Summary
Normothermic ex situ hjerte perfusion (ESHP), bevarer hjerte i en slå, semi-fysiologisk tilstand. Når der udføres i en fungerende tilstand, giver ESHP mulighed for at udføre avancerede vurderinger af donor hjerte funktion og orgel levedygtighed. Her, beskriver vi vores metode til evaluering af Myokardie ydeevne under ESHP.
Abstract
Den nuværende standard metode for orgel bevaring (kølerum, CS), udsætter hjerte til en periode med kold iskæmi, der begrænser tid, sikker opbevaring og øger risikoen for bivirkninger efter transplantation resultater. Desuden tillader den statiske karakter af CS ikke for orgel evaluering eller intervention under bevarelse interval. Normothermic ex situ hjerte perfusion (ESHP) er en roman metode til konservering af donerede hjertet, der minimerer kolde iskæmi ved at levere iltet, næringsstof-rige perfusate til hjertet. ESHP har vist sig at være ikke-inferior til CS i bevarelsen af standard-kriterier donor hjerter og har også lettet kliniske transplantation af hjerter doneret efter kredsløbssygdomme bestemmelse af død. I øjeblikket perfuses kun tilgængelige kliniske ESHP enheden hjerte i en losset, ikke-erhvervsaktive tilstand, begrænse vurderinger af Myokardie ydeevne. Omvendt, ESHP i arbejde tilstand giver mulighed for omfattende evaluering af cardiac ydeevne ved vurdering af funktionelle og metaboliske parametre under fysiologisk forhold. Desuden har tidligere eksperimentelle undersøgelser antydet, at ESHP i arbejde tilstand kan resultere i forbedrede funktionelle bevarelse. Her beskriver vi protokol for ex situ perfusion af hjertet i et stort pattedyr (svin) model, som er reproducerbare for forskellige dyremodeller og hjertet størrelser. I programmet i denne ESHP apparater giver mulighed for real-time og automatiseret kontrol af pumpens omdrejningstal at opretholde ønskede aorta og venstre atriale pres og evaluerer forskellige funktionelle og elektrofysiologiske parametre med minimalt behov for tilsyn/manipulation.
Introduction
Kliniske relevans
Mens de fleste aspekter af cardiac transplantation har udviklet sig betydeligt, siden den første hjertetransplantation i 1967, forbliver cold storage (CS) standarden for donor hjerte bevarelse1. CS udsætter orgel til en periode med kold iskæmi, der begrænser sikker bevarelse interval (4-6 timer) og øger risikoen for primære graft dysfunktion2,3,4. På grund af den statiske karakter af CS er det ikke muligt i tiden mellem udtagning og transplantation vurderinger af funktion eller terapeutiske indgreb. Dette er en særlig begrænsning i udvidede kriterier donorer herunder hjerter doneret efter kredsløbssygdomme død (DCD), at skabe en hindring for at overvinde den betydelige kløft mellem efterspørgsel og den nuværende donor pool5,6. Til adresse denne begrænsning, ex situ hjerte perfusion er blevet foreslået som en roman, semi-fysiologiske metode til at bevare donerede hjerter, minimere eksponeringen for kolde iskæmi ved at levere iltet, næringsstof-rige perfusate til hjertet under bevarelse tid 1 , 7 , 8.
Ex situ hjerte perfusion
En af de mest anvendte metoder til ex situ undersøgelse af isolerede hjertet er Langendorff perfusion. I denne metode, indført af Oskar Langendorff i 1895, blod flyder ind i kranspulsårerne og ud koronar sinus af isolerede hjertet med hjertet i en tom og slå stat9,10. Klinisk ESHP i en Langendorff tilstand med apparatet Transmedics orgel Care System (OCS) har vist sig at være ikke-inferior til CS i bevarelsen af standard-kriterier donor hjerter1, og har lettet den kliniske transplantation af DCD hjerter 11. men der er bekymringer om enhedens evne til at evaluere orgel levedygtighed, som en række af donor hjerter i første omgang troede at være ender blev kasseret efter perfusion på OCS3. OCS understøtter hjertet i Langendorff (ikke-arbejdende) tilstand, og dermed besidder en begrænset kapacitet til evaluering af pumpefunktion af hjertet3,12. En voksende mængde af beviser tyder på, at funktionelle parametre tilbyder en bedre måde at vurdere orgel levedygtighed, tyder på, at vurderinger af hjertefunktion kan blive et pålideligt redskab for evaluering og udvælgelse af hjerter for transplantation under ESHP3 ,12,13,14, desuden vores undersøgelser på ex situ perfunderet svin hjerter foreslår at ESHP i arbejde tilstand giver øget funktionel bevarelse af hjertet under perfusion interval15,16.
Et ESHP apparat i stand til at bevare hjertet i en fungerende tilstand skal råde over et niveau af automatisering til at sikkert og præcist vedligeholde preload, afterload og strømningshastigheder. Et sådant system bør også besidder fleksibilitet for at lette omfattende vurderinger af hjertefunktion skal gennemføres. The ESHP apparater, der anvendes her er udstyret med brugerdefinerede software, der 1) leverer og vedligeholder ønskede aorta (Ao) og venstre atriale (LA) Tryk/flow og 2) giver real-time analyse af funktionelle parametre og visuel vurdering af pres bølgeformer med minimal behov for tilsyn. Pres data er erhvervet med standard væskefyldte Tryktransducere, og flow data er erhvervet med transit-tid doppler flow sonder. Disse signaler er digitaliseret med en bro og analog input, henholdsvis. Hjertet er placeret vandret med en lille udvidelse til de store fartøjer på en blød silikone membran. Vedhæftede filer cannulation passerer gennem membranen, indarbejde en overholdelse afdeling for afdæmpende ventrikulær udslyngning. Målet med dette arbejde er at give forskere i feltet af cardiac transplantation med en protokol til ex situ perfusion og evaluering af hjertet, under normothermic, semi-fysiologiske forhold i orden tilstand, i en stor pattedyr (Yorkshire gris) model.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle procedurer i dette manuskript blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne i den canadiske Rådet om dyrs pleje og vejledning til pasning og anvendelse af forsøgsdyr. Protokollerne blev godkendt af den institutionelle dyrs pleje af University of Alberta. Denne protokol er blevet anvendt i juvenile Yorkshire avlshundyr mellem 35-50 kg. Alle individer ESHP procedurer havde fået ordentlig biosikkerhed uddannelse.
