Подготовка и трансплантация стволовых клеток (ASC) листов жировой ткани, полученных на недостаточно зашивается анастомозов толстой кишки в мышиной модели представлен. Этот роман приложение показывает, что ASC листы можно уменьшить прямой кишки анастомоз утечки.
Анастомоза представляет собой катастрофические осложнение после операции колоректального. Хотя нынешние методы для предотвращения утечки имеют разные уровни клинической эффективности, они являются до теперь несовершенного решения. Терапия стволовой клетки с помощью ASC листов может обеспечить решение этой проблемы. ИСС, считаются как перспективных кандидатов для поощрения исцеление из-за их свойства трофические и иммуномодулирующим ткани. Здесь мы предлагаем методы для получения высокой плотности ASC листы, которые пересаживают на прямой кишки анастомоз в мышиной модели для сокращения утечки. ИСС сформировали ячеек листов в термо отзывчивым культуры блюд, которые могут быть легко отсоединяется. В день трансплантации частичное колэктомия с 5-шов прямой кишки анастомоз была выполнена. Животных сразу же были пересажены с 1 лист ASC в крысу. ASC листы спонтанно присоединились анастомоза без клея, шовный материал или любой биоматериала. Групп животных были принесены в жертву 3 и 7 дней после операции. По сравнению с пересаженной животных, заболеваемость анастомоза абсцессов и утечки был выше контрольных животных. В нашей модели трансплантация ASC листов после прямой кишки анастомоз был успешным и связано с более низкой ставкой утечки.
Частичное колэктомия с первичной анастомоза является часто выполняемые операции, что может быть сделано для многих заболеваний толстой кишки, рака прямой кишки, болезнь Крона и дивертикулит1,2. Самых страшных осложнение после прямой кишки анастомоз анастомоза3. Хотя было выявлено несколько факторов риска, связанных с утечками анастомоза, решения для предотвращения утечки остаются unkown4,5.
Жировая ткань производные стромальные клетки (ИСС), связанные с противовоспалительным и трофические свойства6,7, что делает эти клетки перспективных кандидатов для регенеративной терапии8. Эффективность ИСС для ускорения заживления тканей был показан в различных тканях, таких как сердечной мышцы, кожу и пищевода9,10,11,12,13. Однако есть несколько докладов об использовании ИСС для ускорения заживления кишечника. Местные пересадки ИСС для экспериментальной колоректального анастомозов через ASC-покрытием biosutures или серозных инъекции ИСС показан либо никаких улучшений в исцеление14 или не помешало анастомоза несмотря на более благоприятные анастомоза Исцеление15.
Местные пересадки ИСС в суспензии или в сочетании с биоматериалов могут быть связаны с недостаточной ячейки хранения или недостаточное распределение пересаженные клетки11. Ячейка листа технологии16,17 предлагает инновационный метод ASC доставки18,19. Таким образом в предыдущем исследовании, новый подход был предложен в котором ИСС, организованной в ячейке листа может применяться на экспериментальной кишки анастомоз20. Это исследование показало, что ASC лист трансплантации успеха в сокращении утечки кишки анастомоз после частичное колэктомия в мышиной модели. Эта статья сообщает ASC лист подготовка и техника хирургической трансплантации.
Анастомоза является наиболее серьезных неблагоприятных событий, после резекции кишки с первичной анастомоза. Оптимальные методы для предотвращения утечки и анастомоза нарушения по-прежнему отсутствуют. Местное применение массива биоматериалов был проведен, с различной результаты<su…
The authors have nothing to disclose.
Авторы выражают благодарность проф д-р S.E.R. Hovius, доктор M.A.M. Мюро и все хирурги отделения пластической хирургии для коллекции подкожной жировой ткани. P. сухо поддерживается грант от программы стипендий Нидерланды (NFP-12/435), во время проведения исследования. Ю.м. Bastiaansen-Jenniskens поддерживается грантов от голландского артрит фонда (LP11).
LG DMEM | Gibco, Life technologies | 22320022 | ASC isolation and culture |
Collagenase type I | Gibco, Life technologies | 17100-01 | ASC Isolation |
Bovine Serum Albumin | Sigma-Aldrich | A9418 | ASC Isolation |
Fetal bovine serum | Gibco, Life technologies | 10270-106 | FBS, ASC isolation and culture |
3% acetic acid with methylene blue | Stemcell Technologies | 7060 | ASC Isolation |
Gentamicin | Gibco, Life technologies | 15750-037 | ASC isolation and culture |
Ampothericin B | Gibco, Life technologies | 15290-018 | ASC isolation and culture |
Shaker (Gallenkamp Environmental Shaker Model 10X 400) | Akribis Scientific | F240 | ASC Isolation |
Centrifuge | Hettichlab | Rotina380 | ASC isolation and culture |
Phosphate buffer saline | Gibco, Life technologies | 14190-094 | PBS, ASC isolation and culture |
Ascorbic acid-2-phosphate | Sigma-Aldrich | A8960 | ASC isolation and culture |
Human recombinant fibroblast growth factor 2 | AbD Serotec | AF-100-15 | FGF2, ASC isolation and culture |
Trypsin EDTA | Gibco, Life technologies | 25200-056 | ASC culture |
Dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650-5x | DMSO, ASC freezing |
Thermo-responsive culture dishes | Nunc Thermo scientific | 174904 | ASC sheet preperation |
Non-absorbable braided silk 4/0 | B Braun | 21151042 | surgery |
Non-absorbable monofilament polyamide 8/0 | B Braun | G1118170 | surgery |
Absorbable braided polyglycolic acid 5/0 | B Braun | C1048207 | surgery |