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Article de méthode

Minimalement invasive Transverse Aortic constriction chez la souris

21K vues

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DOI :

10.3791/55293

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14 mars 2017

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Dans cet article

Résumé

Minimalement invasive constriction aortique transverse (MTAC) conserve l'essentiel de constriction aortique transverse régulière (TAC), tout en éliminant l'utilisation d'un ventilateur avec intubation trachéale. Il se révèle être une méthode hautement souhaitable pour les études à haut débit sur la surcharge ventriculaire gauche, en particulier dans les études translationnelles.

Résumé

Minimalement invasive constriction aortique transverse (MTAC) est une méthode plus souhaitable pour le rétrécissement de l'aorte transverse chez la souris que thorax ouvert constriction aortique transverse standard (TAC). Bien que la constriction aortique transverse est un procédé hautement fonctionnel pour l'induction de la haute pression dans le ventricule gauche, il est une procédure plus longue et difficile en raison de son utilisation de la ventilation artificielle avec intubation trachéale. TAC est souvent aussi moins survivable, comme la méthode plus récente, MTAC, ne requiert pas le découpage des côtes et les muscles intercostaux ni intubation trachéale avec une installation de ventilation. Dans MTAC, par opposition à une thoracotomie pour avoir accès à la cavité thoracique, la crosse aortique est atteint par une incision médiane dans la partie antérieure du cou. La thyroïde est tirée en arrière pour révéler l'encoche sternale. Le sternum est ensuite coupé au niveau de la seconde nervure et la crosse aortique est atteint simplement en séparant les tissus conjonctifs et le thymus. Delà, une suture peut être enroulé autour de l'arc et à égalité avec une entretoise, puis la coupe sternal et de la peau peut être fermé. MTAC est une manière beaucoup plus rapide et moins invasive pour induire gauche hypertension ventriculaire et permet la possibilité pour les études à haut débit. Le succès de l'étranglement peut être vérifiée à l'aide à haute fréquence échocardiographie trans-thoracique, en particulier Doppler couleur et pulsé onde Doppler, afin de déterminer les vitesses d'écoulement de l'arc aortique et à gauche et les artères carotides droite, la dimension des vaisseaux sanguins, et la fonction ventriculaire gauche et la morphologie. Une constriction réussie sera également déclencher des changements histopathologiques importants, tels que l'hypertrophie cardiaque des cellules musculaires avec une fibrose interstitielle et périvasculaire. Ici, la procédure de MTAC est décrit, ce qui démontre comment les changements de flux résultant dans les artères carotides peuvent être examinées avec l'échocardiographie, la morphologie générale, et des changements histopathologiques dans le cœur.

Introduction

L'objectif général de cet article est de montrer comment une constriction aortique transverse (TAC) chez la souris peut être modifié pour produire une opération plus simple et plus avantageux. TAC a été introduit en 1991 1 et a permis à des biologistes moléculaires pour étudier les voies cellulaires et moléculaires qui conduisent à une hypertrophie du ventricule gauche et à l' insuffisance cardiaque, en particulier chez les petits animaux avec des génomes manipulés 2, 3, 4, 5,

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Protocole

Le protocole suit les directives du Comité sur l'utilisation des animaux vivants dans l'enseignement et la recherche (CULATR) à l'Université de Hong Kong.

1. Opération de préparation du site

  1. Désinfecter le site de l'opération avec 75% d'alcool isopropylique. Réglez la température du coussin chauffant à 37 ° C pour éviter des changements dans le cœur et la fréquence respiratoire du sujet animal.
  2. Utiliser des instruments chirurgicaux stérilisés dans un autoclave à déplacement par gravité à 121 ° C pendant 30 minutes, ou par d'autres méthodes appropriées.
  3. Prendre 2 - 4 aiguilles de calib....

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Résultats

MTAC permet l'induction d'une hypertension importante dans le ventricule gauche en temps voulu.

Comme on le voit sur la figure 1, la préparation des principaux outils pour la procédure est simple et minimal, ne nécessitant que 2 - 4 aiguilles de calibre 30 à cintrer et maintenu en place avec un tube de polyuréthane. La procédure chirurgicale elle-même est également moins compliqué, par rapport au TAC, .......

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Discussion

Rockman et ses collègues ont conçu la première méthode pour cerclage aortique comme une méthode pour étudier une surcharge de pression dans le cœur. Cette recherche a permis de commencer à découvrir les conséquences cellulaires et moléculaires de l' hypertension et l' insuffisance cardiaque 1. Un procédé amélioré, minimalement invasive constriction aortique transverse (MTAC), fournit une méthode souple, en fonction du temps pour l'induction d' une surcharge de pression ventriculai.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Remerciements

Nous tenons à remercier le Fonds pour la recherche universitaire en sciences de la vie (ULS) de l'Université polytechnique de Hong Kong pour la fourniture de Vevo 2100 échographe. Remerciements particuliers à Dr. Chunyi Wen de la Division interdisciplinaire de génie biomédical, Hong Kong Polytechnic University, de formation et de facilitation. Ce travail a été soutenu par le gouvernement HK RGC Grant GRF 17127215, 764812 et HKU6 / CRF / 11G à Billy KC Chow.

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Aiguilles de calibre <>1 pouce 30BD, Franklin Lakes, NJ 07417, États-Unis.305128Courbée comme dans la procédure et Figure 1<
strong>27 Gauge NeedleBD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  ;301629Rendre émoussé et lisse pour spacer
6/0 DafilonB. Braun, 34212 Melsungen, Hesse, Allemagne.C0933066
6/0 SilkamB. Braun, 34212 Melsungen, Hesse, Allemagne.C0762067
Sterile glovesA.R. Medicom, Inc (Asie), Hong Kong.
strongMannings, Quarry Bay, Hong Kong.Local Shopping Center
Depilatory CreamVeet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong KongLocal Shopping Center
Lexer-Baby ScissorFST, Colombie-Britannique V7H 0A6, Canada.14078-10
Pince à iris incurvéeFST, Colombie-Britannique V7H 0A6, Canada.11065-07
Porte-aiguille Micro Olsen-HegarWPI, Sarasota, FL 34240, États-Unis.  ;501989
Stereo MicrioscopeWPI, Sarasota, FL 34240, États-Unis.  ;PZMIII-BS
strong>GenTeal Eye GelNovartis, East Hanover, NJ 07936, États-Unis.  ;Local Pharmacy
Heating PadKent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, États-Unis.DCT-20
Ruban chirurgicalLaboratory Animal Unit
Kétamine and XylazineLaboratory Animal Unit
BetadineLaboratory Animal Unit
BuprenorphineLaboratory Animal Unit
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Références

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic co....

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Réimpressions et autorisations

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