Summary
Här presenterar vi en modifierad electrospinning metod för att fabricera PCL vaskulär grafter med tjocka fibrer och stora porer och beskriva ett protokoll för att utvärdera i vivo i en råtta modell av bukaorta ersättare.
Abstract
Här presenterar vi ett protokoll för att fabricera avdunsta PCL vaskulär transplantat och beskriva en utvärdering-protokollet med hjälp av en råtta modell av bukaorta ersättare. Electrospun vaskulär grafterna äger ofta relativt små porer, som begränsa cell infiltration i grafterna och hindra regenerering och ombyggnad av neo-artärerna. I denna studie, var PCL vaskulär grafter med tjockare fibrer (5-6 µm) och större porer (~ 30 µm) fabricerade med hjälp av en modifierad bearbetningsteknik. Den långsiktiga resultat av graften utvärderades av implantation i en råtta bukaorta modell. Ultraljud undersökning visade att grafterna förblev patent utan aneurysm eller stenos uppstår även efter 12 månader efter implantation. Avdunsta struktur förbättras den cell inväxt och således främjas vävnad återskapas på 3 månader. Viktigare, fanns det inga tecken på negativa remodeling, såsom förkalkning inom kneg väggen efter 12 månader. Därför har electrospun PCL vaskulär grafter med modifierade avdunsta bearbetning potential att vara en artär substitut för långsiktig implantation.
Introduction
Vaskulär ympkvistar tillverkad av syntetiska polymerer utnyttjas ofta i klinik för behandling av hjärt-kärlsjukdomar (hjärtklaffarna). Tyvärr för liten diameter vaskulär transplantat (D < 6 mm) finns det inga framgångsrika produkter tillgängliga på grund av den låga patency utlöses av minskad blod flödeshastighet, vilket ofta leder till Trombos, intimans hyperplasi och andra komplikationer1.
Vävnadsteknik erbjuder en alternativ strategi för att förverkliga långsiktiga patency och homeostas baserat på en byggnadsställning-guidad vaskulär förnyelse och återuppbyggnad. I detalj, vaskulär transplantat, som en tredimensionell mall, kunde ge mekaniskt stöd och strukturella vägledning under regenerering av kärlvävnad och inflytande cellulära funktioner, inklusive celladhesion, migration, spridning, och utsöndringen av extracellulärmatrix2. Hittills har har olika syntetiska polymerer utvärderats för applikationer i kärlvävnad engineering. Bland dessa polymerer, har poly(ε-caprolactone) (PCL) undersökts intensivt på grund av bra cell kompatibilitet och långsam nedbrytning alltifrån flera månader till två år3. I en råtta aorta modell4,5,6, PCL vaskulär ympkvistar behandlas av electrospinning uppvisade utmärkt strukturell integritet och patency, samt som kontinuerligt ökad cell invasion och kärlnybildning i den transplantat vägg för upp till 6 månader. Dock negativa vävnad remodeling, inklusive regression av celler och kapillärer och förkalkning, observerades också vid längre tidpunkter, upp till 18 månader.
Cellularization av vaskulär transplantat är en nyckelfaktor att bestämma vävnadsregenerering och remolding7. Electrospinning, har som en mångsidig teknik, allmänt använts för beredning av vaskulär grafter med nano-fibrös struktur8. Tyvärr, relativt liten por struktur leder ofta till otillräcklig cell infiltration i electrospun vaskulär transplantat, vilket begränsar den efterföljande vävnadsregeneration. Lös problemet genom har olika tekniker varit försökt att öka porstorlek och övergripande porositet, inklusive salt/polymeren urlakning9,10, modifiering av samlare, efter behandling av laserstrålning11 , etc. Strukturera av electrospun transplantat (inklusive fiber diameter, porstorlek och porositet) är i själva verket nära besläktade bearbetning villkor12,13. Under electrospinning, kan fiber diameter lätt styras genom att ändra parametrarna, till exempel koncentrationen av en polymer lösning flöde, spänning, etc. 14 , 15, och därför de porstorlek och porositet har förbättrats med detta.
