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Medicine

마우스에 가로 대동맥 수축 유도를 폐쇄 가슴 모델

Published: April 5, 2018 doi: 10.3791/57397
* These authors contributed equally

Summary

여기, 선물이 측면 thoracotomy 통해 가로 대동맥 수축 (TAC)의 프로토콜. 이 기술은 압력 과부하 및 마우스 활용 표준 전술 실험실 설정에서에서 심장 마비를 시뮬레이션을 최소 침 습, 닫힌 가슴 수술입니다.

Abstract

심장 비 대 및 심장 마비에 대 한 연구는 자주 압력 과부하 마우스 모델 전술에 의해 유도 된 기반으로 합니다. 부분 thoracotomy 가로 대동맥 아치 시각화를 수행 하는 표준 절차입니다. 그러나, 오픈 가슴 모델에서 thoracotomy로 인 한 수술 외상 변경 호흡 생리학 갈비뼈를 해 부하 고 가슴 폐쇄 후 첨부 되지 않은 왼쪽. 이 방지 하려면 측면 thoracotomy 통해 최소 침 습, 닫힌 가슴 접근을 설립 했습니다. 여기 우리는 접근 대동맥 아치 2nd 있는 공간을 통해 가슴 구멍을 입력 하지 않고 마우스에서 복구할 수 보다 적게 외상 성 부상으로 떠나. 우리는 동등한 생존 률 오픈 가슴 전술 절차에 대 한 표준 실험실 설정을 사용 하 여이 작업을 수행 합니다. 닫힌된 가슴 접근 방식으로 인해 생리 적 호흡 패턴을 유지, 떨어져 쥐 보여주는 빠른 복구 혜택을 덜 침략 적 기술을 나타납니다 빠른 치유 과정을 촉진 하 고 외상 후 면역 응답을 감소 시킬 것으로 보인다.

Introduction

마우스 모델 종종 인간의 질병1을 모방 하는 데 사용 됩니다. 가로 대동맥 수축 (TAC) 압력 과부하를 유도 하는 데 사용 하 고 왼쪽 심 실 비 대2. 오픈 가슴 전술 모델 쥐에서 Rockman 외. 에 의해 확인 되었다 3 고 수술 DeAlmeida 그 외 여러분 에 의해 자세히 설명 되어 4. 가로 대동맥의 Banding은 복 부 대동맥 수축에 비해 더 유리한 순환의 더 큰 부분이 후자의 절차2의 부정적인 효과 보완할 수 있기 때문에.

가로 대동맥의 밴딩 오름차순 대동맥 및 brachiocephalic 동맥에서 동맥 압력이 증가에 이르게 되지만 장기의 충분 한 관류 ( 왼쪽된 일반적인 경 동맥, 왼쪽된 하 말 초 혈관을 통해 동맥, 그리고 하강 대동맥)입니다. 증가 심장 afterload 및 상승 된 심장 벽 긴장을이 끈다. 벽 스트레스 때문에 섬유 두껍게5이후에 감소합니다. 심장 hemodynamics 만성 변화 maladaptation의 좌 심 실 팽창 결과. 이 이런식으로 TAC의 심장 비 대 증 결국 심장 마비로 이어지는 재현할 모델을 만듭니다.

DeAlmeide 그 외 여러분 에 의해 설명 된 대로 전술에 대 한 표준 절차 4 갈비뼈와 흉 골은 mediastinum으로 흉 막 캐비티 입력의 절 개를 통해 부분 상단 thoracotomy 통해 대동맥 아치를 접근 한다. 대동맥 아치와 사이드 가지 좋은 볼 수 있습니다. 불행 하 게도, 해 부 늑 골 수 없습니다 수 다시 연결, 자유롭게 떠 하 고 그로 인하여 호흡 역학 변경 그들 나뭇잎.

