Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Environment
Click here for the English version

Environment

تكوين وخصائص أقوافابا: المياه المستردة من الحمص المعلبة تجارياً

Published: February 10, 2018 doi: 10.3791/56305
Automatic Translation
1,2,3, 1, 1, 1, 1,2,3
1Department of Plant Sciences, University of Saskatchewan, 2Prairie Tide Chemicals Inc., 3Guangdong Saskatchewan Oilseed Joint Laboratory (GUSTO), Department of Food Science and Engineering, Jinan University

Summary

أقوافابا عصير لزج من الحمص المعلب، عندما أثارت قوة، ينتج عنه رغوة بيضاء مستقرة نسبيا أو الرغوة. أن الهدف الأساسي للبحث هو تحديد مكونات أقوافابا التي تسهم في فيسكوسيفيينج/سماكة الخصائص باستخدام الرنين المغناطيسي النووي (الرنين المغناطيسي النووي)، أولترافيلتراتيون، والتفريد والببتيد الشامل أخذ البصمات.

Abstract

وتباع عادة الحمص وغيرها من البقول كالمنتجات المعلبة معبأة في حل سميك أو محلول ملحي. هذا الحل قد ثبت مؤخرا أن إنتاج الرغاوي مستقرة والمستحلبات، ويمكن أن تعمل مغلظة. مؤخرا تم تعزيز الاهتمام بهذا المنتج من خلال شبكة الإنترنت حيث يقترح أن هذا الحل، التي تسمى الآن أقوافابا قبل مجتمع متزايدة، يمكن أن يستخدم بديلاً لبروتين البيض والحليب. كما أقوافابا على حد سواء جديدة ويقوم بوضعها على إنترنت على أساس المجتمع هو معروفة لتكوين أو خصائص. تم استرداد أكوافابا من 10 منتجات تجارية الحمص المعلبة وجرى التحقيق في العلاقات المتبادلة بين تكوين أكوافابا والكثافة واللزوجة وخصائص الإرغاء. بروتون الرنين المغناطيسي تم استخدامه لوصف تكوين أقوافابا قبل وبعد أولترافيلتراتيون من خلال الأغشية مع خفض الوزن الجزيئي مختلف العرضية (موكوس 3 أو 10 أو 50 كاتشين). بروتوكول للتفريد، والببتيد البصمات الشامل يقدم أيضا. تلك الأساليب قدمت معلومات قيمة فيما يتعلق بالعناصر المسؤولة عن أكوافابا الخصائص الوظيفية. سوف تسمح بتطوير الممارسات لإنتاج منتجات أكوافابا التجارية القياسية هذه المعلومات وقد مساعدة المستهلكين على تحديد المنتجات ذات فائدة أعلى أو متسقة.

Introduction

متزايدة ويجري تطوير المنتجات النباتية التي تحاكي الخصائص من اللحوم والحليب والبيض. الخصائص الفنية لنبضات هامة في استخداماتها الحالية في التطبيقات الغذائية ويجري استكشاف الخصائص الخاصة بهم في تطوير بدائل للبروتين الحيواني. على سبيل المثال، مبيعات منتجات الألبان البدائل كانت 8.8 بیلیون دولاراً من دولارات الولايات المتحدة بحلول عام 2015، وتنمو هذه السوق بسرعة. هذا السوق من المتوقع أن ينمو إلى دولار 35.06 بیلیون قبل عام 2024. وعلاوة على ذلك، الاتجاه التصاعدي في الطلب على بدائل الحليب النباتية، جزئيا، نتيجة للشواغل الصحية المستهلك فيما يتعلق بنسبة الكولسترول في الدم والمضادات الحيوية، وهرمونات النمو غالباً ما تستخدم في إنتاج اللبن1. وبالمثل، البروتين النباتي والبيض هيدروكولويد محل أسواق تزداد سرعة ومعدل نمو سنوي مركب من نسبة 5.8 في المائة ومن المتوقع لهذه المواد خلال السنوات القادمة 8 مع المبيعات من 1.5 بیلیون دولار أمريكي ومن المتوقع في 20262. عدد متزايد من المستهلكين يفضلون مصادر البروتين النباتي، حساسية الحد من الوجبات الغذائية وتخفيض انبعاثات الكربون للمنتجات الغذائية. الطلب على المنتجات المستندة إلى النبض، لا سيما من العدس والحمص والفول فول هي تنمو باطراد بسبب محتوى نسبة عالية من البروتين والألياف الغذائية والمحتوى المنخفض من الدهون المشبعة من البقول3. البقول تحتوي أيضا على المواد الكيميائية النباتية مع النشاط البيولوجي محتمل الفائدة4.

الكيانات التجارية، والعلماء والأفراد قد اتخذت نهج مختلفة للتواصل على أساس الخصائص النوعية للحمص بدائل البيض والحليب. جوجير وآخرون. 5 إنتاج منتج مثل الحليب من الحبوب النشويات عالية بما في ذلك الفول adzuki والحمص. حاول أنصار في وصف أساليب لإظهار أن ناتجها فريدة ومختلفة عن "أقوافابا"6. في نهج تجاري آخر توضيح جانب تيتريك et al. وقد وضعت 7 المستندة إلى النباتات بيضة بديلاً. على طلب البراءة وصف أساليب الجمع بين الطحين نبض مثخنات المعروفة التي تحاكي وظيفة البيض الأبيض في المواد المخبوزة. وتشمل الصيغ النموذجية الطحين نبض 80-90% والمضافات سماكة 10-20%.

استعراض الأقران الأدب أيضا يشير إلى الوظائف الممكنة مع الحمص وقد أثبتت أن الزلال البروتين الكسور التي تم الحصول عليها من طحين الحمص كابولي ومنتديات خصائص استحلاب جيدة. قد وجدوا أيضا أثر كبير من مصدر الحمص في الغلة وأداء الزلال8.

بعد التقرير الأولى الإنترنت تصف "أكوافابا" بواسطة الشيف الفرنسي جويل روسيل، تظهر حركة مصدر مفتوح فائدة أكوافابا كبديل للبروتين الألبان والبيض الأبيض في العديد من التطبيقات الغذائية. وهناك العديد من صفحات ويب مشاهدة عالية ويوتيوب أشرطة فيديو تظهر إدراج أقوافابا في الأطعمة التي تحاكي صفات الآيس كريم، والحلوى والجبن والمايونيز والبيض المقلي، وجلد كريم. معظم رواد توفير التطبيقات المفتوحة المصدر أقوافابا (وصفات) الحصول على موادها بإجهاد الحمص المعلب واستخدام السائل في وصفاتهم. وهؤلاء الأفراد هم معظمهم من العلماء المدربين لا. مقاطع فيديو تعليقات تشير إلى أن المجيبين بنسخ الوصفات والبعض قد أخفقت في تكرار النجاح الذي حققه دعاة أكوافابا.

جميع النهج الثلاثة (الشركات، العلمية والمفتوحة المصدر) لتطوير بدائل البيض والحليب الجدارة ولكن بعدا هاما في عداد المفقودين. العلماء التطبيقية والعلماء الأساسية وإصدار المنتجات المستندة إلى نبض الأفراد غير كامل ووصفت وتوحيد موادها الإدخال. التوحيد القياسي للمنتجات لاستخدام محدد ممارسة صناعية عادية. لم تم توحيد أصناف الحمص لنوعية أقوافابا ويجري توحيد الممارسات التعليب الصناعية لإنتاج الحمص متسقة لا أقوافابا.

