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Bioengineering

Multimodale Volumetrische Retinal Imaging von schrägen Scanning Laser Ophthalmoskopie (oSLO) und optische Kohärenztomografie (OCT)

Published: August 4, 2018 doi: 10.3791/57814
Automatic Translation
*1, *1, 1,2
1Department of Medicine, Boston University School of Medicine, 2Department of Biomedical Engineering, Boston University
* These authors contributed equally

Summary

Hier präsentieren wir ein Protokoll, um ein großes Sichtfeld (FOV) dreidimensionale (3D) Fluoreszenz und OCT Netzhautbild mithilfe eine neuartige bildgebende multimodale Plattform abrufen. Wir werden das System-Setup, die Methode der Ausrichtung und der operativen Protokolle vorstellen. In-Vivo Bildgebung werden demonstriert und repräsentative Ergebnisse zur Verfügung gestellt werden.

Abstract

Während Fluoreszenz-Bildgebung in der Augenheilkunde weit verbreitet ist, ist ein großes Sichtfeld (FOV) dreidimensionale (3D) Fluoreszenz Netzhautbild nach wie vor eine große Herausforderung mit der State-of-the-Art-Retinal bildgebende Modalitäten, weil sie Z-Stapeln, erfordern würde Kompilieren Sie eine Volumetrische Dataset. Neuere optische Kohärenztomografie (OCT) und OCT angiographiesysteme (OCTA) überwinden diese Einschränkungen um dreidimensionale (3D) anatomische und vaskuläre Bilder liefern, aber die Farbstoff-freie Art der OCT kann nicht auslaufen bezeichnend für vaskuläre visualisieren Dysfunktion. Dieses Protokoll beschreibt eine neuartige schräge scanning Laser Ophthalmoskopie (oSLO) Technik, die 3D Volumetrische Fluoreszenz retinale Bildgebung. Das Setup von dem abbildenden System generiert die schräge Abtastung durch eine Taube Schweif Schieberegler und richtet die endgültige imaging-System in einem Winkel, fluoreszierende Schnittbilder zu erkennen. Das System nutzt die Laser-scanning-Methode und ermöglicht daher eine einfache Einbindung von OCT als ergänzende volumetrischen strukturellen bildgebenden Modalität. In-Vivo Bildgebung auf Ratte Netzhaut wird hier gezeigt. Fluorescein Lösung wird intravenös injiziert, um Volumetrische Fluorescein Angiographie (vFA) zu produzieren.

Introduction

Augenheilkunde und Vision Wissenschaft profitieren von der modernen optischen bildgebenden Verfahren, da die Netzhaut mit Licht leicht erreicht werden kann. Fluoreszenz retinale Bildgebung ist ein wichtiges Instrument bei der Diagnose und Behandlung von Gefäßerkrankungen chorioretinalen wie Diabetische Retinopathie (DR) und Altersbedingte Makula-Degeneration (AMD), die Ursachen von Blindheit in den Vereinigten Staaten führen.

Jedoch ist es immer noch schwierig, ein großes Sichtfeld (FOV), dreidimensionale (3D) Retinal imaging mit Fluoreszenz-Bildgebung zu erwerben. Fundus-Fotografie verfügt nicht über die Tiefe-Lösung von Fähigkeit und diffuses Licht nicht ablehnen. Die Vermischung von Signalen unterschiedlicher Tiefe reduziert dadurch die Bildqualität. Scanning Laser Ophthalmoskopie (SLO) und konfokale SLO (cSLO) kann die Wirkung von diffusem Licht mithilfe konfokale gating1reduzieren. Es ist jedoch schwierig für SLO oder cSLO eine menschliche Netzhaut 3D-Bild aufgrund der Begrenzung der Schärfentiefe zu erwerben. Adaptiver Optik SLO (AOSLO) bieten hervorragende Auflösung und Kontrast korrigieren der Wavefront Aberrationen durch das menschliche Auge eingeführt. Jedoch müsste AOSLO Z-Stapeln für Volumetrische Bildverarbeitung2. Optische Kohärenz Tomographie (OCT)3 und OCT angiographiesysteme (OCTA) überwinden diese Einschränkungen um dreidimensionale (3D) anatomische und vaskuläre Bilder4,5,6, sondern die Farbstoff-freie Natur bieten Oktober kann nicht auslaufen bezeichnend für vaskuläre Dysfunktion visualisieren.

