Summary
Vi utvecklade en låg kostnad och små flygning kvarn, konstruerad med allmänt tillgängliga objekt och användas enkelt i experiment. Använder denna apparat, mätte vi en ambrosia skalbagge, Platypus quercivorusflykt förmåga.
Abstract
Ambrosia skalbaggen, Platypus quercivorus (Murayama), är vektorn av svamp patogener som orsakar massdöd av Fagaceae träd (japanska ekvissnesjuka). Därför kan att veta spridning kapacitet hjälpa informera svällning/träd borttagning ansträngningar för att förebygga denna sjukdom mer effektivt. I denna studie vi mätt flyg hastighet och längd och beräknad flyg distansera av skalbaggen använder en nyutvecklad flyg kvarn. Flyg kvarnen är låg kostnad, små och konstruerade med hjälp av allmänt tillgängliga artiklar. Både flyg mill armen och dess vertikala axel består av en tunn nål. Ett tips av armen med omedelbar lim limmas en skalbagge förlaga. Den andra tipset är tjock på grund av att vara täckt med plast, således det underlättar upptäckt av rotationer av armen. Rotationen av armen upptäcks av en fotosensor monterad på en infraröd LED och indikeras av en förändring av utspänningen när armen passerade ovanför LED. Foto sensorn är ansluten till en persondator och spänning utdata lagras på en samplingsfrekvens på 1 kHz. Genom att utföra experiment med denna flygning kvarn, Vi hittade att P. quercivorus kan flyga minst 27 km. Eftersom vår flygning mill består av billiga och små vanliga artiklar, kan många flyg mills förberedas och användas samtidigt i ett litet laboratorium utrymme. Detta gör det möjligt för praktiker att erhålla en tillräcklig mängd data inom en kort tidsperiod.
Introduction
Djur migrera långa avstånd på jakt efter mat och kompisar. Flyttande djur kan ibland utföra oönskade följeslagare. Den kvinnliga ambrosia skalbaggen, Platypus quercivorus (Murayama), är en känd vektor av svamp patogener, Raffaelea quercivora Kubono et Shin-Ito. Denna patogen orsakar massdöd av Fagaceae träd (japanska ekvissnesjuka) och hög dödlighet1. Sedan 1980, denna sjukdom har expanderat över hela Japan, och har blivit ett allvarligt problem2.
P. quercivorus är en liten insekt (4-5 mm i kroppslängd och 4-6 mg i kroppsvikt) och årliga expansion av sjukdomen tyder på att de kan flyga upp till flera km3,4. Den manliga P. quercivorus lokaliserar en värd träd och frigör en aggregering feromon som attraherar både män och kvinnor5. Följaktligen, värd trädet attackeras massa av artfränder, och så småningom dör. Manlign tråkar ut en tunnel inne i trädet efter landning och ett feromon-lockade kvinna går in i tunneln och lägger ägg. De kläckta P. quercivours växa i tunneln tills de blir vuxna. Vuxna dyka upp och sprida för att hitta nya värdar. Expansion av sjukdomen är således möjligen relaterad till denna skalbagge flyttande förmåga. Den utsträckning som skalbaggen kan flyga är dock fortfarande oklart. Kvinnor är dessutom större än hanar6 (kvinnliga: 4,6 mm och hane: 4,5 mm) och manliga skalbaggar söka efter ett mål träd, ange tunneln inne i trädet och sedan locka honan. Med tanke på dessa sexuella skillnader i kroppsstorlek och rollen av flyg i deras liv, sexuella skillnader kan finnas i flykt förmåga, men skillnaden i förmåga är fortfarande oklart.