1. præ-kirurgisk præparater
- Placer orgel kammer korrekt på apparat vogn og installere silicium støtte membran inde i orgel kammer. Ao, lungepulsåren (PA) og LA forbindelsespunkter kan ses i figur 1.
- Installere den ESHP slange netværk (repræsenteret i figur 2AB) oxygenator og filter. Vedhæfte varmeveksler vand linjer og feje gas slange til oxygenator.
- Sted strømmen sonder til måling af koronar sinus/PA og LA flow på den tilsvarende slanger.
- Tilslut Tryktransducere Ao og LA til de repræsentative strækninger på kredsløbet.
- Sikre, at alle slanger forbindelserne er solidt fastgjort og alle de stopcocks og luer låse er ordentligt lukket på de separate websteder.
- Prime kredsløb med 750 mL af modificerede Krebs-Henseleit buffer (NaCl, 85; KCl, 4.6; NaHCO3, 25; KH2PO, 1.2; MgSO4, 1.2; glukose, 11; og CaCl2, 1.25 mmol/L) der indeholder 8% albumin. De air Ao og LA pumperne ved at placere trykside over fjorden, så at luften efterlader pumpe kammer (figur 3). Løsningen typisk behøver ikke at være allerede før starten af perfusion.
- Indlede programmet efter Ao og LA pumper er de luftes og kredsløbet er primet.
2. ESHP Software initialisering og justeringer
Bemærk: ESHP apparatet bruges her er udstyret med et brugerdefineret program til at tillade kontrol af pumpehastighed for at opnå og fastholde ønsket LA og Ao pres. Programmet også analyserer funktionelle parametre og giver en visuel vurdering af pres bølgeformer (figur 4).
- For at starte programmet ESHP, skal du klikke på programgenvejen på skærmen.
- Klik på "initialisere" på siden "indstillinger". Initialiseringen af meddelelsen vises på brættet (figur 5).
- På den samme side, nul strøm sensorer at klikke på "nul LA strømmen" og "nul PA flow". Meddelelsen vises på brættet.
- Justere højden på Tryktransducere silicium support. højde Til nul for Tryktransducere, åbne Ao og LA Tryktransducere (og eventuelle andre transducere indstillet til at kontrollere presset) til atmosfæren, derefter på "nul alle pres". Meddelelsen vises på brættet.
- I "forsiden" øge Ao pumpehastighed gradvist indtil det punkt, hvor strømmen fra Ao kanyle vises i salen, orgel. I det nuværende system, er dette opnået med 900-1000 omdrejninger pr. minut (RPM).
- Tilføje 750 mL blod til perfusate løsning til at bringe den samlede perfusate volumen til 1,5 L (som beskrevet i den "kirurgi, høst blodet, og hjertet indkøb" afsnit) og derefter øge LA pumpe PRM (800-900 omdr. / min.), således at ingen luft forbliver i LA kanyle eller LA slangen under silikone støtte membran.
- Efter initialisering af den kontrollerende software og de-udluftning af ESHP apparatet, kan donor hjerte indkøb fortsætte.
3. forberedelse og anæstesi
- Administrere 20 mg/kg af ketamin og 0,05 mg/kg af atropin intramuskulært for præmedicinering.
- Overføre grisen til den kirurgiske suite og placere grisen på operationsbordet med bordplade varme for at opretholde normothermia.
- Titreres ilt strømningshastighed for maske induktion efter dyrenes vægt og den bedøvende system. For lukket cirkel bedøvelsesmiddel kredsløb bør ilt flow være 20-40 mL/kg.
- Tænde isofluran til 4 – 5%; efter et eller to minutter kan dette nedsættes til 3%.
- Vurdere dybde af anæstesi. Grisen er i kirurgisk flyet, hvis der er ingen tilbagetrækning refleks reaktion på skadelige stimuli.
- Efter bekræftelse af den passende dybde af anæstesi, Fortsæt til intubation.
- Placer puls oximeter sonden på tungen (foretrukket) eller øre. Iltmætning målt af pulsoximetri bør forblive over 90%.
- Barbere pletter af hår på venstre og højre albue regioner, og venstre knæ. Vaske hud olier med sæbe og vand, skyl med sprit og tørre fuldstændigt. Placer ECG kontakter. Undgå bly wire interferens med operationsstedet. Tilslut afledningerne til de korrekte placeringer.
- For at opretholde anæstesi, justere ilt flow (20-40 mL/kg) og inhalant gas sats (1-3%). Pulsen skal være 80-130 slag/min. åndedræt sats skal 12-30 vejrtrækninger/min.
- Barbering, vaske og aseptisk klargøre webstedet indsnit.
4. indsamling og hjerte indkøb
- Evaluere niveauet anæstesi hver minimum hvert 5 min for at bekræfte den kirurgiske fly (ingen pedal refleks og ingen blinke refleks, ingen svar til smertefulde stimuli).
-
Udføre en median sternotomi.
- Identificere jugulum og formet som et sværd som vartegn.
- Bruger Elektrokauterisation, udvikle midterlinjen mellem vartegn ved at dividere det subkutane væv og fascia mellem fibrene af pectoralis større muskler.
- Markere midterlinjen langs brystbenet knoglen med cautery. Udføre brystbenet osteotomi med en elektrisk eller luft-drevne så. For at forhindre oprettelse af fortsætte skader på de underliggende strukturer (fx hjertesækken og brachiocephalic vene, og innominate arterie), gradvist med saven.
- Trække brystbenet gradvist, ved hjælp af en brystbenet retractor. For at undgå overdreven spændinger og vaskulære skade, skal retractoren ikke placere alt for langt cranially.
- Gratis sternopericardial ledbånd fra posterior overfladen af brystbenet bruger cautery.
- Åbn at hjertesækken med en Metzenbaum saks og lave perikardial kanterne til brystbenet med 1-0 silke sutur.
- Udvide midterlinjen indsnit cranially af 2 – 3 cm og udsætte højre fælles halspulsåren og interne halsfedt.
- Få proksimale og distale kontrol af fartøjer af omkranser fartøjerne med silke bånd (2-0).
- Binde de kranielle omkredsende bånd på hvert fartøj.
- Åbn den forreste 1/3 af hvert fartøj med en 11-bladet og derefter indsætte en 5-6 F kappe i hvert fartøj. Tie den caudale omkredsende slips omkring hvert fartøj til at sikre de respektive sheathes.
- Overvåge det arterielle og central venøs pres ved at forbinde hver kappe til en tryktransduceren.
- Levere 1.000 U/kg heparin intravenøst.
- Placer en 3-0 polypropylen pung-streng sutur omkring den højre atrium vedhæng og sikre det med en snare.
- Indeni pung-streng sutur, skal du oprette en 1 cm incision på vedhæng med en 11 klinge. Indsæt en to-trins venøse kanyle (28/36 FR) inde i snit og holdning den distale spids i IVC. Sikre kanylen af tieing snare til den venøse kanyle. Styre outlet af kanylen med en slange klemme.
- Fra de to-trins venøse kanyle placeret i højre atrium, indsamle 750 mL fuldblod fra grisen gradvist over en periode på 15 min i en autoklaveres glasbeholder og samtidig udskifte lydstyrken med 1 L af en isotonisk krystalloide løsning som Plasmalyte A.
- Tilføje blodet til perfusion kredsløb, (som har været tidligere PRIMES med 750 mL Krebs-Henseleit buffer indeholdende 8% albumin) for at nå en endelige mængden af 1,5 L i perfusate. Perfusate er en 1:1 kombination af Krebs-Henseleit indeholdende 8% albumin løsning og fuldblod fra donor animalske 17.
- Placer en cardioplegia nål (14-16 F) i den opstigende Ao og sikre det med en snare.
- Tilsluttes cardioplegia taske cardioplegia kanyle og tilsættes 100 mL af blodet til 400 mL af cardioplegia (St. Thomas Hospital løsning) at nå frem til en afsluttende bind af 500 mL blod cardioplegia.
- Aflive svin af exsanguination. Hvis agter at tilføje mere blod til perfusate efter start af perfusion (i henhold til målene for undersøgelsen), indsamle blod og tilføje 10 – 30 U/mL af heparin til det og gemme det i en glasbeholder eller en plasticpose ved 4 ° C for korte varighed (timer
- Cross-klemme den opstigende Ao med Ao klemme og levere cardioplegic løsningen til Ao rod.
-
Efter levering af cardioplegic løsning er fuldført, Fjern cross-clamp og udføre cardiectomy.
- For at lette montering Ao og PA at deres repræsentative kanyle, delvist dissekere den opstigende Ao fra PA ved hjælp af en Metzenbaum saks.
- Transekttællinger den overlegne og ringere vena cava, forlader omkring 1 cm af længden på hver.
- Adskille hjertet fra den bageste mediastinum ved transecting pulmonal venerne.
- Punktafgifter hjertet at sikre alle Ao arch fartøjer indkøbes sammen med et segment af faldende Ao. Bevare op til PA tvedeling.
- Veje det tomme hjerte. Mængden af vægtøgning over ex situ bevarelse interval kan bruges som en metrikværdi for orgel ødem.
5. placering af hjertet på ESHP apparater og indledningen af Perfusion
- Trim overskydende væv omkring LA med en Metzenbaum saks og klippe mellem pulmonal venerne til at oprette en fælles blænde.
- Placer en pung-streng sutur omkring LA blænde ved hjælp af en 3-0 polypropylen sutur.
- Sutur og luk den ringere vena cava med en 3-0 polypropylen sutur. Forlade den overlegne vena cava åbne i begyndelsen af perfusion sikre højre hjertekammer (RV) forbliver dekomprimerede indtil perfusate varmede og en organiseret rytme er opnået.
- Placer LA kanyle i LA blænde og sikre det med en snare (figur 6).
- Forsigtigt klemme hjertekamrene til de-air hjertet"fra 5.5. og føje det til 5.7. som øge Ao pumpehastighed til 1600 RPM som forsigtigt klemme hjertet. De resterende luft i Ao rod vil blive bortvist gennem den innominate og subclavia grene.
- Tillægge Ao kanylen indkapslet i silikone membran Ao. Sikre Ao omkring kanylen med en silke slips. Trim Ao for at opnå en ordentlig løgn uden spændinger eller kinke.
- Øge Ao pumpehastighed til 1600 RPM. De resterende luft i Ao rod vil blive bortvist gennem den innominate og subclavia grene.
- Tilslut Ao purge linje til innominate arterie. Sikring af dets tilslutning med en silke slips.
- Snare venstre subclavia arteria blænde med en silke slips. Sikre lukningen med en snare og snap. Gennem blænde af subclavia arteria, placere en introducerende kappe (5f). Sikre, at længden af kateteret og dens orientering er korrekt justeret, således at det ikke forstyrrer Ao ventil funktion.
- Tilslut Ao tryktransduceren til introducerende kappe side porten.
- Læs Ao pres på skærmen. Justere Ao pumpehastighed for at nå et middeltryk på 30 mm Hg. På dette tidspunkt (tid 0), vil perfusion begyndt i den ikke-fungerende tilstand (Langendorff tilstand) og udseendet af en mørk deoxygenated perfusate i PA linje er en reflektor af naturgenopretning af koronar flow. Indstille en timer at følge varigheden af perfusion, hvis nødvendigt.
- Tænd varmeveksleren og Indstil temperaturen til 38 ° C. Perfusate vil varme op til 37-38 ° C i ca 10 min. Normothermic perfusion af et svin hjerte, holde temperaturen ved 38 ° C i hele perfusion.
- Opretholde perfusion i ikke-arbejdende tilstand for den første time af perfusion. Justere LA pumpehastighed for at opretholde LA trykket på 0 mmHg.
- Når perfusate temperatur er > 34 ° C, vurdere hjerterytme og tempo og defibrillate som påkrævet (5-20 joule). Sikre, at hjertet er helt dekomprimeret før forsøger kardioversion.
- Kontrollere opløst gas status ved hjælp af en blod gas analysator. Justere gasblandingen for at bevare en pH-værdi: 7,35-7,45, arteriel partialtrykket af kuldioxid (PedersenetCO2): 35 – 45 mmHg, arteriel partialtrykket af oxygen (PedersenetO2): 100-150 mm Hg, og oxygen mætning (så2) ≥95%.
- Når hjertet er normothermic og i en stabil rytme, ligate den overlegne vena cava.
- Tillægger midlertidig pacemaker fører lige atrielle væggen og tempo hjertet i et AAI mode på 100 slag/min.
- Fastgør epikardielle Elektrokardiografi elektroder til overfladen af hjertet.
- Skift til fungerende tilstand efter 1 h af perfusion i Langendorff tilstand. Til dette formål, Indtast ønsket LA pres (typisk 6-8 mmHg) i venstre side på hovedsiden, i afsnittet "ønskede LAP" i softwaren, og klik på knappen for at indlede en feedback-sløjfe. Tilstanden aktiveret arbejde vil fremstå som en grøn knap, og LA pumpens omdrejningstal vil automatisk stige og falde for at nå og opretholde den ønskede LA pres.
