Summary
Traditionelle Modellierung von Teil Blasenauslassobstruktion bei Nagetieren ist voller Tiersterblichkeit. Eine Denervierung Verletzung von Dissektion um den proximalen Harnröhre und Blasenhals ist ebenfalls von großer Bedeutung. Wir entwickeln und evaluiert eine sichere und zuverlässige Obstruktion Modell Mitte der Harnröhre, die Mängel des traditionellen Modells zu vermeiden.
Abstract
Partielle Blasenauslassobstruktion (pBOO) hat eine hohe Prävalenz, verursacht erhebliche Patientenbelastung und immens Kosten im Gesundheitswesen. Das häufigste Tiermodell Blase Umbau in pBOO zu untersuchen sind weibliche Nager unterziehen partielle Obstruktion am proximalen Harnröhre. Veränderlichkeit in dem Grad der Behinderung und Tiersterblichkeit sind wichtige Anliegen mit proximaler Obstruktion. Außerdem gefährdet Blase Innervation um den proximalen Harnröhre und Blasenhals zu sezieren.
Wir entwickelten eine nervenschonenden mittleren Harnröhrenobstruktion (NEMO) Modell für pBOO die Nachteile des traditionellen Modells zu vermeiden. Wir näherten uns der Harnröhre unmittelbar unterhalb der Schambeinfuge, die die Notwendigkeit für Laparotomie sowie für die Präparation in diesem Bereich vermieden; Auch blieb die gestreifte Harnröhrenschließmuskel unberührt. Wir führten NEMO in weiblichen Sprague-Dawley-Ratten (12 Hindernisse, 6 Scheintiere) sowie bei weiblichen C57 / BL6-Mäuse (20 Behinderungs, 18 Schein Tiere). Nach zwei Wochen werteten wir die Blasenfunktion, Blasenmasse und Körpermasse.
Wir hatten keine Todesfälle unter obstructed- oder scheinoperierten weiblichen Ratten; wie für das traditionelle proximale pBOO-Verfahren beschrieben, banden wir die Naht um die proximale Urethra und ein 0,9 mm Metallstab vorübergehend platziert. NEMO induzierte eine 85% ige Erhöhung der Blasenmasse nach zwei Wochen, durchschnittliche Resturinvolumen betrug 0,4 ml in Ratten teilweise verstopft, während nur 0,03 ml in sham Tieren. Bei Mäusen testeten wir drei Größen von Kanülen, die sie entlang der Harnröhre platziert, wenn die Naht zu binden. Wir fanden heraus, dass eine 27-Gauge-Kanüle führte zu mehr als 50% Tiersterblichkeit; Platzieren der Kanüle 25-gauge nicht die gewünschte Reaktion bei der Erhöhung Blasenmasse brachte; eine 26-Gauge-Kanüle Verwendung ergab positive Ergebnisse mit minimaler Tiersterblichkeit (1/8) noch eine signifikanten 2-fache Erhöhung der Blasenmasse.
Introduction
Die partielle Blasenaustrittsobstruktion (pBOO) hat eine hohe Prävalenz und kann zu einer schweren Blasenfunktionsstörung führen 1 ; Das Spektrum reicht von angeborenen Fehlbildungen wie posterioren Harnröhrenventilen oder Hypospadien, über erworbene urethrale Strikturen bis hin zu einer gutartigen Prostatahyperplasie. Letzteres betrifft mehr als 30% der Männer sechzig Jahre und älter 2 . Große Patientenbelastung und immense Gesundheitspflege Kosten im Zusammenhang mit pBOO rechtfertigen die beträchtliche Forschung Anstrengungen in das Studium Blase Remodeling als Reaktion auf erhöhte Abfluss Widerstand 3 . Von 2006 bis 2015 wurden über 220 PubMed indizierte Artikel über die Wirkung von pBOO auf die Harnblase veröffentlicht.