استناداً إلى الدراسات المتعلقة بسلع أخرى، أنها يمكن التنبؤ بها أن النمط الوراثي والبيئة سيسهم في نبض أكوافابا الجودة. ومن المعروف أن التركيب الوراثي والبيئة تؤثر في حمص كابولي تعليب خصائص9. عادة، يتم قد آثار كبيرة بين الأنواع ذات الصلة وأصغر داخل أعضاء الأنواع. يمكن التقليل من التباين في الخواص الفيزيائية والكيميائية من خلال الحفاظ على الهوية التي تتيح اختيار الأصناف مع الخصائص المطلوبة. الآثار البيئية أيضا يمكن أن تكون كبيرة، وتتم إدارتها من قبل تقييم الجودة ومزج للأداء القياسية بشكل خاص الاختبارات10.

وهناك العديد من أصناف متميزة وراثيا من الحمص في الإنتاج التجاري. للحصول على أمثلة، مركز تنمية المحاصيل في جامعة ساسكاتشيوان، مصدرا رئيسيا للحمص التجارية الجبلة الجرثومية، سراح 23 الحمص أصناف منذ عام 1980 التي ينصح 6 حاليا لزراعة في كندا. في حين غالباً ما تصف المخطوطات العلمية الصنف المستخدمة في دراسة، ببراءات الاختراع وصفحات الإنترنت التي شملتها لم يوضح الأصناف المستنبطة استخدام أو المصدر الحمص. توحيد الأصناف والمناولة يمكن مساعدة المستخدمين على زيادة مدى نجاحها في استخدام الحمص ولكن لا تتوفر هذه المعلومات عن منتجات الحمص المعلبة.

والهدف من هذا البحث هو تحديد المكونات أقوافابا التي تسهم خصائص الإرغاء. هنا، تم مقارنة خصائص انسيابية أقوافابا من الماركات التجارية الحمص وتمت دراسة الخصائص الكيميائية بالرنين المغناطيسي النووي والتفريد الببتيد الشامل أخذ البصمات. على حد علمنا، هذا هو البحث الأول الذي يصف التركيب الكيميائي والخصائص الوظيفية لمكونات فيسكوسيفير أكوافابا.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

فصل أكوافابا عن الحمص

  1. الحصول على علب من الحمص من محلات البقالة المحلية وفتح مع دليل فتاحة علب.
  2. علب التسمية من ألف إلى ياء.
  3. الحمص منفصلة من أكوافابا استخدام فولاذ المقاوم للصدأ مزجها مصفاة المطبخ وتزن الحمص المنفصلين عن ذويهم وأكوافابا.

الحصول على عينة ممثلة من الحمص وأكوافابا للتحليل الكيميائي.

  1. حدد عشوائياً الحمص عشرة بعد استنزاف أكوافابا لتحديد محتوى الرطوبة.
  2. ضع الحمص المحدد في تين التجفيف والحرارة عند 100 ± 2 درجة مئوية ح 16-18 في فرن تجفيف.
  3. بعد التجفيف، طحن الحمص على شكل مسحوق للاستخدام (علىسبيل المثال البروتين والكربون تحليل المحتوى).
  4. تجميد أكوافابا والرغوة أكوافابا من كل مصدر إلى-20 درجة مئوية والجاف ثم في تجميد مجفف. أقوافابا المجففة سيستخدم لتحديد محتوى النيتروجين والكربون.

الخصائص الفنية أكوافابا

  1. تحديد أقوافابا اللزوجة عند 25 درجة مئوية باستخدام كوب شل رقم 2.
    1. تزج كأس شل في أقوافابا.
    2. سجل الوقت المطلوب لاستنزاف كأس11. يتم بدء تشغيل جهاز ضبط وقت عندما كان رفعت من أكوافابا الكأس وتوقفت عند توقف الدفق الذي ترك في الكأس.
    3. يمكن التحقق لزوجة أقوافابا بأحد التخطيطات المتوفرة مع كأس والتي تتعلق باللزوجة ووقت الصرف.
  2. قدرة الإرغاء
    1. مزيج أكوافابا الحل (100 مل) في وعاء فولاذ المقاوم للصدأ مع يد خلاط على سرعة الإعداد من 10 ل 2 دقيقة.
    2. سجل حجم الرغوة مباشرة بعد مزج 100 مل الحل أكوافابا الخامسf100 بوضع الرغوة في كوب قياس متدرج.
    3. تسمح الرغوة الوقوف وجاف على مر الزمن لمراقبة استقرار الرغوة، والحصول على عينة رغوة المجففة.

معلمات لون بذور الحمص

  1. يمكن بذور الحمص مختارة عشوائياً من كل مجموعة لتحديد اللون.
  2. معايرة ألوان lab هنتر باستخدام الأبيض والأسود ومرجع المعايير قبل القياسات.
  3. لون تنسيق قيم يحددها المختبر CIE نظام12، بما في ذلك ل (يمثل إيجابية بيضاء و 0 يمثل الظلام)، و هو (إيجابية حمراء والسلبية أخضر)، و ب (الإيجابية هو الأصفر والسلبية أزرق) في تتبع مع ضوء النهار 65°.

البروتين ومحتويات الكربون

  1. تحديد محتويات البروتين والكربون قبل الاحتراق باستخدام محلل عنصري13. ويقدر محتوى البروتين كمحتوى النتروجين مضروبة 6.2514.

محتوى الرطوبة

  1. تحديد محتويات رطوبة البذور وأكوافابا بتدفئة عينات من 100 ± 2 درجة مئوية ح 16-18 في فرن تجفيف15.

القياس الطيفي الرنين المغناطيسي النووي

  1. إعداد نموذج
    1. قبل القياس الطيفي، الطرد المركزي أكوافابا عينات 9200 × ز لمدة 10 دقائق. بعد الطرد المركزي، اجتياز المادة طافية 0.45 ميكرومتر المحاقن (عامل تصفية 25 مم المحاقن مع غشاء تترافلوروايثيلين (PTFE)). نقل العينة أكوافابا (0.4 مل) إلى رياضية أنبوب الرنين المغناطيسي 50 مغ إضافة أكسيد الديوتريوم داخل وموضوع العينة لتحليل الرنين المغناطيسي النووي.
    2. للعينة المجففة رغوة الموصوفة سابقا، تكون العينة (25 ملغ) في أكسيد الديوتريوم (500 ملغ) والحل يخضع لتحليل الرنين المغناطيسي النووي.
    3. ضع جميع العينات ل 13ج-الرنين المغناطيسي النووي و 1ح-الرنين المغناطيسي النووي في أنابيب توج 5 مم الرنين المغناطيسي النووي. إضافة 3--(تريميثيلسيليل) وأكسيد الديوتريوم وملح الصوديوم حمض البروبيونيك-2,2,3,3-د4 (اجتماع الدول الأطراف الثالث) لكل أنبوبة الرنين المغناطيسي النووي لتوفير إشارة قفل المذيبات والتصرف كمعيار داخلية، على التوالي.
  2. شروط الرنين المغناطيسي النووي
    1. الحصول على الأطياف بروتون الرنين المغناطيسي مع 500 ميغاهرتز الرنين المغناطيسي أو الحقل عالية مماثلة مطياف الرنين المغناطيسي النووي) مع 16 على الأقل بمسح كل طيف من مياه باستخدام برنامج قمع مثل نبض مزدوجة الحقل تدور التدرج صدى بروتون الرنين المغناطيسي النووي (الرنين المغناطيسي النووي-دبفجسي) نبض تسلسل16.
    2. ضبط التحول الطيفية لمكان ذروة اجتماع الدول الأطراف الثالث في 0 جزء في المليون ثم استخدام برنامج التكامل لتحديد الكميات النسبية للمركبات الحالية.

التفريد

ملاحظة: لهذه الخطوة، تم تحديد أكوافابا التي أسفرت عن الرغوة الأكثر استقرارا (ماركة H). ولم تتضمن هذه العلامة التجارية الملح.

  1. إعداد نموذج
    1. إدخال أكوافابا إلى الخزان العلوي ثلاثة الطرد المركزي مجدد السليلوز ultrafiltration الأجهزة كل مع خفض الوزن الجزيئي مختلف العرضية (موكوس) 3 أو 10 أو 50 كاتشين.
    2. وضع وحدات الطرد المركزي تصفية في أجهزة الطرد مركزي مناسبة عند 4 درجة مئوية وأجهزة الطرد المركزي في 3900 × ز 2 ح للحصول على المادة طافية وريتينتاتي الكسور. واستخدمت الكسور طافية ل 1ح-الرنين المغناطيسي النووي تحليل الجزيئات الأصغر حجماً في غياب ارتفاع الوزن الجزيئي (ميغاواط) الأنواع. الكسر ريتينتاتي الغشاء كاتشين 3 استخدمت لفصل الغرواني الكهربي كما أنه كان يعتقد أن هذا الغشاء سوف تحتفظ معظم البروتينات.
    3. تقدير البروتين محتويات المادة طافية على حد سواء، وريتيناتي باستخدام أسلوب برادفورد تعديل استخدام ألبومين المصل البقري ك معيار17.
    4. وضع عينات من المادة طافية وريتينتاتي الكسور في أنابيب ايبندورف وإخضاع هذه الكسور تهتز بتردد 25 كل ثانية (10 دقيقة) في مناسبة شاكر18. ملاحظة الحل اهتزت لتحديد إذا شكلت رغوة من الهز.
    5. حل في ريتينتاتي عن طريق إضافة 2.0 مل ماء المقطر إلى جهاز أولترافيلتراتيون لعلاج الطرد المركزي ثاني لتحقيق ديافيلتيريشن. رهنا بالجهاز أولترافيلتراتيون الطرد المركزي ثاني في 4 درجة مئوية و 3900 × ز ح 2.
    6. مزيج ريتينتاتي (0.025 ز) مع 1 مل من 0.02 م تريس-HCl الأس الهيدروجيني 7.4 أو مخزنة الفوسفات المالحة (PBS) الأس الهيدروجيني 7.4 لإذابة البروتين.
    7. الطرد المركزي المخلوط في 21000 غ س ل 1 دقيقة.
    8. استخدام المادة طافية لتحديد محتوى البروتين باستخدام برادفورد المعدلة كما ذكر سابقا.
  2. فصل الغرواني الكهربي
    ملاحظة: يخضع ريتينتاتي الغشاء موكو كاتشين 3 (المذكورة أعلاه) لفصل الغرواني الكهربي باستخدام الصوديوم دوديسيل كبريتات-polyacrylamide هلام التفريد (الحزب الديمقراطي الصربي صفحة).
    1. إعداد المواد الهلامية polyacrylamide استخدام هلام حل polyacrylamide 15% و 5% polyacrylamide تراص هلام.
    2. تطبيق عينة من 20 ميكروغرام البروتين إلى حارة واحدة من جل و "سلم البروتين بريستينيد باجيرولير" مع مجموعة من 10-170 كاتشين لممر منفصل polyacrylamide هلام.
    3. إخضاع المواد الهلامية لتيار كهربائي في نظام صغير "البروتين تترا الخلية" المعدلة من لايملي (1970)19. للتفريد ظروف التشغيل، جل اتبع المصبوغة، وديستينينج راتانابارييانوتش et al. (2012) 20.

الببتيد البصمات الجماعية

ملاحظة: قطع عصابات من جل الحزب الديمقراطي الصربي-الصفحة 3 كاتشين ريتينتاتي (موس من حوالي 8، 10، 13، 14، 15، 20، 22، 31، 37، 55 و 100 كاتشين) لهضم التربسين وفقا راتانابارييانوتش وآخرون. (2012) 20 وإجراء التحليل الطيفي الجماعية.

  1. الهضم في جل
    1. إزالة وصمة عار للعصابات مرتين بتخبط في 100 ميليلتر من بيكربونات الأمونيوم 200 ملم (NH4HCO3) في 50% الاسيتو الانيتريل (ACN)، واحتضان عند 30 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة.
    2. بعد الانتهاء من إزالة تلطيخ، تعامل مع تزاول عينات جل (100 ميليلتر) 10 دقيقة والجاف ثم تحت الفراغ، باستخدام مبخر فراغ الطرد مركزي، لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.
    3. تزج العينات هلام المجففة في 100 ميليلتر من ديثيوثريتول 10 ملم (DTT) في 100 ملم NH4HCO3 الحل واحتضان في 56 درجة مئوية ح 1.
    4. إزالة الزائدة تقليل المخزن المؤقت واستبدله 100 ميليلتر alkylating المخزن المؤقت [إيودواسيتاميدي 100 ملم في المياه الصف الكتلي (MS)].
    5. احتضان جل العينات في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة 30 دقيقة.
    6. أغسل جل العينات مرتين مع 200 ملم NH4HCO3 (100 ميليلتر)، تقليص المواد الهلامية بغمر لهم في تزاول (100 ميليلتر)، إعادة تضخم المواد الهلامية مع 200 ملم NH4HCO3 (100 ميليلتر) ويتقلص مرة أخرى بالتعامل مع تزاول (100 ميليلتر).
    7. واستنزاف تزاول الجاف للعينات جل تحت فراغ في مبخر فراغ الطرد مركزي لمدة 15 دقيقة.
    8. إعادة تضخم هلام المجففة العينات باستخدام 20 ميليلتر التربسين العازلة (50 نانوغرام/ميليلتر التربسين 1:1,200 مم NH4HCO3: حل الأسهم التربسين) متبوعاً بإضافة 30 ميليلتر من 200 ملم NH4HCO3 لكل عينة.
    9. احتضان العينات في ثيرموميكسير بين عشية وضحاها في 30 درجة مئوية مع الهز 300 لفة في الدقيقة.
    10. التوقف عن رد فعل الهضم التربسين بإضافة 1/10 حمض تريفلوراسيتيك 1% الحجم النهائي (حجم الخليط بعد خطوة 8) واستخراج الببتيدات تريبتيك من عينات جل استخدام 100 ميليلتر من حمض تريفلوراسيتيك 0.1% في 60% تزاول والجاف تحت الفراغ باستخدام الطرد المركزي مبخر فراغ.
    11. تخزين الببتيدات تريبتيك في-80 درجة مئوية قبل التحليل الشامل والمطيافيه.
  2. الكتلي
    1. إعادة تشكيل الببتيدات تريبتيك بإضافة 12 ميليلتر من الماء درجة ماجستير: تزاول: حمض الفورميك (97:3:0.1، v/v)، ومن ثم دوامة لمدة 1 إلى 2 دقيقة حل الببتيدات.
    2. أجهزة الطرد المركزي الحل الناتجة في ز 18,000 لمدة 10 دقائق في 4 درجات مئوية.
    3. نقل مختبرين الحل (10 ميليلتر) إلى قارورة مرض التصلب العصبي المتعدد لتحليل السائل اللوني-جنبا إلى جنب الكتلي (LC-MS/MS) في الرباعي وقت طيران (قطوف) مطياف أسلحة مجهزة بأداة لوني سائل وواجهة LC-مرض التصلب العصبي المتعدد.
    4. أداء الفصل الكروماتوغرافي الببتيد استخدام [هبلك]-شريحة ذات سعة عالية: تتكون من 360 nL تخصيب عمود وعمود تحليلية 150 مم × 75 ميكرون، كلاهما معبأة مع 180 ألف C18,، 3 ميكرومتر المرحلة ثابتة.
    5. تحميل عينات على العمود تخصيب اليورانيوم مع حمض الفورميك 0.1% في المياه بمعدل تدفق 2.0 ميليلتر/دقيقة.
    6. نقل عينات من الإثراء العمود للعمود التحليلي.
    7. الببتيد فصل الشروط: نظام المذيبات تدرج خطي يتكون من المذيبات (حمض الفورميك 0.1% في المياه) والمذيبات ب (0.1% حمض الفورميك في ACN). يبدأ التدرج الخطي مع المذيب 3% ب أن يزيد على 25% المذيب ب أكثر من 50 دقيقة. بعد ذلك المذيب ب يزيد من 25 إلى 90% أكثر من 10 دقيقة بمعدل تدفق 0.3 ميليلتر/دقيقة.
    8. الحصول على البيانات الطيفية الجماعية اليكتروسبراي أيون إيجابية باستخدام جهد شعرية في عام 1900 الخامس وأيون يفتت في 360 الخامس وتجفيف الغاز (النيتروجين) في 225 درجة مئوية بمعدل تدفق 12.0 لتر في الدقيقة.
    9. جمع نتائج الطيفية على نطاق شامل من 250-1700 (الكتلة وشحن؛ m/z) معدل المسح الضوئي من الأطياف/س. 8 MS/MS جمع البيانات عبر مجموعة من 50-1700 m/z وعرض عزل مجموعة من وحدات الكتلة الذرية 1.3. حدد الأيونات السلائف الأكثر كثافة أعلى 20 لكل عملية مسح مرض التصلب العصبي المتعدد لمرض التصلب العصبي المتعدد جنبا إلى جنب مع إجراء استبعاد نشطة 0.25 دقيقة.
  3. تحديد البروتين
    1. تحويل البيانات الطيفية لتنسيق بيانات كتلة وشحن باستخدام "برمجيات التحليل النوعي ماسشونتير اجيلنت".
    2. بيانات عملية ضد قاعدة البيانات أونيبروت أريتينوم سيسير (الحمص)، باستخدام سبيكتروميل كقاعدة بيانات محرك البحث.
    3. تتضمن معلمات البحث مثل خطأ شامل جزء من 50 جزء من المليون، وخطأ شامل أصل 20 صفحة في الدقيقة، وخصوصية الانقسام التربسين، وكارباميدوميثيل كتعديل ثابت سيستين.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

تتم تسمية كل من الحمص يمكن للإشارة إلى العناصر المضافة أثناء التعليب. وشملت مكونات الماء والحمص والملح وثنائي الإيثيلنديامين حمض tetraacetic (أدتا). وباﻹضافة إلى ذلك، كانت يسمى علب اثنين "قد تحتوي على كلوريد الكالسيوم". ولوحظت ثلاثة ألوان بطانة متميزة؛ أبيض، أصفر واضح والمعدني (الجدول 1).

رمز العلامة التجارية الملح ثنائي يدتا كلوريد الكالسيوم يمكن بطانة
A + - - أبيض
ب + - - أبيض
ج + + - أصفر
د - - - المعادن الفلزية
ه + + - أبيض
و + + - أصفر
ز + + +/- أبيض
ح - - - أصفر
أنا + + - أصفر
ي + + +/- أصفر

الجدول 1: المواد المضافة وبطانة يمكن.

وكان ماركات ه ود (607 ز) أعلى وأدنى الكتلة الإجمالية (567 ز) (الحمص بالإضافة إلى أقوافابا). وكان معامل الاختلاف (CV) من مجموع الكتلة الواحدة يمكن فقط 2%. ح العلامة التجارية الوارد أعلى كتلة الحمص (488 ز). العلامة ي، مع كتلة الحمص أدنى (335 ز)، 31% أخف من ماركة ح وكان أدنى عدد من البذور (244) في كل يمكن (الجدول 2). العلامة د الواردة حجم عصير أدنى في يمكن (110 مل) في حين لوحظ أعلى حجم عصير للعلامة التجارية الإلكترونية (225 مل). ولاحظ اللزوجة أعلى، للعلامة التجارية ح (114.2 cP)، كان أكبر 4.3 إلى 20 مرة مما لوحظ للعلامات التجارية الأخرى (5.7-26.4 cP). ولوحظت عدد من الارتباطات الهامة التي يمكن التنبؤ بجدوى المنتجات المعلبة لإنتاج أكوافابا. كان ارتباطاً سلبيا بحجم عصير الحمص الوزن الطازج وارتباطاً إيجابيا مع عصير اللزوجة. الجلد 100 مل أكوافابا شكل موحد زيادة الرغوة بحوالي 5 إضعاف (Vf100 = 470) فورا بعد المزج مع السيرة ذاتية لثمانية في المئة فقط. الماركات د، ه وز تنتج أقل مبلغ للرغوة من 100 مل أكوافابا. اللزوجة أكوافابا كان ارتباطاً سلبيا مع حجم الرغوة مجموع كل يمكن (Vفكان) (الجدول 3). كثافة عصير كان المعلمة السيرة الذاتية المتغير أقل من 4.6 في المائة في حين كان عصير اللزوجة 160 في المائة أكثر من متغير. السيرة الذاتية البازلاء كل يمكن كان 22 في المائة.

رمز العلامة التجارية يمكن المحتوى
(ز)		 فوت الحمص
(ز)		 يمكن للبذور/ حجم عصير
(mL)		 كثافة عصير
(كجم/م3)		 عصير اللزوجة
(cP) 1 		Vf100
(mL) 2 		Vفكان
(مل/can) 3
A 588 392 454 170 1067 8.75 ± 0.27قبل الميلاد 500 850
ب 581 355 404 200 1100 8.34 ± 0.17abc 500 1000
ج 590 389 289 175 1112 10.50 ± 0.18ج 470 823
د 567 428 423 110 1180 26.41 ± 1.14ه 410 451
ه 607 364 300 225 1066 6.21 ± 0.24ab 405 911
و 602 364 304 220 1048 6.32 ± 0.10ab 480 1056
ز 598 349 280 220 1103 5.70 ± 0.13 430 946
ح 595 488 429 125 1160 114.2 ± 4.29و 500 625
أنا 599 385 323 200 1009 16.12 ± 0.64د 500 1000
ي 584 335 244 220 1109 5.79 ± 0.30 510 1122
يعني 591 385 345 186.5 1095.4 20.84 470 878.4
التنمية المستدامة 12 44 74.72 41.17 50.83 33.44 40 204.63
السيرة الذاتية4 2 12 21.66 22.07 4.64 160.48 8.5 23.29
1 ويرد كل قيمة ك ± يعني SD (n = 3). هي القيم التي تليها رسائل مختلفة تختلف اختلافاً كبيرا (ف < 0.05).
2 زيادة حجم النسبة المئوية من الجلد 100 مل عصير الحمص.
3 حجم الرغوة مجموع كل يمكن
4 معامل الاختلاف (%)

الجدول 2: يمكن للقيم الكمية من الحمص.

يمكن المحتوى
(ز)		 فوت الحمص
(ز)		 البذور/
يمكن		 حجم عصير
(mL)		 كثافة عصير
(كجم/م3)		 عصير اللزوجة
(cP)		 Vفكان
(مل/can) 1
يمكن المحتوى (ز) 1
فوت الحمص (ز) –0.172 1
يمكن للبذور/ –0.442 0.664* * 1
الحجم (مل) من عصير 0.600 -0.878* * -0.739* * 1
عصير الكثافة (كجم/م3) -0.647* * 0.519 0.339 -0.705* * 1
عصير اللزوجة (cP) –0.002 0.890* * 0.474 -0.657* * 0.512 1
Vفكان (مل/can)1 0.483 -0.818* * -0.639* * 0.927* * -0.728* * –0.568 1
1 الرغوة إجمالي حجم من علبة من المنتج.
ملاحظة: هناك لا الارتباطات كبيرة تتصل Vf100 المعلمات الأخرى.

الجدول 3: معامل الارتباط.

الخصائص الفنية أكوافابا من هذه المنتجات التجارية 10، وخاصة حجم الرغوة واستقرار الرغوة، اختلفت اختلافاً كبيرا (الشكل 1). V أعلىفكان حدث في الماركات ب، و، وطاء وياء مع وحدات تخزين أكثر من 1,000 مل. ولوحظت كثافة عصير أعلى وأدنى نسبة زيادة حجم دال العلامة التجارية على الرغم من الغلة موحدة للرغوة في 100 مل أقوافابا في جميع المواد تختلف اختلافاً كبيرا على استقرار الرغوة. بعد ح 1 قد فصل السائل عن جميع المنتجات باستثناء من ماركة H (الشكل 1). بعد تخزين إضافية ح 14 على الرغوة ذهب إلى حد كبير من جميع الماركات ما عدا الماركات دال وحاء من المثير للاهتمام د وح قد عددا من الخصائص المميزة، بما في ذلك: 1) الحمص أعلى الكتلة الواحدة يمكن؛ 2) العائد أكوافابا أدنى كل يمكن؛ 3) أعلى كثافة أقوافابا؛ و 4) اللزوجة أكوافابا أعلى. التسميات على منتجات د وح أشارت إلى أن أي إضافات تدرج سوى الماء والحمص.

Figure 1
الشكل 1 : أكوافابا الرغوة وعصير من الحمص التجارية 10- الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

بذور الحمص الواردة الكربون 63.2 69.9% رطوبة و 45.6 46.5 في المائة (الجدول 4). ولوحظت محتويات البروتين أعلى وأدنى في الماركات ي (22.4 في المائة) وب (18.2%)، على التوالي.

رمز العلامة التجارية الرطوبة (%) الكربون (%) البروتين (%)
A 67.3 ± 0.2مؤتمر نزع السلاح 46.47 ± 0.01و 19.04 ± 0.18ب
ب 66.4 ± 0.4قبل الميلاد 46.24 ± 0.00e 18.24 ± 0.19
ج 67.6 ± 0.2د 45.73 ± 0.01ب 18.38 ± 0.07
د 69.9 ± 0.7ه 46.43 ± 0.02و 21.99 ± 0.23و
ه 66.8 ± 0.5قرص مضغوط 45.63 ± 0.04 20.71 ± 0.01د
و 67.1 ± 0.2مؤتمر نزع السلاح 46.24 ± 0.00e 22.05 ± 0.03fg
ز 63.2 ± 0.4 46.15 ± 0.01دي 19.53 ± 0.08ج
ح 69.3 ± 0.3ه 46.49 ± 0.05و 21.53 ± 0.28ه
أنا 66.9 ± 1.5قرص مضغوط 46.09 ± 0.09مؤتمر نزع السلاح 19.82 ± 0.07ج
ي 65.4 ± 0.8ب 46.04 ± 0.04ج 22.37 ± 0.11g
يعني ± SD (CV) 67.0 ± 1.87 (2.79) 46.20 ± 0.29 (0.63) 20.40 ± 1.57 (7، 70)
ويرد كل قيمة ك ± يعني SD (n = 3). هي القيم التي تليها رسائل مختلفة تختلف اختلافاً كبيرا (ف < 0.05).

الجدول 4: تكوين بذور الحمص.

وكان العلامة التجارية الإلكترونية الشامل تجميد المجفف أعلى (17.9 ز) (الجدول 5). أكوافابا التي تم الحصول عليها من ماركة د البروتين أعلى (26.8 في المائة)، ومحتويات الكربون (39.2 في المائة) والعلامة التجارية الإلكترونية الواردة أدنى من البروتين (23.3%).

رمز العلامة التجارية تجميد المجفف الجماهيري (ز) الرطوبة (%) الكربون (%) البروتين (%)
A 12.4 94.39 ± 0.02قبل الميلاد 35.46 ± 0.59دي 24.91 ± 0.55مؤتمر نزع السلاح
ب نا 94.06 ± 0.01أي بي سي وفيات المواليد وفيات المواليد
ج 15.7 94.41 ± 1.89قبل الميلاد 35.09 ± 0.06مؤتمر نزع السلاح 22.65 ± 0.30
د 11 94.07 ± 0.47abc 39.22 ± 0.02ز 26.83 ± 0.06ه
ه 17.9 93.59 ± 0.01ab 31.28 ± 0.12 23.36 ± 0.19ب
و 15.6 94.28 ± 0.02قبل الميلاد 34.66 ± 0.06ج 24.61 ± 0.15مؤتمر نزع السلاح
ز 12.7 94.70 ± 0.03قبل الميلاد 33.78 ± 0.13ب 22.75 ± 0.19ab
ح 15.1 92.98 ± 0.00 37.30 ± 0.10و 24.49 ± 0.26ج
أنا 16.3 93.63 ± 0.00ab 35.85 ± 0.00e 23.20 ± 0.02ab
ي 13.1 95.12 ± 0.00ج 34.77 ± 0.05ج 25.22 ± 0.44د
ويرد كل قيمة ك ± يعني SD (n = 3) باستثناء تجميد كتلة المجففة. هي القيم التي تليها رسائل مختلفة تختلف اختلافاً كبيرا (ف < 0.05). NA = غير متوفرة. ND = لا العزم

الجدول 5: تكوين أقوافابا.

العلامة د كان أعلى قيمة L الذي يرتبط بخفة البذور تليها حمص ماركة H، من ناحية أخرى، كان العلامة التجارية ي أدنى قيمة مما يشير إلى أن البذور أكثر قتامة (الجدول 6). يمكن أن تكون ذات صلة بزيادة قيم وقت الطهي و/أو نوعية البذور. بالإضافة إلى ذلك، قد يكون هذا مرتبطة بنوعية المادي من الرغوة الناتجة عن ذلك. من الواضح أن أكثر من المرغوب فيه للاستخدام مغلظة منتج أخف.

رمز العلامة التجارية L أ ب
A 58.02 ± 0.96مؤتمر نزع السلاح 8.64 ± 0.95abc 27.23 ± 1، 14آب
ب 57.66 ± 1.92التفكيك الوسيطي القاعدي 8.66 ± 0.97abc 24.84 ± 1.64
ج 58.45 ± 0.93الرفيق 10.31 ± 0.70د 29.62 ± 2.18ب
د 60.49 ± 0.55ه 7.95 ± 0.69 27.74 ± 0.87ب
ه 55.65 ± 1.16ab 9.92 ± 0.28مؤتمر نزع السلاح 27.39 ± 0.87ab
و 57.25 ± 0.52التفكيك الوسيطي القاعدي 8.51 ± 0.58ab 28.09 ± 1.16ب
ز 59.02 ± 1.20دي 7.58 ± 0.34 28.80 ± 1.58ب
ح 56.63 ± 1.78abc 10.44 ± 0.57د 26.77 ± 0.74ab
أنا 56.25 ± 1.34abc 9.71 ± 1.02التفكيك الوسيطي القاعدي 28.87 ± 2.51ب
ي 54.94 ± 0.90 9.34 ± 0.09التفكيك الوسيطي القاعدي 28.29 ± 0.64ب
ويرد كل قيمة ك ± يعني SD (n = 3). هي القيم التي تليها رسائل مختلفة تختلف اختلافاً كبيرا (ف < 0.05).

