Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Minimalt invasiv Tværgående pulsåresammensnøring i mus

Published: March 14, 2017 doi: 10.3791/55293

Summary

Minimalt invasiv tværgående aorta konstriktion (MTAC) bevarer de væsentlige punkter i regelmæssig tværgående aorta konstriktion (TAC) og samtidig fjerne brugen af ​​en ventilator med tracheal intubation. Det viser sig at være en yderst ønskelig metode til high-throughput undersøgelser af venstre ventrikel overbelastning, især i translationelle studier.

Abstract

Minimalt invasiv tværgående pulsåresammensnøring (MTAC) er en mere ønskelig fremgangsmåde til indsnævringen af ​​den tværgående aorta i mus end standard open brystet tværgående pulsåresammensnøring (TAC). Selvom tværgående pulsåresammensnøring er en funktionel metode til induktion af højt tryk i venstre ventrikel, er det en mere vanskelig og langvarig procedure på grund af dens anvendelse af kunstig ventilation med tracheal intubation. TAC er ofte også mindre overleves, som den nyere metode, MTAC, hverken kræver opskæring af ribbenene og mellemsiddende muskler eller trakealintubation med en ventilation setup. I MTAC, i modsætning til en torakotomi for at få adgang til brysthulen, er aortabuen nås gennem en midtlinie incision i den forreste hals. Skjoldbruskkirtlen er trukket tilbage for at afsløre brystbenet hak. Brystbenet efterfølgende skåret ned til den anden ribbe niveau, og aortabuen nås simpelthen ved at adskille bindevæv og thymus. Frader, kan en sutur vikles omkring buen og bundet med en linker, og derefter brystbenets snit og hud kan lukkes. MTAC er en langt hurtigere og mindre invasiv måde at inducere venstre ventrikel hypertension og muliggør muligheden for high-throughput undersøgelser. Succesen med indsnævringen kan verificeres ved hjælp af høj-frekvens trans-thorax ekkokardiografi, især farve Doppler og pulserende bølge Doppler, at bestemme strømningshastigheder af aortabuen og venstre og højre halspulsårer, dimensionen af ​​blodkarrene, og venstre ventrikelfunktion og morfologi. En vellykket konstriktion vil også udløse betydelige histopatologiske ændringer, såsom hjertemuskulaturen cellehypertrofi med interstitiel og perivaskulær fibrose. Her er proceduren for MTAC beskrevet, viser, hvordan de resulterende flow ændringer i halspulsårer kan undersøges med ekkokardiografi, grov morfologi, og histopatologiske ændringer i hjertet.

Introduction

Det overordnede formål med denne artikel er at demonstrere, hvordan tværgående aorta konstriktion (TAC) i mus kan modificeres til at producere en enklere og mere hensigtsmæssig kirurgi. TAC blev først indført i 1991 1 og aktiveret molekylærbiologer at studere cellulære og molekylære veje, der fører til hypertrofi i venstre ventrikel og hjertesvigt, især i små dyr med manipulerede genomer 2, 3, 4, 5, 6. På trods af sin effektivitet ved fremstilling af den ønskede tryk overbelastning, er teknikken i sidste ende begrænset af vanskeligheden ved at udføre proceduren og af dets lave overlevelsesrate. En kirurg ledende TAC skal kunne udføre endotracheal intubation, torakotomi, og anvende kunstig ventilation for at forhindre lunge kollaps 1.

indhold "> Ofte ønskes en enkel og mindre invasiv fremgangsmåde. Som følge heraf minimalt invasiv tværgående pulsåresammensnøring (MTAC) blev udtænkt 3. Selvom resultatet (specifikt venstre ventrikelhypertrofi) er den samme, hvis proceduren omfatter signifikant færre apparater og mindre skade på dyret. MTAC viser sig at være en ønskelig metode, der har en større overlevelsesrate, over 90%, og har en driftstid på kun 15 til 25 min. de sjældne tilfælde af dødsfald efter vellykket operation kan tilskrives for -tight konstriktion af aortabuen, hvilket resulterer i enorme venstre ventrikel overbelastning og fatal reduktion af blodforsyningen til kritiske organer såsom nyrer.

Efter at proceduren er afsluttet, kan ekkokardiografi anvendes til at evaluere resultaterne af banding og hjertefunktionen morfologi og funktion. En højfrekvent ultralyd-systemet kan anvendes til at måle diameteren og flow ændringer i den venstre og højrehalspulsårer, at visualisere aortabuen konstriktion for peak flow hastighedsmålinger, og at bestemme den venstre ventrikel vægtykkelse og funktionelle parametre 7, 8. Efter eutanasi, kan organerne også indsamles for histopatologiske undersøgelser med hematoxylin og eosin-farvning og PicroSirius collagen-farvning, hvor sidstnævnte er særlig anvendelig til observation af fibrose.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Protokollen følger retningslinjerne fra Udvalget om brugen af ​​levende dyr i undervisning og forskning (CULATR) ved University of Hong Kong.

1. Drift Klargøring

  1. Desinficer operationsstedet med 75% isopropylalkohol. Juster varmepuden temperaturen til 37 ° C for at undgå ændringer i hjerte og respirationsfrekvenser af emnet dyr.
  2. Brug kirurgiske instrumenter steriliseret i en tyngdekraft forskydning sterilisator ved 121 ° C i 30 min eller ved andre egnede metoder.
  3. Take 2 - 4 30-gauge nåle og kurve dem med en nåleholder, som ses i figur 1, for at gøre et værktøj til ligering og væv adskillelse og til anvendelse som en retraktor. Monter nu krummende nål på en bomuld applikator til anvendelse i kirurgi.
  4. Blunt en 27-gauge nål og kurve det 90º med nåleholderen. Glat spidsen ved at gnide en hård overflade til at foretage en 0,4-mm spacer i ligering trin.

  1. Bedøver en 2-måneder gamle, mandlige, 22-25 g C57BL / 6N mus med en passende ketamin og xylazin blanding i forhold til kropsvægt: 100 mg / kg + 10 mg / kg ip Bekræft bedøvelse med den negative hale knivspids refleks .
  2. Fjerne hår på den forreste hals og bryst med en 2- til 3-min anvendelse af hårfjerningsmiddel. Fjerne cremen med varmt vand og en bomuld applikator.
  3. Påfør oftalmisk salve eller gel på øjnene af dyret for at forhindre udtørring af hornhinden.
  4. Placer dyret på en varmepude i liggende stilling og gennemføre intraoperativ monitorering, og sørg for at holde passende dokumentation på hver 15-min interval.
  5. Brug kirurgisk papirtape at fastgøre benene til varmepude for at holde dyret i den korrekte position under operationen.
  6. Desinficer huden skiftevis med alkohol og povidon-jodopløsning tre gange.
  7. Brug en steril drabe med en udsat operation felt for at forhindre forurening. Brug nye sterile handsker til hver mus og efter behov.

3. Ligation Procedure

  1. Åbn huden på mus ved midterlinjen position af hals og bryst med en skalpel.
  2. Træk skjoldbruskkirtlen mod hovedet ved forsigtigt at adskille bindevæv med stumpe saks.
  3. Adskil muskel lag på trachea på midterlinjen i retning begge sider med de buede nåle.
  4. Brug af de stumpe saks, klippe brystbenet til den anden ribbe (ca. 5 mm). Åbn snit med en retraktor eller buede pincet.
  5. Adskil thymus flige fra hinanden, og den nedre brystvæggen ved at adskille bindevæv med den krumme nål; den tværgående aortabuen og to halspulsårer vil være klart synlig på dette punkt.
  6. Placer den buede nål under buen og perforere mellem karvæggen og bindevæv på den anden side ved pushing den buede hoved ud.
  7. Brug af den krumme nål, træk 6-0 monofilament sutur under aortabuen.
  8. Placer afstandsstykket i løkken og løse sutur på plads med en dobbelt-knude. Fjern afstandsstykket forsigtigt.
  9. Bekræft en vellykket indsnævring med knuden position og sender enderne af suturen.
  10. Luk brystvæggen hjælp 6/0 silkesutur med en enkel afbrudt sutur mønster. Luk huden med en 6/0 monofilament sutur i en kontinuerlig sutur mønster.

4. Postoperativ pleje

  1. Påfør povidon-jod løsning på sutur websted og placere dyret i en forvarmet bur til nyttiggørelse og postoperativ overvågning.
  2. Injicer buprenorphin (0,05 - 0,1 mg / kg sc hver 12 h) efter at dyret er kommet til bevidsthed at lindre smerter og give musen med passende blød mad.
  3. Retur dyret til en 12-timers lys / mørke cyklus rum efter fuld helbredelse.

Fem.Ekkokardiografi: Bekræftelse af Vellykket Ligation og Målinger

  1. Efter en uge, bedøve tidligere banded mus med 3 - 5% isofluran, til induktion, og 1 - 1,5% til vedligeholdelse, med en 1 l / min oxygen strømningshastighed.
  2. Fjern brystet hår ved hjælp af rigtige spørgsmål creme. fjerne cremen med varmt vand og en bomuldsapplikator grundigt.
  3. Fastgør musen i liggende stilling til dyret håndtering platform, opretholdt ved 37 ° C. Påfør elektrode gel til poterne og tape dem til puden med elektroder.
  4. Påfør ultralyd gel til musen brystet. Med en 40-MHz MS550D probe og en højfrekvent ultralyd-systemet, udføre farve Doppler og pulseret bølge Doppler scanning til venstre og højre halspulsårer, samt på aortabuen.
  5. Brug B-Mode, find den venstre ventrikel. Ved hjælp af M-Mode, kan det systoliske og diastoliske vægtykkelse måles. Brug Cine Store og Frame Store for at gemme data og billeder efter behov.
  6. Using B-mode, finde den venstre fælles halspulsåre før forgreningen punkt. Brug pulseret bølge og farve Doppler at evaluere strømmen. Gentag med den højre carotidarterie på et tilsvarende punkt. Gem billederne i Cine Store og Frame Store modes at analysere senere.
  7. Vip dyret håndtering platform længst til venstre, så musen er i venstre decubitus position. Placer sonden på musen, 30 ° forskudt fra en position parallelt med hoved ved parasternal position, og manipulere X og Y for at finde aortabuen.
  8. Find indsnævringen. Brug farve Doppler-tilstand for at gøre det sted indsnævringen mere synlig, som blod vil blive strømmer gennem en smal kanal mellem det punkt, hvor de to halspulsårer forgrener fra aortabuen.
  9. Brug pulseret bølge og farve Doppler at måle peak flow hastighed. Brug Cine Store og Frame Store for at gemme data og billeder efter behov.
  10. Så dyret kan komme sig på en varmepude i bugleje.Retur dyret til den oprindelige bur i en 12-timers lys / mørke cyklus værelse efter at den er fuldt tilbagebetalt fra anæstesi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

MTAC muliggør induktion af signifikant hypertension i den venstre ventrikel i tide.

Som det ses i figur 1, fremstillingen af de primære midler under proceduren er enkel og minimal, kræver kun 2 - 4 30-gauge nåle, der skal bukkes og holdes på plads med en polyurethan rør. Den kirurgiske procedure selv er også mindre kompliceret i forhold til TAC, og kan udføres nemt. Når skjoldbruskkirtlen er blevet trukket tilbage, er brystbenet skåret og brissel bevæges for at fjerne visningen. Aortabuen let kan anbringes for ligeringsprocessen (figur 2).

MTAC pålideligt producerer venstre ventrikel trykoverbelastning i ligerede mus. Figur 3 illustrerer dette tydeligt, som en indsnævret tværgående aorta kan tydeligt iagttages i figur 3C, som well som en øget peak flow hastighed gennem forsnævringen webstedet i 3D. Dette kan sammenlignes med den sham-opererede mus, ses i figur 3A og 3B, som udviser nogen indsnævring med normal peak flow hastighed. Som følge af ligeringen ses i figur 4C, er strømningshastigheden signifikant forøget i den højre halspulsåre, og kan opbygges et tryk aorta ascendens og i hjertet at producere venstre ventrikel hypertrofi. Men som følge af opstrøms konstriktion, strømningshastigheden reduceres signifikant i den venstre fælles halspulsåre, som i figur 4D. På den anden side er næsten identisk carotidarterie blodgennemstrømning observeret i sham-opererede mus, som i figur 4A (højre carotidarterie) og 4B (venstre carotidarterie).

Den resulterende hypertrofi-relateret parameters og overlevelse kurve let observeres i figur 5, i hvilken kan observeres hjertet af MTAC-ligeret musen til at være betydeligt udvidet og deformeret. Dette er kun yderligere ses på celleniveau, som vist i figur 6A og 6B, som udviser den forstørrede hjertet af MTAC betjente mus sammenlignet med sham-opererede mus. Hvad kan yderligere observeres er den øgede hjertemuskulaturen cellestørrelse og fibrose i MTAC mus (figur 6D, 6F, og 6H) sammenlignet med ikke-ligeret mus (figur 6C, 6E og 6G).

Da MTAC kan verificeres ved en højfrekvent ultralyd system, vil manglende succes snøre aortabuen afsløres ved manglende en synlig konstriktion af den tværgående aorta i den todimensionelle ekkokardiografi, som i figur 3B 3D. Dette kan yderligere verificeres med den pulserede-bølge og farve Doppler modes, bør en vellykket indsnævring vise en højere strømningshastighed i højre carotidarterie og reduceret strømningshastighed i den venstre carotidarterie (figur 4C og 4D).

figur 1
Figur 1: processen med at danne den ønskede Needle Kroge ved at bøje en 1-i, 30-gauge Needle Tip. A) Den oprindelige 1-i, 30-gauge nål spids. B) Tag fat nålespidsen med nåleholderen og bøj omtrent halvvejs langs dens længde. Bøj nålen ind i en løkke, ved hjælp af nål holderen og hænder, som er nødvendigt, for at danne løkken afbilledet i øverste højre i figuren. C) dække nålen med en polyurethan rør for at holde den bøjede segment på plads. D) at anvendenåleholder, bøje spidsen af ​​sløjfen til den ønskede form. I dette tilfælde en nålespids med to 45 - har 60 ° bøjninger blevet vist for illustrative formål. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 2
Figur 2: Processen med at ligere tværgående aorta Arch. A) aortabuen er klart synlig. B) Ved hjælp af førnævnte krog nål, adskille aortabuen fra den nærliggende bindevæv. C) anvendelse af hooked nål, guide suturen under aortabuen, og med anvendelse af en spacer, binde en indsnævring af den ønskede diameter. D) Afsluttet ligation. pl lethed klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 3
Figur 3: Farve og Pulserende-bølge Doppler Ultrasound Imaging fra aortabuen af Ligeret og ikke-ligeret mus. A) Color Doppler billeddannelse af aortabuen af et ikke-ligeret mus. De to halspulsårer er klart synlige, samt manglen på en indsnævring mellem dem. B) Aorta peak flow hastighed af et ikke-ligeret mus. C) Color Doppler billeddannelse af aortabuen af en ligeret mus. Indsnævringen mellem de to halspulsårer på aortabuen er synlige (gule pilespidser). D) Peak strømningshastighed ved indsnævringen site. Klik her for at se en større version af dette tal.

indhold "fo: holde-together.within-side =" 1 "> Figur 4
Figur 4: Pulserende-bølge Doppler Imaging fra venstre og højre halspulsårer af Ligeret og ikke-ligeret mus. A) Pulserende-bølge Doppler billeddannelse af venstre carotidarterie af et ikke-ligeret mus. B) Pulserende-bølge Doppler af højre carotidarterie af et ikke-ligeret mus. Det er bemærkelsesværdigt, at hastigheden af ​​blodstrømmen er næsten identisk med den for den venstre carotisarterie. C) Pulserende-bølge Doppler af højre carotidarterie på en mus med en indsnævring på dens aortabuen. Blodet hastighed er steget betydeligt på grund af indsnævring nedstrøms for posten til venstre halspulsåre. D) Pulserende-bølge Doppler af den venstre carotidarterie af en mus med en indsnævring på dens aortabuen. Blodet strømningshastighed væsentligt reduceret på grund af indsnævringen opstrøms til opførelse afden venstre carotisarterie. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 5
Figur 5: hjertehypertrofi og relaterede parametre med en Survival Curve fra 3-ugers ligeret og ikke-ligeret mus. A) Hjertet fra en 3-måneder gammel mus uden tværgående pulsåresammensnøring. Hjertet er sundt og af en normal form, uden nogen umiddelbart indlysende patologier. B) Hjertet i en 3-måneder gammel mus, der undergik MTAC i 3 uger. Bemærk den klart misdannede karakter af hjertet på grund af venstre ventrikel væg udvidelsen. Ligeringen på aortabuen er også synlig. C) Et tværsnit af hjertet af en 3-måneder gammel ikke-ligeret mus. D) Et tværsnit af hjertet af en 3-måneders gammel mus, der undergik tværgående pulsåresammensnøring i 3 uger. Udvidelsen af ​​venstre ventrikel er klart synlig. Hjertet i almindelighed er også udvidet på grund af det tryk i venstre ventrikel overbelastning forårsaget af MTAC. E) Den hjerte-til-legemsvægt-forhold er signifikant forøget i mus banded i 3 uger. F) Skinnebenets knogle længdeforhold hjerte-til-venstre er steget betydeligt i mus stribede i 3 uger (*, p <0,05, **, p <0,01, ***, p <0,001). G) Overlevelse kurve for en 3 uger lange forsøg (MTAC = 12 og SHAM = 12). Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 6
Figur 6: Histologisk Slides af Mouse Heart. A) Et tværsnit af en sham-opererede mus hjerte. B) Et tværsnit af et hjerte MTAC-ligeret i 3 uger, med en fortykket venstre ventrikel væg og delvis fibrose. Den samlede hjerte størrelse øges også. C) Længdesnit af hjertemuskelceller fibre fra en skinopereret mus. D) Længdesnit af hjerte muskelfibre fra en MTAC-ligeret mus. Cellerne forstørret væsentligt, hvilket fremgår af deres forøget diameter, mens kernen er forblevet den samme størrelse. E) tværsnit af muskelfibre fra en farce-opererede mus. F) tværsnit af kardiale muskelfibre fra en MTAC-ligeret mus. Cellerne forstørret på grund af presset overbelastning som følge af den MTAC. G) Koronararterier fra en farce betjente mus farvet med PicroSirius Rød for kollagen. H) Koronararterier fra en MTAC-ligeret mus. En betydelig mængde af kollagen væv observeres around den dilaterede blodkar, der indikerer perivaskulær fibrose grund af presset overbelastning i kranspulsårerne. Klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Rockman og kolleger udtænkt den første fremgangsmåde til aorta banding som en metode til at studere trykoverbelastning i hjertet. Det gjorde det muligt forskning for at begynde at afdække de cellulære og molekylære konsekvenser af hypertension og hjertesvigt 1. En forbedret fremgangsmåde, minimalt invasiv tværgående pulsåresammensnøring (MTAC), giver en medgørlige, tidsafhængig fremgangsmåde til induktion af tryk i venstre ventrikel overbelastning og hjertesvigt, uden ulemperne ved den konventionelle tværgående pulsåresammensnøring 9. Selve proceduren kan udføres betydeligt nemmere og med øgede overlevelsesrater sammenlignet med TAC. Den største fordel ved denne fremgangsmåde er, at den muliggør udførelsen af ​​pulsåresammensnøring eksperiment, men med betydeligt mindre udstyr, kirurgisk dygtighed, og driftstid for samme eller et bedre resultat.

Den åbne kiste metode i TAC procedure gør det muligt greater adgang og et bedre overblik over helheden af ​​hjertet og fartøjer. Den potentielle fordel er, at den let kan udføres i kombination med andre procedurer, såsom udførelse af lungepulsåren konstriktion for højre ventrikel tryk overbelastning eller kranspulsåreombinding for iskæmiske tilstande på samme tid som aortabuen banding er gjort. Omvendt er minimalt invasiv metode kan ikke anvendes til andet end stigende eller tværgående aortabuen konstriktion.

Det er bemærkelsesværdigt, at denne fremgangsmåde er blevet tilpasset og modificeret på en række måder. I nogle tilfælde har anvendelsen af ​​titanium klip i stedet for en sutur til at snøre aorta blevet anset for mere passende, da det er en eksperimentel betingelse, som er let at reproducere: båndene kan ikke glide ud som de kan i standard TAC og MTAC procedurer, som involverer suturer 6. I tilfælde af at, når det testes med højfrekvent ultralyd-systemet,et stort antal mus ikke har haft held ligeret under eksperimentet, kræves yderligere praksis. Måske anvendelsen af ovennævnte titanium klip kan forbedre succesraten for kirurgi 6.

Ved gennemførelsen af ​​forsøget, er det kritisk, at suturen omkring aorta ikke strammer. Det kan skade aorta eller forårsage fatal reduktion af blodgennemstrømningen til resten af ​​kroppen, herunder de kritiske organer, såsom nyrer. Care skal ligeledes tages at være blid ved brug af buede krog til at adskille aorta fra det omgivende bindevæv og fartøjer, da det kan skade de pulmonale vener og andre fartøjer og kan føre til fatal blodtab. Brysthulen har negativ og det udendørs miljø har positivt tryk. I denne procedure, selv om brystvæggen blev skåret åben fra brystbenet og aortabuen blev banded, brysthulen og undertryk miljø var intakte. Hvis der var accidental skader og indersiden undertryk blev ændret, lungerne ville have brudt sammen, og dyret ville være døde øjeblikkeligt, da der ville have været nogen positivt tryk ventilation. Normalt Proceduren kan sikkert udføres inden for 30 min, selv med langsom ydeevne, hvis der ikke er dødelig skade. Postoperativ pleje er også kritisk, da trykket kan reduceres, hvis dyret er dehydreret, eller dyret kan sulte på grund af smerter og vanskeligt at nå fødevaren. Let tilgængelig blød mad, analgetika, og rehydrering er afgørende for nyttiggørelse, samt for et vellykket resultat.

Den efterfølgende brug af ultralyd-systemer, især farven Doppler-tilstand, muliggør visualisering af den tværgående aortabuen, den vellykkede konstriktion, og virkningerne af MTAC. Ultralydssystemet muliggør måling af strømningshastighed i halspulsårer, af tykkelsen af ​​arterievæggene, og morfologien af ​​den venstre ventrikel.Navnlig bør forholdet mellem strømningshastigheder i normale eller sham-opererede mus være ca. 1 10. Peak flow hastighed i indsnævringen stedet kan anvendes til at beregne trykgradienten brug af modificeret Bernoullis ligning (4 x Vmax 2) for en pålidelig parameter som carotis ratio. Det er værd at bemærke, at i løbet af ekkokardiografi, skal denne kropstemperatur og puls holdes så tæt som muligt på det normale fysiologiske område og bør være ens mellem dyr at producere sammenlignelige datapunkter 10.

Varierende niveauer af konstriktion kan afledes fra forskellige erfaringer niveauer af operatører, og kan i væsentlig grad påvirke den opnåede morfologi. At få ensartede resultater, kontrol vellykket indsnævring med trykgradient niveauer og kun under anvendelse af mus inden for visse grænser, såsom en trykgradient mellem 40-80 mmHg, er vigtig. Når det er muligt, højfrekvente echocardiography bør anvendes til bekræftelse og dyrs udvælgelseskriterier at opnå konsistens i undersøgelsen resultater. Men ekkokardiografi er ikke nødvendigt for MTAC selve metoden.

Hvis højfrekvente ekkokardiografi ikke er tilgængelig, kan den vellykkede konstriktion verificeres med hjerte vægt og relative forhold og med den histopatologiske undersøgelse ved slutningen af ​​eksperimentet. Den udvalgte konstriktion vil øge lean hjertevægt og det relative forhold til kropsvægt og venstre skinneben knogle længde. Ligeledes kan også observeres hjertemuskulaturen celle hypertrofi og både interstitielle og perivaskulær fibrose i held ligerede mus. Dette 3 uger lange forsøg er kun beregnet til at inducere hjertehypertrofi, men ikke at forårsage en fejl. Den hjerte-dilatation og hjertesvigt normalt sat i efter 6 - 8 uger eller senere.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

Vi vil gerne anerkende Universitets Research Facility i Life Sciences (ULS) af The Hong Kong Polytechnic University for levering af Vevo 2100 ultralydssystemet. Særlig tak til Dr. Chunyi Wen fra Interdisciplinært Division of Biomedical Engineering, Hong Kong Polytechnic University, til uddannelse og lettelse. Dette arbejde blev støttet af HK regeringen RGC Grant GRF 17127215, 764.812 og HKU6 / CRF / 11G til Billy KC Chow.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1 inch 30 Gauge Needles BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  305128 Curved as in the procedure and Figure 1
27 Gauge Needle BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA.  301629 Make blunt and smooth for spacer
6/0 Dafilon B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0933066
6/0 Silkam B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. C0762067
Sterile gloves A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong.
Cotton Applicator Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. Local Shopping Center
Depilatory Cream Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong Local Shopping Center
Lexer-Baby Scissor FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 14078-10
Curved Iris Forcep FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. 11065-07
Micro Olsen-Hegar Needle Holder WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  501989
Stereo Micrioscope WPI, Sarasota, FL 34240, USA.  PZMIII-BS
GenTeal Eye Gel Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA.  Local Pharmacy
Heating Pad Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA.  DCT-20
Surgical tape Laboratory Animal Unit
Ketamine and Xylazine Laboratory Animal Unit
Betadine Laboratory Animal Unit
Buprenorphine Laboratory Animal Unit

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
  2. de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
  3. Hu, P., et al. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).
  4. Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).
  5. Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
  6. Zhang, X., et al. A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling. Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).
  7. Hartley, C. J., et al. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).
  8. Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. Echocardiography in translational research: of mice and men. J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).
  9. Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
  10. Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. J Vis Exp. (112), (2016).

Tags

Medicin musemodel minimal tværgående aorta banding hjertehypertrofi fibrose ekkokardiografi dopplerbilledbehandling
Minimalt invasiv Tværgående pulsåresammensnøring i mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. More

Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (121), e55293, doi:10.3791/55293 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter