Mus brukes å studere svangerskapsdiabetes biologi. Imidlertid, graviditet oppsigelse kreves for slike studier som utelukker langsgående undersøkelser og nødvendiggjør bruk av store antall dyr. Derfor beskrive vi ikke-invasiv teknikk høyfrekvente ultrasonography for tidlig deteksjon og overvåking av etter implantasjon hendelser i gravid musen.
Høyfrekvente ultrasonography (HFUS) er en vanlig ikke-invasively overvåke sanntid utviklingen av den menneskelige Foster i utero. Musen er rutinemessig brukes som en i vivo modell embryoet implantasjon og graviditet progresjon. Dessverre, krever slike murine studier graviditet avbrudd aktivere oppfølging fenotypiske analyse. For å løse dette problemet, brukte vi tredimensjonal (3D) rekonstruksjon av HFUS bildebehandling data for tidlig deteksjon og karakterisering av murine embryoet implantasjon nettsteder og deres personlige utviklingsmessige progresjon i utero. Kombinere HFUS bildebehandling med 3D rekonstruksjon og modellering, var vi i stand til nøyaktig kvantifisere embryoet implantasjon området tall samt overvåke utviklingsmessige progresjon i gravid C57BL6J/129S mus fra 5,5 dager innlegget samleie (d.p.c.) gjennom til 9,5 d.p.c. med bruk av en transducer. Målinger inkludert: antall, plassering og volumet av implantasjon områder samt mellom implantasjon området mellomrom; fosteret levedyktighet ble vurdert av cardiac aktivitet avlytting. Umiddelbart etter implantasjon perioden (5.5 til 8,5 d.p.c.), 3D rekonstruksjon av gravid livmor både mesh og solid overlegg aktivert format visuell representasjon av utvikle dem innenfor hver livmor horn. Genmodifiserte mus fortsatt brukes til å beskrive kvinnelige reproduktive fenotyper avledet fra livmor dysfunksjon, har denne metoden en ny tilnærming for å oppdage, kvantifisere og karakterisere tidlig implantasjon hendelser i vivo. Denne romanen bruk av 3D HFUS imaging viser muligheten til å kunne oppdage, visualisere og karakterisere embryo-implantasjon områder under tidlig murine graviditet på en ikke-invasiv måte. Teknologien tilbyder en betydelig bedring over gjeldende metoder, som er avhengige av avbrudd i svangerskap brutto vev og histopathologic karakterisering. Her bruker vi en video og tekst formatter for å beskrive hvordan å utføre ultrasounds av tidlig murine svangerskapet for å generere pålitelige og reproduserbar data med rekonstruksjon av livmor skjemaet i mesh og solid 3D-bilder.
Tilbakevendende tidlig Graviditet er en av de vanligste komplikasjonene etter unnfangelsen og påvirker ca 1% av par prøver å bli gravid1,2. De underliggende mekanismene tidlig Graviditet er varierte: fra iboende embryonale unormalt og mors samtidige feil i endometrial mottagelighet1,3,4. På grunn av deres genetisk tractability, har musen modeller blitt mye utnyttet for undersøkelser av tidlig embryo implantasjon og graviditet. Videre den korte svangerskapsdiabetes tiden museklikk og utføre store studier har sikret voksende nytten av musen i adressering klinisk nøkkelspørsmål i human reproduktiv medisin5. Når det er sagt, det store flertallet av murine eksperimentell design fortsatt krever mange dammer være euthanized på sekvensiell svangerskapsdiabetes dager å kvantifisere og analysere implantasjon lokalisering, antall, størrelse og avstand mønstre under graviditet6, 7,8, og dermed utelukker longitudinelle studier på samme dyret.
I klinikken er ultralyd en pålitelig og uvurderlig verktøy for å overvåke menneskelige fosterets levedyktighet og utvikling i en ikke-invasiv måte9,10,11. Høyfrekvente ultralyd (HFUS) har nylig begynt å finne begrenset programmer i musen for å overvåke fosterets levedyktighet og vekst under graviditet12,13,14. Den siste teknologiske fremskritt i ultralyd imaging tillatt bruk av tredimensjonale (3D) dataene for visuell rekonstruksjon av dyr organer og påfølgende overvåking av patologi15,16, 17. Bruk av denne avansert bildeteknologi har kraftig forbedret makt til å oppdage mindre volum svingninger, å redusere Inter dyr variasjon, og til å overvåke utviklingen av en patologi eller effekten av en terapeutisk intervensjon17. Mens den primære nytten av denne teknologien har vært å overvåke kreft progresjon i oncomouse modeller15,16, er 3D HFUS imaging nylig brukt quantitate og overvåke aktive vekst av fosteret implantasjon og fosterutviklingen i musen livmoren18.
Her viser vi hvordan du utfører HFUS for å produsere 2D og 3D data for å generere rekonstruksjoner av tidlig gravid musen livmoren. Vi viser nytten av denne romanen metoden å oppdage disse tidlige embryonale implantasjon hendelser uten behov for graviditet oppsigelse, slik at forskere til å samle inn data i en ikke-invasiv måte.
Denne romanen bruk av 3D HFUS imaging viser muligheten til å kunne oppdage, visualisere og karakterisere embryo-implantasjon områder under tidlig murine graviditet på en ikke-invasiv måte. Teknologien tilbyder en betydelig bedring over gjeldende metoder, som er avhengige av avbrudd i svangerskap brutto vev og histopathologic karakterisering. Det bør imidlertid bemerkes at histologiske metoder vil fortsatt bli vurdert mer optimal når karakterisering på et mer forstørret og mer mobilnettet nivå er ønskelig, eller…
The authors have nothing to disclose.
Vi setter stor pris på hjelp av Rong Zhao, Jie Li og Yan Ying.
VisualSonics Vevo 2100 Ultrasound Imaging Platform/Machine | VisualSonics, inc. | VS-11945 | |
Vevo Imaging Station | VisualSonics, inc. | SA-11982 | |
Aquasonic 100 Ultrasound Transmission Gel | Parker | #SKU PLI 01-08 | |
Isoflurane (IsoThesia) 100mL bottle | Henry Shein | #29404 | |
PuraLubenAnimal Ophthalmic Ointment | Dechra | #12920060 |