kontrollerede undersøgelser med dyremodeller er nødvendige for at forstå den adfærd og biologi er forbundet med denne komplekse tilstand. Mens tumorrelateret 4 eller kemoterapi-beslægtet 5, 6 fedtigue er blevet undersøgt i gnavermodeller kan ætiologien af CRF være behandling-specifik. For at undersøge CRF relateret til strålebehandling har vores gruppe for nylig udviklet en musemodel for bestråling-induceret træthed 7. I modsætning til eksisterende CRF modeller, der involverer hjernen eller bestråling af hele legemet 8, 9, denne model undersøger, hvordan en ændring i centralt drevne adfærd, ligesom træthed, kan udløses af en perifert målrettet bestråling procedure.
Den her beskrevne procedure er designet til at modellere strålebehandling administreret til patienter med bækkensmerter cancer, ved anvendelse blyafskærmning til at målrette den nedre abdominale / bækkenpartiet med bestråling. Men ved at modificere blyafskærmning eller dens placering i forhold til forsøgsdyr, denne procedure kan tilpasses til at modellere bestråling af andre dele af kroppen. Frivillig hjul-kører aktivitet (VWRA) bruges til at måle træthed-lignende behavior; fordi det er en frivillig og normal adfærd 10, bør den gøre det muligt samtidig brug af andre adfærdsmæssige og biologiske tests. Vi har fundet, at perifer bestråling er tilstrækkelig til at reducere VWRA i mus uden at forårsage åbenlys sygelighed 7. Fremtidige eksperimenter med denne model kan hjælpe afsløre virkningen af perifer bestråling på immun- og andre biologisk signalering, samt de efterfølgende ændringer i centralnervesystemet, der kan producere mangler forbundet med CRF.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Etik Statement: Denne undersøgelse blev godkendt af National Institutes of Health (NIH) Animal Care og brug Udvalg. Alle efterforskere, der deltager i håndtering af dyr og måling af undersøgelsens resultater blev ordentligt uddannet af NIH Office of Animal Care og brug og National Heart, Lung, og Blood Institute Murine Fænotype Core. Alle aspekter af dyreforsøg, bolig, og miljømæssige betingelser, der anvendes i denne undersøgelse var i overensstemmelse med Vejledning for Pleje og anvendelse af forsøgsdyr 11.
1. Boliger og forsøgsdyr
BEMÆRK: House C57BL / 6-mus (af ca. fem uger gammel ved ankomsten) individuelt under hele forsøget og give ad libitum adgang til foder og vand. Alle bure holdes på en 12:12 timer lys-mørke cyklus med lyset fase, der indledes ved 06:00 og mørke fase ved 06:00.
- Identificer mus og tildele dem til individuel standard ventilered mus bure. Tillad 24 timer efter proceduren for inddrivelse identifikation.
BEMÆRK: Tail tatovering anbefales som et middel til identifikation til at fjerne muligheden for, at et øremærke kunne blive fanget i et kørende hjul. Tatovering et tal på halen af hver mus, med nummeret på halen matcher nummeret skrevet på musens bur. - Tillad mus til at akklimatisere sig til deres bure i mindst tre dage mere, håndtering hver mus forsigtigt i en periode på tre minutter om dagen.
2. Løb Wheel Akklimatisering og Baseline
- Indføre musene til individuelle VWRA bure, hver udstyret med en kørende hjul forbundet til en elektronisk tæller til kontinuerlig optagelse.
BEMÆRK: Alle hjul tællere forbindelse til en computer via en enkelt USB-interface (se Materialer List). Computeren software beregner antallet af hjul rotationer, distance, og gennemsnitlig hastighed på tværs hver udpeget tidsinterval for den angivne samlede duration. Når optagelsen stopper, bliver data automatisk gemmes både som tekst og som regneark. - Påbegynd registrering af VWRA via computeren software interface. Sæt optagelsen intervaller til en time og varigheden til mindst fem dage. Fortsæt optagelsen VWRA i mindst fem dage.
BEMÆRK: Ved afslutningen af trin 2.2, skal alle mus opnå en relativt ensartet mængde daglige hjul kørende aktivitet. Hvis ikke, så identificere og udelukke eventuelle outliers. - Stop VWRA optagelsen via software interface, og returnere musene til deres standard bure, der er beskrevet i trin 1.1 (bure uden at køre hjul).
- Tilfældig mus til enten sham-bestrålet kontrol eller bestrålet grupper.
