Kadın Küçük Kemirgenler Sinir koruyucu Orta üretral Tıkanıklığı (Nemo)
Summary
kemirgenlerde kısmi mesane çıkışı tıkanıklığı geleneksel modelleme hayvan ölüm ile doludur. Proksimal üretra ve mesane boynuna diseksiyon A denervasyon yaralanması büyük sorun oluşturmaktadır. Biz geleneksel modelin eksiklikleri kaçınarak, gelişmiş ve güvenli ve güvenilir bir orta üretral tıkanma modelini değerlendirdi.
Abstract
Kısmi mesane çıkışı tıkanması (pBOO), oldukça yaygın olarak görülen önemli hasta yükünü ve muazzam sağlık maliyetlerini de beraberinde getirmektedir. pBOO içinde mesane yenileme araştırmak için en yaygın hayvan modeli proksimal üretra kısmi tıkanıklık geçiren kadın kemirgenler. tıkanıklığı ve hayvan ölüm derecesindeki Değişkenlik proksimal tıkanıklığı ile önemli sorunlardır. Ayrıca, proksimal üretra ve mesane boynunda kesme mesane inervasyonu tehlikeye atar.
Biz geleneksel modelin dezavantajları kaçınarak pBOO için sinir koruyucu orta üretral tıkanma (Nemo) model geliştirdi. Biz laparotomi yanı sıra bu alanda nasıl tedavi edilmesi gerektiği obviated pubis eklemi, sadece alt üretra yaklaştı; Ayrıca, çizgili üretral sfinkter bakir kalmıştır. Bu dişi Sprague-Dawley farelerinde (12 engel, 6 sahte hayvanlar) ve aynı zamanda dişi C57 / BL6 fareleri NEMO gerçekleştirildi (20 tıkanıklığıs, 18 sahte hayvanlar). İki hafta sonra, mesane fonksiyonu, mesane kitlesi ve vücut kitle değerlendirdi.
Biz obstructed- veya yapay olarak ameliyat dişi sıçanların arasında hiçbir ölümlerinin vardı; Geleneksel yakın pBOO-yöntemi için tarif edildiği gibi, biz idrar yoluna dikiş bağlı ve bir geçici 0.9 mm delikli metal çubuk yerleştirilir. NEMO iki hafta sonra, mesane kütlesinde% 85'lik bir artışa neden ortalama rezidüel idrar hacmi, sadece 0.03 mL iken plasebo hayvanlarda kısmen tıkanmış sıçanlarda 0.4 ml idi. farelerde, dikiş bağlama biz üretra boyunca yerleştirilmiş kanüller 3 boyutları test edilmiştir. Bir 27-gauge kanül kullanılarak% 50 hayvan üzerinde mortalite sonuçlandığını tespit; artan mesane kütlesinde istenen yanıtı sağlamak değil, 25-gauge bir kanül yerleştirilmesi; 26 numara bir kanül kullanılarak en az bir hayvan ölüm (1/8) henüz mesane kitlesinde önemli bir 2-kat bir artış ile olumlu sonuçlar vermiştir.
Introduction
Kısmi mesane çıkışı tıkanması (pBOO) yüksek oranda bulunur ve şiddetli mesane fonksiyon bozukluğu 1 neden olabilir; tayfı, iyi huylu prostat hiperplazisi için alınan üretral striktür fazla posterior üretral valfleri veya hipospadyas gibi konjenital malformasyonlar, arasında değişmektedir. Erkekler altmış yıldan fazla% 30 ve 2 eski etkileyen ikincisi. Büyük hasta yükü ve pBOO taşıdığı büyük sağlık masrafları artan dış akış direnci 3 cevaben okuyan mesane yeniden koymak önemli araştırma çaba garanti. 2006 yılından itibaren 2015 yılına kadar 220 üzerinde PubMed makaleleri idrar kesesi üzerinde pBOO etkisiyle ilgili yayımlandı endekslendi.
PBOO için hayvan modelleri, örneğin sıçan 5, tavşan 6, domuz 7 ve Mous gibi çeşitli türler 4 üzere tasarımlanmış olmakla berabere 8, 9, ancak proksimal üretra kısmi engelleme uygulanan dişi fareler burada en yaygın olarak kullanılan bir hayvan modelidir; Mesane boynuna hayvanların karın erişim, mesanenin exteriorizing ve diseksiyon bu geleneksel proksimal üretral tıkanıklığı tekniği ile kaçınılmazdır. Tıkanıklığı ve hayvan ölüm derecesinde değişkenlik sadece 11 Bu prosedür 10 ile ilişkili endişelerden bazılarını; Biz sahte ameliyat hayvanlarda, idrar yoluna diseksiyon mesane boynu 12, sinir liflerinin kaybı ile ilişkili fizyolojik değişikliklere neden olduğunu göstermiştir. Bu bulgu, bir kadın kemirgenlerde yakın üretra erişmek kapsar en yaygın olarak kullanılan pBOO hayvan modeli, etki, mesane bağlantılı bir yapısal ve işlevsel değişiklikler ile denervasyon hasara yol açtığını, göstermektedirsahte ve tıkalı hayvanlar. Bu nedenle, alternatif bir yaklaşım kaçınarak denervasyon yaralanması ihtiyaç vardı. Bizim laboratuvar geliştirilmiş ve sham ameliyat edilen hayvanlar ameliyat edilmemiş kontrol hayvanları ayırt iken, bu, organ kütlesini ve rezidüel idrar artış olarak mesanede beklenen tıkanıklığı ile uyumlu değişiklikler indüklenmesinde etkili olan bir sinir-koruyucu Orta üretral tıkanıklık (NEMO) yaklaşımı değerlendirildi . Bu diseksiyon seviyesine yakınlığında uzandığına olarak da, çizgili üretral sfinkter bakir kalmıştır. Bundan başka, mesane kütlesi içinde tıkanma ile uyarılmış değişkenlik geleneksel Üretra tıkanıklığında önemli ölçüde daha düşük olduğu ve hayvan ölüm olmamıştır.
