Summary
Minimalement invasive constriction aortique transverse (MTAC) conserve l'essentiel de constriction aortique transverse régulière (TAC), tout en éliminant l'utilisation d'un ventilateur avec intubation trachéale. Il se révèle être une méthode hautement souhaitable pour les études à haut débit sur la surcharge ventriculaire gauche, en particulier dans les études translationnelles.
Abstract
Minimalement invasive constriction aortique transverse (MTAC) est une méthode plus souhaitable pour le rétrécissement de l'aorte transverse chez la souris que thorax ouvert constriction aortique transverse standard (TAC). Bien que la constriction aortique transverse est un procédé hautement fonctionnel pour l'induction de la haute pression dans le ventricule gauche, il est une procédure plus longue et difficile en raison de son utilisation de la ventilation artificielle avec intubation trachéale. TAC est souvent aussi moins survivable, comme la méthode plus récente, MTAC, ne requiert pas le découpage des côtes et les muscles intercostaux ni intubation trachéale avec une installation de ventilation. Dans MTAC, par opposition à une thoracotomie pour avoir accès à la cavité thoracique, la crosse aortique est atteint par une incision médiane dans la partie antérieure du cou. La thyroïde est tirée en arrière pour révéler l'encoche sternale. Le sternum est ensuite coupé au niveau de la seconde nervure et la crosse aortique est atteint simplement en séparant les tissus conjonctifs et le thymus. Delà, une suture peut être enroulé autour de l'arc et à égalité avec une entretoise, puis la coupe sternal et de la peau peut être fermé. MTAC est une manière beaucoup plus rapide et moins invasive pour induire gauche hypertension ventriculaire et permet la possibilité pour les études à haut débit. Le succès de l'étranglement peut être vérifiée à l'aide à haute fréquence échocardiographie trans-thoracique, en particulier Doppler couleur et pulsé onde Doppler, afin de déterminer les vitesses d'écoulement de l'arc aortique et à gauche et les artères carotides droite, la dimension des vaisseaux sanguins, et la fonction ventriculaire gauche et la morphologie. Une constriction réussie sera également déclencher des changements histopathologiques importants, tels que l'hypertrophie cardiaque des cellules musculaires avec une fibrose interstitielle et périvasculaire. Ici, la procédure de MTAC est décrit, ce qui démontre comment les changements de flux résultant dans les artères carotides peuvent être examinées avec l'échocardiographie, la morphologie générale, et des changements histopathologiques dans le cœur.
Introduction
L'objectif général de cet article est de montrer comment une constriction aortique transverse (TAC) chez la souris peut être modifié pour produire une opération plus simple et plus avantageux. TAC a été introduit en 1991 1 et a permis à des biologistes moléculaires pour étudier les voies cellulaires et moléculaires qui conduisent à une hypertrophie du ventricule gauche et à l' insuffisance cardiaque, en particulier chez les petits animaux avec des génomes manipulés 2, 3, 4, 5, 6. En dépit de son efficacité à produire une surcharge de pression désirée, cette technique est finalement limitée par la difficulté à exécuter la procédure et par son faible taux de survie. Un chirurgien conduite TAC doivent être en mesure d'effectuer une intubation trachéale, thoracotomie, et utiliser une ventilation artificielle, afin d'éviter l' effondrement du poumon 1.
content "> Souvent, une méthode simple et moins invasive est souhaitée. En conséquence, peu invasive constriction aortique transverse (MTAC) a été conçu 3. Bien que les résultats ( en particulier, l' hypertrophie ventriculaire gauche) est le même, la procédure implique beaucoup moins d' appareils et moins de dommages à l'animal. MTAC se révèle être un procédé souhaitable, qui a un taux de survie plus élevé, supérieur à 90% et possède un temps de fonctionnement de seulement 15 à 25 min. les rares cas de décès après une opération réussie peut être due à une trop constriction -tight de la crosse aortique, ce qui entraîne une surcharge ventriculaire gauche énorme et la réduction fatale de l'approvisionnement en sang vers les organes critiques tels que les reins.Après la procédure est terminée, l'échocardiographie peut être utilisé pour évaluer le succès de baguage et la morphologie cardiaque et la fonction. Un système à ultrasons à haute fréquence peut être utilisée pour mesurer le diamètre et le débit des changements dans la gauche et à droiteartères carotides, pour visualiser l'étranglement de l' arc aortique pour mesurer la vitesse d'écoulement de pointe, et de déterminer l'épaisseur de la paroi du ventricule gauche et les paramètres fonctionnels 7, 8. Après l'euthanasie, les organes peuvent aussi être collectées pour des études histopathologiques avec hématoxyline et éosine et picrosirius collagène coloration, ce dernier étant particulièrement utile pour l'observation de la fibrose.
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Protocol
Le protocole suit les directives du Comité sur l'utilisation des animaux vivants dans l'enseignement et la recherche (CULATR) à l'Université de Hong Kong.
1. Opération de préparation du site
- Désinfecter le site de l'opération avec 75% d'alcool isopropylique. Réglez la température du coussin chauffant à 37 ° C pour éviter des changements dans le cœur et la fréquence respiratoire du sujet animal.
- Utiliser des instruments chirurgicaux stérilisés dans un autoclave à déplacement par gravité à 121 ° C pendant 30 minutes, ou par d'autres méthodes appropriées.
- Prendre 2 - 4 aiguilles de calibre 30 et leur courbe avec un porte-aiguille, comme on le voit sur la figure 1, pour fabriquer un outil pour la ligature et le tissu de séparation et destiné à être utilisé en tant que rouleur. Monter l'aiguille maintenant courbe sur un coton pour une utilisation en chirurgie.
- Blunt une aiguille de calibre 27 et de la courbe, il 90º avec le porte-aiguille. Lisser la pointe en frottant une surface dure pour faire un 0,4-mm entretoise à l'étape de ligature.
- Anesthetize à 2 mois, mâle, 22-25 g C57BL / 6N souris avec un kétamine approprié et mélange de xylazine par rapport au poids corporel: 100 mg / kg + 10 mg / kg ip Confirmez le anesthetization avec la queue négative pincée réflexe .
- Retirez les cheveux sur la partie antérieure du cou et de la poitrine avec une application de 2 à 3 min de la crème dépilatoire. Retirer la crème à l'eau tiède et un applicateur de coton.
- Appliquer une pommade ophtalmique ou de gel pour les yeux de l'animal pour éviter le dessèchement de la cornée.
- Placez l'animal sur un coussin chauffant en position couchée et effectuer une surveillance peropératoire, en étant sûr de conserver la documentation appropriée à chaque intervalle de 15 min.
- Utilisez du ruban de papier chirurgical pour fixer les membres au coussin chauffant afin de maintenir l'animal dans la position correcte pendant la chirurgie.
- Désinfecter la peau en alternance avec de l'alcool et la solution de povidone-iode trois fois.
- Utilisez un dr stérilesinge avec un champ d'opération exposée pour éviter la contamination. Utiliser de nouveaux gants stériles pour chaque souris et au besoin.
3. Procédure Ligation
- Ouvrir la peau de la souris à la position de la ligne médiane du cou et de la poitrine avec un scalpel.
- Tirez la glande thyroïde vers la tête en séparant doucement les tissus conjonctifs avec des ciseaux émoussés.
- Séparer la couche musculaire de la trachée à l'axe médian en direction des deux côtés avec des aiguilles courbes.
- En utilisant les ciseaux émoussés, couper le sternum à la deuxième nervure (environ 5 mm). Ouvrez la coupe avec un écarteur ou pince courbe.
- Séparer les lobes thymus les uns des autres et de la paroi inférieure de la poitrine, en séparant le tissu conjonctif avec l'aiguille courbe; la crosse aortique et deux artères carotides sont bien visibles à ce stade.