الجدول 6: لون المعلمات من بذور الحمص.

زيادة محتويات البروتين في المادة طافية عندما زادت موكو (الجدول 7). عندما استخدمت غشاء موكو 3 كاتشين للترشيح أكوافابا، تم العثور على لا البروتين في المادة طافية مؤكدا أن البروتينات موجودة في عصير الحمص موس أكبر من كاتشين 3. كغشاء زادت موكو، لوحظت بعض البروتينات في المادة طافية. ريتينتاتي بعد ديافيلتريشن جل مثل بيليه، ولذلك فإنه تم حله في 0.02 M HCl تريس في درجة الحموضة 7.4 أو برنامج تلفزيوني في المخزن المؤقت للأس الهيدروجيني 7.4.

كسر موكو (كاتشين)
3 10 50
المادة طافية 0.05 ± 0.00 غرام/لتر 0.17 ± 0.01 غرام/لتر 0.89 ± 0.01 غرام/لتر
ريتينتاتي1 0.88 ± 0.01 غرام/لتر 1.36 ± 0.00 غرام/لتر 0.82 ± 0.02 غرام/لتر
1 تم حله في ريتينتاتي في 0.02 M HCl تريس في درجة الحموضة 7.4. وتم الحصول على الاتجاه ونتائج مماثلة عندما استخدمت برنامج تلفزيوني على درجة الحموضة 7.4 كمذيب.

الجدول 7: البروتين محتوى (غرام/لتر) من المادة طافية من تصفية عصير ماركة ح استخدام موكو مختلفة.

وقد تم تحليل أقوافابا من المنتجات المتاحة تجارياً الحمص 10 باستخدام دبفسي-1ح-الرنين المغناطيسي النووي. طيف 1ح-الرنين المغناطيسي أقوافابا مشروح نموذجي هو مبين في الشكل 2. وانتدب الأصداء المكونات وفقا للمنشورات السابقة21. وحددت مجموعة من 20 من المركبات بما في ذلك الكحول (الكحول، الإيثانول، الميثانول) والأحماض العضوية (حمض اللاكتيك، حامض الخليك، حامض سوكسينيك، وسترات، فورمات، مالات) والسكريات (الجلوكوز، السكروز)، والأحماض الأمينية (ألانين) ونوكليوسدس (إينوسيني، أدينوسين).

Figure 2
الشكل 2 : الممثل 1 "طيف" ح-الرنين المغناطيسي لمجموع منطقة أقوافابا- 1، كحولالايسوبروبيل؛ الإيثانول 2،؛ 3 حمض الالكتيك؛ ألانين 4،؛ 5، حمض الخليك؛ الجلوتامين 6،؛ 7، حمض سوكسينيك؛ سترات 8،؛ مالات 9،؛ الكولين 10،؛ 11، phosphocholine؛ الميثانول، 12؛ 13، السكروز؛ 14، الجلوكوز؛ 15، β-الجلوكوز؛ 16, α-جلوكوز؛ 17، السكروز؛ 18، إينوسيني؛ أدينوسين 19،؛ فورمات 20،. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

أظهرت معظم أطياف الرنين المغناطيسي ح 1من أقوافابا من العينات التجارية (ما عدا العلامات التجارية ه, G و J) من الثلاثي 1.2 صفحة في الدقيقة من الإيثانول مجموعة الميثيل (الشكل 3). يمكن أيضا التحقق من التخمير حمض الخليك في أقوافابا من خلال إشارة خلات 1.95 صفحة في الدقيقة. أكوافابا من ماركة و إظهار مستوى عال من حمض اللبن (1.35 جزء في المليون)، بينما أكوافابا من إظهار مستوى عال من حمض اللبن وحمض سوكسينيك (2.48 جزء في المليون). القميص في 3.2 جزء في المليون في أطياف 1ح-الرنين المغناطيسي لكل أقوافابا التحقيق يشير إلى وجود مادة الكولين. ومن المحتمل أن يتم إنتاج الإيثانول وحمض الخليك وحمض اللاكتيك أثناء التنقيع من الحمص قبل التعليب. السكروز ومادة الكولين وجزيئات أخرى قد تنشأ من الحمص كنواتج الأيض الطبيعي.

Figure 3
الشكل 3 : 1 "طيف" الرنين المغناطيسي ح من أكوافابا من مختلف المنتجات التجارية- 2، الإيثانول؛ 3 حمض الالكتيك؛ 5، حمض الخليك؛ سترات 8،؛ مالات 9،؛ الكولين 10،؛ و 11، phosphocholine. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

لفهم تكوين الرغوة، فصل الطيف 1ح-الرنين المغناطيسي للسائل من الرغوة بعد ح 12 من العلامة التجارية بمقارنة مع طائفة الرغوة (الشكل 4). تم التخصيب إشارات بروتون في المنطقة (5.0 5.4 جزء في المليون) في الطيف الرغوة. وكان تركيز السكروز (3.63 جزء في المليون) أكبر في الرغاوي من السائل. وانخفضت مكونات متفجرة مثل الميثانول (3.40 جزء في المليون)، الإيثانول (1.20 جزء في المليون)، وحمض اللبن (1.35 جزء في المليون)، وحمض الخليك (1.95 جزء في المليون) وحمض سوكسينيك (2.48 جزء في المليون) في طبقة الرغوة، احتمالاً بسبب التبخر. إشارات بروتون من البروتينات (0.5--3.0 جزء في المليون، والبروتونات من سلاسل الأحماض الأمينية الاليفاتيه الجانبية) الموجودة في الرغاوي.

Figure 4
الشكل 4 : 1 ح-الرنين المغناطيسي النووي الطيف رغوة أقوافابا وعصير من ماركة أ 1، كحولالايسوبروبيل؛ الإيثانول 2،؛ 3 حمض الالكتيك؛ ألانين 4،؛ 5، حمض الخليك؛ الجلوتامين 6،؛ 7، حمض سوكسينيك؛ سترات 8،؛ مالات 9،؛ الكولين 10،؛ 11، phosphocholine؛ الميثانول، 12؛ 13، السكروز؛ 14، الجلوكوز؛ 15، β-الجلوكوز؛ 16, α-جلوكوز؛ 17، السكروز؛ 18، إينوسيني؛ أدينوسين 19،؛ فورمات 20،؛ و *، السكاريد. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

عصير أقوافابا من ماركة ح تعرضت أولترافيلتراتيون باستخدام ثلاثة أغشية موكو مختلفة وقورنت الأطياف 1ح (الشكل 5). الغشاء كاتشين 10 مفصولة الظاهر بولينوكليوتيدي (6.5-8.5 جزء في المليون)، بينما السكريات، تساهم قمم 5.0-5.2 جزء في المليون، وأقرت الغشاء كاتشين 50. إشارات الببتيد (0.5-2.5 جزء في المليون) وقد اكتشفت في filtrate كاتشين 3.

Figure 5
الشكل 5 : 1 "طيف" الرنين المغناطيسي ح من أقوافابا تعرض لغشاء الترشيح. 16, α-جلوكوز؛ 17، السكروز؛ *، السكاريد. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

إثراء بروتينات من المنتج ح، واحد الغلة الرغوة الأكثر استقرارا عن طريق غشاء الترشيح يليه الحزب الديمقراطي الصربي صفحة ريتينتاتي كشف العصابات واضحة من الحرارة البروتينات القابلة للذوبان مع موس أكبر من 3 كاتشين (الشكل 6A). ومن الغريب أن يبدو خمسة نطاقات البروتين المحددة تحتوي على بروتينات من الفطريات المسببة للأمراض الحمص ربيعي ديديميلا. معظم البروتينات الأخرى كانت ملكا للبروتينات القابلة للذوبان الحرارة المعروفة مثل الراحل embryogenesis وفرة البروتينات وديهيدرينس (الشكل 6B). تحديد بروتين الصدمة الحرارة كما شملت البروتينات، ديفينسين، هستون، والدهن غير محددة نقل البروتين وفائق أكسيد الفاءق. وحضر أيضا التخزين الرئيسية البروتينات بروفيسيلين وليجومينين.