I allmänhet är det extremt svårt att mäta flyttande förmåga i fältet, särskilt flyg förmåga, på grund av det breda utbudet av flyttande området. Flyttande förmåga har mätts i laboratorier under uppbundna villkor, såsom ett system för mill, för över 60 år7,8,9,10,11,12 , 13. flygning mill system har visat att vissa insekter har förmågan för långväga flygning. Till exempel den längsta flygningen av mountain pine beetle i en flygning kvarn var över 24 km14, och Tetrastichus planipennisi Yang flög maximally över 7 km15. Även om flygning kvarnen är ett allmänt tillgängliga verktyg, resultera biologiska analyser med ett levande djur ofta i betydligt stora individuella skillnader. För att övervinna detta, krävs många mätningar, upprepas flera gånger, att erhålla pålitliga uppskattningar av genomsnittlig spridning kapacitet. Flera individer bör därför användas samtidigt för att snabbt samla en tillräcklig mängd data. Men samtidig experiment kräver ett större utrymme, flera experimentella uppställningar, och är dyrare jämfört med ett enda mätsystem. Därav, flyg kvarnen måste vara låg kostnad, bör vara enkelt byggda med allmänt tillgängliga objekt och kompakta storlek. Dessutom bör det experimentella förfarandet inte vara komplicerat eller behöver en skicklig operatör.
I denna studie, vi monterade en små, billiga flyg kvarn (figur 1 och figur 2) som lätt kan användas i experiment och mätt flygning förmåga ambrosia skalbaggen, P. quercivorus.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. byggande av en flygning kvarn
-
Byggandet av en Flygapparatur mill
- Skär av den plast-delen från en nål (metalldelar: 40 mm i längd och diameter 0,25 mm; plast del: 22 mm i längd och 2 mm i diameter) med Avbitartång (figur 3).
- Fixa denna nål med en obehandlad nål i form av ett kors med epoxi harts lim (figur 3), hänvisa dem som en flygning mill arm och en axiell nål.
Obs: För en axiell nål, den obehandlade sidan bör en nedtill. Den avtäckta tipset av flygning mill armen är för limning en skalbagge (figur 1B och figur 3).
-
Konstruerandet av basen
- Gör en liten grop på ytan av en tunn rostfri metallplatta (5 x 5 cm) genom att Hamra en spik för att förhindra axiella nålen glider horisontellt (figur 4).
Obs: De faktiska dimensionerna av metallplattan är inte kritisk, och ett annat material är möjligt, men Undvik att använda något mjukt material; Annars kan kommer nålen att fastna, hindrar bruket från roterande. - Placera och fixa metallplattan på trä styrelsen (trä bas) med tejp.
- Böj en stålplåt för att göra det dubbla L-formade (figur 1 c och figur 2A).
Obs: Det var bekvämt att använda en L-formad metallplattan för fastställande möbler på väggen. En annan praktisk punkt stöd för använda denna typ av plattan var att plattan redan hade många hål. Hål användes för skruva, och också fastställa en tryckknapp (figur 1A och figur 4). - Göra en cylinder av skärande spetsen av disponibel plast pipett (höjd = 1 cm, ytterdiameter (OD) = 4 mm, invändig diameter (i.d.) = 2 mm) för att styra en axiell nål (figur 2A och figur 4).
- Sätta och fixa dubbla L-formade plattan och cylindern på metallplattan (figur 2A och figur 4).
- Gör en liten grop på ytan av en tunn rostfri metallplatta (5 x 5 cm) genom att Hamra en spik för att förhindra axiella nålen glider horisontellt (figur 4).
-
Byggandet av fjärranalys apparaten
- Böj en metallplatta för att göra det L-formade för att göra en topplatta.
Obs: Det var bekvämt att använda en L-formad metallplattan för fastställande möbler på väggen (figur 5B-C). Om så, kan du hoppa över detta steg. - Sätta en liten metall tak (5 mm i längd och 1 mm i diameter) på den övre plattan (figur 2D-E, figur 4och figur 5A).
Obs: Som en mössa, vi använde en tryckknapp. Det passerade genom ett hål i den L-formade plattan (figur 4). - Fixa en fotosensor på L-formade plattan (figur 4 och figur 5A). Skruvade krets substrat för sensorn på L-formade plattan att spara utrymme (figur 2D-Eoch figur 4).
- Limma en infraröd LED (150 mW) på en liten magnet tillsammans med en krets substrat för LED (figur 1A och figur 2A).
- Placera LED (150 mW) på bottenplattan under fotosensor (figur 1A och figur 2A).
- Böj en metallplatta för att göra det L-formade för att göra en topplatta.
-
Konstruktion av innehavaren av
- Böj en metallplatta för att göra det L-formade.