3. Bestråling
Bemærk: Udfør følgende trin for alle musene i begge grupper, en gang om dagen i tre sekventielle dage. Behandl mus i samme rækkefølge hver dag.
- Bedøver hver mus ved intraperitoneal injektion afen ketamin (100 mg / kg) og xylazin (10 mg / kg) blanding.
- Bekræft anæstesi med en tå knivspids og bruge salve på øjnene for at forhindre tørhed, mens under anæstesi.
- Overfør bedøvet mus i en blyafskærmning enhed. Arranger musen i afskærmning, så kun den nederste abdominal / bækkenpartiet er udsat for.
BEMÆRK: afskærmning er sammensat af to ledende "kasser", med en smal åben plads i mellem som tillader stråling udsat for en mindre, målrettet region af muse (se figur 1). - Brug medicinsk tape for at fastgøre basen af musens hale på plads inde i afskærmningen.
BEMÆRK: Trin 3.4 er valgfrit, men dette kan bidrage til at sikre, at placeringen af musen ikke ændres under det følgende trin. - Transportere afskærmningsanordningen ind i strålerøret, hvilket sikrer, at dyret holdning i afskærmning opretholdes.
- Hvis musen er i bestråling gruppen, leverer 800 cGy på en dose på ca. 110 cGy / min. Hvis musen er i skin-bestråling kontrolgruppen, lade musen i den inaktive strålerøret for den tilsvarende tid.
BEMÆRK: Optimale bestråler indstillinger vil afhænge af den særlige enhed. Dosishastigheden af 110 cGy / min leveret fra en 137 Cesium kilde er den centrale dosishastighed på strålerøret bruges her. Eksponeringstiden indstilles til at nå det ønskede totale dosis på 800 cGy. - Fjern musen fra strålerøret og afskærmning, og derefter returnere det til sin oprindelige, standard nævnt i trin 1.1 bur.
- Løbende overvåge musen, indtil det har genvundet tilstrækkelig bevidsthed til at opretholde brystleje.
4. Stråling-induceret Træthed Måling
- På dagen efter afslutningen af tre på hinanden følgende dage med bestråling, overføre mus til deres individuelle VWRA bure, der er beskrevet i trin 2.1.
- Record VWRA, som beskrevet i trin 2.2, undtagen her indstille optagelsenvarighed til mere end 15 dage. Ved slutningen af de 15 dage, manuelt stoppe VWRA optagelsen via software interface.
BEMÆRK: Data fra hver optagelse periode gemmes automatisk som regneark, som hver især indeholder de rotation, distance og hastighed målinger for alle dyr (kolonner) og på alle intervaller (rækker) i hele varigheden af optagelsen. Ved slutningen af forsøget, er der to regneark genereret af optagelsen software: en for den præ-bestråling VWRA, og en for post-bestråling VWRA.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tre batcher af mus blev kørt gennem forskrift ovenfor beskrevet. Der var i alt 16 sham og 20 bestrålede (2.400 cGy, 3 x 800 cGy / dag) mus. Efter tre dage i træk af bestråling, viste det bestrålede gruppe væsentligt reduceret VWRA sammenlignet med sham (blandede gentagne målinger ANOVA: væsentligste virkning af strålebehandling, F 1,13 = 19,233, p <0,001). Effekten var signifikant for de første syv dage efter bestråling (simple vigtigste virkninger, p <0,05 med Bonferroni korrektion), med det laveste gennemsnitlige VWRA afstand forekommer på den tredje dag efter stråling (figur 2A). På dag 25 og 26, blev der ikke indsamlet data på grund af andre adfærdsmæssige test.
Figur 2B viser fordelingen af ændringen i VWRA fra før til efter bestråling. Mens størstedelen af testede mus udviste træthed symptomer (en reduktion in hjul kører aktivitet), der var en lille antal mus, der viste lille ændring eller endog en stigning i VWRA (figur 2B, lavere plot). På grund af denne variation, kan eksperimenter med små stikprøvestørrelser ikke fange træthed-lignende adfærd.