- Placer l'aiguille courbée sous la voûte plantaire et perforent entre la paroi du vaisseau et du tissu conjonctif de l'autre côté par le pushing la tête courbée sur.
- Utilisation de l'aiguille courbe, tirer la suture 6-0 monofilament sous la crosse de l'aorte.
- Placez l'entretoise dans la boucle et fixer la suture en place avec un double noeud. Retirer l'entretoise doucement.
- Confirmer une constriction réussie avec la position de noeud et couper les extrémités de la suture.
- Fermez la paroi thoracique en utilisant 6/0 suture de soie avec un motif de suture interrompue simple. Fermer la peau avec une suture mono-filament 6/0 dans un motif de suture continue.
Soins 4. post-opératoire
- Appliquer la solution de povidone-iode au site de suture et placer l'animal dans une cage préchauffée pour la récupération et le suivi post-opératoire.
- Injecter buprénorphine (0,05 à 0,1 mg / kg sc toutes les 12 h) après que l'animal a repris conscience pour soulager la douleur et de fournir la souris avec de la nourriture appropriée et douce.
- Retour de l'animal à un 12 h de lumière / salle de cycle d'obscurité après guérison complète.
5.Échocardiographie: Confirmation de Ligation et mesures réussie
- Après une semaine, anesthésier la souris préalablement bagué avec 3-5% d'isoflurane, pour l'induction, et de 1 à 1,5%, pour l'entretien, avec un taux de 1 L / min d'oxygène flux.
- Retirez les cheveux de la poitrine à l'aide de la crème dépilatoire. Retirer soigneusement la crème avec de l'eau chaude et un applicateur de coton.
- Fixer la souris dans la position couchée à la plate-forme des animaux de manutention, maintenu à 37 ° C. Appliquer le gel d'électrode sur les pattes et les enregistrer sur le tampon avec des électrodes.
- Appliquer le gel échographique à la poitrine de la souris. Avec une sonde de 40 MHz MS550D et un système d'ultrasons à haute fréquence, effectuer Doppler couleur et Doppler pulsé à balayage d'ondes sur les artères carotides gauche et droite, ainsi que sur la crosse aortique.
- Utilisation de B-Mode, localiser le ventricule gauche. En utilisant M-mode, la tension artérielle systolique et diastolique, l'épaisseur de paroi peuvent être mesurées. Utilisez Cine Store et Cadre Store pour sauvegarder les données et les images selon les besoins.
- Uchanter B-Mode, recherchez la gauche artère carotide commune avant le point de ramification. Utilisez pulsée-ondes et Doppler couleur pour évaluer l'écoulement. Répéter l'opération avec l'artère carotide droite à un point similaire. Enregistrez les images dans Cine Store et modes Cadre de magasins pour analyser plus tard.
- Inclinez la plate-forme des animaux de manutention à l'extrême gauche de sorte que la souris est en position de décubitus gauche. Placer la sonde sur la souris, 30 ° décalés par rapport à une position parallèle à la tête à la position parasternale, et manipuler X et Y pour trouver la crosse de l'aorte.
- Localisez la constriction. Utilisez le mode Doppler couleur pour rendre le site de la constriction plus visible, que le sang sera coule à travers un canal étroit entre le point où les deux artères carotides ramifient de la crosse aortique.
- Utilisez pulsée-ondes et Doppler couleur pour mesurer la vitesse du débit de pointe. Utilisez Cine Store et Cadre Store pour sauvegarder les données et les images selon les besoins.
- Laisser l'animal de récupérer sur un coussin chauffant en position couchée.Retour à l'animal de la cage d'origine dans un / salle de cycle d'obscurité de 12 h de lumière après qu'il a complètement récupéré de l'anesthésie.
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Representative Results
MTAC permet l'induction d'une hypertension importante dans le ventricule gauche en temps voulu.
Comme on le voit sur la figure 1, la préparation des principaux outils pour la procédure est simple et minimal, ne nécessitant que 2 - 4 aiguilles de calibre 30 à cintrer et maintenu en place avec un tube de polyuréthane. La procédure chirurgicale elle-même est également moins compliqué, par rapport au TAC, et peut être effectuée facilement. Une fois que la thyroïde a été retiré, le sternum est coupé et le thymus est déplacé pour dégager la vue. La crosse de l' aorte est facilement localisable pour le processus de ligature (Figure 2).
MTAC produit fiable ventriculaire gauche surcharge de pression chez les souris ligaturées. La figure 3 montre clairement, comme l' aorte transverse étranglée peut être clairement observé sur la figure 3C, en well comme une vitesse accrue du débit de pointe à travers le site de constriction en 3D. Cela peut être comparé à la souris pseudo-opérées, visible sur la figure 3A et 3B, qui ne présente pas d' étranglement avec une vitesse d'écoulement de crête normale. En conséquence de la ligature voir sur la figure 4C, la vitesse d'écoulement est significativement augmentée dans l'artère carotide droite et la pression peut s'accumuler de l'aorte ascendante et dans le coeur pour produire une hypertrophie ventriculaire gauche. Cependant, en raison de rétrécissement en amont, la vitesse d'écoulement est réduite de manière significative dans l'artère carotide gauche commune, comme sur la figure 4D. D'autre part, la carotide écoulement quasi-identique dans le sang artériel est observée chez la souris pseudo-opérées, comme sur la figure 4A ( à droite de l' artère carotide) et 4B ( à gauche de l' artère carotide).
Le paramètre lié à une hypertrophie-résultantes et la courbe de survie sont facilement observées sur la figure 5, dans laquelle le cœur de la souris MTAC ligaturé peut être observée pour être significativement élargie et déformée. Ceci est seulement vu en outre , au niveau cellulaire, comme le montre la figure 6A et 6B, ce qui présente l'hypertrophie du cœur de la souris MTAC actionné par rapport à la souris pseudo-opérées. Ce qui peut encore être observé est la taille accrue du muscle cardiaque des cellules et de la fibrose chez les souris MTAC (Figure 6D, 6F et 6H) par rapport à des souris non-ligaturé (Figure 6C, 6F et 6G).
Etant donné que MTAC peut être vérifiée par un système à ultrasons à haute fréquence, l' incapacité à se contracter avec succès l'arc aortique sera révélée par l'absence d'un rétrécissement de l'aorte visible transversale en échocardiographie bidimensionnelle, comme sur la figure 3B 3D. Cela peut encore être vérifié avec les modes Doppler pulsé d'onde et de couleur, une constriction réussie doit démontrer une vitesse d'écoulement plus élevée dans l'artère carotide droite et la vitesse d'écoulement réduite dans l'artère carotide gauche (figure 4C et 4D).
Figure 1: processus de formation du Crochets aiguille souhaitee par pliage d' une pointe de l' aiguille 1-in, de calibre 30. A) La pointe de l' aiguille 1-in, de calibre 30 d' origine. B) Saisir la pointe de l' aiguille avec le porte-aiguille et pliez à mi - chemin le long de sa longueur. Pliez l'aiguille dans une boucle, en utilisant le porte-aiguille et les mains, si nécessaire, pour former la boucle sur la photo en haut à droite de la figure. C) Couvrir l'aiguille avec un tube de polyuréthane afin de maintenir le segment plié en place. D) Utilisation de laporte-aiguille, pliez la pointe de la boucle dans la forme désirée. Dans ce cas, une pointe d'aiguille avec deux 45 - 60 ° courbures a été montré à des fins d'illustration. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 2: Le processus de ligaturer le Transverse Aortic Arch. A) L'arc aortique est clairement visible. B) En utilisant l'aiguille de crochet précité, séparer la crosse aortique du tissu conjonctif à proximité. C) Utilisation de l'aiguille à crochet, à guider le fil de suture sous la crosse de l' aorte, et l'utilisation d'une entretoise, attacher un rétrécissement du diamètre souhaité. D) la ligature Terminé. PL facilité cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 3: Couleur et Pulsed-ondes Doppler Ultrasound Imaging de l'Arc de Aortic ligaturé et Souris non-ligaturées. A) d' imagerie Doppler couleur de l'arc aortique de souris non ligaturés. Les deux artères carotides sont clairement visibles, ainsi que l'absence d'un étranglement entre eux. B) la vitesse d'écoulement de pointe aortiques de souris non ligaturés. C) Doppler couleur imagerie de la crosse aortique d'une souris ligaturé. L'étranglement entre les deux artères carotides sur la crosse aortique est visible (flèches jaunes). D) la vitesse d'écoulement de pointe au niveau du site de restriction. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 4: Pulsed-ondes Doppler Imaging des artères carotides gauche et droite de la souris ligaturé et non-ligaturées. A) imagerie Doppler pulsée d'onde de l'artère carotide gauche d'une souris non-ligaturé. B) Doppler pulsée-onde de l'artère carotide droite d'une souris non-ligaturé. Il est à noter que la vitesse du flux sanguin est presque identique à celle de l'artère carotide gauche. C) Doppler pulsée-onde de l'artère carotide droite d'une souris avec un étranglement sur son arc aortique. La vitesse du sang est significativement augmentée en raison de l'étranglement en aval de l'entrée de l'artère carotide gauche. D) Doppler pulsée-onde de l'artère carotide gauche d'une souris avec un étranglement sur son arc aortique. La vitesse d'écoulement du sang est considérablement réduite en raison de l'étranglement en amont de l'entréel'artère carotide gauche. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 5: Hypertrophie cardiaque et paramètres associés à une survie Curve à partir de 3 semaines ligaturé et non-ligaturées souris. A) Le coeur d'une souris 3-month-old sans constriction aortique transverse. Le cœur est en bonne santé et d'une forme normale, sans pathologies immédiatement évidentes. B) Le cœur d'une souris 3-month-old qui a subi MTAC pendant 3 semaines. Remarquez la nature clairement difformes du cœur en raison de l'élargissement gauche de la paroi ventriculaire. La ligature de la crosse de l'aorte est également visible. C) Une coupe transversale du coeur d'un 3-month-old souris non ligaturé. D) Une coupe transversale du coeur d'un 3-mois âgé de souris ayant subi une constriction aortique transverse pendant 3 semaines. L'élargissement du ventricule gauche est clairement visible. Le cœur en général est également élargie en raison de la surcharge de la pression ventriculaire gauche causée par MTAC. E) Le rapport cœur-à-poids est significativement accrue chez les souris bagués pendant 3 semaines. F) Le tibia rapport coeur à gauche longueur de l' os est significativement accrue chez les souris bagué pendant 3 semaines (*, p <0,05; **, p <0,01; ***, p <0,001). Courbe G) Survie pour un 3-semaine expérience (MTAC = 12 et SHAM = 12). S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 6: histologiques Diapositives du Coeur Mouse. A) Une coupe transversale d'un poissonam-exploité coeur de la souris. B) une section transversale d'un coeur MTAC-ligaturé pendant 3 semaines, avec une paroi ventriculaire gauche épaississement et la fibrose partielle. La taille globale du coeur est augmentée. C) section longitudinale des fibres musculaires cardiaques à partir d' une souris opération fictive. D) de la section longitudinale des fibres musculaires cardiaques à partir d' une souris MTAC-ligaturé. Les cellules sont agrandies de façon significative, comme en témoigne leur diamètre accru, tandis que le noyau est restée la même taille. E) section transversale des fibres musculaires d'une souris opération fictive. F) la section transversale des fibres musculaires cardiaques provenant d' une souris MTAC ligaturé. Les cellules sont agrandies en raison de la surcharge de pression par suite de la MTAC. G) Les artères coronaires d'une souris d'opération fictive colorées avec picrosirius Rouge pour le collagène. H) des artères coronaires à partir d' une souris MTAC-ligaturé. Une quantité importante de tissu collagène est observée around le vaisseau sanguin dilaté, ce qui indique une fibrose périvasculaire due à la surcharge de pression dans les artères coronaires. S'il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.
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Discussion
Rockman et ses collègues ont conçu la première méthode pour cerclage aortique comme une méthode pour étudier une surcharge de pression dans le cœur. Cette recherche a permis de commencer à découvrir les conséquences cellulaires et moléculaires de l' hypertension et l' insuffisance cardiaque 1. Un procédé amélioré, minimalement invasive constriction aortique transverse (MTAC), fournit une méthode souple, en fonction du temps pour l'induction d' une surcharge de pression ventriculaire gauche et l' insuffisance cardiaque, sans les inconvénients de la constriction aortique transverse classique 9. La procédure elle-même peut être effectuée de manière significative plus facilement et avec une augmentation des taux de survie par rapport au TAC. Le principal avantage de cette méthode est qu'elle permet l'exécution de l'essai de constriction aortique, mais avec beaucoup moins de l'équipement, des compétences chirurgicales, et le temps de fonctionnement pour le même ou un meilleur résultat.
La méthode à thorax ouvert dans la procédure de TAC ne permet gl'accès et rand une meilleure vue de l'ensemble du cœur et des vaisseaux. L'avantage potentiel est qu'il peut être facilement réalisée en combinaison avec d'autres procédures, telles que la performance du rétrécissement de l'artère pulmonaire à droite surcharge de pression ventriculaire ou la ligature de l'artère coronaire dans des conditions ischémiques, en même temps que l'arc de cerclage aortique est effectué. A l'inverse, la méthode mini-invasive ne convient pas aux autres que l'ordre croissant ou transversale arc aortique constriction quoi que ce soit.
Il est à noter que cette méthode a été adaptée et modifiée de diverses manières. Dans certains cas, l'utilisation de clips de titane à la place d'une suture à la constriction de l'aorte a été jugé plus approprié, étant donné qu'il est une condition expérimentale qui est facilement reproductible: les bandes ne peuvent pas glisser comme ils peuvent dans les procédures TAC et MTAC standard impliquant points de suture 6. Dans le cas où, lors d'un essai avec le système d'ultrasons à haute fréquence,un grand nombre de souris n'a pas été ligaturé avec succès au cours de l'expérience, plus pratique est nécessaire. Peut-être l'application des clips de titane mentionnés ci - dessus peut améliorer le taux de la chirurgie 6 succès.
Lors de la réalisation de l'expérience, il est essentiel que le fil de suture autour de l'aorte ne soit pas trop serré. Il peut blesser l'aorte ou de provoquer une réduction fatale du flux sanguin vers le reste du corps, y compris les organes critiques, tels que les reins. Des précautions doivent également être prises pour être doux lorsque vous utilisez le crochet incurvé pour séparer l'aorte à partir du tissu et des vaisseaux conjonctif environnant, car il peut blesser les veines pulmonaires et d'autres vaisseaux et peut conduire à la perte de sang fatale. La cavité thoracique a négatif et l'environnement extérieur a une pression positive. Dans cette procédure, bien que la paroi thoracique a été coupé ouvert du sternum et de la crosse de l'aorte a été bagué, la cavité thoracique et de l'environnement de pression négative étaient intacts. S'il y avait ACCIDENTAl dégâts et la pression négative à l'intérieur a été modifié, les poumons se sont effondrés, et l'animal serait mort instantanément, car il y aurait eu aucune ventilation à pression positive. Habituellement, la procédure peut être effectuée en toute sécurité dans les 30 minutes, même avec un ralentissement des performances, s'il n'y a pas de blessure mortelle. Les soins post-opératoire est également critique, car la pression peut être réduite si l'animal est déshydraté, ou l'animal peut mourir de faim en raison de la douleur et de difficulté à atteindre la nourriture. Facilement accessible des aliments mous, des analgésiques, et la réhydratation sont essentiels pour la récupération, ainsi que pour un résultat positif.
L'utilisation ultérieure des systèmes à ultrasons, en particulier le mode Doppler couleur, permet la visualisation de la crosse aortique, la constriction réussie, et les effets de MTAC. Le système à ultrasons permet la mesure de la vitesse d'écoulement dans les artères carotides, de l'épaisseur de la paroi artérielle et de la morphologie du ventricule gauche.En particulier, le rapport des débits dans des souris normales ou pseudo-opérées doit être d' environ 1 10. La vitesse d'écoulement de pointe dans le site de restriction peut être utilisée pour calculer le gradient de pression en utilisant l'équation de Bernoulli modifiée (4 x 2 V max) pour un paramètre fiable comme étant le rapport de la carotide. Il est à noter qu'au cours de la échocardiographie, que la température du corps et le rythme cardiaque doivent être aussi près que possible de la gamme physiologique normale et devraient être similaires entre les animaux pour produire des points de données comparables 10.
Différents niveaux de constriction peuvent provenir de différents niveaux d'opérateurs d'expérience et peuvent influencer de manière significative la morphologie obtenue. Pour obtenir des résultats cohérents, en vérifiant avec succès une constriction avec des niveaux de gradient de pression et seulement en utilisant des souris dans certaines limites, par exemple un gradient de pression entre 40 à 80 mm de Hg, est importante. Chaque fois que possible, à haute fréquence echocardiography doit être utilisé pour la confirmation et de sélection des animaux critères pour assurer la cohérence dans les résultats de l'étude. Cependant, l'échocardiographie est pas nécessaire pour le procédé MTAC lui-même.
Si à haute fréquence échocardiographie ne sont pas disponibles, la constriction réussie peut être vérifiée avec le poids du cœur et des rapports relatifs et à l'étude histopathologique à la fin de l'expérience. La constriction réussie va augmenter le poids cardiaque maigre et le rapport relatif au poids du corps et du tibia gauche longueur de l'os. De même, l'hypertrophie cardiaque, des cellules musculaires et à la fois la fibrose interstitielle et périvasculaires peuvent également être observés chez les souris ligaturés avec succès. Cette 3-semaine expérience est destiné uniquement à induire une hypertrophie cardiaque, mais ne pas provoquer un échec. La dilatation cardiaque et l'insuffisance cardiaque habituellement fixés après 6 - 8 semaines plus tard.
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Acknowledgments
Nous tenons à remercier le Fonds pour la recherche universitaire en sciences de la vie (ULS) de l'Université polytechnique de Hong Kong pour la fourniture de Vevo 2100 échographe. Remerciements particuliers à Dr. Chunyi Wen de la Division interdisciplinaire de génie biomédical, Hong Kong Polytechnic University, de formation et de facilitation. Ce travail a été soutenu par le gouvernement HK RGC Grant GRF 17127215, 764812 et HKU6 / CRF / 11G à Billy KC Chow.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 inch 30 Gauge Needles | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 305128 | Curved as in the procedure and Figure 1 |
| 27 Gauge Needle | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 301629 | Make blunt and smooth for spacer |
| 6/0 Dafilon | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0933066 | |
| 6/0 Silkam | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0762067 | |
| Sterile gloves | A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong. | ||
| Cotton Applicator | Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. | Local Shopping Center | |
| Depilatory Cream | Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong | Local Shopping Center | |
| Lexer-Baby Scissor | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 14078-10 | |
| Curved Iris Forcep | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 11065-07 | |
| Micro Olsen-Hegar Needle Holder | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | 501989 | |
| Stereo Micrioscope | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | PZMIII-BS | |
| GenTeal Eye Gel | Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA. | Local Pharmacy | |
| Heating Pad | Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. | DCT-20 | |
| Surgical tape | Laboratory Animal Unit | ||
| Ketamine and Xylazine | Laboratory Animal Unit | ||
| Betadine | Laboratory Animal Unit | ||
| Buprenorphine | Laboratory Animal Unit |
References
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