Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Smak prov: En kort och validerade Test

Published: August 17, 2018 doi: 10.3791/56705
Automatic Translation
1,2, 2, 2, 2, 2, 1,2, 3, 3, 2
1Perelman School of Medicine at the University of Pennsylvania, 2Monell Chemical Senses Center, 3Department of Otorhinolaryngology-Head and Neck Surgery, Division of Rhinology, Hospital of the University of Pennsylvania

Summary

Detta protokoll mäter människors smak svaren och inkluderar en kort anatomisk bedömning, ett kort smak prov och en valideringsmetod som använder motivets rapporterade känsla och smak receptor genotyp.

Abstract

Framväxande vikten av smak i medicin och biomedicinsk forskning och ny kunskap om dess genetiska underbyggnad, har motiverat oss att komplettera klassiska smak-testmetoder på två sätt. Först förklarar vi hur du gör en kort bedömning av munnen, inklusive tungan, att säkerställa att det finns smak papiller och observera tecken på relevant sjukdom. För det andra drar vi på genetik att validera smak testdata genom att jämföra rapporter av upplevda bitterhet intensitet och medfödda receptor genotyper. Discordance mellan objektiva mått av genotyp och subjektiva rapporter av smakupplevelse kan identifiera samling datafel, distraherad ämnen eller de som inte har förstått eller följde instruktionerna. Vår förhoppning är att snabb och giltig smak tester kan övertyga forskare och kliniker att bedöma smaken regelbundet, vilket gör smak testning lika vanligt som testning för hörsel och syn. Slutligen, eftersom många vävnader i kroppen uttrycka smak receptorer, smak Svaren kan tillhandahålla en proxy för vävnad känslighet någon annanstans i kroppen och därmed fungera som en snabb, point-of-care test till guide diagnos och ett verktyg för forskning att utvärdera smak receptor proteinfunktion.

Introduction

Åtgärder av mänskliga smakföreställningen kan vara både del av sjukvård och ett mål av biomedicinsk forskning, men smaken har fått knappa uppmärksamhet jämfört med hörsel och syn (tabell 1). Ur medicinsk, när kliniker utvärderar patienter är klagar över smak förlust, i de flesta fall den faktiska förlusten lukten1, vilket har lett till avskedanden av smak förlust som en ovanligt och ofta ogiltiga presentera klagomål. Smak snedvridningar (dysgeusi) är vanligare och ofta uppstår från de sekundära effekterna av mediciner eller perifer nerv skada2,3, men varken form har en effektiv behandling (andra än stoppa medicineringen). Kliniker har också ignorerat smak förlust eftersom det har hittills haft föga diagnostiska eller prognostiska värde på egen hand. Men även om mätningen av smak har varit ett bakvatten, kan det nu in mainstream medicin med återupplivandet av en historisk uppskattning att smaken kan vara en diagnostisk eller prognostiska verktyg4,5. Exempelvis kan bitterhet uppfattning förutsäga immunförsvaret6 eller viljan hos en patient att ta medicin7. Biomedicinsk forskare har dock i hög grad försummat smak. Detta ouppmärksamhet kan delvis återspegla det faktum att tidiga framsteg i att förstå denna sensoriska system har sina rötter i experimentell psykologi8, ett fält som de i medicin kan vara relativt obekant. Dessutom har förnyat intresse i smak inlett standardiserade smak metoder9 som bygger på tidigare metoder10, som samtidigt omfattande är långa och olämpligt för kliniska inställningar. Slutligen kan vara förtroendet för smak åtgärder svag eftersom försökspersonerna rapportera om sin egen erfarenhet och validering av sina yttranden har hittills saknats. Vår förhoppning är att en enkel åtgärd som utredare eller kliniker kan enkelt administrera kommer att vinna i popularitet med båda beståndsdelar. Här beskriver vi en enkel smak examen protokoll som har tre delar: en bedömning av munhålan, testet smak och en validering steg med hjälp av medfödda genotyp. Först, vi ge biologiska sammanhang för dessa, som slå samman enkla övningar inom medicin, sensoriska åtgärder från experimentell psykologi och validering av svaren med hjälp av genotyp och genetik.