Obwohl Tiermodelle für pBOO in mehreren Arten 4 , wie der Ratte 5 , dem Kaninchen 6 , Schwein 7 und Mous, entwickelt worden sinde 8, 9, die wohl am häufigsten verwendeten Tiermodell jedoch sind weibliche Ratten partielle Obstruktion der proximalen Harnröhre unterziehen; Zugriff auf den Bauch der Tiere, exteriorisieren der Blase, und Dissektion um den Blasenhals sind unvermeidlich mit dieser traditionellen Technik proximalen Harnröhrenobstruktion. Veränderlichkeit in dem Grad der Behinderung und Tiersterblichkeit sind nur einige der Bedenken bei diesem Verfahren 10, 11 zugeordnet ist ; wir haben gezeigt , dass in scheinoperierten Tieren, Dissektion um den proximalen Harnröhre zu physiologischen Veränderungen führt , die 12 mit einem Verlust von Nervenfasern am Blasenhals zu korrelieren. Dieses Ergebnis zeigt, dass die am häufigsten pBOO Tiermodell verwendet, die bei weiblichen Nagern Zugriff auf die proximale Harnröhre beinhaltet, führt zu einer Denervierung Verletzung mit verbundenen strukturellen und funktionellen Veränderungen der Blase, beeinflussteSchein und behindern Tiere. Daher wurde eine alternative Ansatz zu vermeiden Denervierung Verletzung erforderlich. Unser Labor entwickelt und evaluiert einen Nerve sparende Mittelharnröhrenobstruktion (NEMO) Ansatz, wirksam bei der Induktion der erwartete Obstruktion assoziierte Veränderungen in der Blase, wie Erhöhung der Organmasse und Restharn, während scheinoperierten Tiere von nicht operierten Kontrolltieren nicht zu unterscheiden waren . Auch blieb die gestreifte Harnröhrenschließmuskel unangetastet, da sie proximal zu der Ebene der Präparation liegen. Die Weitere Variabilität in Massen Obstruktion-induzierte Zunahme der Blase war signifikant niedriger als bei herkömmlicher proximaler Harnröhrenobstruktion und Tiersterblichkeit war Null.
Wir wandten auch erfolgreich NEMO bei weiblichen Mäusen mit weniger als 10% Mortalität bei Tieren behindert, während alle pBOO Modelle für bisher beschriebenen Mäuse um 50% mit einer Mortalität verbunden waren. Studieren Blase Umbau im Zusammenhang mit pBOO bei Mäusen profitieren von applicability des gesamten Spektrums von transgenen Modifikationen.
Sezieren um die Mitte des Harnröhre bei weiblichen Nagern induzieren nicht die unerwünschten und verwirrende strukturellen oder funktionellen Veränderungen in der Harnblase im traditionellen proximalen Obstruktion Modell beobachtet. Trotzdem induziert immer noch eine teilweise Verstopfung in der Mitte der Harnröhre Ebene induzierende Blase Hypertrophie und erhöhte Restharn, wie für pBOO aus einem Tiermodell erwartet. Wichtig ist, dass bei Mäusen NEMO Durchführung eröffnet Untersuchung von Blasen Remodeling in pBOO transgene Verfahren, die in größeren Nagetieren praktisch nicht erreichbar sind.
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Protocol
Das folgende experimentelle Protokoll wurde von der Institution Tierpflegekommission genehmigt.
1. NEMO bei weiblichen Ratten
- Vorbereitung
- Legen Sie eine weibliche Sprague-Dawley Ratten mit einem Gewicht von etwa 200 g unter 3% Isofluran-Narkose, wiege das Tier, und rasieren und desinfizieren prepubic Bereich 3 mal ein Iodatom chirurgischen Peeling.
- Auf einem Heizkissen, Bandhinterbeinen und Schwanz nach unten und die Blase mit einem 20-Gauge-Angiokatheter katheterisieren, die auch leicht geklebt Abrutschen zu verhindern.
- Präparation
- Verwenden eines Skalpells ein 8 mm Längshautschnitt von der tastbaren Schambeinfuge Richtung Urethraöffnung auszuführen. Heben Sie die Haut auf beiden Seiten ab, um später Wundverschluss zu erleichtern.
- Sezieren stumpf die gestenteten Harnröhre zu identifizieren durch Längs mit einer feinen Schere ausbreitet. Legen Sie feine selbsthalt Haut Haken Exposition zu verbessernder Harnröhre.
- Führen einige sanfte gekrümmte Längs Ausbreiten Schere auf die Harnröhre dorsal mit der Ebene zwischen der Harnröhre und Vagina zu entwickeln. Dann unverblümt eine 4-0 Seidennaht hinter der Harnröhre passieren und den doppelten Wurf eines Knotens des Chirurgen bereiten.
- Partielle Harnröhrenobstruktion
- Entfernen Sie die Angiokatheter, legen eine 0,9 mm Metallstab parallel zur Urethra, und ziehen den Knoten um Harnröhre und Metallstange, so daß dieser noch leicht danach gleitet.
