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Behavior

Elementos-chave da foto atração bioensaio para insetos estudos ou programas de monitoramento

Published: July 26, 2018 doi: 10.3791/57445

Summary

Arenas de bioensaio foto-atração são usados para determinar as cores de luz ideal para maximizar a atração de insetos; no entanto, bioensaios e métodos são específicos para habitats e comportamentos insetos-alvo. Modificações e equipamento personalizável são explicadas para insetos noturnos ou diurnos e terrestres ou aéreos.

Abstract

Atrativos visuais otimizados aumentará a eficiência de captura de insetos usando comportamentos de inata do inseto alvo (foto-táxis positivos) como um meio para atrair o inseto dentro de uma população controle ou monitoramento de armadilha. Díodos (LEDs) criaram opções de iluminação personalizável com comprimentos de onda específicos (cores), intensidades e larguras de banda, todos os quais podem ser personalizados para os insetos alvo. Bioensaios comportamentais foto-atração podem usar LEDs para otimizar as cores atraentes para uma espécie de inseto até fases da história de vida específicos ou comportamentos (acasalamento, alimentação ou procuram abrigo). Pesquisadores devem então confirmar os resultados de bioensaio no campo e entender a distância limitada atraente dos atrativos visuais.

A arena de bioensaio trevo é um método flexível para avaliar atração foto ao mesmo tempo avaliar uma gama de comportamentos naturais de insetos tais como fuga e respostas de alimentação. A arena pode ser usada para experimentos de insetos terrestres ou aéreos, bem como insetos diurnos e noturnos. Técnicas de coleta de dados com a arena estão filmando, contando o contacto com as luzes ou fisicamente coleta de insetos são atraídos para as luzes. As contas de ensaio para insetos que fazem não-escolha e as arenas podem ser única (não-competitivas) cor ou várias cores (competitivas). O trevo design faz com que insetos com forte thigmotaxis para retornar para o centro da arena, onde eles podem exibir todas as opções em um LED competitivo testes. A arena trevo aqui apresentada tem sido usada com mosquitos, percevejos, mosca Hessian, moscas domésticas, mordidas de mosquitos, besouros de farinha vermelho e prejuízos. Bioensaios são usados para desenvolver precisos e armadilhas de insetos eficazes para guiar o desenvolvimento e otimização de armadilhas de insetos usados para monitorar as flutuações de população de pragas para avaliações de risco doença vetor, a introdução de espécies invasoras, ou utilizados para supressão da população.

Introduction

Quase toda a vigilância entomológica depende do olfato ou atrativos visuais e muitas vezes ambos. Atrativos olfativos voláteis podem dispersar em todo o ambiente, resultando em uma grande área atraente. No entanto, atrativos visuais podem ter um alcance mais limitado devido o invertebrados olho composto resolução imagens1,2,3. Portanto, os atrativos visuais devem ser otimizados para o inseto de interesse para maximizar a atração e a armadilha projetado para tirar proveito dos comportamentos naturais do inseto alvo.

Atração visual baseia-se em comprimentos de onda do sol ou outras fontes de luz que é absorvida ou refletida pela superfície de um objeto; organismos ver esta absorção/refração de comprimentos de onda como cor. Visão de inseto foi encontrado para incluem azul, verde e ultravioleta (UV) comprimentos de onda1. Os insetos usam sua visão para ajudar em encontrar companheiros, comida e abrigo4. Insetos visualmente podem definir tamanhos de objeto, cores, formas, movimentos e contrastes5,6. Insetos desconhecimento ativos são geralmente atraídos pela luz de diferente contraste e intensidade4, enquanto insetos diurnos podem resolver as cores e imagens, além do contraste devido à maior disponibilidade de fóton durante o dia. Armadilhas de monitoramento usam pistas visuais do inseto, a sua vantagem para otimizar a atração e capturar7.