우리는, 그러므로, 2nd 있는 공간을 통해 측면 외과 접근을 사용 하 여 대동맥 아치에 대 한 최소한 침략 적 폐쇄 가슴 접근 설립. 이 모델의 가장 큰 장점은 갈비뼈도 절단 없이 전술 수행 능력입니다. 수술 외상의 피부 절 개 하 고 있는 근육의 해 부로 제한 됩니다. 이 절차는 외상 자체를 최소화 하 고 적절 한 가슴 안정성을 유지 하는 데 도움이.

여기는 전체 또는 상위 thoracotomy 수행 하지 않고 마우스에서 전술 수술을 수행 하는 자세한 단계별 절차에 설명 합니다. 높은 주파수 도플러 전술의 성공 앞에서 설명한 6,7보장 하기 위해 사용 되었다.

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Protocol

이 프로토콜은 동물 실험 LANUV Recklinghausen (#84-02.04.2016.A374)에 대 한 윤리 위원회에 의해 승인 되었다. 성인 쥐에이 절차는 수행 하는 일반적으로, > 나이의 10 주. 그러나, 그것이 젊은 동물 뿐만 아니라에이 수술을 수행할 수 있습니다. 수술 도구를 사용 하기 전에 소독 해야 하 고 무 균 조건 하에서 수행 되어야 하는 모든 단계.