- Sicherte den Knoten mit 3 weiteren Würfen mit sanfter Spannung vor dem Stab zu entfernen. Schneiden Sie die Fadenenden etwa 3 mm lang, oder 4 mm, wenn spätere Freisetzung der Obstruktion Teil des Experiments ist.
- Wundverschluss
- Approximieren die paraurethrale Drüsen einen vergrabene Einzelstich aus resorbierbarem geflochtenes Nahtmaterial 4-0 verwendet wird.
- Schließen Sie die Haut mit einem vergrabenen horizontalen Matratze Stich der gleiche resorbierbaren sut miture. Hinweis: Während es ein resorbierbares Naht zu verwenden, für eine Haut eindringenden Stich kann unkonventionell erscheinen, wir haben nicht begegnen Komplikationen wie Wundinfektionen, und dass Nahtentfernung vermieden werden kann.
- nach Pflege
- Einzuspritzen Buprenorphin 0,1 mg / kg subkutan, bevor die Ratte in einem Erholungskäfig platzieren.
- Bieten einige Soft-Recovery-Diät für die ersten 24 Stunden auf die einzelnen Untergebracht Ratte. Nach Ablauf dieser Frist Haus Tiere wieder in den gleichen Paaren wie vor dem Eingriff, sofern ihnen auf die gleiche Behandlungsgruppe gut und gehören tun.
- Überprüfen Sie die Ratten täglich für Blasengröße und das allgemeine Wohlbefinden; aufnehmen ihr Gewicht mindestens einmal pro Woche.
2. NEMO bei weiblichen Mäusen
- Vorbereitung
- Legen Sie eine weibliche C57BL / 6-Maus mit einem Gewicht von etwa 18 g und verfahren wie detaillierter in Schritt 1.1.1.
- Gehen Sie wie detailliert in Schritt 1.1.2, mit der Ausnahme verwenden, um einen 24-Gauge-angiocatheter.
- Präparation
- Verwenden ein Skalpell einen 6 mm Längshautschnitt von der tastbaren Schambeinfuge Richtung Urethraöffnung auszuführen.
- Sezieren stumpf die gestenteten Harnröhre zu identifizieren durch Längs mit einer feinen Schere ausbreitet. Heben das neuro-vaskuläre Bündel läuft ventral auf die Harnröhre durch analoge blunt dissection ab.
- Führen einige sanfte gekrümmte Längs Ausbreiten Schere auf die Harnröhre dorsal mit der Ebene zwischen der Harnröhre und Vagina zu entwickeln. Dann passiert unverblümt einen 5-0 nicht resorbierbare geflochtene Naht hinter der Harnröhre und bereitet den doppelten Wurf eines Knotens des Chirurgen.
- Partielle Harnröhrenobstruktion
- Verbinden des Angiokatheter mit einer 1 ml-Spritze aufgezogen und 0,1 ml normaler Kochsalzlösung in die Blase.
- Legen Sie eine 26-Gauge-Kanüle parallel zur Harnröhre. Ziehen Sie vorsichtig den Knoten um Harnröhre und der Kanüle, während die angioca Zurückziehenth.
- Sicherte den Knoten mit 3 weiteren Würfen mit sanfter Spannung vor der Kanüle zu entfernen.
- Test für Urin an den Gehörgang auf sanften Druck auf das Tier Blase erscheint; Lösen der Bindung nicht in der Lage, wenn Urin auszudrücken. Ansonsten schneiden die Naht etwa 3 mm langen Enden.
- Wundverschluss
- Schließen Sie die Haut mit einem vergrabenen horizontalen Matratze Stich eines 5-0 geflochtene resorbierbares Naht verwenden.
- nach Pflege
- Einzuspritzen 0,1 mg / kg subkutan Buprenorphin, bevor die Maus in einem Wiederherstellungs cage platzieren.
- Bieten einige Soft-Recovery-Diät für die ersten 48 Stunden auf die einzelnen Untergebracht Maus. Nach Ablauf dieser Frist Haus Tiere wieder in den gleichen Gruppen wie vor dem Eingriff, sofern ihnen auf die gleiche Behandlungsgruppe gut und gehören tun.
