Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Een Model van de Rat van milde uteriene hypoperfusie met Microcoil stenose

10.4K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/56723

⸱

7 januari 2018

 ,  ,  ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

Milde uteriene hypoperfusie werd geproduceerd door slagader stenose met metalen microcoils gewikkeld rond de bloedvaten van de baarmoeder en eierstokken bij ratten ten embryonale dage 17. Deze procedure geproduceerd prenatale hypoperfusie en uteriene groei beperking.

Samenvatting

Uteriene hypoperfusie/ischemie is een van de belangrijkste oorzaken van een laag geboortegewicht, beperking van de uteriene/foetale groei en vroeggeboorte. De meeste studies van dit verschijnsel zijn uitgevoerd in beide modellen met ernstige uteriene ischemie of modellen met de mate van kleurovergang van de uteriene hypoperfusie. Geen enkele studie is uitgevoerd in een model op uniforme milde uteriene hypoperfusie (MIUH). Twee modellen zijn gebruikt voor studies van MIUH: een model gebaseerd op hechtdraad Afbinding van beide zijden van de arteriële arcade gevormd met de baarmoeder en eierstokken slagaders en een voorbijgaande model gebaseerd op de bilaterale ovariële slagaders en de aorta, hebben bij knippen. Die twee knaagdier modellen van MIUH hebben enkele beperkingen, bijvoorbeeld niet alle foetussen zijn onderworpen aan MIUH, afhankelijk van hun positie in de baarmoeder-hoorn. In ons MIUH model, zijn alle foetussen onderworpen aan een vergelijkbaar niveau van anticonceptie hypoperfusie. MIUH werd bereikt door milde stenose van alle vier slagaders voeden de baarmoeder, dat wil zeggen, de bilaterale baarmoeder en eierstokken slagaders.

Arteriële stenose was geïnduceerd door metalen microcoils gewikkeld rond de voeding slagaders. Het produceren van arteriële stenose met microcoils ons toegestaan om te controleren, optimaliseren en reproduceren van verminderde doorbloeding met zeer weinig spreiding over de dieren en een laag sterftecijfer, waardoor nauwkeurige evaluatie. Toen microcoils met een binnendiameter van 0,24 mm werden gebruikt, de bloedstroom in de placenta en foetus was mild daalde (ongeveer 30% van het niveau pre stenose in de placenta). De nakomelingen van ons MIUH model toont duidelijk aan dat langdurige wijzigingen in neurologische, neuroanatomische en gedragsmatige testresultaten.

Inleiding

Zuigelingen met uteriene groei beperking (IUGR) (ook bekend als foetale groei beperking) (geboorte gewicht <10 percentiel voor zwangerschapsduur ), vroeggeboorte (geboren op < 37 weken van de dracht) en/of lage gewicht (< 2500 g) account voor de geboorte bijna 10% van alle pasgeborenen 2,3. Veel van deze zuigelingen presenteren met neurologische problemen zoals hersenverlamming en ontwikkelingsstoornissen (bijvoorbeeld aandacht-deficit/hyperactivity disorder (ADHD) en leerstoornissen) 3,4,5. Deze voorwaarde....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle experimenten werden uitgevoerd volgens protocollen die zijn goedgekeurd door de experimentele Animal Care en gebruik van het Comité van de nationale cerebrale en cardiovasculair centrum, Suita, Japan.

1. voorbereiding van de volgende dieren en materialen voor MIUH chirurgie

  1. Bereiden van getimede zwangere Sprague-Dawley ratten op zwangerschapsduur dag 17, dat wil zeggen, embryonale dag 17 (E17). De dammen gemiddelde lichaam gewichten zijn 307.0 ± 40.7 g (bedoel ± SD, n = 9).
  2. Bereiden van metalen microcoils; binnendiameter 0,24 mm, gemaakt van goud-gecoat staal.
  3. Alle materialen volgens de tabel van ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Na het toepassen van microcoils voor de bloedvaten voeden de baarmoeder, dat wil zeggen, de bilaterale baarmoeder en eierstokken slagaders, allemaal worden al foetussen onderworpen aan vergelijkbare niveaus van hypoperfusie. Milde stenose van de slagaders, waardoor een lichte afname van de bloedtoevoer naar de placentas en foetussen zorgt ervoor dat de toepassing van microcoils met een binnendiameter van 0,24 mm (Figuur 3; ongeveer 30% van het niveau pre sten.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De microcoil stenose van zowel de eierstokken en de baarmoeder slagaders in beide baarmoeder horens produceert consistente en reproduceerbare uteriene hypoperfusie in alle placentas en foetussen. Het niveau van hypoperfusie kan worden gewijzigd met behulp van microcoils met verschillende diameters van de innerlijke. Rat pups geboren uit een dam die slagader stenose is uitgevoerd met microcoils 0,24 mm binnendiameter tonen IUGR en vroeggeboorte (zie referentie 1 voor details). De pups vertonen neuroanatomische en gedragsm.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Dit werk werd gesteund door het uitwisselingsprogramma voor FY 2013 onderzoek tussen JSPS en CNRS, JSPS KAKENHI Grant nummer 26860858 en de Narishige Neuroscience Research Foundation. Wij danken Drs. Mariko Harada-Shiba en Kyoko Shioya voor nuttige discussies. Wij danken Mari Furuta, Mutsumi Sakamoto, Ritsuko Maki en Dr. Emi Tanaka voor uitstekende technische bijstand.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Stereomicroscoop
Isofluraannarkoseapparaat
Anesthesie-inductiebox
Verwarmingskussen
Luipaard 30x40 cm
Depilatiefoam of scheerapparaat
Jodiumdesinfectieoplossing
Gaas 10x20 cm 
Chirurgisch scherm 45x45 cm met een ronde opening van 5 cm in diameter
Spuitfles met ethanol voor desinfectie
Wattenstaafje
Pincet met grote stompe uiteinden
Pincet met schuine fijne uiteinden
Schaar
Chirurgisch scalpel, mesjesmaat is 27 mm lang (nr.10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japan)
Chirurgische hechtnaald
Metaal microspoelen; binnendiameter 0,24 mm, gemaakt van goud gecoat staal (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japan)
Zijdedraad 4-0
Steriele zoutoplossing (0,9% natriumchloride)
Verwarmd waterbad
Kunststof spuiten (50 ml) en naalden (18G)

Referenties

  1. Ohshima, M., et al. Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity. Sci Rep. 6, 39377(2016).
  2. Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from: http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Uterine en ovariale arteriënarteriële stenosereductie van de bloedstroomfoetale groerestrictiechirurgische interventieplacentaire bloedstroomintra-uteriene groerestrictie