- Som hjertet begynder at arbejde, vil koronar vaskulære modstand falde, hvilket resulterer i en lav diastolisk tryk. Justere Ao pumpehastighed for at opretholde Ao diastolisk tryk af 40 mmHg som afterload under perfusion i tilstanden arbejdsgruppe.
6. metaboliske støtte under ESHP
Bemærk: Orgel perfusion løsninger, herunder Krebs-Henseleit stødpudeopløsning, typisk indeholder glucose som primær energi substrat.
- Kontrollere glukose niveau (f.eks. med blod gas analyse) med jævne mellemrum under perfusion. Efter satserne, forbrug, ved hjælp af en standard infusion pumpe Erstat glucose ved kontinuerlig arteriel infusion og/eller bolus doser, for at opretholde en arteriel koncentration af 6-8 mmol/L af glukose i hele perfusion.
- Ved hjælp af en separat infusion pumpe, levere 2 U/h af insulin til perfusate i hele perfusion, ændre satsen for insulin infusion efter mål af undersøgelsen.
- For β-adrenoceptor stimulation af hjertet, levere 0,08 µg/min. af adrenalin til perfusate ved hjælp af en standard infusion pumpe, og fortsætte gennem hele perfusion. Alternativt kan der anvendes en infusion af 4 µg/min. af Dobutamin.
7. anti-mikrobiel og anti-inflammatoriske stoffer
- Tilføje en bredspektret antibiotikum (fx 3.375 gram piperacillin-tazobactam) til perfusate i starten af perfusion.
- Tilføje anti-inflammatoriske lægemidler (f.eks. 500 mg methylprednisolon) til perfusate i overensstemmelse med målene for undersøgelsen, hvis det er nødvendigt.
8. vurdering af funktion
Bemærk: ESHP kontrollerende software automatisk beregner og registrerer steady-state hæmodynamiske og funktionelle indekser hvert tiende sekund.
-
Vurdering af steady state systolisk og diastolisk funktion
- For vurdering og optagelse af steady state-data gennem de introducerende kappe placeret tidligere i subclavia arteria, skal du placere en væskefyldt grisehale kateter ind i venstre hjertekammer (LV) i arbejde tilstand.
- Skylle grisehale kateter med saltvand og placere guidewire inde i den.
- Forsigtigt indsætte kateteret i kappe kanylen tidligere placeret i subclavia arteria. Så snart den passerer gennem Ao ventil, fjerne guidewire langsomt og tilsluttes LV pres linje grisehale kateter.
- Følg LV pres bølge på skærmen. Den diastoliske del af trykbølgen vil nå nul, når kateteret er korrekt placeret inde i LV. Bemærk er dette trin kun muligt i arbejde tilstand da Ao ventil skal være åbne normalt for grisehale kateter til at kunne komme ind i salen. Når grisehale kateteret er placeret i LV og forbundet med tryktransduceren LV, vil LV maximum og minimum antallet af pres ændring (dP/dT min og dP/dT maks) registreres automatisk.
- Bestemme den Myokardie ydeevnen ved at indeksere den målte trykforøgelsesanlæg på LA linje, for hjertet masse (mL·min– 1·g– 1), ved en given konstant LA pres (6 – 8 mmHg), og en Ao diastolisk tryk på 40 mm Hg og en puls på 100 beats·min– 1. LA pres er lig med minutvolumen, forudsat der er ingen Ao insufficiens. Undersøge Ao pres bølgeform for at sikre, at der ingen Ao insufficiens.
- For vurdering og optagelse af steady state-data gennem de introducerende kappe placeret tidligere i subclavia arteria, skal du placere en væskefyldt grisehale kateter ind i venstre hjertekammer (LV) i arbejde tilstand.
-
Vurdering af preload rekrutteres slagtilfælde arbejde (PRSW)
Bemærk: PRSW er den lineære sammenhæng mellem slutningen-diastoliske volumen og LV slagtilfælde arbejde (LVSW) og repræsenterer et indeks for evaluering af ventrikel funktion, uafhængig af preload, afterload og størrelse af ventrikel18,19. PRSW kan måles med dette system i en ikke-invasiv måde, som beskrevet nedenfor13.- Fjerne grisehale kateter fra LV, da kateteret kan fremkalde arytmier under PRSW analyse, der negativt påvirker nøjagtigheden af resultaterne.
- På forsiden, i afsnittet "Fange PVL" justere det ønskede antal drop i LA pumpens omdrejningstal under analyse (typisk 100-200 RPM) og ønskede tid under som analysen finder sted (typisk 10 – 12 s) (figur 4).
- Efter udførelsen af de ovennævnte justeringer, klik på "Record PVL". Softwaren vil automatisk afslutte arbejder tilstand og gradvist reducere LA pumpe RPM mens samtidig optagelse LVSW og LA pres. Ved afslutningen af indsamlingen af data, vil software udføre lineær regression på den nyerhvervede datasæt til at give PRSW. Når ESHP software har gennemført analysen, vises en meddelelse på forsiden, viser korrelationskoefficienten af analysen. Tryk på "OK", hvis koefficienten (r-værdi) er ønskeligt (typisk > 0,95). PRSW analyseresultater vil blive registreret.
- Efter analyse, at vende tilbage til perfusion i tilstanden arbejdsgruppe Klik på "Tryk for at Start arbejder tilstand;" ellers softwaren vil fortsætte i Langendorff (ikke-arbejdende) tilstand. Den grå knap vil henvende sig til grøn med angivelse af en tilbagevenden til arbejde tilstand. Hvis gentagen PRSW analyse er nødvendig, før hvert nye forsøg på sikre at LA pres/flow værdier vende tilbage til de forrige steady state værdier.
9. metaboliske vurdering af Ex Situ perfunderet hjerte
- Vurdere den metaboliske tilstand af hjertet og perfusate under ESHP, ved hjælp af oplysningerne fra blod gas analyse af perfusate prøver indsamlet fra både Ao (arteriel) og PA (venøse) linjer hver 1-2 h.
- Udføre blod gas analyse (hver 1-2 h) til at overvåge den gas og ionisk tilstand af perfusate. Justere gas sammensætning (O2 og CO2) og feje hastighed for at opretholde en pH på 7,35-7,45, paO2 af 100-150 mmHg og paCO2 af 35-45 mmHg. Justere og vedligeholde perfusate ionisk koncentrationen af kalium og calcium i rækken fysiologisk under perfusion (f.eks. ved tilsaetning af calciumchlorid hvis nødvendigt).