Smakföreställningen börjar i munnen, så en effektiv smak examen behöver innehålla en kort klinisk bedömning för uppenbara munsjukdomar, rodnad, svullnad och andra missfärgningar. Munhålan innehåller sju underwebbplatser: tungan, gingiva, golvet i munnen, buckala slemhinna, labial slemhinna, hårda gommen och retromolar trigone. Tidigare studier av människors smak fokuserade på friska deltagare eller de med väl definierade sjukdomar, men som smak testning blir rutin i läkarundersökningar, är det viktigt att registrera tillståndet i munhålan som en del av förfarandet.

Tungan själv är en muskulös struktur inneslutet i slemhinna; utspridda över dess dorsala ytan är papiller, de små upphöjda strukturer som ger tungan dess unika konsistens och innehåller smak-receptorceller. Vi klassificera papiller av sin form: fungiform, filiform, BLADLIK och circumvallate. Fungiform papiller (FP) är ligger anterolaterally på tungan och är runda, med en svamp form11. Utredarna har publicerat flera användbara metoder för att kvantifiera FP och vi direkt läsare till dessa källor för mätning protokoll12,13,14,15,16. BLADLIK papiller, formade som sidor i en bok (folia), ligger uteslutande på den laterala bakre tungan yta11. Circumvallate papiller, Funna i den sulcus terminalis av tungan bas, är stora kupol-formade strukturer omgiven av slemhinnor väggar (Latin omständig, ”surround”, + vallum, ”vägg”)11. Den mest talrika papiller, den filiform, är långa och tunna och innehåller inte smak receptorer.

Människor skiljer sig i tungan anatomi. Medan de anatomiska variationen är okänd, bestäms den delvis av medfödda genetiska variation, med utredare rapportering 31% konkordans tungan anatomi bland tvåäggstvillingar tvillingar och 60% konkordans bland monozygota tvillingar17. Papillär densitet skiljer sig också bland människor, och även om det är sällsynt, minst en genetisk sjukdom (familjär dysautonomi) resulterar i en medfödd avsaknad av smak papiller18,19,20. Således innan du utför psykofysisk testning, är det bra att bekräfta förekomsten av FP som en del av den kort bedömningen och notera den relativa storleken och färgen på tungan och bevis på oral sjukdom.

Den smak papiller innehåller de sensoriska celler som när stimuleras initiera smakupplevelse. Människor klarar av avkänning minst fem klasser av smak: salt, surt, bitter, sött och umami. Medan salt, signalera sött och umami smak signalera förekomsten av värdefullt livsmedelskällor som innehåller natriumklorid, glukos och aminosyror, respektive, bitterhet och syrlighet förekomsten av potentiella gifter och syror från bakteriell nedbrytning av mat, respektive, och framkalla aversivt beteende21. Salta och sura smaker är sensorik genom aktivering av jonkanaler som finns i vissa typer av smak celler, även om förståelsen av salt transduktion utvecklas och det kan kräva typ I-celler samt22,23. Bitter, sött och umami uppstår från aktivering av G-proteinkopplade receptorer på typ II smak celler, var anpassade till en viss smak. Heterodimerer av subunits av tre särskilda receptorer transduce sött och umami medan bitter föreningar aktivera en grupp av 25 olika bitter receptorer24. Dessa bittra receptorer kan svara på flera bittra föreningar, och en enda bitter förening stimulerar ofta mer än en receptor25. Trots den senaste utvidgningen av kunskap om den molekylära basen för smak, kan nya vägar26 och nya upptäckter bortom de traditionella fem smak egenskaperna (t.ex., kalcium27 eller fettsyra28 uppfattning) ligga framåt.

Det finns minst två överraskande aspekter av smak familjer receptorer: gener som kodar för dessa receptorer kan skilja sig markant i DNA-sekvensen och därmed fungera bland människor, och många vävnader i kroppen uttrycka dessa gener21,29 , 30 , 31. dessa extraorala platser inkluderar hjärnan, sköldkörtel, övre och nedre luftvägarna och mag-tarmkanalen, bland många andra21,29,30,31. Medan de smakreceptorerna på dessa platser inte deltar i smakföreställningen i traditionell mening, bemärkelse de sannolikt den lokala kemiska miljö29,32. Till exempel cilierade epitel i den övre luftvägarna uttrycker den bittra receptorn T2R38 (Bitter smak Receptor 38), som reagerar på kemiska föreningar produceras av bakterier och påverkar det medfödda immunförsvar32, såsom ökar mukociliär clearance och nivåer av antimikrobiella peptider och kväveoxid. Detta konstaterande har medicinska konsekvenser för kronisk bihåleinflammation, en sjukdom i kronisk bakteriell infektion och inflammation i övre luftvägarna och bihålorna.

Av särskild betydelse för smaken examen som vi beskriver här är att T2R38 bitter smak receptorn, kodas av genen TAS2R38 , uppvisar genetisk variabilitet och därför varierande smak känslighet. Perceptuella skillnader för den bittra förening phenylthiocarbamide (PTC) beskrevs först av kemisten Arthur Fox33; denna förening identifierades senare som en agonist av den T2R38 receptor34. Individuella skillnader uppkommer DNA sekvensen av genen TAS2R38 , som har tre single-nucleotide polymorphisms, varje högproducerande aminosyra substitutioner (A49P, A262V och I296V; A: alanin, P: prolin, V: valin, I: isoleucin). Två gemensamma haplotyper resultera, PAV och AVI, med PAV/PAV individer är mycket känsliga för PTC (”provsmakare”), AVI/AVI individer är relativt okänsliga (”icke-provsmakare”) och heterozygot AVI/PAV individer att vara mer variabel i deras känslighet 35. det finns fler exempel på genetisk variation påverkar bitter uppfattning, t.ex., smak receptor T2R19, kodas av genen TAS2R19 , likaså uppvisar genetisk variabilitet och olika smak känslighet för den bittra föreningen kinin36. Jämväl, variation i TAS2R31 påverkar den upplevda bitterheten av en av den hög styrka sötningsmedel37,38,39.

Här beskriver vi en snabb metod för att karakterisera patientens smaksinne som bygger på hög avkastning protokoll i klinisk medicin, experimentell psykologi och genetik.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

University of Pennsylvania institutionella Review board godkände detta protokoll. Vi exkluderade patienter om de var under 18 år eller var gravida.

1. munhålan utvärdering: Sjukdomen bedömning och Papilla identifiering

  1. Instruera föremål att öppna munnen.
  2. Med hjälp av en ljuskälla som en penlight eller strålkastare, belysa munhålan och undersöka de sju underwebbplatser i området (tungan, golvet i munnen, buckala slemhinna, labial slemhinna, gingiva, hårda gommen och retromolar trigone).
    1. Visualisera den dorsala ytan av tungan. Instruera föremål att lyfta upp tungan, och undersöka de ventrala tungan yta och golvet i munnen, se till att utöka undersökningen posteriort att kindtänderna.
    2. Använder en tungspatel, lateralize motivets kinden för att visualisera den buckala mucosaen, liksom den laterala gingiva bilateralt kring övre och undre tänderna.
    3. Utöka undersökningen anteriorly av lyft övre och nedre läpparna för att visualisera ytbehandlar av den labial slemhinnor och främre gingiva.
    4. Slutligen, visualisera hårda gommen och retromolar trigone.
    5. Observera lesioner, skrubbsår, och massorna eller tecken på inflammation.
    6. Igen, be motivet att öppna munnen och förlänga tungan.
    7. Använd en ljuskälla för att visualisera den dorsala ytan av tungan.
    8. Identifiera närvaron eller frånvaron av FP, t.ex., en smidig tungan yta
  3. Notera resultatet av munhålan undersökningen innan du fortsätter med smak testning. Om utredarna genomföra denna smak prov i medicinska sammanhang, bör oväntade fynd föranleda ytterligare arbete upp.

2. psykofysisk smak testning

Obs: Resurser och beskrivningar för psykofysisk smak testning som följer finns också tillgängliga från följande webbsida: https://osf.io/hn87s/.