Vi rapporterade nyligen en modifierad PCL electrospun transplantat med avdunsta struktur (fibrer med diameter 5-7 µm och porerna i 30-40 µm). In vivo implantation genom att ersätta råtta bukaorta visade hög frekvens av patency, samt bra endothelialization och smidig muskel förnyelse vid 3 månader efter operationen16. Viktigare, kunde inga negativa vävnad remodeling bland annat förkalkning och cell regression observeras även efter ett år av implantationen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Användningen av försöksdjur godkändes av djur experiment etiska kommittén för Nankai universitet och sker i enlighet med guiden för vård och använda av försöksdjur.
1. tillverkning av Electrospun PCL grafter
Obs: Häri, en electrospinning teknik utnyttjades för att fabricera vaskulär ympkvistar.
- Förbereda PCL lösningar av 25 wt % och 10 wt %, genom upplösning PCL i en blandning av metanol och kloroform, respektive (1:5 volym förhållande), vid rumstemperatur (RT) för 12 h.
- Läsa in PCL lösningen i en 10 mL glasspruta.
- Placera sprutan med en 21-G nål.
- Placera rostfritt stål dornen (2 mm i diameter, 25 cm i längd) på instrumentet samling.
- För tjockare-fiber ympkvistar, använda PCL lösning av 25 wt %, arbetsavstånd 17 cm från kanylspetsen till samlare, flöde av 8 mL/h, och spänning på 11 kV som electrospinning parametrar. För tunnare-fiber ympkvistar, använda PCL lösningen av 10 wt %, arbetsavstånd 20 cm från kanylspetsen till samlare, ett flöde av 2 mL/h, och spänning 18 kV som electrospinning parametrar.
- Se till att erhållna grafterna placeras i vakuum över natten för att ta bort de kvarvarande vätskan. Sterilisera alla instrument före ingreppet och underhålla aseptisk teknik i hela.
- Före implantationen, desinficera grafterna genom att doppa dem i 10 mL av 75% etanol i 30 min och sedan utsätta dem för UV-ljus under natten.
- Fiber och por storlek mätningar: beräkna den genomsnittliga fiber diameter använder ImageJ programvara baserat på scanning electron microscopy (SEM) bilder.
- Mekanisk provning av ställningar:
- Skär de tubulära ställningar i 3 mm sektioner i längd med ett rakblad. Mät tjockleken på ställningar med en mikrometer.
- Placera de tubulära ställningar på en drag-testning maskin med en lastkapacitet på 100 N.
- Klämma i ställningar med en 1 mm mellan klämman avstånd och dra longitudinellt med en hastighet av 10 mm/min tills bristning. Mät draghållfasthet och ultimata brottöjning. Beräkna Youngs modul från regionen ursprungliga linjära (upp till 5% stam) av stress-påfrestningar kurvan.
2. råtta bukaorta Implantation modell
Obs: Alla material och instrument som används i kirurgi är sterila. Under operationen, se till att operatören bär en gasbinda mask och sterila handskar för att undvika infektioner. Säkerställa att rumstemperaturen hålls vid 27-30 ° C till upprätthålla den animaliska kroppstemperaturen. Följ lokala IACUC riktlinjer angående smärtlindring.
- Använda manliga Sprague Dawley-råttor som väger 240-270 g som mottagare av vaskulär transplantat. Säkerställa råtta har fastat 24 h före operation. Syftet med fasta råttor för 24 h är att Tom faeces i tarmkanalen tillräckligt, och därmed bredda operatörens horisont.
- Förstå råttans rygg nacke och hålla huvudet nedåt, in springe nålen i bukhålan av nedre delen av buken. Inducera råtta för anestesi med chloral hydrat (330 mg/kg) av en intraperitoneal injektion.
- Bekräfta adekvat anesthetization genom att säkerställa att råttan har avslappnad muskler och stadig andning. Placera råtta under mikroskopet operativa i ryggläge.
- Applicera vaselin oftalmologiska vet salva på ögonen för att förhindra torrhet under anestesi. Administrera antikoagulation (100 UI/kg) med hepariniserad fysiologisk koksaltlösning lösning (50 UI/mL) genom svansen ven injektion före operation.
- Raka bort pälsen i främre bukväggen med ett rakblad, och rengör huden med hjälp av jodlösning och medicinsk alkohollösning.
- Utföra en mittlinjen laparotomi snitt med kirurgisk sax och säkerställa att snittet är ca 4-5 cm lång, och sedan utsätta bukhålan.