Obs: Det var bekvämt att använda en L-form metallplattan för fastställande möbler på väggen (figur 5B-C). Om så, kan du hoppa över detta steg. - Fixa plattan på en trä styrelsen (trävägg) med skruvar (figur 1 c, figur 4och figur 5B). Höjden av trä styrelsen är inte kritisk, det var 7 cm i denna studie.
- Böj en metallplatta för att göra det L-formade.
-
Ansluta kablar
- Ansluta en analog ingångskanal (AIN) foto sensorn av en A/D-omvandlare via normala elektriska kablar.
Obs: Det är bra om alla kablar är stuvat och fast på den L-formade plattan (figur 5B-D) eftersom en rörig arbetsyta förhindrar ofta fina manipulation i hela experimentet. - Anslut den-omvandlaren till en persondator (PC) via en USB-kabel.
- Ansluta en analog ingångskanal (AIN) foto sensorn av en A/D-omvandlare via normala elektriska kablar.
2. experimentell förfarande
- Samla alla färska framkom P. quercivorus vuxna från en döda Quercus mongolicae Blume (om bokar: Fagaceae) träd i morgon (7-9 am) den dag som försöket ska utföras.
Obs: Använd inte skalbaggar i föregående dag. Mer än 100 skalbaggar kom ut varje dag och nyligen framkommit skalbaggar var kontrolleras dagligen. Se en referens16 för detaljerade metoder på att samla skalbaggar. - Sätta en skalbagge på is för anesthetization. Undvik att få skalbaggen våt; annars blir det svårt att slutföra följande procedur. Utföra alla efterföljande förfaranden på is.
- Placera en liten mängd av en komponent i den omedelbar lim (jellylike lim) på beetle längsgående med mill armen och hålla mill armen i kontakt med den längsgående.
Obs: Jellylike limmet torkar långsamt om detta lim används ensamt. Dock fungerar detta lim snabbt när två komponenterna blandas (Tabell för material). Den andra komponenten (flytande lim) kommer att användas i nästa steg. - Lägga till en liten mängd av den andra komponenten av lim (flytande lim) med en fin nål eller stick. Säkerställa att vingarna är fri från lim (figur 1B). Flytande lim används för att underlätta härdning av jellylike limmet.
- Justera korsformade nålen in flyg kvarnen (figur 6) med hjälp av en magnet för att hålla L-formade plattan (övre plattan) på andra L-formade plattan. Bara Skjut den övre plattan när du justerar höjden på den övre plattan för nålen. In den övre spetsen av den axiella nål i hålet av snap-knappen på den övre plattan (figur 5A) och placera den andra spetsen i guiden på bottenplattan (figur 6).
- Justera positionen för en IR LED under sensorn.
3. Hämta och analysera Data
- Spela in förstärkt utsignalen från fotosensor och lagra den i datorn via en A/D-omvandlare med kommersiell programvara med en samplingsfrekvens på 1 000 punkter/s (figur 7A) (för-omvandlare och programvara, Tabell för material).
- Starta programvaran DAQFActoryExpress.
- Klicka på ett kors (+) Markera på ikonen Logga i arbetsyta -fönstret.
- Högerklicka på namnet på loggning och välj Påbörja loggning Set.
Obs: Programvaran fortsätter logga och spara data. - För att stoppa inspelningen, högerklicka på namnet på loggning och välj Slutet logga in för att spara en .csv-fil.
- Extrahera passerar tiden för flygningen mill armen ovan IR LED med hjälp av en lämplig programvara genom att upptäcka tider endast när inspelade spänningen överstiger tröskelvärdet (0,5 V).