  1. Tastant beredning
    1. Bereda lösningar enligt anvisningarna nedan. Gör varje lösning med en mätkolv för att säkerställa precision av koncentrationer till ± 0,0002 M. Lös prover med hjälp av ultrarent vatten. Anpassa valet av föreningar till forskning mål. De föreningar som ingår här är menat som ett exempel.
      1. Denatonium benzoate (bitter): förbereda en stamlösning av 4,99 x 10-3 M Denatoniumbensoat genom upplösning 2.228 g Denatoniumbensoat i 1 L vatten. Tillsätt 180 µL av denna stamlösning till en 500 mL-mätkolv. Tillsätt vatten för att få volymen till 500 mL, producerar en lösning med en slutlig koncentration på 1,8 µM.
      2. PTC (bitter): placera PTC 0.0135 g i en 500 mL-mätkolv. Tillsätt vatten för att få volymen till 500 mL. PTC är svårt att upplösa, så placera en uppståndelse bar i kolven och värm lösningen till 70 ° C på en värmeplatta. Använd fältet uppståndelse för att blanda lösningen tills alla solute har upplöst (~ 15 min). Detta ger en lösning med en slutlig koncentration på 180 µM.
      3. Kinin (bitter): Placera 0,011 g av kinin HCl i en 500 mL-mätkolv. Tillsätt vatten för att få volymen till 500 mL, producerar en lösning med en slutlig koncentration på 56 µM.
      4. Natriumklorid (salt): placera 7,5 g natriumklorid i en 500 mL-mätkolv. Tillsätt vatten för att få volymen till 500 mL, producerar en lösning med en slutlig koncentration på 0,25 M.
      5. Sackaros (sweet): placera 60 g sackaros i en 500 mL-mätkolv. Tillsätt vatten för att få volymen till 500 mL, producerar en lösning med en slutlig koncentration på 0,35 M.
    2. Butikslösningar smak vid 4 ° C. Några vanliga smak föreningar är ljuskänsliga och utredare bör Linda in dem i folie eller annat material för att minska sin exponering för ljus.
    3. För att identifiera vanliga fel i lösning förberedelse, Fyll en välsmakande kopp med den gamla lösningen och en med den nya lösningen. Smaka på varje lösning för att kontrollera de är identiska i styrka.
    4. Inkludera vatten som kontrollösning presenteras i den första positionen att kontrollera ämnen förstå testförfarandet. Presentera ämnen med varje tastant och kontrollen tastant två gånger, försiktigt så att presentera samma tastant i följd. Till exempel för att testa fem unika tastants, har tolv prover i frågeformuläret (se 2.2): de fem tastants och vatten, varje presenteras två gånger. Alikvot 5 mL vatten till enskilda glasampuller scintillation. Etikett injektionsflaska mössor med en mörk blå klistermärke med nummer 1.
    5. Upprepa proceduren för varje tastant. Etikett injektionsflaska caps med en cirkulär klistermärke enligt ordningen för presentation och lite färgkod, exempel nedan; matcha flasketiketterna med etiketter i smak-enkäten (se 2.2).
      Vatten (mörkblå)
      Kinin (ljusblå)
      NaCl (grön)
      PTC (gul)
      Sackaros (orange)
      Denatonium benzoate (röd)
      NaCl (mörkblå)
      Denatonium benzoate (ljusblå)
      Vatten (grön)
      Kinin (gul)
      Sackaros (orange)
      PTC (röd)
    6. Paketet prover genom att placera dem i två lådor, prover 1 – 6 och 7 – 12 i lådor märkta ”fält A” och ”box B”, respektive (figur 1). andra förpackningsstrategier är möjliga.

Figure 1
Figur 1: smaka kit. Ämnen använda kit smak intensitet och kvalitet av olika färgkodade tastants. Fält A innehåller prover 1 – 6, box B innehåller 7 – 12. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

  1. Smak frågeformulär
    1. Förbereda smak enkäten med en kategori-skalan för betyg smak intensitet och ett påtvingat val för att identifiera smak kvaliteten på varje tastant (figur 2).
    2. Cirkulär platsetiketter lämplig färg och antal bredvid lämplig provet i smak frågeformuläret (se 2.1.6).

Figure 2
Figur 2: smaka frågeformulär inträde, bestående av en kategori skala för intensitet värdering och tvingade val svar för tastant kvalitet. Frågeformuläret smak kommer att inkludera en post för varje den färgkodade tastants testat. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

