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Neuroscience

नवजात Hypoxic के एक माउस मॉडल में Neurobehavioral आकलन-कोरोनरी मस्तिष्क चोट

Published: November 24, 2017 doi: 10.3791/55838
Automatic Translation
1,2, 1, 1,2, 1,2, 1,2, 1,3, 1,5, 1,2,4,5
1Department and Research Institute of Rehabilitation Medicine, Yonsei University College of Medicine, 2Brain Korea 21 PLUS Project for Medical Science, Yonsei University, 3Department of Rehabilitation Medicine, Yonsei University Wonju College of Medicine, 4Rehabilitation Institute of Neuromuscular Disease, Yonsei University College of Medicine, 5Graduate Program of NanoScience and Technology, Yonsei University

Summary

हम प्रसव दिवस 7-10 सीडी-1 माउस पिल्ले पर एकतरफा मन्या धमनी रोड़ा प्रदर्शन एक नवजात hypoxic-कोरोनरी (हाय) मॉडल बनाने के लिए और हाय मस्तिष्क चोट के प्रभाव की जांच की । हमने गैर-संचालित सामान्य चूहों की तुलना में इन चूहों में neurobehavioral कार्यों का अध्ययन किया.

Abstract

हम एक नवजात hypoxic-कोरोनरी (हाय) मॉडल बनाने के लिए सीडी-1 चूहों पर एकतरफा मन्या धमनी रोड़ा प्रदर्शन किया और गैर-संचालित की तुलना में इन चूहों में neurobehavioral कार्यों का अध्ययन करके नवजात हाय मस्तिष्क चोट के प्रभाव की जांच की (यानी, सामांय) चूहे । अध्ययन के दौरान, चावल Vannucci की विधि प्रसव दिन 7-10 (P7-10) चूहों में नवजात हाय मस्तिष्क क्षति प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था । हाय आपरेशन द्वारा पिल्ले पर प्रदर्शन किया गया था एकपक्षीय मन्या धमनी बंधाव और हाइपोक्सिया करने के लिए जोखिम (8% हे2 और ९२% N2 ९० मिनट के लिए). एक सप्ताह के आपरेशन के बाद, क्षतिग्रस्त दिमाग अर्द्ध पारदर्शी खोपड़ी के माध्यम से नग्न आंखों के साथ मूल्यांकन किया गया था और उपसमूह में अनुपस्थिति के आधार पर वर्गीकृत किया गया ("कोई cortical चोट" समूह) या उपस्थिति ("cortical चोट" समूह) cortical चोट के, जैसे दाएं गोलार्द्ध में एक घाव । 6 सप्ताह पर, निम्नलिखित neurobehavioral परीक्षण संज्ञानात्मक और मोटर कार्यों का मूल्यांकन करने के लिए प्रदर्शन किया गया: निष्क्रिय परिहार कार्य (पैट), सीढ़ी चलने परीक्षण, और पकड़ शक्ति परीक्षण. ये व्यवहार परीक्षण नवजात हाय मस्तिष्क चोट के प्रभाव का निर्धारण करने में सहायक होते हैं और neurodegenerative रोगों के अन्य माउस मॉडलों में उपयोग किया जाता है । इस अध्ययन में, नवजात हाय मस्तिष्क चोट चूहों मोटर घाटे है कि सही गोलार्द्ध क्षति से संबंधित दिखाया । व्यवहार परीक्षण के परिणाम इस तरह के सेरेब्रल पाल्सी या नवजात स्ट्रोक रोगियों के रूप में मानव नवजात हाय रोगियों, में मनाया घाटे के लिए प्रासंगिक हैं । इस अध्ययन में नवजात हाय ब्रेन इंजरी के एक माउस मॉडल की स्थापना की और गैर संचालित चूहों की तुलना में मोटर घाटे और संज्ञानात्मक हानि के विभिन्न डिग्री दिखाया गया था । यह काम हाय माउस मॉडल पर बुनियादी जानकारी प्रदान करता है । एमआरआई छवियों अलग phenotypes, मोटर और संज्ञानात्मक परीक्षणों से मस्तिष्क क्षति की गंभीरता के अनुसार अलग प्रदर्शन ।

Introduction

नवजात हाय मस्तिष्क चोट प्रारंभिक बचपन के दौरान होता है (१,००० बच्चों के अनुसार लगभग दो रोगियों)1,2,3,4,5। नवजात हाय मस्तिष्क चोट के बारे में अध्ययन महत्वपूर्ण हैं, और एक स्थापित नवजात हाय मस्तिष्क चोट माउस मॉडल हाय मस्तिष्क चोट पर vivo नैदानिक अनुसंधान में सुविधा कर सकते हैं का उपयोग कर ।

पारंपरिक हाय मॉडल वयस्क चूहों पर इस्तेमाल कर रहे हैं6. neonate मॉडल के लिए, चावल-Vannucci विधि सामांयतः P7 चूहों7,8पर प्रयोग किया जाता है । हालांकि, चूहों और चूहों के बाद से थोड़ा अलग हैं9,10, भले ही वे दोनों कुतर रहे हैं, हम P7-10 में सीडी-1 पिल्ले पर एक संशोधित चावल-Vannucci विधि प्रदर्शन किया है कि पता चला कि P7-10 की विशेषता अवधि है अपरिपक्व oligodendrocytes, मानव पद P011,12के लिए इसी । नवजात हाय माउस मॉडल एकपक्षीय मन्या धमनी के दोनों बंधाव के माध्यम से स्थापित किया जाता है और P7 में 8% ऑक्सीजन के साथ हाइपोक्सिया करने के लिए चूहों के जोखिम-10 पिल्ले.

प्रक्रिया के अधीन चूहों ने दाएँ गोलार्द्ध के posterolateral क्षेत्र में मस्तिष्क के घावों के विभिन्न अंश दिखाई दिए. संज्ञानात्मक और मोटर घाटे की पहचान करने के लिए, neurobehavioral के आधार पर आकलन पैट, सीढ़ी चलने परीक्षण, और पकड़ शक्ति परीक्षण किया गया । गैर-संचालित (यानी, सामान्य) और हाय चूहों के बीच मतभेद का विश्लेषण किया गया. यह काम हाय माउस मॉडल पर बुनियादी जानकारी प्रस्तुत करता है । एमआरआई छवियों अलग phenotypes प्रदर्शन, मस्तिष्क क्षति की गंभीरता के अनुसार मोटर और संज्ञानात्मक परीक्षणों का उपयोग कर अलग ।

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Protocol

सभी जानवरों के एक मानक पिंजरे में रखे गए थे (27 × २२.५ × 14 cm3) एक आकलन और प्रयोगशाला पशु देखभाल के प्रत्यायन के लिए एसोसिएशन द्वारा मांयता प्राप्त सुविधा में (AAALAC) और दिया भोजन और पानी विज्ञापन libitum बारी के तहत 12-h प्रकाश/ चक्र. लेखकों ने पशु संरक्षण नियमों का पालन किया, और प्रायोगिक प्रक्रियाओं को संस्थागत पशु देखभाल और Yonsei यूनिवर्सिटी कॉलेज ऑफ मेडिसिन (IACUC No. 2010-0252; 2013-0220) की उपयोग समिति ने अनुमोदित कर दिया ।

