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Neuroscience

Visuelle evozierte möglichen Aufnahmen bei Mäusen mit einer trockenen nichtinvasive Mehrkanal Scalp EEG Sensor

Published: January 12, 2018 doi: 10.3791/56927

Summary

Wir entwarfen einen trocken-Typ 16-Kanal EEG Sensor, der nicht-invasiven, verformbar und wiederverwendbar ist. Dieses Whitepaper beschreibt den gesamten Prozess von der Herstellung der geplante EEG-Elektrode zur Signalverarbeitung von visuell evozierten Potentiale (VEP) Signale auf eine Maus Kopfhaut mit einem trockenen nichtinvasive Multi-Kanal EEG Sensor gemessen.

Abstract

Wir haben für Kopfhaut EEG Forschungsumgebungen mit Labormäusen entwickelt einen trocken-Typ 16-Kanal EEG Sensor ist nicht-invasiv, verformbar und wiederverwendbar wegen der strukturellen Facette Kolben Federhaus und mechanische Festigkeiten aus Metall Materialien. Der gesamte Prozess für den Erwerb der VEP Antworten in Vivo von einer Maus besteht aus vier Schritten: (1) Sensor-Baugruppe, (2) tierische Vorbereitung und (3) VEP-Messung (4) Signalverarbeitung. Dieser Beitrag stellt repräsentative Messungen der VEP Antworten von mehrere Mäuse mit einer Submicro Spannungssignal Auflösung und Sub-hundert Millisekunden Zeitauflösung. Obwohl die vorgeschlagene Methode sicherer und komfortabler ist im Vergleich zu anderen tierische EEG übernehmende Methoden bereits berichtet, gibt es noch Themen wie wie das Signal-Rausch-Verhältnis zu verbessern und wie Sie diese Technik mit frei beweglichen Tieren anwenden. Die vorgeschlagene Methode leicht verfügbare Ressourcen nutzt und zeigt eine sich wiederholende VEP-Antwort mit einem zufrieden stellenden Signalqualität. Daher könnte diese Methode für experimentelle Längsschnittstudien und zuverlässige translationale Forschung Nutzung nicht-invasive Paradigmen verwendet werden.

Introduction

Als die Zahl der Patienten mit senile degenerativen Hirnerkrankungen wie Schlaganfall, Demenz, Alzheimer und Parkinson-Syndrome mit einer alternden Bevölkerung und eine steigende Lebenserwartung gestiegen hat die langfristige gesellschaftliche Belastung dieser Krankheiten 1,2,3erhöht. Darüber hinaus werden die meisten Entwicklungsstörungen Krankheiten wie Schizophrenie und Autismus, von kognitiven und Verhaltensstörungen begleitet, die ein Patient ganzes Leben2,3,4beeinflussen. Aus diesem Grund kämpfen Forscher, Diagnose, Prävention, pathologische Verständnis, Langzeit-Beobachtung und Behandlung von Erkrankungen des Gehirns zu verbessern. Probleme bleiben jedoch aus Komplexität und unrevealed Krankheit Krankheiten des Gehirns. Translationaler Forschung möglicherweise ein viel versprechendes Instrument zur Identifizierung von Lösungen, da es, die Übertragung der Grundlagenforschung in klinische Anwendungen innerhalb eines kürzeren Zeitraums, zu niedrigeren Kosten und mit einer höheren Erfolgsquote in Neurowissenschaften Felder5 ermöglicht ,6,7. Ein weiteres Ziel der translationalen Forschung soll Anwendbarkeit an Probanden, zu prüfen, die nicht-invasive experimentelle Ansätze bei Tieren erfordert, die Vergleiche mit der gleichen Methode für den Menschen. Diese Bedingungen führten zu mehreren erheblicher Bedarf für die Entwicklung der nicht-invasiven Tier Zubereitungsmethoden. Eine Methode ist die Elektroenzephalographie (EEG), welche zeigt kortikalen Gehirn Konnektivität und Aktivität zweidimensional mit hoher zeitlicher Auflösung, und welche Vorteile aus einer nicht-invasiven Protokoll. Die veranstaltungsbezogenen mögliche Aufnahme (ERP) ist eine der typischen experimentellen Paradigmen, die EEG zu nutzen.