Dieses Protokoll beschreibt eine neuartigen multimodale Plattform für 3D Volumetrische Fluoreszenz Retinal imaging, nämlich schräg scanning Laser Ophthalmoskopie (oSLO). In diese imaging-System eine schräge Abtastung entsteht durch eine Taube Schweif Schieberegler und eine endgültige imaging-System orientiert sich in einem Winkel zur Fluoreszenz Kreuz Schnittbilder zu erkennen. Das System nutzt Laser-scanning-Methoden, und diese Techniken ermöglichen einfache Einbindung mit OCT als ergänzende volumetrischen strukturellen bildgebenden Modalität. Die aktuelle Tiefe Auflösung beträgt etwa 25 µm in der Ratte Netzhaut und das Sichtfeld beträgt 30°. Im Wesentlichen der oSLO ermöglicht eine fluoreszierende Version Okt. und sind gleichzeitig mit OCT kombinierbar und OCTA über einem großen FOV.

In diesem Protokoll werden wir das Setup des oSLO, die Methode der Ausrichtung und den Bau, die Methode der in-Vivo Bildgebung der Ratte Netzhaut und die repräsentativen Ergebnisse beschreiben.

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Protocol

Alle hier beschriebene Methoden wurden von Animal Care und Nutzung Ausschuss (ACUC) von Boston Medical Center genehmigt.