O método mais comum de avaliar foto-atração foi a observação de inseto movimento em direção à várias formas coloridas tais como flores8 ou objetos (tais como cartões pegajoso9,,10). Bioensaios visuais usando colonizados insetos podem ajudar a identificar a gama de comprimentos de onda e/ou intensidades, óptima que reduz o número de ensaios de campo. Bioensaios visuais tais como o "túnel de luz de lado duplo" foram projetados para testes de moscas11. O problema com dois túneis de luz faces são que eles não respondem por insetos que não são coletados. A maioria dos insetos vão ficar preso nos cantos internos e bordos em arenas. Também somente duas cores podem ser testadas de uma só vez. Outros ensaios incluem os métodos de Steverding & Troscianko (2004)12, que reduziu a mosca tsé-tsé atração de grandes bandas (± 50 nm) de cores claras. Luz, emitindo-se diodos (LEDs) foram incorporados as armadilhas para melhorar a atração de insetos, otimizando os comprimentos de onda da luz emitida1,13,14. Otimizando a atração visual destas armadilhas ou dispositivos de monitorização irão melhorar a eficiência de coleta de insetos usando comportamentos inata do inseto para atrair insetos. Desta forma, resultados de bioensaio são usados para otimizar a tecnologia de captura existente. O "terrestre artrópode armadilha" que melhorou a armadilha de cúpula-tipo padrão da indústria para vigilância de besouro de farinha vermelho (EUA patente # US8276314B2)) e o "método e composições para melhoria luz armadilhas" que incorporou da luz-emitindo-se diodos em antena armadilhas de insetos (EUA patente # US2009/0025275A1). As duas patentes usam tecnologia LED que foi otimizada usando os resultados de bioensaio para melhorar significativamente as armadilhas de insetos.

Este estudo descreve uma arena de bioensaio de atração de fotografia e métodos que permitem que os investigadores avaliar a resposta inseto para restringir os comprimentos de onda como uma cor atraente do competidor ou única. Equipamento e modificações experimentais são apresentadas para insetos noturnos, diurnos, terrestres e aéreos.

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Protocol

1. bioensaio componentes

  1. Construção de arena terrestre
    1. Tiras de metal de uso intermitente material de 2,54 cm de comprimento. Dobre cada tira em um meio círculo com um diâmetro de 15,24 cm (Figura 1).
    2. Ligue as extremidades de cada meio círculo e uma forma de trevo de quatro peças. Conecte uma porca e um parafuso de máquina #10 para os extremos de cada meio círculo para mantê-los juntos.
    3. Faça um furo no ponto médio de cada semicírculo 0,79 cm da parte inferior da arena. Apor os titulares de 5 milímetros LED furos feitos no meio de cada semicírculo.
    4. Com o objetivo de reduzir a reflexão, spray de tinta de spray preta fosca em toda a arena14 para cobrir o piscar de metal. Usar uma textura líquida (ex., Fluon) para impedir que os insetos pulando fora da arena a tinta spray.
  2. Construção de arena aérea
    Nota: A arena aérea tem um tamanho e uma dimensão semelhante à arena terrestre; no entanto, utilizou-se material poliacrílico (Figura 2). O plástico transparente permite que toda a luz passar. O plástico transparente impede a reflexão que interfere com o experimento. O plástico transparente também permite que o experimento seja filmado.
    1. Passe os pontos mais distantes de cada semicírculo para permitir que os recipientes de recolha para Aparafuse a arena principal. A forma de trevo envia insetos de volta para o meio. Não há cantos externos incentivam inseto Congregação; no entanto, os copos de coleção de insetos aéreos têm todos os cantos internos e sem cantos externos.
    2. Para recipientes de coleta aérea da arena, usar parafuso polymethylpentene tops (125 mL, 64 mm de diâmetro exterior, 74 mm de altura) e furar a parte de baixo (15 mm de diâmetro).
    3. Em cada uma das partes inferiores dos recipientes, apor tubos roscados (15 mm de diâmetro, comprimento de 60 mm).
    4. Anexe um titular de LED de 5 mm para as tampas de cada recipiente. Cada tampa de gaiola de coleção sobre o orifício grande das gaiolas coleção da linha.
    5. A tubulação roscada da arena no pequeno orifício no lado oposto da gaiola coleção do assento. Certifique-se que a ponta do tubo rosca inteira esteja alinhada com as paredes dentro da arena e se encaixa apertado para a gaiola de coleção.
      Nota: O tubo rosqueado era feito de Teflon. O Teflon brilha a cor do LED que mantém sua gaiola de coleção. A tubulação roscada foi o único elemento que brilha com relação os insetos na arena devido a uma substância de plástico cinza na base de cada gaiola de coleção.
  3. Preparação de eletrônica
    Nota: Há várias cores (comprimentos de onda) de diodos emissores de luz são dependentes químicos usados para construir o LED e, portanto, uma ampla variedade de cores são possíveis (tabela 1).
    1. Para todos os experimentos, use padrão 5mm LEDs com fios positivos e negativos. Os LEDs podem ser estreitos em sua gama de comprimento de onda ± 5 nm ou podem ser grandes em sua gama de comprimento de onda ± 50 nm.
    2. Defina o ângulo como o ângulo máximo cônico, na qual uma exposição pode ser vista. Caso contrário, estes são conhecidos como buraco LEDs. Através do buraco LEDs exigem através de slots de buraco em um PCB, um chicote de fios de fiação, ou fios soldados aos terminais positivos e negativos. Superfície de montagem de LEDs exigem adequada PCB design e solda para incorporá-las.
    3. Incorporar o sistema eletrônico para controlar a ingestão de energia LED (LED intensidade) resistências variáveis (Figura 3). Use um espectrômetro de luz para verificar a intensidade (W/m2) e o comprimento de onda (nm) dos LEDs para cada experimento.