  1. Smak Test Administration
    1. Ge försökspersoner ruta A, box B, en flaska vatten, tom kopp, penna och papper och penna smak frågeformulär som innehåller poster för 12 prover. Använda samma märke av flaskvatten under hela varaktigheten av varje studie. Som ett alternativ till en pappersblankett, port materialet i online-undersökning programvara och administreras via surfplatta eller stationära eller bärbara dator. En Exempelmall finns på https://osf.io/hn87s/.
    2. Instruera patienter att de kommer att bli ombedd att betygsätta både intensitet och kvalitet (t.ex., salt, sur, bitter, Söt eller ingen smak) av varje tastant. Dessutom informera ämnen de inte får uppleva alla kvaliteter.
    3. Förklara testförfarandet, enligt följande: Skölj munnen två gånger med vatten och spotta ut i cupen som tillhandahålls. Häll alla prov 1 i din mun och håll den där i 5 sekunder innan spotta lösningen i koppen. Gurgla eller inte svälja lösningen. Cirkel en av 13 vertikala raderna motsvarar provets intensitet, på en skala från 0 till 12, från ”ingen intensitet alls” till ”extremt intensiv” och välja en enda kvalitet att beskriva smaken. Efteråt, skölj munnen med vatten två gånger innan du fortsätter till nästa provet.
    4. Observera föremål provsmakning och betyg prov 1 (vatten). Bör den värdering avviker från ”ingen intensitet alls” och ”ingen smak”, upprepa instruktionerna frågeformulär innan testet för att fortsätta.
    5. Granska färdiga enkäten för fullständighet.
    6. Poäng intensitet betyg på en skala från 0 till 12 från de vertikala linjerna som försökspersonerna inringad. Genomsnitt två intensitet betygen för varje tastant; Detta värde används för analys.

3. genotyp

  1. Samla in saliv från varje använder en saliv DNA collection kit.
  2. Rena genomiskt DNA från provet genom att följa tillverkarens anvisningar.
  3. Bestämma TAS2R38 genotyp använder SNP genotypning analyser (rs713598, rs1726866, rs10246939)40.
  4. Bestämma TAS2R19 genotyp använder SNP genotypning analyser (rs10772420)36.

4. genotyp-fenotyp validering

  1. Granska de tillgängliga poolade kontrolldata från över 800 ämnen genotypbestämts för TAS2R38 (rs713598, rs1726866, rs10246939) och TAS2R19 (rs10772420) på följande webbsida: https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/.
  2. Baserat på motivets TAS2R38 genotyp, jämför hans eller hennes psykofysisk smak svar för bitter förening PTC med normerna för individer av samma genotyp. Svaren ska matcha; dock i sällsynta fall kan TAS2R38 genotyp inte perfekt förutsäga PTC sensoriska resultat35.
  3. Svaren bör och visar betydande avvikelser, jämför motivets smak svar för kinin med normerna för individer av samma TAS2R19 genotyp. Svaren för kinin intensitet och genotyp ska matcha36. Bör alla smak resultat inte överensstämmer med genotyp, är det möjligt att ämnet (a) inte förstår uppgiften (b) att tillhandahålla falska betyg eller simulering eller (c) det har varit ett data collection fel hos utredaren.
  4. Identifiera data punkt outliers, och kanske utesluta dem från analys (figur 3). Korrespondens av sensoriska resultat med objektiva genotypning validerar tillförlitligheten av psykofysisk testförfarandet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Resultat från testet av smak har slagits samman för alla ämnen utvärderas (n = 840) och presenteras efter segregering av genotyp. Hela datamängden nås på https://carayata.shinyapps.io/TasteBoxplots/ och kan granskas för varje tastant bedömas och för TAS2R38 och TAS2R19 genotyper. Resultaten bekräftar förekomsten av perceptuella smak skillnader för PTC bland försökspersoner grupperade efter TAS2R38 receptor genotyp (figur 3). Betyg av PTC intensiteten skiljer sig avsevärt över TAS2R38 genotyper (AVI/AVI, 0,86; AVI/PAV, 6,95; PAV/PAV, 8.18; envägs ANOVA, p < 0,0001). Resultaten av kinin intensiteten skiljer sig också avsevärt över TAS2R19 genotyp (a: a, 3,77; A, 3,08; G, 2,26; envägs ANOVA, p < 0,0001).

Figure 3
Figur 3: PTC smak enkätresultat av TAS2R38 genotyp. Smak enkäten kan användas att segregera individer av TAS2R38 genotyp baserat på PTC bitterhet intensitet betyg i kategorin skala (* p < 0,0001). Här ser vi några avvikare, datapunkter ligger utanför stängsel (”morrhår”) av denna boxplot (t.ex., utanför 1,5 gånger interkvartilintervall ovanför övre kvartilen och nedan den lägre kvartilen) vänligen klicka här för att visa en större version av denna Figur.