Zahlreiche frühere Studien beschäftigte nichtinvasive EEG Methoden für targeting Menschen Themen, während invasive Methoden, wie z. B. Implantat-Schrauben und Pol Art Elektroden, wurden verwendet in tierexperimentellen Studien8,9,10 , 11 , 12. die Signalqualität und Merkmale dieser Methoden auf die Invasivität der Sensor Platzierung deutlich angewiesen sind. Für die erfolgreiche translationale Forschung, Garner betonte, mit den gleichen Bedingungen für Tier-Studie für Humanforschung13verwendet. Für die Grundlagenforschung, die Verwendung von Tieren sind nicht-invasive EEG Methoden jedoch nicht weit verbreitet. Ein neuer Ansatz mit einem nicht-invasive Scalp EEG Sensorsystem mit Schwerpunkt auf Labormäusen wäre ein zuverlässiges und effizientes Werkzeug für die translationale Forschung, die für den Menschen, als auch auf die nicht-invasive Paradigmen angewendet werden können.

Zahlreiche Studien an Mäusen EEG führte der Weg durch die Kommerzialisierung PCB (Printed Circuit Board) basierte Mehrkanal Elektroden14,15,16. Obwohl sie eine invasive Methode angenommen, hatte sie eine begrenzte Anzahl von Kanälen (3-8), wodurch es schwieriger, große Gehirn Dynamik zu beobachten. Darüber hinaus können Anwendungen durch ihre Invasivität und die hohen Kosten beschränkt werden. In einer anderen Studie die KIST (Korea Institute of Science and Technology) entwickelt eine 40 Kanal Polyimid-basierte Dünnschicht-Elektrode und befestigte es an einer Maus Schädel17,18,19,20 . Diese Arbeit hat die höchste Zahl der Maus EEG-Kanäle erworben. Es war jedoch mechanisch schwach und nicht leicht zu verwenden; Daher war es ungeeignet für Langzeitbeobachtungen, führt zu einem geschwächten Signal, möglicherweise durch eine Immunreaktion verursacht. Unterdessen erworbene Troncoso und Mégevand ein sensorisch evozierten Potentiale (SEP) auf Nagetiere Schädel mit zweiunddreißig Edelstahl-Elektroden gesichert durch eine perforierte Poly(methyl methacrylate) (PMMA, Acrylglas) Raster21,22 , 23. trotz ihrer hohen Signalqualität waren die Elektroden mechanisch flexible und zart; Daher hatten sie Schwierigkeiten, die auf mehrere Experimente angewendet wird. Darüber hinaus wurde diese Methode immer noch minimal-invasive. Obwohl diese Methoden bieten gute Signalqualität, die Fläche von einer Maus Schädel ist begrenzt, daher ist die Anzahl der Elektroden über eine Edelstahl-polig-Elektrode eingeschränkt. Eine Reihe von früheren EEG-Studien für Mäuse zeigten mehrere Einschränkungen. In der vorliegenden Studie zeigen wir eine neue Methode zur Messung von EEG in der präklinischen translationale Forschung mit einem nicht-invasive trocken-Typ Multi-Kanal-Sensor anwendbar.

Um die Grenzen der bisherigen tierischen EEG Methoden, zu überwinden, die die innere Komplexität der tierischen Vorbereitung, Invasivität, hohe Kosten, Verschwendung und schwache mechanische Festigkeit enthalten, haben wir versucht, eine neue Elektrode zu entwickeln, die Exponate Flexibilität, trockene Art Status, Multi-Channel-Funktionen, nicht-Invasivität und Wiederverwendbarkeit. In das folgende Protokoll beschreiben wir den Prozess der visuellen evozierte Potenzial (VEP) Aufnahmen auf eine Maus Kopfhaut mit einem trockenen, nicht-invasive, Multi-Kanal EEG Sensor messen. Diese Methode nutzt leicht verfügbare Ressourcen, daher senkt die Eintrittsbarriere in Tierversuchen im Bereich Biomedical Engineering.

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Protocol

Tierbetreuung und Handhabung folgten die institutionellen Richtlinie von Gwangju Institute of Science und Technology (GIST).

Hinweis: Das Verfahren für den Erwerb von den VEP-Signal von einer Maus in Vivo besteht aus vier Schritten: (1) Sensor-Baugruppe, (2) tierische Vorbereitung und (3) VEP-Messung (4) Signalverarbeitung.