1. नवजात हाय ब्रेन इंजरी के माउस मॉडल

  1. isoflurane के साथ पिल्लर को Anesthetize ।
    1. पिल्ले प्लेस (5 से कम) एक anesthetizing बॉक्स में और ढक्कन बंद ।
    2. लगभग 15 मिनट के लिए anesthetizing सिस्टम चालू करें; गैस और एक तालिका शीर्ष संज्ञाहरण मशीन का उपयोग कर isoflurane समायोजित करें । ऑक्सीजन flowmeter समायोजित करने के लिए १.५ L/न्यूनतम isoflurane vaporizer को समायोजित करने के लिए 3-5% संज्ञाहरण के प्रेरण के लिए.
    3. 15 मिनट के बाद, संज्ञाहरण के रखरखाव के लिए 1-2% करने के लिए isoflurane vaporizer समायोजित करें ।
  2. एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत एक पूरी तरह से anesthetized पिल्ला करना (पेट शोधकर्ता का सामना करना पड़) और यह टेप के साथ सुरक्षित ।
  3. निष्फल कैंची का उपयोग कर गर्दन में ~ ०.७ mm चीरा बनाओ ।
  4. ध्यान से वसा के ऊतकों को दूर निष्फल संदंश का उपयोग कर और एकतरफा सही मन्या धमनी का पर्दाफाश.
  5. एक 5-0 अवशोषित सीवन के साथ एकतरफा सही मन्या धमनी Ligate.
  6. सीवन 5-0 सीवन के साथ गर्दन में चीरा ।
  7. वसूली के लिए 1 एच के लिए एक ३७ ° c गर्म hypoxic चैंबर में प्रत्येक पिल्ला प्लेस । चैंबर का ढक्कन बंद न करें ।
  8. 1 ज सर्जरी के बाद, जब पिल्ले पूरी तरह से जाग रहे हैं, हाइपोक्सिया चैंबर ढक्कन बंद और गैस के स्तर में कमी hypoxic स्थितियों (8% हे2 और ९२% एन2) स्थापित करने के लिए ।
  9. हाइपोक्सिया के ९० मिनट के बाद, उनके पिंजरों को पिल्ले वापस ।
  10. एक सप्ताह के बाद हाय ब्रेन इंजरी, दोहराएँ चरण 1.
    1. संज्ञाहरण के बाद, निष्फल कैंची और संदंश के साथ खोपड़ी में एक चीरा बनाने के लिए सही गोलार्द्ध के posterolateral क्षेत्र में मस्तिष्क घावों की पहचान ।
      नोट: यह उपचार पिल्ले में हाइपोक्सिया लाती है । उपस्थिति और सभी चूहों में मस्तिष्क की चोट की सीमा नेत्रहीन अर्द्ध पारदर्शी खोपड़ी के माध्यम से नग्न आंखों के साथ मूल्यांकन किया है । के रूप में आकार या disease की मात्रा (यानी, मस्तिष्क घाव) द्वारा निर्धारित, पिल्ले समूहों में वर्गीकृत कर रहे हैं । यदि कोई दृश्यमान cortical चोट है, माउस "नहीं cortical चोट" समूह में वर्गीकृत किया गया है । यदि वहां एक दिखाई cortical चोट (यानी, दाहिने गोलार्द्ध में एक घाव) है, माउस "cortical चोट" समूह में वर्गीकृत है । के बाद से समूहों में चूहों का वर्गीकरण आपरेशन के बाद एक सप्ताह किया जाता है, समूहings संशोधित किया जा सकता है जब मस्तिष्क के नमूनों की morphologies स्पष्ट रूप से बलिदान के समय में परिभाषित कर रहे हैं1,2,3, 4.

Figure 1
चित्रा 1: नवजात चूहों में हाय मस्तिष्क चोट मॉडलिंग.
(क) एक सात दिन पुराने माउस पिल्ला सर्जरी से गुजरा, और एकतरफा सही मन्या धमनी ligated था । (ख) पिल्ले को 8% हे2 और ९२% N2के साथ ९० मिनट के लिए एक hypoxic चैंबर में रखा गया । (सी, डी, और ई) नवजात हाय चोट के साथ दिमाग नुकसान की विभिंन गंभीरता को दिखाया और नुकसान की डिग्री के आधार पर वर्गीकृत किया गया । सप्ताह में 14, दिमाग प्राप्त कर रहे थे, और घावों की कल्पना कर रहे थे । (ग) एक "कोई cortical चोट" के रूप में वर्गीकृत मस्तिष्क की छवि । दोनों (घ) और (ङ) "cortical चोट" समूह में वर्गीकृत किया गया । (F, G, और H) प्रतिनिधि एमआरआई (सी), (घ), और (ई) चूहों, क्रमशः । (च) हिप्पोकैंपस में होने वाले नुकसान को पीले तीर से दर्शाया गया है, और दाहिने गोलार्द्ध में घावों को पीले तीरों (G and H) के साथ भी दर्शाया गया है । स्केल सलाखों = 1 मिमी इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