Metriska Smak Hörsel Vision Hörsel/smak Vision/smak
PubMed 36,302 123,101 171,522 3.39 4.72
NIH Reporter 6,144 23,873 54,858 3.89 8,93
Vi har utfört en sökning i PubMed och NIH Reporter med en viss känsla som ett nyckelord. PubMed är en online databas av publicerade experimentella resultat och NIH Reporter är en online databas att listor forskningsprojekt som finansieras genom National Institutes of Health. Värden i kolumnen ' Hörsel/smak' visar förhållandet, dvs, det finns över tre gånger så många publikationer referera till förhandlingen jämfört med smak. Vi nås webbadresserna nedan på 31 januari 2018 på 10 am EST.
https://www.ncbi.NLM.NIH.gov/pubmed/
https://projectreporter.NIH.gov/reporter.cfm

Tabell 1: Poster identifieras med hjälp av 'Smak' kontra 'Höra' och 'Vision' som sökord.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Betydelsen av denna metod är att den använder ett multidisciplinärt angreppssätt med funktioner från medicin (muntlig tentamen), experimentell psykologi (testet smak) och genetik (en valideringsstegen). Smak information är benägna att utveckla som diagnostiska och prognostiska verktyg eftersom smak ger ett fönster in i funktionen av proteiner någon annanstans i kroppen. Från experimentell psykologi synpunkt, kan tillägg av en enkel tentamen identifiera patienter som inte är lämpliga för studier av normativa smak funktion. Från en genetik synvinkel ger dessa förfaranden ett enkelt sätt att studera enkelt reproducerbar genotyp-fenotyp relationer.

Mäta människors smak har flera kritiska funktioner som är immateriella, men viktiga, bland annat hjälpa motivet känner på lätta och orienterade till uppgiften, och särskilt i medicinsk inställningar, att hålla förfarandet som är kort, så uppmärksamhet av ämnet inte WAVER. Det är också viktigt att ingripa om ämnen visas obekväm, och felsöka deras oro, såsom när det gäller arten av de provning stimuli. Motiven är ofta lugnad av att lära sig att de flesta av de testning stimuli är i livsmedel, t.ex., salt och socker. Detta förfarande, medan enkla, har betydande begränsningar. Medan den muntliga examen är rutin för utredare med medicinsk utbildning, är de med experimentell psykologi eller genetik utbildning sannolikt att vara mindre lättköpt på att känna igen oral sjukdom. En annan begränsning är den skala som samtidigt som lätt kan förstås av försökspersoner med ingen tidigare utbildning, kan skymmer skillnaderna mellan individer, eller grupper av individer41. Slutligen, vägledning om hur man behandlar patienter med missmatchningar mellan genotyp och fenotyp i den statistiska behandlingen av uppgifterna är inte ännu kodifierats till enkla regler, t.ex., att lämna ämnen som inte uppfyller vissa kriterium.

Inför framtida tillämpningar, kan smak examina bli rutinmässig delar av medicin som syn och hörseltest, som skulle öka vår förståelse av hur smak relaterar till mänskliga sjukdomar och välbefinnande och ger oss möjlighet att förfina detta enkla test.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

NAC och KVR är samtidig uppfinnare på ett patent under granskning (terapi och diagnostik för respiratorisk infektion 61/697,652, WO2013112865).

Acknowledgments

Utmärkelser från National Institutes of Health stöds denna forskning (R01DC013588 till NAC, R21DC013886 till NAC och KVR och NIDCD administrativa forskning tillägg att främja uppkomsten av klinikern-forskare i Chemosensory forskning till JED). Vi samlat genotyp data från utrustning som köpts delvis med NIH medel från OD018125.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Disposable diagnostic penlight Primacare DL-9223
UltraLite Pro headlight Integra LifeSciences AX2100BIF
Millipore Q-Gard 2 water purification system EMB Millipore QGARD00D2
Denatonium benzoate  Sigma Aldrich D5765
Phenylthiocarbamide Sigma Aldrich P7629
Quinine hydrochloride dihydrate Sigma Aldrich Q1125
Sodium Chloride Sigma Aldrich S1679
Sucrose Sigma Aldrich S0389
Glass scintillation vials Thomas Scientific 1230L59 Same as Wheaton catalog no. 986580
Oragene Discover OGR-500 DNA collection kit DNA Genotek OGR-500
prepIT L2P Protocol reagents DNA Genotek PT-L2P-5
rs713598 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___8876467_10
rs1726866 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___9506827_10
rs10246939 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___9506826_10
rs10772420 TaqMan SNP genotyping assay ThermoFisher Scientific C___1317426_10