1. Sensor-Baugruppe

  1. Eine nicht-invasive Elektrode 16 Pins vorbereiten.
    Hinweis: Jede Pin-Typ-Elektrode besteht aus drei Teilen: einem Sonde Kopf Kolben, eine interne Feder und ein Fass wie in Figur 1adargestellt. Die Länge der einzelnen Pins beträgt 13 mm, und die verstellbare Feder-Vorspannung beträgt 1 mm.
  2. Schneiden Sie zwei Stücke von Glassubstraten Faser (Dicke: 1,5 mm) mit der Größe von 15 mm × 17 mm (Breite × Höhe).
    Hinweis: Die nichtleitenden Fiberglas Substrat dient als Isolator, trennt die mehrere Signale gleichzeitig von der Maus Kopfhaut erworben.
  3. Sechzehn Löcher machen mit 1,2 mm Durchmesser verwenden ein Präzisions-Graviermaschine, wie in Abbildung 1 cgezeigt.
    1. Die Koordination der Sonde gleichmäßig im Abstand von 2 mm auf das flache Substrat verteilt: + 7/0, + 2 + /-2, 2/0, + 2 / + 2, 0 /-4, 0 /-2, 0/0 (Bregma), 0 / + 2, 0 / + 4,-2 /-3,-2 /-1,-2 / + 1,-2 / + 3,-4 /-2,-4/0 ,-4 / + 2 (Anteroposterior/Lateral mit Grundlage der Bregma, in mm)24,25,26.
  4. Stapeln Sie zwei Substrate und Tropfen Sie ein schnell wirkendes Klebstoff Leim zwischen Substrat Schichten, produzieren eine Doppelschicht von 3 mm Dicke unterstützen sechzehn stabilere und parallele Elektroden während der Signalerfassung.
  5. Die sechzehn Elektroden auf das Substrat eins nach dem anderen manuell zusammenzubauen.
    Hinweis: Die kleineren Lochdurchmesser stoppt jede Elektrode auf die gleiche Länge. Jeder Durchmesser ist etwas kleiner als die dicksten Durchmesser eines Fasses innerhalb der einzelnen Pin (1,3 mm) ermöglicht die enge Befestigung der Elektroden ohne jede Lockerung.
  6. Löten und jede Elektrode Endung Lot-Cup Teil mit dem Touch-Beweis-Anschluss zu verbinden.
  7. Bedecken Sie und verstecken Sie die nackte Kreuzungen mit Hitze-Schrumpf-Schläuche zur elektrischen Isolation.

2. tierische Vorbereitung

  1. Die Maus mit einer intraperitonealen (i.p.) Injektion von Ketamine:xylazine 100:10 zu betäuben (100 mg / mL:10 mg/mL) Mischung mit der Menge von 10 µL/g Körpergewicht.
    Hinweis: Überprüfen Sie, dass das Tier Anästhesie ausreicht durch ziehen ein Bein oder Optimierungen der Schweif vor Beginn der Vorbereitung.
  2. Gelten Sie Augensalbe um die Maus Hornhaut mit einem Wattestäbchen feucht zu halten.
  3. Entfernen Sie die Haare um den Kopf und Schultern mit einem Haarschneider verbreiten Sie im Handel erhältlichen Enthaarungscreme zu und bewahren Sie es auf diesem Gebiet für 3-4 min.
  4. Entfernen Sie die angewandte Enthaarungsmittel mit einem Spachtel zu, und wischen Sie dann den Rest mit Feuchttücher Anwendung Wasser mehrmals.

(3) VEP-Messung

Hinweis: Die gesamte VEP Messvorgang fand in einem dunklen Faraday-Käfig (breite × Tiefe × Höhe: 61 × 61 × 60 cm).