- Återkalla och Linda tarmarna med en kompress fuktad med koksaltlösning prioriterat.
- Dissekera bukaorta noggrant.
- Identifiera och ligera alla små grenar med 9-0 monofilament nylon suturer.
- Klämma avsnittet isolerade (upp till 1 cm i längd) av aorta med två vaskulära klämmor. Stora kroppspulsådern kan förbli spänns för 20-30 min.
- Transekt bukaorta mellan två klämmor med mikro-sax för att skapa anastomotic webbplatser.
- Skölj de två ändarna av aorta med hepariniserad saltlösning (50 UI/mL) lösning att ta bort kvarvarande blodet.
- Lossna adventitia med mikro-sax.
- Anastomose graften med 2 mm inre diameter och 1 cm i längd till råttans bukaorta med åtta sutur mönster med 9-0 monofilament nylon suturer.
- För det första, konstruera fyra anastomoser enligt sekvensen av 9, 12 och 3 klockan 6 positioner vid proximala sidan, sedan anastomose har skurna kanter i 4 maskor mellan två suturer. Efter avslutad proximala suturen, sutur den distala sidan med samma metod.
Obs: Varje stygn krävs att säkerställa den inhemska sidan är något inbäddad i transplantat. - Bort den distala klämman så att blodet kan flöda in i transplantatet, sedan ta bort den proximala klämman.
- Tryck på suturen ändarna för att stoppa blödningen med en steril bomullstuss eller en liten kompress svamp. Tryck på i ca 3 min, tills hemostas.
- Returnera tarmarna i bukhålan.
- Spola bukhålan med varma fysiologisk koksaltlösning lösning med gentamicin (320 U/mL).
- Sy upp den buk-väggen med en 3-0 Nylon sutur i muskel och hud lager, respektive.
- Placera råtta i en torr och ren bur och sätta en värmedyna under buren för att hålla djur förkroppsligar temperatur; Vänta sedan för råttan att återhämta sig från anestesi. Sköta djuret tills det har återfått tillräcklig medvetande för att upprätthålla sternala koordinationsrubbning.
- Efter det återfår medvetandet, sätta råtta i en enda bur med mat och vatten. Applicera jod på såret att förhindra infektion efter operationen. Tillbaka till råtta till sällskap av andra djur tills det helt återhämtat.
- Avliva råttor enligt institutionella riktlinjer vid förutbestämda tidpunkter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
PCL grafterna var explanterad på 3 månader och 12 månader postoperativt och analyseras av histologiska standardtekniker för hematoxylin och eosin (H & E), Masson trikrom, Verhoeff-van Gieson (VVG), Von Kossa och immunofluorescens färgning för α-SMA, MYH, vWF och elastin. De histologiska bilderna togs genom en upprätt Mikroskop, och immunofluorescens bilderna togs med fluorescence Mikroskop.
Alla data uttrycktes som menar ± SD. En tvåsidiga parat Students t-test användes för att jämföra skillnaderna. Ett värde på p < 0.05 ansågs vara statistiskt signifikant.
Roman electrospun PCL grafter med optimerad struktur, d.v.s. tjockare fibrer och större porer, var framgångsrikt fabricerade i denna studie. SEM-bilder visade att i genomsnitt fiber diameter var nästan 8 gånger tjockare i de modifierade transplantat (figur 1A) än i den konventionella en (figur 1B) (5.59 ± 0,67 kontra 0.69 ± 0,54 µm). Som ett resultat, i genomsnitt porstorlek var markant ökade, från ~ 4.66 µm i tunnare-fiber graft till ~ 40.88 µm i tjockare-fibern en. Tvärsnitt visade homogen fiber distribution inom väggen av tubulär grafterna i både tjockare-fiber (figur 1 d–F) och tunnare-fiber grupper (figur 1 g–jag). Väggtjockleken var ungefär 400-500 µm. De mekaniska egenskaperna av hårstrips präglades av tensile tester, och typiska spännings-töjningskurvor visades i figur 1 c. De mekaniska egenskaperna hos två transplantat var uppenbarligen annorlunda när det gäller töjning. Motsvarande värde för tjockare-fiber ympkvistar var ungefär 3 gånger högre än tunnare-fiber grafterna, vilket tyder på ökad seghet.