HINWEIS: Die Mäuse mit einem tastbaren gefüllten Blase 24 h nach dem Verfahren, das Erlöschen nicht bei der Handhabung sind über behindert und wird innerhalb der n sterbenext 1 - 2 Tage, wenn nicht wieder unter Narkose zur Entfernung der blockier Ligatur genommen. - Schauen Sie sich die Mäuse täglich für Blasengröße und das allgemeine Wohlbefinden; aufnehmen ihr Gewicht mindestens einmal pro Woche.
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Representative Results
Nerve sparende Mittelharnröhrenobstruktion (NEMO) bei weiblichen Ratten
Mortalität
Wir führten eine Mitte Harnröhrenobstruktion auf mehr als 40 weibliche Ratten so weit und hatte keine Mortalitäten.
Blase Masse
Mittlere relative Blasenmasse (Blase-zu-Körper-Masse-Verhältnis) in scheinoperierten Tieren betrug 0,33% 2 Wochen nach dem Eingriff, während verstopfte Ratten eine mittlere relative Blasenmasse von 0,60% hatten, der in einen 85% igen Anstieg (p übersetzt = 0,004 ; Abbildung 1).
Restharn
Sham operierten Ratten hatte praktisch keine Restharn, dass wir absaugen konntedurch direkte Blasenpunktion zum Zeitpunkt der Organentnahme, Mittelharnröhrenobstruktion Tiere im Gegensatz hatten eine signifikant größere mittlere Menge von Restharn von 0,42 ml (p = 0.01; Abbildung 2).
Nerve sparende Mittelharnröhrenobstruktion (NEMO) bei weiblichen Mäusen
Mortalität
Insgesamt unterzog sich 18 weibliche Mäuse eine Farce NEMO Verfahren, und einer von ihnen starb. Um den notwendigen Grad der Obstruktion zu kalibrieren, bewerten wir 3 unterschiedliche Durchmesser von Kanülen (25-Gauge, 26 Gauge und 27 Gauge) entlang der Harnröhre platziert, wenn die Naht zu binden. Keiner der 5 Mäuse starben , als wir eine 25-Gauge - Kanüle als Platzhalter entlang der Harnröhre (Figur 3) verwendet. Auf der anderen Seite, die Sterblichkeit signifikant mit dem kleineren Größe Platzhalter erhöht. 1/8 oder 5/8 Mäuse starben, wenn eine 26-Gauge oder 27 unter Verwendung von-Anzeige Kanüle (p = 0,039, Fisher-Test).
Blase Masse
NEMO in weiblichen Mäusen eine 25-Gauge - Kanüle nicht zu einer Erhöhung effektiv Blase Körpermassenverhältnis (Abbildung 4). Die Verwendung einer 26-Gauge-Kanüle führte zu einem mehr als 2-fachen Anstieg der relativen Blasenmasse (p = 0,04). Wenn wir einen 27-Gauge-Platzhalter eines mehr als 60% Anstieg der relative Blasenmasse aufgebracht trat nach 2 Wochen (p = 0,004).
Restharn
Ähnlich wie bei Ratten, weibliche Mäuse neigen dazu, bei der Einleitung der Narkose zu erlöschen. Wenn die Blasen Ernte, wir den Harnblasenhals mit einer Pinzette verschlossen und gewogen, um die Harnblase mit Urin und nach Ablassen des Urins, dies für eine genaue Berechnung der Restharn vorliegender erlaubt bei Blasen Ernte. PBOO Platzieren einen 25-Gauge oder 26 Gauge Kanüle entlang der Harnröhre nicht innerhalb von 2 Wochen (5) in Restharn in einer Änderung führte. Bemerkenswert ist, nur sehr wenige Tiere während der Einleitung der Narkose für ungültig erklärt, das im Gegensatz zu Ratten, die praktisch alle ungültig, wenn induzieren. In den drei Mäuse überlebenden NEMO eine 27-Gauge-Kanüle, bedeuten Restharnvolumen durch 3-fache im Vergleich zu den jeweiligen shams erhöht wurde. Allerdings erreichte die Differenz keine statistische Signifikanz, höchstwahrscheinlich aufgrund des niedrigen n.
Abbildung 1. NEMO Induziert effektiv Erhöhung der Blasen Masse nach 2 Wochen. NEMO führte zu einer 85% igen Erhöhung der Blasen-zu-Körper-Masse-Verhältnis innerhalb von 2 Wochen (p = 0,004; §).
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Abbildung 2. deutliche Zunahme der Restharn 2 Wochen nach NEMO. Während scheinoperierten Ratten hatten praktisch keine Restharn , die zum Zeitpunkt der Blasen Ernte Mitte Harnröhrenobstruktion Tiere hatten fast 0,4 ml Restharn bei mittleren (p = 0,013; §) nadel aspiriert werden kann.