  1. Montieren Sie die Maus-Kopf auf der stereotaktischen Rahmen indem Ohr Bars in der Maus Gehörgänge und festziehen genau an der Stelle.
  2. Montieren Sie den Sensor in den maßgeschneiderten Elektrodenhalter (Abbildung 1 b) und fixieren Sie den Sensorhalter auf der stereotaktischen Rahmen, wie in Abbildung 1 dgezeigt.
  3. Suchen Sie den flexiblen EEG Sensor, unter Berücksichtigung der Referenzposition Elektrode und der Bregma Position27. Danach senken Sie sehr sorgfältig den Sensor in vertikaler Richtung, so dass die Elektrode angeordneten Kolben der Maus Kopfhaut gleichmäßig auf den gebogenen Rand kontaktieren.
    Hinweis: Der abgesenkte Abstand ist kleiner als 1 mm, was die einstellbare Länge des Kolbens ist.
  4. Kontrollieren, ob die Impedanzen innerhalb der Reichweite von 100 kΩ, 2 MΩ. Positionieren Sie die Elektrode, wenn Impedanzwert des Stiftes aus der Reihe28.
  5. Positionieren Sie den Foto-Stimulator 20 cm weg von der Maus Augen.
  6. Passen Sie vor Beginn des Experiments die Maus für 10 min in den dunklen Käfig für dunkle optische Anpassung.
    1. Legen Sie die Parameter der experimentelle Geräte wie folgt: Sampling-Frequenz: 500 Hz; Notch Filter: 60 Hz; Inter-Stimulus-Intervall: 10 s; Blitzdauer: 10 ms; Anzahl der Flash-Reize: 100 Studien/Thema.
      Hinweis: Das Blinken der LED ist ein weißes Licht LED-Beleuchtung die 550 ± 20 % lx mit einem Abstand von 20 cm hat.

(4) VEP Antworten Signalverarbeitung Verfahren

  1. Epoching
    1. Für serielle Daten kontinuierlich zu messen, zu extrahieren, jede Epoche um Single-Trial VEP Segmente aus der Zeit vor Stimulus (-300 ms) auf die Zeit nach dem Stimulus (600 ms), basierend auf der Flash-Impuls-Ausbruch zu erstellen.
      Hinweis: Da wir immer wieder Flash-Stimulation bieten mehr als 100 Studien für jedes Fach, insgesamt 100 VEP Epochen für jede Maus werden in diesem Schritt extrahiert. EEG-Epoching ist ein Prozess, in dem bestimmte Zeitfenster aus der kontinuierlich gemessenen EEG-Signal-Daten extrahiert werden.
  2. Neu Referenz (durchschnittliche Referenz)
    1. Berechnen Sie den Durchschnitt der EEG-Signale über alle vierzehn Elektrode Kanäle zu jeder Zeit zeigen und dann subtrahieren den gemittelten Wert von jedem Kanal. Wiederholen Sie diesen Vorgang für alle Epochen der VEP.
  3. Führen Sie Bandpass-Filterung des Signals von ~ 1-100 Hz über eine endliche Impulsantwort (FIR) filtern.
  4. Basislinienkorrektur
    1. Berechnen Sie den Mittelwert der EEG-Signale in der Pre-Reiz-Periode (Basisperiode,-300 ~ 0 ms) für jeden Kanal, dann subtrahieren dieser Durchschnittswert von jedem Punkt in der Wellenform (-300 ~ 600 ms). Dadurch wird die Amplitude Achse des VEP Reaktionen auf die Beobachtung der Gehirnwelle Änderungen nach der Stimulation zu erleichtern. Wiederholen Sie diesen Schritt für alle von den VEP-Epochen.
  5. Grand VEP Antworten
    1. Durchschnittlich durchschnittlich Single-Trial VEP Epochen erstelle ich ein-Fach VEP Wellenformen für jeden Kanal. Dann berechnen Sie den grand Ensemble Mittelwert der VEP Antworten für jeden Kanal in Bezug auf alle Themen.

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Representative Results

Wir berechnen den Ensemble-Durchschnitt der VEP Antworten von elf Mäuse wie in Abbildung 2dargestellt. Dieses Ergebnis zeigt die VEP-Antworten, die durch dieses Experiment aus der Pre-Stimulationsdauer (-300 ms), die Post-Stimulationsdauer (600 ms), da die Stimulation am Zeitpunkt 0 s gegeben ist. Es fällt auf, dass das Signal nur für eine Weile schwankt (weniger als 300 ms) nach der Stimulation, während das Signal stetig im Laufe der Zeit während der Post-Stimulationsdauer stabilisiert. Darüber hinaus können die vierzehn Kanäle in mehrere Gruppen anhand der VEP Antworten enthüllen ähnlichen Morphologien und Muster29kategorisiert werden. Diese Methode bietet Einblicke in das Verständnis der Gehirnwelle Dynamik mit zeitlicher und räumlicher Qualitäten respektiert.

