Vi utvecklade ett protokoll för att bedöma välbefinnande hos möss under förfaranden med narkos. En serie av beteendemässiga parametrar som anger nivåer av välbefinnande samt glukokortikoid metaboliter analyserades. Protokollet kan fungera som ett allmänt stöd att uppskatta graden av svårighetsgraden i en vetenskaplig, djur-centrerad sätt.
I linje med de 3R principen (Replacement, minskning, förfining) utvecklat av Russel och Burch, bör vetenskaplig forskning använda alternativ till djurförsök när det är möjligt. När det finns inget alternativ till djurförsök, bör det totala antalet försöksdjur som används vara ett minimum som krävs för att få värdefulla data. Dessutom bör lämpliga förfining åtgärder vidtas för att minimera smärta, lidande och ångest som åtföljer det experimentella förfarandet. De kategorier som används för att klassificera graden av smärta, lidande och ångest är icke-återvinning, mild, måttlig eller svår (EU direktiv 2010/63). För att bestämma vilka kategorier tillämpas i enskilda fall, är det viktigt att använda vetenskapligt verktyg.
Protokollet brunn-vara-bedömning som presenteras här är utformad för förfaranden som används för narkos. Protokollet fokuserar på buren aktivitet, mus grimas skala och lyx beteenden såsom grävande och bygger beteende som indikatorer för välbefinnande boet. Den använder också gratis förberedande paradigm för drag ångest-relaterade beteenden. Fekal kortikosteron metaboliter som indikatorer på akut stress mäts under perioden 24-h efter narkos.
Protokollet ger vetenskapligt solid information om välbefinnandet hos möss efter narkos. Tack vare sin enkelhet, kan protokollet enkelt anpassas och integreras i en planerad studie. Även om det inte ger en skala för att klassificera nöd i kategorier enligt de EU-direktiv 2010/63, kan det hjälpa forskarna att uppskatta graden av svårighetsgraden av en procedur med vetenskapligt korrekta data. Det ger ett sätt att förbättra bedömningen av välbefinnande på ett sätt som vetenskapliga, djur-centrerad.
EU: S direktiv 2010/631 föreskrivs att den 3R-principen (ersättning, begränsning, förfining) som utvecklats av Russel och Burch2 tillämpas närhelst djurförsök är nödvändigt. Det yttersta målet för EU-direktivet är att fasa ut alla djurförsök, men direktivet erkänner att, för närvarande vissa djurförsök fortfarande behövs för att bedriva forskning som kommer att skydda människors och djurs hälsa. Således, om ett djurförsök inte kan ersättas med någon alternativ metod, är bara det minsta antalet försöksdjur som används för att få tillförlitliga resultat. Dessutom ska mängden smärta, lidande och ångest som åtföljer experimentella rutiner minimeras genom att använda lämpliga förfining. EU: S direktiv 2010/63 föreskrivs att svårighetsgraden av ett förfarande prospektivt måste klassificeras som icke-recovery, mild, måttlig eller svår1. Som svårighetsgrad klassificering avgörs på grundval av fall, är det viktigt att ha vetenskapligt verktyg att uppskatta svårighetsgraden av ett visst förfarande.
Poäng ark som föreslagits av Morton och Griffith3 är ett viktigt verktyg för att upptäcka eventuella avvikelser från normal status, inklusive negativa effekter på välbefinnande4. Poäng ark används för att efterhand bestämma smärta, lidande, och ångest som orsakas av ett experiment och fokus på synliga förändringar i det fysiska tillståndet av enskilda djur (t.ex., kroppsvikt, päls, gånganalys). Även om, bilaga VIII i EU: S direktiv 2010/63 ger exempel på varje kategori i svårighetsgrad, forskare fortfarande saknar verktyg för att uppskatta graden av svårighetsgraden av en given procedur med vetenskapligt baserade data.
Avsaknad av indikatorer som visar negativ välbefinnande är inte det enda sättet att avgöra tillstånd för djuret. förekomsten av indikatorer pekar på positiv välbefinnande är också viktiga5,6,7,8. Till exempel djur Visa lyx beteenden som grävande och kapsla byggnad beteende endast när alla deras grundläggande behov är uppfyllda. Om välbefinnande minskas, är lyx beteenden först att minska5,7. Protokoll som ska användas vid bedömningen av välbefinnande bör omfatta indikatorer pekar på den fysiska, fysiologiska/biokemiska och psykologiska tillstånd av djur för att utvärdera deras välbefinnande i en detaljerad och omfattande sätt9.
Inom ramen för förfining utvecklades ett protokoll att uppfylla dessa krav och bedöma effekterna av ett förfarande som inbegriper narkos på välbefinnande av möss10. Samtidigt var målet att minimera ytterligare stress för att aktivera enkel integrering av protokollet i en given experiment. Protokollet anser grävande beteende, buren beteende som aktivitet, födointag och kapsling och drag ångest-relaterade beteenden. Det innehåller dessutom mus grimas skala (MGS) och icke-invasiv analysen av kortikosteron metaboliter i avföring. Protokollet syftar till att underlätta bedömningen av välbefinnande på ett vetenskapligt och djur-centrerad sätt och ge information om välbefinnande som stöder klassificering av graden av svårighetsgrad. Förutom Poäng ark, kan det ge användbar information för allvarlighetsgrad klassificering av ett förfarande. Eftersom protokollet är lätt att genomföra och kräver ingen omfattande utrustning, kan det integreras i ett pågående experiment utan att påverka resultaten av en studie. Det bör noteras att djuret forskningen: rapportering av i Vivo experiment (ankomst) riktlinje11 är att observeras i alla studier som involverar djurförsök, med målet att förbättra design, analys och rapportering.
Protokollet utvecklades ursprungligen för att bedöma välbefinnande C57BL/6JRj möss som fick antingen en enda anestesi eller upprepade isofluran anestesi. Resultaten bekräftar att tester av lyx beteenden, liksom andra åtgärder (t.ex. gratis förberedande paradigmen, MGS, hålhäckande födointag) var känsliga metoder för bedömning av välbefinnande. Upprepade isofluran anestesi orsakade kortsiktiga effekter på drag ångest-relaterade beteenden, MGS och hålhäckande beteende. Dessutom föreföll upprep…
The authors have nothing to disclose.
Tack vare Sabine Jacobs bistå med provsamlingen, Edith Klobetz-Rassam för analys av FCM, PD Dr. med. vet. Hollander. Roswitha Merle bistå med statistisk analys och Wiebke Gentner för korrekturläsning manuskriptet. Studien är en del av den Berlin-Brandenburg forskningsplattformen BB3R (www.bb3r.de) och finansierades av den tyska federala ministeriet för utbildning och forskning (bevilja nummer: 031A262A) (www.bmbf.de/en/index.html).
Isofluran | CP-Pharma Handelsgesellschaft mbH | 1214 | |
InfraMot – Sensore Units | TSE Systems | 302015-SENS | |
InfraMot – Control Units | TSE Systems | 302015-C/16 | |
InfraMot – Software | TSE Systems | 302015-S | |
Nestlet N | Ancare – Plexx | NES3600 | |
Camera EOS 350D | Canon |