Obs: Eftersom vissa program (t.ex., MS Excel) kan läsa en skapade CSV-fil, Använd en bekant programvara beroende på studiens syfte. Om det behövs, Ladda ner de skräddarsydda program som är tillgängliga via Github, https://github.com/HidetoshiIkeno/FlightMill. För ytterligare information om våra program samt instruktioner att använda programmet, se README-filen som åtföljs med huvudprogrammet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
I dessa experiment, ca 50% av skalbaggar tillämpas på flyg kvarnen visade en eller flera varv. När plastdelen passerade en virtuell linje mellan sensorn och LED, inspelade spänningen ändras från om 0 V till ca 6,5 V och varaktigheten av en förbipasserande var inom 10-20 ms, beroende på flyg hastigheten. Därför observeras en spike-liknande spänning förändring som en revolution (figur 7B). Vi definierade flygning som när flight mill armen kretsade, dvsspänning översteg tröskelvärdet (0,5 V), oberoende av antalet rotationer i en släng, revolution hastigheten eller revolutionen varaktighet. Vi också definieras flygtid som en tid endast när inspelade spänningen överstiger tröskelvärdet. Således extraherades endast en tidpunkt för varje godkänd av den plast-delen. Följaktligen, 50% av skalbaggar tillämpas på flyg kvarnen ”flög”. Vissa skalbaggar som tenderade att öppna och stänga sina vingar upprepade gånger innan en flygning, men i de flesta fall skalbaggar började flyga utan visar några tecken i förväg. Vanligtvis en skalbagge höll flyger under en viss period (partiell flyg) och sedan flög igen efter ett intervall (figur 7 c-D). Det var inte möjligt att förutsäga huruvida skalbaggen skulle återuppta flyg. Således har vi utsett en mätning vara komplett när intervallet var över 60 min.
I de flesta fall skalbaggarna flög med en hastighet av 3-6 varv per sekund (0,75-1,50 m/s). Vi beräknade den totala flygningen genom att multiplicera avståndet av en revolution (dvs, omkrets av flygbanan), som kommer att vara cirka 25,1 cm, och är beroende av flygning mill armen, med det totala antalet rotationer. För att undvika underskattning av skalbaggarna flygkapacitet, utelämnas vi skalbaggar som visade en kort flygning (mindre än 1 km) från denna analys. Slutligen fick vi 16 skalbaggar (7 män och 9 kvinnor) från 35 skalbaggar som utfört minst en revolution.
Vi definierade flygtid som total tid tillbringade flygande och flygningen som summerade avståndet mellan partiell flyg. 16 skalbaggar visade en 1,26 timme (3,24 km) eller längre flygning utan energiintag. Maximal varaktighet och avstånd var 7,5 h och 27.1 km, respektive. Eftersom flyg löptider och avstånd var till stor del annorlunda bland individer i dessa experiment, var medianvärden mer informativ än medelvärden.
För att undersöka sexuella skillnaderna i flykt förmåga, vi grupperade data beroende på kön och fann att flygningen var liknande för män (median: 10,2 km, genomsnittlig: 13,4 ± 3.11 km, min: 3.3 km, max: 27.1 km) och kvinnor (median: 17.2 km, genomsnitt: 17,2 ± 2.16 km, min : 8,7 km, max: 25.4 km). Wilcoxon rank sum test visade ingen signifikant skillnad (p = 0.211) i flygningen mellan män och kvinnor (figur 8) eller i flyg löptider mellan hanar och honor (hanar: 3,8 h, Honor: 4,7 h, p = 0,142). Således sluta vi att båda könen av skalbaggar kan ha samma förmåga av flyg i avstånd och tid.