Figure 1
Abbildung 1 : Maus EEG Sensor Beschreibung und Anweisungen zur Verwendung des Maus EEG Sensors. (a) 16 Pin-EEG-Elektrode (b) die individuelle Elektrodenhalter (c) die sechzehn Elektroden-Array-Pin Karte; die Masseelektrode (GND) und die Referenzelektrode (Ref) ist in schwarz (d), in Vivo Maus EEG Messung über die vorgeschlagene Sensor und die angepasste Halterung auf dem stereotaktischen Rahmen hervorgehoben. Diese Zahl wurde von 29geändert. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 2
Abbildung 2 : Repräsentative visuelle evozierte möglichen experimentellen Ergebnisse aus den 14 Kanälen. Grand gemittelt evozierte potential Sichtsignale alle elf Themen und alle Versuche von Pre Stimulationsdauer (-300 ms), die Post-Stimulationsdauer (600 ms). Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

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Discussion

Zunächst konzentrieren wir auf die Gestaltung des Sensors, Priorisierung der Zweckmäßigkeit durch komplexe chirurgische Eingriffe zu minimieren. Die verformbare EEG Sensor besteht aus sechzehn Stifte: vierzehn für Aufnahme, für Boden, und die letzte für Elektroden zu verweisen. Jede Elektrode hat der Kolben Federhaus-Struktur, die Verformbarkeit auf der Elektrodenkontaktfläche gilt, so dass sie homogen und beständig Signalerfassung aus gebogenen und zarte Maus Kopfhaut erleichtern. Wenn man bedenkt das Wohlergehen der Tiere haben wir versucht, die Schmerzen durch die Federkraft entstandenen Druck auf die Haut aufgetragen werden, durch eine Verbreiterung der Kontaktfläche der Haut-Elektroden-Schnittstelle29Linderung zu minimieren.

Die einzelnen Pins bestehend aus der gesamten Mehrkanal-Elektrode können haben unterschiedliche Spezifikationen für Dicke, Länge, Kolben-Typen, und Frühling Kraft. Diese verschiedenen Optionen sollte in Erwägung gezogen werden, um die Elektrode, das Thema leid zu lindern zu entwerfen. Darüber hinaus können die Pin-Karte-Array und die Anzahl der Elektroden nach dem Zweck des Experiments geändert werden. Die Elektrode Halter und Fiberglas Substrat kann durch andere Methoden und verschiedenen Ausführungen, wie z.B. ein 3D-Druck Methode30,31erfolgen.

Die Impedanz einer trockenen Elektrode hat in der Regel höhere Impedanz und verursacht eine abgesenkte Signalqualität im Vergleich zu einer nassen Elektrode32,33gezeigt. Wir konnten die entsprechenden Stellen der sechzehn Elektroden unter die sogar Kraft auf der Kopfhaut durch Überprüfung der Impedanz innerhalb einer Reichweite von 100 kΩ, 2 MΩ bestätigen: die Reichweite war vergleichbar mit der kommerzialisierten trocken-Typ-EEG-Elektrode für einen Menschen33 . Die Impedanz-Werte liegen zwischen 296.2 KΩ und 1,522.6 KΩ (± SD bedeuten: 825.2 ± 443.2 KΩ). Inzwischen der mechanische Druck auf die Kopfhaut durch interne Quellen verursacht möglicherweise senkte die Elektrode Impedanz, daher beeinträchtigen die Signal-Verbesserung-34. Es ist, zwar möglich, Signalqualität durch Anwenden von leitenden Gel auf die Pin Köpfe Oberfläche zu erhöhen kann dies wegen der beengten Maus Kopfhaut Signalstörung zwischen benachbarten Pins führen.

Zum Nachweis der in Vivo -Dienstprogramm von der neu gestalteten EEG Sensor haben wir veranstaltungsbezogenen mögliche Aufnahme Paradigma VEP, einer der typischen passiven EEG Paradigmen. Obwohl wir VEP Signale auf der Maus Kopfhaut ohne Durchführung von nasse Gel gemessen, war das Signal zum vorherigen VEP-Ergebnis von Epicranial EEG aus der gleichen Maus Arten27vergleichbar. Während die VEP Messverfahren ist die Erdung aller Einzelteile, wie z. B. der stereotaktischen Rahmen und Elektrodenhalter, ein wesentlicher Prozess, elektrische Lärm von draußen zu minimieren. Wir unterhalten auch Mäuse für 10 min vor Beginn der VEP-Experiment für dunkle optische Anpassung und primäre sensorische Anpassung35,36.