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Cowart, B. J., Young, I. M., Feldman, R. S., Lowry, L. D. Clinical disorders of smell and taste. Occupational Medicine. 12 (3), 465-483 (1997).
  2. Ackerman, B. H., Kasbekar, N. Disturbances of taste and smell induced by drugs. Pharmacotherapy. 17 (3), 482-496 (1997).
  3. Kveton, J. F., Bartoshuk, L. M. The effect of unilateral chorda tympani damage on taste. Laryngoscope. 104, 25-29 (1994).
  4. Fischer, R. A., Griffin, F. Pharmacogenetic aspects of gustation. Drug Research. 14 (14), 673-686 (1964).
  5. Joyce, C. R., Pan, L., Varonos, D. D. Taste sensitivity may be used to predict pharmacological effects. Life Science. 7 (9), 533-537 (1968).
  6. Adappa, N. D., et al. Genetics of the taste receptor T2R38 correlates with chronic rhinosinusitis necessitating surgical intervention. International Forum of Allergy & Rhinology. , (2013).
  7. Lipchock, S. V., Reed, D. R., Mennella, J. A. Relationship between bitter-taste receptor genotype and solid medication formulation usage among young children: a retrospective analysis. Clinical Therapeutics. 34 (3), 728-733 (2012).
  8. Bartoshuk, L. M. Handbook of perception: Tasting and smelling. Carterette, E. C., Friedman, M. P. , Academic Press. Vol. VIA 2-18 (1978).
  9. Coldwell, S. E., et al. Gustation assessment using the NIH Toolbox. Neurology. 80 (11 Suppl 3), S20-S24 (2013).
  10. Mueller, C., et al. Quantitative assessment of gustatory function in a clinical context using impregnated "taste strips". Rhinology. 41 (1), 2-6 (2003).
  11. Reed, D. R., Tanaka, T., McDaniel, A. H. Diverse tastes: Genetics of sweet and bitter perception. Physiological Behavior. 88 (3), 215-226 (2006).
  12. Miller, I. J. Jr, Reedy, F. E. Jr Variations in human taste bud density and taste intensity perception. Physiological Behavior. 47 (6), 1213-1219 (1990).
  13. Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue. Brain Research. 1052 (2), 196-201 (2005).
  14. Spielman, A. I., Pepino, M. Y., Feldman, R., Brand, J. G. Technique to collect fungiform (taste) papillae from human tongue. Journal of Visualized Experiments. 18 (42), 2201 (2010).
  15. Nuessle, T. M., Garneau, N. L., Sloan, M. M., Santorico, S. A. Denver papillae protocol for objective analysis of fungiform papillae. Journal of Visualized Experiments. (100), e52860 (2015).
  16. Sanyal, S., O'Brien, S. M., Hayes, J. E., Feeney, E. L. TongueSim: development of an automated method for rapid assessment of fungiform papillae density for taste research. Chemical Senses. 41 (4), 357-365 (2016).
  17. Spielman, A. I., Brand, J. G., Buischi, Y., Bretz, W. A. Resemblance of tongue anatomy in twins. Twin Research and Human Genetics. 14 (3), 277-282 (2011).
  18. Kalmus, H., Smith, S. M. The antimode and lines of optimal separation in a genetically determined bimodal distribution, with particular reference to phenylthiocarbamide sensitivity. Annals of Human Genetics. 29 (2), 127-138 (1965).
  19. Pearson, J., Finegold, M. J., Budzilovich, G. The tongue and taste in familial dysautonomia. Pediatrics. 45 (5), 739-745 (1970).
  20. Fukutake, T., et al. Late-onset hereditary ataxia with global thermoanalgesia and absence of fungiform papillae on the tongue in a Japanese family. Brain. 119 (Pt 3), 1011-1021 (1996).
  21. Kinnamon, S. C. Taste receptor signalling - from tongues to lungs. Acta physiologica. 204 (2), Oxford, England. 158-168 (2012).
  22. Lewandowski, B. C., Sukumaran, S. K., Margolskee, R. F., Bachmanov, A. A. Amiloride-insensitive salt taste is mediated by two populations of type iii taste cells with distinct transduction mechanisms. Journal of Neuroscience. 36 (6), 1942-1953 (2016).