Abbildung 3. Die Mortalität Erhöht mit Grad partielle Obstruktion. Einer von 18 Mäusen starben nach Schein-NEMO-Verfahren. Bei Verwendung einer 25-Gauge-Kanüle als Platzhalter entlang der Harnröhre, bedient alle 5 Mäuse überlebten, während 1/8 oder 5/8 Mäuse starben, als eine 26-Gauge oder 27-Gauge-Kanüle bzw. (p = 0,039, Fisher Exact Test).
<strong> Abbildung 4. 26-Gauge und 27er Platzhalter während NEMO Ergebnisses in effektiver Erhöhung der relativen Blasen Masse nach 2 Wochen. NEMO bei weiblichen Mäusen eine 25-Gauge - Kanüle nicht zu einer signifikanten Erhöhung der relativen Blasenmasse (§) nicht zur Folge haben ; nur , wenn eine 26-Gauge - Kanüle verwendet wurde, ein mehr als 2-fachen Anstieg der relativen Blasenmasse aufgetreten ist (p = 0,04; †); Verstopfungen mit einem Platzhalter 27-gauge führten zu einem mehr als 60% Anstieg der relativen Blasenmasse (p = 0,004; ‡).
Abbildung 5. Maintained Blasenentleerung von 2 Wochen nach NEMO. Einen 25-Gauge oder eine 26-Gauge - Kanüle entlang der Harnröhre während NEMO Prozedur führte nach 2 Wochen (§) in Restharn in einer Änderung nicht. Der 3-fachen Anstieg des mittleren Rest urine Volumen in der 27-Gauge - Gruppe im Vergleich zu shams keine statistische Signifikanz erreichte (n = 3 behindert; †).
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Discussion
Tiersterblichkeit ist eines der wichtigsten Anliegen des traditionellen Modells der pBOO am proximalen Harnröhre, bei 15% oder mehr in vielen Berichten 10, 11, 13. NEMO erscheint minimal Sterblichkeit zu haben, wenn bei weiblichen Ratten angewendet. Proximale Harnröhrenobstruktion bei Mäusen ist technisch anspruchsvoller als bei Ratten und damit auch anfälliger für Komplikationen. Unter Verwendung einer 26-Gauge-Kanüle als Platzhalter für unsere Mitte Harnröhren Ansatz, wir hatten nur eine minimale Tiersterblichkeit. In einer laufenden Studie, wo wir NEMO bei weiblichen Mäusen mit einer 26-Gauge-Kanüle nur 2 von 18 Mäusen wurden über Gehbehinderte (Daten nicht gezeigt) angewandt. Mit einem kleineren Platzhalter wie zum Beispiel einer 27-Gauge-Kanüle über die Hälfte der behinderten Mäuse starben infolge überhöhter Obstruktion mit Harnverhalt oder Blasenruptur. Daher betrachten wir ein 26-Gauge-Platzhalter ein vernünftiges Kaliber für weibliche Mäuse von etwa 18 g.
Erhöhung der Blasenmasse ist eines der Kennzeichen der pBOO in menschlichen Krankheiten. Wir identifizierten NEMO, um effektiv eine signifikante Erhöhung der Blasenmasse zu induzieren nach nur 2 Wochen bei Ratten als auch in Mäusen. Durchschnittliche Erhöhung der Blasenmasse nach pBOO am proximalen Harnröhre ist über die 2,5-fache nach 2 Wochen und damit viel höher als das, was wir nach NEMO 12 beobachtet. Eine solche übermäßige Zunahme der Organmasse reflektiert jedoch nicht die Mehrheit der infravesikalen obstruktive Uropathien die Forscher zielen darauf ab zu modellieren, wenn pBOO Anwendung; in dieser Hinsicht bietet NEMO ein weniger invasives und gut pBOO Modell mit einer moderateren Remodeling-Antwort, die als die traditionellen proximalen pBOO menschlicher Pathologie toleriert ist viel näher an. Je ausgeprägter Anstieg der Blasenmasse in proximaler pBOO wird höchstwahrscheinlich zu einer Denervierung Verletzung von Dissektion um den Blasenhals resultierende bezogen; Denervierung dann kann Detrusor-Sphinkter Übersprechen eine gefährdennd verursacht eine funktionelle Obstruktion sogar in scheinoperierten Tieren 12.
Restharn wurde auch bei weiblichen Ratten unterziehen NEMO nach nur 2 Wochen deutlich erhöht. In Mäusen auf der anderen Seite nur mit der 27-Gauge-Kanüle als Platzhalter, die Menge an Resturin bei Mäusen zu erhöhen neigte. Während jedoch die Ratten praktisch alle nichtig, wenn sie unter Gasnarkose gesetzt, wir konnten beobachten, das nicht in den Mäusen, wo nur sehr wenige mit Hohlräumen versehene, wenn induziert. Dieses nicht-Miktion Verhalten von Mäusen wahrscheinlich Masken, die wahre Menge von Restharn und erfordert einen weiteren Stimulus Miktion in zukünftigen Studien zu induzieren.
Während der Grad der Behinderung einer 0,9 mm Stange entlang der Harnröhre bei weiblichen Ratten scheint angemessen zu sein , unter Verwendung minimal Tiersterblichkeit mit einer deutlichen Erhöhung der Blasenmasse und Restharn kombiniert, um den Grad der Behinderung für NEMO in weiblichen Mäusen Kalibrieren istherausfordernd. Auf der einen Seite eine Kanüle 25-Gauge mit nicht zu einer nachweisbaren Erhöhung der Blasenmasse führen, die 27-Gauge-Kanüle auf der anderen Seite mit in Folge über Behinderung in mehr als der Hälfte der Mäuse unterzogen pBOO. Nur die 26-Gauge-Kanüle zusammen mit einer niedrigen Tiersterblichkeit eine angemessene Reaktion in Bezug auf Organwachstum hatte.
Da pBOO deutlich häufiger bei Männern als bei Frauen, vorzuziehen wäre männlichen Tieren zu verwenden, wenn die menschliche pBOO modellieren. Unsere Nerven Mitte Harnröhrenobstruktion (NEMO) Technik sparsam offensichtlich bezieht sich nicht auf diesen Mangel der Tiere Hormonstatus beeinflussen die Entzündungsreaktion zu akzeptieren, die Gewebeumbau einleitet. Die geringe Variabilität und niedrige Tiersterblichkeit von NEMO bei Mäusen werden jedoch machen Untersuchung der Blase auf das gesamte Spektrum der transgenen Methoden zugänglich Umbau, die in größeren Nagetieren sehr begrenzt sind.
Zusammengefasst NEMO für weibliche Ratten und weiblichen Mäusen istleicht zu machen, hat eine niedrige Tiersterblichkeit und vermeidet auf die Blase die Denervierung Verletzungen durch Dissektion um den Blasenhals führt.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Female rat | Charles-River Canada | Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400 | about 200 g |
| Isoflorane vaporizer | Benson medical industries inc. | TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO | |
| Isoflorane | Fresenius Kabi Animal Health | Isoflorane; product code CP0406V2 | 250 mL bottle |
| Disposable scalpel | Ted Pella, Inc. | #15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S | |
| Microscopy forceps | Ted Pella, Inc. | Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443 | |
| Adson forceps | Ted Pella, Inc. | Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9 | |
| Curved surgical scissors | Ted Pella, Inc. | Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376 | |
| 0.9 mm inox metal rod | goodfellow.com | Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65 | |
| Skin hooks - self made from inox steel | goodfellow.com | Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65 | |
| 4-0 Silk suture | esutures.com | 4-0 Sofsilk black 98" strand; product number LS640 | |
| 5-0 Vicry suture | esutures.com | 5-0 Vicryl undyed 27" RB-1 taper; product number J213H | |
| Needle holder | Medsupplier.com | Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder - 5 1/2"; product code SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC |
|
| Temgesic (Buprenorphine) | first veterinary supply | Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701 | |
| 1 mL syringe with 27 G needle | Fisher Scientific | BD Tuberculin Syringe, BD 309623 | |
| 20 G Angiocath | Fisher Scientific | Andwin Scientific ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906 | |
| Recovery diet | clearh2o | DietGel 31M; 72-08-5022 | |
| C57Bl/6 female mice | Charles-River Canada | C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027 | about 18 g |
| 24 G angiocath | Fisher Scientific | Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340 | |
| 5-0 Ethibond | esutures.com | 5-0 Ethibond green 30" RB-1 taper; product number X550H | |
| 26 G syringe needle | Sigma-Aldrich | BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392 | |
| Normal Saline | Baxter | 0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043 |
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