Figur 1: blyafskærmning Apparatur. Den afskærmning, som blev udviklet internt, er samlet som to identiske bokse. Mus er placeret med kun deres bækkenpartiet eksponeret i mellemrummet mellem føringen bokse. (A) Et fotografi af afskærmningen i dets beholder. De ledende bokse er omgivet af polystyrenskum til at holde dem på plads, som er omgivet af den 10,5 tommer plexiglaskasser diameter beholder, der er designet til strålerøret. (B) Skematisk af bly afskærmning. Den ledende afskærmning består af 1-tommer tykke blokke af bly arvarierede som to bokse. Hver kasse består af fire dele: den øverste og nederste stykker er 4,25 "x 3" x 1 ", mens sidestykkerne er ~ 0,5" x 3 "x 1". Når de er samlet, de ydre dimensioner af hver kasse er 4,25 "x 3" x 3 ", og der er en 1" mellemrum mellem dem. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2: Daglig Frivillig Wheel Running Distance. (A) i alt Gennemsnitlig afstand drives af mus hver dag (n = 16 kontrol, 20 bestrålede). Mus blev bestrålet på dagene 14, 15, og 16. På dag 25 og 26 blev der ikke indsamlet data på grund af andre adfærdsmæssige tests. Fejlsøjler viser standardafvigelse på middelværdien. * P <0,05. (B) Histogrammer af ændringen i VWRA, her defineret som middelværdien af tEfter tre dage umiddelbart før bestråling (dag 11 - 13) minus gennemsnittet af de tre dage umiddelbart efter stråling (dag 17 - 19). Positive tal angiver en reduktion i VWRA. Klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi har beskrevet en protokol ved hjælp målrettet perifer bestråling til at fremkalde en reduktion af VWRA i mus uden confounding sygelighed eller dødelighed. Vigtigere er det, en simpel afskærmning enhed giver bestråling i denne protokol til at målrette en ønsket region konsekvent, efterligner strålebehandlinger modtaget af patienter med bækken kræft. I modsætning til eksisterende CRF modeller, der involverer hjernen eller bestråling af hele legemet 8, 9, denne model undersøger, hvordan en perifert målrettet bestråling procedure kan påvirke centralt drevne træthed adfærd. I vores repræsentative resultater, viser vi, at perifer bestråling leveret på denne måde er tilstrækkelig til at frembringe træthed-lignende opførsel med en fuldstændig genopretning omkring en uge senere.
Som et mål for træthed, VWRA giver mulighed for enkel og objektiv vurdering af afstand og hastighed i 24 timer om dagen, der kræver minimal træning og eksperimentere tid. Det gøres kræver boliger mus i individuelle bure, hvilket gør facilitet plads en mulig begrænsende faktor. Mens de enkelte boliger kan påvirke mus adfærd, muligvis kan føre til angst 12 eller hyperaktivitet 13, der er bevis for, at hjulet kører kan reducere disse negative virkninger 14. Wheel løbsforhold har også vist sig at have mindre intra-muse variabilitet og større reproducerbarhed end andre vurderinger af fysisk aktivitet 15. Det er dog muligt, at fysisk træthed kan mere selektivt fanget i andre end frivillige aktiviteter måder, da frivillige aktiviteter kan afhænge af motivation eller andre end strengt fysisk træthed 16 faktorer. Yderligere eksperimenter vil være nødvendigt at foretage en sådan bestemmelse.
Men der er flere punkter i den protokol, der er afgørende for succes. Det er vigtigt, at mus er tilladt tid til Recover ved ankomsten i et nyt anlæg, og at håndtering udføres i denne periode som bemærket. Disse procedurer reducere stress og angst, som kan påvirke de frivillige aktiviteter 17. Fastholdelse fuldstændig anæstesi under bestrålingen processen er også kritisk, ikke kun fordi at være hæmmet i lukkede rum (den ledende afskærmning) kan være en betydelig stressfaktor for dyrene 18, men også for at undgå unødvendig eksponering af andre organer / væv til bestråling. Det er derfor vigtigt at sikre, at doseringen af bedøvelsesmidlet er passende for alder og stammen af mus før start bestrålingen portion af denne protokol. Derudover akklimatisering af mus til kørehjul i mindst fem dage er kritisk for at opnå stabil opførsel før bestråling og egnede data til analyse.
Du kan foretage fejlfinding usædvanlige VWRA numre, bør VWRA bure kontrolleres regelmæssigt for potentielle problemer. For example, hvis strøelse bliver stablet på eller direkte under hjulet, eller hvis de løbende hjul er ikke tilstrækkeligt rent, dette kan tilføje modstand mod hjulet spinding og reducere målinger aktivitetsniveau. Derudover, da der sker mest hjul kører i de mørke timer 7, kan VWRA være følsom over for udsving i lyset cyklus, og der skal sørges for at holde lys cykler regelmæssigt og uafbrudt.