Figur 1: översikter över flyg kvarnen. (A) flyg kvarnen sned uppfattning. Jämför med en tennisboll för skalning. (B) en skalbagge som bifogas flyg kvarnen. (C) skalor för en flygning kvarn. Se figur 2 för mer specificerar av varje delar. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: flyg kvarn från olika Visa vinklar. En frontal (A), vänster (B), höger (C)och (D) ovanifrån av flygning kvarnen. (E) botten med utsikt över den övre plattan. För att fotografera, flyttades LED underifrån fotosensor. en: axiell nål, bp: bottenplatta, dlp: dubbel L-formade plattan, gb: guide på bottenplattan, gt: guide på den övre plattan, LED: IR LED, lp: L-formade plattan, ma: flyg mill arm, mp, metallplattan på bottenplattan, ps: fotosensor. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: nål som används för flygning kvarnen. En ursprungliga nål (vänster) och en kors-formad nål (höger). En nål storlek är: metalldelar: 40 mm i längd och 0,25 mm i diameter, plast-delen: 22 mm i längd och 2 mm i diameter. en: axiell nål, ma: flyg mill arm. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: hur man konstruerar flyg kvarnen. Se text för detaljer. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 5: flyg mill delar. (A) en guide på den övre plattan och en fotosensor fastställdes på L-formade plattan med epoxi harts lim. Diametern på hålet på knappen snap var 1 mm och längden var 5 mm. (B) en sned bild av flygning kvarnen från övre höger vinkel. En magnet ansluter två L-formade plattor. En svart L-formad plåt skruvas på en träplatta. (C) en bakifrån av flygning kvarnen. Elektriska kablar var stuvat och fast på den L-formade plattan som var skruvas i trä styrelsen. (D) tre flyg mills (F1-F3) är klädd i ett litet utrymme (45 x 20 cm). gt: guide på topplattan, mg, magnet, ps: fotosensor. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 6: hur du justerar flyg kvarnen. Skjut den övre plattan vertikalt och infoga den översta spetsen av axial nålen i guiden på den övre plattan, dvs, hålet på knappen snap. Stick in kryssformade nålen i hålet av dubbel L-formade plattan. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 7: representativt tillfälle spår av rotationer. (A) ett exempel på en spänningsutgång under en 500 ms (A), en 10 s (B), och en 1-timmes (C) flygverksamhet. Trace är temporally expanderat från (C) till (A). De streckade linjerna anger de perioder som är utvidgade. Spänningsutgång samplades varje 1 ms (1 000 poäng per sekund). När armen passerade ovanför IR-LED, den tillverkade spänningen av sensorn ökade från 0,01 V till cirka 6,7 V. En spike-liknande spänning förändring sågs som en revolution (B). När tidsskalan är minut som i panelen C, observeras en långvarig flygning som som en svart rektangel (C). Vanligtvis flygverksamhet har två faser: en är en intensiv-flygning fas, den andra är fasen paus. Längden på intervallet mellan intensiv-flygfaser är inte förutsägbara. Under den intensiva-flygning fas flög skalbaggen med konstant hastighet. (D) överlagring av Spänningsutgång och motsvarande ackumulerade flygningen. Spänning utdata är samma som med panelen (C). Blå: spänningsutgång 1-h flygning, röd: ackumulerade flygningen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 8: jämförelse av flygning avståndet mellan män och kvinnor. Ett lådagram av flygningen. Ingen signifikant skillnad i flygningen observeras mellan hanar och honor. Raden i rutan anger medianen och kanterna på rutan anger högre och lägre kvartilen, respektive. Högsta och lägsta värden anges med morrhår. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi utvecklade en låg kostnad, lätt-till-bygga och kompakt flyg kvarnen för små insekter såsom P. quercivorus (4-5 mm i kroppslängd och 4-6 mg i kroppsvikt). Flyg kvarnen består endast vanliga föremål såsom en nål, en IR LED, en fotosensor, momentana lim, etc., och krävde inte någon sofistikerad, dyra eller sällsynta föremål såsom datorstyrda elektriska apparater. Detta aktiverad enkel och snabb insamling av nödvändiga objekt och minskade experimentella kostnader. Ja, det kostar endast 1 000 JPY (ca 10 USD, 8 euro eller 7 pund) per flygning mill (exklusive icke-flygning mill specifika objekt såsom en PC-omvandlare, programvara, programvarulicens etc.) Dessutom presenteras flyg bruket var kompakt. Därför var det möjligt att förbereda och använda flera flyg mills16 utan att behöva ett stort experimentella utrymme (figur 5 d). De är de starkaste punkterna i denna metod med avseende på andra flygning mills metoder.
Framdrivning kraften var mycket liten när det gäller denna liten skalbagge. Friktionsmotstånd måste därför vara så liten som möjligt, som nämns i tidigare studier15,17. Detta är mycket avgörande för mätning. Från denna synpunkt var användningen av en tunn nål mycket bekvämt för att minska kontaktytan av flygning mill bottenplattan. Av samma anledning måste den övre delen av flygningen kvarnen också smidig. Alla potentiella kontaktpunkter eller platser skall vara släta.