-
Brug oplysningerne fra blod gas analyse og koronar blodgennemstrømningen til at beregne metaboliske parametre. For eksempel beregner myokardiets iltforbrug (MVO2), og LV mekaniske virkningsgrad (mig) som følger:
- Bestemme MVO2 (mL O2 · min-1 · 100 g-1) at multiplicere koronar blodgennemstrømningen (CBF) af arteriel-venøs forskellen i iltindhold (CaO2 – CvO2).
MVO2 = [CaO2 - CvO2 (mL O2 · 100 mL-1)] × CBF (mL. min-1 . 100 g hjerte mass), hvor;
Arteriel iltindhold (CaO2) = [1.34 (mL O2 . g Hb-1) × Hb koncentration (g · 100 mL-1) × iltmætning (%)] + [0.00289 (mL O2 · mm Hg-1 · 100 mL-1) × PaO2 (mm Hg)]
Venøse iltindhold (CvO2) = [1,34 (mL O2 · g Hb-1) × Hb koncentration (g · 100 mL-1) × iltmætning (%)] + [0.00289 (mL O2 · mm Hg-1 · 100 mL-1) × PvO2 (mm Hg)] - Beregn LV mekaniske virkningsgrad (mig) som følger:
MIG = LVSW (J. beat-1) / MVO2 (J. beat-1) hvor
Slagtilfælde arbejde = {middel-arterielt tryk (mmHg) - LA pres (mmHg)} × {LA flow (mL. min-1) / heart rate (beats. min-1)} × 0.0001334 (J. mL-1 . mmHg-1), og
MVO2 (J. beat-1) = {MVO2 (mL. min-1) / heart rate (beats. min-1)} × 20 (joule. mL-1)
- Bestemme MVO2 (mL O2 · min-1 · 100 g-1) at multiplicere koronar blodgennemstrømningen (CBF) af arteriel-venøs forskellen i iltindhold (CaO2 – CvO2).
10. fjernelse af hjertet fra ESHP apparat på slutningen af Perfusion
- Exit arbejde tilstand. Bringe LA pumpe RPM til nul.
- Formindske Ao pumpe RPM til nul.
- Fjerne grisehale og skeder.
- Hurtigt fjerne alle de vedhæftede filer til hjertet.
- Veje det tomme hjerte at bestemme graden af Myokardie ødem dannelse.
- Tage hurtigt vævsprøver af korrekt størrelse fra højre og venstre ventrikler og placere dem i optimal opskæring temperatur (OCT) gel, formalin og/eller snap fryse dem i flydende kvælstof. Opbevare prøver for fremtidige undersøgelser (OCT og snap frosne prøver i et-80 ° C fryser, formalin-gemt prøver i et ordentligt forseglet beholder ved stuetemperatur).
- Luk programmet; alle de registrerede data vil blive gemt.
- Kassér resterende væv, blod, bioaktive materialer og brugte ESHP apparater komponenter efter institutionelle protokoller.
- Ren ESHP vognen ved hjælp af en sanitizing hård overflade renere (fx 70% ethanol) grundigt.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Hjertet genoptages i begyndelsen af perfusion (i ikke-arbejdende tilstand), normalt en sinusrytme, når temperaturen i systemet og perfusate nærmer sig normothermia. Når du angiver arbejde tilstand, som LA pres nærmer sig de ønskede værdier, udslyngning på Ao pres sporing skal overholdes og LA flow (en afspejling af minutvolumen) skal stige gradvist. I en Yorkshire gris model (35-50 kg) og en hjerte en startvægt på 180-220 gram, den første LA flow bliver ~ 2.000 mL/min., og dette vil typisk tilgang ~ 2.750 mL/min. i løbet af den første time af perfusion i arbejde tilstand. Figur 7 viser tendenser i Ao pres (A) og LA samt pulmonal arteriel flow (B) over 12 h af perfusion.
Under ESHP i fysiologisk fungerende tilstand er forskellige metaboliske vurderinger af hjertet også muligt. Blod gas analyse/metaboliske vurderinger udført på de perfusate prøver under ESHP giver omfattende oplysninger om hjertet metaboliske status over tid (tabel 1 og 2) og (figur 8A, B)20 . Ud over blod gas analyse, perfusate prøver kan indsamles og vurderes for forskellige biomarkører som hjerne natriuretisk peptid og troponin-; dog skal det bemærkes, at ESHP opstår i et lukket system, med ingen udveksling af perfusate løsning. I mangel af de organer, der naturligt metabolisere/klar disse faktorer (f.eks. nyrerne), er ophobning af biomarkører over tid i perfusate-løsningen typisk observeret (figur 9).
Funktionel vurdering af hjertet ved hjælp af denne platform kan omfatte både belastning-afhængige parametre [herunder Myokardie ydeevne (cardiac indeks, CI), LVSW, maksimale og minimale priser pres ændring (dp/dt max og min.)] og load-uafhængig parametre ( PRSW) (tabel 3). Figur 10 viser evalueringen af LV PRSW under en computer-kontrolleret lineær reduktion i LA pres13. I vores erfaring med ESHP af > 200 svin hjerter og > 10 menneskers hjerter, anvendelse af en automatiseret ESHP softwareprogram har været i forbindelse med udviklingen af standardforskrifter, som resulterer i minimale inter - og intra-operatør variation i de funktionelle parametre. Den ESHP apparater og software system, der anvendes her er designet til at opretholde de ønskede pres og indsamle de funktionelle parametre med minimalt behov for manuelle justeringer, og vi har observeret en interclass korrelationskoefficienten (ICC) ≥0.9 for alle de vurderede parametre (f.eks. LVSW, og dP/dt max og min.), tegner sig for fremragende Inter-rater, intra-rater og test-retest pålidelighed. I dette system, kan det elektrokardiografiske overvågning af hjertet under perfusion også finde sted ved hjælp af to elektroder, som beskrevet i den protokol, med oplysninger om puls og rytme under perfusion (figur 4).
Vurdering af hjertet under ESHP kan udvides til forskellige billeddiagnostiske modaliteter. Ekkokardiografi under ESHP kan give yderligere oplysninger om Myokardie funktion (fx ventrikulær uddrivningsfraktion) og anatomiske parametre (Figur 11 og figur 12). Endvidere er en vurdering af koronar Vaskulaturen muligt med Angiografisk imaging21.