  23. Vandenbeuch, A., Clapp, T. R., Kinnamon, S. C. Amiloride-sensitive channels in type I fungiform taste cells in mouse. BMC Neuroscience. 9, 1 (2008).
  24. Margolskee, R. F. The biochemistry and molecular biology of taste transduction. Current Opinions in Neurobiology. 3 (4), 526-531 (1993).
  25. Meyerhof, W., et al. The molecular receptive ranges of human TAS2R bitter taste receptors. Chemical Senses. 35 (2), 157-170 (2010).
  26. Yee, K. K., Sukumaran, S. K., Kotha, R., Gilbertson, T. A., Margolskee, R. F. Glucose transporters and ATP-gated K+ (KATP) metabolic sensors are present in type 1 taste receptor 3 (T1r3)-expressing taste cells. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. , (2011).
  27. Tordoff, M. G. Calcium: taste, intake and appetite. Physiological Review. 81, 1567-1597 (2001).
  28. Reed, D. R., Xia, M. B. Recent advances in fatty acid perception and genetics. Advances in Nutrition. 6 (3), 353S-360S (2015).
  29. Blekhman, R., et al. Host genetic variation impacts microbiome composition across human body sites. Genome Biology. 16, 191 (2015).
  30. Hoon, M. A., et al. Putative mammalian taste receptors: a class of taste-specific GPCRs with distinct topographic selectivity. Cell. 96 (4), 541-551 (1999).
  31. Laffitte, A., Neiers, F., Briand, L. Functional roles of the sweet taste receptor in oral and extraoral tissues. Current Opinion in Clinical Nutrition and Metabolic. 17 (4), 379-385 (2014).
  32. An, S. S., et al. Tas2r activation promotes airway smooth muscle relaxation despite beta2-adrenergic receptor tachyphylaxis. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular. , (2012).
  33. Fox, A. L. The relationship between chemical composition and taste. Science. 74, 607 (1931).
  34. Fox, A. L. The relationship between chemical constitution and taste. Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 18, 115-120 (1932).
  35. Bufe, B., et al. The molecular basis of individual differences in phenylthiocarbamide and propylthiouracil bitterness perception. Current Biol.ogy. 15 (4), 322-327 (2005).
  36. Reed, D. R., et al. The perception of quinine taste intensity is associated with common genetic variants in a bitter receptor cluster on chromosome 12. Human Molecular Genetics. 19 (21), 4278-4285 (2010).
  37. Bobowski, N., Reed, D. R., Mennella, J. A. Variation in the TAS2R31 bitter taste receptor gene relates to liking for the nonnutritive sweetener Acesulfame-K among children and adults. Science Reports. 6, 39135 (2016).
  38. Allen, A. L., McGeary, J. E., Knopik, V. S., Hayes, J. E. Bitterness of the non-nutritive sweetener acesulfame potassium varies with polymorphisms in TAS2R9 and TAS2R31. Chemical Senses. 38 (5), 379-389 (2013).
  39. Roudnitzky, N., et al. Genomic, genetic, and functional dissection of bitter taste responses to artificial sweeteners. Human Molecular Genetics. 20 (17), 3437-3449 (2011).
  40. Guo, S. W., Reed, D. R. The genetics of phenylthiocarbamide perception. Annals in Human Biology. 28 (2), 111-142 (2001).
  41. Bartoshuk, L. M., et al. Labeled scales (e.g., category, Likert, VAS) and invalid across-group comparisons: what we have learned from genetic variation in taste. Food Quality Prefererences. 14 (2), 125-138 (2003).

Tags

Medicin fråga 138 psykofysiken mänskliga tungan smak celler TAS2R38 phenylthiocarbamide psykofysisk smak testning
Smak prov: En kort och validerade Test
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Douglas, J. E., Mansfield, C. J.,… More

Douglas, J. E., Mansfield, C. J., Arayata, C. J., Cowart, B. J., Colquitt, L. R., Maina, I. W., Blasetti, M. T., Cohen, N. A., Reed, D. R. Taste Exam: A Brief and Validated Test. J. Vis. Exp. (138), e56705, doi:10.3791/56705 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter