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Behavior

एक स्वचालित टी-भूलभुलैया आधारित तंत्र और प्रोटोकॉल देरी का विश्लेषण करने के लिए और प्रयास आधारित मुक्त चलती कुतर में बनाने का निर्णय

Published: August 2, 2018 doi: 10.3791/57895
Automatic Translation
1,2, 1, 1, 1
1Laboratory of Behavioral Genetics, Center for Brain Science, RIKEN, 2Faculty of Human Science, University of Tsukuba

Summary

यह लेख एक स्वचालित टी भूलभुलैया उपकरण है कि हम आविष्कार का परिचय, और देरी आधारित निर्णय लेने और प्रयास आधारित मुक्त चलती कुतर में निर्णय लेने के विश्लेषण के लिए इस उपकरण पर आधारित एक प्रोटोकॉल ।

Abstract

कई स्नायविक और मनोरोग रोगियों कठिनाइयों और निर्णय लेने में/ मूषक मॉडल निर्णय लेने वाली समस्याओं अंतर्निहित neurobiological कारणों की गहरी समझ उत्पन्न करने में सहायक होते हैं । एक लागत लाभ आधारित टी भूलभुलैया कार्य निर्णय लेने में जो कुतर एक उच्च इनाम हाथ (एचआरए) और एक कम इनाम हाथ (LRA) के बीच चयन को मापने के लिए प्रयोग किया जाता है । टी-भूलभुलैया निर्णय लेने वाले कार्य के दो प्रतिमान हैं, जिनमें से एक में लागत एक समय देरी है और दूसरी जिसमें यह शारीरिक प्रयास है. दोनों मानदंड प्रयोगात्मक पशुओं, कई दरवाजे, गोली इनाम, और हाथ पसंद रिकॉर्डिंग के एक थकाऊ और परिश्रम गहन प्रबंधन की आवश्यकता होती है । वर्तमान काम में, हम गोली वितरण, दरवाजा प्रबंधन और पसंद रिकॉर्डिंग के लिए पूर्ण स्वचालन के साथ पारंपरिक टी भूलभुलैया के आधार पर एक उपकरण का आविष्कार किया । इस स्वचालित सेटअप दोनों देरी के मूल्यांकन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और प्रयास आधारित कुतर में बनाने का निर्णय । प्रोटोकॉल के साथ यहां वर्णित है, हमारे प्रयोगशाला के निर्णय की जांच की कई आनुवंशिक रूप से संशोधित चूहों के phenotypes बना । प्रतिनिधि डेटा में, हमने दिखाया है कि ablated औसत दर्जे का habenular के साथ चूहों दोनों देरी और प्रयास के बचने से पता चला है और तत्काल और सरल इनाम का चयन करने के लिए खड़ा था. यह प्रोटोकॉल प्रयोगकर्ता हस्तक्षेप के कारण परिवर्तनशीलता को कम करने और प्रयोग कुशलता को बढ़ाने में मदद करता है । इसके अलावा, पुरानी सिलिकॉन जांच या microelectrode रिकॉर्डिंग, फाइबर ऑप्टिक इमेजिंग और/या तंत्रिका गतिविधि के हेरफेर आसानी से निर्णय के दौरान लागू किया जा सकता है सेटअप का उपयोग कर काम यहां वर्णित है ।

Introduction

मानव और अंय जानवरों के लिए एक इनाम पाने के लिए लागत (देरी, प्रयास, और जोखिम सहित) का मूल्यांकन, और फिर कार्रवाई के एक निश्चित पाठ्यक्रम का चयन करने के लिए अपने निर्णय करते हैं । निर्णय घाटा एक प्रकार का पागलपन (SZ), ध्यान घाटे सक्रियता विकार (एडीएचडी), जुनूनी बाध्यकारी विकार (ओसीडी), पार्किंसंस रोग (पीडी) और1लत सहित कई neuropsychiatric रोगों में दिखाई देते हैं । मनुष्यों और बंदरों पर अध्ययन से पता चला कि कई प्रमुख मस्तिष्क क्षेत्रों2,3,4बनाने के निर्णय में शामिल हैं । हालांकि रहनुमाओं अधिक जटिल निर्णय लेने में संलग्न हैं, कुतर को सूचित किया गया है कि एक ऐसे वातावरण में जीवित रहने के लिए अनुकूली निर्णय करने में सक्षम हो जहां पुरस्कार आकस्मिकताओं का अक्सर परिवर्तन होता है । इसके अलावा, तंत्रिका सर्किट तंत्र और आणविक तंत्र अंतर्निहित निर्णय पूरी तरह से माउस chemogenetic उपकरण, optogenetic उपकरण और आनुवंशिक रूप से इंजीनियर चूहों की उपलब्धता के कारण मॉडल में जांच की जा सकती है । वहां कई काम कर रहे है कुतर ' निर्णय व्यवहार का मूल्यांकन में प्रयोग किया जाता है, ध्यान सेट बदलाव सहित कार्य, प्रयत्न या देरी आधारित टी भूलभुलैया कार्य, आयोवा जुआ कार्य, दृश्य भेदभाव उलटा कार्य सीखना5, आदि । एनालॉग टी भूलभुलैया लागत लाभ प्रोटोकॉल मूल रूप से पियरे समूह द्वारा विकसित किए गए6 और निर्णय लागत के दो प्रकार के प्रभाव की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है (देरी और प्रयास) पर मुक्त चलती कुतर7,8, 9,10. इस कार्य का विशेष लाभ यह है कि पशुओं को एक कटोरी में प्रेस लीवर या खुदाई करने के लिए प्रशिक्षित नहीं किया जाना है । इसके बजाय, पशु एक हाथ (एचआरए) में एक उच्च इनाम उच्च लागत विकल्प या दूसरे हाथ में कम इनाम कम लागत विकल्प (LRA) के बीच एक विकल्प बनाते हैं । इसलिए, यह कार्य करने के लिए बहुत आसान है ।

देरी आधारित प्रतिमान में, एक जंक्शन दरवाजा एक बार शुरू की है प्रयोगात्मक पशु लक्ष्य हथियारों में से एक में प्रवेश करती है, ताकि पशु लक्ष्य हाथ में रखा जाता है । अगर जानवर LRA को चुनता है तो LRA पर गोल दरवाज़ा तुरंत मुकर जाता है और थोड़ी मात्रा में भोजन दिया जाता है । यदि पशु एचआरए चुनता है, तो अपेक्षित देरी के बाद एचआरए पर लक्ष्य दरवाज़ा घटाया जाता है और बड़ी मात्रा में भोजन छर्रों का वितरण किया जाता है (आंकड़ा 1a). प्रयास आधारित प्रतिमान में, एचआरए एक बाधा द्वारा बाधित है और पशुओं के लिए यह पर चढ़ाई करने के लिए छर्रों की एक बड़ी मात्रा में प्राप्त करना होगा (आंकड़ा 1b) । आम तौर पर बोल, देरी आधारित प्रतिमान बहुत पशु मॉडल और प्रयास के impulsivity परीक्षण के आधार पर एक बाहर उदासीन पशुओं2,4,11,12पता लगाने में मदद कर सकते है उपयोगी है, 13. अब तक शोधकर्ताओं ने इस परख प्रदर्शन कर रहा है मैंयुअल रूप से समय की देरी गिनती, डालने और वापस दरवाजे, प्रयास बैरियर पैंतरेबाज़ी, गोली संख्या गिनती, स्थिति में छर्रों रखकर, रखने और पशुओं लौटने , और हर परीक्षण के लिए जानवरों के विकल्प की रिकॉर्डिंग । ये श्रम और समय लागत शोधकर्ताओं के लिए एक गंभीर प्रयोगात्मक अड़चन मुद्रा, इस व्यवहार परख के व्यापक उपयोग में बाधा । वर्तमान कार्य में, हम पूर्ण स्वचालन, मानकीकरण, और उच्च प्रवाह क्षमता के साथ, देरी-या के प्रयास के निर्णय के आधार पर एक टी-भूलभुलैया आधारित सेटअप का आकलन करने के लिए विकसित किया है ।

उपकरण

एक वाणिज्यिक निर्माता के सहयोग से ( सामग्री की तालिकादेखें), हम एक संशोधित स्वचालित टी भूलभुलैया उपकरण है जो सॉफ्टवेयर आधारित साधन नियंत्रण (चित्रा 2) इस्तेमाल किया विकसित की है । विशेष रूप से, हम पारंपरिक टी भूलभुलैया (चित्रा 2) की तुलना में एक "वापस दरवाजा" और "वापस रास्ता" की शुरुआत की है, ताकि जानवरों को वापस शुरू बात करने के लिए खुद को और एक नया परीक्षण शुरू करने के लिए जा सकते हैं । टी भूलभुलैया मैट ग्रे रंग का है, और जब प्रयोग हालत और सॉफ्टवेयर ठीक से सेट कर रहे हैं, दोनों काले और सफेद चूहों का पता लगाया जा सकता है । यह तीन हथियारों के शामिल है: एक शुरू बांह और दो गोल हथियार, प्रत्येक ४१० मिमी के साथ लंबाई में १५५ मिमी के वी आकार की दीवारों, चौड़ाई में 30 मिमी का एक आधार और चौड़ाई में १५५ मिमी के एक खुले शीर्ष. वी आकार का कॉरिडोर प्रभावी रूप से चूहों को कूदने से रोक सकता है । इसके अलावा, वी के आकार का गलियारा यह आसान है vivo में केबल के साथ रिकॉर्डिंग लागू करने के लिए । एक प्रारंभ बॉक्स प्रारंभ आर्म के अंत से अनुलग्न है. एक लक्ष्य बॉक्स प्रत्येक लक्ष्य बांह के अंत करने के लिए संलग्न है । एक स्वचालित खाद्य मशीन प्रत्येक लक्ष्य बॉक्स में स्थापित करने के लिए मीठा भोजन छर्रों की एक पूर्वनिर्धारित संख्या वितरित है । गोली का सेवन एक अवरक्त संवेदक द्वारा पता चला है और स्वचालित रूप से एक कंप्यूटर द्वारा दर्ज की गई है । प्रत्येक लक्ष्य बॉक्स एक सीधे गलियारे द्वारा प्रारंभ बॉक्स से कनेक्टेड है । जानवरों के गलियारे के माध्यम से शुरू बॉक्स के लिए वापस autonomously एक बार वे एक परीक्षण खत्म कर सकते हैं । वहां के प्रवेश द्वार और शुरू और लक्ष्य बक्से के निकास पर ऊंचाई में १५५ mm के दरवाजे फिसलने हैं । इसके अतिरिक्त, एक स्लाइडिंग दरवाजा प्रत्येक लक्ष्य हाथ के द्वार पर स्थित है एक विकल्प (चित्रा 2a) बनाने के बाद पीछे की ओर बढ़ने से पशुओं को रोकने के लिए । सभी फिसलने दरवाजे एक कंप्यूटर द्वारा नियंत्रित कर रहे हैं और स्वचालित रूप से खोला और बंद किया जा सकता है । एक उच्च संवेदनशीलता 1/2 "चार्ज युग्मित डिवाइस (सीसीडी) monocle कैमरा जानवरों के व्यवहार को ट्रैक करने के लिए उपकरण के ऊपर सेट है । लेंस की फोकल लंबाई 2.8-12 मिमी है । कैमरे की स्थिति करीब १.९ मीटर ऊंची है । भूलभुलैया की ऊंचाई तल से ०.५ मीटर है के बाद से, कैमरा और भूलभुलैया के बीच की दूरी १.४ मीटर (चित्रा बी) के आसपास है. ट्रैकिंग डेटा सीसीडी कैमरे से प्राप्त करने के लिए जीना-टी भूलभुलैया नियंत्रण, खोलने और विशिष्ट दरवाजे बंद जब जानवरों के हित के कुछ क्षेत्रों (ROIs) में प्रवेश किया जाता है । प्रयास के लिए इस्तेमाल किया बाधाओं आधारित प्रतिमान एक तीन आयामी सही कोण त्रिकोण (चित्रा 2c) है, जो पूरी तरह से वी के आकार की दीवारों में फिट बैठता है के आकार में हैं, और ऊंचाई में १५५ mm के बारे में हैं । पशु ऊर्ध्वाधर पक्ष पैमाने पर होना चाहिए, लेकिन एक ४५ ° ढलान उतरना करने में सक्षम हैं । उपकरण प्रयोग के दौरान १०० लक्स पर प्रबुद्ध है । प्रयोग में प्रयुक्त चीनी छर्रों ( सामग्री की तालिकादेखें), और सिलिका जेल ( सामग्री की तालिकादेखें) छर्रों सूखी रखने के लिए प्रयोग किया जाता है.

Protocol

सभी प्रायोगिक प्रोटोकॉल आरआईकेईएन मस्तिष्क विज्ञान संस्थान की पशु देखभाल और उपयोग समितियों द्वारा अनुमोदित किया गया ।

1. पशु तैयारी

  1. प्रयोगात्मक उद्देश्य के आधार पर प्रयोगात्मक चूहों (या चूहों) के सेक्स, उम्र, जीनोटाइप और औषधीय उपचार चुनें ।
    नोट: यहां हम चार पुरुष C57B/2 महीने की उंर के 6 चूहों के प्रदर्शन को प्रदर्शित किया ।
  2. घर के एक कमरे में चूहों मानक शर्तों के तहत बनाए रखा (12 एच लाइट/12 एच अंधेरे चक्र, 8:00 A.M. और 8:00 P.M., 22 ± 1 डिग्री सेल्सियस के बीच पर रोशनी).
    नोट: यदि उद्देश्य दो पादी, पिंजरे प्रति समूह 4 चूहों के बीच अंतर की तुलना करने के लिए है और प्रत्येक जीनोटाइप के 2 चूहों शामिल हैं.
  3. उन्हें मानव संपर्क के साथ परिचित करने के लिए 5 दिनों के लिए 2 मिनट/दिन के लिए चूहों संभाल । उंहें मापा राशन के साथ फ़ीड इतना है कि उनके शरीर के वजन मोटे तौर पर 80 के बारे में बनाए रखा है-प्रयोग भर में मुफ्त वजन के 85% । पानी विज्ञापन libitumप्रदान करें ।
  4. Habituate चूहों प्रयोगात्मक कमरे के लिए माउस आवास कमरे से प्रायोगिक कमरे में एक दिन के प्रयोग से पहले 30 मिनट के लिए स्थानांतरित कर रहे हैं ।
  5. पशु प्रदर्शन पर circadian लय के प्रभाव से बचने के लिए प्रत्येक दिन एक ही समय में प्रयोगों शुरू.

2. पशु भूलभुलैया को आदी होना

  1. माउस हैंडलिंग (2 मिनट/दिन) के साथ एक साथ भूलभुलैया के लिए आदी होना शुरू करो । इस मुकाम पर सभी दरवाजे खुले रखें । कुल 5 दिनों के लिए आदी होना प्रदर्शन करते हैं ।
  2. 1 दिन पर, भूलभुलैया भर में खाना छर्रों तितर बितर ।
  3. 2 और 3 दिनों पर, दो गोल हथियारों के साथ छर्रों तितर बितर ।
  4. 4 और 5 दिनों पर, केवल दो लक्ष्य बक्से पर छर्रों रखो ।
  5. हर दिन, छर्रों रखने के बाद, चार के समूहों में टी भूलभुलैया के शुरू बॉक्स में चूहों जगह और चूहों 10 मिनट के लिए भूलभुलैया का पता लगाने के लिए अनुमति देते हैं.
    नोट: Habituating चार के समूहों में चूहों उन्हें एक दूसरे से सीखने के लिए और प्रशिक्षण की गति में मदद मिलेगी.

3. LRA से एचआरए का पशु भेदभाव

नोट: इस प्रोटोकॉल दोनों देरी आधारित और प्रयास आधारित निर्णय लेने परीक्षण भी शामिल है । हालांकि, उद्देश्य के आधार पर, शोधकर्ताओं उनमें से केवल एक, या दोनों का परीक्षण कर सकते हैं । नियंत्रण सॉफ्टवेयर (सामग्री तालिका) स्वचालित रूप से निम्न चरणों के लिए T-भूलभुलैया सेटअप को नियंत्रित करने के लिए प्रयोग किया जाता है । यदि प्रयास आधारित निर्णय की जांच की जाएगी, दोनों एचआरए और LRA को मजबूर हाथ प्रवेश चरण में बाधाओं का परिचय । इसके बाद पशुओं को एक साथ होने वाले भेदभाव और बाधा दोनों के लिए प्रशिक्षित किया जाएगा । भूख से मर चूहों सक्रिय रूप से बाधाओं चढ़ाई और इस चरण के बाद, उन सभी कुशलता से चढ़ाई कर सकते हैं । इसलिए, यह इस प्रोटोकॉल के साथ एक कम बाधा से शुरू करने के लिए आवश्यक नहीं है ।

  1. मजबूर शाखा प्रवेश चरण
    1. नियंत्रण सॉफ़्टवेयर के पैरामीटर पंजीकरण विंडो खोलें, और पैरामीटर निम्नानुसार सेट करें (चित्र 3) ।
      1. "चरण विकल्प" चुनें । "परीक्षण संख्या" 10 के लिए सेट करें, ताकि प्रत्येक जानवर के माध्यम से जाना जाएगा 10 प्रति दिन परीक्षण 5 निरंतर दिनों के लिए ।
        नोट: एक अपने प्रयोगों में एक अलग परीक्षण संख्या चुन सकते हैं.
      2. ९०० s करने के लिए "अवधि" सेट करें ताकि प्रति दिन एक माउस का प्रशिक्षण ९०० एस से अधिक नहीं होगा. "डिफ़ॉल्ट प्रारंभ विलंब समय" सेट करने के लिए 3 s, ताकि प्रारंभ दरवाजा पशु का पता लगाने के बाद प्रारंभ क्षेत्र में 3 s खुल जाएगा ।
      3. एचआरए और LRA के लिए "गोली संख्या" सेट करें ताकि 4 छर्रों हमेशा एचआरए में स्वचालित रूप से तिरस्कृत हों और 1 गोली LRA में तिरस्कृत की जाती है ।
        नोट: हमारे प्रयोगों में, हमने पाया है कि 1:4 सबसे अच्छा अनुपात है जब 10 मिलीग्राम चीनी छर्रों का उपयोग किया जाता है. हम 6 से 10 छर्रों का उपयोग करते हैं, चूहों उन सभी को खाने खत्म नहीं कर सकते हैं और वहाँ हो रहा चूक हो जाएगा.
      4. "लंब समय" को 0 s पर सेट करें, ताकि इस चरण के दौरान एचआरए और LRA दोनों के लिए कोई विलंब नहीं होगा.
    2. नियंत्रण सॉफ़्टवेयर की "ID पंजीकरण" विंडो खोलें । एचआरए के स्थान के अनुसार सॉफ्टवेयर के लिए प्रत्येक व्यक्ति माउस की आईडी रजिस्टर, या तो बाईं ओर या दाईं ओर । (चित्रा 4).
      नोट: स्थान जीनोटाइप समूहों के संबंध में counterbalanced होना चाहिए । प्रत्येक जीनोटाइप समूह के ५०% के लिए, एचआरए हमेशा बाईं ओर होता है और LRA हमेशा दाईं ओर होता है । अन्य ५०% के लिए, एचआरए हमेशा दाईं ओर होता है और LRA हमेशा बायीं ओर होता है ।
    3. सॉफ्टवेयर की अनुप्रयोग विंडो खोलें, ड्रॉपडाउन "कार्य" सूची से "निर्णय लेने" का चयन करें. इनपुट विषय आईडी और "चरण" ड्रॉपडाउन सूची से "चरण 2" का चयन करें. "दिन" ड्रॉपडाउन सूची से दिन का नंबर चुनें. प्रयोग इंटरफ़ेस विंडो में प्रवेश करने के लिए "OK" बटन दबाएं ।
    4. प्रयोग अंतरफलक खिड़की में, प्रेस "GetBG" भूलभुलैया की पृष्ठभूमि की जानकारी इतनी है कि पशु सही पर्यावरण की पृष्ठभूमि की परवाह किए बिना ट्रैक किया जाएगा रजिस्टर करने के लिए । प्रेस "सत्र शुरू" बटन (चित्रा 5) ।
    5. माउस को प्रारंभ बॉक्स में रखें और दूरस्थ नियंत्रण के "प्रारंभ" बटन दबाकर प्रशिक्षण आरंभ करें ।
      1. ध्यान दें कि शुरू दरवाजा, एक जंक्शन दरवाजा (या तो छोड़ दिया है या दाईं ओर) स्वचालित रूप से 3 एस के बाद खुल जाएगा; एक बार माउस जंक्शन क्षेत्र में प्रवेश करती है, शुरू दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
      2. निरीक्षण है कि एक बार माउस देरी क्षेत्र में प्रवेश करती है (या तो छोड़ दिया है या दाईं ओर), जंक्शन दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा और लक्ष्य दरवाजा स्वचालित रूप से खुलेगा ।
      3. निरीक्षण है कि एक बार माउस गोली लेता है, पीछे का दरवाजा और पूर्व शुरू दरवाजा स्वचालित रूप से खुला होगा । एक बार माउस वापस क्षेत्र में प्रवेश करती है, पीछे का दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
      4. निरीक्षण करें कि एक बार माउस प्रारंभ बॉक्स में प्रवेश करता है, पूर्व-प्रारंभ डोर स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा, और एक नया परीक्षण प्रारंभ होगा ।
        नोट: प्रत्येक दिन के 10 परीक्षणों के भीतर इस प्रशिक्षण चरण के दौरान, सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से सुनिश्चित करें कि प्रत्येक माउस 5 परीक्षणों और 5 परीक्षणों के लिए LRA के लिए एचआरए का दौरा करेंगे ।
    6. भूलभुलैया अच्छी तरह से हर दिन साफ ।
  2. नि: शुल्क एआरएम प्रवेश चरण
    1. पैरामीटर और विषय आईडी को उसी तरह से रजिस्टर करें जैसा कि बलपूर्वक प्रवेश चरण में किया गया था (चरण 3.1.1 और 3.1.2). "चरण विकल्प" चुनें । 20 के लिए "परीक्षण संख्या" सेट करें, ताकि प्रत्येक जानवर के माध्यम से जाना जाएगा 20 परीक्षण, प्रति दिन के लिए 7 निरंतर दिन.
    2. अनुप्रयोग विंडो में, "चरण" ड्रॉपडाउन सूची से "चरण 3" का चयन करें । 3.1.3 चरण के अनुसार अंय पैरामीटर सेट करें ।
    3. प्रयोग इंटरफ़ेस विंडो में, "सफलता दर" के मान को ८०% के रूप में सेट करें ताकि प्रशिक्षण स्वचालित रूप से तब तक जारी रहेगा जब तक माउस परीक्षणों के ८०% में एचआरए का चयन नहीं कर लेगा, या जब माउस 20 परीक्षणों प्रति दिन खत्म होता है (जैसा कि पैरामीटर्स सेटअप में पंजीकृत है) । चरण 3.1.4 के अनुसार अंय कार्रवाइयां लागू करें ।
    4. अनुमति दें माउस को स्वतंत्र रूप से एक हाथ, या तो एचआरए या LRA चुनने के लिए ।
      1. ध्यान दें कि शुरू दरवाजा, दो जंक्शन दरवाजे स्वचालित रूप से 3 एस के बाद खुल जाएगा; एक बार माउस जंक्शन क्षेत्र में प्रवेश करती है, शुरू दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
      2. निरीक्षण करें कि एक बार माउस एक हाथ चुनता है और देरी क्षेत्र में प्रवेश करती है (या तो छोड़ दिया है या दाईं ओर), जंक्शन दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा और लक्ष्य दरवाजा स्वचालित रूप से खुलेगा ।
      3. निरीक्षण है कि एक बार माउस गोली लेता है, पीछे का दरवाजा और पूर्व शुरू दरवाजा स्वचालित रूप से खुला होगा । एक बार माउस वापस क्षेत्र में प्रवेश करती है, पीछे का दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
      4. निरीक्षण करें कि एक बार माउस प्रारंभ बॉक्स में प्रवेश करता है, पूर्व-प्रारंभ डोर स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा, और एक नया परीक्षण प्रारंभ होगा ।

४. विलंब आधारित निर्णय-परीक्षण कराना

  1. रजिस्टर पैरामीटर और विषय आईडी उसी तरह के रूप में मुक्त शाखा प्रविष्टि चरण में किया (चरण 3.2.1) । "विलंब समय" को 5, 10, 15 दिन 1, दिन 2 और दिन 3 पर क्रमशः सेट करें, ताकि 1 दिन पर एचआरए के लिए 5 एस विलंब होगा, दिन 2 पर एचआरए के लिए 10 s देरी, और 3 दिन पर एचआरए के लिए 15 एस देरी ।
  2. अनुप्रयोग विंडो में, "चरण" ड्रॉपडाउन सूची से "चरण 4" का चयन करें । अंय पैरामीटर को उसी तरह सेट करें जैसे 3.2.2 में ।
  3. प्रयोग इंटरफ़ेस विंडो में, चरण 3.2.3 के अनुसार सभी कार्रवाइयां लागू करें ।
  4. अनुमति दें माउस को स्वतंत्र रूप से एक हाथ, या तो एचआरए या LRA चुनने के लिए ।
    1. ध्यान दें कि शुरू दरवाजा, दो जंक्शन दरवाजे स्वचालित रूप से 3 एस के बाद खुल जाएगा; एक बार माउस जंक्शन क्षेत्र में प्रवेश करती है, शुरू दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
    2. निरीक्षण करें कि एक बार माउस एक हाथ चुनता है और देरी क्षेत्र में प्रवेश करती है (या तो छोड़ दिया है या दाईं ओर), जंक्शन दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
      नोट: अगर माउस LRA चुनता है, लक्ष्य दरवाजा स्वचालित रूप से तुरंत खुल जाएगा । हालांकि, अगर माउस एचआरए चुनता है, तो लक्ष्य का दरवाजा क्रमशः 5 एस, 10 एस, और 15 दिनों के बाद 1, 2, 3 पर स्वचालित रूप से खुल जाएगा ।
    3. निरीक्षण है कि एक बार माउस गोली लेता है, पीछे का दरवाजा और पूर्व शुरू दरवाजा स्वचालित रूप से खुला होगा । एक बार माउस वापस क्षेत्र में प्रवेश करती है, पीछे का दरवाजा स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा ।
    4. निरीक्षण करें कि एक बार माउस प्रारंभ बॉक्स में प्रवेश करता है, पूर्व-प्रारंभ डोर स्वचालित रूप से बंद हो जाएगा, और एक नया परीक्षण प्रारंभ होगा ।
      नोट: यहाँ, हम प्रत्येक देरी हालत के साथ 5-7 दिनों के लिए चूहों को प्रशिक्षित किया. हालांकि, ट्रांसजेनिक या रूपांतरित चूहों, 1 दिन (20 परीक्षणों) के कई लाइनों के परीक्षण पर हमारे अनुभव के आधार पर बिल्कुल अलग पादी के चूहों के बीच अंतर देखने के लिए पर्याप्त है और वहाँ कोई अर्थ नहीं है प्रशिक्षण समय का विस्तार करने के लिए ( चित्रा 6 के रूप में देखें एक उदाहरण) । इसलिए, वर्तमान में हम केवल प्रत्येक देरी समय के लिए 1 दिन लागू करते है और यह अच्छी तरह से काम करता है । कोई समस्या नहीं है अगर शोधकर्ताओं को अपने स्वयं के उद्देश्य के आधार पर प्रशिक्षण दिन बढ़ाना चाहते हो जाएगा ।
  5. वैकल्पिक: एचआरए के साथ परीक्षण को उलट कर. परीक्षण करने के लिए यदि माउस की पसंद एक अभिविन्यास वरीयता का परिणाम है, एचआरए और LRA की बाईं/सही स्थिति स्विच (जो स्वचालित रूप से सॉफ्टवेयर द्वारा पूरा किया जा सकता है) और चूहों स्वतंत्र रूप से ४.४ में के रूप में एक हाथ का चयन करने के लिए अनुमति देते हैं ।
  6. वैकल्पिक: कोई विलंब नियंत्रण परीक्षण निष्पादित करें । यह परीक्षण करने के लिए कि क्या कोई घाटा मनाया स्थानिक स्मृति या इनाम के बजाय निर्णय लेने में परिवर्तन का परिणाम संवेदनशीलता का परिणाम है, LRA के रूप में अच्छी तरह से एचआरए के लिए एक 15 एस देरी परिचय, और चूहों स्वतंत्र रूप से ४.४ में के रूप में एक हाथ का चयन करने की अनुमति ।

५. प्रयास आधारित निर्णय-परीक्षण कराना

  1. (चित्रा 1) आरेख में दिखाए गए के रूप में एचआरए के लिए बाधा का परिचय.
  2. सभी मापदंडों की स्थापना की और चरण ३.२ के अनुसार सभी आपरेशनों लागू-मुक्त शाखा प्रवेश चरण और 3 लगातार दिनों के लिए जानवरों का परीक्षण ।
  3. चूहों को आज़ादी से एक हाथ, या तो एचआरए या LRA चुनने के लिए अनुमति दें ।
    नोट: यहां हमने चूहों को 14 दिनों तक ट्रेनिंग दी । हालांकि, ट्रांसजेनिक या रूपांतरित चूहों की कई लाइनों के परीक्षण पर हमारे अनुभव के आधार पर, 3 दिन बिल्कुल अलग पादी के चूहों के बीच अंतर को देखने के लिए पर्याप्त हैं और प्रशिक्षण समय का विस्तार करने के लिए कोई अर्थ नहीं है (एक उदाहरण के रूप में चित्रा 6 देखें ). इसलिए वर्तमान में हम केवल प्रयास के लिए 3 दिन लागू आधारित परीक्षण और यह अच्छी तरह से काम करता है । कोई समस्या नहीं है अगर शोधकर्ताओं को अपने स्वयं के उद्देश्य के आधार पर प्रशिक्षण दिन बढ़ाना चाहते हो जाएगा ।
  4. वैकल्पिक: एचआरए के साथ परीक्षण को उलट कर. परीक्षण करने के लिए यदि माउस की पसंद एक अभिविन्यास वरीयता का परिणाम है, एचआरए और LRA की बाईं/सही स्थिति स्विच (जो स्वचालित रूप से सॉफ्टवेयर द्वारा पूरा किया जा सकता है) और चूहों को स्वतंत्र रूप से चरण ५.३ में के रूप में एक हाथ का चयन करने के लिए अनुमति देते हैं ।
  5. वैकल्पिक: प्रयास नियंत्रण परीक्षण निष्पादित करें । परीक्षण करने के लिए कि क्या कोई घाटा मनाया स्थानिक स्मृति या इनाम के बजाय निर्णय लेने में परिवर्तन का परिणाम संवेदनशीलता का परिणाम है, LRA के रूप में अच्छी तरह से एचआरए के लिए एक बाधा परिचय, और चूहों को स्वतंत्र रूप से ५.३ कदम में एक हाथ के रूप में चुनने की अनुमति ।

6. डेटा विश्लेषण

  1. नियंत्रण सॉफ्टवेयर से सीधे डेटा और परिणाम प्राप्त करें ।
    1. ध्यान दें कि सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से प्रायोगिक तारीख, शुरू और खत्म समय, अवधि, परीक्षण संख्या, एचआरए में एचआरए, गोली संख्या का स्थान और LRA, स्थिति (एक्स, वाई), और चलती ट्रेस आदि "डेटा" फ़ोल्डर में प्रत्येक माउस की , रिकॉर्ड होगा .
    2. जाँच करें कि सॉफ़्टवेयर स्वचालित रूप से निम्न आइटम्स का विश्लेषण है और उन्हें प्रत्येक पशु ID के अंतर्गत "परिणाम" फ़ोल्डर में रिकॉर्ड: अवधि, परीक्षण संख्या, एचआरए पसंद संख्या, LRA पसंद संख्या, एचआरए पसंद प्रतिशत, LRA पसंद प्रतिशत, कुल चलती दूरी, और कुल जंक्शन समय ।
  2. एक मिश्रित ANOVA (स्प्लिट-प्लॉट ANOVA) द्वारा सभी प्रयोगों के डेटा पर सांख्यिकीय विश्लेषण करें, बीच-बीच के कारक के रूप में दिन सत्र के साथ और समूह कारक (जीनोटाइप समूह या विभिन्न प्रायोगिक स्थितियों वाले समूह) के बीच के रूप में-विषय कारक के रूप में.
  3. समूह फैक्टर के मुख्य प्रभाव का विश्लेषण अगर वहां दिन के बीच कोई संपर्क है/ पोस्ट हॉक pairwise तुलना लागू करें अगर वहां दिन के बीच एक महत्वपूर्ण बातचीत/

Representative Results

देरी-और प्रयास-आधारित निर्णय का एक उदाहरण (एमएचबी: DTA चूहों)14 उनके जंगली-प्रकार littermate नियंत्रण चूहों (सीटी चूहों) के साथ औसत दर्जे का habenular ablated चूहों द्वारा निष्पादित कार्य कर चित्रा 6में दिखाया गया है । दो एमएचबी: DTA चूहों और दो सीटी चूहों प्रातः के बाद एक पिंजरे में सह-घर में थे ।

विलंब आधारित निर्णय परीक्षा (figure 6A) में, किसी भी चरण में जीनोटाइप और सत्र के बीच कोई महत्वपूर्ण सहभागिता नहीं थी, जिसमें भेदभाव प्रशिक्षण चरण (एचआरए का विलंब समय 0 था जब) और देरी आधारित निर्णय लेने की परीक्षा चरण (जब एचआरए की देरी का समय 5 एस, 10 एस, और 15 एस, क्रमशः) था । जीनोटाइप का मुख्य प्रभाव जब देरी समय 5 एस था महत्वपूर्ण नहीं था । हालांकि, जब देरी समय 10 एस और 15 एस, एमएचबी: DTA चूहों के लिए लंबी थी सीटी चूहों की तुलना में एचआरए यात्राओं के प्रतिशत में एक महत्वपूर्ण कमी का प्रदर्शन किया । इन परिणामों से पता चला कि एमएचबी के पृथक एक बड़ा इनाम के लिए प्रतीक्षा करने के लिए चूहों की वरीयता में कमी आई, और इसके बजाय एक छोटे से इनाम तुरंत चयन की प्रवृत्ति प्रदर्शित, जब प्रतीक्षा समय 10 सेकंड या अब भी थे. डेटा का सुझाव दिया है कि एमएचबी impulsivity और/या समय की लागत/लाभ के मूल्यांकन के नियंत्रण में एक महत्वपूर्ण मस्तिष्क संरचना हो सकता है, और अधिक देरी पहुंच बर्दाश्त करने के लिए एक बड़े इनाम पाने के लिए प्रवण पशुओं प्रतिपादन ।

प्रयास आधारित निर्णय परीक्षा (फिगर घमण्ड) में, एचआरए यात्राओं के प्रतिशत में काफी कमी आई थी एमएचबी: DTA चूहों में जब एक अवरोध एचआरए में रखा गया था, चाहे एचआरए के बाईं/सही स्थानीयकरण (1x बाधा चरण और उलटा चरण ). इसका मतलब यह है कि एमएचबी के phenotype: DTA चूहों स्थानिक वरीयता और स्मृति में एक घाटे के कारण नहीं था । प्रयास नियंत्रण परीक्षण में, बाधाओं दोनों लक्ष्य हथियारों (2 × बाधाओं चरण) में रखा गया था और दोनों LRA और एचआरए उच्च प्रयास के साथ जुड़े थे । इसलिए, प्रयास लागत या तो कम इनाम या उच्च इनाम का चयन पशुओं के लिए ही था । एमएचबी: DTA चूहों LRA से अधिक बार एचआरए का दौरा किया, और अंतिम सत्र (सत्र 5) पर एक तुलनीय एचआरए यात्रा संख्या तक पहुँच गया. इस परिणाम से पता चलता है कि इनाम संवेदनशीलता और एमएचबी में स्थानिक स्मृति: DTA चूहों बरकरार था । आंकड़ों का आविर्भाव हुआ कि एमएचबी प्रयास लागत/लाभ मूल्यांकन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है, जिससे पशुओं को अधिक से अधिक पुरस्कार प्राप्त करने के लिए अधिक काम में लगाया जा सके ।

Figure 1
चित्रा 1: निर्णय लेने परीक्षण के लिए पारंपरिक टी भूलभुलैया तंत्र के योजनाबद्ध आरेख. (क) देरी आधारित निर्णय परीक्षण उपकरण बना । जानवरों को स्टार्ट आर्म में रखा गया और दो गोल आर्म्स, एचआरए और LRA के बीच चुना गया. जब जानवरों ने एचआरए चुना, तो उन्हें बड़ा इनाम पाने के लिए (सेकंड में देरी के समय पर निर्भर करते हुए) इंतजार करना पड़ा । शोधकर्ताओं को मैंयुअल रूप से प्रत्येक परीक्षण के लिए पशुओं, छर्रों, और दरवाजे संभाल की जरूरत है । (ख) प्रयास आधारित परीक्षण उपकरण बनाने का निर्णय । जानवरों को स्टार्ट आर्म में रखा गया और दो गोल आर्म्स, एचआरए और LRA के बीच चुना गया. जब जानवरों ने एचआरए चुना तो उन्हें बड़ा इनाम पाने के लिए त्रिकोणीय बैरियर पर चढ़ना पड़ा । शोधकर्ताओं को मैंयुअल रूप से प्रत्येक परीक्षण के लिए पशुओं, छर्रों, दरवाजे और बाधाओं को संभालने की जरूरत है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्रा 2: निर्णय लेने परीक्षण के लिए स्वचालित टी-भूलभुलैया सेटअप । (A) स्वचालित सेटअप का शीर्ष दृश्य । (ख) स्वचालित सेटअप का पार्श्व दृश्य । (ग) 3d दाएँ कोण त्रिकोण बाधा प्रयास आधारित निर्णय परीक्षण के लिए इस्तेमाल किया, बाएँ से दाएँ, पक्ष को देखने, विपरीत पक्ष को देखने और कर्ण पक्ष देखने के लिए कर रहे हैं, क्रमशः. मूल तकनीकी तस्वीरें वाणिज्यिक निर्माता से अनुमति के साथ संपादित । GBL: लक्ष्य बॉक्स (बाएँ), GBR: लक्ष्य बॉक्स (दाएँ), GDL: लक्ष्य द्वार (बाएँ), GDR: लक्ष्य दरवाजा (दाएँ), दाल: देरी क्षेत्र (बाएँ), डार: देरी क्षेत्र (दाएँ), JDL: जंक्शन दरवाजा (बाएँ), JDR: जंक्शन दरवाजा (दाएँ), बीडीएल: पिछला दरवाजा (बाएँ), बीडीआर: पीछे का दरवाजा (दाएँ), सीसीडी: आरोप युग्मित डिवाइस कैमरा) । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्र 3: पैरामीटर पंजीकरण विंडो । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्रा 4: विषय आईडी पंजीकरण खिड़की । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्र 5: प्रयोग इंटरफ़ेस विंडो । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्रा 6: देरी आधारित है और प्रयास आधारित एमएचबी में निर्णय लेने: DTA चूहों । (क) एमएचबी में विलंब आधारित निर्णय परीक्षण: DTA चूहे (चूहे १२-१४ माह-पुराने थे, एन = ८/जीनोटाइप). पादी के बीच एचआरए पसंद का प्रतिशत तुलनीय था जब विलंब समय था 0 और 5 एस, लेकिन एमएचबी में काफी कमी आई: DTA चूहों जब देरी समय था 10 एस और 15 एस. जब देरी समय था 5 एस, जीनोटाइप × दिन बातचीत: एफ (1, 14) = ०.५९४, पी = ०.२३६; जीनोटाइप का प्रभाव: एफ (1, 14) = ०.६१, पी = ०.४५; जब देरी समय था 10 एस: जीनोटाइप × दिन बातचीत: एफ (1, 14) = ३७.५, पी = ०.३४६; जीनोटाइप का प्रभाव: F (1, 14) = ३२.४, p < 0.0001; जब देरी समय था 15 एस: एफ (1, 14) = ३८.७, पी = ०.२४३; जीनोटाइप का प्रभाव: एफ (1, 14) = ३१.६, और पी ≤ ०.०००१ । (ख) प्रयास आधारित निर्णय-एमएचबी में परीक्षण करना: DTA चूहों (चूहों 12-14 महीने-पुराने थे, n = 9/जीनोटाइप) । 1x बैरियर चरण के दौरान, वहां जीनोटाइप और सत्र (जीनोटाइप × दिवस बातचीत: एफ (1, 16) = २.११, पी = ०.०१५) के बीच एक महत्वपूर्ण बातचीत थी, और पोस्ट हॉक pairwise तुलना पता चला कि एचआरए एमएचबी के%: DTA चूहों काफी सभी में गिरा दिया सत्र. उलटा चरण के दौरान, वहां जीनोटाइप और सत्र (जीनोटाइप × दिवस बातचीत: एफ (1, 16) = १.६१, पी = ०.०८) के बीच कोई महत्वपूर्ण बातचीत थी । एमएचबी: DTA चूहों ने एचआरए का दौरा किया सीटी चूहों की तुलना में काफी कम (मुख्य जीनोटाइप प्रभाव: एफ (1, 16) = ८.१८, पी = ०.०१). 2 × बाधाओं चरण के दौरान, वहां पादी और सत्र के बीच एक महत्वपूर्ण बातचीत थी, और सत्र में एक महत्वपूर्ण अंतर 3 और सत्र 4 (2x बाधाओं चरण: जीनोटाइप × दिन बातचीत: एफ (1, 16) = ३.९, पी = ०.००६७) । एमएचबी: DTA चूहों अंतिम सत्र, सत्र 5 पर सीटी चूहों के बराबर एक एचआरए यात्रा संख्या तक पहुँच गया. डेटा का प्रतिनिधित्व मतलब ± SEM. * * p < 0.01; p < 0.001 । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 7
चित्रा 7: निर्णय लेने परीक्षण के फ़्लोचार्ट (देरी या प्रयास आधारित)।

Discussion

निर्णय लेने के एक संज्ञानात्मक उच्च विकास के दौरान संरक्षित प्रक्रिया है15। मनुष्यों और जानवरों प्रतिस्पर्धी कार्रवाई विकल्प संभावित इनाम के सापेक्ष और फिर अपनी पसंद बनाने की लागत का मूल्यांकन कर सकते हैं । मस्तिष्क संबंधी रोगों और मनोवैज्ञानिक विकारों की एक संख्या से पीड़ित रोगियों को16निर्णय लेने के विभिंन रूपों में घाटे का प्रदर्शन । इसलिए यह महत्वपूर्ण है neurobiological और pathophysiological निर्णय लेने की प्रक्रिया अंतर्निहित तंत्र की जांच । पिछले कुछ वर्षों में देरी-और प्रयास आधारित निर्णय लेने से अधिक से अधिक शोध हित आकर्षित हो रहे हैं । इसके अलावा, मूषक, विशेष रूप से चूहों को बड़े पैमाने पर निर्णय के इन दो रूपों का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है17।

कई अध्ययनों एक एचआरए और एक LRA2,6,7,8,9,10के साथ एक टी भूलभुलैया उपकरण शामिल एक व्यवहार कार्य का उपयोग कर दिलचस्प खोजों के लिए नेतृत्व किया, 18 , 19 , 20 , 21 , 22. कार्य में, एचआरए सहयोगियों को या तो एक समय देरी या प्रयास परिश्रम के साथ बड़े पुरस्कार । LRA पर, पशुओं को किसी भी समय देरी और शारीरिक प्रयास के बिना तुरंत एक छोटे से इनाम प्राप्त कर सकते हैं । पारंपरिक दृष्टिकोण मानव प्रयोगकर्ता के मैनुअल हस्तक्षेप पर निर्भर करता है । प्रत्येक परीक्षण में, प्रयोगकर्ता को छर्रों की गिनती करने और उन्हें एचआरए और LRA की फूड ट्रे में रखने की जरूरत है, एचआरए और LRA दोनों पर लक्ष्य दरवाजे लगाएं, और फिर शुरू बांह के अंत में पशु को लगाएं । जब पशु हथियारों के या तो प्रवेश करती है, एक जंक्शन के दरवाजे को लक्ष्य हाथ से पशु को प्रतिबंधित रखा जाना चाहिए । प्रोटोकॉल के आधार पर, प्रयोगकर्ता को समय की गणना करने और निर्धारित विलंब के बाद लक्ष्य का दरवाजा खोलने की आवश्यकता होती है । के बाद पशु लक्ष्य क्षेत्र में प्रवेश करती है और गोली (ओं) को प्राप्त करता है, प्रयोगकर्ता को पिंजरे में लौटने की जरूरत है, और जानवर की बांह पसंद और व्यवहार रिकॉर्ड है । फिर प्रयोगकर्ता को अगले ट्रायल के लिए टी-भूलभुलैया दरवाजे और गोली तैयार करने की जरूरत है । पूरे प्रशिक्षण और परीक्षण प्रक्रियाओं काफी समय और गहन श्रम कर रहे हैं । इसके अलावा, विभिंन प्रयोगशालाओं में मानकीकरण की कमी एक और चिंता का विषय है ।

इस पत्र में, हम एक वीडियो ट्रैकिंग प्रणाली (चित्रा 7) पारंपरिक प्रोटोकॉल की समस्याओं को हल करने के साथ एक संशोधित स्वचालित टी-भूलभुलैया उपकरण पर आधारित एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया । पारंपरिक टी-भूलभुलैया के लिए एक "वापस दरवाजा" और "वापस गलियारे" शुरू करके, हम एक "bisected isoceles त्रिकोण आकार" के साथ भूलभुलैया प्राप्त की । इस सेटअप के लाभ कर रहे है (1) व्यवहार प्रशिक्षण और परीक्षण के पूर्ण स्वचालन । यह प्रयोगकर्ता मनोवाद के प्रभाव को निकालता है और मानवीय समय और श्रम प्रतिबद्धताओं को कम करता है । हम प्रयोगशाला में चार setups है, ताकि चार चूहों को प्रशिक्षित किया जा सकता है या एक साथ परीक्षण एक प्रयोगकर्ता, जो पारंपरिक प्रोटोकॉल का उपयोग कर पूरा किया जा करने के लिए असंभव है । (2) नियंत्रण सॉफ्टवेयर के रूप में सॉफ्टवेयर लचीलापन है experimenters स्वतंत्र रूप से गोली संख्या, देरी समय, दरवाजा खोलने और बंद, परीक्षण संख्या, अवधि, और ट्रेस मोड सहित कई मापदंडों, स्थापित करने के लिए अनुमति देता है. इसलिए यह प्रणाली विभिन्न प्रकार की प्रायोगिक जरूरतों को पूरा कर सकती है । (3) टी भूलभुलैया पर सभी फिसलने दरवाजे के रूप में व्यापक अनुकूलता है जब वे खुले हैं भूलभुलैया के आधार के तहत संग्रहीत किया जा करने के लिए डिज़ाइन कर रहे हैं । इसलिए, सेटअप आसानी से विविध शारीरिक प्रणालियों के साथ एकीकृत किया जा सकता है, optogenetic/ऑप्टिकल हेरफेर सहित, vivo इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी रिकॉर्डिंग में , और microdialysis. इसके अलावा, संभावना है कि चूहों एक स्थिति वरीयता के कारण एचआरए चुना को छोड़कर के लिए, हम दोनों देरी और प्रयास आधारित परख के लिए एक नियंत्रण परीक्षण लागू करने की सलाह देते हैं । दो लक्ष्य हथियार में लागत equalizing द्वारा, पशुओं को एक ही कीमत पर दोनों इनाम परिणामों का अनुभव करने का अवसर है । चुनाव बस इनाम अंतर के आधार पर बनाया जा सकता है, इस प्रकार की जरूरत को दूर करने के लिए निर्णय लेने से पहले दोनों लागत और लाभ को एकीकृत । यह भी परीक्षण है कि क्या जानवरों के विकल्पों में कोई बदलाव की लागत या इनाम, या स्मृति घाटे पैमाने के बजाय जिस तरह से वे अपने फैसले का मूल्यांकन में एक परिवर्तन की अक्षमता का परिणाम है ।

हमारी प्रयोगशाला में, हम इस स्थापना के साथ चूहों के बारे में 10 उपभेदों का विश्लेषण किया है । एक उदाहरण के प्रतिनिधि डेटा में दिखाया गया था, एमएचबी: DTA चूहों दोनों देरी में एक मजबूत phenotype का प्रदर्शन किया-और प्रयास आधारित निर्णय लेने. कि है, इनाम मूल्य दृढ़ता से समय और एमएचबी में प्रयास: DTA चूहों द्वारा रियायती है । परिणाम impulsivity नियंत्रण पर एमएचबी की महत्वपूर्ण भूमिका का पता चला. इसके अलावा, हम निर्णय लेने की प्रक्रिया (अप्रकाशित डेटा) के दौरान मुक्त चलती चूहों पर सिलिकॉन जांच रिकॉर्डिंग लागू किया है । सभी प्रयोगों स्वचालित स्थापना की क्षमता के लिए मांयता मानक प्रदान की है । इस प्रकार, T-भूलभुलैया आधारित स्वचालित उपकरण के साथ निर्णय लेने के लिए मानकीकृत प्रोटोकॉल आनुवंशिक प्रभाव का पता लगाने के लिए उपयुक्त है, औषधीय प्रभाव और देरी पर और कुतर के प्रयास डिस्काउंटिंग तंत्रिका सर्किट प्रभाव । संक्षेप में, सेटअप कई फायदे के लिए देरी और प्रयास आधारित निर्णय परख के लिए एक आदर्श प्रणाली के रूप में सेवा है ।

Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

हम dr. मैथ्यू एफ एस Rushworth (प्रयोगात्मक मनोविज्ञान, ऑक्सफोर्ड विश्वविद्यालय के विभाग) और डॉ Sakagami Masamichi (मस्तिष्क विज्ञान अनुसंधान केंद्र, Tamagawa विश्वविद्यालय) परियोजना की दीक्षा पर उनके बहुमूल्य सलाह के लिए और विवरण पर शुक्रिया अदा करना चाहूंगा प्रोटोकॉल का । हम महत्वपूर्ण टिप्पणियों के लिए डॉ लिली यू धंयवाद और पांडुलिपि संपादन । इस परियोजना को आरआईकेईएन प्रोत्साहन अनुसंधान परियोजना (१००२२६२०१७०११००४४३) द्वारा क्ष z, मस्तिष्क विज्ञान परियोजना, उपंयास विज्ञान पहल, राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान के संस्थान (BS291003) क्ष z, आरआईकेईएन एजिंग परियोजना के लिए केंद्र के लिए समर्थन किया गया ( 10026-201701100263-340120) के लिए Q Z और JSPS Kakenhi अनुदान में युवा वैज्ञानिकों के लिए सहायता (ख) (१७८४१७४९) Q.Z. करने के लिए

लेखक योगदान: क्ष Z कल्पना और परियोजना शुरू की, q. z, Y. k और एच. जी. प्रयोगों और डेटा विश्लेषण, एच. जी लैब और O'HARA एंड कं, लिमिटेड, क्यू जेड और वाई के बीच काम समंवित कश्मीर पांडुलिपि लिखा था, एस मैं परियोजना की निगरानी ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
automated t-maze for decion making testing O’HARA & Co.,ltd no catalog number, customorized Address requested by the reviewer: 4-28-16 Ekoda, Nakano-ku, Tokyo 165-0022
TEL: 81-3-3389-2451 FAX:81-3-3389-2453
slica gel  Nacalai Tesque 1709155
AIN-76A Rodent Tablet 10mg Test Diet 1811213(5TUL) Manufactured for Japan,SLC
Time TM1 software  O’HARA & Co.,ltd no catalog number
SPSS statistics V21.0 IBM

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Zhang, Q., Kobayashi, Y., Goto, H., Itohara, S. An Automated T-maze Based Apparatus and Protocol for Analyzing Delay- and Effort-based Decision Making in Free Moving Rodents. J. Vis. Exp. (138), e57895, doi:10.3791/57895 (2018).

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