2. preparação de arena

  1. Antes e entre cada replicar, cuidadosamente desmontar e limpar a arena usando um sabão inodoro, não abrasivo em água morna para remover quaisquer odores ou attractants indesejados. Use uma esponja com um baixo nível de abrasivo para evitar riscar a arena.
    1. Completamente seco da arena e coloque-a para terminar o ar de secagem em preparação para o próximo julgamento. Isso evitará manchas de água desenvolvendo. Arranhões e marcas de água podem causar refração sobre esses pontos na arena. Distorções criam erro nos resultados.
    2. Sempre que a arena deve ser tratada, use luvas de nitrilo para evitar a introdução de odores humanos sobre as superfícies da arena.
  2. Gravar as seguintes condições ambientais: umidade, temperatura, pressão barométrica, data, hora de início/fim, fontes de luz externas e posições de LED na arena. Gravar esses valores e monitorar suas tendências de experimento para experimento. Isso garante repetições experimentais uniformes adequadas, gravar as condições ambientais, antes e após as repetições.
  3. Tipos de experiências
    Nota: Esta configuração é capaz de testar luz única e competitiva.
    1. Para o teste de luz única, use uma luz emitida em um único trevo enquanto o resto das folhas trevo tem nada emitindo a partir deles.
    2. Para experiência competitiva, emitem luz de todos os quatro artérias com características diferentes em concorrência uns com os outros.
      Nota: Outras experiências podem avaliar a importância do estado de insetos (alimentar, fome, teneral, acoplado, sangue alimentado, etc.) e palco de história de vida. Software de gravação/análise comportamental pode ser usado para registrar e quantificar o comportamento. Para experiências noturnas, câmeras de infravermelhas podem ser usadas para exibir os insetos, que irão brilhar branco no IR gravar em contraste com a escura arena.
    3. Rode LED posições após cada replicar para controlar o efeito potencial de interferência de luz entre fontes de luz adversárias e quaisquer preferências ambientais.
    4. Para contar o número de coleções de insetos que não vá nos furos, use LEDs infravermelhos, uma câmera infravermelha e software14. A gravação de vídeo irá mostrar que o número de besouro visitas para cada LED. Uma coleção não é contabilizada a menos que o inseto se move do centro da arena em direção a um LED em vez de seguir uma borda passado um LED.
  4. Instalação de arena
    1. Construa um pedestal com quatro frascos de pedreiro idênticos e coloque um pano de linho preto em cima deles. O pano de linho é preto para impedir que a luz refletindo fora da parte inferior da arena.
    2. Coloque a placa de base da arena no topo do pedestal. Monte cada pedaço da arena em cima desta placa de base.
    3. Coloque a trevo arena centralmente em torno do ponto de lançamento da placa de base. Manter esta central permite que os insetos que emergem do centro do experimento, dando-lhes sem preferência inicial.
    4. Instale a luz emitindo-se diodos (LEDs) para os titulares de LED do contêiner quatro coleção.
    5. Configure o equipamento elétrico para controlar as luzes.

3. começando bioensaios

  1. Coloque a tampa clara da arena pela arena paralelo à placa de base. Se os insetos são liberados através da placa de base, a tampa da arena já deve estar na arena. Isso contém insetos e permite a avaliação visual ou gravação de vídeo (insetos terrestres).
    1. Se necessário por espécies (insetos aéreos), imobilize temporariamente os insetos para permitir a extração de suas gaiolas (emergência) e permitir a introdução de arena. Derrubando os insetos pode ser realizada com temporariamente com dióxido de carbono ou uma temperatura fria (<-20 ° C para mosquitos-4,00 ° c para mosquitos).
    2. Usando um aspirador, extrai o sexo desejado e contagem de insetos dos insetos batidos para baixo. Em seguida, introduza os insetos para a arena através da placa de base. Use um tubo ou outra ferramenta de aspiração para a extração de insetos. Muito manuseio ou longas exposições reduzirá a sobrevivência.
    3. Começa as gravações de bioensaio/avaliação antes aclamação para confirmar os insetos estão respondendo apenas para a luz e não exibindo uma resposta de fuga. Para evitar a fuga de resposta, uma proporcionar um tempo de aclimatação de 1 h para os insetos antes de ligar o sistema eletrônico. Insetos orientam no sentido de comprimentos de onda específicos da luz durante sua resposta de fuga quando colocado em um ambiente novo.

4. terminando e quantificando os bioensaios

Nota: A duração de cada replicar experimental dependerá de comportamento de insetos e de tempo de resposta, em geral usar uma exposição mais longa, mais respostas tendem a ser mais informativo.

  1. Registro das condições ambientais.
  2. Pare as gravações, tais como a câmera de infravermelho, se usado.
  3. No caso de utilizar câmaras de coleção: após cada replicar, coloque a trevo arena em um freezer para matar os insetos para quantificação. A arena não deve ser deixada no congelador por muito tempo, porque o ambiente frio pode causar o plástico de crack.
  4. Quantificar o comportamento de insetos por contagem respondentes insetos em gaiolas de coleção ou análise de vídeo. Insetos que permaneceram na arena trevo foram contados como não tendo feito nenhuma escolha. Por exemplo, Culicoides foram encontrados para ser mais atraídas pela luz UV em comparação com fazendo nenhuma escolha7.

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Representative Results

A arena terrestre tem sido usada para melhorar armadilhas para farinha vermelho besouros14 de monitoramento de pragas e as arenas aéreas para bárbaro voa15 e mordidas de mosquitos7. Embora os trevo arenas foram semelhantes, as condições de cada espécie de inseto eram diferentes e acomodados a avaliação dos insetos noturnos ou diurnos que pode rastejar ou voar. Mais importante, estes estudos de laboratório traduzido em aplicações de campo para monitorar alterações de população de insetos pragas, introdução de espécies invasoras, supressão de população e/ou avaliações de risco de vetor de doença.

Os besouros de farinha vermelho, uma praga de produtos armazenados, foram avaliados na arena terrestre e filmado usando uma câmera infravermelha de14. Respostas foram consideradas positivas para uma cor, se um besouro movido em direção e em contato com o LED. A configuração da arena foi um estilo competitivo com quatro luzes ou três luzes e um vazio escuro para controle. Dados experimentais indicam que os besouros eram mais atraídos por perto de LED UV (390 nm) (Figura 4). Esta informação foi usada para fazer um besouro de farinha vermelho a melhor armadilha usando uma matriz de LED UV octogonal, que resultou em um aumento de 20% na coleção em comparação com uma taxa de 1% de captura com o original do pheromone attractant sozinho.

Hessian voa, colheita de campo de trigo pragas foram avaliadas para a atração de foto usando a arena aérea com uma diurnas configuração15. Hessian moscas eram mais atraídas por comprimento de onda verde com intensidades altas (Figura 5). As fêmeas preferiam os espectros verdes de 502 e 525 nm. No entanto, ambos os sexos preferiam de alta intensidade de luz (16 W/m2). Este é o primeiro relatório da mosca Hessian atração selecionem comprimentos de onda emitidos e intensidades de LEDs sob condições controladas. Estes resultados estão sendo usados para desenvolver uma melhor armadilha de deteção de mosca Hessian para campos de trigo populado.

A doença vetor mordidas midge, Culicoides sonorensis pode transmitir o vírus, que em cervídeos, bovídeos e ovids podem resultar em doença hemorrágica epizoótica ou doença da língua azul. C. sonorensis foram testados usando a arena aérea em condições nocturnas para determinar as cores ideais que atraiu açúcar buscando mordidas de mosquitos7. As maiores proporções de mordidas de mosquitos foram atraídas à luz ultravioleta (UV) e intensidade da luz foi importante com as luzes mais brilhantes, sendo mais atraente (Figura 6). Comportamentos de procura de açúcar e fuga foram acionados por 355 nm e 365 nm de comprimento de onda respectivamente e os mosquitos mordidas distingue-se entre as luzes de duas cores. Usando estes comprimentos de onda, a atração de c. sonorensis para armadilhas de luz pode ser melhorada e as luzes foram incorporadas ao inseticida açúcar armadilhas16.

Figure 1
Figura 1: este desenho reflete a dimensão da arena terrestre. O lançamento ponto no meio da arena, bem como pontos de anexos de LED no ápice de cada meio círculo são rotulados. Também apresentado é um exemplo de uma projeção cônica de luz de um LED. O ângulo de visão ideal dos LEDs é 45°, embora o projeto arena permite mais estreita ou ampla visualização ângulos, como os círculos metade limitará luz cruzamento, exceto no meio da arena. A arena terrestre tem um perfil mais baixo comparado à arena aérea porque os insetos não precisam de espaço para voar, que ajuda a manter o foco sobre os insetos gravações em vídeo. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 2
Figura 2: A arena de ensaio luz aérea construída a partir de acrílico desobstruído embora ele tem os mesmos benefícios do projeto da arena terrestre, mas permite mais espaço vertical para voando inseto avaliação. Quatro recipientes de recolha tem LEDs de diferentes comprimentos de onda iluminando seu respectivo ápice do trevo. Esta figura mostra a arena montada estilo competição com vermelho, verde, azul e luzes UV. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 3
Figura 3: esquema elétrico de uma fonte de alimentação de DC de V 6 anexado a resistências variáveis (potenciômetros) que controlam o poder de cada LED (diodo emissor de luz) então a intensidade de cada LED pode ser ajustado independentemente. Papel de densidade neutra também pode ser utilizado para reduzir a intensidade sem alterar o comprimento de onda emitido. Comprimento de onda e de comprimentos de onda são ajustados, selecionando químicas de LED diferentes. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 4
Figura 4: (Topo) O movimento de dez besouros vermelhos farinha por 5 min foi avaliado na arena de trevo. Uma visita foi definido movimento no sentido de uma cor, resultando em tocar o LED. Cores testadas eram azuis (410 nm) e UV (390, 380 e 360 nm). Barras de erro padrão são indicadas e diferenças significativas são denotadas por letras (p < 0,0001), letras diferentes indicam significativamente diferentes meios. (Parte inferior) Nova avaliação do movimento com cores de intensidade mais baixas foi semelhante ao acima, mas com as cores UV (390 nm), verde (555 nm), vermelho (655 nm) e amarelo (587 nm). (Figura 4 foi reproduzida a partir de Duehl et al 2011 com permissão). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 5
Figura 5: machos e fêmeas moscas Hessian foram avaliadas para a atração de foto separadamente evitar factores co-fundadora. (A-C) são do sexo feminino respostas voar e (D-F) são do sexo masculino. Diferenças significativas são indicadas por letras diferentes (P < 0,05), letras diferentes indicam significativamente diferentes meios. (A e D) Machos e fêmeas foram significativamente atraídas para verde (527 nm) em relação ao vermelho (624 nm), amber (590 nm) e azul (472 nm). (B e E) Dentro os espectros verdes 502-525 nm era mais atraente e (C e F) a intensidade da luz foi importante. (Figura foi reproduzida a partir de Schmid et al 2017 com permissão). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 6
Figura 6: (Topo) Culicoides sonorensis foram atraídos significativamente mais para UV luz do azul, verde ou vermelho. Letras diferentes indicam significativamente diferentes meios (P < 0,05), letras diferentes indicam significativamente diferentes meios. Refeições de açúcar foram fornecidas antes cada replicar. (Parte inferior) Atração de intensidade da luz foi avaliada utilizando Culicoides sonorensis movimento em direção à luz UV mesma, mas em diferentes intensidades (4, 8 e 12 watts) e uma luz azul (24 watts). (Figura foi reproduzida a partir de Snyder et al. 2016 com permissão). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Suplementar tabela 1: tabela geral LED para comprimentos de onda. Existem mais comprimentos de onda LED estreitos; Esta lista mostra apenas amplas gamas de LEDs que existem nos espectros de visão do inseto. Clique aqui para baixar este arquivo.

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Discussion

Bioensaios de foto-atração são uma ferramenta importante para determinar as cores atraentes ideal e minimizar as opções para ensaios de campo destas cores. No entanto, vários fatores devem ser considerados ao otimizar o bioensaio para um inseto específico, incluindo: única luz vs. experiências competitivas de luz, brilho, faixa espectral ideal, interferência de luz ambiente, estada dos insetos e comportamentos naturais que possam limitar as possíveis respostas.

A maioria dos insetos tem alguns phototaxis, que pode ser uma inata escapar o mecanismo, fazendo com que o inseto se mover em direção à luz. Isso pode ser testado, fornecendo uma fonte de luz única na arena e deixando os outros três lados escuros. No entanto, um teste competitivo terá quatro luzes coloridas e demonstra a preferência de cor com base na resposta inseto para cada luz. Usuários de bioensaio devem determinar se eles estão testando para atração de luz ou luz de preferência. A arena competitiva pode ser configurada para procurar por repulsão também. Lembre-se que os insetos podem ainda não fazer uma escolha de cor clara, se ficarem na arena e não orientar em direção uma luz. Estes insetos de escolha não devem ser contabilizados nos resultados.

Luminoso brilho diodo deve sempre ser considerado, e as luzes da arena devem ser aumentadas ou diminuídas com a mesma intensidade; Portanto, é importante testar o brilho dos LEDs antes de cada ensaio com um espectrómetro de foto. Os potenciómetros são importantes para controlar a tensão de cada LED, que por sua vez, ajusta o brilho. Produzido comercialmente LEDs variam em resposta de tensão até mesmo dentro de um grupo de LEDs com o mesmo espectro, cada LED diferente deve ser avaliada e o potenciômetro ajustado antes do uso. Mesmo com esta densidade neutra técnica filtros às vezes são necessários para reduzir a intensidade das lâmpadas muito brilhantes. Snyder et al . (2016) 8 e Schmidt et al . (2017) 10 encontrou o brilho para ser um fator significativo em mordidas midge e mosca Hessian coleções com as luzes mais brilhantes coletando insetos proporcionalmente mais, embora o comprimento de onda foi o fator mais importante, seguido de brilho.

Usuários de bioensaio irão beneficiar através do teste de espectros de onda estreita LEDs. Snyder et al . (2016) 8 encontrado c. sonorensis capaz de diferenciar entre comprimentos de onda (10 nm separado) e estas suscitou respostas comportamentais muito diferentes. Diodos emissores de luz de comprimento de onda estreita, portanto, será necessário determinar o comprimento de onda estreito ideal de luz para um determinado comportamento.

Luz externa pode interferir na atração de luz. Schmidt et al . (2017) 10 encontrados Hessian moscas muito mais atraídas por cores, quando é fornecida uma arena escura do que durante um iluminado. No entanto, em uma arena crepuscular (parcialmente iluminada), as luzes funcionou melhor. Uma arena escuro bloqueia 100% da luz externa e é usado para testar os insetos noturnos em seu ambiente visual mais natural. As arenas também podem ser usadas em luz natural para simular o ambiente visual de um insecto diurno, fator importante para garantir a atração, sob condições de interceptação do mundo real.

Embora a atração visual é importante, atrativos olfativos (feromônios, kairomones) podem ser adicionados como Duehl et al (2010) 16. esta atração sinérgica aumentada coleção de armadilha. Um atrator de longa distância pode ajudar a trazer indivíduos mais próximos à fonte de luz atraente e extremamente aumento interceptará atração14. Por exemplo, o feromônio usado para atrair os besouros de farinha vermelho era um feromônio do sexo feminino. No entanto, testando vários estágios como agente federal, unmated, recentemente surgiu, ovos, alimentos/anfitrião buscando ou outros Estados podem ser importantes porque eles podem ter atrações exclusivas como o maio as várias fases da história de vida como larvas, pupas ou adultos. O ambiente de armadilhas também deve ser considerado, em ambientes ricos de comida como moinhos de farinha comida odor com base atrativos será menos eficazes.

Arenas podem alterar ou influenciar comportamentos de inseto, mesmo sob condições controladas, tais como fixados níveis de luz, umidade e temperatura. A pequenas áreas ou aberturas podem ser restritivas aos movimentos naturais do insetos. Por exemplo, em um julgamento Culex tarsalis mosquitos não entra as aberturas estreitas em gaiolas de coleção (LW Cohnstaedt, observação pessoal) e moscas domésticas não entraria áreas escuras11. Em alguns casos, estes podem ser superados usando papel colante e captura os insetos que se aproxime as luzes mas não entrarão em gaiolas ou filmando os comportamentos de insetos. Portanto, todos os resultados de bioensaio laboratório precisam ser confirmada com testes de campo.

A arena de bioensaio luz e protocolo descrito são únicas, porque eles podem ser adaptados a qualquer espécie de inseto terrestre ou aérea. As arenas design contas de alta atividade e baixa atividade insetos (a forma de trevo) e as luzes são flexíveis para vários ensaios competitivos e não competitivos. Por último, esse método também pode acomodar a maioria qualquer traço de história de vida (tais como fome, açúcar/anfitrião buscando, palco da história de vida, etc.). Estas razões ajudam a tornar esta luz bioensaio um protocolo universal e flexível para tempo mínimo ou dinheiro investido.

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Disclosures

Nenhum

Acknowledgments

Nenhum

Materials

Name Company Catalog Number Comments
metal flashing material
#10 stainless steel machine screw Stock
#10 stainless steel locking nut Stock
5 mm LED holder Radio Shack Corp 276-080
matte black spray paint Stock
Fluon Stock
molded polyacrylic
screw top Nalgene Thermo Fisher Scientific Nunc polymethylpentene 125 mL, 64 mm outer diameter, 74 mm height
Threaded Teflon pipes Stock 15 mm diameter, 60 mm length
StellarNet light spectrometer Stellar Net, Inc BLACK Comet C-SR-25
LED infrared light source Tracksys LTD
infrared video camera Panasonic Corp WV-BP330 Panasonic CCTV camera
MEDIACRUISE software Canopus Corp

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References

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Comportamento edição 137 diodos emissores de luz bioensaio Arena competição foto-táxis doença-vector vigilância de inseto inseto terrestre e aéreo aprisionando
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Cohnstaedt, L. W., Disberger, J. C., More

Cohnstaedt, L. W., Disberger, J. C., Paulsen, E., Duehl, A. J. Key Elements of Photo Attraction Bioassay for Insect Studies or Monitoring Programs. J. Vis. Exp. (137), e57445, doi:10.3791/57445 (2018).

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