När ett mål insekt är liten, måste flyg kvarnen hållas platt, även om tidigare papper inte har nämnt detta tydligt. Annars kunde mätresultaten påverkas oväntat av gravitation-relaterade effekter. Gravitation-relaterade influenser och stor friktionsmotstånd kunde ge missvisande resultat. En annan kritisk punkt var riktigheten av längden på flyg mill armen. Eftersom antalet varv överskred över tio tusen när skalbaggar flög långa sträckor, ger en felaktig mätning av nålen längd vilseledande uppgifter. Mäta radien av mill arm revolutionen efter konstruktion är mer praktisk än att göra flygningen kvarnen arm exakt önskad längd.
För att mäta aktiviteten flygning av P. quercivorus, tyder detta experiment vissa praktiskt viktiga punkter. Först måste mätningar utföras av nymalen framkom skalbaggar. Hittills har vi märkt att starta ett experiment på morgonen tillhandahålls ett högre antal skalbaggar som flyger över 1 km, i förhållande till start på eftermiddagen. Därav, helst så många skalbaggar som möjligt måste mätas på morgonen. Andra kan guider på topp och bas plattan vara kritiska för att samla in stora mängder data. Experimentet utförs med hjälp av det beskrivna förfarandet var ganska enkel och snabb. Från anesthetizing slutförandet av limning, tog det mindre än 1 min. ofta justera korsformade nålen till flygning kvarnen är det hastighetsbegränsande steget. Om det tar för mycket tid, kan endast några skalbaggar mätas. Dessa guider hjälper att snabbt anpassa nålen till kvarnen. Tredje bästa villkor för mätning måste hittas, samt det bästa förfarandet för hantering av insekter. Helst användas alla uppmätta data för analys, även om en uteslutning användes ofta i fältet djurs beteende9,10,18. Vi utelämnade insekter som flög mindre än 1 km eftersom vi inte visste om kort avstånd flygblad har en dålig förmåga att flyga eller några experimentella fel orsakade kort avstånd flyg. Den bästa prestandan av experimentet skulle ge en mer exakt uppskattning av skalbaggarna flygkapacitet.
En annan begränsning kanske samtidigt dataurval från en hel del skalbaggar. En motorstarka PC är till hjälp för att bearbeta flera flyg Brukens data samtidigt. Särskilt, samtidigt spara och skriva data, är PC specifikationerna kritiska. Eftersom flyget är snabb och långvarig, kunde vissa data gå saknas en lämplig PC används inte. Vi hittade 1 kHz samplingsfrekvens vara bäst för vår set-up. Samplingsfrekvensen måste dock anpassas till varje specifik Flygapparatur mill.
Eftersom mätningen av flyg av en skalbagge avslutades när en flygning intervall översteg 60 min, höll vi observerar varje skalbagge 60 min hade förflutit. Vår analys var dessutom off-fodrade. Alltså, det vore bra om vissa beteendemässiga stater såsom en flygning intervall, en flygtid, flygningen, etc. är informerade visas i realtid. För att uppnå analys i realtid, ett nytt program måste utvecklas i framtiden, och en motorstarka PC bör användas.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har något att avslöja.
Acknowledgments
Vi tackar Mr S. Fukaya, Mr. N. Okuda och Mr T. Ishino för att hjälpa till med experimenten. Denna studie stöddes av Grants-in-Aid för vetenskaplig forskning från Japan Society för främjande av vetenskap (nr. 15K 14755).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| needle | Seirin | J type No. 5 x 40 mm | |
| epoxy resin adhesive | Konishi | #16113 | |
| metal plate | from a home improvement store | ||
| disposable plastic pipette | from a home improvement store | ||
| snap button | from a craft store | ||
| IR sensor | Hamamatsu Photonics | S7136 | |
| IR LED | OptoSupply | OSIR5113A | 150 mW |
| custom-made program | downloadable from Github. URL: https://github.com/HidetoshiIkeno/FlightMill |
||
| instant glue | Toagosei | 31204 | |
| A/D converter | LabJack Co. | U3-HV | |
| DAQ software | AzeoTech | DAQFactoryExpress | download from AzeoTech Web page. |
References
- Kubono, T., Ito, S. Raffaelea quercivora sp. nov. associated with mass mortality of Japanese oak, and the ambrosia beetle (Platypus quercivorus). Mycoscience. 43, 255-260 (2002).