2. नवजात व्यवहार परीक्षण

नोट: यहां, व्यवहार परीक्षण 6 उंर के सप्ताह में प्रदर्शन किया गया ।

  1. निष्क्रिय परिहार कार्य ।
    नोट: सीखने और एक aversive उत्तेजना के परिहार के आधार पर स्मृति समारोह का मूल्यांकन करने के लिए, एक दो डिब्बे के माध्यम से कदमपैट13,14,15,16आयोजित किया जाना चाहिए ।
    1. एक पॅट उपकरण के Plexiglas शटल बॉक्स (४१.५ × 21 × ३५ सेमी3) के उज्ज्वल डिब्बे में एक चूहा प्लेस ।
    2. 30 एस के बाद, गिलोटिन दरवाजा खुला और माउस के लिए विलंबता समय रिकॉर्ड करने के लिए अंधेरे डिब्बे में स्थानांतरित करने के लिए (अप करने के लिए ३०० s).
    3. गिलोटिन दरवाज़ा बंद करें जब माउस के सभी चार अंग पूरी तरह अंधेरे डिब्बे के अंदर हों ।
    4. 2 एस के लिए बिजली के पैर सदमे (०.५ मा) प्रशासन और उसके पिंजरे में माउस को वापस ।
    5. बिजली के पैर के झटके के बाद ब्राइट कम्पार्टमेंट 24 एच में माउस को बदलें ।
    6. गिलोटिन दरवाजा खुला 10 एस के बाद माउस को पूरी तरह से चमकीले डिब्बे में रखा है, और माउस के लिए विलंबता समय रिकॉर्ड अंधेरे डिब्बे में स्थानांतरित करने के लिए (अप करने के लिए ३०० s) ।
  2. सीढ़ी चलना परीक्षण ।
    नोट: सीढ़ी चलने का कार्य कुशल चलने17,18के गुणात्मक और मात्रात्मक विश्लेषण के संयोजन के द्वारा मोटर समारोह के सूक्ष्म गड़बड़ियों के बीच भेदभाव के लिए अनुमति देता है ।
    1. वीडियो कैमरा चालू करें.
    2. सीढ़ी के शुरू पैनल पर एक माउस प्लेस और तुरंत रिकॉर्डिंग शुरू करते हैं ।
    3. वीडियो रिकॉर्ड, माउस अंगों पर ध्यान केंद्रित ।
    4. जब माउस सीढ़ी के अंतिम पैनल छू रिकॉर्डिंग बंद करो । पीछे की और आगे की यात्रा को चार बार दोहराएं ।
    5. वीडियो रिकॉर्डिंग का विश्लेषण करें और मैन्युअल रूप से प्रत्येक forelimb की स्लिप्स की संख्या निम्नानुसार गणना करें:
      1. एक धीमी गति (0.1 x) पर एक कंप्यूटर पर वीडियो की रिकॉर्डिंग खेलते हैं और मैन्युअल रूप से कदम गिनती.
  3. पकड़ शक्ति परीक्षण ।
    नोट: पकड़ शक्ति परीक्षण एक पकड़ शक्ति मीटर है, जो एक धक्का-पुल तनाव गेज भी शामिल है का उपयोग किया जाता है ।
    1. एक एक्रिलिक पैनल पर पकड़ शक्ति उपकरण फिक्स ।
    2. एक्रिलिक पैनल पर एक माउस प्लेस और इसकी पूंछ पकड़ो ।
      1. हाथ पूंछ पकड़े ताकि माउस तक पहुंच सकते है और उपकरण के धातु तार पकड़ ले जाएं ।
    3. एकाधिक परीक्षणों की अनुमति दें जब तक माउस पकड़ता धातु तार का एक त्रिकोणीय टुकड़ा (व्यास में 2 मिमी); पीक बल स्वचालित रूप से उपकरण द्वारा ग्राम में पंजीकृत है ।
      नोट: विश्लेषण के लिए तीन परीक्षणों के मतलब पीक बल का प्रयोग करें19,20,21।

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Representative Results

सभी डेटा मतलब (SEM) के अर्थ ± मानक त्रुटि के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । दो समूहों के बीच चर की तुलना एक स्वतंत्र या SPSS सांख्यिकी सॉफ्टवेयर पर युग्मित टीपरीक्षण का उपयोग कर आयोजित किया गया था । p-मान < 0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना गया था ।

नवजात हाय चोट के साथ दिमाग नुकसान की अलग गंभीरता से पता चला और तदनुसार वर्गीकृत (चित्रा 1C-ई) थे । दिमाग 14 सप्ताह में प्राप्त किया गया, और घावों visualized थे । चित्रा 1C एक "कोई cortical चोट" मस्तिष्क के रूप में वर्गीकृत मस्तिष्क से पता चलता है, चित्रा 1 डी एक हल्के चोट के रूप में वर्गीकृत मस्तिष्क से पता चलता है, और आंकड़ा 1E एक गंभीर रूप से क्षतिग्रस्त मस्तिष्क से पता चलता है । दोनों (घ) हल्के और (ई) गंभीर चोटों "cortical चोट" समूह में वर्गीकृत किया गया । हाय आपरेशन के बाद, 13 सप्ताह पुराने चूहों एमआरआई का उपयोग कर छवि थे, और परिणाम (चित्रा 1F-एच) (सी) के प्रतिनिधि छवियों हैं, (डी), और (ई) चोटों, क्रमशः. हालांकि मस्तिष्क आकृति विज्ञान पर कोई महत्वपूर्ण घाव था, एमआरआई छवि हिप्पोकैम्पस चोट (चित्रा 1F) दिखाया. हिप्पोकैंपस को नुकसान (चित्रा 1F, एक पीले तीर के साथ संकेत दिया) मामूली घायल मस्तिष्क में थोड़ा स्पष्ट है । एक गंभीर रूप से क्षतिग्रस्त मस्तिष्क में, माउस सही गोलार्द्ध के अधिकांश खो दिया (चित्रा 1G और एच, एक पीले तीर के साथ संकेत) ।

हाय चोट के साथ दिमाग के बाद से हिप्पोकैम्पस चोट (चित्रा 1F-एच) दिखाया, हाय चोट के साथ चूहों सामान्य चूहों की तुलना में स्मृति घाटे का प्रदर्शन किया. पैट प्रदर्शन हिप्पोकैम्पस नुकसान13,15,16,19के लिए बारीकी से संबंधित है । चित्रा 2 से पता चलता है कि हाय चोट के साथ चूहों सामान्य चूहों की तुलना में अधिक संज्ञानात्मक घाटे था13, के रूप में पैट में मूल्यांकन (सामान्य n = 10; HI n = 9). सामांय चूहों में आधारभूत और 24-h स्मृति परीक्षण के बीच सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर देखा गया, जैसा कि चित्र 2a (*p = ०.००३ एक युग्मित t-परीक्षण के आधार पर) में दिखाया गया है । चित्रा बी 1 हाय चोट चूहों सामान्य चूहों की तुलना में संज्ञानात्मक समारोह में परिवर्तन से पता चलता है (डेल्टा (Δ) बेसलाइन और 24 एच परीक्षण के बीच अंतर है)13.

केवल दाएँ गोलार्द्ध क्षतिग्रस्त था, क्योंकि नवजात हाय मस्तिष्क चोट चूहों hemiplegic मोटर कार्यों दिखाया. प्रत्येक forelimb द्वारा उठाए गए कदमों की कुल संख्या के सापेक्ष सीढ़ी के अनुप्रस्थ rungs पर स्लिप्स के प्रतिशत में अंतर नवजात हाय मस्तिष्क चोट चूहों17,19के साथ सामान्य चूहों की तुलना करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. चित्रा 3 से पता चलता है कि हाय मस्तिष्क चोट चूहों में contralateral forelimb की पर्ची दर है कि सामांय चूहों में से काफी अधिक था (सामांय n = 19; HI n = 18; *p = ०.०१० एक स्वतंत्र टी-परीक्षण के आधार पर)22, लेकिन ipsilateral forelimb में कोई अंतर नहीं देखा गया था(p = ०.७९८ एक स्वतंत्र टी-टेस्ट के आधार पर).