Bugüne kadar tarif edilmiş fareler için tüm pBOO modelleri 50 yaklaşık% mortalite ile ilişkili ise de başarılı bir tıkanmış hayvanlarda% 10'dan az mortalite ile dişi farelerde NEMO uygulanır. Farelerde pBOO bağlamında mesane yenileme incelenmesi applicabil yararlanacaktırTransgenik modifikasyonların bütün spektrum üretebilir.
Kadın kemirgenlerde orta idrar yoluna Kesme geleneksel yakın obstrüksiyon modelinde gözlenen idrar kesesi, istenmeyen ve karıştırıcı yapısal veya fonksiyonel değişiklikler indüklemez. Bununla birlikte, orta üretral düzeyinde bir kısmi engelleme indükleyici hala mesane hipertrofi indükler ve pBOO için bir hayvan modeli beklendiği gibi, artık idrar artmıştır. Önemli olarak, farelerde NEMO performans büyük kemirgenlerde neredeyse kullanılamaz transgenik yöntemlere pBOO mesane biçimlenme soruşturma açar.
Protocol
Representative Results
Discussion
Hayvan ölümleri Birçok raporda 10, 11, 13% 15 veya daha fazlasında proksimal üretra de pBOO geleneksel modelin önemli sorunlardan biridir. NEMO dişi sıçanlarda uygulandığında çok az ölüm oranı gibi görünmektedir. Farelerde proksimal üretral tıkanma teknik olarak daha zor sıçanlarda daha ve böylece daha meyilli komplikasyonlar etmektir. Bizim orta üretral yaklaşım için yer tutucu olara…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The work was funded by a CHIR operating grant (DJB).
Materials
| Female rat | Charles-River Canada | Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400 | about 200g |
| Isoflorane vaporizer | Benson medical industries inc. | TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO | |
| Isoflorane | Fresenius Kabi Animal Health | Isoflorane; product code CP0406V2 | 250ml bottle |
| Disposable scalpell | Ted Pella, Inc. | #15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S | |
| Microscopy forceps | Ted Pella, Inc. | Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443 | |
| Adson forceps | Ted Pella, Inc. | Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9 | |
| Curved surgical scissors | Ted Pella, Inc. | Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376 | |
| 0.9mm inox metal rod | goodfellow.com | Stainless Steel – AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65 | |
| Skin hooks – self made from inox steel | goodfellow.com | Stainless Steel – AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65 | |
| 4-0 Silk suture | esutures.com | 4-0 Sofsilk black 98" strand; product number LS640 | |
| 5-0 Vicry suture | esutures.com | 5-0 Vicryl undyed 27" RB-1 taper; product number J213H | |
| Needle holder | Medsupplier.com | Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder – 5 1/2"; product code SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC SKU NEE4484-8-40TC |
|
| Temgesic (Buprenorphine) | first veterinary supply | Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701 | |
| 1ml syringe with 27G needle | Fisher Scientific | BD Tuberculin Syringe, BD 309623 | |
| 20G Angiocath | Fisher Scientific | Andwin Scientific ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906 | |
| Recovery diet | clearh2o | DietGel 31M; 72-08-5022 | |
| C57Bl/6 female mice | Charles-River Canada | C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027 | about 18g |
| 24G angiocath | Fisher Scientific | Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc. IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340 | |
| 5-0 Ethibond | esutures.com | 5-0 Ethibond green 30" RB-1 taper; product number X550H | |
| 26G syringe needle | Sigma-Aldrich | BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392 | |
| Normal Saline | Baxter | 0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043 |
References
- Andersson, K. E. Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects. Urology. 62 (5), 3-10 (2003).
- Boyle, P., et al. The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study. BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).
- Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review. J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).
- Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction. Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).
- Mattiasson, A., Uvelius, B. Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder. J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).
- Chang, S., et al. Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder. Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).
- Moore, J. A., Brading, A. F. A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry. BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).
- Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model. BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).
- Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction. J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).
- Kang, Y. J., et al. Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder. Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).
- Schroeder, A., et al. Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction. J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).
- Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., Bägli, D. “sometimes a sham is just a sham” – why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment. J Urol. 195 (4), e379 (2016).
- Jin, L. H., et al. Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).