1입니다. 마 취와 삽 관 법의 유도

  1. Intraperitoneally 통증 완화에 대 한 buprenorphine 0.1 µ g/g 몸 무게를 주사. 수술 후 앞으로 3 일에 대 한 buprenorphine 0.1 mg/kg 매 8 h의 복 주사를 반복 합니다.
  2. 유도, 1 L/min의 산소 흐름 isoflurane의 3.0 Vol %로 설정 하는 기화 기에 연결 되어 있는 마 취 유도 상자에 마우스를 놓습니다.
  3. 촉각 자극을 유도 하 여 깊은 마 취 법을 확인 합니다.
    참고: 증가 Vol %isoflurane 최대 5%, 마 취 유도 실패 하거나 마 취 법은 충분히 깊은 되지 않습니다.
  4. 반사 부재를 보장 하기 위해 마우스의 꼬리에 꼬 집 음. 반사의 완전 한 부재의 경우 최적의 송풍기 설치에 대 한 마우스의 무게 (1.12 참조).
  5. 절차에 걸쳐 37 ℃의 체온을 유지 하기 위해 온도 제어 운영 테이블에 마우스를 이동 합니다.
  6. 마 취 법을 유지 하기 위해 마 취 유도 상자에 연결 된 플라스틱 원뿔에 마우스의 코를 놓습니다.
  7. 마우스의 상단 incisors 나일론 봉합으로 해결. 접착 테이프를 가진 사지 흥분
  8. 적절 한 마 취 법을 다시 있도록 집게의 끝과 뒷 발에 압력을 적용 합니다. 철수 반사의 부재에서 다음 단계를 진행 합니다.
    참고: 마 취 유도 실패 하거나 마 취 법은 충분히 깊은 isoflurane의 볼륨 % 증가 하 고 철수 반사의 부재에 대 한 기다립니다.
  9. 마 취 건조를 방지 하기 위해 각 막에 살 균 안과 윤활제를 놓습니다.
  10. 직장 외상을 피하기 위해 직장 탐사선 기름칠 37 ° c.의 핵심 온도 되도록 직장 온도 프로브를 삽입
  11. 제조업체의 지침에 따라 depilatory 크림 위 가슴과 목 구멍을 depilate. 1 분 후 크림을 닦아. 필요한 경우, 성공할 때까지이 단계를 반복 합니다.
    참고: 출혈 시 면 기울 ㄴ 면봉을 사용 합니다.
  12. 70% 에탄올 depilated 영역을 청소. Povidone-요오드 적어도 3 분 동안 현지 피부 소독 3 번 한 다음 적용.
  13. 인공 호흡기 생리 적 매개 변수 설정을 조정 합니다. 150/min 및 8-10 µ L/g 체중 (BW)에 해 일 볼륨에 호흡 속도 설정 합니다.
  14. 멸 균 장갑 한 켤레를 입었다. 수술 현미경 마우스를 놓고 마우스를 놓고 살 균 fenestrated 드 레이프.
  15. 중간 선 악의 2nd 갈비뼈 아래로 아래 약 3 mm에 피부 incise 중간 및 submandibular 동맥의 결합 조직 식별 합니다. 다음 각된 intracapsular 집게를 사용 하 여 부드럽게 분할 하는 중간에 선 퉁 명 스럽게 두 집게와 고 tracheal 근육을 탐험.
  16. Intracapsular 집게와 파라 tracheal 근육 떨어져 퉁 명 스럽게 당겨 부드럽게 기도 준비 합니다.
  17. 쉽게 삽 관 법 조건에 대 한 목 구멍을 제대로 하 고 부드럽게 기도 내 삽 관 법 정 (외경 1.2 m m)를 삽입 하는 집게와 혀에 당겨. 기관 내 튜브의 직접적인 시각화 및 적절 한 가슴 운동에 대 한 검사는 삽 관 법을 확인 합니다.
  18. 1.0 L/min과 100% O2의 흐름 2 %isoflurane 삽 관 법 후 isoflurane 농도 조정 합니다.
    참고: 호흡 운동을 중지 하지 않는 경우 마우스 이동 시작, 먼저 180/분까지 호흡 속도 증가. 필요한 경우 증가 isoflurane 농도 3.5%까지 이차 마우스 자체에 호흡 중지 될 때까지. 가장 일반적인 문제 누설 또는 기화 기의 부적 절 한 작성을 평가 합니다.
  19. 또는 다음 하위 단계에서 제안으로 삽 관 법을 수행 합니다.
    1. 60 ° 각도에서 테이블에 마우스를 놓습니다.
    2. 접착 테이프를 가진 마우스의 말단을 흥분 하 고 머리를 기대 다.
    3. 직접 후 두 위의 피부에 감기 빛 소스를 배치 합니다.
    4. 성 대를 시각화 하는 집게로 혀를 부드럽게 당겨.
    5. 성 대를 통해 4-정 (24 G)의 플라스틱 튜브를 삽입 하 고 인공 호흡기 설정에 플라스틱 튜브를 연결.
    6. Synchrone 가슴 움직임에 의해 삽 관 법을 확인 하는 정에 호흡기를 연결 합니다.
      참고: 호흡 운동을 중지 하지 않는 경우 마우스 이동 시작, 먼저 분 당 180까지 호흡 속도 증가. 필요한 경우 증가 secondarily isoflurane 농도 3.5%까지 마우스 자체에 호흡 중지 될 때까지. 가장 가능성이 문제 누설 또는 기화 기의 부적 절 한 작성을 평가 합니다.

2. 수술 전 도플러 측정

  1. 부드럽게 결합 조직을 집게로 떨어져 당겨 두 경 동맥 기관에는 누워 외래를 준비 합니다.
  2. 오른쪽에 45 ° 미만의 각도에서 왼쪽된 경 동맥 일부 살 균 초음파 젤 20 m h z 도플러 프로브 팁을 놓습니다.
  3. 천천히 회전 측면 및 도플러 신호를 찾아서 신호를 최적화 하기 위해 프로브 기울기 중간 이동 프로브.
  4. 도플러 소프트웨어를 사용 하 여 표시 하 고 컴퓨터에서 오른쪽과 왼쪽 일반적인 경 동맥에 흐름 속도 저장.

3입니다. thoracotomy

  1. 각 개별 마우스에 대 한 멸 균 장갑의 세트를 사용 하 여 수술 부위의 감염을 방지 하기 위해.
  2. 피부 절 개는 시저와 함께 2 있는 공간으로 확장 합니다.
  3. 갈비뼈를 계산 하 여 2 있는 공간을 시각적으로 식별 하 고 퉁 명 스럽게 intracapsular 집게와 함께이 공간을 침투.
    참고: 1세인트 갈비뼈는 쇄 골 아래 있으며 따라서 보이지 않습니다 2nd 있는 공간 첫 번째 보이는 리브 ( 2 리브)와 3rd 갈비뼈 사이 발견 때문에.
  4. 겸 팁의 도움으로 2 있는 공간을 열고는 견인 기 삽입 합니다.
  5. Thymus의 명확한 보기 운영 테이블에 연결 된 고무 밴드와 함께 있는 견인 기를 조정 합니다.
  6. 출혈 하는 경우 목화-팁을 사용 하 고 2 분 대는 표면에 누릅니다.

4. 가로 대동맥의 밴딩

  1. 중간 및 결합 조직 식별을 200%로 확대를 조정 합니다. 다음 직각된 포 셉을 사용 하 여 부드럽게 thymus를 나눕니다. 대동맥 아치 명확 하 게 볼 수 있습니다 때까지 지방 조직을 제거 합니다.
  2. 아래 ( 그림 1참조) brachiocephalic 동맥과 좌 일반 경 동맥 사이 가로 대동맥 겸 자 매 각도와 터널에 준비 합니다. 좋은 집게의 도움으로 6.0 봉합의 끝을 잡고 고 대동맥 아치 아래 스레드를 전달 합니다.
  3. 아치의 다른 쪽에서 두 번째 집게와 스레드를 가져가 라.
  4. 으로 바늘을 사용 하 여 27 G의 3 m m 긴 조각 길이 잘라는 쥐 쥐에 대 한 스페이서로 19-25 g 몸 무게와 26 G 바늘 사이 무게에 대 한 전술-결 찰에 대 한 스페이서 > 25 g BW.
  5. 신중 하 게는 스페이서 가로 대동맥에 평행 하 게 배치 합니다.
  6. 공백 요소에 느슨한 이중 매듭을 준비 하 고 대동맥을 병렬로 스페이서의 최적의 위치를 보장. 그런 다음 첫 번째 던져 고 신속 하 게 수행 하는 두 번째 반대 던져. 공백 요소를 신속 하 게 제거 합니다.
  7. 가짜 마우스 제어를 수행 하려면 대동맥의 결 찰을 생략 하는 동일한 프로토콜을 따릅니다.
  8. 2노스다코타 있는 공간을 6.0 폴 리 프로필 렌 봉합을 닫습니다. 때 ligating subclavian 선박에 특별 한 관심을 지불.
  9. 연속 봉합 패턴에 6.0 폴 리 프로필 렌 봉합 사를 사용 하 여 피부 봉합

5. 가로 대동맥의 성공적인 결 찰의 확인

  1. 섹션 2에서 45 ° 각도에서 목의 양쪽에 20 MHz 도플러 프로브를 배치 합니다.
  2. 각 측면에 흐름 속도 문서화 합니다.
    참고: 성공적인 전술 도플러 흐름 속도 의해 그림 2와 같이 유효성 수 있습니다. 사이는 오른쪽과 왼쪽 경 동맥 일반적으로 4-10의 흐름 속도 비율 보장 적절 한 전술 ( 그림 2참조).

6. 심장 수확

  1. 1.2 단계에 따라 마 취 법을 유도. 그리고 1.3.
  2. 챔버를 안락사에 마우스를 놓고 볼륨/분의 10-30% 치환 하 이산화탄소 유량 조정 합니다.
  3. 수술 테이블에 마우스 흥분 가 위 및 수확 추가 분석에 대 한 정으로 열 등 한 베 나 정 맥에서 혈액으로 복 부를 엽니다.
  4. 횡 경 막과 sternal 뼈 강한가 위로 잘라내어 심장 제거.
  5. 심장 무게 전에 모든 동맥 및 결합 조직을 제거 합니다.
  6. 우 심 실 및 좌 심 실에서 심장 고 두 샘플 무게 합니다.
  7. 액체 질소에 두 조직 샘플을 동결.

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Representative Results

성공적인 전술 압력 과부하 및 왼쪽된 심 실 비 대의 유도 보장합니다. 압력 과부하의 ad hoc 유효성 검사는 그림 2와 같이 도플러 흐름 속도 측정을 사용 하 여 얻을 수 있습니다. 수술 전 혈액 흐름 속도 두 경 동맥에서, 전술 인해 증강된 혈액 속도 좌 심 실 그리고 대동맥에 높은 압력으로 인해 오른쪽 경 동맥에 포스트 stenotic 감쇠 혈액 흐름 속도에서 발생 하는 동안은 왼쪽 경 동맥.

전술과 그 결과 비 대의 효능 하루 3, 6, 21 일 수술 후에 남성 마우스 C57BL/6J 심장 무게/몸 무게 비율 (HW/BW; mg/g)의 계산에 의해 확인 되었다. HW/BW 비율 전술 쥐 수술 후 6 일 비 줄무늬 쥐에 비해 크게 증가 (4.78 ± 0.18 대7.66±1.43 mg/g, p < 0.0001). 이 비는 21 일 후 거의 일정 (4.8 ± 0.11 vs7.81 ± 0.65 mg/g, p < 0.0001) ( 그림 3참조). 생존 율은 주로 내부 요원 출혈 의존: 정기적인 연습을 통해 5% 이하로 감소 될 수 있다. 21 일 후 생존 율은 주로 유전자 형에 따라 달라 집니다. 마우스 기능 심장 질환에서 생존 율 금액을 고통을 하지 > 85%. 21 일 후 제시 C57BL/6J 쥐의 생존 율 88%에 도달 했다.

수축 기 혈압과 심장 기능 삽 관 법 마 취에서 측정 되었고 다른 사람에 의해 설명 된 대로 1.4 프랑스 압력 계수 테8 수행. 9 심장 박동 (인사) 왼쪽된 심 실 (LV) 수축에 상당한 효과가 있다. 줄무늬 및 비 대동맥 대동맥 줄무늬 쥐의 심장 박동수 (HR)에 차이가 있었다 (p = 0.1456) ( 그림 4A참조) 21 일 후. 대동맥의 일정 구간 (p = < 0.0001)는 증가 수축 기 혈압 ( 그림 4B참조) 21 일 후 측정에 의해 입증 되었다.

문학에서 논의 되었습니다로 C57BL/6J 마우스 전술 후 수축 부전10 편심 비 대를 개발 하는 것 일반적으로 알려져 있다. 왼쪽된 심 실 직경의 증가, 또한 나타나는 볼륨 측정에서 중요 한 발견 되었습니다. 끝 심장 수축 볼륨 23.31 µ L (± 1.617µL) 16.25 µ L (± 1.935 µ L)에서 증가. 이 변화는 상당한 (p = 0.0131) ( 그림 4C참조). 끝 확장기 볼륨 31.24 µ l ± (1.093 µ L) 25.81 µ l (± 1.852 µ L)에서 증가. 이 변화는 상당한 (p = 0.0268) ( 그림 4D참조).

일방통행 ANOVA Bonferroni의 posthoc 테스트 다음 전술 비교 하 고 그룹을 사기 위해 수행 되었습니다. 볼륨 측정, 경우 그룹 웰 치의 교정으로는 짝이 없는 t-검정을 사용 하 여 비교 했다. 모든 데이터 의미 ± SEM (오차 막대)으로 발표 됐다.

Figure 1
그림 1: 2노스다코타 있는 공간 200% 확대를 통해 수술 접근법. 이 사진은 수술 현미경으로 찍은 고 대동맥 아치 brachiocephalic 동맥과 좌 일반 경 동맥 사이 스레드를 표시 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2: 두 경 동맥 (전술 쥐 대 가짜)에서 대표적인 펄스 파 도플러 영상. A) 전술 전에 왼쪽된 경 동맥의 펄스 파 도플러 영상. B) 전술 전에 오른쪽 경 동맥의 펄스 파 도플러 영상. C) 이미지 ofPulsed 파 전술 후 왼쪽된 경 동맥의 도플러. 혈액 흐름 속도 그림 2A에 비해 감소 된다. D) 전술 후 오른쪽 경 동맥의 펄스 파 도플러. 혈액 흐름 속도 그림 2B에 비해 증가 했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3: 심장 무게 / 몸 무게 비. 심장 비 대는 전술 인해 유발 됩니다. 이것은 심장 무게/몸 무게 비율에 있는 상당한 증가 의해 증명 됩니다. 쥐 대동맥 밴딩 없이 (. 가짜 쥐, 흰색 막대) 3, 6, 및 21 일 후 전술 운영 쥐 (검은 막대)를 비교 했다. 전술 후 6 일 심장 무게 몸 무게 비율 크게 전술 생쥐에서 증가 했다. 이 효과 21 일 후 약간 발음 된다. 중요성 p 설정 = < 0.05. ns = 중요 한; p < 0.0001. 데이터는 ± SEM (오차 막대)를 의미 하는 대로 표시 됩니다. n = 그룹 당 6-9. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 4
그림 4: Hemodynamic 매개 변수 측정 압력-볼륨 마우스 (C57BL/6J)에 카 테 터를 통해 전술 없이 수술 후 21 일: A) (bpm) 분당에서 심장 박동 (인사). 침략 적인 측정 동안 비교 마 취 법을 나타내는 두 그룹에서 시간에 차이가 없었다. B) (sBP) 바로 일반적인 경 동맥에 수축 기 혈압. 21 일 후 sBP의 상당한 증가 대동맥 아치의 지속적인 수축을 나타냅니다. C) 끝 심장 수축 양 (ESV)는 크게 증가 했다 (p = 0.0131) 21 일 후에 쇼는 전술 때문에 증가 한 afterload 유도 심 실 팽창. D) 끝 확장기 볼륨 (ESV) 증가 (p = 0.0268. 중요성 p 설정 = < 0.05. ns = 중요 한; * p < 0.05; p < 0.0001. 데이터는 ± SEM (오차 막대);를 의미 하는 대로 표시 됩니다. n = 8-13 그룹 당. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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Discussion

전술 때문에 고혈압의 급속 한 발병 대동맥 협 착 증 또는 고혈압으로 인 한 임상 관련 비에서 다릅니다. 그럼에도 불구 하 고, 심장 마비를 유발 하는 작은 동물 모델의 사용에는 많은 이점이 있다 고 많은 조사11선택 따라서. 이 닫힌된 가슴 모델 쥐4가로 대동맥 수축 유도 하는 수술 방법의 기존 모델을 향상 시킵니다.

가장 중요 한 단계는 대동맥 아치 아래 통로 이다. 대동맥 주위 너무 꽉 봉합 신장 등 중요 장기에 혈액 흐름의 치명적인 감소를 발생할 수 있습니다. 하 겐 Poiseuille의 법률, 흐름은 주로 반지름에 의존 합니다. 따라서, 일부 체중에 맞게 스페이서 우리의 프로토콜에서 사용 되었다. 이 절차는 더 보편적으로 적용 가능한, 개별 실험 설정에 따라 매우 젊 거 나 오래 된 쥐에 관한 특히이 모델을 만든다.

수술 외상 자체 면역 반응을 유도 하 고 방지 하기 위해 절대 최소한으로 감소 되어야 한다 왜곡 하 고 효과. 빠른 복구 및 높은 생존 율은 특히 복잡 한 동물 모델에서에서 필수입니다. 역사적으로, 인간 환자에 thoracotomy, 달리 쥐에 빗 전술 수술 후 복원 되지 않습니다. 따라서, 생리 적 호흡 운동 회복 무료 부동 갈비뼈, 흉 골에 연결 되지 인해 제한 됩니다.

전술에 대 한 최소 침 습 기술을는12,13다른 사람에 의해 사용. 두 모델에서 대동맥 아치 중간 절 개 및 위 부분 sternotomy를 통해 도달 된다. 하지만 두 모델은 오픈 가슴 모델 보다 적게 침략 적, 외과 갈비뼈 또는 대동맥에 도달 하는 흉 골의 일부를 제거 해야 합니다. 우리는 전체 빗 에이즈 빠른 복구의 생리학을 유지 믿습니다. 따라서,이 프로토콜 이미 기존 프로토콜 향상과 자체 수술 외상을 최소화 하는 도움이 됩니다.

더 꼭대기 외과 액세스 인해 atelectasis 또는 pneumothoraces의 방지를 위한 폐의 수술 후 hyperinflation 처럼 때로는 설명된4,14, 필요 하지 않습니다. 이를 열어 기존 모델에서 atelectasis 내쉬는 숨 관을 클램핑 하 여 유도 될 수 있다 폐, barotrauma 수 없습니다. 이 프로토콜은 또한 개별적인된 생리 적 환기 전략을 포함 한다. 그것은 개별적으로 적응된 환기 barotrauma 등 호흡기 관련 합병증을 감소 시키기에서 에이즈 추측을 유혹입니다. 무게 적응 환기 전략을15자체 환기에 의해 조직의 사이토카인 생산에 미치는 영향을 피하기 위해 사용 되었다.

결론적으로, 이러한 기술을 쥐에서 심장 비 대를 유도 하는 대체 하 고 향상 된 모델을 나타냅니다.

외상 thoracotomy 피 함으로써 최소화 하지만 염증의 감소에 대 한 우수한 효과이 출판물에 표시 되지 않습니다. 불행 하 게도, 동물 보호 법률에 의해 제한이 침 습 모델 년 이미 설정 된 때문에 병행 비교에 대 한 최소한의 침략 적 전술 오픈 가슴 전술 수행을 허용 하지 않았다. 따라서, 이러한 문은 우리 그룹의 이전 경험에 근거한 다.

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Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

우리에 그들의 기술 지원을 었 Frede와 수잔 슐츠 감사합니다. 이 연구는 아무 자금을 받았다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Pressure-volume catheter Millar Instruments, USA SPR-839
Mouse ventilator Harvard Apparatus GmbH, Germany Minivent - TYPE 845
Mouse ventilator Harvard Apparatus GmbH, Germany Y-connection with intubation cannula OD 1.2mm 73-2844
Vaporizer Dräger Medical AG&CO.KG, Germany 19.3 Isofluran-Vaporizer (a newer version is available under catalog number  D-877-2010)
Microscope  Leica Microsystems, Germany MZ 7.5
Light source  Schott AG, Germany KL 1500 LCD
6-0 Prolene Ethicon, USA Polypropylene suture BV-1 9.3 mm 3/8c suture for surgery
Seraflex Serag Wiessner, Germany USP 5/0 schwarz;  IC108000  suture for constriction
Homoeothermic Controlled Operating Tables Harvard Apparatus GmbH, Germany Typ 872/3 HT with tripod stand and homoeothermic controller Type 874; 73-4233
Flexible Rectal Probe Harvard Apparatus GmbH, Germany 1.6 mm OD; 55-7021
Doppler Signal Visualisation Instrument Indus Instruments, USA Doppler Signal Processing Workstation (DSWP) with 20MHz Pulsed Doppler Module
Arruga Intracapsular Forceps Altomed, UK A5400
Doppler Probe Indus Instruments, USA 20MHz Tubing-mounted Probe
Jaffe Lid Retractor Altomed, UK A3513

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Eichhorn, L., Weisheit, C. K., Gestrich, C., Peukert, K., Duerr, G. D., Ayub, M. A., Erdfelder, F., Stöckigt, F. A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (134), e57397, doi:10.3791/57397 (2018).

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