इसके अलावा, के बाद से पकड़ ताकत मस्तिष्क में मोटर प्रांतस्था शामिल है, सामांय और cortical चोट समूहों पकड़ सत्ता में मतभेद दिखाया । हालांकि पकड़ शक्ति परीक्षण से परिणाम सामांय और कोई cortical चोट चूहों के बीच कोई अंतर नहीं दिखाया (चित्रा 4a; सामांय n = 4; कोई cortical चोट n = 12), ग्राफ पता चलता है कि contralateral forelimb की पकड़ शक्ति काफी था सामान्य चूहों की तुलना में cortical चोट चूहों में कमजोर (चित्रा 4B; सामांय n = 4; cortical चोट n = ३६; *p = ०.०३६ एक स्वतंत्र टी-टेस्टकेआधार पर)21,22,23.

Figure 2
चित्रा 2: नवजात हाय मस्तिष्क चोट और सामान्य चूहों में पैट ।
(एक) उज्ज्वल डिब्बे में विलंबता समय मापा गया था और नवजात हाय मस्तिष्क चोट और सामान्य चूहों के बीच की तुलना में (एन = 9 और एन = 10, क्रमशः). (ख) इलेक्ट्रॉनिक सदमे के क्षण में माप आधारभूत माना जाता था, और लंबे समय तक स्मृति बिजली के झटके के बाद 24 घंटे का मूल्यांकन किया गया था । डेल्टा (Δ) 24-h लेटेंसी में 24 h और आधार रेखा पर मूल्यांकित फ़ंक्शन के बीच अंतर था । *p< 0.05; सभी डेटा अर्थ ± SEM के रूप में व्यक्त कर रहे हैं. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3: सीढ़ी चलना परीक्षण में Forelimb पर्ची दर ।
contralateral और ipsilateral forelimb स्लिप की दरों सामांय और हाय ब्रेन चोट चूहों के बीच मूल्यांकन किया गया (n = 19 और n = 18, क्रमशः) । *p< 0.05; सभी डेटा अर्थ ± SEM के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

Figure 4
चित्रा 4: नवजात हाय मस्तिष्क चोट और सामान्य चूहों में पकड़ शक्ति परीक्षण ।
contralateral forelimb की पकड़ शक्ति और मूल्यांकन किया गया था के बीच तुलना (A) सामांय, कोई cortical चोट और (B) चोट चूहों cortical (n = 4, n = 12, n = ३६) । * p< 0.05; सभी डेटा अर्थ ± SEM के रूप में व्यक्त कर रहे हैं । इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

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Discussion

इस अध्ययन में, हम एक नवजात P7-10 सीडी-1 माउस में हाय मस्तिष्क चोट प्रेरित और प्रासंगिक संज्ञानात्मक और मोटर घाटे के साथ मस्तिष्क घावों की पहचान की । इस प्रक्रिया के दौरान, एकतरफा सही मन्या धमनी के रोड़ा महत्वपूर्ण था. इस चरण में धमनी क्षतिग्रस्त और बेहाल हो सकती थी । सबसे पिल्ले जो एक धमनी आंसू का अनुभव मर गया । इसके विपरीत, अगर शोधकर्ताओं ने एकतरफा सही मन्या धमनी के बजाय एक और खून की नस ligated, पिल्ला के मस्तिष्क ही हल्का क्षतिग्रस्त हो गया था, और कोई महत्वपूर्ण phenotype24देखा जा सकता है ।

इस अध्ययन में, चूहों और घावों की मात्रा में बदलाव के कारण, दिमाग कई समूहों में वर्गीकृत किया गया (चित्रा 1C-एच). हल्के से घायल दिमाग के साथ कई चूहों केवल हिप्पोकैंपस में और नहीं cortical क्षेत्र (चित्रा 1F)13में नुकसान था । इसके विपरीत, गंभीर रूप से क्षतिग्रस्त दिमाग के साथ कई चूहों सही गोलार्द्ध के अधिकांश खो दिया है, और cortices बुरी तरह क्षतिग्रस्त थे (चित्रा 1G और एच). इसलिए, शोधकर्ताओं प्रक्रिया19,25के बाद एक सप्ताह के घावों के आकार की पहचान करनी चाहिए । के बाद से दिमाग एमआरआई स्कैन का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया, मात्रा और एक घाव के आकार का निर्धारण अधिक विश्वसनीय था । इसलिए, हम अनुशंसा करते है कि शोधकर्ताओं ने एमआरआई का उपयोग दिमाग का मूल्यांकन, हालांकि नग्न आंखों के साथ दृश्य निरीक्षण भी संभव है ।