Udfører en lineær regressionsanalyse identificerer hvilke parametre bedste korreleret med Myokardie ydeevne (cardiac indeks: mL·min-1·g-1) under ESHP. Vi har tidligere viste, at trods betydelig variation i evnen af de målte funktionelle parametre til at forudsige Myokardie ydeevne, samlet, funktionelle parametre udviser en høj korrelation med hjertets minutvolumen. De bedste funktionelle prædiktorer inkluderet systolisk slagtilfælde arbejde [determinationskoefficienten (R2) = 0.759], for systolisk funktion og minimum dP/dt, (R2 = 0.738) for diastolisk funktion. Interessant, metabolisk parametre alene viser en meget begrænset evne til at forudsige Myokardie ydeevne (iltforbrug: R2 = 0,28; koronar vaskulære modstand: R2 = 0,20; laktat koncentration: R2 = 0,02). 13 perfusion af hjertet i et normothermic arbejde tilstand giver mulighed for at opnå omfattende metaboliske og funktionelle vurderinger af hjertet under orgel bevarelse. En klinisk ESHP enhed med evnen til at understøtte donor hjertet i arbejde tilstand vil give den sundhedspleje team med mulighed for at lavet beslutninger om orgel levedygtighed baseret på objektive data før transplantation.
Figur 1: silikone støtte membran for hjertet. Støtte membran afbilledet med integreret aorta kanyle (A), venstre atriale kanyle (B) og lungepulsåren kanyle (C). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2: The ESHP kredsløb. (A) skematiske figur af ESHP kredsløbet. (B) ESHP apparater, der anvendes i vores omgivelser. A = orgel kammer og silikone støtte membran, B = reservoir, C = arteriel linie filter, D = venstre atriale pumpe, E = aorta pumpe, F = membran oxygenator og varmeveksler, G = gas mixer, H = røret flowsensor, jeg = tryksensor, J = stophane/luer lock. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3: de luftning pumperne ved at placere trykside til et højere niveau. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4: skærmbillede fra de kørende ESHP softwareprogram viser hjerte funktionelle parametre. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 5: skærmbillede fra programmet initialiseret ESHP software. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 6: magnetiske venstre atriale kanylen fastgjort til den bageste del af venstre atrium. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 7: overvågning pres og flyder under perfusion. (A) tendenser i aorta pres under 12 h af ESHP. (B) tendenser i den venstre atriale og lungepulsåren flyder under 12 h af ESHP venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 8: tendenser over tid. (A) myokardiets iltforbrug og (B) venøs laktat koncentration under 12 h af ESHP venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 9: tendenser over tid i perfusate koncentration af cardiac troponin-jeg under 12 h af ESHP. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 10: vurdering af preload rekrutteres slagtilfælde arbejde et dårligt fungerende hjerte (grå) versus et velfungerende hjerte (sort). Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 11: repræsentative todimensionale ekkokardiografisk billeder. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 12: repræsentant M-mode ekkokardiografisk billeder. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
| Aorta (arteriel) parametre | PA (venøse) parametre | ||||||
| T1 | T5 | T11 | T1 | T5 | T11 | ||
| Blod Gas værdier | |||||||
| pH | 7.28 | 7,44 | 7,33 | 7,25 | 4.42 | 7,30 | |
| pO2 (mmHg) | 123.00 | 149,00 | 141.00 | 44.00 | 55.40 | 57.80 | |
| pCO2 (mmHg) | 38.00 | 33.90 | 42.50 | 43,00 | 37.10 | 46.10 | |
| Oximetri værdier | |||||||
| HB (g/dL) | 4.20 | 4.10 | 3,90 | 4.20 | 4.10 | 3,90 | |
| Så2 (%) | 100,00 | 100,00 | 100,00 | 64,00 | 95.50 | 92.00 | |
| Elektrolyt værdier | |||||||
| K+ (mmol/L) | 4.20 | 4,60 | 5.20 | 4.20 | 4,60 | 5.20 | |
| Na+ (mmol/L) | 142.00 | 144.00 | 149,00 | 142.00 | 144.00 | 149,00 | |
| Ca2 + (mmol/L) | 1,02 | 1,20 | 1.40 | 1,02 | 1,20 | 1.40 | |
| CL- (mmol/L) | 107.00 | 109.00 | 114.00 | 107.00 | 109.00 | 114.00 | |
| OSM (mmol/kg) | 291.30 | 292.50 | 302.40 | 291.90 | 292.90 | 302.40 | |
| Metabolit værdier | |||||||
| Glukose (mmol/L) | 7,00 | 5.30 | 5.10 | 7,00 | 5.20 | 5,00 | |
| Laktat (mmol/L) | 3,00 | 2.30 | 2.00 | 3.10 | 2,40 | 1,90 | |
| Syre Base status | |||||||
| Hco3- (mmol/L) | 17.60 | 23,10 | 21.90 | 18,50 | 23.70 | 22.40 | |
Tabel 1: et tilfælde af blod gas analyse udført under ex situ hjerte perfusion. Ca2 +, calcium ion; CL-, chloridion; HB, hæmoglobin; HCO3-, bikarbonat ion; K+, kalium ion; Na+, natrium ion; OSM, osmolaritet; paCO2, arteriel partialtrykket af kuldioxid; paO2, arteriel partialtrykket af ilt; Så2, iltmætning; T1, 1 h, ex situ perfusion (tidlig perfusion); T5, 5 h ex situ perfusion (midten perfusion); T11, 11 h af ex situ perfusion (sent perfusion)
| Tid | |||
| Metaboliske parametre | T1 | T5 | T11 |
| MVO2 mL/min/100 g | 6,68 | 2,44 | 1,77 |
| Venøse laktat mmol/L | 3.1 | 2.4 | 1.9 |
| Venøse - arteriel laktat forskellen mmol/L | 0,1 | 0,1 | -0.1 |
| Glukose udnyttelse g/h | 1.23 | 0,6 | 1.14 |
Tabel 2: metaboliske parametre beregnes blod gas analyse data. MVO2, myokardiets iltforbrug; T1, 1 h, ex situ perfusion (tidlig perfusion); T5, 5 h ex situ perfusion (midten perfusion); T11, 11 h af ex situ perfusion (sent perfusion)
| Tid | |||
| Funktionelle parametre | T1 | T5 | T11 |
| CI (mL/min/g) | 10.26 | 9.66 | 7,50 |
| SW (mmHg * mL) | 2253 | 1965 | 1323 |
| dP/dT max (mmHg/s) | 1781 | 1783 | 1482 |
| Sys Petersen (mmHg) | 128 | 121 | 91 |
| MIG (%) | 6.69 | 16.85 | 21.68 |
| PRSW | 399 | 348.38 | 248.63 |
| dP/dT min (mmHg/s) | -1444 | -2350 | -844 |
Tabel 3: et tilfælde af venstre ventrikel funktionelle parametre vurderet ved ex situ hjerte perfusion. CI, cardiac indeks; dP/dT max, maksimum sats af trykket Skift; dP/dT min, minimumssats på trykket Skift; MIG, mekaniske virkningsgrad; PRSW, preload rekrutteres slagtilfælde arbejde; SW, slagtilfælde arbejde; Sys Petersen, systolisk blodtryk; T1, 1 h, ex situ perfusion (tidlig perfusion); T5, 5 h ex situ perfusion (midten perfusion); T11, 11 h af ex situ perfusion (sent perfusion).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vellykket perfusion er defineret i henhold til målene for undersøgelsen; imidlertid bør dette omfatte uafbrudt ESHP til den ønskede mængde af tid og komplet indsamling af data på hjertefunktion under perfusion. Til dette formål, skal et par kritiske trin i protokollen følges.
Hjertet er et organ med høj ilt og energiefterspørgsel, og minimering af iskæmisk tid før cannulation og perfusion er et vigtigt princip, der skal følges. Processen med indkøb, montering hjertet på ESHP apparater, og indlede perfusion bør ikke overstige 20 – 30 min.
For effektiv perfusion og pålidelige funktionel vurdering, processen med montering hjertet på apparatet er forsynet med afgørende betydning. Korrekt anatomisk justering af de store kar spiller en vigtig rolle i denne henseende. Hjertet skal være indkøbt med en passende længde på PA og Ao arch grene så at disse fartøjer ikke strakt ud når der er knyttet til de repræsentative kanyler. Fra starten af perfusion spiller effektiv koronar perfusion en central rolle i beskyttelsen af hjertet under ex situ perfusion. Efter start af perfusion i ikke-arbejdende tilstand, bør Ao pres overvåges og reguleres på mindst 30 mmHg at støtte de koronar perfusion effektivt. Udseendet af en mørk deoxygenated perfusate i PA linje er en reflektor af naturgenopretning af koronar flow. Efter skift til tilstanden arbejdsgruppe, bør Ao pres justeres til 40 mmHg at give passende koronar perfusion pres for arbejder hjertet.
Deairing hjertekamre og Ao er afgørende for vellykket ESHP. På tidspunktet for fastgørelse LA kanyle, vil klemme kamrene medvirke til deairing hjertet. Luft tilbage i af LV, der skubbes bør recirkulere via linjen udrensning i innominate arterie, der minimerer risikoen for koronar luft emboli. Men hvis væsentlige air forbliver venstre midt på tidspunktet for skiftet til fungerende tilstand, koronar luft blodprop er muligt fører til en betydelig nedgang i Myokardie funktion.
Målet med den præsenterede tilgang er at skabe en reproducerbar og pålidelig platform for eksperimenterende ESHP undersøgelser i store pattedyr modeller. Et sådant system giver mulighed for perfusion i en fysiologisk fungerende tilstand, og omfattende vurdering af den perfused hjerte. Dette giver mulighed for at evaluere cardioprotective protokoller med henblik på resuscitating dysfunktionelle donor organer. Dette system letter simpel og reproducerbar vurderinger af cardiac funktionelle parametre sammen med metaboliske parametre under ESHP, leverer objektive data, der kan bruges til at identificere levedygtige organer til transplantation. Sådan en omfattende vurdering er af særlig betydning, når evaluering udvidede kriterier doneret hjerter og hjerter doneret efter kredsløbssygdomme død. Desuden, ifølge vores observationer i indstillingen af eksperimenterende ESHP, hjerter perfunderet i en fungerende tilstand vise overlegen bevarelse af systolisk og diastolisk funktion over tid i forhold til hjerter bevares i en tilstand med Langendorff og kan hjælpe med at udvide sikkert bevarelse tid.
ESHP i en fungerende tilstand er en effektiv metode til at bevare de donerede hjerte og vurdere sin levedygtighed, men det er en kunstig indstilling, mangler mange af fysiologisk aspekt af kroppen (f.eks. realtids hormonelle og ernæringsmæssige balance/support, og frie radikaler scavenging systemer). Hjertet er et organ med sofistikeret energi/metaboliske krav. Således, at yde konsistent og effektiv metaboliske støtte til hjertet perfunderet er kritisk vigtigt. Vi har observeret et fald i funktionen af ex situ perfunderet hjerte, især under udvidede perfusion gange22. Sådan et fald kan være reflekterende af metaboliske ineffektivitet påvirker funktionen af arbejder funktion perfunderet hjerte. Flere undersøgelser er berettiget til at karakterisere den optimale metaboliske støtte til hjertet under ESHP. En ekstra udfordring er kompleksiteten af arbejder tilstand hjerte perfusion. På trods af den forbedrede enkelhed af ESHP i dette system, bør arbejde tilstand perfusion udføres af veluddannede personale.