1. System-Setup

  1. oSLO-System
    1. Verwenden einer Laserquelle Supercontinuum als System-Laserquelle.
      1. Höheren Wellenlängenbereich (650-2000 nm) Bereich des sichtbaren Lichts (450-650 nm) durch einen dichroitischen Spiegel (DM1) trennen. Erweitern Sie das Spektrum mit einem Paar dispersive Prismen nach den Strahl durch einen Strahlteiler Polarisation (PBS).
      2. Legen Sie einen Schlitz um die Erregung Wellenlängenbereich (475-495 nm) auszuwählen. Verwenden Sie einen reflektierenden Spiegel reflektieren den gefilterten Strahl zurück auf das Prisma paar und Paar dann das Licht in die Singlemode-Faser (SMF 1).
      3. Verwenden Sie ein Spektrometer zur Bestätigung der Auswahl der Wellenlänge am Ausgang der single-Mode-Faser.
    2. Verbinden Sie die Singlemode-Faser mit zwei kaskadierte LWL-Koppler, wie in Abbildung 2dargestellt. Einer der Faser-Ausgangs-Port aus der zweiten Faserkoppler liefert das Licht auf das oSLO-System.
    3. Lassen Sie den Laser zuerst im oSLO-System.
      1. Den Laser von einem Galvanometer-Spiegel (GM1) abzulenken. Relais der Laser zu einem zweiten Galvanometer-Spiegel (GM2) durch ein 1:1 Teleskopsystem, und weitere Relais auf die Pupille des Auges durch einen 3:1 Teleskopsystem.
      2. Installieren Sie einen dichroitischen Spiegel (DM2) innerhalb des Systems der 3:1 Teleskop, die Fluoreszenz-Signale zu reflektieren.
    4. Das 3:1 Teleskopsystem und dichroitische Spiegel (DM2) auf eine angepasste Taube Schweif Schieberegler zum Ausgleich der optischen Achse und erstellen die schräge Beleuchtung zu scannen, wie in Abbildung 3gezeigt zu montieren. Verwenden Sie ein Bremssattel genau die Offset Länge beliebig steuern.
    5. Fluoreszenz imaging Strahlengang.
      1. Die Fluoreszenz von der dichroitischen Spiegel und Relais zum dritten Galvanometer-Spiegel um das langsame Scannen de-Scannen zu reflektieren.
      2. Relais das Licht zu einem bildgebenden Objektiv von einem anderen 1:1 Teleskopsystem. Installieren Sie die oben genannten Optik auf einem Verschiebetisch.
        Hinweis: Zusätzliche Übersetzung zweistufig sind unter dem dritten Galvanometer-Spiegel (GM3), Redundanz in die Anzahl der Freiheitsgrade sorgen für die Optimierung der Bildgebung installiert.
    6. Montieren Sie eine endgültige imaging-System auf einer Bühne, die hat drei Freiheitsgrade (Rotation und zwei Achsen der Übersetzung). Verwenden Sie eine planare Kamera, um die Cross-Sectional Fluoreszenzbilder zu erfassen.
  2. Optische Kohärenz Tomographie System
    1. Verwenden Sie die gleichen Supercontinuum Laserquelle als System-Laserquelle.
      1. Trennen Sie das nahe Infrarot (NIR) Bereich (650-900 nm) von Restlicht (650-2000 nm) durch ein anderes dichroitische Spiegel (DM3). Verwenden Sie einen langen Pass Filter um ausreichend Bandbreite, um 800-900 nm weiter einzuschränken. Koppeln Sie den Strahl in die Singlemode-Faser (SMF 2).
    2. Verbinden Sie die Singlemode-Faser mit den anderen Eingang der zwei kaskadierte LWL-Koppler, mit der blauen oSLO Anregung zu kombinieren. Lenken Sie das Licht aus der zweiten Ausgangs-Port des zweiten Faserkoppler, OCT referenzarm, verfügt über eine Variable Graufilter (VNDF), Streuung Entschädigung Platten und einen reflektierenden Spiegel.
      Hinweis: Das Licht aus dem referenzarm zurück und das Auge setzt bei der zweiten LWL-Koppler und wird an das OCT-Spektrometer, das Signal zu sammeln.
  3. Die Datenerfassung
    1. Verwenden Sie eine Datenerfassungs-System-Software in LabVIEW geschrieben und aus dem Scan-Protokoll von OCTA7,8,9,10geändert. Für jeden B-Scan, eine 80 % Einschaltdauer sah Zahn mit 500 Schritten ist die Ausgabe von einem Analogausgang (AO1) X Steuerung "schnelle Scan Spiegel, GM2.
    2. Auslösen der Zeilenkamera bei jedem Schritt Daten für das Office-Anpassungstool zu erwerben nur, wenn der Spiegel in der Scan-Richtung ist. Legen Sie die Belichtungszeit für die Zeilenkamera 17 µs sein.
    3. Um die OCTA-Signal zu erhalten, wiederholen Sie die Messung 5 Mal am gleichen Ort B-Scan.
    4. Legen Sie die Ausgaberate AO bei 100 kHz und die OCT-a-line-Rate bei 50 kHz. Steuern der y' slow Scan Spiegel, GM1, durch Rampen Wellenform. Synchronisieren Sie den de-Scannen Spiegel, GM3, mit GM1, das langsame Scannen de-scannen.
    5. Die planare Kamera auslösen, indem Sie ein anderes Analogausgang Board (AO2) für eine fluoreszierende Aufnahme bei jeder y' Lage. Die bildgebende Größe zuschneiden oder bin die Nachbar-Pixel zur Erhöhung der Geschwindigkeit und Empfindlichkeit wie gewünscht.