Denne protokol kan rumme brugen af forskellige niveauer af bestråling. For eksempel beskrev vi tre dage af dosering med 800 cGy i denne protokol, men vi har set lidt lavere niveauer af træthed ved hjælp af tre dage med 600 cGy dosering 7. Virkningerne af en bestemt strålingsdosis vil afhænge af musestamme 19, doseringshastigheden af strålerøret 20, fraktioneringen over flere dage 21, og sandsynligvis størrelsen af regionen exposed under afskærmning. Enkelte doser på 1000 cGy hele kroppen bestråling har været anvendt i C57 / BL6-mus uden øget dødelighed 22, men skal tages forholdsregler for at sikre, at store doser af stråling ikke har nogen tegn på morbiditet.
Udover strålingsdosis kan flere andre trin tilpasses til eksperimentet ved hånden. Ved at modificere blyafskærmning eller dyrets placering i afskærmningen, kunne disse metoder tilpasses til at målrette andre kropsområder med bestråling. Dog bør ændringer afskærmningsanordningen valideres med dosimetri for at sikre, at bestråling ikke trænger gennem afskærmede område. Denne protokol kan også tilpasses til at optage en lang række adfærdsmæssige foranstaltninger, som frivilligt kører aktivitet ikke ville udelukke adfærdsmæssige eksperimenter, der er mere fysisk eller mentalt krævende. F.eks CRF forekommer ofte sammen med kognitive mangler 3; fremtideksperimenter kunne udforske den rolle, som strålebehandling kan spille i denne sammenhæng. Skal tages Tilstedeværelsen af hjul kørende aktivitet i betragtning, når du udfører de yderligere adfærdsmæssige tests som VWRA kan påvirke fysiologi og adfærd på mange måder 16.
Med bestråling doser på 800 cGy eller mindre, skal musene ikke brug for særlig pleje efter genoprettelse fra anæstesi. Dog kan bestråling procedure og deraf træthed potentielt interagere med andre indgreb såsom ekstra opførsel tests eller farmaceutiske behandlinger. Dyrene bør overvåges nøje på dagene umiddelbart efter bestråling, når ændre eller tilføje til denne beskrevne procedure. Forskellige stammer af mus kan også vise forskellige følsomhed over for bestråling 19, så forsigtighed er berettiget ved brug af andre end C57BL / 6 stammer.
Mens denne teknik er designet til at repræsentere stråling-inindført træthed, det er kun en komponent af komplekset CRF koncept. CRF er en tilstand, sandsynligvis har mange årsager og forekommer hos patienter, der har kræft og ofte får flere behandlinger. En forståelse af CRF kan derfor kræve sæt forsøg med tumorbærende mus og med andre behandlinger såsom kemoterapi eller hormonbehandling. Indarbejde disse variabler i biologiske og adfærdsmæssige tests vil tillade forskerne at identificere deres bidrag til denne komplekse tilstand. Den musemodel beskrevet her, kan hjælpe med at forstå den særlige rolle af stråling i CRF og udvikle potentielle lægemidler.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Denne forskning blev støttet af afdelingen for Intramural Research, Statens Institut for Sygeplejeforskning, National Institutes of Health.
Acknowledgments
Forfatterne vil gerne takke Michele Allen for National Heart, Lung, og Blood Institute (NHLBI) af National Institutes of Health (NIH) for generøst deler hendes ekspertise i murine fænotypebestemmelse metoder og for hendes fortsatte teknisk bistand, samt for Timothy Hunt af NHLBI for at hjælpe os med at udvikle afskærmning enhed. Denne undersøgelse er støttet af afdelingen for Intramural Research af Det Nationale Institut for Sygeplejeforskning af NIH, og en del af valideringen forsøg støttet af en bevilling fra Oncology Nursing Society Foundation.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| C57BL/6 Mice | Charles River | Strain code 027 (http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/c57bl-6n-mouse) | |
| Ketamine HCl | Putney | 100 mg/mL stock solution | |
| Xylazine HCl | Lloyd Laboratories | 100 mg/mL stock solution | |
| Rodent Tattoo System | AIMS | ATS-3 | http://animalid.com/lab-animal-identification-systems/ats-3-general-rodent-tattoo-system |
| Lead Shielding Apparatus | (custom made) | One-inch thick lead shielding arranged as two boxes with a one-inch thick gap between them for targeted irradiation | |
| Plexiglass shielding container | (custom made) | Plexiglass container filled with styrofoam. Styrofoam cutouts hold the lead shielding in place. | |
| GammaCell 40 Exactor | Best Theratronics | http://www.theratronics.ca/product_gamma40.html | |
| RAD Disk Ultra | Best Theratronics | http://www.theratronics.ca/product_rad.html | |
| Mouse Single Activity Wheel Chamber | Lafayette Instrument Company | #80820 | http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=980 |
| Activity Wheel Counter for Computer Monitoring | Lafayette Instrument Company | #86061 | http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1052 |
| Modular Cable for Wheel Counters | Lafayette Instrument Company | #86051-7 | http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1046 |
| USB Computer Interface for Activity Wheel Counters | Lafayette Instrument Company | #86056A | http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1047 |
| Activity Wheel Monitor Software | Lafayette Instrument Company | #86065 | http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1053 |
References
- Minton, O., et al. Cancer-related fatigue and its impact on functioning. Cancer. 119, Suppl 11. 2124-2130 (2013).