ESHP apparater med kapacitet til at udføre en omfattende funktionelle og metaboliske vurdering af hjerter i store pattedyr model, tilbyder store muligheder for at udvikle translationel terapeutiske protokoller for at forbedre dysfunktionelle/suboptimal donerede hjerter . ESHP kan tjene som en platform til at administrere terapeutiske interventioner rettet mod en lang række betingelser (fx iskæmi reperfusion skade), og vurdere deres indvirkning på metaboliske og funktionelle parametre for perfunderet hjerte12. Derudover kan arbejder tilstand ESHP lette udvidelse af sikker bevarelse interval, som kan bidrage til at overvinde geografiske begrænsninger af organdonation og lette bedre fordeling af donerede hjerter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
DHF indehaver af patenter på ex situ orgel perfusion teknologi og metoder. DHF og JN er stiftere og hovedaktionærer af Tevosol, Inc.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af tilskud fra den canadiske nationale Transplant Research Program. SH er modtageren af en Faculty of Medicine og tandpleje Motyl Graduate Studentship i hjertets videnskaber. DHF er en modtager af en kollaborativ forskning projekter (CHRP) grant i støtte fra de nationale videnskaber og Engineering Research Council og canadiske institutter for sundhedsforskning.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Debakey-Metzenbaum dissecting scissors | Pilling | 342202 | |
| MAYO dissecting scissors | Pilling | 460420 | |
| THUMB forceps | Pilling | 465165 | |
| Debakey straight vascular tissue forceps | Pilling | 351808 | |
| CUSHING Gutschdressing forceps | Pilling | 466200 | |
| JOHNSON needle holder | Pilling | 510312 | |
| DERF needle holder | Pilling | 443120 | |
| Sternal saw | Stryker | 6207 | |
| Sternal retractor | Pilling | 341162 | |
| Vorse tubing clamp | Pilling | 351377 | |
| MORRIS ascending aorta clamp | Pilling | 353617 | |
| Surgical snare (tourniquet) set | Medtronic | CVR79013 | |
| 2-0 SILK black 12" x 18" strands | ETHICON | A185H | |
| 3-0 PROLENE blue 18" PS-2 cutting | ETHICON | 8687H | |
| Biomedicus pump drive (modified) | Medtronic | 540 | Modified to allow remote electronic control of pump speed |
| Biomedicus pump | Maquet | BPX-80 | |
| Membrane oxigenator D 905 | SORIN GROUP | 50513 | |
| Tubing flow module | Transonic | Ts410 | |
| PXL clamp-on flow sensor | Transonic | ME9PXL-BL37SF | |
| TruWave pressure transducer | Edwards | VSYPX272 | |
| Intercept tubing 3/8" x 3/32" xX 6' | Medtronic | 3506 | |
| Intercept tubing 1/4" x 1/16" x 8' | Medtronic | 3108 | |
| Heated/Refrigerated Bath Circulator | Grant | TX-150 | |
| ABL 800 FLEX Blood Gas Analyzer | Radiometer | 989-963 | |
| DLP cardioplegia cannula (aortic root cannula) | Medtronics | 20613994495406 | |
| 5F Ventriculr straight pigtail cathter | CORDIS | 534550S | |
| 5F AVANTI+ Sheath Introducer | CORDIS | 504605A | |
| Emerald Amplatz Guidewire | CORDIS | 502571A | |
| Dual chamber pace maker | Medtronic | 5388 | |
| Defibrilltor | CodeMaster | M1722B | |
| Infusion pump | Baxter | AS50 | |
| Surgical electrocautery device | Kls Martin | ME411 | |
| Gas mixer | SECHRIST | 3500 CP-G | |
| Medical oxygen tank | praxair | 2014408 | |
| Cabon dioxide tank | praxair | 5823115 | |
| Bovine serum albumin | MP biomedicals | 218057791 |
References
- Ardehali, A., et al. Ex-vivo perfusion of donor hearts for human heart transplantation (PROCEED II): a prospective, open-label, multicentre, randomised non-inferiority trial. Lancet. 385 (9987), 2577-2584 (2015).
- Collins, M. J., Moainie, S. L., Griffith, B. P., Poston, R. S. Preserving and evaluating hearts with ex vivo machine perfusion: An avenue to improve early graft performance and expand the donor pool. European Journal of Cardiothoracic Surgery. 34 (2), 318-325 (2008).
- Freed, D. H., White, C. W. Donor heart preservation: Straight up, or on the rocks? Lancet. 385 (9987), 2552-2554 (2015).
- Guibert, E. E., et al. Organ preservation: Current concepts and new strategies for the next decade. Transfusion Medicine and Hemotherapy. 38 (2), 125-142 (2011).
- Collins, M. J., et al. Use of diffusion tensor imaging to predict myocardial viability after warm global ischemia: Possible avenue for use of non-beating donor hearts. Journal of Heart and Lung Transplantation. 26 (4), 376-383 (2007).
- White, C. W., et al. A cardioprotective preservation strategy employing ex vivo heart perfusion facilitates successful transplant of donor hearts after cardiocirculatory death. Journal of Heart and Lung Transplantation. 32 (7), 734-743 (2013).
- Iyer, A., et al. Normothermic ex vivo perfusion provides superior organ preservation and enables viability assessment of hearts from DCD donors. American Journal of Transplantation. 15 (2), 371-380 (2015).
- Peltz, M., et al. Perfusion preservation maintains myocardial ATP levels and reduces apoptosis in an ex vivo rat heart transplantation model. Surgery. 138 (4), 795-805 (2005).
- Liao, R., Podesser, B. K., Lim, C. C. The continuing evolution of the Langendorff and ejecting murine heart: New advances in cardiac phenotyping. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 303 (2), H156-H167 (2012).
- Rivard, L., Gallegos, R., Ogden, I., Bianco, R. Perfusion Preservation of the Donor Heart: Basic Science to Pre-Clinical. Journal of Extra Corporeal Technology. 41 (3), 140-148 (2009).
- Dhital, K. K., et al. Adult heart transplantation with distant procurement and ex vivo preservation of donor hearts after circulatory death: A case series. Lancet. 385 (9987), 2585-2591 (2015).
- Messer, S., Ardehali, A., Tsui, S. Normothermic donor heart perfusion: Current clinical experience and the future. Transplant International. 28 (6), 634-642 (2015).
- White, C. W., et al. Assessment of donor heart viability during ex vivo heart perfusion. Canadian Journal of Physiology and Pharmacology. 93 (10), 893-901 (2015).
- Messer, S. J., et al. Functional assessment and transplantation of the donor heart after circulatory death. Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (12), 1443-1452 (2016).
- Hatami, S., et al. Endoplasmic reticulum stress in ex vivo heart prfusion: A comparison between working vs non-working modes. Canadian Journal of cardiology. 33 (10), (2017).
- White, C. W., et al. Ex vivo perfusion in a loaded state improves the preservation of donor heart function. Canadian Journal of cardiology. 31 (10), s202 (2015).
- White, C. W., et al. A wholeblood-based perfusate provides superior preservation of myocardial function during ex vivo heart perfusion. Journal of Heart and Lung Transplantation. (14), (2014).
- Lips, D. J., et al. Left ventricular pressure-volume measurements in mice: comparison of closed-chest versus open-chest approach. Basic Research in Cardiology. 99 (5), 351-359 (2004).
- Morita, S. Is there a crystal ball for predicting the outcome of cardiomyopathy surgery? Preload recruitable stroke work, may be a possible candidate. Journal of Cardiology. 71 (4), 325-326 (2018).
- Hatami, S., et al. Canadian Society for Transplantation. , Halifax. (2017).
- Anthony, C., et al. Ex vivo coronary angiographic evaluation of a beating donor heart. Circulation. 130 (25), e341-e343 (2014).
- Sandha, J. K., et al. Steroids Limit Myocardial Edema During Ex vivo Perfusion Of Hearts Donated After Circulatory Death. Annals of Thoracic Surgery. , (2018).