Abschließend zeigen wir ein wiederholbares experimentelle Protokoll zur visuellen evozierten Potentiale, die mit dem nicht-invasive trocken Mehrkanal-Maus Scalp EEG Sensor bieten. Die hier beschriebene Methode ist nicht invasiv, also es erfordert keine zusätzliche chirurgische Vorbereitung sowie die Verkürzung der Zeit für die Zubereitung von leitenden Gel, wenn trocken-Art Elektroden verwendet werden. Ein Sensor besitzen mehrere Elektroden ermöglicht darüber hinaus die Gehirnströme aus verschiedenen Kopfhaut Bereichen gleichzeitig zu messen. Die vorgeschlagene Methode für eine nicht-invasive Scalp EEG Sensor kann auf translationale Forschungsbereiche verbinden Grundlagenforschung Ergebnisse in Studien am Menschen mit vergleichbaren, zuverlässigen und effizienten Ergebnissen beitragen. Letztlich bietet einen Ansatz mit diesen wesentlichen Merkmalen, Komfort und Sicherheit sowohl für Benutzer und Themen. Dennoch gibt es weitere Forschungsfragen, z. B. Verbesserung der Signalqualität Vergleich Signalqualität mit anderen Gehirnwellen-Erwerb-Methoden und Anwendung dieser Methoden in die frei beweglichen Maus. Darüber hinaus hat die vorgestellte Methode weitere Möglichkeiten für Anwendung in präklinischen Kleintier EEG- in Vivo Studien, groß angelegte Gehirn Netzwerkanalyse, sensorische möglichen Aufnahmen evozierte und Kombinationen mit Stimulation Brain oder Oberfläche-tiefe elektrophysiologische Aufnahmemethoden.

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Disclosures

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Acknowledgments

Diese Arbeit wurde teilweise von GIST Research Institute (GRI), die GIST-Caltech Zusammenarbeit Forschungsprojekt über ein Stipendium zur Verfügung gestellt von GIST im Jahr 2017 unterstützt. Auch unterstützt durch Forschungsstipendium (NRF-2016R1A2B4015381) der National Research Foundation (NRF) von der koreanischen Regierung (MEST) und von KBRI Grundlagenforschung Programm durch Korea Institut für Hirnforschung gefördert durch das Ministerium für Wissenschaft, IKT und Zukunft finanziert Planung (17-BR-04).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Ketamine 50 Inj. (Vial) Yuhan - Ketamine HCl 57.68 mg
Zoletil 50 Inj. Virbac - Tiletamina 125 mg/ Zolazepam 125 mg
Rompun 2% Inj. BAYER - Xylazine hydrochloride 23.32mg/mL
Hycell solution 2% Samil - Hydroxypropylmethylcellulose 20 mg
Puralube Vet Ointment 3.5 mg Pharmaderm -
Saline solution Inj.  JW Pharmaceutical  - NaCl 9 g/1000 mL
Veet Hair Removal Cream – Legs & Body - Sensitive Skin Reckitt Benckiser - depilatory
Skins - Surgical Skin Marker Surgmed S-3000 STERILE - Multi-Tip Fine Marker with ruler and label set
Stainless Steel Micro Spatulas HEATHROW SCIENTIFIC HS15907  One Round Flat End, 2L x 5/16W"
cotton swap
Stereotaxic, Desktop Digi Single RWD Life Science 68025
Mouse Adapter RWD Life Science 68010
Ear Bar for Mouse Non-Rupture RWD Life Science 68306
Mitsar-EEG 202-24  MITSAR amplifier
EEGStudio EEG acquisition software MITSAR
White flash stimulator  MITSAR MITSAR Flash stimulator
BCI2000 software Schalk lab
g.USBamp g.tec 0216
g.Power-g.USBamp g.tec 0247
 441 style straight body Touch Proof connector PlasticsOne 441000PSW080001 441 - 000 PSW 80" (BLACK)
Standard probe LEENO SK100CSW http://www.globalinterpark.com/detail/detail?prdNo=2114277241&dispNo=001851006012
Precision engraving machine tools TINYROBO TinyCNC-6060C
Heat shirink 3M FP301

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