Figure 6
الرقم 6 : (أ) "فصل" الحزب الديمقراطي الصربي صفحة من البروتين عصير الحمص؛ (ب) إمكانية تحديد البروتين الواحد الفرقة- يتم تمييز خمسة نطاقات البروتين التي تم تحديدها. قفزة = أواخر embryogenesis البروتين وفيرة، HSP = بروتين الصدمة الحرارة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

في هذا البحث، وقد وجدنا أن أكوافابا الحمص من مصادر تجارية مختلفة تنتج الرغاوي التي تختلف في الخصائص (الحجم واستقرار الرغوة) والتركيب الكيميائي. وكان هناك ارتباط إيجابي بين اللزوجة أكوافابا ومحتوى الرطوبة. زيادة حجم الرغوة (Vf100) لا ترتبط هذه المعلمات. إضافات مثل يدتا الملح وثنائي قد قمع اللزوجة ورغوة الاستقرار كما أكوافابا من الحمص المعلبة مع هذه المضافات قد اللزوجة أقل وتنتج الرغاوي مع أقل رغوة الاستقرار. هذه النتيجة يختلف من البحيرة وآخرون. (2014) 22 حيث أفيد بأنه تم تخفيض حجم الرغوة micellar حضور الملح وأن رغوة انهيار معدل تباطأ بالملح. وكان الحمص أكوافابا التي تم الحصول عليها من عينات المطبوخ مع الملح المضافة أيضا الرطوبة أعلى وأدنى محتويات الكربون مقارنة أكوافابا من الحمص المعلب بالملح. قد تكون محدودة إضافة الملح قبل الطهي الحمص النشا والبروتين تورم23.

فصل البروتين عن طريق غشاء الترشيح تليها الببتيد والحزب الديمقراطي الصربي-صفحة البصمات الشامل أظهرت أن البروتينات أقوافابا الأنواع ماء قابل للذوبان الحرارة معروفة إلى حد كبير. ومن الغريب أن هناك أيضا أدلة تريبتيك الشظايا التي اقترحت هذه المواد كانت ملوثة بآفة أسكوتشيتا. وكشف تحليل الرنين المغناطيسي النووي الذوائب العضوية الصغيرة تصل إلى 20، بما في ذلك الكحول خلات وحمض اللبن وحمض سوكسينيك. تظهر هذه النتائج تشير إلى أن منتجات التخمير تراكمت في أكوافابا. هذه المركبات قد صدرت بالكائنات الحية الدقيقة أثناء التنقيع من البذور قبل التعليب. أطياف الرنين المغناطيسي النووي بروتون الرغوة وعصير أظهرت أن يسوفلافونيس ومكونات متفجرة كانت موجودة في العصير بينما الرغوة الواردة أساسا من السكريات والسكروز والبروتين. أيضا للفائدة 1ح-الرنين المغناطيسي النووي يدل على وجود الأحماض النووية (ربما الحمض النووي).

وضوح العمليات المستخدمة في تعليب خصائص أكوافابا المتضررة والجودة. فمن الممكن أن مستهلك يمكن تحديد أفضل مصادر أكوافابا استناداً إلى تركيز الحل. ويمكن اختيار أساسا مصدر أن كان المعلبة دون إضافة الملح أو يدتا. بعد فتح علبة المستهلك يمكن قياس نسبة كتلة الحمص وأكوافابا لتحديد التركيز. بيد أن الشركة مصنعة يمكن توحيد شروط تجهيز وإنتاج أقوافابا موحدة كمنتج تجاري.

هذا الببتيد البحث استخدمت البصمات الشامل و 1ح-الرنين المغناطيسي النووي لتحليل تكوين أكوافابا. كتلة الببتيد البصمات البروتينات المحددة أكوافابا المساهمة في خصائص الإرغاء. ثبات البروتينات التي تم تحديدها معروف جيدا. وكان المميزين التقنية بما فيه الكفاية لتحديد وجود البروتينات المرتبطة بالكائنات الفطرية البذور. ومع ذلك، قد تؤثر عوامل شتى النتائج24. الخطوات الحاسمة هي إعداد عينة، تنقية البروتين، الانفصال قبل التفريد جل والهضم التربسين والبحث الشامل الذي يؤدي إلى تحديد الهوية. برامج قاعدة بيانات البحث من الشظايا تريبتيك النظر في وجود العديد من التعديلات الببتيد بما في ذلك يسين كارباميلاتيد، الميثيونين المؤكسد، وحمض بيروجلوتاميك، أسباراجين deamidated، سيرين فوسفوريلاتيد، ثريونين، وتيروزين كمتغير التعديلات. يضرب مصادق عليه من تحليل مرحلتين يتم البحث ثم استخدام التربسين شبه غير محددة ج-المحطة، وشبه التربسين غير محدد N-المحطة. بعد تحليل تكرارية وعمليات التحقق من الصحة ينص الببتيد والبروتينات بمعدل 1% اكتشاف كاذبة.

واستخدمت بروتون الرنين المغناطيسي لتحديد وجود الجزيئات العضوية الصغيرة في أكوافابا. وحددت عدة مركبات هذه الأطياف. وأجرى الترشيح والطرد المركزي لعينات أكوافابا للقضاء على جزيئات غير قابلة للذوبان التي يمكن أن تتداخل مع الرنين المغناطيسي ذروة الأشكال وأقل حساسية. وبالإضافة إلى ذلك، استخدمت قمع المذيبات لتحسين حساسية الكاشف الرنين المغناطيسي للجزيئات التي تتداخل مع خط الأساس الواسع الناجم عن صدى قوي المياه.

بروتون الرنين المغناطيسي النووي أداة أنشئت في مراقبة جودة المنتجات الغذائية. مقارنة طرق الكروماتوغرافي مثل GC/MS، LC للأشعة فوق البنفسجية، و LC/MS، 1ح-الرنين المغناطيسي أسلوب عادة أقل حساسية. ومع ذلك، هذا الأسلوب تتطلب القليل جداً من الأعمال التحضيرية عينة ويحقق نتائج سريعة وإعلامية واسعة في قياس واحد25. حيث هو مادة كافية الحالية 1ح-الرنين المغناطيسي النووي أيضا وسيلة موثوق بها للغاية للتحليل الكمي وتوضيح التركيب الكيميائي للمركبات غير معروف.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgments

وأيد هذا البحث "صندوق إنقاذ الباحث" في معهد التعليم الدولي (IIE-إطار النتائج الاستراتيجية).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Freeze Dryer
Stoppering Tray Dryer Labconco Inc. 7948040
Mixer 
Stainless steel hand mixer  Loblaws PC2200MR
Viscosity Measurement 
Shell cup No. 2  Norcross Corp.
Color Measurement 
Colorflex HunterLab spectrophotometer  Hunter Associates Laboratory Inc.
Protein and Carbon Contents 
Elemental analyzer   LECO Corp. CN628
NMR Spectrometry
Spectrafuge 24D   Labnet International Inc.
Syringe filters  VWR International CA28145-497 25 mm, with 0.45 µm PTFE membrane
Deuterium oxide  Cambridge Isotope Laboratories Inc. 7789-20-0
3-(trimethylsilyl)propionic-2,2,3,3-d4 acid sodium salt Sigma-Aldrich 169913-1G
Bruker Avance 500 MHz NMR spectrometer  Bruker BioSpin
TopSpin 3.2 software  Bruker BioSpin GmbH
Electrophoresis 
Regenerated cellulose membrane  Millipore Corp. 3, 10, 50 kDa (MWCO)
Centrifugal filter unit  Millipore Corp.
Benchtop centrifuge  Allegra X-22R, Beckman Coulter Canada Inc.
Mixer Mill MM 300  bead mill  F. Kurt Retsch GmbH & Co. KG
Eppendorf centrifuge 5417C Eppendorf
Phosphate buffered saline, pH 7.4 Sigma-Aldrich P3813-10PAK
Tris-HCl buffer pH 7.4  Sigma-Aldrich T6789-10PAK
PageRuler Prestained Protein Ladder  Fisher Scientific
Mini-Protein Tetra Cell system BioRad
Peptide Mass Fingerprinting
Thermo-Savant SpeedVac BioSurplus Centrifugal vacuum evaporator 
Trypsin buffer  20 µL trypsin in 1 mM hydrochloric acid and 200 mM NH4HCO3
Iodoacetamide Sigma-Aldrich I1149-5 g
Trifluoroacetic acid  Fluka BB360P050
Acetonitrile Fisher Scientific  L14734
Formic acid  Sigma-Aldrich 33015-500mL
Mass spectrometry vial  Agilent Technologies Canada Ltd.
Agilent 6550 iFunnel quadrupole time-of-flight mass spectrometer  Agilent Technologies Canada Ltd. Agilent 1260 series LC instrument and Agilent Chip Cube LC-MS interface
HPLC-Chip II: G4240-62030 Polaris-HR-Chip_3C18  360 nL enrichment column and 75 µm × 150 mm analytical column, both packed with Polaris C18-A, 180Å, 3 µm stationary phase. 
Agilent MassHunter Qualitative Analysis Software Agilent Technologies Canada Ltd.
SpectrumMill data extractors Agilent Technologies Canada Ltd.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Janssen, M., Busch, C., Rödiger, M., Hamm, U. Motives of consumers following a vegan diet and their attitudes towards animal agriculture. Appetite. 105, 643-651 (2016).
  2. Cision PR Newswire. Egg Replacement Ingredient Market: Global Industry Analysis and Opportunity Assessment, 2016-2026. , Available from: https://www.prnewswire.com/news-releases/egg-replacement-ingredient-market-global-industry-analysis-and-opportunity-assessment-2016-2026-300370861.html (2016).
  3. Joshi, P. K., Parthasarathy Rao, P. Global and regional pulse economies current trends and outlook. IFPRI Discussion Paper 01544. , 149 (2016).
  4. Oomah, B. D., Patras, A., Rawson, A., Singh, N., Compos-Vega, R. Chemistry of pulses. Pulse Foods. Tiwari, B. K., Gowen, A., Mckenna, B. , Academic Press. Oxford. 9-55 (2011).
  5. Legume-based dairy substitute and consumable food products incorporating same. United States Patent Application. Gugger, E. T., Galuska, P., Tremaine, A. , A1 20160309732 (2016).
  6. Aquafaba Science. , Available from: http://aquafaba.com/science.html (2016).
  7. Tetrick, J., et al. Plant-based egg substitute and method of manufacture. World Patent. , WO 2013067453 A1 (2013).
  8. Singh, G. D., Wani, A. A., Kaur, D., Sogi, D. S. Characterisation and functional properties of proteins of some Indian chickpea (Cicer arietinum) cultivars. J. Sci. Food Agric. 88 (5), 778-786 (2008).
  9. Nleya, T. M., Arganosa, G. C., Vandenberg, A., Tyler, R. T. Genotype and environment effect on canning quality of kabuli chickpea. Can. J. Plant Sci. 82 (2), 267-272 (2002).
  10. Vaz Patto, M. C., et al. Achievements and Challenges in Improving the Nutritional Quality of Food Legumes. Crit. Rev. Plant Sci. 34, 105-143 (2015).
  11. Ratanapariyanuch, K., Clancy, J., Emami, S., Cutler, J., Reaney, M. J. T. Physical, chemical, and lubricant properties of Brassicaceae oil. Eur. J. Lipid Sci. Technol. 115, 1005-1012 (2013).
  12. Hunter, R. S. Photoelectric color-difference meter. J. Opt. Soc. Am. 48, 985-995 (1958).
  13. Sweeney, R. A., Rexroad, P. R. Comparison of LECO FP-228 'N Determinator' with AOAC copper catalyst Kjeldahl method for crude protein. JAOAC. 70, 1028-1032 (1987).
  14. Boye, J. I., et al. Comparison of the functional properties of pea, chickpea and lentil protein concentrates processed using ultrafiltration and isoelectric precipitation techniques. Food Res Int. 43, 537-546 (2010).
  15. Ratanapariyanuch, K., Shim, Y. Y., Emami, S., Reaney, M. J. T. Protein concentrate production from thin stillage. J. Agric. Food Chem. 64, 9488-9496 (2016).
  16. Ratanapariyanuch, K., et al. Rapid NMR method for the quantification of organic compounds in thin stillage. J. Agric. Food Chem. 59, 10454-10460 (2011).
  17. Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72, 248-254 (1976).
  18. Burnett, P. G. G., Olivia, C. M., Okinyo-Owiti, D. P., Reaney, M. J. T. Orbitide composition of the flax core collection (FCC). J. Agric. Food Chem. 64, 5197-5206 (2016).
  19. Laemmli, U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 227, 680-685 (1970).
  20. Ratanapariyanuch, K., Tyler, R. T., Shim, Y. Y., Reaney, M. J. T. Biorefinery process for protein extraction from oriental mustard (Brassica juncea L., Czern.) meal using ethanol stillage. AMB Express. 2, 1-9 (2012).
  21. Lv, Q., Yang, Y., Zhao, Y., Gu, D. Comparative study on separation and purification of isoflavones from the seeds and sprouts of chickpea by HSCCC. J. Liq Chromatogr Relat. Technol. 32, 2879-2892 (2009).
  22. Behera, M. R., Varade, S. R., Ghosh, P., Paul, P., Negi, A. S. Foaming in micellar solutions: effects of surfactant, salt, and oil concentrations. Ind. Eng. Chem. Res. 53, 18497-18507 (2014).
  23. Tan, S. H., Mailer, R. J., Blanchard, C. L., Agboola, S. O. Canola proteins for human consumption: Extraction, profile, and functional properties. J. Food Sci. 76, R16-R28 (2011).
  24. Thiede, B., et al. Peptide mass fingerprinting. Methods. 35, 237-247 (2005).
  25. Hwang, H. S. Application of NMR spectroscopy for foods and lipids. Advances in NMR spectroscopy for lipid oxidation assessment. , SpringerBriefs in Food, Health, and Nutrition 11-13 (2017).

Tags

العلوم البيئية، 132 قضية، الحمص، والمستحلبات، المثبتات، الخرنوب، التصنيع ومنتجات البيض/الغلوتين (نباتي)
تكوين وخصائص أقوافابا: المياه المستردة من الحمص المعلبة تجارياً
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Shim, Y. Y., Mustafa, R., Shen, J.,… More

Shim, Y. Y., Mustafa, R., Shen, J., Ratanapariyanuch, K., Reaney, M. J. T. Composition and Properties of Aquafaba: Water Recovered from Commercially Canned Chickpeas. J. Vis. Exp. (132), e56305, doi:10.3791/56305 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter