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Cell Biology
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JoVE Science Education Cell Biology
Cell Cycle Analysis
  • 00:00Overview
  • 00:56Principle Behind Cell Cycle Analysis
  • 03:33Generalized Protocol for BrdU and PI Staining
  • 05:43Flow Cytometric Analysis
  • 07:26Applications
  • 09:07Summary

Zellzyklus-Analyse

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Overview

Zellzyklus bezieht sich auf den Satz von Ereignissen, durch die eine Zelle wächst, sein Genom repliziert und schließlich teilt sich in zwei Tochterzellen durch den Prozess der Mitose. Weil die Menge an DNA in einer Zelle charakteristische Veränderungen während des Zyklus Techniken bekannt zeigt als Zellzyklus Analyse verwendet werden kann, in sind, einer Bevölkerung der Zellen entsprechend der verschiedenen Phasen des Zellzyklus zu trennen, basierend auf ihren unterschiedlichen DNA-Gehalt.

Dieses Video deckt die Prinzipien hinter Zellzyklus Analyse über DNA-Färbung. Wir prüfen eine generalisierte Protokoll für die Durchführung dieser Färbung mit Bromodeoxyuridine (BrdU, eine analoge Thymidin, die neu synthetisierten DNA-Stränge eingebaut ist) und Propidium Jodid (PI, ein DNA-Farbstoff, der alle DNA Flecken), gefolgt von der Analyse der gefärbten Zellen mit Durchflusszytometrie. Während der Durchflusszytometrie einen einzigen Zellsuspension Fluoreszent markierten Zellen wird ein Instrument mit einem Laserstrahl durchlaufen und die Fluoreszenz jeder Zelle wird gelesen. Wir dann diskutieren, wie man Daten vom Fluss durchflusszytometrischen Streudiagrammen zu interpretieren und zu guter Letzt schauen Sie sich ein paar Anwendungen dieser Technik.

Procedure

Zellzyklus bezieht sich auf die zelluläre und biochemische Prozesse, die innerhalb einer Zelle führt zu seiner Division. Eine Zelle durchläuft verschiedene Phasen des Zyklus, und der Zeitaufwand für diesen Vorgang ist nahezu konstant für einen Zelltyp. Jede Abweichung von dieser Dauer ist bezeichnend für abnorme Zellteilung. Zellzyklus-Analyse wird daher ein sehr nützliches Werkzeug für Biologen, die Interesse an einem Studium Mechanismen der Zellteilung, die letztlich hilft bei der Behandlung von Patienten mit Kra…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Cell Cycle Analysis. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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