- Bower, J. E. Cancer-related fatigue--mechanisms, risk factors, and treatments. Nat Rev Clin Oncol. 11 (10), 597-609 (2014).
- Saligan, L. N., et al. The biology of cancer-related fatigue: a review of the literature. Support Care Cancer. 23 (8), 2461-2478 (2015).
- Norden, D. M., et al. Tumor growth increases neuroinflammation, fatigue and depressive-like behavior prior to alterations in muscle function. Brain Behav Immun. 43, 76-85 (2015).
- Ray, M. A., Trammell, R. A., Verhulst, S., Ran, S., Toth, L. A. Development of a mouse model for assessing fatigue during chemotherapy. Comp Med. 61 (2), 119-130 (2011).
- Zombeck, J. A., Fey, E. G., Lyng, G. D., Sonis, S. T. A clinically translatable mouse model for chemotherapy-related fatigue. Comp Med. 63 (6), 491-497 (2013).
- Renner, M., et al. A murine model of peripheral irradiation-induced fatigue. Behav Brain Res. 307, 218-226 (2016).
- Van der Meeren, A., Lebaron-Jacobs, L. Behavioural consequences of an 8 Gy total body irradiation in mice: Regulation by interleukin-4. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 79 (2), 140-143 (2001).
- York, J. M., et al. The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation. Brain Behav Immun. 26 (2), 218-227 (2012).
- Meijer, J. H., Robbers, Y.
- The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , 8th Edition, National Research Council of the National Academies. (2011).
- Heredia, L., Torrente, M., Domingo, J. L., Colomina, M. T. Individual housing and handling procedures modify anxiety levels of Tg2576 mice assessed in the zero maze test. Physiol Behav. 107 (2), 187-191 (2012).
- Varty, G. B., Paulus, M. P., Braff, D. L., Geyer, M. A. Environmental enrichment and isolation rearing in the rat: effects on locomotor behavior and startle response plasticity. Biol Psychiatry. 47 (10), 864-873 (2000).
- Pham, T. M., Brene, S., Baumans, V. Behavioral assessment of intermittent wheel running and individual housing in mice in the laboratory. J Appl Anim Welf Sci. 8 (3), 157-173 (2005).
- Knab, A. M., et al.
- Novak, C. M., Burghardt, P. R., Levine, J. A. The use of a running wheel to measure activity in rodents: relationship to energy balance, general activity, and reward. Neurosci Biobehav Rev. 36 (3), 1001-1014 (2012).
- Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice. Behav Brain Res. 175 (1), 43-50 (2006).
- Perhach, J. L. Jr, Barry, H. 3rd Stress responses of rats to acute body or neck restraint. Physiol Behav. 5 (4), 443-448 (1970).
- Iwakawa, M., et al. Different radiation susceptibility among five strains of mice detected by a skin reaction. J Radiat Res. 44 (1), 7-13 (2003).
- Travis, E. L., Peters, L. J., McNeill, J., Thames, H. D. Jr, Karolis, C. Effect of dose-rate on total body irradiation: lethality and pathologic findings. Radiother Oncol. 4 (4), 341-351 (1985).
- Duran-Struuck, R., Dysko, R. C. Principles of bone marrow transplantation (BMT): providing optimal veterinary and husbandry care to irradiated mice in BMT studies. J Am Assoc Lab Anim Sci. 48 (1), 11-22 (2009).
- Duran-Struuck, R., et al. Differential susceptibility of C57BL/6NCr and B6.Cg-Ptprca mice to commensal bacteria after whole body irradiation in translational bone marrow transplant studies. J Transl Med. 6, 10 (2008).