Förberedda vaskulär grafterna (inre diameter 2,0 mm) och längd 1 cm (figur 2A) var inopererad för att ersätta ett segment av infödda bukaorta råtta (figur 2B). Vid förutbestämda tidpunkter undersöktes patency av implanterade grafterna med ultraljud. Resultaten visade att de flesta av grafterna patent (figur 2 c). Vidare var blod flödeshastigheten liknande mellan graft och intilliggande infödda blodkärlen vid 12 månader. Explanterad ympkvistar behöll bra morfologi utan aneurysm (figur 2D), och inga stenos eller tromboser kunde observeras på luminala ytan (figur 2E).
Vävnadsregenerering och ECM sekretion vid 3 månader bedömdes ytterligare av histologi analyser. H & E färgning visade att ett lager av neo-vävnad bildades på lumen av transplantat (figur 3 g-H). VWF färgning visar dessutom att luminala ytan var helt täckt av nybildade endotel (figur 3A), som liknar det av infödda aorta (figur 3B). Under tiden organiserades flera lager av MYH-positiva celler längs omkretsriktningen riktning, som anger regenerering av vaskulär media (figur 3 c–D). Extracellulär matrix syntes observerades av Masson och VVG färgning, respektive. En betydande mängd kollagen och fibrösa elastin kunde observeras inom transplantat (figur 3I–J, K–L), som spelar en viktig roll i vaskulär förnyelse och remodeling. Immunofluorescens färgning visade strukturen av elastin arrangera i rak linje maskrad i ett mönster liknande i den infödda artären (figur 3E–F).
Dessutom regenererad vävnader inklusive endotel och glatta muskulaturen underhålls integrerade och regrediera inte efter 12 månader efter implantation (figur 4A–C). Viktigare, fanns det inga tecken på förkalkning som uppstår inom kneg väggen utifrån den Von Kossa färgning (figur 4 d).
Figur 1 : Struktur och mekaniska egenskaper av PCL graften. SEM-bilder av electrospun mats PCL med tjockare fibrer (A) och tunnare fibrer (B). Tvärsnitt av tjockare-fiber tubulär transplantat (D–F) och tunnare-fiber transplantat (G–jag). Representativa stam-stress kurvan visas i (C). Dessa siffror har ändrats från Zhao, o.a. 16 Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2 : Implantation av vaskulär ympkvistar i en råttmodell bukaorta. Electrospun PCL vaskulär transplantat av 1 cm i längd (A) var kirurgiskt insköt i bukaorta råtta (B). Ultraljudsbilden visade att transplantatet patent i vivo vid 1 år (C). Stereomicroscopic bilder visar att transplantatet var väl integrerad med intilliggande infödda aorta utan aneurysm (D), och luminala ytan är ren och fri från tromb (E). Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3 : Vävnadsregenerering och nedfall av ECM i explanterad grafterna vid 3 månader jämfört med infödda aorta. Tvärsnittsdata bilder av regenererad transplantat (A, Coch E) och infödda artär (B, Doch F) var immunostained att upptäcka den endothelial celler och glatta muskelceller elastin. H & E färgning visar den vävnadsregeneration i explanterad grafterna (G) jämfört med infödda aorta (H). Masson färgning visade att förekomsten av kollagen i explanterad transplantat (jag) och infödda aorta (J). VVG färgning visade förekomst av elastin i explanterad transplantat (K) och infödda aorta (L). Dessa siffror har ändrats från Zhao, o.a. 16 Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4 : Histologisk analys av explanterad grafterna vid 12 månader. (A) H & E färgning visade vävnadsregeneration i explanterad grafterna. (B) endotel var immunostained av vWF antikropp. (C) glatt muskulatur var immunostained av α-SMA antikroppar. (D) förkalkning utvärderades av Von Kossa färgning. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Cell infiltration är kritisk för upprustning och ombyggnad av vaskulär transplantat i vivo16. Begränsade cell infiltration är ofta relaterade till relativt små porerna i transplantatet som hindrar migration av celler i transplantatet väggen. För att lösa denna svårighet, utvecklat vi en modifierad metod för att förbereda electrospun PCL vaskulär grafter med stor-pore struktur. I detalj, porstorlek ökade med ökningen av fiber tjocklek som lätt kunde styras av processparametrar. Resultaten visade att vara värdcellerna kunde enkelt nästla sig in väggen i denna avdunsta transplantat efter i vivo implantation och cellularitet förblev på en relativt hög nivå utan uppenbara cell regression på 12 månader efter operationen.
Infödda artär består huvudsakligen av tre lager, det vill säga endotelet, tunica media och adventitia. Endotelet, spelar som anti-trombogen gränssnitt, en viktig roll i att upprätthålla den långsiktiga patency av blodkärl. I vår studie observerades full endothelialization på transplantatet vid 3 månader. Dessutom, är tunica media bestående av flera lager av glatta muskelceller mycket viktiga för att reglera blodkärlens funktion och att tillhandahålla lämpliga mekaniska egenskaper av artären. Föreliggande studie visade att electrospun PCL grafter med tjock-fiber och stora pore markant förbättrad regenerering av funktionella tunica media. Förutom, strukturera av regenererad glatt muskulatur är liknande till det av infödda tunica media. Immunofluorescens färgning visade flera lager av MYH+ cellerna distribueras inom elastin nätverk, återspeglar den kontraktila fenotypen av glatta muskelceller maskrad. Mer viktigt, regenereras vävnaderna (endotel och glatt muskulatur) hålls intakt och det fanns inga negativa remodeling även efter 12 månader på grund av obalansen mellan ECM syntes och nedbrytning.
Förkalkning är fortfarande ett stort problem associerade med kardiovaskulära implantat, särskilt i vaskulär graften. Vaskulära glatta muskelceller (VSMCs) förlora sin ursprungliga fenotyp och upplev trans-differentiering mot osteochondrogenic riktning, vilket leder till ektopisk mineralisering under processen av vaskulär förkalkning. Vår studie visade att det fanns inga kalcium nedfall inträffar inom kneg väggen även efter 12 månader efter implantation. Huvudskälen till hämmad förkalkning i makro-porös vaskulär graften inkluderar: (1) makro-porös graften struktur främjar ämnesomsättningen, såsom jonbyte mellan celler och blod; (2) fysiska ledtrådar av transplantat strukturen kunde reglera eller hämma differentiering av VSMC in i osteoblast1, (3) bra cell infiltration i de stora porerna främjar utsöndringen av ECM och hämmar dess nedbrytning som utlöser förkalkning17och (4) normala eller funktionella VSMCs har potential att förhindra kalcium nedfall18.
Sammanfattningsvis ger långsiktig utvärdering av makro-porösa electrospun PCL vaskulär ympkvistar i råtta bukaorta modellen viktig inblick i potentiella utmaningar av nedbrytbara vaskulär ympkvistar, som kommer direkt följande forskningen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga motstridiga ekonomiska intressen.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes ekonomiskt av NSFC projekt (81522023, 81530059, 91639113, 81772000, 81371699 och 81401534).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Poly(ε-caprolactone) (PCL) pellets (Mn=80,000) | Sigma | 704067 | |
| Methanol | Tianjin Chemical Reagent Company | 1060 | |
| Alcohol | Tianjin Chemical Reagent Company | 1083 | |
| Chloroform | Tianjin Chemical Reagent Company | A1007 | |
| Sucrose | Tianjin Fengchuan Company | 2296 | |
| Triton X-100 | Alfa Aesar | A16046 | |
| Sprague Dawley rats | Laboratory Animal Center of the Academy of Military Medical Sciences | ||
| Normal saline | Hebei Tiancheng Pharmaceutical company | ||
| Chloral hydrate | Tianjin Ruijinte chemical company | 2223 | |
| Heparin sodium Injection | Tianjin Biochem Pharmaceutical company | ||
| Gentamycin Sulfate Injection | Jiangsu Lianshui Pharmaceutical company | ||
| Mouse anti-α-SMA primary antibody | Abcam | ab7817 | |
| Mouse anti-smooth MYH primary antibody | Abcam | ab683 | |
| Rabbit polyclonal anti-rat elastin antibody | Abcam | ab23748 | |
| Rabbit anti-von Willebrand factor primary antibody | Abcam | ab6994 | |
| Goat anti-mouse IgG (Alexa Fluor 488) | Invitrogen | ab150117 | |
| Goat anti-rabbit IgG (Alexa Fluor 488) | Invitrogen | ab150077 | |
| 5% normal goat serum | Zhongshan Golden bridge | ZLI9022 | |
| Hematoxylin and eosin (H&E) | Beijing leagene biotech | DH0006 | |
| Masson's trichrome | Beijing leagene biotech | DC0032 | |
| Verhoeff-van Gieson (VVG) | Beijing leagene biotech | DC0059 | |
| Von Kossa | Beijing leagene biotech | DS0003 | |
| Surgical sutures needles with thread,3-0 silk | Shanghai Jinhuan medical supplies company | G3002b | |
| Surgical sutures needles with thread,9-0 silk | Shanghai Jinhuan medical supplies company | H901 |
References
- Coombs, K. E., Leonard, A. T., Rush, M. N., Santistevan, D. A., Hedberg-Dirk, E. L. Isolated effect of material stiffness on valvular interstitial cell differentiation. J Biomed Mater Res A. 105 (1), 51-61 (2017).
- Zhang, L., et al. A sandwich tubular scaffold derived from chitosan for blood vessel tissue engineering. J Biomed Mater Res A. 77 (2), 277-284 (2006).
- Thottappillil, N., Nair, P. D. Scaffolds in vascular regeneration: current status. Vasc Health Risk Manag. 11, 79-91 (2015).
- Pektok, E., et al. Degradation and healing characteristics of small-diameter poly (e-caprolactone) vascular grafts in the rat systemic arterial circulation. Circulation. 118 (24), 2563-2570 (2008).
- Innocente, F., et al. Paclitaxel-eluting biodegradable synthetic vascular prostheses: a step towards reduction of neointima formation? Circulation. 120 (11 Suppl), S37-S45 (2009).
- de Valence, S., et al. Advantages of bilayered vascular grafts for surgical applicability and tissue regeneration. Acta Biomater. 8 (11), 3914-3920 (2012).
- Assmann, A., et al. Acceleration of autologous in vivo recellularization of decellularized aortic conduits by fibronectin surface coating. Biomaterials. 34 (25), 6015-6026 (2013).
- Hasan, A., et al. Electrospun scaffolds for tissue engineering of vascular grafts. Acta Biomater. 10 (1), 11-25 (2014).
- Baker, B. M., et al. The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers. Biomaterials. 29 (15), 2348-2358 (2008).
- Wang, K., et al. Creation of macropores in electrospun silk fibroin scaffolds using sacrificial PEO-microparticles to enhance cellular infiltration. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101 (12), 3474-3481 (2013).
- Lee, B. L. P., et al. Femtosecond laser ablation enhances cell infiltration into three-dimensional electrospun scaffolds. Acta Biomaterialia. 8 (7), 2648-2658 (2012).
- Rnjak-Kovacina, J., Weiss, A. S. Increasing the pore size of electrospun scaffolds. Tissue Eng Part B Rev. 17 (5), 365-372 (2011).
- Zhong, S., Zhang, Y., Lim, C. T. Fabrication of large pores in electrospun nanofibrous scaffolds for cellular infiltration: a review. Tissue Eng Part B Rev. 18 (2), 77-87 (2012).
- Pham, Q. P., Sharma, U., Mikos, A. G. Electrospun poly(epsilon-caprolactone) microfiber and multilayer nanofiber/microfiber scaffolds: characterization of scaffolds and measurement of cellular infiltration. Biomacromolecules. 7 (10), 2796-2805 (2006).
- Rnjak-Kovacina, J., et al. Tailoring the porosity and pore size of electrospun synthetic human elastin scaffolds for dermal tissue engineering. Biomaterials. 32 (28), 6729-6736 (2011).
- Wang, Z., et al. The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(epsilon-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration. Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).
- Hutcheson, J. D., et al. Genesis and growth of extracellular-vesicle-derived microcalcification in atherosclerotic plaques. Nat Mater. 15 (3), 335-343 (2016).
- Tara, S., et al. Well-organized neointima of large-pore poly(L-lactic acid) vascular graft coated with poly(L-lactic-co-epsilon-caprolactone) prevents calcific deposition compared to small-pore electrospun poly(L-lactic acid) graft in a mouse aortic implantation model. Atherosclerosis. 237 (2), 684-691 (2014).