सेरेब्रल पाल्सी आमतौर पर प्रारंभिक बचपन के दौरान होता है, १,००० बच्चों के प्रति लगभग दो रोगियों की एक घटना दर के साथ5. नवजात हाय माउस मॉडल के बाद से मस्तिष्क पक्षाघात या नवजात स्ट्रोक के एक प्रतिनिधि मॉडल हो सकता है4,11,26, इस अध्ययन से आधारभूत जानकारी सेरेब्रल पाल्सी पर नैदानिक अनुसंधान में इस्तेमाल किया जा सकता है या नवजात स्ट्रोक ।

Neurobehavioral आकलन संज्ञानात्मक और मोटर घाटे की phenotypes की पहचान करने के लिए13उपयोगी होते हैं । इस अध्ययन में शुरू की neurobehavioral आकलन भी अनुकूलनीय है और आमतौर पर इस तरह के हटिंगटन के रूप में अन्य neurodegenerative रोगों, के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं, पार्किंसंस, और इतने पर. शोधकर्ताओं को पता होना चाहिए कि, पैट के दौरान, विषयों एक बिजली के झटके प्राप्त करते हैं । इसलिए, पैट पिछले प्रदर्शन किया जाना चाहिए, तो बिजली के झटके अंय व्यवहार आकलन को प्रभावित नहीं करता है ।

आगे के अध्ययन के लिए शोधकर्ताओं को हाय ग्रुप की तुलना में अन्तर्वासना संचालित समूह का अध्ययन करने की जरूरत है । एक विशिष्ट नियंत्रण समूह के लिए, शोधकर्ताओं गर्दन पर एक चीरा बनाने के लिए और किसी भी धमनी बंधाव बिना चीरा बंद कर सकते हैं । हाय आपरेशन नकल करने के लिए, इन पिल्ले hypoxic चैंबर में डाल दिया जाना चाहिए, लेकिन हाइपोक्सिया के बिना, एक उच्च समूह के रूप में समय की एक ही राशि के लिए अपने पिंजरों को लौट जाने से पहले ।

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Disclosures

लेखकों में कोई प्रतिस्पर्धी रुचि नहीं है ।

Acknowledgments

इस अध्ययन के राष्ट्रीय अनुसंधान फाउंडेशन (एनआरएफ-2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), विज्ञान और प्रौद्योगिकी, कोरिया गणराज्य, कोरियाई स्वास्थ्य प्रौद्योगिकी अनुसंधान एवं विकास परियोजना (HI16C1012), स्वास्थ्य मंत्रालय और के मंत्रालय से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था कल्याण, कोरिया गणराज्य, और "Dongwha" Yonsei यूनिवर्सिटी कॉलेज ऑफ मेडिसिन (6-2016-0126) के संकाय अनुसंधान सहायता कार्यक्रम ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Hypoxic chamber Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder
PAT apparatus Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder
The ladder rung walking Jeung Do Bio & Plant Co Experimental Builder
SDI Grip Strength System San Diego Instruments Inc.
Grip-Strength Meter Ugo Basile 47200
Harvard Apparatus Fluovac anesthetizing system  Harvard Apparatus
Anesthetizing box acryl box
I-Fran Liquid (Isofluorane) Hana Pharm. Co., Ltd. General Anesthetics ( isoflurane 100ml)
CD-1 mice Orient Co., Ltd.
Blue Nylon Mono Non-Absorbbable suture 5-0 50cm Ailee Co., Ltd. NB 521
IBM SPSS Statistics IBM Ver. 23

DOWNLOAD MATERIALS LIST

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नवजात Hypoxic के एक माउस मॉडल में Neurobehavioral आकलन-कोरोनरी मस्तिष्क चोट
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Kim, M., Yu, J. H., Seo, J. H., Shin, Y. K., Wi, S., Baek, A., Song, S. Y., Cho, S. R. Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury. J. Vis. Exp. (129), e55838, doi:10.3791/55838 (2017).

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