Zellzyklus-Analyse

Zellzyklus bezieht sich auf den Satz von Ereignissen, durch die eine Zelle wächst, sein Genom repliziert und schließlich teilt sich in zwei Tochterzellen durch den Prozess der Mitose. Weil die Menge an DNA in einer Zelle charakteristische Veränderungen während des Zyklus Techniken bekannt zeigt als Zellzyklus Analyse verwendet werden kann, in sind, einer Bevölkerung der Zellen entsprechend der verschiedenen Phasen des Zellzyklus zu trennen, basierend auf ihren unterschiedlichen DNA-Gehalt.

Dieses Video deckt die Prinzipien hinter Zellzyklus Analyse über DNA-Färbung. Wir prüfen eine generalisierte Protokoll für die Durchführung dieser Färbung mit Bromodeoxyuridine (BrdU, eine analoge Thymidin, die neu synthetisierten DNA-Stränge eingebaut ist) und Propidium Jodid (PI, ein DNA-Farbstoff, der alle DNA Flecken), gefolgt von der Analyse der gefärbten Zellen mit Durchflusszytometrie. Während der Durchflusszytometrie einen einzigen Zellsuspension Fluoreszent markierten Zellen wird ein Instrument mit einem Laserstrahl durchlaufen und die Fluoreszenz jeder Zelle wird gelesen. Wir dann diskutieren, wie man Daten vom Fluss durchflusszytometrischen Streudiagrammen zu interpretieren und zu guter Letzt schauen Sie sich ein paar Anwendungen dieser Technik.