Summary
Djurmodeller av åderförkalkning är viktiga att förstå mekanismen och utreda nyare metoder för att förhindra plack utveckling eller bristning, en ledande dödsorsak i den industrialiserade världen. Detta protokoll använder en kombination av ballong skada och kolesterol kost för att inducera aterosklerotiska plack i kanin bäckenartären.
Abstract
Akuta koronara syndrom som följd av koronar ocklusion efter blodkärlets utveckling och bristning är den ledande dödsorsaken i den industrialiserade världen. Nya Zeeland White (NZW) kaniner används allmänt som en djurmodell för att studera ateroskleros. De utveckla spontan lesioner när matas med aterogena kost; men kräver detta lång tid av 4-8 månader. För att ytterligare förbättra och påskynda aterogenes, används ofta en kombination av aterogena kost och mekaniska endoteliala skador. Presenterade förfarandet för att inducera aterosklerotiska plack i kaniner använder en ballongkateter för att störa endotelet i den vänstra bäckenartären NZW kaniner utfodras med aterogena diet. Sådana mekaniska skador som orsakas av ballongkateter inducerar en kedja av inflammatoriska reaktioner inleda neointimal lipid ackumulering i en tid beroende mode. Aterosklerotiska plack efter ballong skada Visa neointimal förtjockning med omfattande lipid infiltration, höga glatta muskulatur cellinnehållet och förekomsten av makrofag härrör skumceller. Denna teknik är enkel, reproducerbar och producerar plack av kontrollerade längd inom bäckenartären. Hela förfarandet är avslutat inom 20-30 min. Förfarandet är säker med låg mortalitet och erbjuder också hög framgång att få betydande intimans lesioner. Tillvägagångssättet av ballongkateter inducerad arteriell skada leder till åderförkalkning inom två veckor. Denna modell kan användas för att utreda sjukdom patologi, bilddiagnostik och utvärdera nya terapeutiska strategier.
Introduction
Bristning av sårbara aterosklerotiska plack är en av de ledande dödsorsakerna i industriländerna1. Forskning under de senaste decennierna har vecklade flera molekylära och cellulära mekanismer som är involverade i plack progression, fortsatte ansträngningar behövs inte bara för att nysta upp den komplexa mekanismen av progression av sjukdomen men också att testa nya terapeutiska tillvägagångssätt. Flera modeller har föreslagits att studera åderförkalkning. Genmanipulation, kolesterol utfodring eller mekanisk skada endotel är standard strategierna delas av mest djurmodeller av åderförkalkning inklusive möss, kaniner och minigrisar. Bland dessa är NZW kaniner känsliga för kolesterol diet medan normala råttor och möss inte avsevärt absorbera kolesterol2,3,4. Kaniner utvecklar spontant aorta lesioner rik på makrofager med vissa fibrösa komponent när matas med kolesterol kost5,6. Den långa förberedande tid 4-8 månader att inducera aterosklerotisk plaquesby utfodring kolesterol diet ensam6,7 är dock en stor nackdel för de flesta experimentella inställningarna. I strävan för att inducera lesioner på relativt kort tid, har en kombination av högt kolesterol kost och ballong skada utvecklats av Baumgarter och Studer8. Det övergripande målet för denna teknik är att inducera aterosklerotiska plack består av skumceller (liknar fatty streak hos människor) i hypercholesterolemic kaniner inom 2 veckor. Den nuvarande tekniken beskriver tillvägagångssättet av kärlväggen skada baserat på Baumgarters metod med hjälp av en ballongkateter avancerade in bäckenartären NZW hypercholesterolemic kaniner.
Tillsammans med en kolesterol kost leder skada till följd av ballong inducerad avinstallation endothelialization till åderförkalkning. Ballong skada påskyndar bildandet av aterosklerotiska lesioner och producerar plack enhetlig storlek och fördelning. Intimans förtjockning ökar över en tidsperiod och intimans cell infiltration startar inom några dagar efter skadan. Feta streck med betydande makrofager börjar visas efter 7-10 dagar av ballong skada och representeras som typ II lesion enligt klassificering av American Heart Association. Ballong skada i kanin utförs ofta i aorta för att studera plack sammansättning. Neointimal endotelet uttrycker höga nivåer av intercellulära vidhäftning molekyl. Plack är associerade med mediala dissektion och adventitial förändringar. Aterosklerotiska lesioner består av lipider, prolifererande glatta muskelceller (SMCs), kollagenfibrer och inflammatoriska celler som ackumuleras under regenererad endotelet och är mestadels typ II i naturen. Topologisk fördelningen av kanin plack var liknande som rapporterats i mänskliga artärer 9,10 i princip, aorta är större i storlek jämfört med bäckenartärerna och skulle producera plack i större längd. Men är den stora fördelen med att använda bäckenartären som platsen för åderförkalkning hos kaniner dess tillgänglighet, dess likhet i muskulös innehåll till mänskliga kranskärl11, enhetlig lesion utveckling12, hög vävnadsfaktor verksamhet13 och konsekvent fartyget dimension jämförbara mänskliga kranskärl som möjliggör utvärdering av kommersiellt tillverkade enheter morfometriska och angiografiska slutpunkter. Invasiva och icke-invasiva metoder har undersökts för att analysera plack i kanin bäckenartärerna i det levande djuret. Tidigare rapporter beskriver användningen av magnetisk resonanstomografi (MRT) med hjälp av en 2,35-tesla MR system 14 dessutom, intravaskulärt ultraljud (IVUS) eller optisk koherens tomografi (ULT) katetrar kan vara lämpligt tillämpas på bild aterosklerotiska plack i kanin bäckenartärerna. Bäckenartären är tillgänglig för ultraljudsundersökningar när du använder en högupplöst ekografi och aorta kan också undersökas med denna teknik.
Under det senaste decenniet, har denna kanin modell av ballong skada bidragit till att ytterligare förstå mekanismerna bakom plack progression15och plack regression16. Dessutom modellen har använts för att studera påverkan av nya terapeutiska medel såsom statiner, standard trombocytaggregationshämmande medel, antioxidant medel17,18 och drog-eluering stent såsom everolimus eller zotarolimus-eluering stent19,20 på neointimal förtjockning. Denna modell har också använts för att undersöka intravaskulär avbildning av infrarött fluorescens imaging katetern21.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
detta experimentellt protokoll har godkänts av den kantonala veterinärfrågor, Fribourg och den schweiziska federala veterinär kontor, Schweiz (FR 2015/58).
Obs: manliga NZW kaniner som väger mellan 2,8 och 3.2 kg användes. Djuren var inrymt konventionella villkor (12 h ljus och mörka cykel, enligt ad libitum vatten och mat). Innan ballongen denudation, var djur acklimatiserade för 1 vecka under vilken de matades med normala chow kost. Efter 1 veckas acklimatisering, kaniner var bytte till aterogena kost bestående av hög fetthalt (8,6%) och mättade fettsyror med 205 mg/kg (1%)-kolesterol diet under hela studien. Ballong skada i den vänstra bäckenartären utfördes 1 vecka efter diet initiering och djur offrades efter 2 veckor eller 4 veckor av ballong skada.
1. preoperativ förfaranden
- sterilisera alla kirurgiska instrument före användning med en glas pärla sterilizer eller andra lämpliga regleringsformen.
- Förbered och kontrollera ballong kateter församlingen.
- Bifoga en 1 mL luerlock spruta fylld med fysiologisk koksaltlösning till det luer-lock med en ballongkateter. Noggrant övervaka för avsaknad av instängd luft. Kontrollera läckor och säkerställa korrekt ballongen inflationen genom att trycka på kolven i sprutan.
- Väger kaninen och slå på thermopad till 37 ° C.
- Använder en buprenorfin lösning med en koncentration på 0,3 mg / ml. injicera en dos 0,01 mg/kg subkutant.
- Anesthetize kanin med 5% isofluran och 5 L/min O 2 i en induktion kammare för 10-15 min.
- Placera sövda kaninen på värme pad höll på kirurgiska plattformen. Placera plåstret och klipp att övervaka temperatur, andning och elektrokardiogram.
- Fäst nosen av kaninen en ansiktsmask som är ansluten till en lämplig anestesi maskin. Upprätthålla anestesin med isofluran (4,0% med 2,5 L/min O 2). Bekräfta rätt anesthetization (indikeras av avsaknaden av muskeltonus och förlust av gag och extremiteterna reflexer).
- Gäller oftalmologiska salva för båda ögonen att förhindra hornhinna från torkning. Drapera kaninen med en steril kirurgiska plåt med endast nedre extremiteterna utsatta.
2. Kirurgiska protokoll
- ta bort håret från ventrala området nedanför knäleder med animaliskt hårklippningsmaskiner.
- Provstickan området med lämpligt desinfektionsmedel för att rengöra huden och ta bort löst hår.
- Lokalisera den ytlig artären och göra en liten hud snitt ca 1,5 cm i längd med en skalpell.
- Avslöja en liten del av ytlig artär med små böjda pincetten utan att skada femoral ven och femoralisblockad.
- Placera två lösa ligatur slingor (5-0 silk) under den ytlig artären och knyt en ligatur slinga mot den distala änden av artären. Placera en mikrovaskulära klämma ovan ligatur att stoppa blodflödet från bäckenartären.
- Lokalt Applicera en droppe av papaverin att vidgas artären och förhindra vasospasm.
- Lyfta upp den ytlig artären med hjälp av bundet ligatur och gör en liten arteriotomin snitt med en 24 gauge nål.
- Höja snittet viftar med fin pincett och långsamt infoga en ven plocka eller en vägledande nål i lumen av artär.
- Infoga en 2 franska Fogarty arteriell pulmonell embolektomi kateter i ytlig artär. Ta bort ven plocka och mikrovaskulära klämmor.
- In katetern tills sjätte märket (20-25 cm) motsvarar en position ungefär 2-5 cm ovan iliaca bifurkation.
- Blåsa upp ballongen med 0,1 mL fysiologisk koksaltlösning med en 1 mL-spruta eller på ett nominellt tryck av 6 atm med en reglerad manuell uppblåsning som beskrivs i 16 , 22.
- Håll ballongen katetern med pincett och dra tillbaka av 6 cm genom den iliaca arterytoward anslutningar, medan roterande katetern.
- Tömma ballongen genom att dra tillbaka kolven i sprutan.
- Upprepa steg 2.10 till 2.13 tre gånger för att säkerställa fullständig endothelial denudation.
- Ta bort katetern och omedelbart knyta ligatur slingan precis ovanför arteriotomin platsen för att stoppa blödning.
- Applicera lämplig antiseptisk all runt periferin av såret och svabba bort blodproppar. Stäng huden snitt med en 5-0 sutur och desinficera operationsstället med povidon-jodlösning.
- Upprepa steg 2.1-2.16 på den kontralaterala iliaca använder en ny kateter.
- Svabba oftalmologiska salvan från ögon.
3. Postoperativ vård
- Administrera sulfadoxine 40 mg/kg och trimetoprim 8 mg/kg eller någon annan lämplig antibiotika omedelbart efter det kirurgiska ingreppet.
- Under anestesi-återhämtningsperioden, hålla kaninen över en hetta madrassera placeras i en ren Ånghärdad bur.
- Ta bort övervakning patch och klipp.
- Efter återhämtning, återvända kaninerna till sina hem burar. Injicera subkutant buprenorfin 0,05 - 0,1 mg/kg post - operativt varje 6-12 h för 48 h. Fortsätt aterogena diet för en annan två veckor eller fyra veckor.
4. Vävnaden skörd och analys av plack sammansättning
- efter två veckor (för tidig tunn platta) eller tre veckor av ballong skada, söva kaninen med isofluran på ett liknande sätt som beskrivs ovan.
- Öppna brösthålan och avliva kaniner av intracardial exsanguination.
- Isolera bäckenartärerna som beskrivs i 23.
- Kort, öppna buken och exponera retroperitoneum. Spåra aorta mot bifurkationen iliaca och knyta den ovan bifurkation. Ta försiktigt bort omgivande vävnader för att exponera och isolera båda bäckenartärerna.
- Analysera ut båda bäckenartärerna och doppa dem i iskall fosfatbuffrad saltlösning. Ta bort blodproppar med hjälp av tången. Dela varje bäckenartären i 4-6 segment att karakterisera plack i hela artären tjocklek.
- Omedelbart bädda in arteriell segment i ett mögel som innehåller optimal skärtemperatur förening, snapin-frysning med flytande kväve och hålla det vid-70 ° C. förbereda 5 µm tjocka sektioner med en kryostat enligt beskrivningen i 24.
- Utför histologi, immunofluorescens eller immunhistokemisk färgning för morfometri, plack lipid och cellulära innehåll som beskrivs i 10 , 25.
Obs: Kort, skölj de arteriella sektioner med fosfatbuffrad saltlösning (PBS) och permeabilize med 0,2% Triton. Skölj avsnitten med PBS och blockera icke specifika platser med 2% bovint serumalbumin för 30 min. Inkubera avsnitten för 1 h vid 37 ° C med anti α-SM aktin (1: 200) eller RAM11 antikropp (1: 200). Skölj avsnitten med PBS och inkubera dem med lämpliga sekundära antikroppar under 30 minuter vid 37 ° C. Tvätta igen med PBS och lägga till Hoechst (5 µg/mL) i ca 10 min att upptäcka atomkärnor.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Ballong skada av bäckenartären utfördes framgångsrikt utan komplikation (figur 1). Den totala operativa tiden varierade mellan 20 och 30 min för skador utförs på endast en bäckenartären och 35 till 45 min för skador på både artärer. Kaninen återhämtade sig inom 1 h efter ballong skada. Alla djur dök upp friska utan betydande viktminskning. Ingen infektion, ödem eller arteriell trombos påträffades. Sårområdet var normalt förutom några mild fibros på webbplatsen suturen. Efter 4-veckors aterogena kost utfodring, utställda kaniner hyperkolesterolemi 44 ± 18 mM/l.
Siffror 2A, figur 2Eoch räkna 2I Visa den rätta oskadd bäckenartären (inte utsätts för ballong skada) med ett normalt utseende. En kombination av ballong skada och kolesterol dietresulted till strukturella förändringar i kärlväggen ledde till utvecklingen av aterosklerotiska plack i två veckor (figur 2 och figur 3). De oskadd och ballong skadade bäckenartärerna för isolerades från samma djur. Den proliferativa vaskulär respons till ballong skada som en utlösande händelse resulterade i omfattande lipid infiltration (8,7 ± 1,7% lipid område) (figur 2 och figur 3), glatt muskulatur cellmigration och spridning (figur 4), samt som rekrytering av makrofager (figur 4) leder till en ökning av intima-media tjocklek ratio (1,5 ± 0,2) och plack område (0,8 ± 0,2 mm2) med en samtidig minskning av lumen område (1,4 ± 0,2 mm2) observerade (figur 3) 2 veckor efter ballong skada. RAM-11 är en monoklonal antikropp som riktar sig specifikt mot cytoplasman i kanin makrofager. Α-SM aktin identifierar muscle aktin och reagerar med vaskulära glatta muskelceller i blodkärlen. Dessa antikroppar har tidigare använts för att studera makrofag och smidig muskelcell i intimans lesioner av kaninen. Dessa förändringar fortsatte att utvecklas med tiden och en ytterligare ökning av intima/media tjockleksförhållande (2,6 ± 0,2) och luminala förträngning (0,7 ± 0,1 mm2) (figur 2 och figur 3) noterades 4 veckor efter ballong skada. Denna teknik leder till robust utveckling av aterosklerotiska plack som utvecklas över tid och undersöktes efter 2 till 4 veckor.
Figur 1: Schematisk bild som illustrerar tidslinjen av plack Progression efter ballong skada. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: ballong skada inducerad ateroskleros i kanin bäckenartären. Representativa bilder av Movat pentachrome (A-D), Hematoxylin-Eosin (E-H) och olja röd O (-L) färgade sektioner från un-skadade (A, E, jag), 2 veckor post ballong skada (B, F, J) (n = 5) och 4 veckor efter ballong skada (C, G, K) (n = 3) bäckenartären segment av aterogena diet utfodras NZW kaniner. Skalstapeln för D, H och L är 100 µm. skalstapeln för övriga bilder = 500 µm. Labelled i bild B är de lumen, intima, IEL (intern elastisk lamina) och ål (extern elastisk lamina). Media är området mellan IEL och ål. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: morfometriska analys av plack. Scatter plot visar intima/media tjockleksförhållande, plack området, lumen område och % olja röd O positiv område i bäckenartären sektioner från un-skadade kontroll, ballong skadade artär på 2 (n = 5) och 4 veckor (n = 3). Data visas som medelvärde ± SD. * p < 0,05 vs un-skadade artär, #p < 0,05 vs 4 veckor post ballong skada. N.D. betecknar inte upptäcks. Plack-området beräknas genom att subtrahera området lumen från området IEL medan olja röd O positiv området representerar % av den totala tvärsnittsdata fartyget vägg. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: immunhistokemisk analys av plack sammansättningen. Representativa bilder visar α-smooth muscle aktin (röd) (A-D) och makrofag (RAM 11) positiva celler (röd) (E-F). Rätt panelerna visar respektive sammanslagna bilder med Hoechst (blå) och elastin (grön). Skalstapeln = 100 µm. vänligen klicka här för att visa en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Kanin bäckenartären åderförkalkning modellen används ofta i aterosklerosforskning. Med detta protokoll utvecklat kaninerna snabbt mer allvarliga och avancerade plack jämfört med spontana lesioner utvecklade med endast kolesterol diet. Ännu viktigare, djur snabbt återhämta sig från operation.
Aterogenes viktigaste drivfjäder är mekaniska skador som orsakats av den ballongkateter som endotelet och distends fartyget vägg26. Detta förfarande inducerar en omformande svar som kännetecknas av inflammation med makrofag rekrytering och lipid ackumulering när i samband med hypercholestorolemic kost, vaskulär glatt muskulatur cellmigration och spridning, förbättrad matris syntes, och inrättandet av en invasiv neointima i en tid beroende mode15,16. Infoga en ballongkateter är den mest kritiska delen av förfarandet. Försiktighet måste iakttas för att undvika att kraftfullt infoga ballongen. Användning av perifer ytlig artär tillgång till den gemensamma bäckenartären förenklar tekniken. Bäckenartären kan också nås via halspulsådern cut-ner som tidigare beskrivits27,28. Men kräver att bedöma bäckenartären via halspulsådern en hög grad av kirurgisk expertis och ytterligare utrustning som t.ex en angiografi enhet. Det är också förknippat med förfarande-relaterade komplikationer som skada för halsvenen leder till dödlig blödning29. Användning av topikala vasodilaterande såsom papaverin hjälper till att vidga fartyget och minska motståndet i kärlväggen mot ballong kateter30. Inflationen pressar och ballong storlek måste övervägas noggrant eftersom dessa har en direkt koppling på neointimal bildandet31. Överdriven buk av ballongen till en högre grad än önskade nivåerna kan leda till ruptur av kärlväggen. Detta kan resultera i läckage av blod och robust tromb bildas både i lumen och den yttersta ytan26.
Djuren måste matas en lipid som rik kost för 1 eller 2 veckor före ballong skada att säkerställa att den endothelial skada uppstår i en hypercholesterolemic miljö. Det hjälper också djuren att anpassa sig till den nya kosten. Även om denna teknik inducerar avancerade plack hos kaniner, morfologi av plack skiljer sig från det observerade i människan. De spontana mänskliga lesionerna är begränsade till regionen sub-endothelial med en intakt inre elastiska lagrar32. Här studierna utförs tills 4 veckor visade ingen fibrotiska kärnor. Aterosklerotisk lesionen förblir liknar fatty streak med betydande makrofag infiltration.
Många små och stora djurmodeller har använts för att förstå aterogenes6. Ballong-skada kanin bäckenartären modellen har använts för att studera effekten av nya terapeutiska medel, romanen drog leveranssystem, plack evolution och imaging10,32,33. Enstaka eller flera ballong injurieshave utförts i bäckenartären34,35, halspulsådern36,37och aorta10,38. Fördelarna med denna metod är utvecklingen av stora plack volym och tjocklek jämfört med användning av halspulsådern. I tillägg, den kontralaterala iliaca kan användas som en kontroll och därför minskar variabilitet29. Den ballong skadan i kanin bäckenartärerna kan utföras enkelt och säkert med metoden som beskrivs här. Plack utvecklar i en tid beroende mode och är homogen i hela längden av artären. Andra aterosklerotiska kanin-modeller har också utvecklats såsom Watanabe ärftliga hyperlipidemi (WHHL) modellen, en genetiskt modifierade djur modell med låg densitet receptor lipoproteinlipasbrist. Ballong skada modellen kan också tillämpas på WHLL kanin att producera lesioner på en definierad plats.
Det finns skillnader mellan kanin bäckenartären och mänskliga koronar plaketter. Faktiskt, flera alternativa förfaranden har fastställts i ett försök att utveckla avancerade aterosklerotiska lesioner och för att skapa en modell av plack brister som observerats hos människor39. Till exempel förmåddes instabila plack genom att eliminera den kolesterol dieten efter 8 veckor hos kaniner som genomgick ballong skada16. Andra ändrade förfaranden använda farmakologiska utlösare som Russell's viper venom10 och efterföljande upprepade ballong skada40att utvärdera mekanismen av plack bristning, thrombogenesis och tromber tillväxt i aterosklerotiska fartyg. Russell's viper venom innehåller proteaser som aktiverar koagulationskaskaden vilket leder till Trombos. Upprepade ballong skada resultat till trombin generation av plack vävnaden faktor40. Det bör noteras att djurmodeller resultaten, inklusive kanin modellen perfekt inte kan extrapolera till människor. Dessa modeller kan dock vara ett användbart verktyg för att bedöma och jämföra effekten av nya farmakologiska interventioner. Försiktig extrapoleringar måste göras i förhållande till graden av hyperkolesterolemi och plack sammansättning att bredda kunskapen på etiologi, patofysiologi och behandling av mänsklig ateroskleros. Modellen presenteras här hjälper till att studera mekanismerna som är involverade i plack evolution och undersöka effekten av nya anti-aterosklerotisk behandlingar riktade mot plaketten stabiliserings/regression.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna förklarar inget konkurrerande finansiella intressen.
Acknowledgments
Detta arbete stöds av den schweiziska National Science Foundation Grant 150271.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| New Zealand White rabbits | Charles River laboratories,France | Cre:KBL(NZW) | |
| Cholesterol rich diet | Ssniff spezialdiäten | Ssniff EF K High Fat and Cholesterol | |
| Glass bead sterilizer-Germinator 500 | VWR, Leicestershire, UK | 101326-488 | |
| Fogarty balloon embolectomy catheters, 2 French | Edwards Lifesciences, Switzerland | 120602F | For single use only |
| Luer Lock Syringe | Becton, Dickinson and Company, USA | 309628 | |
| Thermopad Type 226 | Solis, Switzerland AG | 397387 | |
| Buprenorphine- Temgesic | Reckitt Benckiser AG, Switzerland | 7.68042E+12 | |
| Isoflurane | Piramal Critical Care, Inc, Bethlehem, PA 18017 | 2667-46-7 | |
| Anaesthesia machine-combi-vet Base Anesthesia System | Rothacher Medical GmbH, Switzerland | CV 30-301-A | |
| Cardell touch veterinary vital signs monitor | Midmark, Ohio, USA | 8013-001 | |
| Ophthalmic ointment-Humigel | Virbac, France | ||
| Animal hair clippers | Aesculap AG, Germany | GT420 | |
| Disinfectant-Betadine solution | MundipharmaMedicalCompany, Switzerland | 14671-1203 | |
| Dumont #7 Forceps | FST Germany | 11274-20 | |
| Medium and small microscissors | Medline International Switzerland Sàrl | UC4337 | |
| Microvascular clamps | FST, Germany | 18051-28 | |
| Papaverine | ESCA chemicals, Switzerland | RE 356 803 | |
| Vein Pick | Harvard Apparatus, Cambridge, UK | 72-4169 | For single use only |
| Saline | Laboratorium Dr. G. Bichsel AG, , Switzerland | 1330055 | |
| Polysorb 5-0 suture | Covidien AG, Switzerland | UL 202 | Monofilament |
| Sulfadoxine and Trimethoprim-Trimethazol | Werner Stricker AG, Switzerland | Swissmedic Nr. 50'361 | |
| Antiseptic- Octenisept | Schülke & Mayr AG, Switzerland | GTIN: 4032651214068 | |
| Phosphate Buffered Saline | Roth | 1058.1 | |
| Isobutanol-2-Methylbutane | Sigma-Aldrich, Switzerland | M32631-1L | |
| Optimum Cutting Temperature compound-Tissue-Tek | VWR Chemicals, Belgium | 25608-930 | |
| Cryostat | Leica, Glattbrugg, Switzerland | Leica CM1860 UV | |
| Glass slide- Superfrost Plus | Thermo Scientific | 4951PLUS4 | |
| Mayer's Haematoxylin | Sigma-Aldrich, Switzerland | MHS32-1L | |
| Eosin 0.5% aq. | Sigma-Aldrich, Switzerland | HT110232-1L | |
| Oil Red O | Sigma-Aldrich, Switzerland | O0625-25G | |
| α-smooth muscle actin antibody | Abcam, UK. | ab7817 | |
| Macrophage Clone RAM11 antibody | DAKO, Switzerland | M063301 | |
| Hoechst | Abcam, UK. | ab145596 | |
| Goat polyclonal Secondary Antibody (Chromeo 546) | Abcam, UK. | ab60316 | |
| Alexa Fluor 488/547 | Abcam, UK. | ||
| Glycergel Mounting Medium, Aqueous | DAKO, Switzerland | C056330 | |
| Hematoxylin for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | H3136-25G | |
| Ferric chloride for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 157740-100G | |
| Iodine for Movat staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 207772-100G | |
| Potassium iodide for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 60400-100G-F | |
| Alcian blue for Movat staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | A5268-10G | |
| Strong Ammonia for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 320145-500ML | |
| Brilliant crocein MOO for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 210757-50G | |
| Acid Fuchsin for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | F8129-50G | |
| Sodium Thiosulfate for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 72049-250G | |
| Phosphotungstic acid for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 79690-100G | |
| Crocin for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 17304-5G | |
| EUKITT for Movat pentachrome staining | Sigma-Aldrich, Switzerland | 03989-100ML |
References
- Mozaffarian, D., et al. Heart disease and stroke statistics--2015 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 131, e29-e322 (2015).
- Boone, L. R., Brooks, P. A., Niesen, M. I., Ness, G. C. Mechanism of resistance to dietary cholesterol. J Lipids. 2011, 101242 (2011).
- Kapourchali, F. R., et al. Animal models of atherosclerosis. World J Clin Cases. 2, 126-132 (2014).
- Carter, C. P., Howles, P. N., Hui, D. Y. Genetic variation in cholesterol absorption efficiency among inbred strains of mice. J Nutr. 127, 1344-1348 (1997).
- Kolodgie, F. D., et al. Hypercholesterolemia in the rabbit induced by feeding graded amounts of low-level cholesterol. Methodological considerations regarding individual variability in response to dietary cholesterol and development of lesion type. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 16, 1454-1464 (1996).
- Singh, V., Tiwari, R. L., Dikshit, M., Barthwal, M. K. Models to study atherosclerosis: a mechanistic insight. Curr Vasc Pharmacol. 7, 75-109 (2009).
- Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. Experimental atherosclerosis in rabbits. Arq Bras Cardiol. 95, 272-278 (2010).
- Baumgartner, H. R., Studer, A. [Effects of vascular catheterization in normo- and hypercholesteremic rabbits]. Pathol Microbiol (Basel). 29, 393-405 (1966).
- Tanaka, H., et al. Sustained activation of vascular cells and leukocytes in the rabbit aorta after balloon injury. Circulation. 88, 1788-1803 (1993).
- Phinikaridou, A., Hallock, K. J., Qiao, Y., Hamilton, J. A. A robust rabbit model of human atherosclerosis and atherothrombosis. J Lipid Res. 50, 787-797 (2009).
- Nakazawa, G., et al. Drug-eluting stent safety: findings from preclinical studies. Expert Rev Cardiovasc Ther. 6, 1379-1391 (2008).
- Aikawa, M., et al. Lipid lowering by diet reduces matrix metalloproteinase activity and increases collagen content of rabbit atheroma: a potential mechanism of lesion stabilization. Circulation. 97, 2433-2444 (1998).
- Jeanpierre, E., et al. Dietary lipid lowering modifies plaque phenotype in rabbit atheroma after angioplasty: a potential role of tissue factor. Circulation. 108, 1740-1745 (2003).
- Durand, E., et al. Magnetic resonance imaging of ruptured plaques in the rabbit with ultrasmall superparamagnetic particles of iron oxide. J Vasc Res. 44, 119-128 (2007).
- Stadius, M. L., et al. Time course and cellular characteristics of the iliac artery response to acute balloon injury. An angiographic, morphometric, and immunocytochemical analysis in the cholesterol-fed New Zealand white rabbit. Arterioscler Thromb. 12, 1267-1273 (1992).
- Khanna, V., et al. Cholesterol diet withdrawal leads to an initial plaque instability and subsequent regression of accelerated iliac artery atherosclerosis in rabbits. PLoS One. 8, e77037 (2013).
- Zou, J., et al. Effect of resveratrol on intimal hyperplasia after endothelial denudation in an experimental rabbit model. Life Sci. 68, 153-163 (2000).
- Li, M., Zhang, Y., Ren, H., Zhang, Y., Zhu, X. Effect of clopidogrel on the inflammatory progression of early atherosclerosis in rabbits model. Atherosclerosis. 194, 348-356 (2007).
- Nakazawa, G., et al. Evaluation of polymer-based comparator drug-eluting stents using a rabbit model of iliac artery atherosclerosis. Circ Cardiovasc Interv. 4, 38-46 (2011).
- Van Dyck, C. J., et al. Resolute and Xience V polymer-based drug-eluting stents compared in an atherosclerotic rabbit double injury model. Catheter Cardiovasc Interv. 81, E259-E268 (2013).
- Abran, M., et al. Validating a bimodal intravascular ultrasound (IVUS) and near-infrared fluorescence (NIRF) catheter for atherosclerotic plaque detection in rabbits. Biomed Opt Express. 6, 3989-3999 (2015).
- Kanamasa, K., et al. Recombinant tissue plasminogen activator prevents intimal hyperplasia after balloon angioplasty in hypercholesterolemic rabbits. Jpn Circ J. 60, 889-894 (1996).
- Pai, M., et al. Inhibition of in-stent restenosis in rabbit iliac arteries with photodynamic therapy. Eur J Vasc Endovasc Surg. 30, 573-581 (2005).
- Fischer, A. H., Jacobson, K. A., Rose, J., Zeller, R. Cryosectioning tissues. CSH Protoc. 2008, (2008).
- Chaytor, A. T., Bakker, L. M., Edwards, D. H., Griffith, T. M. Connexin-mimetic peptides dissociate electrotonic EDHF-type signalling via myoendothelial and smooth muscle gap junctions in the rabbit iliac artery. Br J Pharmacol. 144, 108-114 (2005).
- Zhang, W., Trebak, M. Vascular balloon injury and intraluminal administration in rat carotid artery. J Vis Exp. (94), (2014).
- Maillard, L., et al. Effect of percutaneous adenovirus-mediated Gax gene delivery to the arterial wall in double-injured atheromatous stented rabbit iliac arteries. Gene Ther. 7, 1353-1361 (2000).
- Sharif, F., et al. Gene-eluting stents: adenovirus-mediated delivery of eNOS to the blood vessel wall accelerates re-endothelialization and inhibits restenosis. Mol Ther. 16, 1674-1680 (2008).
- Lee, J. M., et al. Development of a rabbit model for a preclinical comparison of coronary stent types in-vivo. Korean Circ J. 43, 713-722 (2013).
- Tulis, D. A. Rat carotid artery balloon injury model. Methods Mol Med. 139, 1-30 (2007).
- Asada, Y., et al. Effects of inflation pressure of balloon catheter on vascular injuries and subsequent development of intimal hyperplasia in rabbit aorta. Atherosclerosis. 121, 45-53 (1996).
- Dornas, W. C., Oliveira, T. T., Augusto, L. E., Nagem, T. J. Experimental atherosclerosis in rabbits. Arq Bras Cardiol. 95, 272-278 (2010).
- Waksman, R., et al. PhotoPoint photodynamic therapy promotes stabilization of atherosclerotic plaques and inhibits plaque progression. J Am Coll Cardiol. 52, 1024-1032 (2008).
- Fernandez-Parra, R., et al. Pharmacokinetic Study of Paclitaxel Concentration after Drug-Eluting Balloon Angioplasty in the Iliac Artery of Healthy and Atherosclerotic Rabbit Models. J Vasc Interv Radiol. 26, 1380-1387 (2015).
- Dussault, S., Dhahri, W., Desjarlais, M., Mathieu, R., Rivard, A. Elsibucol inhibits atherosclerosis following arterial injury: multifunctional effects on cholesterol levels, oxidative stress and inflammation. Atherosclerosis. 237, 194-199 (2014).
- Manderson, J. A., Mosse, P. R., Safstrom, J. A., Young, S. B., Campbell, G. R. Balloon catheter injury to rabbit carotid artery. I. Changes in smooth muscle phenotype. Arteriosclerosis. 9, 289-298 (1989).
- Miyake, T., et al. Prevention of neointimal formation after angioplasty using nuclear factor-kappaB decoy oligodeoxynucleotide-coated balloon catheter in rabbit model. Circ Cardiovasc Interv. 7, 787-796 (2014).
- Fulcher, J., Patel, S., Nicholls, S. J., Bao, S., Celermajer, D. Optical coherence tomography for serial in vivo imaging of aortic plaque in the rabbit: a preliminary experience. Open Heart. 2, e000314 (2015).
- Abela, O. G., et al. Plaque Rupture and Thrombosis: the Value of the Atherosclerotic Rabbit Model in Defining the Mechanism. Curr Atheroscler Rep. 18, 29 (2016).
- Yamashita, A., Asada, Y. A rabbit model of thrombosis on atherosclerotic lesions. J Biomed Biotechnol. 2011, 424929 (2011).