- Kobayashi, M., Ueda, A. Wilt disease of Fagaceae trees caused by Platypus quercivorus (Murayama) (Coleoptera: Platypodidae) and the associated fungus: Aim is to clarify the damage factors. J Jpn For Soc. 87, in Japanese with English summary 435-450 (2005).
- Nunokawa, K. Local distribution and spreading process of damages caused by Japanese oak wilt in Niigata Prefecture, Japan (in Japanese). Bulletin of Niigata Prefectural Forest Research Institute. 48, 21-32 (2007).
- Ohashi, A. Distribution and spreading of damages caused by Japanese oak wilt in Gifu Prefecture, Japan (in Japanese). Bulletin of the Gifu Prefectural Research Institute for Forests. 37, 23-28 (2008).
- Tokoro, M., Kobayashi, M., Saito, S., Knuura, H., Nakashima, T., Shoda-Kgaya, E., Kashiwagi, T., Tebayashi, S., Kim, C., Mori, K. Novel aggregation pheromone, (1S,4R)-p-menth-2-en-1-ol, of the ambrosia beetle, Platypus quercivorus (Coleoptera: Phatypodidae). Bulletin of FFPRI. , 49-57 (2007).
- Nobuchi, A. Platypus quercivorus Murayama (Coleoptera, Platypodidae) attacks to living oak trees in Japan, and information of Platypodidae (I). Forest Pest. 42, 2-6 (1993).
- Clements, A. N. The sources of Energy for flight in mosquitoes. J Exp Biol. 32, 547-554 (1955).
- Armes, N. J., Cooter, R. J. Effects of age and mated status on flight potential of Helicoverpaarmigera (Lepidoptera: Noctuidae). Physiol Entomol. 16, 131-144 (1991).
- Stewart, S. D., Gaylor, M. J. Effects of age, sex, and reproductive status on flight by the tarnished plant bug (Heteroptera: Miridae). Environ Entomol. 23, 80-84 (1994).
- Sarvary, M. A., Bloem, K. A., Bloem, S., Carpenter, J. E., Hight, S. D., Dorn, S. Diel flight pattern and flight performance of Cactoblastis castorum (Lepidoptera: Pyralidae) Measured on a flight mill: influence of age, gender, mating status, and body size. J Econ Entomol. 101 (2), 314-324 (2008).
- Zhang, Y., Wyckhuys, K. A. G., Asplen, M. K., Heinpel, G. E., Wu, K. Effect of Binodoxys Communis parasitism on flight behavior of the soybean aphid, Aphis glycines. Biol Control. 62, 10-15 (2012).
- Sappington, T. W., Burks, C. S. Patterns of flight behavior and capacity of unmated navel orangeworm (Lepidoptera: Pyralidae) Adults related to age, gender, and wing size. Environ Entomol. 43, 696-705 (2014).
- Attisano, A., Murphy, J. T., Vickers, A., Moore, P. J. A simple flight mill for the study of tethered flight in insects. J. Vis. Exp. (106), e53377 (2015).
- Evenden, M., Whitehouse, L., C, M., Sykes, J. Factors influencing flight capacity of the mountain pine beetle (Coleoptera: Curculionidae: Scolytinae). EnvironEntomol. 43, 187-196 (2014).
- Fahrner, S. J., Lelito, J. P., Blaedow, K., Heimpel, G. E., Aukema, B. H. Factors affecting the flight capacity of Tetrastichus planipennisi (Hymenoptera: Eulophidae), a classical biological control agent of Agrilus Planipennis (Coleoptera: Buprestidae). Environ Entomol. 43, 1603-1612 (2014).
- Pham, D. L., Ito, Y., Okada, R., Ikeno, H., Isagi, Y., Yamasaki, M. Phototactic behavior of the ambrosia beetle Phatypusquercirorus (Murayama) (Coleoptera: Platypodidae) before and after flight. J Insect Behav. 30, 318-330 (2017).
- Wanner, H., Gu, H., Dorn, S. Nutritional value of floral nectar sources for flight in the parasitoid wasp, Cotesia glomerata. Physiol Entomol. 31, 127-133 (2006).
- Rowley, W. A., Graham, C. L. The effect of age on the flight performance of female Aedes aegypti mosquitoes. J Insect Physiol. 14, 719-728 (1968).