2. System Ausrichtung

  1. Passen Sie den Schlitz in der oSLO-Lichtquelle die blauen Erregung Wellenlänge auswählen. Verwenden ein Spektrometers zur Überwachung des Spektralbereichs um rund 475-490 nm.
  2. Den Schieberegler Taube Heck montieren um die optische Achse von ~ 5 mm verschieben. Dadurch wird ein Offset bei der Ratte-Schüler von ~1.7 mm, was in einem schrägen Winkel von ~ 15 ° auf der Netzhaut.
  3. Verschiebetisch der Fluoreszenz-Detektion-Optik durch die gleichen 5 mm einstellen.
  4. Passen Sie die endgültige Fluoreszenz imaging-System um ~ 30 ° zu sein.
  5. Messen Sie die optische Leistung mit einem Leistungsmesser. Sicherstellen Sie, dass die blauen oSLO erregerleistung ist ≤0.2 mW und OCT Laser macht ≤0.8 mW, die Netzhaut nicht beschädigt wird.
    Hinweis: Basierend auf dem ANSI-Standard, die maximale permissive Belichtung (MPE) an der Netzhaut ist auf der Ebene der ~ 2mW7,8 im sichtbaren Bereich des Lichts. Nach der Formel von Delori Et al. 9, die Fehlergrenze für das nahe Infrarot-Licht ist etwa doppelt so hoch als das sichtbare Licht, bei etwa 4 mW.

3. in Vivo Tierversuch

  1. Übertragen Sie eine 12-Wochen männliche lange Evans Ratte in der Induktion Kammer. Die Ratte mit 4,5 % Isofluran in Sauerstoff für 10 Minuten mit einer Durchflussmenge von 2 L/min durch einen Verdampfer Isoflurane zu betäuben.
    1. Bestätigen Sie die Tiefe der Narkose wie durch einen Mangel an Rückzug Reflex während einer interdigital Prise bestimmt.
  2. Legen Sie nach der Induktion die Ratte auf Inhaber eines 5-Achsen (X, y, Z-Übersetzungen, Gier und Tonhöhe). Sorgen Sie für zusätzliche Wärme mittels einer beheizten Objekttisch, zirkulierenden Warmwasser Decke oder eine andere geeignete Methode in einem längeren Experiment. Pflegen Sie die Narkose auf 1,5 % des Isofluorane mit einer Durchflussmenge von 2 Liter/Minuten während der restliche Teil des Experiments. Wenn keine Induktion-Kammer mit aktiven Auspuff verwenden, sollte die Induktion Kammer auf einem Backdraft oder Randabsaugung Tisch oder unter einen Schnorchel, Isofluran Aufräumen platziert werden.
  3. Erweitern Sie die Pupille mit 1 % Tropicamid ophthalmologischen Lösung für 2 Minuten. Tragen Sie 0,5 % Tetracaine HCl ophthalmologischen Lösung auf die Ratte Auge für zusätzliche örtliche Betäubung, auf, bei Bedarf. Auge mindestens einmal pro Minute während des Tests mit kommerziellen künstliche Tränen befeuchtet.
  4. Fluorescein Salz (10 % w/w) oder FITC zu injizieren (10 % w/w) in steriler Kochsalzlösung verdünnt (0,1-0,3 mL) durch die Rute Vene mit einer 1 mL Spritze und ein 29G Nadel.
  5. Schalten Sie die Laserquelle. Ort ein Graufilter, die blaue leichte Erregung bei der Ausrichtung zu vermindern. Messen Sie die Kraft des Lichtes OCT ~0.8 mW zu sein, und das blaue Licht < 0,01 mW auf die Bildung des grauen Stars zu vermeiden.
  6. Startmodus der Galvanometer Scannen und Ausrichtung. Passen Sie die Höhe der den Augapfel zu einen stationären Laser auf der Hornhaut vor Ort machen. Passen Sie die Ratte augenposition um den Rand der Pupille etwa senkrecht zum Laser machen, und versetzt den Laser auf der apikalen Mitte des Auges, um ca. ~1.5 mm.
  7. Tierische pedaldom weiter bis OCT Bilder optimale Qualität zu erreichen. In der X' schnell Abtastrichtung, stellen sicher, dass der Querschnitte B-Bild flach erscheint. Beim Umschalten auf die y' Scanrichtung zu verlangsamen, sicherstellen, dass der Querschnitt B-Bild scheint geneigt, wegen der schrägen scannen.
  8. Graufilter, der blaue leichte Erregung zu entfernen und die Futtermittel von der Kamera in Echtzeit zu überwachen. Cross sectional fluoreszierende Bild sollte angezeigt werden, zeigt Blutgefäße erscheinen in verschiedenen Tiefen.
    1. Stellen Sie den Fokus der letzten Fluoreszenz imaging-System um den optimalen Fokus zu erreichen. Lassen Sie Feineinstellungen der augenposition in der seitlichen Ebene, optimale oSLO Bildqualität zu erreichen.
  9. Beginnen Sie nach der Ausrichtung, gleichzeitige OCTA und volumetrische Fluorescein Angiographie (vFA) zu erwerben.
  10. Die volumetrische Bilder für OCTA und oSLO von Matlab zu konstruieren. Die Algorithmen werden zuvor im Detail10beschrieben. Erzeugen Sie retinale Vasculatures Tiefe gelöst durch Segmentierung Bild.
  11. Schalten Sie nach Abschluss der Bildgebung den Laser, lassen Sie das Tier tragen Sie einige ophthalmologische Salbe auf die Augen auf und dann legen Sie das Tier in einer Box Erholung.
  12. Nicht unbeaufsichtigt lassen das Tier bis es ausreichend Bewusstsein zur Aufrechterhaltung der sternalen liegen wiedererlangt hat oder wie pro institutionelle Politik.

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Representative Results

Abbildung 4a zeigt ein Querschnitt OCT-Bild der Ratte Netzhaut. Abbildung 4 b -4 c zeigen die gleichen retinalen Schnittbilder von OCTA und oSLO vFA zur gleichen Zeit erworben. Der oSLO ermöglicht Cross-Sectional FA analog zu der OCT B-Scan. Im Vergleich zu OCTA identifiziert das oSLO vFA Cross-Sectional Bild eindeutig die Schiffe in der nervenfaserschicht (NFL) und Ganglion Zellschicht (GCL) und Kapillaren in der äußeren plexiformen Schicht (OPL). Abbildung 4-d und 4 g zeigen die oberflächliche Schicht der OCTA und oSLO vFA-Bild. Im Gegensatz zu OCTA vermeidet das oSLO-vFA-Bild (Abb. 4 g) die Bewegungsartefakte (vertikale Streifen in Abbildung 4 d) durch die Verwendung von Fluoreszenz Emission Kontrast. Durch den Vergleich der oSLO vFA (Abb. 4e) und OCTA (Abbildung 4 h) Bilder innerhalb der Netzhaut Zwischenschicht, werden vertikal Tauchen Schiffe im oSLO FA Bild aber nicht ersichtlich in OCTA übersichtlich dargestellt. Vermutlich deshalb, weil die Fließgeschwindigkeit des Blutes oder der Schiff-Orientierung der OCTA-Signal aber nicht den oSLO-Fluoreszenz-Kontrast auswirkt.

Abbildung 4f und 4i zeigen die Bilder innerhalb der Schicht tief Kapillare Plexus. Die Regionen von blauen Pfeilen in oSLO vFA hingewiesen haben einen besseren Kontrast als OCTA in das Gefäßsystem. Die Größe der Venole wies darauf hin, durch weiße Pfeile in oSLO ist größer als die in OCTA. Insgesamt gleicht die oSLO vFA Bild die tatsächlichen vaskuläre Morphologie genauer als OCTA, da es nicht Blut ist die Strömungsgeschwindigkeit oder die Ausrichtung des Schiffes abhängig ist. Ein En Face Durchflug von zwei gleichzeitig erworbenen Volumetrische Datensatz aus oSLO und OCTA werden in Video 1angezeigt.

Figure 1
Abbildung 1: Das Anlagenschema. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 2
Abbildung 2: Das Foto von zwei kaskadierte Faser-Koppler, die oSLO und ÜLG Licht leiten. Die Routen des leichten Passes sind beschriftet. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 3
Abbildung 3. Das Setup der Taube Schweif Halterung für Schrägbeleuchtung. (ein) die solide Arbeit Modell für Schrägbeleuchtung Teil. (b-c) Die vergrößerte Ansicht, und die separate Ansicht der Taube Heck montieren. (d) die Fotografie die eigentliche Einrichtung für Schrägbeleuchtung Teil. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 4
Abbildung 4. Ratte Netzhautbild von oSLO und OCTA gleichzeitig erworben. Beispiel für (eine) Cross-Sectional Bild Okt (b) OCTA und (c) oSLO FA. Platten (d) und (g) zeigen de Gesicht OCT und oSLO FA Bilder aus der oberflächlichen Schicht. Die Bewegungsartefakte in OCTA Bild wurde darauf hingewiesen, durch rote Pfeile. Platte (e) und (h) zeigen die Ergebnisse aus der Zwischenschicht. Aufgezeigt wurden die Orte, wo die Schiffe nach unten in die nächste Schicht Tauchen, durch die gelben Pfeile, die klarer auf oSLO FA als OCTA sind. Platten (f) und (ich) zeigen die Ergebnisse aus dem tief Kapillare Plexi-Layer. Der Kontrast von oSLO ist besser als OCTA in der Region von blauen Pfeile darauf hingewiesen. Die Größe der Venole wies darauf hin, durch weiße Pfeile in oSLO ist größer als die in OCTA. Balken in der Abbildung ist 200 µm. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

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Discussion

Hier haben wir beschrieben, oSLO, eine in Vivo Volumetrische fluoreszierende Retinal imaging Technik mit einem FOV über 30°. Im Vergleich zu OCT, eines aktuellen Behandlungsstandards bildgebendes Verfahren in der Augenheilkunde, oSLO bietet eine ähnliche 3D imaging-Funktion doch erlaubt Fluoreszenz-Kontrast, der OAT nicht anfällig ist. Der Vorteil von oSLO ist, dass es nur einen rasterscan erfordert und die nahtlose Kombination von OCT erlaubt, die zwei sich ergänzende Techniken für Struktur- und fluoreszierende Volumetrische Bildverarbeitung.

In diesem Protokoll ist der entscheidende Punkt, gute Bildqualität zu erhalten die Klarheit des Auges Ratte. Wenn das oSLO Bild verdeckt wird, prüfen Sie, ob kataraktentstehung. Mehrere Faktoren wie Ketamin/Xylazin-Anästhesie, Hornhaut Trocknung und übermäßige Belastung durch blaues Licht werden Bildung von grauem Star, wodurch die Bildqualität deutlich verschlechtern würde. Um den Grauen Star zu verhindern, vermeiden Sie kontinuierliche Exposition um blaues Licht für mehr als 2 Minuten; gelten Sie Kunstauge Riss mindestens einmal pro Minute um zu verhindern, Hornhaut zu trocknen; und das Auge mindestens 30 Sekunden zwischen bildgebenden Abschnitte durch die Blockierung der Licht ruhen lassen.

Wir uns vorstellen, dass oSLO die klinische Praxis der Fluoreszenz-Bildgebung erheblich beeinträchtigen kann. Wir haben gezeigt, dass die Tiefe Auflösungsvermögen effektiv beseitigen kann das Signal von der äußeren Netzhaut nachgeben kontrastreiche Volumetrische FA Bilder Einzelsatzebene einzelne Kapillare, die mit herkömmlichen SLO unerreichbar ist. Die deutlich verbesserte Bildschärfe würde empfindlicher Erkennung und Quantifizierung der Blut-Retina-Schranke Störung und Retinal Kapillare Leckage, das Markenzeichen von Vision-bedrohlichen Makula-Ödem in DR und andere chorioretinalen vaskulären ermöglichen Krankheiten.

Im aktuellen System ist die Geschwindigkeit der CCD Kamera 20 Bilder pro Sekunde, die zu führt > 25 zweite Erfassungszeiten. Eine wissenschaftliche CMOS-Kamera wird die Systemgeschwindigkeit drastisch verbessern. Die Fluoreszenz-Detektion hat einen anderen optischen Pfad getrennt von der Beleuchtung. Es wird das System vereinfachen, wenn mit den gleichen optischen Pfad für die Beleuchtung und den Nachweis in der Zukunft zu entwerfen. Zusammenfassend lässt sich sagen wurde eine neuartige multimodale Plattform für Volumetrische retinale Bildgebung, nämlich schräg scanning Laser Ophthalmoskopie (oSLO), vorgestellt. Die großen FOV in-Vivo Bildgebung über einen 30 ° Betrachtungswinkel der Ratte Netzhaut mit oSLO und gleichzeitige optische Kohärenztomografie (OCT) zeigte.

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Disclosures

Ji Yi hält eine ausstehende Patent für oSLO. Die anderen Autoren erklären keine konkurrierenden finanziellen Interessen.

Acknowledgments

Finanzierung ist von Evans medizinische Stiftung Fördermittel aus Boston Medical Center sowie einen Untervertrag von NIH 5R01CA183101, BU-CTSI Pilot gewähren, 1UL1TR001430, BU-Joslin pilot-Programm und BU-CTSI KL2TR001411.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Supercontinuum Laser Source NKT Photonics SuperK EXTREME EXU-OCT6
Dichroic Mirror (DM1) Thorlabs DMLP650R
Dichroic Mirror (DM2) Chroma ZT514/1064rpc
Dichroic Mirror (DM3) Thorlabs DMLP900R
Single Mode Fiber (SMF 1) Thorlabs P3-460B-FC-2
Single Mode Fiber (SMF 2) Thorlabs P3-780A-FC-2
Optic Fiber Coupler Thorlabs TW850R5A2
1:1 Telescope System Thorlabs AC254-100-A×2
3:1 Telescope System Thorlabs AC254-150-A×2
3:1 Telescope System Thorlabs AC254-50-A×2
Galvo Mirrors (GM1,GM2) Thorlabs GVS201×2
De-sacn Galvo Mirrors (GM3) Thorlabs GVS011
Objective Lens Olympus UplanSApo 20×/0.75
Final imaging system Olympus UplanFL N 10×/0.3
Final imaging system Computar 12-36mm/1:2.8
Camera PCO Pco.pixelfly usb
Filter Thorlabs FEL0800
Mounted Continuously Variable ND Filter Thorlabs NDC-50C-4M-A
Line Scan Camera Thorlabs SPL2048-140K
Analog Output Board (AO1) National Instrument PCI-6731
Analog Output Board (AO2) National Instrument PCIe-6351
Long pass filter Thorlabs FEL0800

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References

  1. Webb, R. H., Hughes, G. W., Delori, F. C. Confocal scanning laser ophthalmoscope. Applied Optics. 26 (8), 1492-1499 (1987).
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  10. Zhang, L., et al. Volumetric fluorescence retinal imaging in vivo over a 30-degree field of view by oblique scanning laser ophthalmoscopy (oSLO). Biomedical Optics Express. 9 (1), 25-40 (2018).

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Frage 138 schrägen scanning Laser Ophthalmoskopie Bioengineering Multimodal volumetrische retinale Bildgebung
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Song, W., Zhou, L., Yi, J.… More

Song, W., Zhou, L., Yi, J. Multimodal Volumetric Retinal Imaging by Oblique Scanning Laser Ophthalmoscopy (oSLO) and Optical Coherence Tomography (OCT). J. Vis. Exp. (138), e57814, doi:10.3791/57814 (2018).

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